JP2002531117A - 植物の生産性を改善するための微生物 - Google Patents

植物の生産性を改善するための微生物

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JP2002531117A JP2000586874A JP2000586874A JP2002531117A JP 2002531117 A JP2002531117 A JP 2002531117A JP 2000586874 A JP2000586874 A JP 2000586874A JP 2000586874 A JP2000586874 A JP 2000586874A JP 2002531117 A JP2002531117 A JP 2002531117A
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バシリエンワ レッズキナ タティアナ
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タットコ バイオテック インコーポレイテッド
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Abstract

(57)【要約】 本発明はＡｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢを含む作物接種菌を目的とする。この作物接種菌は、広範な土壌タイプおよび気候条件、ならびに広範な植物タイプに対し、一貫して土壌の質を改善し、植物の生産性を高めるために有効である。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 （発明の背景） いくつかの微生物は植物の成長に有益な効果を有することが知られている。そ
の中に、根粒菌属の窒素固定細菌があり、マメ科植物の共生生物である。アゾス
ピリラム属はイネ科植物の根に関連する非寄生性窒素固定細菌で、これも最近そ
の植物成長促進性が認められている（Ｍｉｓｈｕｓｔｉｎ ａｎｄ Ｓｈｉｌｎ
ｉｋｏｖａ，Ｍｏｓｃｏｗ，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌ．Ｈｏｕｓｅ，１９７３
； Ｍｉｓｈｕｓｔｉｎ ａｎｄ Ｓｈｉｌｎｉｋｏｖａ，Ｍｏｓｃｏｗ，Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌ．Ｈｏｕｓｅ，１９６８）。より具体的には、Ａｚｏｓｐ
ｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅの特定の菌株がコムギおよびダイズにお
いて様々な無機質の蓄積を促進し（Ｂａｓｈａｎ等，Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ
Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５６（３）：７６９−７７５（１９９
０））、トウモロコシ苗条の乾燥重量を増加させ（Ｏ′Ｈａｒａ等，Ｃａｎ．Ｊ
．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，２７：８７１−８７７（１９８１）、かつモロコシ、
トウジンビエおよびネピアグラスの乾燥重量を増加させる（Ｓｍｉｔｈ等，Ａｐ
ｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，４７（６）：１
３３１−１３３６（１９８４））ことが明らかにされている。
【０００２】 作物改善のために、種子または土壌へのアゾスピリラムを含む有益な微生物の
接種が何年も実施されてきた。しかし、おそらくは接種菌の生存力がないため、
または接種菌の生存力の変化により供与量にばらつきがあるため、不定で一貫性
のない結果が見られることが多かった（Ｏｋｏｎ等，ＣＲＣ Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ
．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，６：６１−８５（１９８７））。さらに、作物
接種菌として特定のタイプの微生物を用いることで、成功の程度にばらつきが見
られ、次の変数が原因として考えられる。（１）微生物の増殖を支持する土壌中
の十分な微量および多量養素の有無；（２）土壌中の栄養素および微生物を支え
、微生物の増殖に適した環境を提供するために利用可能な土壌中の有機物質の量
；（３）微生物の作用によって提供される、植物が栄養素を適当に取り込むため
に必要な特定の無機質または化合物の有無；および（４）土壌のタイプ、ｐＨ、
温度および水分などの土壌の特徴における変動。
【０００３】 いくつかのアゾスピリラム菌株が南の地域から分離されている。これらの菌株
は、異なる気候帯の他の土壌タイプに導入された時に、限られた適応能力しか持
たないようである（Ｂａｓｈａｎ等，Ｃａｎ．Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，３６
：５９１−６０８（１９９０）； Ｎｕｒ等，Ｃａｎ．Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ
．，２６（４）：４８２−４８６（１９８０）； Ｓｍｉｔｈ等，Ａｐｐｌｉｅ
ｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，４７（６）：１３３１−
１３３６（１９８４）； Ｏ′Ｈａｒａ等，Ｃａｎ．Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．
，２７：８７１−８７７（１９８１））。さらに、これらのタイプの微生物は植
物の乾燥重量と根粒の成長を刺激する傾向があったが、ニトロゲナーゼ活性を必
ずしも増強しなかったため、マメ科植物−根粒菌共生の有効な刺激物質ではなか
った（Ｂａｓｈａｎ等，Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏ
ｂｉｏｌ．，５６（３）：７６９−７７５（１９９０）； Ｙａｈａｌｏｍ等，
Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，３３（６）
：５１０−５１９（１９８７）； Ｓｃｈｍｉｄｔ等，Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕ
ｍ ＩＶ： Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，Ｅｃｏｌｏｇｙ，Ｓｐ
ｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ｐｐ．９２−１０１，（１９８８））。
【０００４】 （発明の概要） 本発明は、植物の生産性および土壌の質を高めるために有効な接種菌を目的と
する。本発明の重要な態様において、この接種菌は微生物Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌ
ｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢ（本明細書においては「ＭＫＢ」
と呼ぶ）を含む。ＭＫＢの接種菌としての使用は、非マメ科およびマメ科両方の
植物や蔬菜植物の、多様な土壌タイプおよび気候での生産性を増大させるために
有効である。
【０００５】 本発明の１つの重要な態様は、寄託番号ＮＲＲＬ Ｂ−３００８２（標識株）
およびＮＲＲＬ Ｂ−３００８１（非標識株）を有するＭＫＢの生物学的に純粋
な培養株を目的とする。ＭＫＢは接種菌として単独または他の農業経済学的に有
益な微生物との組み合わせのいずれかで用いることができる。接種菌の植物また
は土壌への適用は、土壌窒素のレベルを上昇させ、植物への無機質取り込みを改
善し、植物成長調節因子の産生によって植物の成長を刺激し、植物病原体ミクロ
フローラを阻害する。
【０００６】 もう１つの重要な態様において、本発明はＭＫＢを増殖させるための方法を提
供する。本発明の方法によれば、ＭＫＢをマメ科植物抽出物培地に接種し、約１
０８から約１０９細胞／ｍｌの細胞密度を提供するのに有効な条件下で細胞を増
殖させる。
【０００７】 （発明の詳細な説明） （定義） 「植物の生産性」または「作物の生産性」という用語は一般に、植物が栽培さ
れる理由である、植物の成長または発生のいかなる局面も意味する。例えば、穀
物や蔬菜などの食用作物について述べるとき、作物の生産性は一般に、特定の作
物から収穫された穀物または果実などの収量を意味する。しかし、芝草などの「
作物」については、植物の生産性は成長速度、芝の密度、疾病抵抗性などを意味
することもある。したがって、本発明の目的上、植物または作物の生産性改善は
、様々な目的のために収穫された穀物、果実、花卉、または植物の他の部分の収
量改善、茎、葉および根を含む植物の部分の成長改善、疾病抵抗性の改善、極限
の気候での生存性改善、ならびに植物の成長および発生の類似の改善を広く意味
する。農業経済学的に有益な微生物の例には、桿菌、シュードモナス、根粒菌、
光栄養およびセルロース分解細菌、クロストリジウム、トリコデルマなどが含ま
れる。
【０００８】 「土壌の質を改善する」とは、土壌中の窒素レベルを高め、植物毒性微生物の
数を減らすことを意味する。
【０００９】 本明細書において用いられる「接種菌」または「接種材料」とは、Ａｚｏｓｐ
ｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢを含む調製物を意味す
る。Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢとは、
寄託番号ＮＲＲＬ Ｂ−３００８２を有する標識株、すなわちストレプトマイシ
ン耐性を有する菌株と、寄託番号ＮＲＲＬ Ｂ−３００８１を有する非標識株、
すなわちストレプトマイシン耐性のない菌株との両方を意味する。（これらの菌
株はいずれも、Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ
Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＮＲＲＬ），ＵＳＤＡ，Ｐｅｏｒｉ
ａ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓに１９９８年１２月９日に寄託された）。
【００１０】 本明細書において用いられる「生物学的に純粋な」とは、ＭＫＢが接種材料に
加えられた唯一の農業経済学的に有益な菌株である接種菌を意味する。この接種
菌は農業経済学的利益を提供しない他の微生物を含むことができる。
