JP2003510289A - 胸骨切開術後の胸骨の回復を向上させる方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わない胸骨切開術後の胸骨処置を向上させるための、胸骨切開術後の胸骨の処置のための薬剤を該胸骨もしくはその周囲に適用することを含む方法であって、該薬剤が、ｂＦＧＦ、ａＦＧＦ、ＴＧＦβ、ＶＥＧＦ、ＨＧＦ、ＢＭＰ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦα、その他のサイトカイン、または遺伝子のような、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法、ならびに該方法に用いるための薬剤、それを含む、胸骨切開術後の胸骨の回復または処置を向上させるための薬剤、および該薬剤の使用が開示される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （技術分野） 本発明は、内胸動脈（以下、「ＩＴＡ」と呼ぶこともある）の少なくとも一つ
の除去を伴う胸骨切開術を包含する、開心手術または冠動脈手術のような手術に
おいて、血管新生因子を含有する薬剤を用いて胸骨切開術（すなわち、心臓に接
近するために胸骨を切断すること）後の胸骨の回復を向上させる方法に関する。

【０００２】 （技術の背景） 胸骨切開術は、心筋梗塞およびその機構的併発症、弁膜性心疾患、大動脈疾患
、ならびに先天性心疾患を包含する、冠動脈疾患のような様々な心疾患に罹患し
た心臓を手術するのにほとんど常に必要である。しかし、胸骨が回復するには時
間がかかり、ときには充分に回復しない。

【０００３】 胸骨の緩慢かつ不充分な回復は、胸骨切開術、したがってまた心臓手術の後の
問題の一つである。緩慢な回復は、患者の入院期間を延長し、健康管理のコスト
を著しく増大させ、患者の仕事または社会的活動への復帰を遅延させる。胸骨の
不充分な回復は、胸骨切開術から実施される心臓手術後の重大な問題の一つであ
り、しばしば、深い胸骨創感染を生じて、大がかりな集中管理にもかかわらず、
死亡率および罹患率の上昇を招く。従来の研究は、不充分な胸骨の回復に関する
危険因子を次のように記載した：すなわち、肥満、慢性閉塞性肺疾患（たとえば
慢性気管支炎または気腫）、高齢、末梢血管疾患、再手術、糖尿病、内胸動脈（
ＩＴＡ）導管、手術時間、低い心拍出量、機械的人工呼吸時間、および出血に関
する再診査がそれである。増加する数の患者には、上記の危険因子のいくつかが
あり、緩慢／不充分な胸骨の回復は、さらに問題が多いと思われる。緩慢／不充
分な胸骨の回復は、しばしば、冠動脈バイパス手術の際の両側内胸動脈（以下、
「ＢＩＴＡ」と呼ぶこともある）の使用を限定するが、それは特に、糖尿病の患
者においてそうであり、彼らは、特にＢＩＴＡ除去（すなわち心臓に対する移植
片を作成するための）後に、血液供給の欠如のために、胸骨の壊死（すなわち胸
骨の骨の死）をしばしば発症することから、その心臓がＢＩＴＡ移植から利益を
得ることが示されている。

【０００４】 塩基性繊維芽細胞増殖因子（以下、「ｂＦＧＦ」と呼ぶこともある）は、強い
血管新生性の（すなわち、新たな血管を創造し、胸骨への血液供給を増加させる
）分裂促進因子であるばかりでなく、骨形成も刺激できることが報告されている
。ａＦＧＦ、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβのようなその他の成長因子は、それらの血管新
生効果を通じて、胸骨の回復を向上させるのに多少とも利益がある。

【０００５】 本発明者らの何名かは、既に、ヨーロッパ特許第0 493 737号公報で、骨疾患
を処置するためにｂＦＧＦを含有する薬剤を、またヨーロッパ特許第0 702 959
号公報で、ｂＦＧＦを含有する架橋したゼラチンゲル製剤を用いることを提唱し
ている。すなわち、本発明者らの何名かは、既に、ヨーロッパ特許第0 493 737
号公報で、骨疾患の処置のためにｂＦＧＦを含有する薬剤を、またヨーロッパ特
許第0 702 959号公報で、ｂＦＧＦを含有する架橋したゼラチンゲル製剤を用い
ることを提唱している。ヨーロッパ特許第0 493 737号公報では、様々な外傷性
骨折；様々な疲労骨折；骨粗鬆症、骨軟化症、悪性腫瘍、多発性骨髄腫等々に伴
う骨折を包含する病的骨折；上に列挙されたような様々な疾患に伴う骨強度の低
下；および上に列挙されたような様々な疾患に伴う骨形成の阻害のような、骨疾
患の処置のための新規薬剤（が開示されている）。ヨーロッパ特許第0 702 959
号公報では、ヘモグロビンレベル上昇効果、骨無機質含量増大効果などが開示さ
れている。彼らは、ｂＦＧＦを含んだゼラチンヒドロゲルが、血管新生効果およ
び骨再生をin vivoで向上させることを立証している。

【０００６】 その上、本発明者らの何名かは、〔J. Neurosurg., Vol. 86, pp. 871-875 (1
997)〕に、ウサギのモデルを用いて、生物分解できるヒドロゲルに組み込まれた
ｂＦＧＦの頭蓋骨再生に対する潜在的薬効を、また〔Biomaterials, vol. 19, p
p. 807-815 (1998)〕には、生物分解できるヒドロゲルと複合させたｂＦＧＦに
よる、臨床的にほとんど不可能と認められている、頭蓋骨欠損の骨再生を報告し
ている。しかし、上記参考文献のいずれにおいても、ＩＴＡ除去を伴う胸骨切開
術を包含する、胸骨切開術後の胸骨の回復についての記載がない。胸骨は、頭蓋
骨または長骨のそれとは異なる形状および血液供給（すなわち異なる供給動脈）
を有し；その違いは、胸骨切開術（すなわち、ほとんど常に、横断性切断ではな
く、縦断性切断である）の後で一層明白になる。

【０００７】 （発明の要約） 本発明の目的は、ＢＩＴＡ除去による胸骨切開術を包含する胸骨切開術後の、
胸骨の回復を向上させるための方法であって、患者の入院を短縮することができ
、不充分な胸骨の回復に関連する併発症を軽減することができ、したがってまた
健康管理のコストを削減し、患者の仕事への復帰を促進し、彼らの生産性を上昇
させることになる方法を提供することである。本発明は、血管新生因子または骨
形成因子を含有する薬剤を用いることによって、胸骨を効果的に回復させること
ができる。

