JP2003089612A - 植物病害の防除方法 - Google Patents
植物病害の防除方法Info
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- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
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- A01N63/22—Bacillus
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Abstract
(57)【要約】
【課題】茎葉処理では防除困難な土壌中に存在する細菌
による病害を防除すること、および植物の生長を促進す
る。 【解決手段】拮抗細菌であるBacillus subtilis KB-11
11株（微工研寄託第1738）または／およびBacillus su
btilis KB-1122株（微工研寄託第1739号）を植物種子ま
たは土壌に処理する。
による病害を防除すること、および植物の生長を促進す
る。 【解決手段】拮抗細菌であるBacillus subtilis KB-11
11株（微工研寄託第1738）または／およびBacillus su
btilis KB-1122株（微工研寄託第1739号）を植物種子ま
たは土壌に処理する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、植物に発生する病
害を拮抗作用により防除できる細菌を有効成分として、
土壌中に存在する細菌による植物病害の防除方法、及び
植物生長促進方法に関する。
害を拮抗作用により防除できる細菌を有効成分として、
土壌中に存在する細菌による植物病害の防除方法、及び
植物生長促進方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】作物に発生する土壌病害としては代表的
にPythium 菌、Rhizoctonia 菌、Fusarium菌による立枯
病、Ralstonia solanacearum菌による青枯病等が挙げら
れる。これらの病害の防除には種子消毒剤、土壌混和
剤、土壌灌注剤が有効であるとされ、これら薬剤を単独
あるいは組合せによる体系使用が行われている。しか
し、これら化学薬剤の防除効果は必ずしも高く安定して
いるとはいえず、また化学薬剤を土壌中に大量に投与す
ることによる土壌生物叢破壊や環境に与える影響が懸念
されている。生産現場ではこれら病害の対策に苦慮して
おり、環境への負荷が少ない農薬や防除方法の開発が望
まれている。また、微生物により植物の病害を抑制防除
するための拮抗作用を有する細菌が見だされている。例
えば、特許第２６７３７１８号公報にはバチルス ズブ
チルスs.p.KB-1111(Bacillus subtilis KB-1111) 株及
びバチルス ズブチルスs.p.KB-1122(Bacillus subtili
s KB-1122)株を野菜に散布することによって病害を防除
することが記載されている。
にPythium 菌、Rhizoctonia 菌、Fusarium菌による立枯
病、Ralstonia solanacearum菌による青枯病等が挙げら
れる。これらの病害の防除には種子消毒剤、土壌混和
剤、土壌灌注剤が有効であるとされ、これら薬剤を単独
あるいは組合せによる体系使用が行われている。しか
し、これら化学薬剤の防除効果は必ずしも高く安定して
いるとはいえず、また化学薬剤を土壌中に大量に投与す
ることによる土壌生物叢破壊や環境に与える影響が懸念
されている。生産現場ではこれら病害の対策に苦慮して
おり、環境への負荷が少ない農薬や防除方法の開発が望
まれている。また、微生物により植物の病害を抑制防除
するための拮抗作用を有する細菌が見だされている。例
えば、特許第２６７３７１８号公報にはバチルス ズブ
チルスs.p.KB-1111(Bacillus subtilis KB-1111) 株及
びバチルス ズブチルスs.p.KB-1122(Bacillus subtili