【００１１】 本明細書において用いられる「農業経済学的に有益な菌株」とは、植物の生産
性を高めるために有効な微生物を意味する。ＳＡＢのほかに農業経済学的利益を
提供する微生物には、植物にとって生物学的により利用しやすい栄養素を作るた
めに有効と考えられる共生および非共生微生物や、植物病原体ミクロフローラを
阻害し、植物の成長を刺激する微生物が含まれる。
【００１２】 （微生物の単離） 本発明のこの態様において、ＭＫＢはロシアのヨーロッパ地域北部で３月に草
地ポドゾル土壌から単離された。このタイプの土壌は栄養素レベルが低い北方気
候の痩せた土壌の典型である。いかなる理論にもしばられるつもりはないが、Ｍ
ＫＢは最初に痩せた土壌から単離されたため、痩せた土壌条件が生存により適し
ており、したがって、多様な土壌条件に適応すると考えられる。
【００１３】 土壌サンプルを、約１％の乳酸ナトリウムと、約０．１％の酵母抽出液を含む
培地中での培養により、標準の技法を用いて強化した。ＭＫＢの純粋な培養株を
、例えばじゃがいも寒天、牛肉ブイヨン、自然培地Ａおよび自然培地Ｄ（いずれ
も実施例に記載）などの固形寒天様培地に硫酸アンモニウムを加えた強化調製物
の継代培養によって単離した。ＭＫＢの存在は、位相差顕微鏡で培養調製物を観
察することによって確認した。本発明の重要な態様において、ＭＫＢは下記の形
態学的、生理学的および生化学的特徴を有する。
【００１４】 染色特性：グラム陰性 細胞サイズ：直径約０．５から０．６ミクロン、長さ約１から１．５ミクロン
で、わずかに彎曲。
【００１５】 形態：ＭＫＢの形態は、培養に用いた培地のタイプに応じて異なる。固形およ
び半固形培地ではビブリオ属型が生じ、液体培養ではＳ型が生じる。じゃがいも
寒天上での増殖により、大きく、不透明で、丸い、粘液性、ピンク色の、金属性
の光沢を持つコロニーが形成される。牛肉ブイヨン寒天上での増殖により、丸く
、不透明で、白色の小さい円形コロニーが形成される。培地Ａ上での増殖では、
濃いピンク色で、境界（端）が乾燥し、中心が粘液性の大きいコロニーが得られ
る。本発明の重要な態様において、ＭＫＢはピンクのカロチノイド色素、ロドビ
ブリンを生成する。
【００１６】 運動性：動きは典型的には波状および回転で、運動性は液体培地中では単一の
極鞭毛によって提供され、固形培地上では多数の側鞭毛によって提供される。本
発明の重要な態様において、鞭毛の存在によってＭＫＢの運動能力が改善され、
ＭＫＢを植物の根系に速やかに到達する接種材料として適用することが可能とな
る。
【００１７】 嚢胞形成：ＭＫＢは、じゃがいも寒天、牛肉ブイヨン、または培地Ａなどの強
化培地で約１０から１４日間培養したときに、最初は嚢胞および封入型（スフェ
ロプラスト）を形成する。強化培地で複数回の継代培養を行った後、スフェロプ
ラストを形成する能力は失われ、ＭＫＢを貧困培地（例えば、０．５％乳酸カル
シウム水溶液）で培養する場合でも、スフェロプラスト形成は起こらない。
【００１８】 （ＭＫＢの増殖） 本発明の重要な態様において、ＭＫＢは、菌株の安定性および一貫性を維持す
るのに有効な様式で維持し、増殖させることができる。反復継代培養を行う場合
でも、ＭＫＢは安定で、その窒素を固定し、植物成長調節因子を生成し、植物毒
性微生物を阻害する能力は初期レベルから低下しない。
【００１９】 ＭＫＢは、有機酸の塩および様々な多量および微量養素を含む最小限の培地上
で増殖させ、安定に維持することができる。本発明の重要な態様において、ＭＫ
Ｂは最小限の培地（約０．５％乳酸Ｃａを含む水など）で増殖させることができ
、窒素を固定するその能力も維持される。
【００２０】 本発明のもう１つの態様において、ＭＫＢは多様な環境条件下で耐え、増殖す
ることさえ可能である。ＭＫＢは追加の成長因子を必要とせず、有機栄養性で、
発酵能力を持たない。
【００２１】 本発明のもう１つの態様において、ＭＫＢは嫌気性条件下で増殖することがで
きる。嫌気性条件下では、ＭＫＢはＮＯ３を末端電子受容体として利用し、最終
的にＮＯ３のＮ２への変換が起こる。
【００２２】 本発明のもう１つの重要な態様において、ＭＫＢは工業スケールで容易に増殖
させることができる。この工業スケールのＭＫＢ培養法は、単位容積あたり高率
のバイオマスを提供するために有効で、保存条件に対してより耐容できる作物接
種材料を提供する。
【００２３】 本発明のこの態様において、ＭＫＢをマメ科植物抽出物培地に接種する。培地
はマメ科植物（種子および／または茎、根は抽出しない）の水抽出物と、有機酸
の塩および追加窒素を含む。有機酸の適当な塩には、リンゴ酸、コハク酸、乳酸
、酪酸、プロピオン酸、エタノール、およびその混合物のカルシウムまたはナト
リウム塩が含まれる。窒素固定微生物の増殖のための最適な炭素源には、リンゴ
酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、およびエタノールが含ま
れる。ＭＫＢを増殖させるために有用な窒素源には、アンモニウム塩、硝酸塩、
ペプトン、酵母溶解産物、窒素含有アミノ酸の混合物、およびその混合物が含ま
れる。
【００２４】 接種されたマメ科植物抽出物培地を次いで、光学密度が少なくとも約３．０の
細胞密度を提供するのに有効な時間、温度および通気速度で培養する。本発明の
重要な態様において、培養時間は典型的には約２４時間から４８時間の範囲で、
