JP2003335652A - トランスグルタミナーゼ１活性化剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 脂肪酸モノグリセリドを主成分とするラ
メラベシクルを有効成分とするトランスグルタミナーゼ
１活性化剤。 【効果】 本発明の脂肪酸モノグリセリドを主成分とす
るラメラベシクルを含有する組成物は、組織のトランス
グルタミナーゼ１の局在を正常化し、活性化することに
よって皮膚疾患や皮膚性状等種々の組織における疾病や
異常を治療・改善することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、主に皮膚や腸管等
の上皮系組織や脳などに多く存在し、それらの組織にお
ける種々の疾患に関与しているトランスグルタミナーゼ
１の活性化剤及びこれを有効成分とするトランスグルタ
ミナーゼ１関連疾患改善剤に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】トラン
スグルタミナーゼ１は近年、皮膚、肝臓、腎臓、肺、脳
等の組織に発現が確認されている（T.hiiragi et.al.、
J,Biol.Chem、274、34148-34154、1999）。その変調は、こ
れらの組織の疾患に関与すると考えられている。特に、
皮膚の表皮ケラチノサイトに存在するものは、分化の過
程で細胞を含むタンパク質の膜状構造を構築する機能を
有する。本酵素の機能が失われると皮膚のバリア機能が
低下し、乾燥性皮膚疾患（魚鱗癬、乾癬、アトピー性皮
膚炎等）を発症すると考えられている（M.Huber et.a
l.、Science、267、525-528、1996）。

【０００３】皮膚に現れる疾患、例えば、紫外線による
炎症に対しては多くの抗炎症剤が、乾燥性皮膚疾患の治
療や改善には多くの保湿剤が、これまで用いられてき
た。また、皮膚性状の改善には、柔軟性、弾力性、くす
み、キメの配列の乱れ等に対して目的別にこれらの改善
剤が個別に用いられてきた。しかしながら、表皮が正常
に形成され、また角化が正常に起こればこれらの症状が
軽減すると考えられることから、表皮の形成過程に作用
して種々の皮膚疾患や皮膚性状を根本的に治療・改善す
るような表皮性状の治療・改善剤が要望されている。ま
た乾癬の治療剤として広く用いられるビタミンＤには、
ケラチノサイトに含まれるある種のトランスグルタミナ
ーゼを活性化することが推測されている（T.Kanekura e
t.al.、J.Invest.Dermatol.、111、634-639、1998）が、ト
ランスグルタミナーゼ１に対する明確な作用は不明であ
る。

【０００４】従って、トランスグルタミナーゼ１を活性
化する成分は、表皮における種々の症状を治療改善する
ことが可能であり、そのような作用を有する成分の開発
が望まれている。

【０００５】

【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは、
上記課題を解決するため鋭意研究を行った結果、脂肪酸
モノグリセリドを主成分とするラメラベシクルを皮膚に
塗布したり、経口摂取すれば、表皮のトランスグルタミ
ナーゼ１の局在を正常化し、活性化すること、また、そ
のとき肥厚、柔軟性、弾力性、くすみ等多くの皮膚性状
を改善することを見出し、本発明を完成した。

【０００６】すなわち、本発明は、脂肪酸モノグリセリ
ドを主成分とするラメラベシクルを有効成分とするトラ
ンスグルタミナーゼ１活性化剤及びトランスグルタミナ
ーゼ１関連疾患改善剤を提供するものである。

【０００７】

【発明の実施の形態】本発明の有効成分である脂肪酸モ
ノグリセリドを主成分とするラメラベシクルは保湿作用
を有すること（特許第２６０６７６１号）、及びこれと
ビタミンＡを併用するとしわ形成防止効果が得られるこ
と（特開２０００−２３９１４０）が知られている。し
かし、当該ラメラベシクルがトランスグルタミナーゼ１
活性化作用を有することは全く知られていない。

