JP2002539132A

JP2002539132A - ２０（ｓ）−カンプトテシンの糖−共役体の製造法

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Publication number: JP2002539132A
Application number: JP2000604049A
Authority: JP
Inventors: レルヘン，ハンス−ゲオルク
Original assignee: Bayer AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 1999-03-06
Filing date: 2000-02-23
Publication date: 2002-11-19
Also published as: DE19909979A1; AU3159500A; EP1173454A1; WO2000053614A8; WO2000053614A1; CA2366632A1

Abstract

(57)【要約】本発明はＮ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル−メチレン］−Ｎ−メチルメタン−アミニウムヘキサフルオロホスフェート−Ｎ−オキシド（ＨＡＴＵ）のような特定のカップリング剤の存在下における構成要素（ＩＩ）と構成要素（Ｖ）の結合に決定的な段階がある、３−Ｏ−メチル化β−Ｌ−フコース構成要素がチオ尿素−修飾ペプチドスペーサーを介してカンプトテシン誘導体の２０ヒドロキシル基に結合している２０（Ｓ）−カンプトテシンの糖−共役体の製造法に関する。【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、３−Ｏ−メチル化β−Ｌ−フコース構成要素をチオ尿素−修飾ペプ
チドスペーサーを介してカンプトテシン誘導体の２０−ヒドロキシル基に結合さ
せる、２０（Ｓ）−カンプトテシンの糖共役体（ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ
ｓ）の製造法に関する。

【０００２】２０（Ｓ）−カンプトテシンは１９６６年にＷａｌｌｅｔａｌ．（Ｊ．Ａ
ｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８８，３８８８（１９６６））により単離された五環状
アルカロイドである。それは多数のｉｎｖｉｔｒｏ及びｉｎｖｉｖｏ試験に
おいて高い抗腫瘍活性の可能性を有している。しかしながら、不運なことに、毒
性及び溶解度の問題のために、臨床においては有望な可能性を実現することに成
功していない。

【０００３】Ｅ環ラクトンを開環してナトリウム塩を形成することにより、閉環形態とｐＨ
−依存性平衡にある水溶性化合物が得られた。この場合も、現在まで臨床的研究
は不成功であった。

【０００４】

【化１１】

【０００５】約２０年後、生物学的活性がトポイソメラーゼＩの酵素阻害に帰せられるべき
であることが見いだされた。それ以降、ｉｎｖｉｖｏでより適合性且つ活性で
あるカンプトテシン誘導体を見いだすための研究活動が再び増した。

【０００６】水−溶解度を向上させるために、Ａ環−及びＢ環−修飾カンプトテシン誘導体
の、ならびにイオン化可能基を有する２０−Ｏ−アシル誘導体の塩が記載されて
いる（Ｖｉｓｈｎｕｖａｊｊａｌａｅｔａｌ．ＵＳ４９４３５７９）。後
者のプロドラッグの概念は後に、修飾カンプトテシン誘導体にも適用された（Ｗ
ａｎｉｅｔａｌ．ＷＯ９６０２５４６）。しかしながら、記載された２０
−Ｏ−アシルプロドラッグはｉｎｖｉｖｏで非常に短い半減期を有し、非常に
急速に開裂して親構造を与える。

【０００７】ＷＯ９６３１５３２は糖−修飾静細胞剤（ｓｕｇａｒ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ
ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃｓ）及びそれらの製造法を記載しており、そこでは、例え
ば位置選択的に修飾された炭水化物構成単位を有する種々の細胞毒性化合物又は
静細胞的に活性な化合物をある種のスペーサーを介して結合させることにより、
向上した腫瘍選択性が達成される。

【０００８】ＷＯ９８５１７０３は式（Ｉ）：

【０００９】

【化１２】

【００１０】［式中、Ｒ¹はアミノ酸の立体的に要求性の（ｓｔｅｒｉｃａｌｌｙｄｅｍａｎｄｉｎ
ｇ）非極性側鎖であり、Ｒ²はアミノ酸の塩基性側鎖である］の２０（Ｓ）−カンプトテシンの特定の糖共役体及びそれらの製造を記載してい
る。