温度はほぼ室温に維持し、Ｏ２レベルが制限されないような標準の通気速度を用
いる。
【００２５】 （ＭＫＢの適用） ＭＫＢは、種子コーティング、泥炭または植え付け物質を用いた適用、および
生体高分子への取り込みを含む、当技術分野において知られている方法によって
適用することができる。種子コーティングを用いる本発明の態様において、コー
ティングはＢｒｏｗｎ，Ｓｅｅｄ ａｎｄ Ｒｏｏｔ Ｂａｃｔｅｒｉｚａｔｉ
ｏｎ，ｐｐ．１８７−１９７（１９７４）に記載され、引用される方法によって
行うことができ、これは参照として本明細書に組み入れられる。泥炭を用いる本
発明の態様において、ＭＫＢは発酵器中で高い菌体数レベル（すなわち１０８か
ら１０９細胞／ｍｌ）に達するまで培養し、次いであらかじめ滅菌した泥炭に加
えることができる。その後、接種材料を、土壌に直接適用することにより（泥炭
懸濁液を植え付け用の畝間のすじに滴下することにより）、または泥炭もしくは
おがくずなどの他の植え付け物質と混合することにより、種子に適用（泥炭／細
菌混合物と付着性を改善するためのゴムまたは糖を含むスラリーを調製すること
により）することもできる（Ｏｋｏｎ等，ＣＲＣ Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｔ
ｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，６：６１−８５（１９８７）、これは参照として本明細書
に組み入れられる）。
【００２６】 さらに、ＭＫＢは知られている方法によりポリアクリルアミド（Ｄｏｍｍｅｒ
ｇｕｅｓ等，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，３７；７７９
−７８１（１９７９））；キサンタンゴムおよびカロブガム（Ｍｕｇｎｉｅｒ等
，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５０：１０８−１１４（
１９８５））；およびアルギン酸塩（Ｂａｓｈａｎ，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ
．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５１：１０８９−１０９８（１９８６））などの様々
な生体高分子に取り込むこともできる。これらはすべて参照として本明細書に組
み入れられる。
【００２７】 本発明のもう１つの態様において、ＭＫＢは接種材料として用い、単独（単一
培養）または他の農業経済学的に有益な微生物との組み合わせのいずれかで適用
することもできる。本発明の非常に重要な態様において、ＭＫＢは種子と懸濁し
て約１０８から約１０９細胞／ｍｌ／種子とする。次いで、この種子と微生物と
の懸濁液を土壌に植え付ける。ＭＫＢは、例えば桿菌、シュードモナス、根粒菌
、光栄養およびセルロース分解細菌、クロストリジウム、トリコデルマなどを含
む広範な細菌および真菌と生理学的に適合性である。
【００２８】 本発明のもう１つの態様において、ＭＫＢは、単一培養で単独または他の農業
経済学的に有益な微生物との組み合わせのいずれかで、植物または土壌に市販の
肥料の適用と組み合わせて適用することもできる。本発明のこの態様において、
ＭＫＢによる接種は、作物接種菌をまったく使用せずに肥料を用いる処理よりも
植物の生産性を高めるのに有効である。
【００２９】 （植物の成長および土壌の質への効果） 本発明の重要な態様において、ＭＫＢは窒素固定を通じて、植物による無機質
の取り込みを改善することにより、植物の成長を刺激することにより、また広範
な植物病原体ミクロフローラを阻害することにより、植物の生産性を改善する作
用をする。
【００３０】 窒素固定：ＭＫＢによる窒素固定は、広範な環境条件で起こる。例えば、窒素
固定は約１０℃から約４０℃の温度範囲で起こり、至適温度は約２２℃から約３
０℃である。本発明のこの態様において、ＭＫＢの純粋培養物は約１００から約
２００マイクログラムＮ２／１０ｍｌ培養物／２日のニトロゲナーゼ活性を有す
る。ＭＫＢを作物接種菌として土壌に適用するとき、ほぼ同等のレベルの窒素固
定が土壌で観察される。
【００３１】 無機質取り込みの改善：本発明のもう１つの重要な態様において、ＭＫＢは窒
素の植物への輸送を促進するようはたらくアミノ酸を産生することができる。例
えば、ＭＫＢはアスパラギン酸およびプロリンを、植物による窒素同化を助ける
のに有効なレベルで産生する。
【００３２】 植物の成長刺激：本発明の重要な態様において、植物の成長を刺激するＭＫＢ
の能力は、少なくとも部分的には、インドール酢酸（ＩＡＡ）などの植物成長調
節因子を産生する能力による。本発明のこの態様において、ＭＫＢは蛋白質１ｍ
ｇあたり少なくとも約５００マイクログラムのＩＡＡを提供するために有効であ
る。
【００３３】 植物病原体ミクロフローラの阻害：本発明のもう１つの重要な態様において、
ＭＫＢは根部で発生することが多く、植物の生産性に有害な作用を有する傾向が
ある、植物病原体ミクロフローラの増殖を阻害するために有効である。本明細書
において用いられる「植物病原体ミクロフローラの増殖を阻害する」とは、植物
病原体ミクロフローラのバイオマスの増加を阻害するだけでなく、植物の生産性
を低下させうるいかなる代謝活性を阻害することも意味する。ＭＫＢがその増殖