【０００８】本発明に用いるラメラベシクルの主成分で
ある脂肪酸モノグリセリドとしては、炭素数８〜１８の
飽和または不飽和脂肪酸のモノグリセリドが好ましい。
脂肪酸モノグリセリドの構成脂肪酸の具体例としては、
カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、
パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸等が挙げられ
る。これらのモノグリセリドは２種以上のものを組み合
わせて用いてもよい。ここで、主成分とはベシクルの構
成成分の５０重量％（以下単に％で示す）以上が脂肪酸
モノグリセリドであることをいい、特に７５％以上が脂
肪酸モノグリセリドであることが好ましい。

【０００９】また、このラメラベシクルの他の構成成分
としては、コレステロール、アルキルもしくはアルケニ
ルグリセリンエーテル等が挙げられる。コレステロール
の配合は、ラメラベシクルの安定性を向上させるため、
特に好ましい。これらの添加量は、合計で脂肪酸モノグ
リセリド１００重量部に対し、１〜１００重量部、特に
５〜２５重量部が好ましい。

【００１０】さらに、ラメラベシクルの構造は多重層構
造によって形成されるよりも一枚膜ラメラ構造であるこ
とが好ましい。多重層ラメラベシクルはCa²⁺存在下で形
成し、平均粒子経は数μｍと大きく、皮膚に浸透しにく
く、かつトランスグルタミナーゼ１活性化作用が発現し
にくい。一方、Ca²⁺を完全に除去して形成する一枚膜ラ
メラベシクルは平均粒子経が０．１μｍ以下と小さく、
皮膚に十分吸収され、優れたトランスグルタミナーゼ１
活性化作用を有する。一枚膜ラメラベシクルの粒子経は
０．００１〜１μｍに分布するが、特に０．０１〜０．
１μｍのものが好ましい。

【００１１】かかるベシクルの調製は脂肪酸モノグリセ
リド含有溶液を物理的に攪拌して分散せしめることによ
り行われる。このような方法としては、たとえば、脂肪
酸モノグリセリドまたはこれを含有する油相混合物をジ
クロロメタン、クロロホルム、アセトン等の有機溶媒に
溶解した後、回転容器中で溶媒を留去して脂質層を沈殿
させ、次いで水または適当な水溶液を添加し、混合する
ことにより、本発明に用いるラメラベシクルを調製する
ことができる。また別法として、脂肪酸モノグリセリド
またはこれを含有する油相混合物を過熱して溶融混合し
た後、同程度の温度に保持された水相を添加し、物理的
に攪拌して油相を水相に分散することによっても、本発
明に用いるラメラベシクルの分散液を調製することがで
きる。上記加熱温度としては、４５〜１００℃、更に４
５〜８０℃が好ましく、５０〜７０℃が特に好ましい。
ここで、物理的分散には、例えば超音波乳化装置、高圧
均一分散装置、ナノマイザー、ホモジナイザー、コロイ
ドミル等の微粒化装置を用いるのが好ましい。また、脂
肪酸モノグリセリド含有溶液としては、水溶液が望まし
く、その濃度は０．１〜２０％程度が好ましい。

【００１２】かくして得られる脂肪酸モノグリセリドを
主成分とするラメラベシクルは、後記実施例に示す如
く、優れたトランスグルタミナーゼ１活性化作用を有す
る。また、皮膚、特に表皮における肥厚改善、柔軟性改
善、弾力性改善、くすみ改善等の種々の皮膚症状改善作
用を有し、トランスグルタミナーゼ１関連疾患改善剤と
して有用である。本発明のトランスグルタミナーゼ１活
性化剤及びトランスグルタミナーゼ１関連疾患改善剤
は、経口摂取することもできるが、化粧品、医薬品、医
薬部外品に該当する皮膚外用剤とするのが好ましい。