【０００８】 胸骨切開術後の緩慢または不充分な胸骨の回復という問題を克服しようとして
、本発明者らは、下記のような胸骨回復を向上させるためのいくつかの方法を開
発した。略述すると、本発明は、胸骨に対する血液供給の不足を解消するか、ま
たは骨形成を助ける（すなわち、胸骨向けの骨組織を生成するのを助ける）ため
に、上記の血管新生因子、またはそれらの遺伝子の一つまたはそれ以上を、胸骨
もしくは周囲の組織に適用して、血管新生を増強し、胸骨を安定させ、そして胸
骨の回復を助ける。

【０００９】 すなわち、本発明は、胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わな
い胸骨切開術後の胸骨の回復を向上させるか、またはそれを処置するための、胸
骨切開術後の胸骨の処置のための薬剤を該胸骨もしくはその周囲に適用すること
を含む方法であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類
似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法に関する
。

【００１０】 本発明は、胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、も
しくは伴わない胸骨切開術の後の胸骨で骨を再生させる、胸骨切開術後の胸骨の
処置のための薬剤を該胸骨もしくはその周囲に適用することを含む方法であって
、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体よりなる群から
選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法にも関する。

【００１１】 本発明は、さらに、胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴
うか、または伴わない胸骨切開術の後の胸骨の周囲において、胸骨切開術後の胸
骨の処置のための薬剤を該胸骨もしくはその周囲に適用することを含む、血管新
生に付す方法であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの
類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法に関す
る。

【００１２】 その上、本発明は、内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わな
い胸骨切開術後の骨折部位を処置する、胸骨切開術後の骨折部位の処置のための
薬剤を肋骨、軟骨、もしくはそれらの接合部の骨折部位に直接接して適用するこ
とを含む方法であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの
類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法にも関
する。

【００１３】 また、本発明は、胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わない胸
骨切開術後の胸骨の回復もしくは処置を、胸骨の処置のためのそれを該胸骨もし
くはその周囲に適用することによって向上させる薬剤であって、該薬剤が、血管
新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体よりなる群から選ばれる少なくと
も一つを有効成分として含む薬剤にも関する。

【００１４】 本発明は、胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、も
しくは伴わない胸骨切開術の後の胸骨において、胸骨切開術後の胸骨の処置のた
めのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって、骨を再生させる薬
剤であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体より
なる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む薬剤にも関する。

【００１５】 本発明は、さらに、胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴
うか、もしくは伴わない胸骨切開術の後の胸骨の周囲において、胸骨切開術後の
胸骨の処置のためのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって血管
新生に付す薬剤であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれら
の類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む薬剤に関
する。

【００１６】 その上、本発明は、内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、もしくは伴わ
ない胸骨切開術の後の骨折部位を、胸骨切開術後の胸骨の骨折部位の処置のため
のそれを肋骨、軟骨、もしくはそれらの接合部位に直接接して適用することによ
って処置する薬剤であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれ
らの類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む薬剤に
関する。

【００１７】 また、本発明は、内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、もしくは伴わな
い胸骨切開術の後の胸骨の回復または処置を、胸骨切開術後の胸骨の処置のため
のそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって向上させるための薬剤
の使用であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体
よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む使用にも関する。

【００１８】 本発明は、胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、も
しくは伴わない胸骨切開術の後の胸骨で骨を、胸骨切開術後の胸骨の処置のため
のそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって再生させる薬剤の使用
であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体よりな
る群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む使用にも関する。

【００１９】 本発明は、さらに、胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴
うか、または伴わない胸骨切開術の後の胸骨の周囲において、胸骨切開術後の胸
骨の処置のためのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって血管新
生に付す薬剤の使用であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそ
れらの類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む使用
に関する。

【００２０】 その上、本発明は、内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わな
い胸骨切開術の後の骨折部位を、胸骨切開術後の骨折部位の処置のためのそれを
肋骨、軟骨、もしくはそれらの接合部の骨折部位に直接接して適用することによ
って処置する薬剤の使用であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およ
びそれらの類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む
使用にも関する。

【００２１】 （好適実施態様の説明） 以下、本発明を詳しく説明する。

【００２２】 ＢＩＴＡ除去を伴う胸骨切開術を包含する、胸骨切開術後の胸骨の回復を向上
させるための本発明の方法では、胸骨またはその周囲に適用しようとする、胸骨
の回復を向上させるための薬剤は、塩基性繊維芽細胞増殖因子（以下、「ｂＦＧ
Ｆ」と呼ぶこともある）、酸性繊維芽細胞増殖因子（以下、「ａＦＧＦ」と呼ぶ
こともある）、血管内皮増殖因子（以下、「ＶＥＧＦ」と呼ぶこともある）、組
織増殖因子−β（以下、「ＴＧＦβ」と呼ぶこともある）、肝細胞増殖因子（以
下、「ＨＧＦ」と呼ぶこともある）、骨形成タンパク質（以下、「ＢＭＰ」と呼
ぶこともある）、血小板由来増殖因子（以下、「ＰＤＧＦ」と呼ぶこともある）
、組織増殖因子−α（以下、「ＴＧＦα」と呼ぶこともある）、その他のサイト
カインのような、ｂＦＧＦまたは他の何らかの血管新生因子を含有し；また血管
新生および／または骨形成を誘導するタンパク質、核酸、および遺伝子を用いる
ことができる。血管新生因子のうちでも、ｂＦＧＦが、胸骨の回復という観点か
らは、部分的にはそれが血管新生（すなわち、新たな血管を創出し、胸骨への血
液供給を増大させる）、および骨形成（すなわち、胸骨向けの骨組織を創出する
）の効果の双方を有するため、最も効果的であり得る。しかし、ＶＥＧＦ等々の
ような、他の血管新生因子も、軽い胸骨虚血等々のような、何らかの条件下では
役立ち得る。

【００２３】 血管新生／骨形成因子、またはそれらの類似体は、ｂＦＧＦのような血管新生
／骨形成因子、生理学的もしくは正常な食塩水その他の慣用の補助剤（グルコー
ス、ショ糖、緩衝液等々）を含む溶液、該溶液を用いる注射もしくは噴霧剤、上
記溶液を含有する軟膏、またはヒドロゲルを包含するゲルの形態で用いることが
できる。これらのうちでも、本発明の薬剤は、ヒドロゲルの形態をなすのが特に
好ましく、その理由は、ゲルは、標的部域に何週間も留まり、胸骨が回復するま
で、血管新生／骨形成因子を供給し続けるからである。ヒドロゲルの形状は、シ
ート、ペースト、顆粒、管状、円板または微小球体のいずれであることもできる
。本発明の薬剤は、局所または総体的適用の経路をとり得るが、患者の身体のそ
の他の部分に対する影響が少なく、併発症の機会が少なく、標的部域（すなわち
胸骨）に対する効果が多大なため、局所的適用が好ましい。