を阻害することが知られている植物障害性の細菌および真菌には、フザリウム−
オキシスポルム、Ｔｈｉｅｌａｖｉｏｐｓｉｓ ｂａｓｉｃｏｌａ、アルテルナ
リア、アスペルギルス−フラーブス、ムコール−フラジリス、Ｐｅｎｉｃｉｌｌ
ｉｕｍなどが含まれる。
【００３４】 下記の実施例は本発明を実行するための方法を例示しており、本発明の範囲を
例示するが、限定するものではなく、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲に定
義されることが理解されるべきである。
【００３５】 （実施例） （実施例１：ＭＫＢの特徴） ＭＫＢは、Ｏ２を末端電子受容体とする呼吸代謝を主に有する好気性微生物で
ある。その他の生化学的特徴を、当技術分野において知られている標準的方法に
よって調べた。その他の特徴は以下のとおりである。
【００３６】 オキシダーゼ＋ カタラーゼ＋ 硝酸塩による嫌気性増殖 − ＮＯ３のＮＯ２への還元 ＋ − ＮＯ２のＮ２Ｏへの還元 ＋ − Ｎ２ＯのＮ２への還元 ＋ デンプン加水分解 − ウレアーゼ ＋ ゼラチンの液化 − トリプトファンからのインドール形成 − ３％ＮａＣｌ存在下での増殖 − フォゲス−プロスカウエル反応 − Ｍｅｔｈｙｌ−Ｒｅｄとの反応 − ラクムスによるミルク増殖 ａｌｋｉｌｉｎｉｎｇ ＤＮＡのＧ＋Ｃのモル％ ＧＣ６９％ 窒素固定および増殖の温度範囲 １０〜４０℃ 至適温度 ２２〜３０℃ 窒素固定および増殖のｐＨ範囲 ５．５〜８．５ 至適ｐＨ ６．５〜７．２
【００３７】 （実施例２：増殖培地） ＭＫＢは下記の培地上で増殖および維持させることができる。 半固形無窒素培地 Ｄ ｇ／ｌ リンゴ酸ナトリウム ５．０ Ｋ２ＨＰＯ４ １．７４ ＫＨ２ＰＯ４ ０．９１ ＭｇＳＯ４ ７Ｈ２Ｏ ０．３ ＣａＣｌ２ ６Ｈ２Ｏ ０．１ ＦｅＣｌ２ ６Ｈ２Ｏ ０．０１ 寒天 ４．０ Ｈ３ＢＯ３ ５．０ Ｎａ２ＭｏＯ４ ２Ｈ２Ｏ ５．０ ＭｎＳＯ４ ４Ｈ２Ｏ ３．０ ＫＪ ０．５ ＺｎＳＯ４ ７Ｈ２Ｏ ０．２ Ａｌ２（ＳＯ４）３１２Ｈ２Ｏ ０．３ ｐＨ ６．８〜７．０
【００３８】 半固形無窒素培地 Ａ ｇ／ｌ Ｋ２ＨＰＯ４ １．７４ ＫＨ２ＰＯ４ ０．９１ ＭｇＳＯ４ ７Ｈ２Ｏ ０．３ ＣａＣｌ２ ６Ｈ２Ｏ ０．１ ＦｅＣｌ２ ６Ｈ２Ｏ ０．０１ グルコース １．０ ペプトン １．０ 乳酸ナトリウム ０．５ 酢酸ナトリウム １．０ リンゴ酸またはコハク酸ナトリウム ０．５ 酵母自己分解物 ０．５ 寒天 １５．０
【００３９】 （実施例３：工業スケールのＭＫＢ増殖） マメ科植物抽出物培地の調製 １．マメ科植物（種子および／または茎、根は含まない）を水に加え（２００
ｇ／ｌ）、２０分間煮沸した。 ２．混合物から固体物質を分離（ろ過により）し、下記の成分を加えた。 ０．５％ リンゴ酸ナトリウム ０．１％（ＮＨ４）２ＳＯ４ 培養条件 １．ＭＫＢを培地に接種し、２５℃から２８℃で振盪および通気しながら４８
時間増殖させた。 ２．細胞密度が光学密度３．０に達し、６００〜７００ｍｇのバイオマスを提
供した。
【００４０】 （実施例４：植物の生産性に対するＭＫＢ接種の影響） 別に示されない限り、ＭＫＢを記載のとおりに増殖させ、１０８〜１０９細胞
／ｍｌ／種子の割合でＭＫＢを接種することにより、温室および畑での実験を実
施した。結果は下記のとおりであった。
【００４１】
【表１】
【００４２】
【表２】
【００４３】
【表３】
【００４４】
【表４】
【００４５】
【表５】
【００４６】
【表６】
【００４７】
【表７】
【００４８】
【表８】
【００４９】 当業者なら、前述の本発明の詳細な説明について考慮すれば、本発明の実施に
おいて多くの修正および変更を思いつくものと予想される。したがって、そのよ
うな修正および変更は添付の特許請求の範囲内に含まれるものとする。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4B065 AA01X AC14 BB27 BC02 BC03 BC11 BD05 CA16 CA47 4H011 AB03 DC10 DD03

Claims (16)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 寄託番号ＮＲＲＬ Ｂ−３００８２を有するＡｚｏｓｐｉｒ
    ｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢの生物学的に純粋な培養株
    。
  2. 【請求項２】 植物または土壌に適用するために有効な接種菌であって、Ａ
    ｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢを含むことを
    特徴とする接種菌。
  3. 【請求項３】 マメ科植物、非マメ科植物および蔬菜作物における植物の生
    産性を高めるために有効であることを特徴とする、請求項２に記載の接種菌。
  4. 【請求項４】 約１０℃から約４０℃の温度範囲で植物の生産性を高めるた
    めに有効であることを特徴とする、請求項２に記載の接種菌。
  5. 【請求項５】 約５．５から約８．５のｐＨ範囲で植物の生産性を高めるた
    めに有効であることを特徴とする、請求項２に記載の接種菌。
  6. 【請求項６】 Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢに加えて農業経済学的に有益な細菌株をさらに含むことを特徴とする、