【００１３】かかる皮膚外用剤にするには、前記ラメラ
ベシクルをそのまま使用してもよいが、本発明の効果を
妨げない範囲で公知の化粧料成分、例えば水、アルコー
ル類、油成分、界面活性剤、防腐剤、香料、色素、保湿
剤、増粘剤、水溶性高分子、酸化防止剤、キレート剤、
ｐＨ調整剤、発泡剤、（顔料、紫外線吸収・散乱剤、粉
体）ビタミン類、アミノ酸類、抗菌剤、植物抽出物、動
物由来成分、海藻抽出物、各種薬剤、添加剤等を配合す
ることができる。

【００１４】具体的には、油分としては、マカデミアナ
ッツ油、ヒマシ油、オリーブ油、カカオ油、椿油、ヤシ
油、木ロウ、ホホバ油、グレープシード油、アボガド油
等の植物油脂類；ミンク油、卵黄油等の動物油脂類；蜜
ロウ、鯨ロウ、ラノリン、カルナウバロウ、キャンデリ
ラロウ等のロウ類；流動パラフィン、スクワラン、マイ
クロクリスタリンワックス、セレシンワックス、パラフ
ィンワックス、ワセリン等の炭化水素類；ミリスチン
酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、リノー
ル酸、リノレン酸、ミリスチン酸、オレイン酸、イソス
テアリン酸等の天然および合成脂肪酸類；セタノール、
ステアリルアルコール、ヘキシルデカノール、オクチル
ドデカノール、ミリスチルアルコール、セチルアルコー
ル、フィトステロール等の天然および合成高級アルコー
ル類；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプ
ロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、オレイン酸オ
クチルドデシル、コレステロールオレエート等のエステ
ル類等を例示することができる。

【００１５】界面活性剤としては、ソルビタンアルキル
エーテル、モノラウリン酸ソルビタン、モノパルミチン
酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、トリオレ
イン酸ソルビタン、モノラウリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソル
ビタン、ポリエチレングリコールモノオレート、ポリエ
チレングリコールアルキルエーテル、脂肪酸イソプロパ
ノールアミド、マルチトールヒドロキシ脂肪酸エーテ
ル、アルキル化多糖、アルキルグルコシド、シュガーエ
ステル、ポリグリセリンモノステアレート、ポリグリセ
リンアルキルエーテル、ポリエチレングリコールモノス
テアレート、ソルビタンモノオレート、ポリエチレング
リコールモノステアレート、ポリオキシエチレンソルビ
タンモノオレート、ポリオキシエチレンセチルエーテ
ル、ポリオキシエチレンコレステリルエーテル、ポリオ
キシエチレン化ステロール、ポリオキシエチレン硬化ヒ
マシ油等のノニオン界面活性剤；ステアリン酸ナトリウ
ム、パルミチン酸カリウム、セチル硫酸ナトリウム、ラ
ウリルリン酸ナトリウム、パルミチン酸トリエタノール
アミン、パルミチン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウ
ム、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油マレイン酸、アシ
ルメチルタウリン等のアニオン界面活性剤；塩化ステア
リルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ステアリルト
リメチルアンモニウム、ラウリルアミンオキサイド等の
カチオン界面活性剤；塩酸アルキルアミノエチルグリシ
ン液、レシチン、酢酸ベタイン、アミドプロピルベタイ
ン等の両性界面活性剤等を例示することができる。

【００１６】防腐剤としては、安息香酸塩、サリチル酸
塩、ソルビン酸塩、デヒドロ酢酸塩、パラオキシ安息香
酸エステル、３，４，４’−トリクロロカルバニリド、
ヒノキチオール、レゾルシン、エタノール等を例示する
ことができる。

【００１７】保湿剤としては、グリセリン、エリスリト
ール、キシリトール、プロピレングリコール、１，３−
ブチレングリコール、ソルビトール、ポリグリセリン、
ポリエチレングリコール、１，２−ペンタンジオール等
の多価アルコール類；アミノ酸、乳酸ナトリウム、ピロ
リドンカルボン酸ナトリウム等のＮＭＦ成分；キシログ
ルカン、クインスシード、カラギーナン、ペクチン、デ
ルマタン硫酸、ケラタン硫酸、コンドロイチン、ローカ
ストビーンガム、ヒアルロン酸、ヘパラン硫酸、ヒアル
ロン酸ナトリウム、ムコ多糖類、コンドロイチン硫酸、
ジメチルポリシロキサン等のシリコーン類、ホエイ２、
乳酸菌培養ろ液等を例示することができる。

