CN108485995A - 一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂及生物有机肥 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂及生物有机肥。复合微生物菌剂由酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、胶胨样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和细黄链霉菌混合制成。生物有机肥是将鸡粪，牛粪，猪粪，玉米秸秆，稻壳粉，褐煤腐植酸，麸皮，鱼粉和复合微生物菌剂经发酵制成。在播种前，将土壤灌透水分，使0～40cm深土壤含水达到含水量30％～40％，经过一遍机耕翻地，于土壤中施用生物有机肥，施加量为500kg/亩；在播种前20天将含有生物有机肥的土壤再翻耕一遍，使得生物有机肥充分活化土壤有益活菌，同时提高土壤肥力，为羊肚菌这一土生腐生菌创造良好生长环境，达到抑制杂菌，促进羊肚菌生长，提高产量和质量的目的。

Description

一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂及生物有机肥
技术领域
本发明涉及一种微生物肥料，尤其涉及促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂和提高土壤肥力的生物有机肥。
背景技术
羊肚菌(Morchella spp.)又称羊肚菜，隶属于子囊菌纲、盘菌目、羊肚菌科、羊肚菌属，是一种名贵珍稀食用真菌。羊肚菌的成份主要包括氨基酸、维生素、矿质元素、脂肪酸、酶类和多糖等。羊肚菌食用药用价值高，含有蛋白质20.5％，粗脂肪3.82％，富含人体必需氨基酸8种，占氨基酸总量47.47％。羊肚菌据【本草纲目】记载，羊肚菌子囊果入药，其性平、无毒。味甘寒，具有有益肠胃、助消化、化痰理气、补肾、补脑、提神等功效。现代医学研究表明，羊肚菌有“四抗”、“两降”和“一调节”的药用功效，即有抗射线、抗肿瘤、抗氧化和抗疲劳的作用；降血压和降血脂功效；还具有调节免疫力的功效。此外，还含有多种微量元素和维生素，如锌、硒、维生素B1、维生素B2等，对人体有很好的保健作用。
早在十九世纪80年代，羊肚菌人工栽培的相关研究就在英、美、法、德等国家广泛展开。羊肚菌的生存环境复杂多样，多生长于腐殖质土、沙泥混合土、黑黄色壤土、碌壤土中。有一定规律：在一定范围内，有机质丰富的土壤野生羊肚菌产量高，但是在生地土壤条件下不符合该规律。同时，投入料量与产量关系表明：底肥最好不要超过500kg/亩。据熊川等报道，生长羊肚菌的土壤细菌群落结构表明：较为丰富土壤细菌群落有利于羊肚菌生长，暗示羊肚菌发生需要微生物刺激，需要某些特殊物质，与土壤微生物活动有关。所以，土壤基础地力提高和微生物群落结构与羊肚菌生长密切相关，但是国内外研究甚少。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种促进羊肚菌生长并提高羊肚菌产量的复合微生物菌剂，满足属低温高湿型腐生土生食用菌——羊肚菌对土壤基础肥力的需求，构建有益微生物群落(真菌、细菌和放线菌)。
本发明的目的之二是以提高羊肚菌生产产量为目的，利用农业废弃物畜禽粪便和农作物秸秆为原料，利用复合微生物菌剂促进羊肚菌生长，生产能够满足羊肚菌生长需求的生物有机肥，从而提高羊肚菌生长的土壤基础肥力，满足羊肚菌产量质量。
本发明采用的技术方案是：一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂，包括酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、胶胨样芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)经发酵制成。
优选的，所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC20138的菌株。所述的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC11089的菌株。所述的胶胨样芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC 10013的菌株。所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC10225的菌株。所述的细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)选自中国微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC4.1007的菌株。