    請求項２に記載の接種菌。
  7. 【請求項７】 土壌の質を改善し、植物の生産性を高めるための方法であっ
    て、土壌または植物に接種菌を接種することを含み、接種菌がＡｚｏｓｐｉｒｉ
    ｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢを含むことを特徴とする方法
    。
  8. 【請求項８】 接種菌が種子コーティングとして適用されることを特徴とす
    る請求項７に記載の土壌の質を改善し、植物の生産性を高めるための方法。
  9. 【請求項９】 接種菌が土壌に直接適用されることを特徴とする請求項７に
    記載の土壌の質を改善し、植物の生産性を高めるための方法。
  10. 【請求項１０】 接種菌が微生物および植え付け物質の混合物として植物ま
    たは土壌に適用されることを特徴とする請求項７に記載の土壌の質を改善し、植
    物の生産性を高めるための方法。
  11. 【請求項１１】 接種菌がＡｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓ
    ｅ ＳＡＢ ＭＫＢに加えて農業経済学的に有益な細菌株をさらに含むことを特
    徴とする請求項７に記載の土壌の質を改善し、植物の生産性を高めるための方法
    。
  12. 【請求項１２】 接種菌が土壌および植物の窒素含有量を増加させるために
    有効な量で植物または土壌に適用されることを特徴とする請求項７に記載の土壌
    の質を改善し、植物の生産性を高めるための方法。
  13. 【請求項１３】 接種菌が市販の肥料との組み合わせで植物または土壌に適
    用されることを特徴とする請求項７に記載の土壌の質を改善し、植物の生産性を
    高めるための方法。
  14. 【請求項１４】 Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡ
    Ｂ ＭＫＢを増殖させる方法であって、 マメ科植物抽出物培地にＡｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ
    ＭＫＢ ＳＡＢを接種すること、ならびに 接種したマメ科植物抽出物を、少なくとも約１０８から約１０９細胞／ｍｌの
    細胞密度を提供するのに有効な時間、温度および通気速度で培養することを含む
    ことを特徴とする方法。
  15. 【請求項１５】 マメ科植物抽出物がマメ科植物の水抽出物であり、有機酸
    の塩と窒素源とを含むことを特徴とする請求項１４に記載のＡｚｏｓｐｉｒｉｌ
    ｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢを増殖させる方法。
  16. 【請求項１６】 寄託番号ＮＲＲＬ Ｂ−３００８１を有するＡｚｏｓｐｉ
    ｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ＳＡＢ ＭＫＢの生物学的に純粋な培養
    株。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007100162A1 (ja) * 2006-03-03 2007-09-07 Mayekawa Mfg. Co., Ltd. 新規細菌及びそれを用いた植物病害の防除方法

Families Citing this family (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7192523B2 (en) 1996-12-17 2007-03-20 Global Biosciences, Inc. Methods for treating agricultural waste and producing plant growth-enhancing material
US20030066322A1 (en) * 2001-05-15 2003-04-10 Perriello Felix Anthony Microbiologically accelerated humus and method and apparatus for producing same
HU230555B1 (hu) * 2001-08-13 2016-12-28 Biofil Kft. Környezetbarát mikroorganizmus-készítmény és annak előállítása
US20050000154A1 (en) * 2001-10-31 2005-01-06 Global Biosciences, Inc. Apparatus and methods for enhanced plant and lawn growth using alkane injection
WO2003037066A2 (en) 2001-10-31 2003-05-08 Global Biosciences, Inc. Enhanced plant growth using alkane biostimulation
US6918354B2 (en) 2001-12-20 2005-07-19 Global Biosciences, Inc. Method and apparatus for butane-enhanced aquatic plant and animal growth