s KB-1122)株を野菜に散布することによって病害を防除
することが記載されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者等は、上記公
報に記載されたこれら細菌を野菜に散布することでは防
除困難な病害である土壌中に存在する細菌による病害に
対し防除効果の高い生物防除処理を探索を課題として研
究し、拮抗細菌を植物種子または土壌に処理する本発明
を完成するに至った。
報に記載されたこれら細菌を野菜に散布することでは防
除困難な病害である土壌中に存在する細菌による病害に
対し防除効果の高い生物防除処理を探索を課題として研
究し、拮抗細菌を植物種子または土壌に処理する本発明
を完成するに至った。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は、上記したよう
に、茎葉処理では防除困難な土壌病害を防除することを
課題として研究した結果、作物に発生する土壌病害の病
原菌に拮抗作用を有する細菌であるBacillus subtilis
KB-1111 株または／およびBacillus subtilisKB-1122
株を植物種子に処理、または土壌処理することにより茎
葉処理では得られない病害防除効果および植物生長促進
効果を見いだし本発明に到った。
に、茎葉処理では防除困難な土壌病害を防除することを
課題として研究した結果、作物に発生する土壌病害の病
原菌に拮抗作用を有する細菌であるBacillus subtilis
KB-1111 株または／およびBacillus subtilisKB-1122
株を植物種子に処理、または土壌処理することにより茎
葉処理では得られない病害防除効果および植物生長促進
効果を見いだし本発明に到った。
【０００５】
【発明の実施の形態】本発明に用いるKB-1111 菌および
KB-1122 菌の菌学的性質は下記の通りである。 b) 生育状況 (1) 肉汁寒天平板培養 コロニーは灰色かクリーム色、
光沢少々有り、円形で大きさは直径2 〜4mm 、集落隆起
形は中凹、周縁形は波状、粘性あり。 (2) 肉汁寒天斜面 培地表面に広がって増殖し、色は灰
白色で光沢少々あり、粘性あり、拡散性色素はなし。 (3) 肉汁液体培地 1 〜2 日目で培地表面に菌膜をつく
り全体に覆う。混濁なく、菌体は灰白色。 (4) ばれいしょ切片 拡散性で皺状の灰白色コロニー。 (5) 肉汁ゼラチン穿刺培養 20 ℃、30℃で培養すると液
化が始まる。その形地は層状。
KB-1122 菌の菌学的性質は下記の通りである。 b) 生育状況 (1) 肉汁寒天平板培養 コロニーは灰色かクリーム色、
光沢少々有り、円形で大きさは直径2 〜4mm 、集落隆起
形は中凹、周縁形は波状、粘性あり。 (2) 肉汁寒天斜面 培地表面に広がって増殖し、色は灰
白色で光沢少々あり、粘性あり、拡散性色素はなし。 (3) 肉汁液体培地 1 〜2 日目で培地表面に菌膜をつく
り全体に覆う。混濁なく、菌体は灰白色。 (4) ばれいしょ切片 拡散性で皺状の灰白色コロニー。 (5) 肉汁ゼラチン穿刺培養 20 ℃、30℃で培養すると液
化が始まる。その形地は層状。
【０００６】
b) 生育状況
(1) 肉汁寒天平板培養 コロニーは灰色かクリーム色、
光沢なく不正円形で大きさは直径2 〜6mm 、隆起形で周
縁形は波状 (2) 肉汁寒天斜面 培地表面に広がって増殖し、色は灰
白色かクリーム色 拡散性はなし (3) 肉汁液体培地 1 〜2 日目で培地表面に菌膜をつく
り全体に覆う。混濁なく、菌体は灰白色。 (4) ばれいしょ切片 拡散性で皺状の灰白色コロニー (5) 肉汁ゼラチン穿刺培養 20 ℃、30℃で培養すると液
化が始まる。その形は層状。
光沢なく不正円形で大きさは直径2 〜6mm 、隆起形で周
縁形は波状 (2) 肉汁寒天斜面 培地表面に広がって増殖し、色は灰
白色かクリーム色 拡散性はなし (3) 肉汁液体培地 1 〜2 日目で培地表面に菌膜をつく
り全体に覆う。混濁なく、菌体は灰白色。 (4) ばれいしょ切片 拡散性で皺状の灰白色コロニー (5) 肉汁ゼラチン穿刺培養 20 ℃、30℃で培養すると液