上述的一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂，按载体的重量份配比为，酿酒酵母菌载体:枯草芽孢杆菌载体:胶胨样芽孢杆菌载体:解淀粉芽孢杆菌载体:细黄链霉菌载体＝18:25:20:12:25；每种载体上吸附的有效活菌数超过3亿/克；所述的载体由麸皮和米糠按重量比50:50制成。
上述的一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂的制备方法，方法如下：将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、胶胨样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和细黄链霉菌分别于固体培养基活化和液体培养基中逐级培养，再分别于发酵培养基中逐级培养后，当有效活菌数为2.5～5亿/mL时，按1％接种量，分别接种在载体上，当载体上有效活菌数超过3亿/克时，按载体的重量配比，酿酒酵母菌载体:枯草芽孢杆菌载体:胶胨样芽孢杆菌载体:解淀粉芽孢杆菌载体:细黄链霉菌载体＝18:25:20:12:25，取酿酒酵母菌载体、枯草芽孢杆菌载体、胶胨样芽孢杆菌载体、解淀粉芽孢杆菌载体和细黄链霉菌载体，并混合均匀，进行自然固态堆积发酵，温度保持35～38℃，持续24～36小时后，进行低温干燥，干燥温度不高于55℃，当有效活菌总数≥20亿/克，杂菌率≤10％，含水量≤20％时，常温常压真空包装，得复合微生物菌剂。
一种促进羊肚菌生长的生物有机肥，由鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮、鱼粉和权利要求1所述的复合微生物菌剂经发酵制成。
上述的一种促进羊肚菌生长的生物有机肥，按重量份配比，鸡粪40～60份、牛粪20～40份、猪粪5～15份、玉米秸秆30～40份、稻壳粉10～20份、褐煤腐植酸5～15份、麸皮8～12份、鱼粉3～7份；复合微生物菌剂的加入量为，每立方米鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮和鱼粉的混合物中加入0.2kg复合微生物菌剂。
一种促进羊肚菌生长的生物有机肥的制备方法，包括如下步骤：
1)按重量份配比，将40～60份鸡粪、20～40份牛粪、5～15份猪粪、30～40份玉米秸秆、10～20份稻壳粉、5～15份褐煤腐植酸、8～12份麸皮和3～7份鱼粉，用混拌机充分混匀后，加水搅拌至含水量为50～60％，得混合料；
2)将混合料在GALLUS设备中进行发酵处理，进入发酵仓的混合料，通过扣压摩擦使机体内被处理的混合料温度自行升高，处理温度达到55～60℃，立刻进行排堆；
3)将步骤2)的产物进行排堆翻拌发酵处理，排堆翻拌发酵经过物料温度上升期、高温期和降温期，中间采用多次翻拌，在发酵开始降温，温度达到35～40℃时，结合翻拌加入上述的复合微生物菌剂，继续翻拌至发酵终点，形成生物有机肥。
上述的一种促进羊肚菌生长的生物有机肥的制备方法，步骤3)中，温度上升期指从常温上升到50℃、温度高温期为60～65℃；所述的发酵终点是指堆温达到室内温度，水分≤30％，或翻拌后温度升高微弱或不再升高。
上述的一种促进羊肚菌生长的生物有机肥的制备方法，步骤3)中，复合微生物菌剂的加入量为，每立方米鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮和鱼粉的混合物中加入0.2kg复合微生物菌剂。
本发明生物有机肥料的生产技术工艺主要分为两步骤，即主发酵和后发酵：
主发酵是：将鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮和鱼粉，用混拌机充分混匀后，加水搅拌至含水量为50～60％，然后送入发酵仓GALLUS中进行发酵，通过扣压摩擦使机体内被处理的混合物温度自行升高，处理温度达到55-60℃，进入场地排堆。
再排堆翻拌发酵处理，在发酵过程中，物料温度上升快，开始时从常温(25～30℃)启动至高温(50℃)呈直线上升，一般仅需2～3天，接着进入60-65℃高温期，通常可维持5～6天，然后转入中温(45℃)阶段，当加入较多的疏松有机物(玉米杆)时，60-65℃高温可持续10天以上。将主发酵好的成品堆积，经过二次翻拌和使尚未完全分解的有机物质继续分解，变成稳定的腐殖质物质。
后发酵是：当发酵后期，即发酵开始降温时候，在温度下降到35～40℃时，结合翻拌添加复合微生物菌剂，继续发酵至终点。发酵终点标志为堆温达到室内温度相同，水分降低30％以下；或者翻拌后温度升高微弱或不再升高，标志着易分解的碳水化合物和氮化物的初级分解已基本结束，整个周期通常15～20天，冬季时间稍长25～30天。
