JP2003342277A

JP2003342277A - フロピリジン抗細菌剤

Info

Publication number: JP2003342277A
Application number: JP2003191576A
Authority: JP
Inventors: Yutaka Sugie; 裕杉江; Akemi Sugiura; 朱美杉浦; Nobuji Yoshikawa; 展司吉川; John Wing Wong; ウィンウォングジョン; Susan Jane Truesdell; ジェ−ン．トゥルースデルスーザン
Original assignee: Pfizer Japan Inc
Current assignee: Pfizer Japan Inc
Priority date: 1998-11-02
Filing date: 2003-07-04
Publication date: 2003-12-03
Also published as: EP0999212B1; DK0999212T3; JP2000143666A; EP0999212A1; CA2287736C; DE69904797D1; JP3564543B2; CA2287736A1; ATE230750T1; ES2189356T3; DE69904797T2

Abstract

(57)【要約】【課題】フロピリジン化合物及び前記化合物を含む医
薬組成物を提供する。【解決手段】式：【化１】で表される化合物（例えば、２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジ
ヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−
ヒドロキシ−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−
ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒド）又は薬剤学的に
許容することのできるその塩。前記化合物及び前記化合
物を含有する医薬組成物は、細菌による感染疾患の治療
に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、フロピリジン抗細
菌剤に関する。本発明は、特に、真菌クラドボトリウム
・バリウム（Ｃｌａｄｏｂｏｔｒｙｕｍｖａｒｉｕ
ｍ；ＦＥＲＭＢＰ−５７３２）の発酵によって生成さ
れるフロピリジン抗細菌剤、及び微生物カロネクトリア
・デコラ（Ｃａｌｏｎｅｃｔｒｉａｄｅｃｏｒａ；Ｆ
ＥＲＭＢＰ−６１２４）、クンニンハメラ・エチヌラ
タ・バー・エレガンス（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅｌｌａ
ｅｃｈｉｎｕｌａｔａｖａｒ．ｅｌｅｇａｎｓ；
ＦＥＲＭＢＰ−６１２６）、又は未同定細菌（ＦＥＲ
ＭＢＰ−６１２５）によるそれらのバイオトランスフ
ォーメーション生成物に関する。また、本発明は、それ
らを含有し、種々の細菌〔例えば、スタフィロコッカス
種（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．）、ストレ
プトコッカス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｓ
ｐ．）、及びエンテロコッカス種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃ
ｃｕｓｓｐ．）の多剤耐性株〕の感染によって発生す
る疾患、障害、及び悪化状態の治療に有用な医薬組成物
にも関する。

【０００２】

【従来の技術】ペニシリンが発見（Ａ．Ｆｌｅｍｉｎ
ｇ，１９２９）され、そして開発（Ｈ．Ｗ．Ｆｌｏｒｅ
ｙら，１９４１）されて以来、人類は、多種の感染症に
対する健康管理において大きな利益を享受している。し
かしながら、最近、多くの標準的薬剤（例えば、β−ラ
クタム類、マクロライド類、及びキノロン類）の有用性
を制限する多剤耐性感染の発生率が増加するという警報
が発せられている。例えば、メチシリン耐性黄色ブドウ
球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）
（ＭＲＳＡ）及びバンコマイシン耐性エンテロコッカス
種は、現在、実質的に全ての他の抗生物質群に対して共
耐性である。また、多剤耐性肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）も、小児及
び成人の両方における上気道感染及び低気道感染におけ
る頻度のために、最も重要な病原性細菌の１つである。
肺炎連鎖球菌は、現在利用可能な全ての療法に対して急
速に耐性を持ちつつある。一般に処方されている抗感染
剤（例えば、β−ラクタム及び現在のマクロライド）
は、もはや確実に有効とは限らない。

【０００３】これらの多剤耐性細菌は、病院に限らず、
世界中の種々の人間社会において発生する。多くの場
合、多剤耐性感染は、潜在的な致死的状態をもたらした
り、入院が必要になることがある。前記多剤耐性細菌の
出現は、薬剤発見計画を促進した。例えば、ＭＲＳＡに
対する有効な抗細菌活性を有する新規抗生物質として、
ジペプチド類が「Ｒ．Ｍ．Ｗｉｌｌｉａｍｓら，Ｊ．Ａ
ｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，５１（２），１８９−２０１，
１９９８」に記載されている。種々の細菌〔例えば、多
剤耐性細菌（例えば、スタフィロコッカス種、ストレプ
トコッカス種、及びエンテロコッカス種）〕に対して良
好な活性を有する化合物を提供することは、重度の医学
的需要によって要求されるだけでなく、治療の失敗、実
験室試験、及び入院を最小化することによって達成する
ことができる全体的健康管理経費の抑制によっても要求
される。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、種々
の細菌（例えば、多剤耐性細菌）に対して良好な抗細菌
活性を有するフロピリジン化合物を提供すること、及び
前記化合物を含む医薬組成物を提供することである。種
々のフロピリジン化合物が知られている。例えば、ドイ
ツ国特許公報ＤＥ４２１８９７８Ａ１には、液晶材料と
してのフロピリジン化合物が開示されている。また、国
際特許公報ＷＯ９７／１１０７６には、殺真菌剤として
のフロピリジン化合物が開示されている。本発明の別の
課題は、前記フロピリジン化合物の製造方法を提供する
ことである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、式（Ｉ）：

【化６】［式中、Ｘ¹及びＸ²は、炭素原子又は窒素原子であり；
Ｒ¹及びＲ²は、それぞれ独立して場合によりヒドロキシ
基で置換されていることのあるフェニル基であるが、但
し、Ｘ¹及びＸ²が同時に炭素原子又は窒素原子であるこ
とはなく、Ｘ¹が窒素原子である場合にはＲ¹が存在せ
ず、そしてＸ²が窒素原子である場合にはＲ²が存在しな
いものとし；Ｒ³は、メチル基又はヒドロキシメチル基
であり；Ｒ⁴は、ホルミル基、ヒドロキシメチル基、又
はヒドロキシＣ_3-6アルケニル基であり；そしてＲ⁵は、
ヒドロキシ基、Ｃ_3-6アルケニル基、又はヒドロキシＣ
_3-6アルケニル基であるか；あるいはＲ⁴及びＲ⁵は、そ
れらが結合するフロピリジン環中の炭素原子と一緒にな
って、式：

【化７】で表される基、又は式：

【化８】で表される（前記フロピリジン環と縮合する）環を形成
することができるが；但し、Ｒ³がメチル基であって、
そしてＲ⁵が２−ブテン−２−イル基である場合には、
Ｘ²は窒素原子以外の基であるものとする］で表される
化合物、又は薬剤学的に許容することのできるその塩を
提供する。

【０００６】また、本発明は、（１）分子式がＣ₁₉Ｈ₁₉
ＮＯ₂であり；（２）メタノール中でのスペクトルの紫外光域の吸収極
大が、２０６．０ｎｍ及び２４７．０ｎｍにあり；（３）メタノール中で濃度６％の場合の旋光度（［α］
_D ²⁴）が＋１３．３゜であり；（４）ＫＢｒ中でペレット化した場合の赤外域の特性吸
収が、３３７８、２９６３、１６４７、１６１４、１４
５０、１４２７、１２２８、１０４２、８２３、７７
４、及び６９４ｃｍ^-1の波長で生じ；（５）¹ＨＮＭＲスペクトル（２７０ＭＨｚ）の主要
なピークが、δ７．５２（ｍ，２Ｈ），７．４７（ｓ，
１Ｈ），７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｍ，１
Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，１Ｈ），３．１３（ｂｒｓ，
１Ｈ），２．７８（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），１．
６７（ｓ，３Ｈ），１．５８（ｓ，３Ｈ），１．１８
（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）であり；そして（６）¹³ＣＮＭＲスペクトル（２７０ＭＨｚ）の主要
なピークが、δ１６５．０３（ｓ），１６２．５５
（ｓ），１５１．３８（ｓ），１３５．３８（ｄ），１
３０．２３（ｓ），１２９．７１（ｄ×２），１２８．
７９（ｄ×２），１２８．１５（ｄ），１２７．８１
（ｄ），１１４．３４（ｓ），１１１．０６（ｓ），１
０４．２８（ｓ），５８．３２（ｄ），５０．３０
（ｄ），２６．９７（ｑ），２０．９３（ｑ），１５．
２８（ｑ）である；特性を有する化合物、又は薬剤学的
に許容することのできるその塩に関する。

【０００７】本発明のフロピリジン化合物は、細菌（例
えば、スタフィロコッカス種、ストレプトコッカス種、
及びエンテロコッカス種の多剤耐性株）に対する抗生物
質活性を示す。従って、本発明は、細菌によって生じる
感染疾患の治療に有効な量の式（Ｉ）で表される化合物
又は薬剤学的に許容することのできるその塩、及び薬剤
学的に許容することのできる担体を含む、前記疾患治療
用の医薬組成物も提供する。また、本発明は、治療有効
量の式（Ｉ）で表される化合物を哺乳動物に投与するこ
とを含む、前記哺乳動物における細菌によって発生する
感染疾患を治療する方法に用いることができる。

【０００８】

【発明の実施の形態】本明細書において「多剤耐性」
は、微生物が抗生物質（例えば、マクロライド類及びβ
−ラクタム類）に対して耐性を有することを意味する。
前記抗生物質としては、ペニシリン、エリスロマイシ
ン、メチシリン及びバンコマイシンを挙げることができ
る。本発明には、式（Ｉ）で表される化合物の可能な全
ての立体異性体及び互変異性体を含む。