【００２４】 血管新生／骨形成因子の少なくとも一つをヒドロゲルの形態で用いるとき、こ
の血管新生／骨形成因子は、分子間力によって物理的に固定化され、in vivoで
の水素の生物分解を伴って、血管新生／骨形成因子が徐々に放出される。物理的
固定化としては、たとえば、イオン結合、配位結合、疎水性相互作用などが、列
挙され得る。血管新生／骨形成因子の持続的放出は、ヒドロゲルの生物分解速度
によってのみ制御され、血管新生／骨形成因子の単純な拡散による持続的放出に
はよらない。ヒドロゲルの生物分解速度は、ヒドロゲルの含水量によって制御さ
れる。含水量が高いときは、ヒドロゲルの生物分解速度は高くなり、それが低い
ときは、それの生物分解速度は低く、そのため持続的放出期間が長期になる。

【００２５】 本発明の薬剤を、たとえばヒドロゲルの形態で用いるときは、活性成分として
のｂＦＧＦを、持続放出性の架橋したゼラチンゲルに組み込むことによって、そ
れを調製することができる。本発明に用いられる、架橋したゼラチンゲルの原料
としてのゼラチンゲルは、特に限定されることはなく、一般的に入手できるもの
から選ぶことができる。ゼラチンの例は、たとえば、約４．９の等電点を有する
、アルカリ処理したゼラチン（ニッタゼラチン社より入手可能）、または約９．
０の等電点を有する、酸処理したゼラチン（ニッタゼラチン社より入手可能）を
包含する。ゼラチンとしては、一種類のゼラチンを用い得るばかりでなく、溶解
度、分子量、等電点および材料のような物理的特性が異なるゼラチンの混合物も
、用いようとする目的に応じて用いてよい。そのようなゼラチンとしては、たと
えばヨーロッパ特許第0 702 959号公報に記載されたものを用いてよい。本発明
のヒドロゲルを調製するための他方の材料としては、たとえば、コラーゲン、ヒ
アルロン酸、アルギン酸、澱粉、ペクチン、キチン、キトサン、またはこれらの
多糖類の誘導体を用いてよい。

【００２６】 本発明に用いられる、ゼラチンを架橋させるための架橋剤は、生体に対する毒
性のない材料から選ぶことができる。そのような架橋剤は、たとえば、グルタル
アルデヒド、水溶性カルボジイミド、たとえば塩酸１−エチル−３−（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミドおよび１−シクロヘキシル−３−（２−モ
ルホリノエチル）カルボジイミド−メト−ｐ−トルエンスルホナート、ビスエポ
キシ化合物、ならびにホルマリンが列挙され得る。これらのうちでも、グルタル
アルデヒドおよび塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボ
ジイミドが、特に好適である。

【００２７】 ゼラチンは、熱処理、または紫外線の照射によって架橋させて、異なる生物分
解性を有するヒドロゲルを得ることができる。ゼラチンのヒドロゲルシート中の
含水量は、ゼラチンヒドロゲルシートの総重量に対して、好ましくは８５〜９９
重量％、より好ましくは９０〜９８重量％、特に好ましくは９２〜９７重量％で
ある。

【００２８】 血管新生／骨形成因子のうちでも、特にＢＩＴＡ採取後の、胸骨切開術後の胸
骨の回復を向上させるための、薬剤の有効成分として用いようとするｂＦＧＦは
、記載の通りの周知の血管新生／骨形成因子または成長因子である。たとえば、
ヨーロッパ特許第0 493 737号公報では、その存在は、ヒト、ウシ、マウス、ラ
ット等々で確認される。基本的には、いかなる動物起源からのｂＦＧＦも、同じ
活性をin vivoで有する。しかし、胸骨切開術後の胸骨の回復を向上させるため
に、本発明に用いられる薬剤のうちでも、血管新生／骨形成因子を考慮すると、
人体で産生されるｂＦＧＦ（ヒトｂＦＧＦ）のそれと同じアミノ酸配列を有する
、ｂＦＧＦを用いるのが好ましい。ｂＦＧＦ、および上記の血管新生／骨形成因
子に加え、ヨーロッパ特許第0 493 737号公報に開示されたような、ｂＦＧＦの
類似体を用いてもよい。

【００２９】 本発明の薬剤は、胸骨の表面にか；単独でか、または骨ろうもしくは膠の一部
として、胸骨の内部、またはバーもしくはネイルもしくはヒンジ型の装置の表面
にか；肋骨、軟骨（すなわち軟らかい骨）、もしくはそれらの接合部の骨折部位
に直接接してか；あるいは内胸動脈の血管床に投与することができる。

【００３０】 本発明では、胸骨切開術後の胸骨の回復を向上させるいくつかの方法を、具体
的に列挙することができる。

【００３１】 第一の方法は、ｂＦＧＦ、ａＦＧＦ、ＴＧＦβ、ＶＥＧＦ、ＨＧＦ、ＢＭＰ、
ＰＤＧＦ、ＴＧＦα、その他のサイトカイン、または上記の材料を作らせる遺伝
子のような、血管新生／骨形成因子のうち少なくとも一つを、胸骨辺縁（および
冠動脈バイパス手術のためにＩＴＡが採取された患者ではＩＴＡ床）に吹き付け
るか、あるいは軟膏として塗布することである。

【００３２】 第二の方法は、ｂＦＧＦ、ａＦＧＦ、ＴＧＦβ、ＶＥＧＦ、ＨＧＦ、ＢＭＰ、
ＰＤＧＦ、ＴＧＦα、その他のサイトカイン、または上記の材料を作らせる遺伝
子のような、血管新生／骨形成因子のうち少なくとも一つを含有する溶液を、胸
骨辺縁またはその周囲の組織（および冠動脈バイパス手術のためにＩＴＡが採取
された患者ではＩＴＡ床）に注射することである。

