JP2003171222A - 化粧料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】マリンコラーゲンと、ヘチマとアマチャヅルの
雑種細胞抽出物を含有することを特徴とする化粧料を提
供する。 【構成】本発明は、マリンコラーゲンと、ヘチマとアマ
チャヅルの雑種細胞抽出物を配合した化粧料に関するも
のである。これらは優れた老化防止効果を示した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、マリンコラーゲン
と、ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物を配合した
化粧料に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】皮膚の老化現象のひとつとして、シワの
発生や弾力性の低下があげられるが、これには真皮構成
成分であるコラーゲンの減少が大きく影響することが知
られている。そのため、コラーゲンを配合した数多くの
化粧料やコラーゲン生成促進物質を配合した化粧料が開
発されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかし、コラーゲンを
配合した従来の化粧料は一時的な保湿効果はあるもの
の、真皮中のコラーゲン量を根本的に改善するものでは
なかった。また、コラーゲン生成促進物質を配合した化
粧料の効果も十分ではなく、より効果のあるものが望ま
れていた。そこで、コラーゲン生成促進剤を組み合わせ
て化粧料に配合することにより、真皮コラーゲン量の減
少をより効果的に抑制し、シワの発生や弾力性の低下を
抑制できることを見出し、本発明に至ったものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、マリンコラー
ゲンと、ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物を配合
することを特徴とする化粧料である。本発明でいうマリ
ンコラーゲンは、魚（例えば、鮭、金目鯛、平目、鱈、
鰯、鮪等）の皮、浮袋等から得られるコラーゲンであ
る。最近ではマリンコラーゲンは保湿剤として使用され
るようになってきているが、従来多用されているウシ由
来のコラーゲンに比べ、マリンコラーゲンはほとんど研
究されていなかった。今回、マリンコラーゲンにコラー
ゲン生成促進効果があることを見出した。さらに、加水
分解による低分子のマリンコラーゲンにより高い効果の
あることを見出した。また本発明は、コハク化コラーゲ
ンやフタル化コラーゲン等の修飾したマリンコラーゲン
も含む。

【０００５】また、ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽
出物には、セリンプロテアーゼ阻害効果によってコラー
ゲンの分解を抑制し、肌の老化を防ぐことは知られてい
る（特開平１１−１２４３２５）が、コラーゲン生成促
進効果があることは全く知られていない。

【０００６】マリンコラーゲンにコラーゲン生成促進効
果のあることを見出し、さらに効果を高めるために研究
した結果、マリンコラーゲンと、ヘチマとアマチャヅル
の雑種細胞抽出物を併用することにより、特に顕著な効
果を発揮することを見出した。さらに、平均分子量２０
０〜１，５００の低分子マリンコラーゲンと、ヘチマと
アマチャヅルの雑種細胞抽出物を併用することにより、
より高い効果を発揮することを見出した。

【０００７】本発明で用いるマリンコラーゲンの抽出・
精製は、通常公知の方法を用いて行うことができる。具
体的には、例えば魚皮を粉砕した後に水洗し、酸或いは
アルカリ溶液による抽出、ペプシン、トリプシンやヒア
ロニダーゼ等の酵素により抽出し、塩析や透析の公知の
精製手段を施して、平均分子量３０万程度のコラーゲン
溶液を得ることができる。このコラーゲン溶液は、抽出
した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希
釈、濾過等の処理および活性炭等による脱色、脱臭処理
をして用いても良い。さらに、このコラーゲン溶液に通
常公知の方法でコラゲナーゼを加えることによって、分
子量２００〜１，５００程度のコラーゲンペプチドにす
ることが可能である。平均分子量に関わらず、こうして
得られたコラーゲン溶液にコハク酸やフタル酸等を反応
させて化学修飾した、コハク化コラーゲンやフタル化コ
ラーゲンなどのマリンコラーゲンを使用することもでき
る。

【０００８】こうして得られたマリンコラーゲンは、濃
縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物と
して用いても良い。

【０００９】上記のマリンコラーゲンは、単独で用いて
も良いし、２種以上の混合物として用いても良い。

【００１０】ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物は
特開平０１−４４２９７の方法により作出した雑種細胞
カルスを用いることができる。

【００１１】ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞のカルス
は特開平０１−４４２９７の方法により作出した雑種細
胞カルス（Ｆ３、Ｆ４、Ｆ５、Ｆ６）を単独で用いても
良いし、２種以上の混合物として用いても良い。

【００１２】ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞を抽出す
る溶媒としては、水以外に、例えば、低級アルコール類
（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プ
ロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液
状多価アルコール（グリセリン、プロピレングリコー
ル、１，３−ブチレングリコール等）、ケトン類（アセ
トン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エス
テル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘ
キサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類
（エチルエーテル、プロピルエーテル、テトラヒドロフ
ラン等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコー
ルおよび液状多価アルコールが良く、特に好ましくは、
水、エタノール、プロピレングリコールおよび１，３−
ブチレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二
種以上を混合して用いても良い。