【０００９】より具体的な本発明の化合物は、Ｘ¹が炭
素原子であり、Ｘ²が窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基
であり、Ｒ²が存在せず、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴及
びＲ⁵が一緒になって、フロピリジン環に縮合する式：

【化９】で表される環を形成するか；Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²
が窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在
せず、Ｒ³及びＲ⁴がヒドロキシメチル基であり、そして
Ｒ⁵が２−ブテン−２−イル基であるか；Ｘ¹が炭素原子
であり、Ｘ²が窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であ
り、Ｒ²が存在せず、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴がホル
ミル基であり、そしてＲ⁵が４−ヒドロキシ−２−ブテ
ン−２−イル基であるか；Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²が
窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在せ
ず、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴がヒドロキシメチル基で
あり、そしてＲ⁵が４−ヒドロキシ−２−ブテン−２−
イル基であるか；Ｘ¹が窒素原子であり、Ｘ²が炭素原子
であり、Ｒ¹が存在せず、Ｒ²がフェニル基であり、Ｒ³
がメチル基であり、Ｒ⁴がヒドロキシメチル基であり、
そしてＲ⁵が２−ブテン−２−イル基であるか；Ｘ¹が窒
素原子であり、Ｘ²が炭素原子であり、Ｒ¹が存在せず、
Ｒ²がフェニル基であり、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴及
びＲ⁵がそれらが結合する炭素原子と一緒になって、フ
ロピリジン環に縮合する式：

【化１０】で表される環を形成するか；又はＸ¹が窒素原子であ
り、Ｘ²が炭素原子であり、Ｒ¹が存在せず、Ｒ²がフェ
ニル基であり、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴が３−ヒドロ
キシ−２−メチル−１−ブテン−１−イル基であり、そ
してＲ⁵がヒドロキシ基である、式（Ｉ）で表される化
合物である。

【００１０】本発明の具体的な化合物は、２Ｒ^*，３Ｒ^*
−２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−
イル］−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−３−
メチル−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン又は
その塩；２Ｒ^*，４ａＲ^*，９ａＳ^*−４ａ，９ａ−ジヒ
ドロ−５−ヒドロキシ−８−フェニル−２，３，４ａ−
トリメチル−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｂ］フロ［３，２
−ｃ］ピリジン又はその塩；１Ｒ^*，４ｂＳ^*−１，３，
４ａ，４ｂ−テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−４ｂ−メ
チル−８−フェニル−４−（Ｅ）−エチリデンピラノ
［４，３−ｂ］フロ［２，３−ｂ］ピリジン又はその
塩；２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２
−イル］−３，３−ジ−（ヒドロキシメチル）−４−ヒ
ドロキシ−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン又
はその塩；２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２，４−
ジヒドロキシ−３−［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−メ
チル−１−ブテニル］−７−フェニルフロ［３，２−
ｃ］ピリジン又はその塩；２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒ
ドロ−４−ヒドロキシ−２−［（Ｅ）−４−ヒドロキシ
−２−ブテン−２−イル］−３−メチル−５−フェニル
フロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒド又
はその塩；２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−４−ヒド
ロキシ−２−［（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−ブテン−
２−イル］−３−ヒドロキシメチル−３−メチル−５−
フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン又はその塩から選
択した化合物である。

【００１１】前記医薬組成物中に含ませるのに最も好ま
しい具体的な化合物は、２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒド
ロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒド
ロキシ−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］
ピリジン−３−カルボアルデヒドである。この化合物
（以下、化合物１と称する）は、以下の構造：

【化１１】を有すると考えられる。

【００１２】本発明に用いる微生物としては、ニューヨ
ークボタニカルガーデン（ＮｅｗＹｏｒｋＢｏｔａｎ
ｉｃａｌＧａｒｄｅｎ；ＴｈｅＢｒｏｎｘ，Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，ニューヨーク州，１０４５８，米国）から購
入したクラドボトリウム・バリウム（Ｃｌａｄｏｂｏｔ
ｒｙｕｍｖａｒｉｕｍ）の菌株を挙げることができ
る。前記微生物は、ブダペスト条約に基づいて、１９９
６年１０月２９日に、受託番号ＦＥＲＭＢＰ−５７３
２として、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究
所（あて名：郵便番号３０５日本国茨城県つくば市東１
丁目１−３）に寄託した。クラドボトリウム・バリウム
の分類学的特徴は、「ＧａｍｓＫ．Ｗ．ａｎｄＨｏ
ｏｚｅｍａｎｓ，Ａ．Ｃ．Ｍ．，Ｐｅｒｓｏｏｎｉａ
６，９６−１１０，１９７０」に記載されている。

【００１３】本発明で用いる別の微生物は、カロネクト
リア・デコラ（Ｃａｌｏｎｅｃｔｒｉａｄｅｃｏｒ
ａ；ＦＥＲＭＢＰ−６１２４）、クンニンハメラ・エ
チヌラタ・バー・エレガンス（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅ
ｌｌａｅｃｈｉｎｕｌａｔａｖａｒ．ｅｌｅｇａｎ
ｓ；ＦＥＲＭＢＰ−６１２６）、及びアメリカンタイ
プカルチャーコレクション（１０８０１Ｕｎｉｖｅｒ
ｓｉｔｙＢｌｖｄ．Ｍａｎａｓｓａｓ，バージニア
州，２０１１０−２２０９，米国）から購入した未同定
細菌（ＦＥＲＭＢＰ−６１２５）である。これらは、
ブダペスト条約に基づいて、１９９７年９月２６日に、
前記の受託番号で通商産業省工業技術院生命工学工業技
術研究所（あて名：郵便番号３０５日本国茨城県つくば
市東１丁目１−３）に寄託した。

【００１４】本発明により、ＦＥＲＭＢＰ−５７３
２、又はそれらの突然変異若しくは組換え形態を好気的
発酵すると、Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²が窒素原子であ
り、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在せず、Ｒ³がメ
チル基であり、Ｒ⁴がホルミル基であり、そしてＲ⁵が２
−ブテン−２−イル基であるか；Ｘ¹が炭素原子であ
り、Ｘ²が窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ
²が存在せず、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴がヒドロキシ
メチル基であり、そしてＲ⁵が２−ブテン−２−イル基
であるか；Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²が窒素原子であ
り、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在せず、Ｒ³がメ
チル基であり、Ｒ⁴及びＲ⁵が一緒になって、フロピリジ
ン環に縮合する式：

【化１２】で表される環を形成するか；Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²
が窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在
せず、Ｒ³及びＲ⁴がヒドロキシメチル基であり、そして
Ｒ⁵が２−ブテン−２−イル基であるか；Ｘ¹が窒素原子
であり、Ｘ²が炭素原子であり、Ｒ¹が存在せず、Ｒ²が
フェニル基であり、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴がヒドロ
キシメチル基であり、そしてＲ⁵が２−ブテン−２−イ
ル基であるか；Ｘ¹が窒素原子であり、Ｘ²が炭素原子で
あり、Ｒ¹が存在せず、Ｒ²がフェニル基であり、Ｒ³が
メチル基であり、Ｒ⁴及びＲ⁵がそれらが結合する炭素原
子と一緒になって、フロピリジン環に縮合する式：

【化１３】で表される環を形成するか；又はＸ¹が窒素原子であ
り、Ｘ²が炭素原子であり、Ｒ¹が存在せず、Ｒ²がフェ
ニル基であり、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴が３−ヒドロ
キシ−２−メチル−１−ブテン−１−イル基であり、そ
してＲ⁵がヒドロキシ基である、式（Ｉ）で表されるフ
ロピリジン化合物を産生することができる。

【００１５】また、ＦＥＲＭＢＰ−５７３２菌株の好
気的発酵により、（１）分子式がＣ₁₉Ｈ₁₉ＮＯ₂であり；（２）メタノール中でのスペクトルの紫外光域の吸収極
大が、２０６．０ｎｍ及び２４７．０ｎｍにあり；（３）メタノール中で濃度６％の場合の旋光度（［α］
_D ²⁴）が＋１３．３゜であり；（４）ＫＢｒ中でペレット化した場合の赤外域の特性吸
収が、３３７８、２９６３、１６４７、１６１４、１４
５０、１４２７、１２２８、１０４２、８２３、７７
４、及び６９４ｃｍ^-1の波長で生じ；（５）¹ＨＮＭＲスペクトル（２７０ＭＨｚ）の主要
なピークが、δ７．５２（ｍ，２Ｈ），７．４７（ｓ，
１Ｈ），７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｍ，１
Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，１Ｈ），３．１３（ｂｒｓ，
１Ｈ），２．７８（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），１．
６７（ｓ，３Ｈ），１．５８（ｓ，３Ｈ），１．１８
（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）であり；そして（６）¹³ＣＮＭＲスペクトル（２７０ＭＨｚ）の主要
なピークが、δ１６５．０３（ｓ），１６２．５５
（ｓ），１５１．３８（ｓ），１３５．３８（ｄ），１
３０．２３（ｓ），１２９．７１（ｄ×２），１２８．
７９（ｄ×２），１２８．１５（ｄ），１２７．８１
（ｄ），１１４．３４（ｓ），１１１．０６（ｓ），１
０４．２８（ｓ），５８．３２（ｄ），５０．３０
（ｄ），２６．９７（ｑ），２０．９３（ｑ），１５．
２８（ｑ）である；特性を有する化合物も産生すること
ができる。以下、この化合物を化合物２と称する。