【００１１】驚くべきことに、そこに記載されているカンプトテシン誘導体の特定の構築、
すなわち立体的に要求性の非極性及び塩基性アミノ酸から成るチオ尿素−修飾ペ
プチドスペーサーを介して３−位−修飾β−Ｌ−フコース構成要素を２０（Ｓ）
−カンプトテシンの２０−ヒドロキシル基に結合させると、先行技術の化合物と
比較して、特に高い安定性、水中におけるより高い溶解度、より高い適合性、ｉ
ｎｖｉｔｒｏ及びｉｎｖｉｖｏの両方における種々の腫瘍に対するより大き
い治療的有効性ならびに、特に骨髄毒性を見ると、有意により高い腫瘍選択性を
有する格別に好ましい共役体が生ずることが見いだされた。

【００１２】ＷＯ９８５１７０３は、式（Ｉ）の化合物の製造のための２つの方法を記載
している。

【００１３】第１の方法に従うと、本発明に従う式（Ｉ）の糖共役体は、２０（Ｓ）−カン
プトテシンを式（ＩＩ）のペプチジル−カンプトテシンを介して２つの適したア
ミノ酸に順に結合させて式（ＩＩＩ）のペプチジル−カンプトテシンを得、続い
て式（ＩＶ）のイソチオシアナートを結合させる（直線的合成（ｌｉｎｅａｒ
ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ））：

【００１４】

【化１３】

【００１５】［式中、Ｒ¹及びＲ²は上記で定義した通りである］ことにより製造される。

【００１６】しかしながら、この方法は、用いられる出発材料が毒性のカンプトテシンであ
り、方法のさらに進んだ段階はそれぞれの場合に毒性的に安全ではないカンプト
テシン誘導体を与えるという欠点を有している。

【００１７】従って、ＷＯ９８５１７０３において、最初に式（ＩＶ）のイソチオシアナ
ートを場合により保護されていることができる末端塩基性アミノ酸に結合させて
式（Ｖ）の構成要素を得、この構成要素を次いで２０（Ｓ）−カンプトテシンと
非極性の立体的に要求性のアミノ酸により形成される式（ＩＩ）のアミノ酸共役
体の遊離のアミノ基と反応させる式（Ｉ）の化合物の製造のための第２の方法が
提案されている（収斂的合成（ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔｓｙｎｔｈｅｓｉｓ））
：

【００１８】

【化１４】

【００１９】この方法では、構成単位（Ｖ）の製造は毒性的に安全でないカンプトテシン誘
導体中間体を含んでおらず、そのおかげでこの方法は、安全性、及びそれに伴う
必要な安全手段の減少の理由で、第１の製造法より好ましい。さらに、収斂的合
成経路では、最も長い反応順が２段階から成り、それは３段階の直線的合成経路
と比較して１つの反応段階が省かれることを意味し、それは経済的利点を伴う。

【００２０】第２の方法における重要段階は構成要素（ＩＩ）及び（Ｖ）のカップリングで
ある。この目的のために、構成要素（Ｖ）のカルボキシル基を活性化し、次いで
構成要素（ＩＩ）の遊離のアミノ基と反応させる。ＷＯ９８５１７０３では、
例えばＪａｋｕｂｋｅ／Ｊｅｓｃｈｋｅｉｔ：Ａｍｉｎｏｓａｅｕｒｅｎ，Ｐｅ
ｐｔｉｄｅ，Ｐｒｏｔｅｉｎ［Ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｐ
ｒｏｔｅｉｎｓ］；ＶｅｒｌａｇＣｈｅｍｉｅ１９８２又はＴｅｔｒａｈｅ
ｄｒ．Ｌｅｔｔ．３４，６７０５（１９９３）に記載されているようなペプチド
の化学から既知のカップリング剤を用いてカルボキシル基を活性化する。挙げる
ことができる例は、無水Ｎ−カルボン酸、酸塩化物又は混合無水物、カルボジイ
ミド、例えばＮ，Ｎ’−ジエチル−、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピル−、Ｎ，Ｎ’−
ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’
−エチル−カルボジイミド塩酸塩、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ’−（２−モルホリ
ノエチル）−カルボジイミドメト−ｐ−トルエンスルホネートあるいはカルボ
ニル化合物、例えばカルボニルジイミダゾールあるいは１，２−オキサゾリウム
化合物、例えば２−エチル−５−フェニル−１，２−オキサゾリウム−３−サル
フェート又は２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチル−イソオキサゾリウム過塩素酸
塩あるいはアシルアミノ化合物、例えば２−エトキシ−１−エトキシカルボニル
−１，２−ジヒドロキノリンあるいはプロパンホスホン酸無水物、あるいはイソ
ブチルクロロホルムあるいはベンゾトリアゾリルオキシ−トリス−（ジメチルア
ミノ）−ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート、１−ヒドロキシベンゾト
リアゾールあるいはＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルとの付加物である。
さらに、アミノ酸成分をＬｅｕｃｈｓ’無水物の形態で用いることが提案されて
いる。