【００１８】増粘剤としては、アルギン酸ナトリウム、
キサンタンガム、硅酸アルミニウム、アラビアガム、カ
ルボキシメチルグアガム、グアガム、デキストラン、ト
ラガントガム、デンプン、キチン、キトサン、γ−グル
タミン酸等の天然高分子物質；セルロース、ヒドロキシ
プロピルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメ
チルセルロース、可溶性デンプン等の半合成高分子物
質；カルボキシビニルポリマー、ポリビニルアルコー
ル、ポリビニルピロリドン等を例示することができる。

【００１９】酸化防止剤としては、ジブチルヒドロキシ
トルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロ
ピル、アスコルビン酸等を、キレート剤としては、エデ
ト酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸塩、クエン
酸、酒石酸、グルコン酸等を、ｐＨ調整剤としては、水
酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、クエン酸、ホ
ウ酸、ホウ砂、リン酸水素カリウム等をそれぞれ例示す
ることができる。

【００２０】紫外線吸収・散乱剤としては、パラアミノ
安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収
剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収
剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収
剤、３−ベンジリデン−ｄ，１−カンファー、ウロカニ
ン酸、フェニル−５−メチルベンゾキサゾール、２−
（２’−ヒドロキシ−５’−メチルフェニルベンゾトリ
アゾール、４−メトキシ−４’−ｔ−ブチルジベンゾイ
ルメタン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノ
ン、オクチルジメチルパラアミノベンゾエート、エチル
ヘキシルパラメトキシサイナメート、酸化チタン、カオ
リン、タルク等を例示することができる。

【００２１】ビタミン類としては、アスコルビン酸類の
他に、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＢ₆塩酸
塩、ビタミンＢ₆トリパルミテート、ビタミンＢ₆ジオク
タノエート、ビタミンＢ₂及びその誘導体、ビタミンＢ
₁₂、ビタミンＢ₁₅及びその誘導体等のビタミンＢ類、α
−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェ
ロール、ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビタ
ミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ビ
タミンＦ、ビタミンＫ、ビタミンＰ、ビタミンＵ、カル
ニチン、フェルラ酸、γ−オリザノールおよびそれらの
誘導体等を例示することができる。

【００２２】アミノ酸類としては、グリシン、アラニ
ン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオ
ニン、フェニルアラニン、チロシン、アスパラギン、グ
ルタミン、タウリン、トリプトファン、プロリン、アス
パラギン酸、アルギニン、ヒスチジン、リジンおよびそ
れらの誘導体等を例示することができる。

【００２３】抗菌剤としては、安息香酸、サリチル酸、
ソルビン酸、パラオキシ安息香酸アルキルエステル、ヘ
キサクロロフェン等を例示することができる。

【００２４】植物抽出物としては、ギシギシ、クララ、
コウホネ、オレンジ、セージ、ノコギリソウ、ゼニアオ
イ、センブリ、タイム、トウキ、トウヒ、バーチ、スギ
ナ、ヘチマ、マロニエ、ユキノシタ、アルニカ、ユリ、
ヨモギ、シャクヤク、アロエ、クチナシ、サワラ、ブク
リョウ、サンシシ、オウゴン、甘草、カワラヨモギ、ク
ジン、ヨクイニン、ニンドウ、シャクヤク、ソウハク
ヒ、サンザシ、ボタンピ、キクカモク、ショウヨウブド
ウ等からの抽出物を例示することができる。