本发明生物有机肥料的生产技术工艺参数如下：
①发酵参数-物料配比(C/N)
通常微生物繁殖要求的适宜C/N比为20～30，为了创造适宜微生物活动的营养条件，需调整粪肥的C/N比，研究查明，选用鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉，以鸡粪含N高，稻壳和玉米秸秆含碳含量高，因此本发明以畜禽粪便掺入适量的玉米秸秆和稻壳粉混合调节C/N，最适宜的C/N为20:1。
②发酵参数—含水量
发酵前，降低鲜粪水分的方法是掺合低水分的有机物料如泥炭、锯末、秸秆等，在需要接种微生物促进发酵的情况下，掺合适量15～20％已发酵好的有机肥料，具有接菌和调整含水率的双重作用，适宜含水率就为50～60％，物料含水率小于60％。
③发酵参数—温度
进入发酵仓的有机物料，通过扣压摩擦使机体内被处理的混合物温度自行升高，处理温度达到55～60℃。在排堆翻拌，物料温度上升快，开始时从常温(25～30℃)启动至高温(50℃)呈直线上升，一般仅需2～3天，接着进入60～65℃高温期，通常可维持5～6天，然后转入中温(45℃)阶段，翻拌后温度升高微弱或不再升高，标志着易分解的碳水化合物和氮化物的初级分解已基本结束。
④发酵参数—酸碱度(pH)
发酵过程pH适宜6.5～7.5，开始pH由起点的7.5左右下降，堆肥后期会导致升高，前期可以添加石灰1～5kg/t，后期可以添加适量青草，来调减原料pH。
本发明制备的生物有机肥，质量达到国家质量标准，生物有机肥中，有机质45～55％，N、P、K总量5％，有效活菌数≥0.2×108个/g，粪大肠菌数呈阴性，蛔虫卵死亡率100％。
上述的促进羊肚菌生长的生物有机肥在栽培羊肚菌中的应用。方法如下：在播种前，首先将土壤灌透水分，使0～40CM深土壤含水达到含水量30％～40％，经过一遍机耕翻地，在土壤施用上述的生物有机肥，施加量为500公斤/亩；在播种前20天将含有生物有机肥的土壤再翻耕一遍，栽培羊肚菌。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、现有常规栽培羊肚菌的培养基料成本高，发菌速度慢，生长周期长、发菌产量低，采菇期短，应用本发明的复合微生物菌剂可以提高土壤基础肥力，促进羊肚菌生长，丰富有益微生物菌群，发菌时间短，产菇时间长。
2、本发明首次提出采用多种有益菌群(真菌、细菌和放线菌)制备复合微生物菌剂，克服了国内畜禽粪便及秸秆腐熟菌剂分解纤维素和蛋白质的能力弱，功能较单一的缺点，同时，构建羊肚菌生长土壤的有益微生物群落。
3、本发明操作简单，易于大面积示范推广，为规模化生产羊肚菌从根本上解决了产量低且不稳的问题，采用本发明的生物有机肥所得羊肚菌产品品质好。
4、本发明充分利用农业废弃物畜禽粪便和秸秆，不仅解决了环境污染问题，而且有效利用了资源。
5、本发明的促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂及生物有机肥应用于羊肚菌人工栽培，能够促进羊肚菌生产，具有抗杂菌污染效果，增产效果达到提高产量25～50％，羊肚菌品质提高，表现为优质菇率达到80％，提高其商品销售价格。
附图说明
图1是生物有机肥的生产示意图。
具体实施方式
下面结合实例对本发明进一步说明。
实施例1促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂
复合微生物菌剂包括酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、胶胨样芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)经发酵制成。
(一)酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的培养
酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC20138的菌株。
将酿酒酵母菌原菌种于BPY固体培养基(葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏2g，磷酸二氢钾1g，琼脂20g，水1000mL，pH7.0，121℃灭菌20min)中培养。
取原菌种置于BPY液体培养基(葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏2g，磷酸二氢钾1g，水1000mL，pH7.0，121℃灭菌20min)中，溶解后分装试管，高温高压灭菌30分钟，得酿酒酵母菌原菌种液体。