【００２１】しかしながら、ＷＯ９８５１７０３に記載されているカップリング剤を用い
ると、構成要素（ＩＩ）と（Ｖ）のカップリングは、特に基Ｒ¹及びＲ²の寸法が
増すと共に、あるとしても（ｉｆａｔａｌｌ）、中程度から低い収率でしか
行い得ないことが見いだされた。特にＲ²がアミノ酸ヒスチジンの側鎖を示す場
合、所望のカップリング反応を全体的に妨げるか、あるいは非常に低い収率を生
ずる多数の副反応（例えばエピマー化、活性化構成要素（Ｖ）の分子内チオリシ
ス、構成要素（ＩＩ）への他のアシル化など）が観察される。例えば、カップリ
ング剤Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸
塩（ＥＤＣｌ）を用いてカップリングを行うと、得られる収率は１０％未満であ
る。同様に、ベンゾトリアゾリルオキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホ
ニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）の存在下でカップリングを行うと
、カルボキシル成分（Ｖ）の有意な副反応があり、目的化合物（Ｉ）への転換は
非常に低くしかない。

【００２２】従って、本発明の目的は、式（Ｉ）の化合物の製造のための上記の収斂的方法
を改良すること、ならびに特に該方法をもっと広範囲の種々の基Ｒ¹及びＲ²の場
合に実行可能なものとすることであった。

【００２３】驚くべきことに、構成要素（ＩＩ）と（Ｖ）をカップリングさせる段階のため
にある種のカップリング剤を用いると、すべての通常のアミノ酸を用いて上記の
第２の製造法を行い、中程度から高い収率が得られ得ることが見いだされた。

【００２４】従って、本発明は、式（ＩＶ）

【００２５】

【化１５】

【００２６】のイソチオシアナートを場合により保護されていることができる末端塩基性アミ
ノ酸

【００２７】

【化１６】

【００２８】［式中、Ｒ²はアミノ酸の塩基性側鎖を示す］と反応させて式（Ｖ）

【００２９】

【化１７】

【００３０】［式中、Ｒ²は上記で定義した通りである］のアミノ酸共役体を得、それを次いで式（ＩＩ）

【００３１】

【化１８】

【００３２】［式中、Ｒ¹はアミノ酸の立体的に要求性の非極性側鎖を示す］のアミノ酸共役体と反応させ、側鎖の保護基を除去し、適宜、化合物を適した塩
に変換する式（Ｉ）

【００３３】

【化１９】

【００３４】［式中、Ｒ¹及びＲ²は上記で定義した通りである］の化合物の製造法に関し、それは構成要素（ＩＩ）及び（Ｖ）のカップリングを
下記：

【００３５】

【化２０】

【００３６】の化合物より成る群から選ばれるカップリング剤の存在下で行うことを特徴とす
る。

【００３７】カップリング剤、Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ
［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル−メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウム
ヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド（ＨＡＴＵ）：

【００３８】

【化２１】

【００３９】の使用が特に好ましい。

【００４０】本発明に従うと、式（Ｉ）の化合物の製造のための上記の方法において、Ｒ¹
が最高で４個の炭素原子を有する分枝鎖状アルキル基を示し、Ｒ²が式−（ＣＨ₂ ）_n−Ｒ³の基を示し、ここでＲ³は−ＮＨ₂、