【００２５】海藻抽出物としては、褐藻、紅藻、緑藻、
藍藻等からの抽出液があり、具体的にはコンブ、マコン
ブ、ワカメ、ヒジキ、テングサ、ノリ、アオサ、ヒバマ
タ、オキナワモズク等からの抽出物を例示することがで
きる。

【００２６】各種薬剤としては、ニコチン酸アミド、ニ
コチン酸ベンジル、アラントイン、グリチルリチン酸
（塩）、グリチルレチン酸及びその誘導体、ビサボロー
ル、ユーカルプトーン、イノシトール、サイコサポニ
ン、ニンジンサポニン、ヘチマサポニン等のサポニン
類、パントテニルエチルエーテル、エチニルエストラジ
オール、トラネキサム酸、セファランチン等を例示する
ことができる。

【００２７】本発明の皮膚外用剤は、常法により製造す
ることができ、化粧水、乳液、保湿クリーム、クレンジ
ングクリーム、マッサージクリーム、洗顔クリーム、パ
ック、美容液等の基礎化粧品、シャンプーやリンス等の
頭髪用製品、入浴剤等の浴用化粧品、ファンデーション
等のメイクアップ化粧品、日焼け止め等の特殊化粧品
等、種々の形態とすることができる。前記ラメラベシク
ルの配合量は特に制限されないが、皮膚外用剤中に０．
０１〜１００％、特に０．１〜９０％が好ましい。

【００２８】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説
明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

【００２９】製造例１ 蒸留水１ｍｌに対し、最終濃度が１％（ｗ／ｖ）モノグ
リセリド（モノパルミチン：モノステアリン＝３０：６
０）、０．３％（ｗ／ｖ）モノステアリルグリセリンエ
ーテルおよび０．１％コレステロールとなるように各々
の脂質を秤量し、蒸留水中で６０℃下にて超音波処理
（Branson sonifer250、２０ＫＨｚ、５５Ｗ、１０分
間）を行うことによって一枚膜ラメラベシクルの製造を
行った。得られた一枚膜ラメラベシクル懸濁液を、発明
品１とした。得られた発明品１を顕微鏡下で目視し、ま
た、超微粒子粒度分布計（ＢＩ−９０、ＢＲＯＯＫＨＡ
Ｎ ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ）を用いてベシクルの直径を
測定した結果、平均粒子径は、０．１μｍであった。さ
らに、凍結割断法を用いて電子顕微鏡（ＪＥＭ−２００
０ＦＸII、ＪＥＯＬ）で調べた結果、発明品１のラメラ
ベシクルは一枚膜ラメラであることが確認できた。一
方、同様の操作を０．１％塩化カルシウム中にて行い、
多重層のラメラベシクルの製造を行い、得られた多重層
のラメラベシクル懸濁液を、発明品２とした。発明品１
と同様に平均粒子径と膜の状態を確認した結果、このベ
シクルの平均粒子径は、５μｍであり、発明品１と同様
に電子顕微鏡下で調べた結果、多重層ラメラベシクルで
あることが確認できた。

【００３０】製造例２ 水溶液１００ｍｌに対し、最終濃度が１％（ｗ／ｖ）モ
ノグリセリド（モノミリスチン：モノパルミチン＝５
０：５０）、０．３％（ｗ／ｖ）モノステアリルグリセ
リンエーテルおよび０．１％コレステロールとなるよう
に各々の脂質を秤量し、０．１％塩化カルシウム水溶液
中６０℃にてポリトロンホモジナイザー（Kinematica P
T10/35、１２０００ｒｐｍ、回転刃直径１．２ｃｍ、１
０分間）処理を行うことによって、多重層のラメラベシ
クルの製造を行った。製造例１と同様に平均粒子径と膜
の状態を確認した結果、このベシクルの平均粒子径は、
２μｍであり、多重層ラメラベシクルであることが確認
できた。