US8251471B2 (en) * 2003-08-18 2012-08-28 Fujifilm Dimatix, Inc. Individual jet voltage trimming circuitry
US8068245B2 (en) * 2004-10-15 2011-11-29 Fujifilm Dimatix, Inc. Printing device communication protocol
US7911625B2 (en) * 2004-10-15 2011-03-22 Fujifilm Dimatrix, Inc. Printing system software architecture
US7907298B2 (en) * 2004-10-15 2011-03-15 Fujifilm Dimatix, Inc. Data pump for printing
US7722147B2 (en) * 2004-10-15 2010-05-25 Fujifilm Dimatix, Inc. Printing system architecture
US8085428B2 (en) 2004-10-15 2011-12-27 Fujifilm Dimatix, Inc. Print systems and techniques
US8199342B2 (en) * 2004-10-29 2012-06-12 Fujifilm Dimatix, Inc. Tailoring image data packets to properties of print heads
US7234788B2 (en) * 2004-11-03 2007-06-26 Dimatix, Inc. Individual voltage trimming with waveforms
US7556327B2 (en) * 2004-11-05 2009-07-07 Fujifilm Dimatix, Inc. Charge leakage prevention for inkjet printing
CN100376666C (zh) * 2006-03-01 2008-03-26 华南农业大学 糖蜜草固氮螺菌及其应用
US8029593B2 (en) * 2007-02-09 2011-10-04 The Board of Regents of the Nevada System of Higher Education on Behalf of the University of Las Vegas, Nevada Biofertilizer for treatment to improve growth of turf grass and method of developing the biofertilizer
CN101842334B (zh) * 2007-08-27 2013-11-20 普罗贝尔特公司 新型生物肥料、获得所述肥料的方法及所述肥料作为植物生长刺激剂的应用
US9856415B1 (en) 2007-12-11 2018-01-02 Superior Silica Sands, LLC Hydraulic fracture composition and method
US9057014B2 (en) 2007-12-11 2015-06-16 Aquasmart Enterprises, Llc Hydraulic fracture composition and method
US20170137703A1 (en) 2007-12-11 2017-05-18 Superior Silica Sands, LLC Hydraulic fracture composition and method
US10920494B2 (en) 2007-12-11 2021-02-16 Aquasmart Enterprises, Llc Hydraulic fracture composition and method
US20100016162A1 (en) * 2008-07-11 2010-01-21 Brian Goodwin Foliarly applicable silicon nutrition compositions & methods
CN102740689B (zh) 2009-09-03 2015-09-23 Fb科技控股公司 种子处理组合物及方法
AU2010297937B2 (en) * 2009-09-28 2016-03-17 Fbsciences, Holdings, Inc. Methods of reducing plant stress
CA2775407A1 (en) * 2009-09-28 2011-03-31 Fbsciences Holdings, Inc. Fertilizer compositions and methods
ES2378040B1 (es) 2010-03-31 2013-02-18 Probelte, S.A Un preparado biológico bionematicida y estimulador del crecimiento vegetal y cultivos puros de las cepas denominadas n11, sr11 y alo1, contenidas en el mismo.