【００４１】

【化２２】

【００４２】を示し、ｎは１〜４の数を示すアミノ酸を用いるのがさらに好ましい。

【００４３】ここで、Ｒ¹が式

【００４４】

【化２３】

【００４５】の分枝鎖状アルキル基を示し、Ｒ²が式

【００４６】

【化２４】

【００４７】の基を示すアミノ酸を用いるのが特に好ましい。

【００４８】本発明の最も好ましい態様に従うと、上記の製造法において、式（ＩＶ）のイ
ソチオシアナートを場合により保護されていることができるリシン又はヒスチジ
ン、好ましくは保護されていないヒスチジンと反応させ、カンプトテシンをバリ
ンと反応させる。得られる構成要素（Ｖ）及び（ＩＩ）をＮ−［（ジメチルアミ
ノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル−メチ
レン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド
（ＨＡＴＵ）の存在下でカップリングさせ、続いて適宜、保護基を除去し、本発
明に従う方法の最も好ましい態様に従い、式（Ｉ）の化合物として２０（Ｓ）−
２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［４−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル−オキシ
）−フェニルアミノチオカルボニル］−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−バリル｝−カンプ
トテシン又は２０（Ｓ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［４−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ
−フコピラノシル−オキシ）−フェニルアミノチオカルボニル］−Ｌ−リシル−
Ｌ−バリル｝−カンプトテシン、特に好ましくは２０（Ｓ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^α −［４−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル−オキシ）−フェニルアミ
ノチオカルボニル］−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−バリル｝−カンプトテシンを得る。

【００４９】構成要素（ＩＩ）を生成する第１アミノ酸のカンプトテシンへのカップリング
はジアステレオマーの混合物を生成させ得る。本発明に従う化合物の純粋なジア
ステレオマーは上記の方法により、例えば第１アミノ酸構成単位をカンプトテシ
ンに結合させ、保護基を除去してしまった後で適した方法でジアステレオマーを
分離することにより製造され得る。ジアステレオマー的に純粋な中間体（ＩＩ）
を用い、上記の経路によってジアステレオマー的に純粋な目的化合物（Ｉ）を製
造することが可能である。

【００５０】構成要素（ＩＩ）及び（Ｖ）をカップリングさせる時にもジアステレオマーの
混合物が生成し得る。これらのジアステレオマーは（Ｉ）の塩−非含有糖共役体
の段階に、カラムクロマトグラフィーにより、又は結晶化もしくは温浸法（ｄｉ
ｇｅｓｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ）により互いから分離され得る。メタノールで
飽和させること、又はジエチルエーテルもしくはメチル−ｔ−ブチルエーテルを
用いるジクロロメタン／メタノールからの沈殿が好ましい。

【００５１】本発明に従う上記の製造法のそれぞれの段階は、種々の圧力及び温度条件下で
、例えば０．５〜２バール、そして好ましくは大気圧において、及び／又は−３
０〜＋１００℃、そして好ましくは−１０〜＋８０℃において、適した溶媒、例
えばジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジクロ
ロメタン、クロロホルム、低級アルコール、アセトニトリル、ジオキサン、水中
で、又は上記の溶媒の混合物中で行われ得る。一般に室温における、又は氷冷し
ながらの、及び大気圧下におけるＤＭＦ、ジクロロメタン、ＴＨＦ、ジオキサン
／水又はＴＨＦ／ジクロロメタン中の反応が好ましい。

【００５２】出発材料として用いられる式（ＩＶ）のイソチオシアナートは、例えば、ＷＯ９８／５１７０３に記載されている方法に従って市販のｐ−ニトロフェニルβ
−Ｌ−フコピラノシドから、ヨウ化メチル及びジブチル錫オキシドを用いてサッ
カリド基（ｓａｃｃｈａｒｉｄｅｒａｄｉｃａｌ）の３−位におけるヒドロキ
シル基を選択的にエーテル化し、接触水素化によりニトロ基を還元し、続いてエ
チルジイソプロピルアミンのような塩基の存在下に、チオ炭酸誘導体、例えばチ
オホスゲン又はチオカルボニル−ビスイミダゾールと反応させることにより製造
され得る。

【００５３】カルボキシル基の活性化のために適したカップリング剤は、例えば、Ｊａｋｕ
ｂｋｅ／Ｊｅｓｃｈｋｅｉｔ：Ａｍｉｎｏｓａｅｕｒｅｎ，Ｐｅｐｔｉｄｅ，Ｐ
ｒｏｔｅｉｎ［Ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ
］；ＶｅｒｌａｇＣｈｅｍｉｅ１９８２又はＴｅｔｒａｈｅｄｒ．Ｌｅｔｔ
．３４，６７０５（１９９３）に記載されているようなペプチドの化学から既知
のカップリング剤である。例えば無水Ｎ−カルボン酸、酸塩化物又は混合無水物
が好ましい。