化が始まる。その形は層状。
【０００７】以上の菌学的性質からバージーズ マニュ
アル(Bergey's manual of systematic bacteriology)を
参照して同定を行った結果、2 菌株ともにバチルス ズ
ブチルス(Bacillus subtilis) に属する菌株と同定され
た。KB-1111 菌およびKB-1122 菌はそれぞれ微工研条寄
第1738号、微工研条寄第1739号として現通商産業省工業
技術院生命工学工業技術研究所（旧通商産業省工業技術
院微生物工業技術研究所）にに寄託されている。KB-111
1 菌およびKB-1122 菌の培養条件は、上記特許公報に詳
細に記載されているように発酵学の分野で公知の常法に
従って行うことができる。本発明の拮抗細菌が種子処理
または土壌処理して有効な病害としてはトマト、ナス、
ジャガイモの青枯病（Ralsotonia solanacearum)、ダイ
コン、ハクサイ、キャベツ、タマネギ、コンニャクの軟
腐病(Erwinia carotovora)、果樹の根頭癌腫病(Agrobac
terium tumefacience)、ジャガイモ、ダイコンのそうか
病(Streptomyces sp.)、野菜類、イネのPythium 菌、Rh
izoctonia 菌、Fusarium菌による苗立枯病、アブラナ科
野菜の根こぶ病(Plasmodiophora Brassicae)、ワタの苗
立枯病（Pythium 菌、Rhizoctonia 菌、Fusarium菌、Gl
oeosporium菌) 、トウモロコシの苗立枯病及び根腐病(P
ythium菌、Fusarium菌、Penicillium 菌) 、大豆の立枯
病(Fusarium 菌) 、麦類の立枯病(Gaeumanomyces grami
nis)等が挙げられる。これら病害は茎葉処理では防除困
難な病害であって、薬剤の種子処理または土壌処理によ
る防除が行われている。
アル(Bergey's manual of systematic bacteriology)を
参照して同定を行った結果、2 菌株ともにバチルス ズ
ブチルス(Bacillus subtilis) に属する菌株と同定され
た。KB-1111 菌およびKB-1122 菌はそれぞれ微工研条寄
第1738号、微工研条寄第1739号として現通商産業省工業
技術院生命工学工業技術研究所（旧通商産業省工業技術
院微生物工業技術研究所）にに寄託されている。KB-111
1 菌およびKB-1122 菌の培養条件は、上記特許公報に詳
細に記載されているように発酵学の分野で公知の常法に
従って行うことができる。本発明の拮抗細菌が種子処理
または土壌処理して有効な病害としてはトマト、ナス、
ジャガイモの青枯病（Ralsotonia solanacearum)、ダイ
コン、ハクサイ、キャベツ、タマネギ、コンニャクの軟
腐病(Erwinia carotovora)、果樹の根頭癌腫病(Agrobac
terium tumefacience)、ジャガイモ、ダイコンのそうか
病(Streptomyces sp.)、野菜類、イネのPythium 菌、Rh
izoctonia 菌、Fusarium菌による苗立枯病、アブラナ科
野菜の根こぶ病(Plasmodiophora Brassicae)、ワタの苗
立枯病（Pythium 菌、Rhizoctonia 菌、Fusarium菌、Gl
oeosporium菌) 、トウモロコシの苗立枯病及び根腐病(P
ythium菌、Fusarium菌、Penicillium 菌) 、大豆の立枯
病(Fusarium 菌) 、麦類の立枯病(Gaeumanomyces grami
nis)等が挙げられる。これら病害は茎葉処理では防除困
難な病害であって、薬剤の種子処理または土壌処理によ
る防除が行われている。
【０００８】本発明で抗菌細菌として用いるKB-1111 菌
およびKB-1122 菌は、これら細菌の懸濁液を植物種子に
これら菌を粉衣、吹き付け、塗沫または種子をこれらの
細菌の懸濁液に浸漬することにより、あるいはこれらの