【００１３】本発明に用いるマリンコラーゲンと、ヘチ
マとアマチャヅルの雑種細胞抽出物をあわせた配合量
は、乾固物に換算して本発明化粧料の全量中、０．００
００１〜１０重量％の配合が良い。０．００００１重量
％未満では十分な効果は望めない。１０重量％を越えて
配合した場合、効果の増強はなく不経済である。また、
添加の方法については、予め加えておいても、製造途中
に添加してもよく、作業性を考えて適宜選択すれば良
い。

【００１４】本発明の化粧料には、マリンコラーゲン
と、ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物の効果を損
なわない範囲内で、通常の化粧料に用いられる成分であ
る油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール
類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、pH調整剤、防
腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色
素、酸化防止剤、キレート剤等の成分を配合することが
できる。

【００１５】本発明の化粧料には、化粧水、乳液、クリ
ーム、美容液、パック、ゲル剤、洗浄剤、浴用剤、ファ
ンデーション、口紅、アイシャドウ等が挙げられる。

【００１６】

【実施例】以下に、本発明を実施例により詳しく説明す
る。ただし、本発明の技術的範囲がこれらの製造例等に
よって限定されるものではない。実施例に示す配合量の
部とは重量部を示し、％は重量％を示す。

【００１７】製造例１：鮭の皮由来のマリンコラーゲン 鮭の皮１ｋｇを用い、通常公知の方法により得られたコ
ラーゲン溶液を濃縮、希釈、濾過等の処理および活性炭
等による脱色、脱臭処理を施し、抽出した溶液を凍結乾
燥処理し、平均分子量３０万のコラーゲン粉末１４０ｇ
を得た。さらに、上記コラーゲン粉末に熱水を加えゼラ
チンに変性させ、通常公知の方法でコラゲナーゼを加え
て加水分解したコラーゲンペプチド溶液を凍結乾燥処理
し、低分子のコラーゲンペプチド粉末１３５ｇを得た。

【００１８】製造例２：ヘチマとアマチャヅルの雑種細
胞５０％エタノール抽出物 ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞（Ｆ５）１００ｇに
１，０００ｍＬの５０％エタノールを加え、常温で７日
間抽出した後、ろ過し、その濾液を濃縮し、乾固して、
ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞５０％エタノール抽出
物７ｇを得た。

【００１９】実施例 美容液 マリンコラーゲンと、ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞
抽出物の配合量を変化させることによって、表１〜２に
示す美容液１〜５、比較例１〜２をつくることができ
る。

【００２０】

【表１】

【００２１】

【表２】

【００２２】［製造方法］表１〜２とも、成分１〜７及
び１２と、成分８〜１１をそれぞれ均一に溶解し、両者
を混合して調整する。

【００２３】

【発明の効果】次に、本発明の効果を詳細に説明するた
め、実験例を挙げる。

【００２４】実験例１ コラーゲン生成促進作用 試験には、供試細胞としてヒト皮膚線維芽細胞（６歳男
子由来、継代数６）を用い、培地としてＥａｇｌｅ’ｓ
ＭＥＭを用いた。コラーゲン生成量の測定は、コラー
ゲンタンパク中への^３Ｈ−プロリンの取り込みを指標と
して行った。９６穴プレート（Ｆａｌｃｏｎ３０７２）
にヒト皮膚線維芽細胞を２５，０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅ
ｌｌ播種し、１０％ＦＣＳを含むＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥ
Ｍにて、３７度、５％ＣＯ_２条件下で４日間培養した。
この間に細胞は、コンフルエントの状態となった。次
に、本発明のマリンコラーゲン（製造例１；平均分子量
１００、平均分子量２００、平均分子量５００、平均分
子量１，５００、平均分子量３，０００、平均分子量３
０万）、ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物（製造
例２）、マリンコラーゲン（製造例１；平均分子量１０
０、平均分子量２００、平均分子量５００、平均分子量
１，５００、平均分子量３，０００、平均分子量３０
万）＋ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物（製造例
２）を各々最終濃度５μｇ／ｍｌとなるように調整した
無血清のＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭ（５０μｇ／ｍｌ Ｌ
−アスコルビン酸、５０μｇ／ｍｌ β−アミノプロピ
オニトリル、１８.５ＫＢｑ ^３Ｈ―プロリン含有）に
交換し、２４時間培養した。その後、直ちに各ｗｅｌｌ
にペプシン溶液を加えインキュベーションした後、^３Ｈ
―プロリン標識されたコラーゲンを抽出した。塩析によ
り精製した後、コラーゲンタンパク中の放射活性を液体
シンチレーションカウンター（Ｂｅｃｋｍａｎ ＬＳ５
８０１）により測定した。各試料とも５ｗｅｌｌずつ測
定し、生成量は平均値±標準偏差で示した。また、試料
無添加のものをコントロールとして用いた。