【００１６】これらの化合物は、水性栄養培地中又は水
性栄養培地中の固体支持体上で、１５〜５０℃、好まし
くは２５〜３５℃の温度で、３〜３０日間、好ましくは
７〜２０日間、ＦＥＲＭＢＰ−５７３２を発酵させる
ことによって生成することができる。培地のｐＨは、
４．０〜９．０、好ましくは５．０〜７．０の範囲に調
節することができる。前記プロピリジン化合物を生成す
るためのＦＥＲＭＢＰ−５７３２の培養は、通常、２
０〜３５℃の温度で、７〜２１日間で実施する。培地の
ｐＨは、４．０〜９．０、好ましくは５．０〜７．０の
範囲に調節することができる。

【００１７】前記発酵に有用な栄養培地は、同化可能な
炭素の供給源（例えば、糖、デンプン、及びグリセロー
ル）；及び有機窒素の供給源［例えば、カゼイン、カゼ
インの酵素消化物、大豆ミール（挽き割り粉）、綿実ミ
ール、落花生ミール、小麦グルテン、大豆粉（フラワ
ー）、肉抽出物、及びフィッシュミール］を含む。生長
物質の供給源（例えば、無機塩、塩化ナトリウム、及び
炭酸カルシウム）；並びに微量元素（例えば、鉄、マグ
ネシウム、銅、亜鉛、コバルト、及びマンガン）も利用
することができ、有利な結果をもたらす。表面培養用の
不溶性材料の量は、１０〜５０％〔質量／体積（ｗ／
ｖ）〕であることができる。発酵に有用な適当な不溶性
材料としては、砂、砕石、木片、並びにまるごとの及び
割れた穀類（例えば、そば粉、オートミール、砕けたト
ウモロコシ、及びキビなど）を挙げることができる。

【００１８】液内生長用の発酵器内における培地の通気
は、１分間あたりの滅菌空気体積／培地体積を、３〜２
００％、好ましくは５０〜１５０％に維持する。撹拌速
度は、使用する撹拌機のタイプに依存する。発酵器は、
通常３００〜２，０００ｒｐｍで運転するが、振とうフ
ラスコは、通常１５０〜２５０ｒｐｍで運転する。当然
であるが、生物の移植の間及びその生長の間を通じて、
無菌状態を維持しなければならない。水性培地中の液内
発酵の間に過剰の泡が発生する場合には、消泡剤（例え
ば、ポリプロピレングリコール又はシリコーン）を発酵
培地に加えることができる。

【００１９】カロネクトリア・デコラ（ＦＥＲＭＢＰ
−６１２４）、クンニンハメラ・エチヌラタ・バー・エ
レガンス（ＦＥＲＭＢＰ−６１２６）、及び未同定細
菌（ＦＥＲＭＢＰ−６１２５）の菌株は、化合物１
（２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２
−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−３−メチル−
５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボ
アルデヒド）をバイオトランスフォームするのに用いる
ことができる。これらの微生物は、１９９７年９月２６
日に、ブダペスト条約に基づいて、各微生物の名称の後
ろに記載された受託番号で通商産業省工業技術院生命工
学工業技術研究所（あて名：郵便番号３０５日本国茨城
県つくば市東１丁目１−３）に寄託した。本発明には、
例えば、カロネクトリア属及びクンニンハメラ属に属す
る別の菌株、並びに前記バイオトランスフォーメーショ
ンを行うことのできる別の微生物も用いることができ
る。前記菌株の突然変異形態又は組換え形態であって、
化合物１をバイオトランスフォームする能力を有する突
然変異形態又は組換え形態も用いることができる。前記
の突然変異又は組換えは、自然突然変異、紫外線放射若
しくは突然変異誘発物質（例えば、Ｎ−メチル−Ｎ’−
ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン又はエチル・メタンス
ルホネート）による人工突然変異、又は細胞技術方法
（例えば、細胞融合）、又は遺伝子操作などによって、
周知の方法で得ることができる。

【００２０】本発明により、バイオトランスフォーメー
ションによって生物活性化合物を生成するのに用いられ
る一般的な条件と同様の条件下で、ＦＥＲＭＢＰ−６
１２４、ＦＥＲＭＢＰ−６１２５、ＦＥＲＭＢＰ−
６１２６、又はそれらの突然変異形態若しくは組換え形
態をフロピリジン化合物１と一緒に好気的発酵すること
によって、化合物１のバイオトランスフォーメーション
を実施することができる。

【００２１】すなわち、ＦＥＲＭＢＰ−６１２４、Ｆ
ＥＲＭＢＰ−６１２５、ＦＥＲＭＢＰ−６１２６、又
はそれらの突然変異形態若しくは組換え形態を、フロピ
リジン化合物１と一緒に、水性栄養培地中又は水性栄養
培地中に懸濁した不溶性材料表面上で発酵させる。前記
バイオトランスフォーメーションに有用な栄養培地及び
発酵条件は、ＦＥＲＭＢＰ−５７３２の発酵に対する
前記のものと基本的に同じである。フロピリジン化合物
１は、発酵の前に培地中に加えるか、あるいは、培養開
始後好ましくは１〜２日目に、懸濁液又は溶液の形態
で、発酵ブロスに加えることができる。フロピリジン化
合物１の懸濁液又は溶液を作るには、培養基に用いられ
る任意の材料及び少量の有機溶媒（例えば、ジメチルス
ルホキシド又はエタノール）を使用することができる。
フロピリジン化合物１をバイオトランスフォームするた
めのＦＥＲＭＢＰ−６１２４、ＦＥＲＭＢＰ−６１
２５、又はＦＥＲＭＢＰ−６１２６の培養は、１５〜
５０℃、好ましくは２５〜３５℃の温度で、３〜３０日
間、好ましくは７〜２０日間実施する。培地のｐＨは、
４．０〜９．０、好ましくは５．０〜７．０の範囲内に
調節することができる。

【００２２】本発明のフロピリジン化合物は、標準的技
術（例えば、抽出及び種々のクロマトグラフィー技術）
によって単離することができる。実施例に記載のフロピ
リジン化合物は、実質的に純粋な形態で発酵混合物から
単離し、そして種々の分光技術（例えば、ＵＶ分光光度
法、ＮＭＲ、及び質量分析法）によって同定した。その
分析によると、ＦＥＲＭＢＰ−５７３２の発酵によっ
て調製されるフロピリジン化合物は、２Ｒ^*，３Ｒ^*−
２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イ
ル］−４−ヒドロキシ−３−メチル−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒド又はそ
の塩；２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）
−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−３−ヒド
ロキシメチル−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３
−ｂ］ピリジン又はその塩；２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジ
ヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−
ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−３−メチル−７−
フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン又はその塩；２Ｒ
^*，４ａＲ^*，９ａＳ^*−４ａ，９ａ−ジヒドロ−５−ヒ
ドロキシ−８−フェニル−２，３，４ａ−トリメチル−
２Ｈ−ピラノ［２，３−ｂ］フロ［３，２−ｃ］ピリジ
ン又はその塩；１Ｒ^*，４ｂＳ^*−１，３，４ａ，４ｂ−
テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−４ｂ−メチル−８−フ
ェニル−４−（Ｅ）エチリデンピラノ［４，３−ｂ］フ
ロ［２，３−ｂ］ピリジン又はその塩；２，３−ジヒド
ロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−３，３−
ジ−（ヒドロキシメチル）−４−ヒドロキシ−５−フェ
ニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン又はその塩；及び２Ｒ
^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２，４−ジヒドロキシ−
３−［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−１−ブテ
ニル］−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン又は
その塩であると考えられる。

【００２３】２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２，４
−ジヒドロキシ−３−［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−
メチル−１−ブテニル］−７−フェニルフロ［３，２−
ｃ］ピリジンは、２種類のジアステレオマーからなる。
以下、これらのジアステレオマーを、それぞれジアステ
レオマーＡ及びジアステレオマーＢと称する。

【００２４】ＦＥＲＭＢＰ−６１２４、ＦＥＲＭＢ
Ｐ−６１２５、及びＦＥＲＭＢＰ−６１２６の培養か
ら、化合物１とのインキュベーションによって３種類の
化合物を産生することができる。ＦＥＲＭＢＰ−６１
２４、ＦＥＲＭＢＰ−６１２５、及びＦＥＲＭＢＰ
−６１２６の培養物から単離された化合物は、それぞれ
２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２
−［（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−ブテン−２−イル］
−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジ
ン−３−カルボアルデヒド；２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジ
ヒドロ−４−ヒドロキシ−２−［（Ｅ）−４−ヒドロキ
シ−２−ブテン−２−イル］−３−ヒドロキシメチル−
３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジ
ン；及び２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
５−（４−ヒドロキシフェニル）−３−メチルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒドである
と考えられる。

【００２５】ＦＥＲＭＢＰ−５７３２の発酵により得
られるブロス中に含まれている化合物２の構造は、分析
に利用することのできる前記化合物の量が少量であった
ために、解明することができなかったが、前記で同定さ
れている本発明のフロピリジン化合物（この構造は解明
されている）に関連する新規化学式を有すると考えられ
る。