【００５４】カルボジイミド、例えばＮ，Ｎ’−ジエチル−、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピル−
、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）−Ｎ’−エチル−カルボジイミド塩酸塩、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ’−（
２−モルホリノエチル）−カルボジイミドメト−ｐ−トルエンスルホネートあ
るいはカルボニル化合物、例えばカルボニルジイミダゾールあるいは１，２−オ
キサゾリウム化合物、例えば２−エチル−５−フェニル−１，２−オキサゾリウ
ム−３−サルフェート又は２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチル−イソオキサゾリ
ウム過塩素酸塩あるいはアシルアミノ化合物、例えば２−エトキシ−１−エトキ
シカルボニル−１，２−ジヒドロキノリンあるいはプロパンホスホン酸無水物、
あるいはイソブチルクロロホルムあるいはベンゾトリアゾリルオキシ−トリス−
（ジメチルアミノ）−ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート、１−ヒドロ
キシベンゾトリアゾールあるいはＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルと付加
物を形成することによってもカルボキシル基を活性化することができる。

【００５５】さらに、アミノ酸成分をＬｅｕｃｈｓ’無水物の形態で用いることもできる。
この型のアミノ酸活性化は、２０（Ｓ）−カンプトテシンをアミノ酸成分でアシ
ル化する場合に好ましい。

【００５６】上記の通り、構成要素（ＩＩ）及び（Ｖ）のカップリングは、以下の化合物：

【００５７】

【化２５】

【００５８】より成る群から選ばれる特定のカップリング剤を必要とする。

【００５９】特に好ましくは、ここで用いられるカップリング剤はＮ−［（ジメチルアミノ
）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル−メチレ
ン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド（
ＨＡＴＵ）：

【００６０】

【化２６】

【００６１】である。

【００６２】これらの特定のカップリング剤は商業的に入手可能である。例えば、ＨＡＴＵ
はＰｅｒｓｅｐｔｉｖｅＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＧｍｂＨ，Ｗｉｅｓｂａｄｅ
ｎ，Ｇｅｒｍａｎｙから入手可能である。

【００６３】本発明に従う製造法のそれぞれの段階で用いるために適した塩基は、例えばト
リエチルアミン、エチル−ジイソプロピルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチル
アミノピリジン又はそのような段階で通常用いられる他の塩基である。

【００６４】アミノ酸の第３の官能基のための適した保護基は、ペプチドの化学から既知の
、例えばウレタン、アルキル、アシル、エステル又はアミド型の保護基である。

【００６５】本発明の範囲内で、アミノ保護基はペプチドの化学で通常用いられるアミノ保
護基である。

【００６６】これらには好ましくは：ベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベン
ジルオキシカルボニル、３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、２，４
−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニ
ル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンジルオキシカルボニ
ル、２−ニトロ−４，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、メトキシカル
ボニル、エトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、アリ
ルオキシカルボニル、ビニルオキシカルボニル、３，４，５−トリメトキシベン
ジルオキシカルボニル、フタロイル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニ
ル、２，２，２−トリクロロ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、メンチルオキシ
カルボニル、４−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−９−メトキシカ
ルボニル（Ｆｍｏｃ）、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、２−
クロロアセチル、２−ブロモアセチル、２，２，２−トリフルオロアセチル、２
，２，２−トリクロロアセチル、ベンゾイル、ベンジル、４−クロロベンゾイル
、４−ブロモベンゾイル、４−ニトロベンゾイル、フタルイミド、イソバレロイ
ル又はベンジルオキシメチレン、４−ニトロベンジル、２，４−ジニトロベンジ
ル、４−ニトロフェニル又は２−ニトロフェニルスルフェニルが含まれる。Ｆｍ
ｏｃ基及びＢｏｃ基が特に好ましい。

【００６７】対応する反応段階における保護基の除去は、例えば、酸もしくは塩基の作用に
より、水素化分解的に又は他の還元的方法により行われ得る。

【００６８】出発材料として用いられるカンプトテシン構成単位は、２０（Ｒ）−又は２０
（Ｓ）−立体配置であるいはこれらの２つの立体異性体の混合物として存在し得
る。２０（Ｓ）−立体配置が好ましい。