【００３３】 第三の方法は、本発明者らが開発した、生物分解できるヒドロゲルを用いるこ
とであって；該ヒドロゲルは、酸性ゼラチンを含んで、ｂＦＧＦ、ａＦＧＦ、Ｔ
ＧＦβ、ＶＥＧＦ、ＨＧＦ、ＢＭＰ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦα、その他のサイトカイ
ン、または上記の材料を作らせる遺伝子のような、血管新生／骨形成因子のうち
少なくとも一つが、延長された期間にわたって作用部位で放出されるのを可能に
する。ヒドロゲルは、胸骨の後方の（すなわち内側の）表面に塗布することがで
きるが、前方の（すなわち外側の）表面にも塗布することができ；ヒドロゲルは
、ＩＴＡ床に適用して、胸壁からの胸骨の血液供給を回復することができる。

【００３４】 第四の方法は、ｂＦＧＦ、ａＦＧＦ、ＴＧＦβもしくはＶＥＧＦ、ＨＧＦ、Ｂ
ＭＰ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦα、その他のサイトカイン、または上記の材料の遺伝子
のような、血管新生／骨形成因子のうち少なくとも一つを含有する材料を、胸骨
の骨髄に（すなわち内部に）挿入することである。この第四の方法は、上記の方
法とともに（すなわち内部および外部の双方から）適用して、胸骨回復をさらに
向上させることができる。

【００３５】 本発明に従って胸骨切開術後の胸骨回復を向上させるための薬剤の効果的な用
量は、疾患の程度、患者の年齢または状態等々に応じて変動する。しかし、一般
的には、この用量は、骨折の場合の有効成分としては、１胸骨切開術部位あたり
約０．１μg〜１０mgの範囲内にある。回復を加速するには、適用の一般的に好
ましい経路は、薬剤を、胸骨切開術の部位に直接接して：（１）外部から（すな
わち胸骨の表面に、（２）内部から（すなわち胸骨または胸骨骨髄内に）、およ
び（３）ＩＴＡ床（すなわち、ＩＴＡおよびその柄部が座するのを常とする部域
）に投与することである。

【００３６】 本発明の上記の薬剤は、胸骨切開術後の胸骨で骨を再生させるか、または胸骨
切開術後の胸骨の周囲での血管新生に付すのにも効果的である。したがって、胸
骨切開術後の胸骨で骨を再生させるか、または胸骨切開術後の胸骨の周囲での血
管新生に付すために、上に列挙したのと類似する方法を、患者に適用することが
できる。

【００３７】 （実施例） 以下、実施例を参照して、本発明を説明する。

【００３８】 例１： 本発明の効果を、ラットで、胸骨切開術後のｂＦＧＦの局所的使用、およびＢ
ＩＴＡの除去によって、増強された胸骨回復の際に評価した。

【００３９】 ４．９の等電点のゼラチンを、アルカリ法によって、Ｃａ（ＯＨ）₂を用いて
（ニッタゼラチン社、大阪）ウシの骨コラーゲンから単離した。このゼラチンの
重量平均分子量は、標準的なポリエチレングリコールのサンプルと比較して、ゲ
ル濾過クロマトグラフィーによって測定したとき、９９，０００であった。９．
６の等電点のヒト組換えｂＦＧＦは、科研製薬（東京）から供給された。

【００４０】 （ｉ）ｂＦＧＦを組み込んだゼラチンヒドロゲルシートの製造 １０重量％水溶液としたゼラチンを、様々な量のグルタルアルデヒドを用いて
２５℃で化学的に架橋させて、異なる程度の架橋を有するシートを製造した。略
述すると、グルタルアルデヒドを含有するゼラチン水性溶液４．５mlを、テフロ
ン（Ｒ）製成形用型（５ｘ５cm²、深さ１．８mm）に注型した。２５℃で１２時
間継続した架橋の後、得られたヒドロゲルシートを、５０mMのグリシン水性溶液
に３７℃で１時間浸漬して、グルタルアルデヒドの残留アルデヒド基を遮断し、
再蒸留水、１００％エタノール、およびオートクレーブ滅菌した再蒸留水で洗浄
して、滅菌されたシートを得た。これらを、凍結乾燥した後、ｂＦＧＦ１００μ
gを含有する水溶液で含浸して、ｂＦＧＦを組み込んだゼラチンヒドロゲルを得
た。こうして製造したヒドロゲルシートは、矩形（１ｘ１０mm）の形状で、０．
７mmの厚さであった。すべての実験過程は、無菌条件下で実施した。

【００４１】 （ii）動物実験 ３００〜４００gの体重のウィスター系雄ラット１５匹を、エーテルで麻酔し
た後に経口挿管し、従量式小型の動物用換気装置（Rodant ventilator Model 68
3, Harvard、米国）で換気した。麻酔を、１〜２％のイソフルランにより、手術
の間維持した。仰臥位での正中皮膚切開の後、両側の大胸筋を胸骨の接合部から
分割し、両側の肋間筋を露出させた。正中胸骨切開術は、微細金槌により注意深
く実施した。骨髄からの出血を、骨ろう（NESTOR、日本商事）の使用によって停
止させた。ＢＩＴＡは、６−０ポリプロピレン縫合糸により、ＩＴＡの始点およ
び遠位分岐部で結紮し、その上、ＢＩＴＡを、電気凝血器によって破壊した。Ｂ
ＩＴＡの欠損に代えて、ｂＦＧＦを組み込んだ（１００μg／シート）ゼラチン
ヒドロゲルシートを、６−０ポリプロピレン縫合糸で定置かつ固定した。対照と
しては、正中胸骨切開術のみ、および単なるＢＩＴＡ除去を同様にして実施した
。呼吸終末陽圧を加えて、肺を完全に膨張させた後、胸骨を、４−０Nespolene
縫合糸により、４カ所の胸骨周囲断続縫合によって閉鎖した。筋層および皮膚は
、４−０ナイロン単繊維により注意深く縫合した。皮膚閉鎖の直後に、ストレプ
トマイシン（５０mg／ラット）を筋内投与した。

【００４２】 １５匹のラットを３群に分割し：群Ａには、ＢＩＴＡ除去と、正中胸骨切開術
後の胸骨へのｂＦＧＦを組み込んだゼラチンヒドロゲルシートとを施し、群Ｂに
は、ＢＩＴＡ除去のみを施し、群Ｃは、無処置のＢＩＴＡを有した（各５匹）。
術後の心膜内出血の２例、呼吸不全の２例、または感染症の１例で死亡した、５
匹の動物を、研究から除外した。手術から４週間後に、超過用量でのナトリウム
ペントバルビタールの静脈内投与によって、ラットを犠牲に供した。胸骨を取り
出し、ＰＢＳ中１０重量％のホルムアルデヒド溶液で４日間固定して、骨再生を
評価した。