【００２６】

【投与】本発明のフロピリジン化合物は、種々の細菌
〔例えば、スタフィロコッカス種、ストレプトコッカス
種、及びエンテロコッカス種の多剤耐性株〕の感染によ
って発生する疾患、障害、及び悪化状態の治療に有用で
ある。哺乳動物（特に、ヒト）における抗感染剤として
用いる場合には、本発明のフロピリジン化合物を、標準
的医薬慣行に従って、単独で、それらの薬剤学的に許容
することのできる塩として、別の抗生物質と一緒に、又
は医薬組成物中で不活性担体と一緒に、投与することが
できる。前記化合物は、非経口又は経口投与によって投
与することができる。前記活性成分は、例えば、錠剤、
ペレット、カプセル、座薬、溶液、乳液、懸濁液、及び
使用に適した他の形態用の通常の無毒の薬剤学的に許容
することのできる担体と調合することができる。使用す
ることのできる担体は、水、グルコース、ラクトース、
アラビアゴム、ゼラチン、マンニトール、デンプンペー
スト、三ケイ酸マグネシウム、タルク、コーンスター
チ、ケラチン、コロイド状シリカ、ポテトデンプン、尿
素、及び工業製造において使用するのに適した他の担体
である。更に、必要により、補助剤、安定化剤、着色
料、及び香料を用いることができる。一般的に、本発明
のフロピリジン化合物は、５〜７０質量％、好ましくは
１０〜５０質量％の範囲の濃度レベルで前記投与形態中
に提供される。

【００２７】本発明のフロピリジン化合物は、０．０１
〜１００ｍｇ／ｋｇの投与範囲で、抗感染剤として哺乳
動物に使用することができる。具体的な症例において使
用される投与量は、多くの要素（例えば、治療する疾患
の状態、投与する個々の化合物の効力、具体的な患者の
応答、及び投与経路）によって変化することになろう。
しかしながら、種々の細菌の感染によって発生する疾
患、障害、及び悪化状態を治療するために本発明のフロ
ピリジン化合物の１種類をヒト患者において使用する場
合には、経口又は非経口投与量は、通常、１日当たり１
回〜４回で、０．５〜２５０ｍｇ、好ましくは５〜２５
０ｍｇの範囲内となろう。

【００２８】

【抗細菌アッセイ】抗細菌活性は、連続寒天希釈法によ
って評価することができる。この方法は、各フロピリジ
ン化合物の最小阻止濃度（ＭＩＣ）を、以下の通りに決
定する。

【００２９】１．微生物アッセイに用いた薬剤耐性菌株を、以下の表１にまとめ
た。同様の薬剤耐性特徴を有する別の菌株も使用するこ
とができる。前記菌株は、当業者に容易に入手すること
ができる。

【００３０】

【表１】

【００３１】２．保存培養物の調製黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕ
ｒｅｕｓ）０１Ａ１１０５、エンテロコッカス・ファエ
カリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉ
ｓ）０３Ａ１０６９、及び大腸菌（Ｅｓｈｅｒｉｃｈｉ
ａｃｏｌｉ）５１Ａ０２６６の各菌株を、トリプチカ
ーゼ大豆ブロス（ＴｒｙｐｔｉｃａｓｅＳｏｙＢｒｏ
ｔｈ；ＴＳＢ，ＤＩＦＣＯ）１０ｍｌを含む試験管中に
接種し、３７℃で２００ｒｐｍで一晩振盪して生長させ
る。ＴＳＢ及び５０％水性グリセロールで希釈すること
によって、培養物の細胞密度を、６００ｎｍ（光路＝１
ｃｍ）における光学密度が１．４であり、そして最終的
なグリセロール濃度が２０％であるように調節する。希
釈した培養物を、瓶当たり１ｍｌずつでクリオチューブ
（ｃｒｙｏｔｕｂｅ）に分注し、そして使用まで−８０
℃で貯蔵する。

【００３２】ＴＳＢ（１０ｍｌ）及び溶解ウマ血液
（０．５ｍｌ，ＮｉｐｐｏｎＢｉｏ−Ｓｕｐｐｌｙ
Ｃｅｎｔｅｒ）を含む試験管中に化膿連鎖球菌（Ｓｔｏ
ｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇｅｎｅｓ）０２Ｃ１
０６８菌株を接種し、そして３７℃で２４時間静置して
生長させた。このインキュベーションの後に、細胞を遠
心分離し、そして５０％水性グリセロール（４ｍｌ）と
脱繊維素ヒツジ血液（６ｍｌ，ＮｉｐｐｏｎＢｉｏ−
ＳｕｐｐｌｙＣｅｎｔｅｒ）との混合物中に再懸濁し
た。得られた細胞懸濁液を、瓶当たり１ｍｌずつでクリ
オチューブに分注し、そして使用まで−８０℃で貯蔵し
た。

【００３３】３．アッセイプレートの調製各貯蔵培養物（黄色ブドウ球菌及び大腸菌は２００μ
ｌ、並びにエンテロコッカス・ファエカリスは１ｍｌ）
を、ＭｕｅｌｌｅｒＨｉｎｔｏｎ培地（ＤＩＦＣＯ）
１００ｍｌに加え、混合し、そしてアッセイプレート中
に注ぐ。化膿連鎖球菌の貯蔵培養物（１ｍｌ）を、ＴＳ
Ｂ（２０ｍｌ）及び脱繊維素ウマ血液（１ｍｌ，Ｎｉｐ
ｐｏｎＢｉｏ−ＳｕｐｐｌｙＣｅｎｔｅｒ）を含む
試験管中に接種し、そして３７℃で２４時間静置してイ
ンキュベートする。インキュベート培養物（５ｍｌ）及
びヒツジ血液（５ｍｌ，ＮｉｐｐｏｎＢｉｏ−Ｓｕｐ
ｐｌｙＣｅｎｔｅｒ）をＭｕｅｌｌｅｒＨｉｎｔｏ
ｎ培地（１００ｍｌ）に加え、混合し、そしてアッセイ
プレート中に注いだ。

【００３４】４．抗細菌活性の検出紙製円盤（内径＝６ｍｍ，薄型，Ａｄｖａｎｔｅｃ）に
サンプル溶液を加え、そして乾燥する。前記円盤を前記
アッセイプレート上に配置し、そして３７℃で一晩イン
キュベートする。円盤周囲における生長阻害領域の大き
さを計測することによって活性を決定する。対照とし
て、バンコマイシン１μｇ及びテトラサイクリン１μｇ
の円盤を使用する。最小阻止濃度（ＭＩＣ）の決定に
は、前記と同じインキュベーション条件で連続寒天希釈
法を用いる。６５５ｎｍにおける光学密度を計測するこ
とによって細菌の生長を監視する。

【００３５】

【実施例】以下の実施例によって本発明を説明するが、
本発明は、これらの実施例における特定の細部事項に限
定されるものではないと理解されたい。

【００３６】

【実施例１】《クラドボトリウム・バリウム（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５７３２）の発酵によるフロピリジン化合物の
製造》〈クラドボトリウム・バリウム（ＦＥＲＭＢＰ−５７
３２）の発酵〉（Ａ）ＦＥＲＭＢＰ−５７３２の斜面培養物から、５
００ｍｌフラスコ２個中の培地−１（ポテトデキストロ
ースブロス２．４％，イースト抽出物０．５％，及び寒
天０．１％）１００ｍｌに、栄養細胞懸濁液を接種し
た。前記フラスコを回転式振盪機〔２６℃，振幅＝７ｃ
ｍ，２１０ｒｐｍ〕上で４日間振盪して、種培養物を得
た。フラスコ２個中の前記種培養物を用いて、それぞれ
５ｍｌずつ、培地−２（グルコース１％，グリセロール
６．６％，ＮＺアミンタイプＡ０．５％，硫酸アンモニ
ウム０．２％，脱脂大豆ミール０．５％，トマトペース
ト０．５％，クエン酸ナトリウム０．２％，及びｐＨ
７．０）１００ｍｌ及びそば粉３０ｇを含む５００ｍｌ
フラスコ３０個に接種した。２６℃で１４〜２１日間イ
ンキュベーションを実施した。（Ｂ）ＦＥＲＭＢＰ−５７３２の斜面培養物から、５
００ｍｌフラスコ中の培地−１（ポテトデキストロース
ブロス２．４％，イースト抽出物０．５％，及び寒天
０．１％）１００ｍｌに、栄養細胞懸濁液を接種した。
前記フラスコを回転式振盪機（２６℃，振幅＝７ｃｍ，
２１０ｒｐｍ）上で４日間振盪して、第１の種培養物を
得た。培地−１（１５０ｍｌ）を含む５００ｍｌフラス
コに、前記の第１の種培養物５ｍｌを接種した。そのフ
ラスコを、回転式振盪機（２６℃）上で３日間振盪し
て、第２の種培養物を得た。第２の種培養物を用いて、
滅菌培地（培地−３：グリセロール８．５％，大豆ミー
ル０．５％，トウモロコシ粉１．０％，及びコーン・ス
チープ・リカー粉０．２５％，及びｐＨ５．０）３リッ
トルを含む６リットル発酵器に接種した。そのブロス
を、１，７００ｒｐｍで攪拌及び３リットル／分で通気
しながら、２６℃で１２日間発酵した。