【００６９】本発明に従う方法で用いられるアミノ酸は、Ｌ−又はＤ−立体配置であるいは
またＤ−及びＬ−型の混合物として存在し得る。

【００７０】本発明に従うと、「アミノ酸」という用語は特に天然に存在するα−アミノ酸
を示すが、さらにそれらの同族体、異性体及び誘導体を含む。挙げることができ
る異性体の例はエナンチオマーである。誘導体は例えば保護基を保有するアミノ
酸である。

【００７１】「立体的に要求性の」側鎖を有するアミノ酸は、その側鎖がβ−又はγ−位に
おいて分枝しているアミノ酸を意味すると理解されるべきであり；挙げることが
できる例はバリン及びイソロイシン又はロイシンである。

【００７２】非極性側鎖を有するアミノ酸の典型的な例は：アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン、フェ
ニルアラニン、メチオニンである。

【００７３】塩基性側鎖を有するアミノ酸の典型的な例は：リシン、アルギニン、ヒスチジン、オルニチン、ジアミノ酪酸である。

【００７４】本発明に従う化合物は好ましくはそれらの塩の形態で存在する。ここでは一般
に有機もしくは無機酸との塩を挙げることができる。これらの塩は遊離の式（Ｉ
）の化合物を有機もしくは無機酸と反応させることにより製造され得る。本発明
に従うと、ここで好ましい酸はハロゲン化水素酸、例えば塩酸及び臭化水素酸、
特に塩酸、さらにリン酸、硝酸、硫酸、一−及び二官能基性カルボン酸及びヒド
ロキシカルボン酸、例えば酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、マロン酸、シ
ュウ酸、グルコン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、サリチル酸、ソ
ルビン酸及び乳酸、ならびに又スルホン酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸、１
，５−ナフタレンジスルホン酸又はカンファースルホン酸である。

【００７５】下記において、非制限的な実施例及び比較実施例によって本発明を例示する。

【００７６】

【実施例】

下記の実施例において、他にことわらない限りすべての量は重量パーセントに
基づく。１．構成要素（Ｖ）の製造１ａ）ｐ−アミノフェニル−３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド：

【００７７】

【化２７】

【００７８】３００ｍｌの無水メタノール中の６ｇ（２１ミリモル）のｐ−ニトロフェニル
−β−Ｌ−フコピラノシドを７．８４ｇ（３１．５ミリモル）のジブチル錫オキ
シドで処理し、還流において２時間加熱する。次いで混合物を濃縮し、残留物を
乾燥し、次いで３００ｍｌのＤＭＦ中に取り上げる。１５．７ｍｌのヨウ化メチ
ルを加え、次いで混合物を７０℃で４０時間撹拌する。溶媒を減圧下で除去し、
残留物を３００ｍｌのジクロロメタン中に取り上げる。懸濁液を濾過し、残る溶
液を再濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール
９９：１）にかける。濃縮は３．８２ｇ（８３％）の目的生成物を与える。

【００７９】この方法で得られるｐ−ニトロフェニル−３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラ
ノシドの３．８１ｇ（１２．７３ミリモル）をメタノール中に溶解し、パラジウ
ム−オン−カーボン（１０％）の添加の後、水素の雰囲気中で、わずかに過圧に
おいて水素化する。触媒を濾過し、エーテルを用いて生成物を沈殿させ、３ｇ（
８８％）の目的生成物を得る。［ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノール９：１Ｒ_f＝０．５３］。１ｂ）ｐ−イソチオシアナートフェニル−３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノ
シド（ＩＶ）：

【００８０】

【化２８】

【００８１】６００ｍｌのジオキサン／水１：１中の６．８ｇ（２５．３ミリモル）の１
ａ）に従って得られるｐ−アミノフェニル−３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラ
ノシドの溶液を撹拌し、２．７２ｍｌのチオホスゲン（１．４当量）を加える。
１０分後、２６ｍｌのエチルジイソプロピルアミンを加え、混合物を室温でさら
に５分間撹拌し、次いで減圧下で１５０ｍｌの容積まで濃縮する。８００ｍｌの
ジクロロメタンを加え、相を分離する。有機相を水で２回洗浄し、硫酸ナトリウ
ム上で乾燥し、濃縮する。残留物を２００ｍｌのメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエー
テル及び２００ｍｌの石油エーテル中に撹拌して入れ、吸引濾過する。これは７
．２６ｇ（９２％）のイソチオシアナートを与える。１ｃ）Ｎ^α−［４−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル−オキシ）−フ
ェニルアミノ−チオカルボニル］−Ｌ−ヒスチジン（Ｖ）：