【００４３】 （iii）胸骨周囲血流量の測定 正中胸骨切開術後、胸骨の閉鎖後、および手術から２〜４週間後に、非接触レ
ーザー流量計（ＡＬＦ２１Ｎ、アドバンス社、東京）を用いて、胸骨周囲血流量
を測定した。この装置は、毛細血管血液潅流のパラメータ（血流量、体積および
速度）を瞬時に測定する。この研究では、血流量のみを追跡かつ記録した（ml／
分／１００g）。レーザー光のビームを、３．０mmの直径を有する測定プローブ
に、光ファイバーを通じて指向させた。プローブを、胸骨付近の肋間筋を覆って
、直線で１０mm引き離して置いたため、調べようとする測定部域は、直径が約５
mmで、深さが１mmであった。次いで、Ｈｅ−Ｎｅ光をダイオードレーザー（２mW
、７８０nm）に切り換えて、胸骨周囲血流量を測定したが、それは、ドップラー
偏移を用いて算出した。プローブは、２本の光ファイバーを備えた。一方は、レ
ーザー照明のため、他方は、反射かつ散乱された光を受けるためであった。測定
ごとに３回の読み取りを、安定した基線が得られた後に記録し、平均した。

【００４４】 （iv）血管新生の組織学的評価 ヘマトキシリン−エオシンおよびアザンで染色したプレパラート中の、小動脈
を計数した。５視野（５mmｘ５mm）を、胸骨の内側の胸骨周囲の部域から無作為
に選んだ。５mmｘ５mmの視野のそれぞれの中の小動脈の密度を、無作為に選んだ
５つの単位部域（５００μmｘ５００μm）中の血管の平均数を、４００倍の倍率
の方眼接眼マイクロメーター（オリンパス社、東京）を用いて計数することによ
って評価した。２５の単位部域（それぞれ５単位部域を有する５視野）中の血管
の総数を、計数した。

【００４５】 （ｖ）骨形成の評価 胸骨の周囲の骨形成を、二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）、および
組織学的検査によって評価した。胸骨の周囲の骨無機質密度（ＢＭＤ）を、３群
への正中胸骨切開術の４週間後に、骨無機質分析装置（Dichroma Scan 600、ア
ロカ社、東京）を用いたＤＥＸＡによって測定した。計器は、既知の無機質含有
量のファントムで較正した。各走査は、２０mm／分の速度で実施し、走査長は、
１mmであった。ＤＥＸＡ測定は、各実験群ごとに、第三肋骨から第六肋骨までの
胸骨の限界で実施した。

【００４６】 骨標本を、１０wt％ＥＤＴＡ溶液中、４℃で３日間無機質除去し、パラフィン
に包埋し、そして１０μmの厚さの切片に切断した。切片は、等しい４部分の胸
骨へと分割されるように切断し、手術から２および４週間後に、ヘマトキシリン
−エオシン（ＨＦ）で染色した。この組織学的切片を、画像解析装置系（ＳＰ−
１０００、オリンパス社、東京）に接続したビデオカメラを備えた顕微鏡を用い
て解析した。各切片あたりの胸骨の新たな骨の面積を、２倍の倍率で測定した。

【００４７】 （vi）統計的分析 すべてのデータを一方向分散分析によって分析して、実験群間の統計的有意差
を評価した。実験結果は、平均±標準誤差として表した。有意差の検定は、対照
群と比較して、９５％の信頼区間で実施した。

【００４８】 （vii）胸骨周囲血流量 結果を図１に要約する。図１は、各群における、手術の前後の胸骨周囲血流量
である。群Ａ（ｂＦＧＦおよびヒドロゲルをともに適用した）では、胸骨周囲血
流量は、群Ｂ（対照、ｂＦＧＦもヒドロゲルも用いなかった）、群Ｃ（擬似手術
、ｂＦＧＦは用いないが、ヒドロゲルは用いた）より大であった。これは、胸骨
の後方（すなわち内側）表面、および内胸動脈血管床に適用したｂＦＧＦ含有ヒ
ドロゲルが、胸骨の表面／周囲での血管新生を促進したことを示唆する。術前の
胸骨周囲血流量（ＰＢＦ）は、８．６±０．６（平均±標準誤差）ml／分／１０
０gであった。正中胸骨切開術のみの後のＰＢＦは、有意な変化はなかったもの
の、ＢＩＴＡ除去後には、８．５±０．６ml／分／１００gへと減少した。群Ａ
、群Ｂまたは群Ｃでの手術から４週間後のＰＢＦは、それぞれ、９．７±１．２
、６．５±０．６または８．２±０．５ml／分／１００gであった。有意差は、
３群で注目された（ｐ＜０．００１）。

【００４９】 （viii）血管新生の組織学的評価 胸骨の周囲の血管新生の組織学的研究は、血管数のこの増加を確認した。群Ａ
では、群ＢおよびＣより多くの毛細血管および小動脈（直径１０〜５０μm）が
存在した（図２Ａ〜２Ｃ）。図２Ａ、２Ｂおよび２Ｃは、手術から４週間後の胸
骨の周囲の結合組織の顕微鏡写真を示す。群Ａ（ｂＦＧＦおよびヒドロゲルをと
もに適用した）では、多数の血管新生が認められる（図２Ａ）のに対し、群Ｂ（
対照、ｂＦＧＦもヒドロゲルも用いなかった：図２Ｂ）および群Ｃ（擬似手術、
ｂＦＧＦは用いないが、ヒドロゲルは用いた：図２Ｃ）では、僅かな血管新生の
みが観察されたにすぎない。結果は、図１で認められた、群Ａの増加した胸骨周
囲血流量は、血管新生によって生じたことを強く示唆する。図３は、３群間の胸
骨の周囲における単位面積あたりの小動脈および毛細血管の数を示す。すなわち
、図３は、各群における胸骨の周囲の血管数を示す。群Ａ（ｂＦＧＦおよびヒド
ロゲルをともに適用した）では、胸骨の周囲の結合組織中に、多数の血管が認め
られた。一方、群Ｂ（対照、ｂＦＧＦもヒドロゲルも用いなかった）、および群
Ｃ（擬似手術、ｂＦＧＦは用いないが、ヒドロゲルは用いた）では、有意に少な
い血管数が認められた。胸骨の周囲における単位面積あたりの小動脈および毛細
血管の数は、群Ａでは、他の２群より顕著に増加した（群Ａ：３０．５±３．２
、群Ｂ：１５．８±２．７、群Ｃ：１２．３±１．５本の血管／単位面積、ｐ＜
０．０１）。