【００３７】〈抽出及び単離〉発酵ブロス（３リット
ル）をエタノール（３リットル）で抽出し、そしてろ過
した。ろ液を濃縮して５００ｍｌの水溶液とし、Ｄｉａ
ｉｏｎＨＰ２０（三菱化成）カラム上に与え、そして
３０％、５０％、及び１００％水性メタノール及びアセ
トンで溶離した。メタノール及びアセトンフラクション
を混合し、蒸発乾固し、５０％水性メタノールを用いて
再形成し、次にＯＤＳカラム上に与え、そして７０％水
性メタノールで溶離した。その活性フラクション（３．
１ｇ）をＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０カラム（１６０
ｍｌ，メタノール）上に与えた。活性を示すフラクショ
ンをプールし、そして留去した材料（１．７ｇ）を、Ｈ
ＰＬＣ〔ＹＭＣ−パックＯＤＳＡＭＳＨ−３４３−
５ＡＭカラム（２０×２５０ｍｍ，商品名Ｙａｍａｍｕ
ｒａとして市販されている），メタノール−水（１３：
７）で流速１０ｍｌ／分で４０分間溶離〕における多重
注入によって更に分離した。２４０ｎｍにおける紫外線
吸光度によって検出した。溶出ピークを収集して、以下
の化合物を得た：２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２
−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ
−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジ
ン−３−カルボアルデヒド（７００ｍｇ）；２Ｒ^*，３
Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−
２−イル］−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−
３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン
（８．４ｍｇ）；２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２
−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ
−３−ヒドロキシメチル−３−メチル−７−フェニルフ
ロ［３，２−ｃ］ピリジン（１８．３ｍｇ）；２Ｒ^*，
４ａＲ^*，９ａＳ^*−４ａ，９ａ−ジヒドロ−５−ヒドロ
キシ−８−フェニル−２，３，４ａ−トリメチル−２Ｈ
−ピラノ［２，３−ｂ］フロ［３，２−ｃ］ピリジン
（２．８ｍｇ）；化合物２（１０．２ｍｇ）；１Ｒ^*，
４ｂＳ^*−１，３，４ａ，４ｂ−テトラヒドロ−９−ヒ
ドロキシ−４ｂ−メチル−８−フェニル−４−（Ｅ）−
エチリデンピラノ［４，３−ｂ］フロ［２，３−ｂ］ピ
リジン（１６．２ｍｇ）；及び２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−３，３−ジ−（ヒ
ドロキシメチル）−４−ヒドロキシ−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン（３．３ｍｇ）。

【００３８】また、最後のＨＰＬＣ精製をアセトニトリ
ル−水（１：４）で実施すること以外は前記と殆ど同じ
精製工程を用いて、前記液体発酵ブロス（３リットル）
から、以下の２種類の化合物も単離された：２Ｒ^*，３
Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２，４−ジヒドロキシ−３−
［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−１−ブテニ
ル］−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン（ジア
ステレオマーＡ，５．６ｍｇ），及び２Ｒ^*，３Ｓ^*−
２，３−ジヒドロ−２，４−ジヒドロキシ−３−
［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−１−ブテニ
ル］−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジンのジア
ステレオマー（ジアステレオマーＢ，７．３ｍｇ）。

【００３９】〈ＨＰＬＣ分析〉前記フロピリジン化合物
を含むサンプルの分析ＨＰＬＣを、ＹＭＣパックＯＤＳ
−ＡＭＡＭ−３１０−３カラム（６．０×５０ｍｍ，
商品名Ｙａｍａｍｕｒａとして市販されている）を用い
て、アセトニトリル−水勾配系〔最初の２分間＝１０：
９０（体積／体積；ｖ／ｖ）から３５：６５，続く７．
５分間＝３５：６５から６０：４０，最後の３分間＝６
０：４０から１００：０〕で流速０．９ｍｌ／分で溶離
することによって実施した。抽出されたフロピリジン化
合物の保持時間は以下の通りであった：２Ｒ^*，３Ｒ^*−
２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イ
ル］−４−ヒドロキシ−３−メチル−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒド（６．
４分）；２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−ヒドロキシメチル−３−メチル−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン（７．９分）；２Ｒ^*，３Ｒ^*−
２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イ
ル］−４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−３−メ
チル−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン（７．
６分）；２Ｒ^*，４ａＲ^*，９ａＳ^*−４ａ，９ａ−ジヒ
ドロ−５−ヒドロキシ−８−フェニル−２，３，４ａ−
トリメチル−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｂ］フロ［３，２
−ｃ］ピリジン（８．２分）；化合物２（９．０分）；
１Ｒ^*，４ｂＳ^*−１，３，４ａ，４ｂ−テトラヒドロ−
９−ヒドロキシ−４ｂ−メチル−８−フェニル−４−
（Ｅ）−エチリデンピラノ［４，３−ｂ］フロ［２，３
−ｂ］ピリジン（５．１分）；２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−３，３−ジ−（ヒ
ドロキシメチル）−４−ヒドロキシ−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン（５．８分）；２Ｒ^*，３Ｓ^*−
２，３−ジヒドロ−２，４−ジヒドロキシ−３−
［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−１−ブテニ
ル］−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン（ジア
ステレオマーＡ）（４．４分）；及び２Ｒ^*，３Ｓ^*−
２，３−ジヒドロ−２，４−ジヒドロキシ−３−
［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−１−ブテニ
ル］−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン（ジア
ステレオマーＢ）（４．４分）。

【００４０】〈発酵培地から単離された化合物の特性〉
前記の抽出及び単離の欄に記載した化合物を、物理化学
的データに関して特徴付けした。本発明のフロピリジン
化合物に対するスペクトル及び物理化学的データは、以
下の装置によって得た：融点（無修正），ヤナコ（Ｙａ
ｎａｋｏ）マイクロ融点計測機；ＩＲ，シマズＩＲ−４
７０；ＵＶ，ＪＡＳＣＯＵｂｅｓｔ−３０；旋光度，
ＪＡＳＣＯＤＩＰ−３７０（５ｃｍセルを使用）；Ｎ
ＭＲ，ＪＥＯＬＪＮＭ−ＧＸ２７０（ＬＳＩ−１１／
７３ホストコンピューター，ＴＨ−５同調可能プロー
ブ，及びバージョン１．６ソフトウェアを装備）；及び
ＦＡＢ−ＭＳ，ＪＥＯＬＪＭＳ−７００。バイオトラ
ンスフォーム生成物に対するスペクトルデータは、以下
の装置によって得た：ＵＶ，シマズＵＶ１６０Ｕ分光光
度計；ＮＭＲ，ＶａｒｉａｎＵｎｉｔｙＰｌｕｓ
４００ＭＨｚ；及びＦＡＢ−ＭＳ，ＶＧＡｎａｌｙｔ
ｉｃａｌＺＡＢ２ＳＥ高フィールド質量分析計。特
に断らない限り、全てのＮＭＲスペクトルは、アセトン
−ｄ₆中で測定し、そしてピークの位置は、¹ＨＮＭＲ
に関して２．０ｐｐｍ（ｐａｒｔｓｐｅｒｍｉｌｌｉ
ｏｎ）、及び¹³ＣＮＭＲに関して３０．３ｐｐｍにお
けるアセトンピークを参照してｐｐｍで表す。ピークの
形状は、以下のように示す：ｓ＝一重線；ｄ＝二重線；
ｔ＝三重線；ｑ＝四重線；ｍ＝多重線；及びｂｒ＝幅広
（ｂｒｏａｄ）。全てのＦＡＢ−ＭＳスペクトルは、グ
リセロール−マトリクスを用いて計測した。前記化合物
の物理化学的特性及びスペクトルデータは、以下の通り
である。

【００４１】《２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン
−３−カルボアルデヒド》無色針状結晶；融点：１９８〜ｌ９９℃；分子式：Ｃ₁₉
Ｈ₁₉ＮＯ₃；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１０［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１０．１４２９（Ｃ₁₉Ｈ
₂₀ＮＯ₃に対する理論値，３１０．１４４４）；［ａ］_D ²⁴＋２１．２°（ｃ０．５２，ＭｅＯＨ）；ＵＶλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０９．０（２
４，０００），２３４．０（１９，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３０２５，１７２４，１
６４５，１５９３，１４４０，１４１３，１３７４，１
２８９，１２０１，１０６３，１０４９，１０１３，７
９２，６９６；¹ ＨＮＭＲ δ９．５７（ｓ，１Ｈ），７．７４
（ｓ，１Ｈ），７．４３（ｍ，２Ｈ），７．３９（ｍ，
２Ｈ），７．３６（ｍ，１Ｈ），５．７８（ｑ，Ｊ＝
６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｓ，１Ｈ），１．６１
（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），１．６０（ｓ，３
Ｈ），１．５３（ｓ，３Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ２０１．１５（ｄ），１３１．８１
（ｓ），１３０．７９（ｄ×２），１２９．９２（ｄ×
２），１２８．７７（ｄ），１２５．５０（ｄ），１０
７．８４（ｓ），５９．１７（ｓ），２０．６８
（ｑ），１３．５３（ｑ），１３．５２（ｑ）

【００４２】《２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−ヒドロキシメチル−３−メチル−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン》無色針状結晶；融点：２０７〜２０８℃；分子式：Ｃ₁₉
Ｈ₂₁ＮＯ₃；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１２［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１２．１５９５（Ｃ₁₉Ｈ
₂₂ＮＯ₃に対する理論値，３１２．１６０１）；［α］_D ²⁴＋５２．３°（ｃ０．０９，ＭｅＯＨ）；ＵＶλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０８．５（２
４，０００），２３３．０（１９，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３０３５，１５９４，１
４３１，１２９７，１２３５，１１９３，１０７０，１
０５０，９４５，７９１，６９８；¹ ＨＮＭＲ δ７．７８（ｓ，１Ｈ），７．４９
（ｍ，２Ｈ），７．３３（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｍ，
１Ｈ），５．５９（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．
８０（ｓ，１Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，
１Ｈ），３．６９（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），
１．５８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），１．５０
（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１３７．３１（ｓ），１３３．７１
（ｓ），１３０．５７（ｄ×２），１２９．２９（ｄ×
２），１２７．９５（ｄ），１２５．２９（ｄ），１１
１．７８（ｓ），９５．３１（ｄ），６７．２２
（ｔ），５０．４４（ｓ），２５．７４（ｑ），１３．
５３（ｑ），１３．３８（ｑ）