細菌の懸濁液もしくはこれらの菌体を土壌に灌注混和す
ることにより行うことができる。細菌の懸濁液の適当な
濃度は上記した施用法により異なるが、例えばキュウリ
種子を浸漬処理する場合には、これらの細菌の濃度とし
て１×１０11〜１×１０2 ／ml、好ましくは１×１０10
〜１×１０5 ／mlで、５℃〜４０℃、好ましくは１５℃
〜３０℃で、１〜２日程度行う。例えばこれらの細菌懸
濁液もしくはこれら菌体を土壌に灌注混和する場合は、
これらの細菌を１×１０11〜１×１０2 ／ml、好ましく
は１×１０10〜１×１０3 ／ml含む懸濁液を１平方メー
トル当たり１０リットルから１００ml、好ましくは５リ
ットルから５００mlを育苗土壌に灌注混和する。またこ
の灌注混和土壌を覆土として用いてもよい。これらの実
施例において懸濁液は培養菌液でもよく、また培養菌液
より遠心分離などにより培地を除去し、菌体を水または
生理食塩水、緩衝液等に再懸濁したものでもよい。ま
た、菌体を直接または適当な分散媒を用いて凍結乾燥な
どによって安定に保存した細菌を再懸濁した液を用いる
こともできる。
およびKB-1122 菌は、これら細菌の懸濁液を植物種子に
これら菌を粉衣、吹き付け、塗沫または種子をこれらの
細菌の懸濁液に浸漬することにより、あるいはこれらの
細菌の懸濁液もしくはこれらの菌体を土壌に灌注混和す
ることにより行うことができる。細菌の懸濁液の適当な
濃度は上記した施用法により異なるが、例えばキュウリ
種子を浸漬処理する場合には、これらの細菌の濃度とし
て１×１０11〜１×１０2 ／ml、好ましくは１×１０10
〜１×１０5 ／mlで、５℃〜４０℃、好ましくは１５℃
〜３０℃で、１〜２日程度行う。例えばこれらの細菌懸
濁液もしくはこれら菌体を土壌に灌注混和する場合は、
これらの細菌を１×１０11〜１×１０2 ／ml、好ましく
は１×１０10〜１×１０3 ／ml含む懸濁液を１平方メー
トル当たり１０リットルから１００ml、好ましくは５リ
ットルから５００mlを育苗土壌に灌注混和する。またこ
の灌注混和土壌を覆土として用いてもよい。これらの実
施例において懸濁液は培養菌液でもよく、また培養菌液
より遠心分離などにより培地を除去し、菌体を水または
生理食塩水、緩衝液等に再懸濁したものでもよい。ま
た、菌体を直接または適当な分散媒を用いて凍結乾燥な
どによって安定に保存した細菌を再懸濁した液を用いる
こともできる。
【０００９】本発明は、上記の拮抗細菌をそのまま懸濁
液として使用してもよいが、例えば固体担体、液体担体
等の各種担体と混合し、必要な場合には添加剤、その他
の製剤助剤を加えて、水和剤、懸濁剤、粉剤、粒剤、糊
状剤、マイクロカプセル剤に調製した製剤として使用す
ることができる。製剤化の際に用いる固体担体として
は、例えばカオリンクレー、パイロフィライト、ベント
ナイト、モンモリロナイト、珪藻土、酸性白土、バーミ
キュライト、パーライトなどの鉱物質担体、硫酸アンモ
ニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿
素、塩化アンモニウム、炭酸カルシウムなどの無機塩を
用いることができる。また、小麦粉、フスマ、米ぬかな
どの有機物微粉末も用いることができる。液体担体とし
ては大豆油、綿実油などの植物油、グリセロール、エチ
レングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレン
グリコール、ポリプロピレングリコール等が挙げられ
る。
液として使用してもよいが、例えば固体担体、液体担体
等の各種担体と混合し、必要な場合には添加剤、その他
の製剤助剤を加えて、水和剤、懸濁剤、粉剤、粒剤、糊
状剤、マイクロカプセル剤に調製した製剤として使用す
ることができる。製剤化の際に用いる固体担体として
は、例えばカオリンクレー、パイロフィライト、ベント
ナイト、モンモリロナイト、珪藻土、酸性白土、バーミ
キュライト、パーライトなどの鉱物質担体、硫酸アンモ
ニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿
素、塩化アンモニウム、炭酸カルシウムなどの無機塩を
用いることができる。また、小麦粉、フスマ、米ぬかな
どの有機物微粉末も用いることができる。液体担体とし
ては大豆油、綿実油などの植物油、グリセロール、エチ
レングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレン
グリコール、ポリプロピレングリコール等が挙げられ
る。
【００１０】固着剤や分散剤等の製剤としては、カゼイ
ン、ゼラチン、澱粉、アラビアガム、アルギン酸、セル
ローズ誘導体などの多糖類、リグニン誘導体、糖類、植
物油、鉱物油、合成性水溶性高分子が挙げられる。その
他、製剤用補助剤として凍結防止剤、消泡剤、増粘剤等
を必要に応じて用いることができる。また、本発明の拮
抗細菌は糸状菌病害を対象とした種子消毒剤または散布
剤との混用が可能である。例えば、イプコナプール、メ
トコナゾール、ペフラゾエート、トリフルミゾール、プ
ロクロラズ、テブコナゾール、ジフェノコナゾール、フ
ルジオキソニル、ベノミル、チオファネートメチル、フ
サライド、トリシクラゾール、ピロキロン、カルプロパ
ミド、フェリムゾン、イソプロチオラン、EDDP、イミノ
クタジン酢酸塩、イミノクタジンアルベシル酸塩、カル
ボキシンなどが挙げられる。さらに、殺虫剤、殺線虫
剤、殺ダニ剤、殺菌剤、除草剤、植物成長調節剤、共力
剤等と、混合し、または混合せずに同時に用いることも
できる。本発明にかかわるKB-1111 菌およびKB-1122 菌
を製剤化するには、これらの細菌（湿重量として) を通
常約0.01〜95重量％含有させる。また製剤１g 当たり約
103 〜約1011のコロニー形成単位含有させることが好ま
しい。以下、製剤例、試験例を挙げて本発明を説明す
る。
ン、ゼラチン、澱粉、アラビアガム、アルギン酸、セル
ローズ誘導体などの多糖類、リグニン誘導体、糖類、植
物油、鉱物油、合成性水溶性高分子が挙げられる。その
他、製剤用補助剤として凍結防止剤、消泡剤、増粘剤等
を必要に応じて用いることができる。また、本発明の拮
抗細菌は糸状菌病害を対象とした種子消毒剤または散布
剤との混用が可能である。例えば、イプコナプール、メ
トコナゾール、ペフラゾエート、トリフルミゾール、プ
ロクロラズ、テブコナゾール、ジフェノコナゾール、フ
ルジオキソニル、ベノミル、チオファネートメチル、フ
サライド、トリシクラゾール、ピロキロン、カルプロパ
ミド、フェリムゾン、イソプロチオラン、EDDP、イミノ
クタジン酢酸塩、イミノクタジンアルベシル酸塩、カル
ボキシンなどが挙げられる。さらに、殺虫剤、殺線虫
剤、殺ダニ剤、殺菌剤、除草剤、植物成長調節剤、共力
剤等と、混合し、または混合せずに同時に用いることも
できる。本発明にかかわるKB-1111 菌およびKB-1122 菌
を製剤化するには、これらの細菌（湿重量として) を通
常約0.01〜95重量％含有させる。また製剤１g 当たり約
103 〜約1011のコロニー形成単位含有させることが好ま
しい。以下、製剤例、試験例を挙げて本発明を説明す
る。
【００１１】
【製剤例】拮抗細菌であるKB-1111 菌およびKB-1122 菌
を適当な液体培地で振とう培養後、遠心分離して培地成
分を除去し、カオリンクレーと水または適度な緩衝液を
加えて再懸濁し、リグニンスルホン酸５％の割合でよく
混合し凍結乾燥する。これを乳鉢中で穏やかに粉砕し、
水和剤形式の製剤を得る。。
を適当な液体培地で振とう培養後、遠心分離して培地成
分を除去し、カオリンクレーと水または適度な緩衝液を
加えて再懸濁し、リグニンスルホン酸５％の割合でよく
混合し凍結乾燥する。これを乳鉢中で穏やかに粉砕し、
水和剤形式の製剤を得る。。
【００１２】
【試験例１】（キュウリつる割病に対する防除効果）キ
ュウリつる割病（Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinu
m)の小分生子懸濁液を市販の園芸用粒状培土（商品名：
くみあい粒状培土，呉羽化学（株）製）に１ｇあたり２
×１０6 個の胞子を含むように汚染土壌を調製した。キ