【００５０】 （ix）骨形成の評価 図４Ａおよび４Ｂは、それぞれ、様々な手術から４週間後のラットの胸骨の、
ＢＭＣ（骨無機質含量）およびＢＭＤ（骨無機質密度）測定の結果を示す。群Ａ
（ｂＦＧＦおよびヒドロゲルをともに適用した）では、骨無機質含量は、群Ｂ（
対照、ｂＦＧＦもヒドロゲルも用いなかった）、および群Ｃ（擬似手術、ｂＦＧ
Ｆは用いないが、ヒドロゲルは用いた）より多く；これは、群Ａの方が、胸骨の
多大な再生（すなわち回復）があったことを示唆する。すべての群で、骨無機質
密度は、同じ水準であり；これは、群Ａには、正常な質を有する再生胸骨があっ
たことを示唆する。

【００５１】 群ＡにおけるＢＭＣは、６５．５±１５．７であったが、これは、群Ｂおよび
Ｃ（群Ｂ：４７．６±６．４、群Ｃ：４１．３±１７．５）より有意に大きかっ
た。一方、ＢＭＤは、３群間で有意に変化しなかった（群Ａ：５１．１±８．１
、群Ｂ：５０．０±６．１、群Ｃ：４３．７±８．５mg/mm²）。

【００５２】 図５は、様々な手術から２および４週間後の、全群間の胸骨の新たな骨形成の
面積の結果を立証する。図５は、手術から２および４週間後の、新たな骨形成の
面積を示す。手術から２週間後に、群Ａ（ｂＦＧＦおよびヒドロゲルをともに適
用した）は、群Ｂ（対照、ｂＦＧＦもヒドロゲルも用いなかった）、および群Ｃ
（擬似手術、ｂＦＧＦは用いないが、ヒドロゲルは用いた）より多大な骨形成が
ある傾向にあり、この差は、２週間後（すなわち手術から４週間後）にさらに大
きく、有意であった。手術から２週間後には、群Ａでの新たな骨形成の面積は、
群ＢおよびＣより大きい傾向にあったが、３群間で、有意差はなかった（群Ａ：
１．７９±１．２２、群Ｂ：０．８７±０．７０、群Ｃ：１．３７±０．９２mm ² ）。一方、群Ａは、手術から４週間後には、他の２群より有意に大きい新たな
骨形成の面積を有した（群Ａ：５．１３±２．８２、群Ｂ：２．１７±０．９１
、群Ｃ：２．０１±０．８９mm²）。

【００５３】 図６Ａ〜６Ｃ、および７Ａ〜７Ｃは、それぞれ、異なる手術から２および４週
間後の、胸骨の組織学的切片を示す。すなわち、図６Ａ、６Ｂおよび６Ｃは、手
術から２週間後の胸骨からの断面の顕微鏡写真である。群Ａ（ｂＦＧＦおよびヒ
ドロゲルをともに適用した：図６Ａ）、および群Ｃ（擬似手術、ｂＦＧＦは用い
ないが、ヒドロゲルは用いた：図６Ｃ）では、胸骨は、既に回復を開始した。一
方、群Ｂ（対照、ｂＦＧＦもヒドロゲルも用いなかった：図６Ｂ）では、胸骨は
、回復を開始しなかった。また、図７Ａ、７Ｂおよび７Ｃは、手術から４週間後
の胸骨からの断面の顕微鏡写真である。群Ａ（ｂＦＧＦおよびヒドロゲルをとも
に適用した）では、胸骨は、ほとんど完全に回復し、胸骨の回復不良または過剰
回復は、なかった（図７Ａ）。一方、群Ｂ（対照、ｂＦＧＦもヒドロゲルも用い
なかった：図７Ｂ）、および群Ｃ（擬似手術、ｂＦＧＦは用いないが、ヒドロゲ
ルは用いた：図７Ｃ）では、胸骨は、充分に回復しなかった。手術から２週間後
、群ＡおよびＣでは、本来の胸骨の周囲に多少の軟骨内骨化が観察されたが、群
Ｂでは観察されなかった。手術から４週間後、群ＢおよびＣには、本来の胸骨の
周囲に部分的な軟骨内骨化があった。対照的に、群Ａには、再生した骨組織で満
たされた、ほぼ完全に回復した胸骨があった。

【００５４】 本発明では、ＢＩＴＡ除去後の胸骨切開術を包含する、胸骨切開術後の胸骨回
復を向上させるいくつかの方法を提供することができる。実験で得られたデータ
によれば、増強された胸骨回復は、胸骨、および周囲の組織の血管新生、ならび
に骨形成によって生じ；血管新生および骨形成の双方が、局所的に適用された、
血管新生／骨形成因子（たとえば、この実験でのｂＦＧＦ）によって誘導された
。

【００５５】 例２ 本発明の効果を、ビーグル犬での胸骨切開術およびＢＩＴＡ除去後の、ｂＦＧ
Ｆの局所的使用によって増強された胸骨回復の際に評価した。

【００５６】 （ｉ）ｂＦＧＦを組み込んだゼラチンヒドロゲルシートの調製 例１の（ｉ）と同様にして、４．９の等電点を有する、アルカリ処理したゼラ
チンを、グルタルアルデヒドにより２５℃で化学的に架橋させて、滅菌されたシ
ートを製造した。これらを、凍結乾燥した後、ｂＦＧＦ１００μgを含有する水
溶液で含浸して、ｂＦＧＦを組み込んだゼラチンヒドロゲルを得た。こうして製
造したヒドロゲルシートは、矩形（１ｘ１０mm）の形状で、０．７mmの厚さであ
った。それぞれのヒドロゲルシートの含水量は、９５％であった。すべての実験
過程は、無菌条件下で実施した。

【００５７】 （ii）動物実験 １０〜１２kgの体重のビーグル犬８頭を、エーテルで麻酔した後に経口挿管し
、仰臥位での正中胸骨切開術に付し、それぞれのイヌの両側の内胸動脈を、有柄
の方式の電気小刀を用いることによって、出発位置から剣状突起の高さまで剥離
させた。剥離した両側の内胸動脈を、完全に分離し、中心側および末梢側で１−
０絹糸を用いることによって、切断し、除去した。