CN103052311B (zh) 2010-07-15 2016-05-18 Fb科技控股公司 微生物组合物和方法
US9485991B2 (en) 2012-01-12 2016-11-08 Fbsciences Holdings, Inc. Modulation of plant biology
US9527781B2 (en) 2013-12-19 2016-12-27 Aquasmart Enterprises, Llc Persistent, targeted, optimized, soil amendment composition and method
WO2016009397A1 (en) * 2014-07-18 2016-01-21 Consorzio Di Ricerche Applicate Alla Biotecnologia Biofertilizer, method for its preparation and uses thereof
US11548833B2 (en) * 2015-02-13 2023-01-10 Michael J. Meyer Method to formulate humic substances
WO2017037500A1 (en) * 2015-08-29 2017-03-09 Benemérita Universidad Autónoma De Puebla Bacterial inoculant to boost phenological growth of coffee plants
US20200163291A1 (en) * 2017-04-11 2020-05-28 Nanollose Limited Plant growth media and method for making same
CN107056556A (zh) * 2017-06-20 2017-08-18 黄平县海江生态种养殖有限公司 干旱期豆科牧草肥料及其制备方法
MX2017008876A (es) * 2017-07-04 2019-02-08 Newpek S A De C V Una formulacion inoculante bacteriano a base de un consorcio de microorganismos del genero calothrix sp. para incrementar el rendimiento y calidad de cultivos vegetales, el metodo para la fabricacion de la formulacion, y usos.
CR20200053A (es) * 2017-07-06 2020-04-18 Agrozono S L Método para la desinfección de suelos u otros sustratos de cultivo agrícola
CN109593800B (zh) * 2019-01-24 2019-09-03 内蒙古拜克生物有限公司 一种发酵生产l-亮氨酸的方法
CN113046260B (zh) * 2021-02-04 2023-04-25 兴安盟莱绅生物农业有限公司 一种促进大豆生长的微生物混合菌剂及其应用
MX2021002999A (es) * 2021-03-12 2022-09-13 Carranza Luis Rodrigo Becerra Cepa de azospirillum brasilense, mezclas y metodo, para promover el desarrollo radicular de plantulas vegetales.
AU2021439602A1 (en) * 2021-04-09 2023-06-01 Total Biotecnologia Indústria E Comércio S/A Agricultural composition of indoleacetic acid having increased photostability, process for the production and use thereof

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2670291A (en) * 1950-08-24 1954-02-23 Melnick Daniel Protection of food against protein degradation
US4486459A (en) * 1979-11-26 1984-12-04 Thompson Jerome B Process for preparing cellulose
US5229291A (en) * 1985-12-30 1993-07-20 Novo Industri A/S Rhizobia transformants which symbiotically fixes nitrogen in non-legumes, a material for treating seeds of a non-legume plant, non-legume seeds, a non-legume plant and a method for producing rhizobia transconjungants
US5147441A (en) * 1991-05-31 1992-09-15 Megeed Mohamed E A Biological product for soil improvement and method of application to soil
US5697186A (en) * 1994-02-24 1997-12-16 Rutgers, The State University Of New Jersey Flocculated microbial inoculants for delivery of agriculturally beneficial microorganisms
ES2093559B1 (es) * 1995-05-04 1997-07-01 Consejo Superior Investigacion Fertilizante bacteriano y procedimiento de obtencion.
US5955082A (en) * 1997-01-29 1999-09-21 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By Agriculture And Agri-Food Canada Insecticidal factor from field peas

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007100162A1 (ja) * 2006-03-03 2007-09-07 Mayekawa Mfg. Co., Ltd. 新規細菌及びそれを用いた植物病害の防除方法
JP5120849B2 (ja) * 2006-03-03 2013-01-16 株式会社前川製作所 新規細菌及びそれを用いた植物病害の防除方法
US8728459B2 (en) 2006-03-03 2014-05-20 Mayekawa Mfg. Co., Ltd. Bacteria and method for controlling plant disease using the same

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