按5％接种量，将酿酒酵母菌原菌种液体接种于液体发酵培养基(葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏2g，磷酸二氢钾1g，水1000mL，pH7.0，121℃灭菌20min)中，30℃，200r/min摇床培养。
当有效活菌数为2.5～5亿/mL时，按1％接种量，接种在载体上，当载体上有效活菌数超过3亿/克时，具备混合条件。
所述的载体由麸皮和米糠按重量比50：50制成。
(二)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的培养
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC11089的菌株。
将枯草芽孢杆菌原菌种于固体培养基(牛肉膏0.3g，NaCl 0.5g，蛋白胨10g，琼脂2g，蒸馏水100mL，pH自然)中培养。
取枯草芽孢杆菌原菌种于液体培养基(牛肉膏0.3g，NaCl 0.5g，蛋白胨10g，蒸馏水100Ml，pH自然)中，溶解后分装试管，高温高压灭菌30分钟，得枯草芽孢杆菌原菌种液体。
按5％接种量，将枯草芽孢杆菌原菌种液体接种于种子罐内发酵培养基(水1000kg、大豆的豆浆8.75kg、淀粉6.5kg、葡萄糖1kg，CaCO3 100g，FeCl3 10g，pH7.0，经121℃实罐灭菌30分钟)中，在28℃～30℃培养24～36小时。
当有效活菌数为2.5～5亿/mL时，按1％接种量，接种在载体上，当载体上有效活菌数超过3亿/克时，具备混合条件。
所述的载体由麸皮和米糠按重量比50：50制成。
(三)胶胨样芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)的培养
胶胨样芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC 10013的菌株。
将胶胨样芽孢杆菌原菌种于固体培养基(酵母膏0.4g，(NH4)2SO4 0.5g，蔗糖0.3g，NaCl 0.01g，MgSO4·7H2O 0.05g，FeCl3 0.001g，CaCO3 0.3g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，PH7.0—7.2；经纱布过滤，滤液加水溶解后置于试管，高温高压灭菌30分钟)中培养。
取胶胨样芽孢杆菌原菌种于液体培养基(酵母膏0.4g，(NH4)2SO4 0.5g，蔗糖0.3g，NaCl 0.01g，MgSO4·7H2O 0.05g，FeCl3 0.001g，CaCO3 0.3g，蒸馏水1000ml，PH7.0—7.2)中，经纱布过滤，滤液置于试管中，高温高压灭菌30分钟，得胶胨样芽孢杆菌原菌种液体。
按5％接种量，将胶胨样芽孢杆菌原菌种液体接种于种子罐内发酵培养基(水1000kg，大豆的豆浆8.75kg，淀粉6.5kg，葡萄糖1kg，CaCO3 100g，FeCl3 10g，pH7.0，经121℃实罐灭菌30分钟)中，在28℃～30℃培养45～50小时。
当有效活菌数为2.5～5亿/mL时，按1％接种量，接种在载体上，当载体上有效活菌数超过3亿/克时，具备混合条件。
所述的载体由麸皮和米糠按重量比50：50制成。
(四)解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的培养
解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)选自中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为ACCC10225的菌株。
将解淀粉芽孢杆菌原菌种于BPY固体培养基(葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏2g，磷酸二氢钾1g，琼脂20g，水1000mL，pH7.0，121℃灭菌20min)中培养。进行培养48小时后，制成解淀粉芽孢杆菌含量为109个/mL的菌悬液。然后，按照5％的接种量，接入到BPY液体培养基(葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏2g，磷酸二氢钾1g，水1000mL，pH7.0，121℃灭菌20min)中，在200r/min摇床上，30±1℃，培养45-50小时。
当有效活菌数为2.5～5亿/mL时，按1％接种量，接种在载体上，当载体上有效活菌数超过3亿/克时，具备混合条件。
所述的载体由麸皮和米糠按重量比50：50制成。
(五)细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)的培养