【００５８】 これら８頭のイヌを、２群に分割し：群Ａには、ＢＩＴＡの除去を施し、ｂＦ
ＧＦ（１００μg／シート）を組み込んだゼラチンヒドロゲルシートを、正中胸
骨切開術後の胸骨に接着し、群Ｂには、ＢＩＴＡ除去のみを施した（それぞれ４
頭）。ゼラチンヒドロゲルシートは、４．９の等電点を有するアルカリ処理した
ゼラチンを、グルタルアルデヒドで化学的に架橋させることによって製造した。
このゼラチンヒドロゲルシートは、総ゼラチンヒドロゲルシートに対して９５重
量％の量の水を含有した。

【００５９】 （iii）骨形成の評価 ４週間後の胸骨の周囲の骨再生を、骨シンチグラム（テクネチウム９９二ホス
ホン酸メチレンを用いて；以下、「Ｔｃ−９９−ＭＤＰ」と略す）、胸骨のＸ線
写真、および二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）によって評価した。

【００６０】 （vi）骨シンチグラム解析 手術から４週間後に、それぞれのイヌにＴｃ−９９−ＭＤＰを静脈内に投与し
、投与から６０分後に、イヌの骨シンチグラムを写真撮影した。結果を図８Ａ（
群Ａ）および８Ｂ（群Ｂ）に示す。これらの写真から理解できるとおり、Ｔｃ−
９９−ＭＤＰは、群Ａの胸骨に、群Ｂのそれより多く蓄積された。

【００６１】 また、胸骨を問題の領域（ＲＯＩ）として３群に区分し、それぞれの領域での
陰の比率を、参照領域（ｒｅｆ−ＲＯＩ）としての全部縦隔部分のそれに基づい
て算出して、定量的評価を実施した。結果として、図９に示したとおり、Ｔｃ−
９９−ＭＤＰ投与の３０分後には、群Ａは、２３４．９±３１．０％であり、群
Ｂは、１７６．２±３９．０％であり、Ｔｃ−９９−ＭＤＰ投与の６０分後には
、群Ａは、２８２．７±２２．９％であり、群Ｂは、１７４．２±２７．２％で
あった。したがって、これらの群では、有意差が注目された（ｐ＜０．００１）
。

【００６２】 （ｖ）胸骨のＸ線写真法 手術から４週間後の胸骨の周囲の骨再生を、Ｘ線写真法によって評価した。結
果を、図１０Ａ（群Ａ）および１０Ｂ（群Ｂ）に示す。

【００６３】 群Ａでは、充分な骨再生を、すべての部分で認めることができたのに対し、群
Ｂでは、骨再生が不充分である多くの部分が存在し、いくつかの部分は、部分的
に分離されていた。

【００６４】 （vi）二重エネルギーＸ線吸収測定（ＤＥＸＡ） 胸骨の再生を定量的に評価するため、０．１ｘ１．０cmの大きさを有する問題
の領域（ＲＯＩ）を、胸骨の切開部分に設定し、この部分の骨量および骨密度を
、ＤＥＸＡを用いることによって測定した。測定した部分は、胸骨の両側の第一
ないし第六肋骨の胸骨切開部分であった。結果を図１１に示す。図１１から理解
できるとおり、群Ａの骨量は、２１．４±１１．１mgであったのに対し、群Ｂで
は、それが８．６±７．４mgであり、群Ａの骨密度は、１２５．８±７０．５mg
/mm²であったのに対し、群Ｂでは、それが６６．７±４４．３mg/mm²であった。
したがって、群Ａは、群Ｂのそれより顕著に高い値を示した結果、これらの群で
は有意差が注目された（ｐ＜０．００１）ことを理解することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 ３群間の手術前の水準と比較した胸骨周囲血流量を示すグラフである。

【図２Ａ】 手術から４週間後の胸骨の周囲の結合組織の顕微鏡写真であって、図２Ａは、
群Ａ（ｂＦＧＦ）である。

【図２Ｂ】 手術から４週間後の胸骨の周囲の結合組織の顕微鏡写真であって、図２Ｂは、
群Ｂ（対照）である。

【図２Ｃ】 手術から４週間後の胸骨の周囲の結合組織の顕微鏡写真であって、図２Ｃは、
群Ｃ（擬似手術）である。

【図３】 ３群間の胸骨の周囲の血管数の比較を示すグラフである。

【図４Ａ】 ３群間の、それぞれ、骨無機質含量の比較を示すグラフであって、群ＡはｂＦ
ＧＦ、群Ｂは対照、群Ｃは擬似手術である。

【図４Ｂ】 ３群間の、それぞれ、骨無機質密度の比較を示すグラフであって、群ＡはｂＦ
ＧＦ、群Ｂは対照、群Ｃは擬似手術である。

【図５】 手術から２または４週間後の３群間の新たな骨形成の面積の比較を示すグラフ
である。

【図６Ａ】 手術から２週間後の胸骨から得られた組織学的断面を示す顕微鏡写真であって
、群ＡはｂＦＧＦである。

【図６Ｂ】 手術から２週間後の胸骨から得られた組織学的断面を示す顕微鏡写真であって
、群Ｂは対照である。

【図６Ｃ】 手術から２週間後の胸骨から得られた組織学的断面を示す顕微鏡写真であって
、群Ｃは擬似手術である。

【図７Ａ】 手術から４週間後の胸骨から得られた組織学的断面を示す顕微鏡写真であって
、群ＡはｂＦＧＦである。

【図７Ｂ】 手術から４週間後の胸骨から得られた組織学的断面を示す顕微鏡写真であって
、群Ｂは対照である。

【図７Ｃ】 手術から４週間後の胸骨から得られた組織学的断面を示す顕微鏡写真であって
、群Ｃは擬似手術である。

【図８Ａ】 手術から４週間後の胸骨から得られた骨シンチグラムの比較を示す写真であっ
て、群ＡはｂＦＧＦである。

【図８Ｂ】 手術から４週間後の胸骨から得られた骨シンチグラムの比較を示す写真であっ
て、群Ｂは対照である。

【図９】 手術から４週間後の２群間の、^99mＴｃ−ＭＰＤの投与から３０分および６０
分後の骨のシンチグラムの比較を示すグラフである。

【図１０Ａ】 手術から４週間後の胸骨を示すＸ線写真であって、群ＡはｂＦＧＦである。

【図１０Ｂ】 手術から４週間後の胸骨を示すＸ線写真であって、群Ｂは対照である。

【図１１Ａ】 手術から４週間後の胸骨の、それぞれ、骨量の比較を示すグラフであって、群
ＡはｂＦＧＦ、群Ｂは対照である。

【図１１Ｂ】 手術から４週間後の胸骨の、それぞれ、骨密度の比較を示すグラフであって、
群ＡはｂＦＧＦ、群Ｂは対照である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ， ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ， ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，Ｃ Ｚ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＧＤ，ＧＥ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＴ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，Ｎ Ｚ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ Ｆターム(参考） 4C076 AA08 AA09 AA12 AA25 AA71 BB32 CC09 CC19 EE32A EE32P FF68 4C084 AA02 AA03 BA44 DA01 DB53 DB54 DB57 DB60 DB61 DB62 MA05 MA67 NA10 ZA962