【００３１】試験例１（トランスグルタミナーゼ１活性
化に及ぼす影響の検討） 試料としては、製造例１で得られた発明品１及び２を用
いた。ヘアレスマウス（ｈｒ−１：Ｈｏｓ、雌、７週
令）に４０ｍＪ／ｃｍ²／日の紫外線を１日１回、４日
間照射した。各照射直後に、発明品１及び２を連日塗布
した（ｎ＝４〜６）。比較品としては５％グリセリン
（和光社）を用いた。実験終了日（照射４日目）に皮膚
を剥がし、一般的な方法に準して凍結切片標本スライド
を作製した。標本スライドを−２０℃の１００％アセト
ン（和光社）に５分間浸し固定した後、１０％ウマ血清
（ライフテック・オリエンタル社）に１５分間浸し、ブ
ロッキングを行った。別に作製したトランスグルタミナ
ーゼ１の活性化に必要な２箇所の限定分解部位の一方
（９３番目アルギニン残基と９４番目グリシン残基間）
を特異的に認識する抗体〔Ｒ１４１０Ｈ抗体、ハイブリ
ドーマＲ１４１０Ｈ（生工研菌寄第１７９０３号）によ
り産生（特開２００２−２０４００）〕に蛍光色素を標
識（FluoroLink^TMMab Cy3 labelling kit：アマシャム
社）させものを、室温で２時間反応させ免疫染色を行っ
た。無蛍光グリセリン（ベクター社）で封入し、共焦点
レーザー顕微鏡（バイオ・ラッド社）で解析した。さら
に、この染色輝度を画像解析（Ｗｉｎｒｏｏｆ、三谷商
事）によって定量化し、客観的に評価した。

【００３２】（結果）図１と図２に示したように紫外線
を照射した皮膚は、著明に肥厚した表皮に染色輝度の低
い組織像が見られた。これに対して発明品１を塗布した
皮膚は、紫外線を照射していない皮膚と同様に活性型ト
ランスグルタミナーゼ１を示す高輝度に染色された組織
像が検出された。また、染色領域も紫外線を照射してい
ない皮膚と同様に狭いことから、皮膚の肥厚も抑制され
た。発明品２を塗布した時も、活性型トランスグルタミ
ナーゼ１が検出されたが、発明品１よりは効果は低かっ
た。比較品のグリセリンでは、表皮上部の角質層が高輝
度を示したが、これ以外の表皮組織の輝度は低く、改善
効果はまったく見られなかった。

【００３３】さらに、皮膚の厚さをデジマジック・イン
ジケータ５４３（三豊）を用いて測定した結果、各々の
皮膚の厚さは、ＵＶ（−）；０．４２±０．０１ｍｍ、
ＵＶ（＋）；０．５３±０．０１ｍｍ、ＵＶ（＋）＋発
明品１；０．４９±０．０１ｍｍ、ＵＶ（＋）＋発明品
２；０．４８±０．０４ｍｍおよびＵＶ（＋）＋比較
品；０．５２±０．０４ｍｍであり、発明品１および発
明品２に皮膚肥厚の抑制効果が認められた。

【００３４】試験例２（皮膚柔軟性改善効果の検討） 試料としては、製造例１で得られた発明品１及び２を用
いた。ヘアレスマウス（ｈｒ−１：Ｈｏｓ、雌、７週
令）に４０ｍＪ／ｃｍ²／日の紫外線を１日１回、４日
間照射した。各照射直後に、上記製造例１の方法で得ら
れた発明品１及び２を連日塗布した（ｎ＝４〜６）。比
較品としては５％グリセリン（和光社）を用いた。塗布
後、皮膚をゴム手袋（クアラテック手袋：厚さ約０．１
４ｍｍ：井内盛栄堂）をした手で触り、皮膚の柔軟性を
表１の評価基準に従って経時的な変化を調べた。また、
実験終了日（照射４日目）に弾力性をCutometer SM575
（Ｃ＋Ｋ社）を用いて測定した。