ュウリの種子に上記製剤を種子重量の０．５％にあたる
量を粉衣し、汚染土壌に播種、覆土後、温室内で生育さ
せた。播種後２０日目に発病指数を次の基準で調査し
た。試験は１区につきキュウリ１５個体を供試し、平均
発病指数を求めた。結果を表１に示す。 ０：無発病、１：茎部に褐変が見られる、２：植物体に
萎縮、褐変、褪色が見られる、３：立枯状態、４：発芽
後枯死
ュウリつる割病（Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinu
m)の小分生子懸濁液を市販の園芸用粒状培土（商品名：
くみあい粒状培土，呉羽化学（株）製）に１ｇあたり２
×１０6 個の胞子を含むように汚染土壌を調製した。キ
ュウリの種子に上記製剤を種子重量の０．５％にあたる
量を粉衣し、汚染土壌に播種、覆土後、温室内で生育さ
せた。播種後２０日目に発病指数を次の基準で調査し
た。試験は１区につきキュウリ１５個体を供試し、平均
発病指数を求めた。結果を表１に示す。 ０：無発病、１：茎部に褐変が見られる、２：植物体に
萎縮、褐変、褪色が見られる、３：立枯状態、４：発芽
後枯死
【００１３】
【表１】
【００１４】
【試験例２】（トウモロコシの生長促進効果）トウモロ
コシの種子に上記製剤を種子重量の０．５％にあたる量
を粉衣し、畑土に適度な肥料を混和した土壌を詰めた１
／５０００ａポットに１粒ずつ播種した。その後、温室
内で生育させた。播種後３０日目に成長の状況を次の基
準で調査した。試験は１区につきトウモロコシ５個体を
供試し、平均指数を求めた。結果を表２に示す。 １：無処理区より２０％以上草丈が低く、葉も小さい、
２：無処理区より１０〜２０％草丈が低く、葉も小さ
い、３：無処理区と同等、４：無処理区より１０〜２０
％草丈が高く、葉もやや大きい、５：無処理区より２０
％以上草丈が高く、葉も大きい
コシの種子に上記製剤を種子重量の０．５％にあたる量
を粉衣し、畑土に適度な肥料を混和した土壌を詰めた１
／５０００ａポットに１粒ずつ播種した。その後、温室
内で生育させた。播種後３０日目に成長の状況を次の基
準で調査した。試験は１区につきトウモロコシ５個体を
供試し、平均指数を求めた。結果を表２に示す。 １：無処理区より２０％以上草丈が低く、葉も小さい、
２：無処理区より１０〜２０％草丈が低く、葉も小さ
い、３：無処理区と同等、４：無処理区より１０〜２０
％草丈が高く、葉もやや大きい、５：無処理区より２０
％以上草丈が高く、葉も大きい
【００１５】
【表２】
【００１６】
【発明の効果】本発明のKB-1111 株又は/ および KB-11
22株を有効成分として植物の種子処理または土壌処理に
用いることにより、土壌病害を防除でき、かつ植物の生
長を促進させることがきる。また、土壌生物叢破壊や環
境に与える影響が少ない。
22株を有効成分として植物の種子処理または土壌処理に
用いることにより、土壌病害を防除でき、かつ植物の生
長を促進させることがきる。また、土壌生物叢破壊や環
境に与える影響が少ない。
Claims (2)
- 【請求項１】バチルス ズブチルスs.p.KB-1111(Bacill
us subtilis KB-1111) 株（微工研条寄第1738号）及び
/ またはバチルス ズブチルスs.p.KB-1122(Bacillus s
ubtilis KB-1122)株（微工研条寄第1739号）を植物種子
または土壌に処理することを特徴とする植物病害の防除
方法。 - 【請求項２】バチルス ズブチルスs.p.KB-1111(Bacill
us subtilis KB-1111)株（微工研条寄第1738号）及び/
またはバチルス ズブチルスs.p.KB-1122(Bacilluus su
btilis KB-1122) 株（微工研条寄第1739号）を植物種子
または土壌に処理することを特徴とする植物生長促進方
法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
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