【００４３】《２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−ヒドロキシメチル−３−メチル−７−フェニルフロ
［３，２−ｃ］ピリジン》無色粉末；分子式：Ｃ₁₉Ｈ₂₁ＮＯ₃；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１２［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１２．１５９８（Ｃ₁₉Ｈ
₂₂ＮＯ₃に対する理論値，３１２．１６０１）；［α］_D ²⁴＋１５．４°（ｃ０．２６，ＭｅＯＨ）；ＵＶλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０６．５（２
２，０００），２４６．０（２１，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３９５，２９７５，１
６４７，１６１１，１４４４，１２１３，１０５５，７
８２，６９４；¹ ＨＮＭＲ δ７．５９（ｓ，１Ｈ），７．５７
（ｍ，２Ｈ），７．３５（ｍ，２Ｈ），７．２７（ｍ，
１Ｈ），５．５９（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．
２７（ｂｒｓ，１Ｈ），４．９０（ｓ，１Ｈ），３．６
６（ｓ，２Ｈ），１．６７（ｓ，３Ｈ），１．６５
（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．１７（ｓ，３
Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１６６．８０（ｓ），１６３．２７
（ｓ），１３５．８１（ｄ），１３４．７５（ｓ），１
３３．１０（ｓ），１２９．８４（ｄ×２），１２８．
９１（ｄ×２），１２８．５０（ｄ），１２４．２９
（ｄ），１１７．０５（ｓ），１１１．６２（ｓ），９
５．１５（ｄ），７０．０５（ｔ），５２．０４
（ｓ），１７．５４（ｑ），１４．３９（ｑ），１３．
６１（ｑ）

【００４４】《２Ｒ^*，４ａＲ^*，９ａＳ^*−４ａ，９ａ
−ジヒドロ−５−ヒドロキシ−８−フェニル−２，３，
４ａ−トリメチル−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｂ］フロ
［３，２−ｃ］ピリジン》無色針状結晶；融点：２４３〜２４４℃；分子式：Ｃ₁₉
Ｈ₁₉ＮＯ₃；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１０［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３１０．１４５６（Ｃ₁₉Ｈ
₂₀ＮＯ₃に対する理論値，３１０．１４４４）；［α］_D ²⁴−２２．７°（ｃ０．３３，ＭｅＯＨ）；ＵＶλ_max（ＭｅＯＨ）（ε）ｎｍ：２０７．０（２
８，０００），２４７．０（２７，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３４３５，２９４０，１
６５９，１６１７，１４２８，１２１５，１１５７，９
１１，８３８，７８１，６９３；¹ ＨＮＭＲ δ１０．５７（ｂｒｓ，１Ｈ），７．５
５（ｍ，２Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３５
（ｍ，２Ｈ），７．２５（ｍ，１Ｈ），５．９０（ｓ，
１Ｈ），５．７１（ｓ，１Ｈ），４．３５（ｑ，Ｊ＝
７．６Ｈｚ，１Ｈ），１．６２（ｓ，３Ｈ），１．５０
（ｓ，３Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３
Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１６４．６１（ｓ），１６１．２８
（ｓ），１３５．８７（ｄ），１３５．６１（ｓ），１
３４．８０（ｓ），１２９．７９（ｄ×２），１２８．
８４（ｄ×２），１２８．３１（ｄ），１２４．６７
（ｄ），１１６．８０（ｓ），１１２．７９（ｄ），１
１０．５０（ｓ），６８．１４（ｄ），４３．００
（ｓ），２３．６８（ｑ），１９．８９（ｑ），１９．
５０（ｑ）

【００４５】《１Ｒ^*，４ｂＳ^*−１，３，４ａ，４ｂ−
テトラヒドロ−９−ヒドロキシ−４ｂ−メチル−８−フ
ェニル−４−（Ｅ）−エチリデンピラノ［４，３−ｂ］
フロ［２，３−ｂ］ピリジン》無色針状結晶；融点：２３４〜２３５℃；分子式：Ｃ₁₉
Ｈ₁₉ＮＯ₄；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２６［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２６．１３９８（Ｃ₁₉Ｈ
₂₀ＮＯ₄に対する理論値，３２６．１３９３）；［α］_D ²⁴＋２０５．０°（ｃ０．１２，ＭｅＯＨ）；ＵＶλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０８．５（２
８，０００），２３５．０（２５，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３０５５，１６４５，１
５９７，１４４１，１４１４，１３７６，１１９８，１
０７８，９４７，７９４，６９７；¹ ＨＮＭＲ δ７．６６（ｓ，１Ｈ），７．５１
（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｍ，
１Ｈ），５．８６（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），４．
８１（ｓ，１Ｈ），４．７５（ｓ，１Ｈ），４．４４
（ｓ，２Ｈ），１．６１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３
Ｈ），１．４１（ｓ，３Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１４４．２３（ｄ），１３７．３４
（ｓ），１３２．２４（ｓ），１３０．４７（ｄ×
２），１２９．１９（ｄ×２），１２７．９４（ｄ），
１２４．５４（ｄ），１００．３９（ｄ），９２．２９
（ｄ），６４．１１（ｔ），５３．２１（ｓ），２２．
２５（ｑ），１３．５３（ｑ）

【００４６】《２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−
ブテン−２−イル］−３，３−ジ−（ヒドロキシメチ
ル）−４−ヒドロキシ−５−フェニルフロ［２，３−
ｂ］ピリジン》無色針状結晶；融点：２１４〜２１６℃；分子式：Ｃ₁₉
Ｈ₂₁ＮＯ₄；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２８［Ｍ＋
Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２８．１５３４
（Ｃ₁₉Ｈ₂₂ＮＯ₄に対する理論値，３２８．１５４
９）；［α］_D ²⁴＋４０．０°（ｃ０．０２，ＭｅＯＨ）；Ｕ
Ｖλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０７．５（１５，
０００），２３４．５（１３，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３０７３，１６４３，１
５９７，１４３６，１３７９，１１５６，１０７０，９
４４，７９６，６９７；¹ ＨＮＭＲ δ７．７３（ｓ，１Ｈ），７．４９
（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝
７．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，
１Ｈ），５．５４（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），５．
０５（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１
Ｈ），３．９４（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），３．５
９（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），３．５１（ｄ，Ｊ＝
７．３Ｈｚ，１Ｈ），１．５８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，
３Ｈ），１．５３（ｓ，３Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１６２．６１（ｓ），１４８．９０
（ｄ），１３７．８０（ｓ），１３３．９３（ｓ），１
３０．５４（ｄ×２），１２９．２０（ｄ×２），１２
７．７２（ｄ），１２４．３８（ｄ），９０．１５
（ｄ），６３．９４（ｔ），６１．９８（ｔ），５６．
３０（ｓ），１３．６１（ｑ），１３．５１（ｑ）

【００４７】《２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２，
４−ジヒドロキシ−３−［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２
−メチル−１−ブテニル］−７−フェニルフロ［３，２
−ｃ］ピリジン（ジアステレオマーＡ）》無色粉末；分子式：Ｃ₁₉Ｈ₂₁ＮＯ₄；ＬＲＦＡＢ−ＭＳ
ｍ／ｚ３２８［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ
／ｚ３２８．１５５９（Ｃ₁₉Ｈ₂₂ＮＯ₄に対する理論
値，３２８．１５５０）；［α］_D ²⁴−７．４０°（ｃ０．１１，ＭｅＯＨ）；Ｕ
Ｖλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０６．５（２３，
０００），２４５．０（２３，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３７５，１６４８，１
６１４，１４２８，１３１１，１１５４；¹ ＨＮＭＲ δ７．５５（ｍ，２Ｈ），７．５１
（ｓ，１Ｈ），７．３３（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｍ，
１Ｈ），５．９８（ｓ，１Ｈ），５．７７（ｓ，１
Ｈ），４．０８（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），１．６
２（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｓ，３Ｈ），１．１２
（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１６４．２９（ｓ），１６１．６９
（ｓ），１４３．２７（ｓ），１３５．６１（ｄ），１
３５．１６（ｓ），１２９．７２（ｄ×２），１２８．
９０（ｄ×３），１２８．２７（ｄ），１１７．２５
（ｓ），１１１．２３（ｄ），１１０．８０（ｓ），７
４．１９（ｄ），４９．７８（ｓ），２２．８６
（ｑ），２２．８６（ｑ），１２．９８（ｑ）

【００４８】《２Ｒ^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−２，
４−ジヒドロキシ−３−［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２
−メチル−１−ブテニル］−７−フェニルフロ［３，２
−ｃ］ピリジン（ジアステレオマーＢ）》無色粉末；分子式：Ｃ₁₉Ｈ₂₁ＮＯ₄；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２８［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ１２８．１５７０（Ｃ₁₉Ｈ
₂₂ＮＯ₄に対する理論値，３２８．１５５０）；［α］_D ²⁴＋２．１７°（ｃ０．１４，ＭｅＯＨ）；ＵＶλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０７．０（２
２，０００），２４５．５（２２，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３８４，１６４９，１
６０９，１４２７，１１５２，１０４７，８７４，６９
４；¹ ＨＮＭＲ δ７．５５（ｍ，２Ｈ），７．５４
（ｓ，１Ｈ），７．３３（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｍ，
１Ｈ），５．９９（ｓ，１Ｈ），５．７４（ｓ，１
Ｈ），４．０８（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），１．６
２（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．１２
（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１６４．４２（ｓ），１６１．８３
（ｓ），１４３．３１（ｓ），１３５．６８（ｄ），１
３５．１５（ｓ），１２９．７２（ｄ×２），１２８．
９１（ｄ×３），１２８．２８（ｄ），１１７．４０
（ｓ），１１１．４８（ｄ），１１０．９２（ｓ），７
４．２６（ｄ），４９．７０（ｓ），２２．８１
（ｑ），２２．８１（ｑ），１２．９４（ｑ）