【００８２】

【化２９】

【００８３】１ｂ）で得られるイソチオシアナートの１０ｇ（０．０３２１モル）及び４．
９８ｇ（０．０３２１モル）のＬ−ヒスチジンの溶液を４００ｍｌのジオキサン
／水１：１中に懸濁させ、１１ｍｌのＮ−エチルジイソプロピルアミンで処理
する。混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで減圧下で濃縮し、ジクロロメタン
／メタノール１：１を用いて再蒸留する。粗生成物を２００ｍｌのメタノール
中に溶解し、１ｌのメチル−ｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）に滴下する。残留
物を濾過し、ＭＴＢＥで洗浄し、減圧下で乾燥する。目的生成物が９５％の収率
で得られる［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸５：１：０．２Ｒ_f＝０
．１４］。２．構成要素（ＩＩ）の製造：２ａ）２０（Ｓ）−２０−Ｏ−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ／
Ｄ−バリル］−カンプトテシン：

【００８４】

【化３０】

【００８５】５００ｍｌの無水ジクロロメタン中の１０ｇ（２８．７ミリモル）の２０（Ｓ
）−カンプトテシンの懸濁液を、撹拌しながら１４ｇ（２当量）のＮ−（ｔｅｒ
ｔ−ブトキシ−カルボニル）−バリン−Ｎ−カルボン酸無水物及び１ｇの４−（
Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−ピリジンで処理する。混合物を還流において４日間
加熱し、次いで減圧下で濃縮する。残留物及び１００ｍｌのＭＴＢＥを２０分間
撹拌する。次いで２００ｍｌの石油エーテルを加え、混合物を濾過する。これは
１４．９ｇ（９５％）の目的化合物を与える。［ＴＬＣ：アセトニトリルＲ_f
＝０．３４］。２ｂ）２０（Ｓ）−２０−Ｏ−Ｌ−バリル−カンプトテシン、トリフルオロ酢酸
塩（ＩＩ）：

【００８６】

【化３１】

【００８７】３００ｍｌのジクロロメタン及び７０ｍｌの無水トリフルオロ酢酸の混合物中
の化合物２ａ（１１．６５ｇ。２１ミリモル）の溶液を５℃で１時間撹拌する。
減圧下で混合物の容積を減らし、次いでジエチルエーテルを用いて生成物を沈殿
させ、ジエチルエーテルを用いて十分に洗浄する。生成物をジクロロメタン／メ
タノールから、ジエチルエーテルを用いて再沈殿させる。必要なら粗生成物を４
０ｍｌのメタノール中にもう１度取り上げ、１２０ｍｌのメチル−ｔ−ブチルエ
ーテルと混合し、０℃に冷却する。沈殿を濾過し、９．４ｇ（８０％）の所望の
化合物を得る［ＴＬＣ：アセトニトリル／水２０：１Ｒ_f＝０．３９］。３．化合物（Ｉ）の合成３ａ）２０（Ｓ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［４−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコ
ピラノシル−オキシ）−フェニルアミノ−チオカルボニル］−Ｌ−ヒスチジル−
Ｌ−バリル｝−カンプトテシン