细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)选自中国微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC4.1007的菌株。
取细黄链霉菌原菌种，采用高氏合成1号培养基(KNO3 1g，K2HPO4 0.5g，NaCl0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，MgSO4·7H2O 0.5g，可溶性淀粉20g，pH7.2～7.4，蒸馏水1000ml)，溶解后分装试管，高温高压灭菌30分钟，得细黄链霉菌原菌种液体。
按5％接种量，将细黄链霉菌原菌种液体接种于种子罐内发酵培养基(水1000kg，大豆的豆浆8.75kg，淀粉6.5kg，葡萄糖1kg，土豆的蒸煮液2kg，pH7.0，经121℃实罐灭菌30分钟)中，在28℃～30℃培养45-50小时。
当有效活菌数为2.5～5亿/mL时，按1％接种量，接种在载体上，当载体上有效活菌数超过3亿/克时，具备混合条件。
所述的载体由麸皮和米糠按重量比50：50制成。
(六)混合发酵
将具备混合条件的吸附有不同菌种的载体，按载体的重量配比，酿酒酵母菌载体:枯草芽孢杆菌载体:胶胨样芽孢杆菌载体:解淀粉芽孢杆菌载体:细黄链霉菌载体＝18:25:20:12:25，取酿酒酵母菌载体、枯草芽孢杆菌载体、胶胨样芽孢杆菌载体、解淀粉芽孢杆菌载体和细黄链霉菌载体，并混合均匀，进行自然固态堆积发酵，温度保持35～38℃，持续24～36小时后，进行低温干燥，干燥温度不高于55℃，当有效活菌总数≥20亿/克，杂菌率≤10％，含水量≤20％时，常温常压真空包装得复合微生物菌剂。
实施例2促进羊肚菌生长的生物有机肥
(一)制备方法
1)按重量份配比，将50份鸡粪、30份牛粪、10份猪粪、35份玉米秸秆、15份稻壳粉、10份褐煤腐植酸、10份麸皮和5份鱼粉，用混拌机充分混匀后，加水搅拌至含水量为50-60％，得混合料。
所述的鸡粪有机质含量≥45％；秸秆有机质≥46％；猪粪有机质含量≥45％；褐煤腐植酸含量≥50％。
2)主发酵：将混合料在GALLUS设备或发酵槽中进行发酵处理，进入发酵仓的混合料，通过扣压摩擦使机体内被处理的混合料温度自行升高，处理温度达到55-60℃时，立刻进行排堆；
3)后发酵，将步骤2)的产物进行排堆翻拌发酵处理，排堆翻拌发酵经过物料温度上升期、高温期和降温期，中间经过多次翻拌，在发酵开始降温，温度达到35-40℃时，结合翻拌加入实施例1制备的复合微生物菌剂，每立方米鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮和鱼粉的混合物中加入0.2kg复合微生物菌剂，继续翻拌至发酵终点，形成生物有机肥。具体为：
将步骤2)在排堆翻拌发酵处理中，物料温度上升快，开始时从常温(25～30℃)启动至高温(50℃)呈直线上升，一般堆温控制最佳达到60-65℃，通常可维持5～6天，然后转入中温(45℃)阶段。主发酵好的成品堆积，经过二次翻拌和添加实施例1制备的复合微生物菌剂使尚未完全分解的有机物质继续分解，变成稳定的腐殖质物质。当发酵后期，即发酵开始降温时候，在温度下降到35-40℃时，结合翻拌添加实施例1制备的复合微生物菌剂，继续发酵至终点，制得生物有机肥。发酵终点标志为堆温达到室内温度相同，水分降低30％以下，或者翻拌后温度升高微弱或不再升高，标志着易分解的碳水化合物和氮化物的初级分解已基本结束，整个周期通常15～20天，冬季时间稍长25～30天。
实施例3生物有机肥在羊肚菌人工栽培中的应用及效果
(一)生物有机肥使用方法
在播种前，首先将土壤灌透水分，使0～40cm深土壤含水达到含水量30％-40％，经过一遍机耕翻地，于土壤中施用实施例2制备的生物有机肥，施加量为500kg/亩；然后在播种前20天将含有生物有机肥的土壤再翻耕一遍，人工栽培羊肚菌。
(二)生物有机肥施用效果
2015-2016年，在辽宁省农业科学院食用菌研究所基地宽甸、北镇的羊肚菌高效栽培示范基地，进行不同有机肥对羊肚菌产量影响小区试验中，共设计5个处理：
处理1：对照不施肥
处理2：基施草炭500公斤/亩
处理3：基施香菇菌糠1500斤/亩
处理4：基施牛粪1500公斤/亩
处理5：本发明实施例2生物有机肥500kg/亩
1、不同施肥处理对菌丝生长状况
表1不同有机肥对土壤菌丝生长状况及形态变化
处理 生长速度mm/d 满床时间d 长势 形态学变化
1 6.5 30 ++ 先期浅棕色时间长，变棕红色慢
2 9.1 24 +++ 先期浅棕色时间较短，变棕红色快
3 7.5 27 +++ 先期浅棕色时间较长，变棕红色较快