【００４９】《化合物２》無色粉末；分子式：Ｃ₁₉Ｈ₁₉ＮＯ₂；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２９２［Ｍ−Ｈ］^-；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ２９２．１３１９（Ｃ₁₉Ｈ
₁₈ＮＯ₂に対する理論値，２９２．１３３８）；［α］_D ²⁴＋１３．３°（ｃ０．０６，ＭｅＯＨ）；ＵＶλ_max（ＭｅＯＨ）ｎｍ（ε）：２０６．０（２
１，０００），２４７．０（２２，０００）；ＩＲν_max（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３７８，２９６３，１
６４７，１６１４，１４５０，１４２７，１２２８，１
０４２，８２３，７７４，６９４；¹ ＨＮＭＲ δ７．５２（ｍ，２Ｈ），７．４７
（ｓ，１Ｈ），７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２４（ｍ，
１Ｈ），５．３６（ｂｒｓ，１Ｈ），３．１３（ｂｒ
ｓ，１Ｈ），２．７８（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），
１．６７（ｓ，３Ｈ），１．５８（ｓ，３Ｈ），１．１
８（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ δ１６５．０３（ｓ），１６２．５５
（ｓ），１５１．３８（ｓ），１３５．３８（ｄ），１
３０．２３（ｓ），１２９．７１（ｄ×２），１２８．
７９（ｄ×２），１２８．１５（ｄ），１２７．８１
（ｄ），１１４．３４（ｓ），１１１．０６（ｓ），１
０４．２８（ｓ），５８．３２（ｄ），５０．３０
（ｄ），２６．９７（ｑ），２０．９３（ｑ），１５．
２８（ｑ）

【００５０】

【実施例２】《化合物１（２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒ
ドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒ
ドロキシ−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−
ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒド）のバイオトラン
スフォーメーション》〈微生物〉カロネクトリア・デコラ（ＦＥＲＭＢＰ−
６１２４）、クンニンハメラ・エチヌラタ・バー・エレ
ガンス（ＦＥＲＭＢＰ−６１２６）、及び未同定細菌
（ＦＥＲＭＢＰ−６１２５）の培養物を、−８０℃で
冷凍した１３．３％グリセロール中の栄養菌糸（ＦＥＲ
ＭＢＰ−６１２５）又は胞子懸濁液（ＦＥＲＭＢＰ−
６１２４及びＦＥＲＭＢＰ−６１２６）として維持し
た。

【００５１】〈バイオトランスフォーメーション条件〉
バイオトランスフォーメーションスクリーニング実験
を、Ｒ．Ｖ．Ｓｍｉｔｈ及びＪ．Ｐ．Ｒｏｓａｚｚａ
（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６４，１７３７−１７５
９，１９７５）によって記載された培地〔脱イオン水
（１リットル）中に、グルコース（２０ｇ）、ＮａＣｌ
（５ｇ）、Ｋ₂ＨＰＯ₄（５ｇ）、イースト抽出物（５
ｇ）、及びダイズ粉（５ｇ）を含む〕中で実施した。こ
の混合物のｐＨを７．０に調節し、そして１２１℃で２
０分間オートクレーブ（高圧滅菌）した。冷凍グリセロ
ール保存物０．０５ｍｌを接種した培地２．５ｍｌを含
む１６×１２５ｍｍ試験管中でスクリーニングを実施し
た。接種の１日後に、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）中の２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン
−３−カルボアルデヒド（５ｍｇ／ｍｌ）の溶液０．０
５ｍｌを、最終ブロス濃度０．１ｍｇ／ｍｌとなるよう
に加えた。振盪（２２０ｒｐｍ）しながら２８℃で１〜
６日間インキュベートした。

【００５２】バイオコンバージョン生成物を単離するた
めに、ＦＥＲＭＢＰ−６１２４及びＦＥＲＭＢＰ−
６１２６培養物を増やして、エーレンマイヤーフラスコ
（１２５ｍｌ）又はフェルンバッハフラスコ（２８００
ｍｌ）に移した。エーレンマイヤーフラスコには、前記
培地２５ｍｌを含有させ、フェルンバッハフラスコには
前記培地２５０ｍｌを含有させた。同じ培地で２〜３日
間生長した段階の１０％予備形成接種物を、それぞれに
接種した。ＦＥＲＭＢＰ−６１２５の培養に、前記接
種物と、「Ｔ．Ｓ．Ｃｈｅｎら，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ
ｉｃｓ，４５，５７７−５８０，１９９２」に記載のバ
イオトランスフォーメーション培地とを、同じ割合で使
用した。接種の１日後に、２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒ
ドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒ
ドロキシ−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−
ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒドを、最終濃度０．
１ｍｇ／ｍｌとなるように培地に加え、そして３日間イ
ンキュベーションを続けた。

【００５３】〈アッセイ〉２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒ
ドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒ
ドロキシ−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−
ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒド及びそのバイオト
ランスフォーメーション生成物を、コントローラー（６
００）、オートサンプラー（７１７）、及びフォトダイ
オード配列検出器（９９６）を含むＷａｔｅｒｓＭｉ
ｌｌｅｎｎｉｕｍ系上のＨＰＬＣによって検出した。ブ
ロスサンプル（２．５ｍｌ）を、必要によりｐＨ６に調
節し、次に酢酸エチル（同体積量）で抽出した。有機層
を除去し、そして窒素を用いて蒸発乾固し、その後、そ
の固形物をメタノール１ｍｌ中で再形成した。サンプル
（２０μｌ）を、５μ・ＩｎｅｒｔｓｉｌＣ８カラム
（４．６×２５０ｍｍ）上に流し込み、そして２０ｍＭ
−ＫＨ₂ＰＯ₄（ｐＨ６）：アセトニトリル（６７：３
３）で、流速１ｍｌ／分で、実施時間３０分間で溶離し
た。溶出物は、２３３ｎｍにおけるＵＶ吸光度によって
監視した。

【００５４】〈バイオトランスフォーメーション生成物
の単離〉酢酸エチル（同体積量）で、バイオコンバージ
ョン発酵物からブロス（合計体積：１．６リットル〜
４．２リットル）を３回抽出した。ＨＰＬＣによって分
析したところ、前記ブロス中には生成物が、有意量で残
存していなかった。減圧下における回転蒸発によって前
記抽出物を乾固し、そして乾燥した抽出物をヘキサン１
０ｍｌで洗浄した。ヘキサンフラクションをデカント
し、アリコートを乾燥し、そしてＨＰＬＣ分析用にメタ
ノール中で再形成した。ヘキサンフラクション中に、所
望の生成物は有意な量で検出されなかった。得られた乾
燥抽出ペレットをＤＭＳＯ（１．０ｍｌ）中に溶解し
た。アセトニトリル及び水の階段状勾配による１０ｇ・
ＹＭＣ−ＸＱＳＦＡＱ１００固相抽出カートリッジから
の溶離によって、この材料の部分精製を実施した。所望
の材料を含むフラクションは、最初に溶媒をストリップ
し、次に酢酸エチルで３回再度抽出し、そして以下の変
形〔２０×２５０ｍｍ半調製５μ・Ｉｎｅｒｔｓｉｌ
Ｃ８カラム及び５０×２０ｍｍ１０μＣ８Ｉｎｅｒｔ
ｓｉｌガードカラム、並びに２０ｍＭ−ＫＨ₂ＰＯ₄（ｐ
Ｈ６）：アセトニトリル（比率＝７８：２２）の修正移
動相〕を加えた前記の系を用いるＨＰＬＣによって更に
精製した。所望のピークに相当するフラクションをプー
ルし、溶媒をストリップし、酢酸エチルで抽出し、そし
て乾燥して、最終生成物を得た。ＦＥＲＭＢＰ−６１
２４培養物４．２リットルから、２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３
−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２−［（Ｅ）−４−ヒド
ロキシ−２−ブテン−２−イル］−３−メチル−５−フ
ェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボアルデ
ヒド（７７．２ｍｇ）を単離した。ＦＥＲＭＢＰ−６
１２６培養物３．２リットルから、２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，
３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］
−４−ヒドロキシ−５−（４−ヒドロキシフェニル）−
３−メチルフロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボア
ルデヒド（８．１ｍｇ）を単離し、そしてＦＥＲＭＢ
Ｐ−６１２５培養物１．６リットルから、２Ｒ^*，３Ｓ^*
−２，３−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２−［（Ｅ）−
４−ヒドロキシ−２−ブテン−２−イル］−３−ヒドロ
キシメチル−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−
ｂ］ピリジン（３５．４ｍｇ）を単離した。