【００８８】

【化３２】

【００８９】１．０４ｇ（１．９６ミリモル）のＮ^α−［４−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−
フコピラノシル−オキシ）−フェニルアミノ−チオカルボニル］−Ｌ−ヒスチジ
ン（Ｖ、実施例１）及び１ｇ（１．７８ミリモル）の２０（Ｓ）−２０−Ｏ−Ｌ
−バリル−カンプトテシントリフルオロ酢酸塩（ＩＩ、実施例２）を３５ｍｌの
ジメチルホルムアミド中に溶解し、混合物を０℃に冷却し、次いで１．３５ｇ（
３．５６ミリモル）のＮ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾ
ロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル−メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウ
ムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド（ＨＡＴＵ）及び６１６μｌのＮ−
エチルジイソプロピルアミンで処理する。混合物を０℃で終夜撹拌し、次いで４
００ｍｌのＭＴＢＥに滴下する。残留物を濾過し、次いで１００ｍｌのメタノー
ル及び５ｍｌのＤＭＦ中に取り上げる。３ｍｌの１７％濃度アンモニア水を加え
、混合物を１０分間撹拌する。次いで混合物を５００ｍｌのＭＴＢＥに滴下する
。残留物を濾過し、ＭＴＢＥで洗浄し、次いで２５ｍｌの水と一緒に撹拌する。
１５分後、残留物を再び集め、終夜乾燥する。得られる粗生成物は本質的にジア
ステレオマーの混合物から成る（目的化合物のＬ−ヒスチジン及びＤ−ヒスチジ
ンエピマー）。粗生成物を３５ｍｌのメタノールと一緒に２時間撹拌することに
より、副生成物として得られるＤ−ヒスチジンエピマーを除去する。次いで沈殿
を濾過し、この精製操作にさらに２回供する。これは８１９ｍｇ（５１％）のジ
アステレオマー的に純粋な目的生成物を与える［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／
氷酢酸５：１：０．２Ｒ_f＝０．３８］。３ｂ）２０（Ｓ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［４−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコ
ピラノシル−オキシ）−フェニルアミノ−チオカルボニル］−Ｌ−ヒスチジル−
Ｌ−バリル｝−カンプトテシン、塩酸塩

【００９０】

【化３３】

【００９１】実施例３ａからの化合物の８０６ｍｇ（０．９ミリモル）を４０ｍｌの水中に
懸濁させ、０．８６ｍｌ（０．９５当量）の１Ｍ塩酸溶液を用いて塩酸塩に転換
する。撹拌しながら溶液を調製し、次いでこの溶液を凍結乾燥する。これは８１
４ｍｇ（９７％）の目的化合物を与える［ＴＬＣ：アセトニトリル／水１０：
１、Ｒ_f＝０．１５、［ａ］²² _D＝−３７．６^o（ｃ＝０．２１ＤＭＦ）］。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（ＩＶ）【化１】のイソチオシアナートを場合により保護されていることができる末端塩基性アミ
ノ酸【化２】［式中、Ｒ²はアミノ酸の塩基性側鎖を示す］と反応させて式（Ｖ）【化３】［式中、Ｒ²は上記で定義した通りである］のアミノ酸共役体を得、それを次いで式（ＩＩ）【化４】［式中、Ｒ¹はアミノ酸の立体的に要求性の非極性側鎖を示す］のアミノ酸共役体と反応させ、側鎖の保護基を除去し、適宜、化合物を適した塩
に変換する式（Ｉ）【化５】［式中、Ｒ¹及びＲ²は上記で定義した通りである］の化合物の製造法であって、構成要素（ＩＩ）及び（Ｖ）のカップリングを下記
：【化６】の化合物より成る群から選ばれるカップリング剤の存在下で行うことを特徴とす
る製造法。
【請求項２】構成要素（ＩＩ）及び（Ｖ）のカップリングをＮ−［（ジメ
チルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イ
ル−メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−
オキシド（ＨＡＴＵ）【化７】の存在下で行うことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】Ｒ¹が最高で４個の炭素原子を有する分枝鎖状アルキル基を
示し、Ｒ²が式−（ＣＨ₂）_n−Ｒ³の基を示し、ここでＲ³は−ＮＨ₂、【化８】を示し、ｎは１〜４の数を示すアミノ酸を用いることを特徴とする請求項１又は２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】Ｒ¹が式【化９】の分枝鎖状アルキル基を示し、Ｒ²が式【化１０】の基を示すアミノ酸を用いることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】式（ＩＶ）のイソチオシアナートを場合により保護されてい
ることができるリシン又はヒスチジンと反応させることを特徴とする請求項１〜
４のいずれかにて特許請求した方法。
【請求項６】式（ＩＶ）のイソチオシアナートを保護されていないヒスチ
ジンと反応させることを特徴とする請求項１〜５のいずれかにした方法。
【請求項７】カンプトテシンを場合により保護されていることができるバ
リンと反応させることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の方法。