Claims (19)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うかまたは伴わない胸骨
   切開術後の胸骨処置を向上させるための、胸骨切開術後の胸骨の処置のための薬
   剤を該胸骨もしくはその周囲に適用することを含む方法であって、該薬剤が、血
   管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体よりなる群から選ばれる少なく
   とも一つを有効成分として含む方法。
2. 【請求項２】 薬剤を、胸骨の表面もしくは内部にか；胸骨の周囲の組織に
   か；内胸動脈の血管床にか；または肋骨もしくは軟骨、もしくはそれらの接合部
   の骨折部位に直接接して適用する、請求項１記載の方法。
3. 【請求項３】 薬剤を、影響された部分に、溶液、生理食塩水その他の慣用
   の補助剤、該溶液を用いた注射剤もしくは噴霧剤、ゲル、骨ろう、膠、または軟
   膏の形態で適用する、請求項１または２記載の方法。
4. 【請求項４】 薬剤を、胸骨の表面もしくは内部にか；胸骨の周囲の組織に
   か；または内胸動脈の血管床にヒドロゲルの形態で適用する、請求項１〜３のい
   ずれか一項に記載の方法。
5. 【請求項５】 該ヒドロゲルが、約４．９の等電点を有するアルカリ処理ゼ
   ラチンまたは約９．０の等電点を有する酸処理ゼラチン、ならびに塩基性繊維芽
   細胞増殖因子および／もしくはその類似体、および架橋剤を含む、架橋したヒド
   ロゲルである、請求項４記載の方法。
6. 【請求項６】 血管新生因子、骨形成因子、またはそれらの類似体が、塩基
   性繊維芽細胞増殖因子、酸性繊維芽細胞増殖因子、血管内皮増殖因子、組織増殖
   因子−β、肝細胞増殖因子、骨形成タンパク質、血小板由来増殖因子、組織増殖
   因子−α、サイトカイン；血管新生および骨形成のうち少なくとも一方を誘導す
   るタンパク質、核酸および遺伝子；ならびにそれらの類似体よりなる群から選ば
   れる少なくとも１種類である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
7. 【請求項７】 血管新生因子、骨形成因子、またはそれらの類似体が、塩基
   性繊維芽細胞増殖因子、またはその類似体である、請求項１〜６のいずれか一項
   に記載の方法。
8. 【請求項８】 有効成分を、患部に、１胸骨切開術部位あたり約０．１μg
   〜１０mgの量で投与する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
9. 【請求項９】 胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴う
   か、もしくは伴わない胸骨切開術の後の胸骨で骨を再生させる、胸骨切開術後の
   胸骨の処置のための薬剤を該胸骨もしくはその周囲に適用することを含む方法で
   あって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体よりなる
   群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法。
10. 【請求項１０】 胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴
    うか、または伴わない胸骨切開術の後の胸骨の周囲において、胸骨切開術後の胸
    骨の処置のための薬剤を該胸骨もしくはその周囲に適用することを含む、血管新
    生に付す方法であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの
    類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法。
11. 【請求項１１】 内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わな
    い胸骨切開術後の骨折部位を処置する、胸骨切開術後の骨折部位の処置のための
    薬剤を肋骨、軟骨、もしくはそれらの接合部の骨折部位に直接接して適用するこ
    とを含む方法であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの
    類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む方法。
12. 【請求項１２】 胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わない
    胸骨切開術後の胸骨の回復もしくは処置を、胸骨の処置のためのそれを該胸骨も
    しくはその周囲に適用することによって向上させる薬剤であって、該薬剤が、血
    管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体よりなる群から選ばれる少なく
    とも一つを有効成分として含む薬剤。
13. 【請求項１３】 胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴
    うか、もしくは伴わない胸骨切開術の後の胸骨において、胸骨切開術後の胸骨の
    処置のためのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって、骨を再生
    させる薬剤であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類
    似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む薬剤。
14. 【請求項１４】 胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴
    うか、もしくは伴わない胸骨切開術の後の胸骨の周囲において、胸骨切開術後の
    胸骨の処置のためのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって血管
    新生に付す薬剤であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれら
    の類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む薬剤。
15. 【請求項１５】 内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、もしくは伴わ
    ない胸骨切開術の後の骨折部位を、胸骨切開術後の胸骨の骨折部位の処置のため
    のそれを肋骨、軟骨、もしくはそれらの接合部位に直接接して適用することによ
    って処置する薬剤であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれ
    らの類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む薬剤。
16. 【請求項１６】 内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、もしくは伴わ
    ない胸骨切開術の後の胸骨の回復または処置を、胸骨切開術後の胸骨の処置のた
    めのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって向上させるための薬
    剤の使用であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似
    体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む使用。
17. 【請求項１７】 内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、もしくは伴わ
    ない胸骨切開術の後の胸骨の回復または処置を、胸骨切開術後の胸骨の処置のた
    めのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって向上させる薬剤の使
    用であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそれらの類似体より
    なる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む使用。
18. 【請求項１８】 胸骨切開術、または内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴
    うか、または伴わない胸骨切開術の後の胸骨の周囲において、胸骨切開術後の胸
    骨の処置のためのそれを該胸骨もしくはその周囲に適用することによって血管新
    生に付す薬剤の使用であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およびそ
    れらの類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む使用
    。
19. 【請求項１９】 内胸動脈の少なくとも一つの除去を伴うか、または伴わな
    い胸骨切開術の後の骨折部位を、胸骨切開術後の骨折部位の処置のためのそれを
    肋骨、軟骨、もしくはそれらの接合部の骨折部位に直接接して適用することによ
    って処置する薬剤の使用であって、該薬剤が、血管新生因子、骨形成因子、およ
    びそれらの類似体よりなる群から選ばれる少なくとも一つを有効成分として含む
    使用。