【００５５】〈バイオトランスフォーム化合物の特徴〉
前記バイオトランスフォーム化合物に対するスペクトル
及び物理化学的データは、前記の通りに得た。これらの
化合物の物理化学的特性及びスペクトルデータは、以下
の通りである。２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−４−
ヒドロキシ−２−［（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−ブテ
ン−２−イル］−３−メチル−５−フェニルフロ［２，
３−ｂ］ピリジン−３−カルボアルデヒド：無色粉末；分子式：Ｃ₁₉Ｈ₁₉ＮＯ₄；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２６［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２６．１３７６（Ｃ₁₉Ｈ
₂₀ＮＯ₄に対する理論値，３２６．１３９２）；ＵＶλ_max（ＥｔＯＨ）ｎｍ（ε）：２０８．０（３
３，４００），２３３．０（２４，２００）；¹ ＨＮＭＲ δ９．５５（ｓ，１Ｈ），７．６２
（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２
Ｈ），７．３２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２
２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．８６（ｔ，Ｊ＝
６Ｈｚ，１Ｈ），４．８８（ｓ，１Ｈ），４．１４
（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，２Ｈ），１．６１（ｓ，３Ｈ），
１．５７（ｓ，３Ｈ）；２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２−
ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−５−（４−ヒド
ロキシフェニル）−３−メチルフロ［２，３−ｂ］ピリ
ジン−３−カルボアルデヒド：無色粉末；分子式：Ｃ₁₉Ｈ₁₉ＮＯ₄；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２６［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２６．１３８０（Ｃ₁₉Ｈ
₂₀ＮＯ₄に対する理論値，３２６．１３９２）；ＵＶλ_max（ＥｔＯＨ）ｎｍ（ε）：２１１．０（１
７，２００），２４５．０（１１，８００）；¹ ＨＮＭＲ δ９．５７（ｓ，１Ｈ），７．６５
（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２
Ｈ），６．８３（ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），５．７
７（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｓ，１
Ｈ），１．６２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），１．５
９（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｓ，３Ｈ）；２Ｒ^*，３Ｓ^*
−２，３−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２−［（Ｅ）−
４−ヒドロキシ−２−ブテン−２−イル］−３−ヒドロ
キシメチル−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−
ｂ］ピリジン：無色粉末；分子式：Ｃ₁₉Ｈ₂₁ＮＯ₄；ＬＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２８［Ｍ＋Ｈ］⁺；ＨＲＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ３２８．１５３４（Ｃ₁₉Ｈ
₂₂ＮＯ₄に対する理論値，３２８．１５４９）；ＵＶλ_max（ＥｔＯＨ）ｎｍ（ε）：２１１．０（５
２，０００），２３４．０（４５，３００）；¹ ＨＮＭＲ δ７．８２（ｓ，１Ｈ），７．５３
（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝
７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，
１Ｈ），５．７２（ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，１Ｈ），４．８６
（ｓ，１Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，２Ｈ），
３．８０（ｓ，２Ｈ），１．５８（ｓ，３Ｈ），１．５
３（ｓ，３Ｈ）

【００５６】実施例で調製した化合物の化学構造を、以
下の表２にまとめた。

【化１４】

【００５７】

【表２】

【００５８】前記表２において、Ｐｈ．はフェニル基で
あり、（ａ）は２−ブテン−２−イル基であり、（ｂ）
はヒドロキシメチル基であり、（ｃ）は式：

【化１５】で表される基であり、（ｄ）は式：

【化１６】で表される基であり、（ｅ）は３−ヒドロキシ−２−メ
チル−１−ブテン−１−イル基であり、（ｆ）はｐ−ヒ
ドロキシフェニル基であり、そして（ｇ）は４−ヒドロ
キシ−２−ブテン−２−イル基である。

【００５９】《アッセイ》実施例１で調製した化合物
（２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−［（Ｅ）−２
−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−３−メチル−
５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボ
アルデヒド）を、前記のアッセイ法に従って試験した。
アッセイの結果を以下の表３にまとめた。

【００６０】

【表３】

【００６１】前記表３に示されているように、実施例１
の化合物（２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン
−３−カルボアルデヒド）は、種々の細菌に対して顕著
な抗細菌活性を有する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者杉浦朱美愛知県知多郡武豊町字五号地２ファイザー・グローバル・リサーチ・アンド・デベロップメント内 (72)発明者吉川展司愛知県知多郡武豊町字五号地２ファイザー・グローバル・リサーチ・アンド・デベロップメント内 (72)発明者ジョンウィンウォングアメリカ合衆国06333コネチカット州イースト・ライム市スプリング・ロック・ロード46 (72)発明者スーザンジェ−ン．トゥルースデルアメリカ合衆国02888ロード・アイランド州ウァーウィック市メットカーフ・ストリート40 Ｆターム(参考） 4C050 AA01 BB07 CC16 DD08 EE01 FF01 GG03 HH01 4C086 AA01 AA02 AA03 CB22 MA01 MA04 NA14 ZB35

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）：【化１】［式中、Ｘ¹及びＸ²は、炭素原子又は窒素原子であり；
Ｒ¹及びＲ²は、それぞれ独立して場合によりヒドロキシ
基で置換されていることのあるフェニル基であるが、但
し、Ｘ¹及びＸ²が同時に炭素原子又は窒素原子であるこ
とはなく、Ｘ¹が窒素原子である場合にはＲ¹が存在せ
ず、そしてＸ²が窒素原子である場合にはＲ²が存在しな
いものとし；Ｒ³は、メチル基又はヒドロキシメチル基
であり；Ｒ⁴は、ホルミル基、ヒドロキシメチル基、又
はヒドロキシＣ_3-6アルケニル基であり；そしてＲ⁵は、
ヒドロキシ基、Ｃ_3-6アルケニル基、又はヒドロキシＣ
_3-6アルケニル基であるか；あるいはＲ⁴及びＲ⁵は、そ
れらが結合するフロピリジン環中の炭素原子と一緒にな
って、式：【化２】で表される基、又は式：【化３】で表される基を形成することができるが、但し、Ｒ³が
メチル基であって、そしてＲ⁵が２−ブテン−２−イル
基である場合には、Ｘ²は窒素原子以外の基であるもの
とする］で表される化合物、又は薬剤学的に許容するこ
とのできるその塩。
【請求項２】Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²が窒素原子で
あり、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在せず、Ｒ³が
メチル基であり、Ｒ⁴及びＲ⁵が一緒になって式：【化４】で表される基を形成するか；Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²
が窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在
せず、Ｒ³及びＲ⁴がヒドロキシメチル基であり、そして
Ｒ⁵が２−ブテン−２−イル基であるか；Ｘ¹が炭素原子
であり、Ｘ²が窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であ
り、Ｒ²が存在せず、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴がホル
ミル基であり、そしてＲ⁵が４−ヒドロキシ−２−ブテ
ン−２−イル基であるか；Ｘ¹が炭素原子であり、Ｘ²が
窒素原子であり、Ｒ¹がフェニル基であり、Ｒ²が存在せ
ず、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴がヒドロキシメチル基で
あり、そしてＲ⁵が４−ヒドロキシ−２−ブテン−２−
イル基であるか；Ｘ¹が窒素原子であり、Ｘ²が炭素原子
であり、Ｒ¹が存在せず、Ｒ²がフェニル基であり、Ｒ³
がメチル基であり、Ｒ⁴がヒドロキシメチル基であり、
そしてＲ⁵が２−ブテン−２−イル基であるか；Ｘ¹が窒
素原子であり、Ｘ²が炭素原子であり、Ｒ¹が存在せず、
Ｒ²がフェニル基であり、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴及
びＲ⁵がそれらが結合する炭素原子と一緒になって式：【化５】で表される環を形成するか；又はＸ¹が窒素原子であ
り、Ｘ²が炭素原子であり、Ｒ¹が存在せず、Ｒ²がフェ
ニル基であり、Ｒ³がメチル基であり、Ｒ⁴が３−ヒドロ
キシ−２−メチル−１−ブテン−１−イル基であり、そ
してＲ⁵がヒドロキシ基である、請求項１に記載の化合
物。
【請求項３】２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−ヒドロキシメチル−３−メチル−７−フェニルフロ
［３，２−ｃ］ピリジン又はその塩；２Ｒ^*，４ａＲ^*，
９ａＳ^*−４ａ，９ａ−ジヒドロ−５−ヒドロキシ−８
−フェニル−２，３，４ａ−トリメチル−２Ｈ−ピラノ
［２，３−ｂ］フロ［３，２−ｃ］ピリジン又はその
塩；１Ｒ^*，４ｂＳ^*−１，３，４ａ，４ｂ−テトラヒド
ロ−９−ヒドロキシ−４ｂ−メチル−８−フェニル−４
−（Ｅ）−エチリデンピラノ［４，３−ｂ］フロ［２，
３−ｂ］ピリジン又はその塩；２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−３，３−ジ−（ヒ
ドロキシメチル）−４−ヒドロキシ−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン又はその塩；２Ｒ^*，３Ｓ^*−
２，３−ジヒドロ−２，４−ジヒドロキシ−３−
［（Ｅ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−１−ブテニ
ル］−７−フェニルフロ［３，２−ｃ］ピリジン又はそ
の塩；２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−４−ヒドロキ
シ−２−［（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−ブテン−２−
イル］−３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］
ピリジン−３−カルボアルデヒド又はその塩；及び２Ｒ
^*，３Ｓ^*−２，３−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２−
［（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−ブテン−２−イル］−
３−ヒドロキシメチル−３−メチル−５−フェニルフロ
［２，３−ｂ］ピリジン又はその塩から選択した、請求
項２に記載の化合物。
【請求項４】細菌によって生じる感染疾患の治療に有
効な量の２Ｒ^*，３Ｒ^*−２，３−ジヒドロ−２−
［（Ｅ）−２−ブテン−２−イル］−４−ヒドロキシ−
３−メチル−５−フェニルフロ［２，３−ｂ］ピリジン
−３−カルボアルデヒド又は薬剤学的に許容することの
できるその塩、及び薬剤学的に許容することのできる担
体を含む、前記疾患治療用の医薬組成物。