【００３５】

【表１】

【００３６】（結果）表２に示したように、紫外線を照
射した皮膚は実験開始２日後から柔軟性が低下したが、
発明品１および２を塗布した皮膚は各々紫外線照射前の
柔軟性を維持していた。特に発明品１は実験開始３日後
まで紫外線照射前の柔軟性を維持しており、極めて高い
柔軟性改善効果が得られることがわかった。一方、比較
品のグリセリンでもある程度の柔軟性は保っていたが、
実験開始２日後には柔軟性の低下が認められ、発明品に
比較すると軽度であった。また、図３に示したように発
明品１には弾力性改善効果が見られた。

【００３７】

【表２】

【００３８】試験例３（皮膚のくすみ改善効果の検討） 試料としては製造例１で得られた発明品１及び２を用い
た。ヘアレスマウス（ｈｒ−１：Ｈｏｓ、雌、７週令）
に４０ｍＪ／ｃｍ²／日の紫外線を１日１回、４日間照
射した。各照射直後に、上記製造例１の方法で得られた
発明品１及び２を連日塗布した（ｎ＝４〜６）。実験終
了日（照射４日目）に以下の条件で皮膚の写真をとり、
JIS Z 8721規格に基づいた色の三属性表示のうち、明度
に関して、画像解析装置（WinROOF、三谷商事）を用い
て解析した。 撮影条件：蛍光灯（４０Ｗ並列２本）の光源から１８０
ｃｍの下の位置で、デジタルカメラPowerShot G2（キャ
ノン製）のＰプログラムＡＥモードで撮影した。

【００３９】（結果）図４に示したように、紫外線を照
射した皮膚は明度が著明に低下したが、発明品１または
発明品２を塗布した皮膚では改善効果が見られた。比較
品のグリセリンでは、改善効果はまったく見られず、皮
膚はくすんだ色調を示した。

【００４０】 実施例１ 下記組成の化粧水を製造した。 (1)パルミチン酸モノグリセリド 1.0（重量％） (2)コレステロール 0.1 (3)エタノール 2.0 (4)ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.05 (5)尿素 2.0 (6)パラオキシ安息香酸メチル 0.1 (7)香料 0.1 (8)蒸留水 全体で100となる量

【００４１】製法：(1)、(2)および(8)を用いて試験例
１と同様にラメラベシクルを製造し、これに(3)〜(7)を
添加して十分撹拌することにより化粧水を得た。

【００４２】 実施例２ 下記組成の乳液を製造した。 (1)ミリスチン酸モノグリセリド 1.0（重量％） (2)コレステロール 0.1 (3)ステアリン酸 2.0 (4)流動パラフィン 5.0 (5)スクワラン 2.0 (6)ソルビタンモノステアレート 1.5 (7)ポリオシキエチレン（２０） ソルビタンモノステアレート 2.0 (8)パラオキシ安息香酸ブチル 0.05 (9)グリセリン 2.0 (10)パラオキシ安息香酸メチル 0.1 (11)香料 0.15 (12)蒸留水 全体で100となる量

【００４３】製法：(1)、(2)および(12)を用いて試験例
１と同様にラメラベシクルを製造し、これに(9)、(10)
を添加して十分撹拌する。さらにこれに80℃で(3)〜(8)
を加えて乳化し、その後(11)を加えて室温まで冷却して
乳液を得た。

【００４４】 実施例３ 下記組成のクリームを製造した。 (1)ミリスチン酸モノグリセリド 1.0（重量％） (2)パルミチン酸モノグリセリド 1.0 (3)コレステロール 0.1 (4)塩化カルシウム 0.01 (5)流動パラフィン 23.0 (6)ワセリン 7.0 (7)セタノール 1.0 (8)ステアリン酸 2.0 (9)ミツロウ 2.0 (10)ソルビタンモノステアレート 3.5 (11)ポリオシキエチレン（２０） ソルビタンモノステアレート 2.5 (12)パラオキシ安息香酸ブチル 0.05 (13)ヒアルロン酸 0.1 (14)１，３−ブチレングリコール 1.0 (15)パラオキシ安息香酸メチル 0.1 (16)香料 0.15 (17)乳酸菌培養液 5.0 (18)蒸留水 全体で100となる量