【００２５】

【表３】

【００２６】表３に示したように、本発明のマリンコラ
ーゲン＋ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物はヒト
皮膚線維芽細胞のコラーゲン生成を有意に促進した。単
なるマリンコラーゲン、ヘチマとアマチャヅルの雑種細
胞抽出物単独よりマリンコラーゲンと、ヘチマとアマチ
ャヅルの雑種細胞抽出物を併用することにより効果の向
上が見られた。また、マリンコラーゲンは、コラーゲン
生成促進効果のあるウシ由来のコラーゲンと比べ、単独
の場合でも、ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物を
併用した場合でもヒト皮膚線維芽細胞のコラーゲン生成
をより促進した。また、マリンコラーゲンと、ヘチマと
アマチャヅルの雑種細胞抽出物を併用した場合、平均分
子量３０万の高分子マリンコラーゲンに比べ、平均分子
量２００〜１，５００の低分子マリンコラーゲンは、ヒ
ト皮膚線維芽細胞のコラーゲン生成をより促進した。

【００２７】実験例２ 弾力改善試験１ 表１で示した実施例の美容液１と比較例１〜２の美容液
を用いて、弾力改善試験を実施した。試験は、健康な女
性３０人（３７〜４４才）を対象に３ヶ月行った。被験
者を１０人ずつ３群に分け、Ｉ群は美容液１、ＩＩ群は
比較例１、ＩＩＩ群は比較例２を使用することとした。
使用前に測定した肌の弾力をコントロールとし、使用後
の肌の弾力と比較した。肌の弾力は、キュートメーター
（Ｃｏｕｒａｇｅ＋Ｋｈａｚａｋａ社製）を用いて測定
した。

【００２８】肌の弾力の測定結果を表４に示した。この
表から美容液１は優れた弾力改善効果を有していること
が認められた。

【００２９】

【表４】

【００３０】表４に示すように、マリンコラーゲンと、
ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物を併用すること
によってマリンコラーゲン、ヘチマとアマチャヅルの雑
種細胞抽出物単独で配合したときより効果が高くなるこ
とが認められた。

【００３１】実験例３ 弾力改善試験２ 表２に示した実施例の美容液１〜５の美容液を用いて、
弾力改善試験を実施した。試験は、健康な女性５０人
（３４〜４２才）を対象に３ヶ月行った。被験者を１０
人ずつ５群にわけ、Ｉ群は美容液１、ＩＩ群は美容液
２、ＩＩＩ群は美容液３、ＩＶ群は美容液４、Ｖ群は美
容液５を使用することとした。試験は実験例２ 弾力改
善試験１と同様の方法で実施した。

【００３２】

【表５】

【００３３】表５に示すように、マリンコラーゲンと、
ヘチマとアマチャヅルの雑種細胞抽出物をあわせた配合
量が乾固物に換算して本発明化粧料の全量中、０．００
００１重量％以上になるとき、より効果が高くなること
が認められた。

【００３４】実験例４ 使用試験 表１に示した実施例の美容液１と比較例１〜２の美容液
を用いて、しわ、たるみ、肌の弾力について、アンケー
ト調査を行って老化防止効果を評価した。試験は、実験
例２と同様、健康な女性６０人（３５〜４５才）を対象
に３ヶ月行った。被験者を２０人ずつ３群に分け、Ｉ群
は美容液１、ＩＩ群は比較例１、ＩＩＩ群は比較例２を
使用することとした。アンケートの評価基準は、使用前
に比べて有効なものを「優」、やや有効なものを
「良」、わずかに有効なものを「可」、無効なものを
「不可」として評価した。アンケートの結果を表６に示
した。この表から実施例のマリンコラーゲンと、ヘチマ
とアマチャヅルの雑種細胞抽出物を併用する美容液１は
優れた老化防止効果を有していることが認められた。

【００３５】

【表６】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 山田 俊二 名古屋市西区鳥見町２−７ 日本メナード 化粧品株式会社総合研究所内 (72)発明者 石井 泉 名古屋市西区鳥見町２−７ 日本メナード 化粧品株式会社総合研究所内 (72)発明者 中田 悟 名古屋市西区鳥見町２−７ 日本メナード 化粧品株式会社総合研究所内 Ｆターム(参考） 4C083 AA021 AA071 AA111 AB032 AC092 AC102 AC112 AC122 AC342 AC432 AC482 AC532 BB51 CC02 DD23 DD27 EE06 EE12 EE13 FF01 FF05

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 マリンコラーゲンと、ヘチマとアマチ
   ャヅルの雑種細胞抽出物を含有することを特徴とする化
   粧料。
2. 【請求項２】 マリンコラーゲンの平均分子量が２０
   ０〜１，５００であることを特徴とする請求項１である
   化粧料。
3. 【請求項３】 マリンコラーゲンと、ヘチマとアマチ
   ャヅルの雑種細胞抽出物をあわせた配合量が、乾固物に
   換算して本発明化粧料の全量中、０．００００１〜１０
   重量％である請求項１〜２の化粧料。
4. 【請求項４】 化粧料が抗老化用化粧料である請求項
   １〜３である化粧料。