【００４５】製法：(1)、(2)および(18)を用いて試験例
１と同様にラメラベシクルを製造し、これに(14)、(15)
および(17)を添加し、これに(13)を分散せしめて分散液
を得る。次いでこれを80℃で(5)〜(12)を加えて乳化
し、その後(16)を加えて室温まで冷却してクリームを得
た。

【００４６】 実施例４ 下記組成の美容液を製造した。 (1)パルミチン酸モノグリセリド 1.0（重量％） (2)ステアリン酸モノグリセリド 1.0 (3)コレステロール 0.1 (4)エタノール 6.0 (5)ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 1.0 (6)カルボキシビニルポリマー 0.3 (7)アスコルビン酸グリコシド 1.0 (8)グリセリン 5.0 (9)１，３−ブチレングリコール 10.0 (10)パラオキシ安息香酸メチル 0.2 (11)香料 0.1 (12)ヒアルロン酸 0.1 (13)蒸留水 全体で100となる量

【００４７】製法：(1)、(2)、(3)および(13)を用いて
試験例１と同様にラメラベシクルを製造し、これに(4)
〜(12)を添加して十分撹拌することにより美容液を得
た。

【００４８】以上の実施例１〜４で得られた化粧料を使
用することにより、皮膚肥厚、柔軟性、弾力性、くすみ
等の改善が見られた。

【００４９】

【発明の効果】本発明の脂肪酸モノグリセリドを主成分
とするラメラベシクルを含有する組成物は、組織のトラ
ンスグルタミナーゼ１の局在を正常化し、活性化するこ
とによって皮膚疾患や皮膚性状等種々の組織における疾
病や異常を治療・改善することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】紫外線照射した皮膚の表皮組織における活性型
トランスグルタミナーゼ１の発現に対する本発明ベシク
ルの効果を示す組織像である。

【図２】紫外線照射した皮膚表皮の肥厚（皮膚表面から
表皮基底膜までの距離）に対する本発明ベシクルの効果
を示す図である。

【図３】紫外線照射した皮膚の弾力性（弾性量）の低下
に対する本発明ベシクルの効果を示す図である。

【図４】紫外線照射した皮膚のくすみ（明度の低下）に
対する本発明ベシクルの効果を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ (72)発明者 花水 智子 東京都港区東新橋１丁目１番19号 株式会 社ヤクルト本社内 (72)発明者 千葉 勝由 東京都港区東新橋１丁目１番19号 株式会 社ヤクルト本社内 Ｆターム(参考） 4C083 AA032 AA082 AB102 AC012 AC022 AC072 AC122 AC242 AC421 AC422 AC432 AC442 AC482 AC682 AD042 AD332 AD492 AD642 CC04 CC05 DD23 DD31 EE12 4C206 AA01 AA02 DB47 MA01 MA04 NA14 ZA89

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 脂肪酸モノグリセリドを主成分とするラ
   メラベシクルを有効成分とするトランスグルタミナーゼ
   １活性化剤。
2. 【請求項２】 ベシクルが、一枚膜ラメラ構造を形成す
   るものである請求項１記載のトランスグルタミナーゼ１
   活性化剤。
3. 【請求項３】 脂肪酸モノグリセリドを主成分とするラ
   メラベシクルを有効成分とするトランスグルタミナーゼ
   １関連疾患改善剤。
4. 【請求項４】 ベシクルが、一枚膜ラメラ構造を形成す
   るものである請求項３記載のトランスグルタミナーゼ１
   関連疾患改善剤。
5. 【請求項５】 トランスグルタミナーゼ１関連疾患改善
   剤が、表皮性状改善剤である請求項３又は４記載のトラ
   ンスグルタミナーゼ１関連疾患改善剤。
6. 【請求項６】 形態が、皮膚外用剤である請求項３〜５
   のいずれか１項記載のトランスグルタミナーゼ１関連疾
   患改善剤。