4 7.0 27 ++++ 先期浅棕色时间较长，变棕红色较快
5 8.6 25 +++ 先期浅棕色时间较短，变棕红色快
如表1所示，不同实验处理有很大差异，其中处理2和5均较对照1，开始进入菌袋时间提前2-3天，以处理2和处理5为最好，说明生物有机肥提高了土壤内羊肚菌丝进入营养袋速度，满袋时间缩短，生长势较强。同时菌丝在生长阶段颜色变化表现提前改变颜色。一般菌丝初期均为浅棕色，且菌丝尖端呈白色，在生长后期逐渐转变成棕红色。不同有机肥均较对照好，不同有机肥之间看，以生物有机肥和草炭有机肥最好。
2、不同处理菌核特征分析
表2不同有机肥施肥处理菌核的培养特征差异
处理 开始形成时间d 密度 显微镜下纽结时间早晚
1 29 + 晚
2 24 +++ 早
3 27 ++ 较早
4 27 ++ 较早
5 25 +++ 早
+密度小；++密度较大；+++密度大；-无菌核形成
由表2可知，其菌核的形成特征随着不同有机肥较对照具有明显的差异。不同有机肥处理均较对照处理形成形成菌核时间较早，提前2～7天，且密度随着培养时间的延长迅速增大；从菌核形成的早晚和密度来看，处理2和处理5生物有机肥和草炭有机肥较适合于菌株的生长，产生菌核所需要的时间最短且菌核数量最多。
3、不同有机肥处理生物学产量影响
表3不同栽培配方对子实体鲜重及干重变化的影响
由表3可见，试验表明生物有机肥和草炭有机肥最好，单株鲜重、单株干重、折合每亩鲜产量、折合每亩干产量最高。单产达到712～730斤/亩，为提高产量效益提供了实践依据。
4、不同有机肥处理土壤有机质、速效氮、速效磷及速效钾含量变化
表4不同有机肥处理土壤有机质、速效氮、速效磷及速效钾含量变化
处理 有机质g/kg 碱解氮mg/kg 速效磷mg/kg 速效钾mg/kg PH
1 2.15 95.8 35.8 118.0 7.45
2 3.0 123 51.2 151 7.30
3 2.55 115 40.2 125 7.22
4 2.43 109 41.7 128 7.38
5 2.8 121 48.2 142 7.2
由表4可见，各施肥处理的土壤全量和速效养分含量分别较不施肥处理均有显著提高。其中，土壤有机质增幅较小，而速效养分(碱解氮、速效磷、速效钾)增加幅度大，PH变化无规律。且施肥较不施肥处理最大分别增加了有机质25.58％，碱解氮28.39％，速效磷43.0％，速效钾27.97％。说明本发明的生物有机肥不仅本身对土壤养分有添加作用，而且其所含有大量微生物进入土壤后，有助于分解和释放速效养分，供作物吸收利用，并且本底有机质含量越低，肥料施入土壤后，其微生物的生命活动就越强，同时还加速促进施入土壤的有机质的矿化。

Claims (10)

1.一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂，其特征在于，包括酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、胶胨样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和细黄链霉菌经发酵制成。
2.根据权利要求1所述的一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂，其特征在于，按载体的重量份配比为，酿酒酵母菌载体:枯草芽孢杆菌载体:胶胨样芽孢杆菌载体:解淀粉芽孢杆菌载体:细黄链霉菌载体＝18:25:20:12:25；每种载体上吸附的有效活菌数大于3亿/克；所述的载体由麸皮和米糠按重量比50:50制成。
3.权利要求2所述的一种促进羊肚菌生长的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，方法如下：将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、胶胨样芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和细黄链霉菌分别于固体培养基活化和液体培养基中逐级培养，再分别于发酵培养基中逐级培养后，当有效活菌数为2.5～5亿/mL时，按1％接种量，分别接种在载体上，当载体上有效活菌数超过3亿/克时，按载体的重量配比，酿酒酵母菌载体:枯草芽孢杆菌载体:胶胨样芽孢杆菌载体:解淀粉芽孢杆菌载体:细黄链霉菌载体＝18:25:20:12:25，取酿酒酵母菌载体、枯草芽孢杆菌载体、胶胨样芽孢杆菌载体、解淀粉芽孢杆菌载体和细黄链霉菌载体，并混合均匀，进行自然固态堆积发酵，温度保持35～38℃，持续24～36小时后，进行低温干燥，干燥温度不高于55℃，当有效活菌总数≥20亿/克，杂菌率≤10％，含水量≤20％时，常温常压真空包装，得复合微生物菌剂。
4.一种促进羊肚菌生长的生物有机肥，其特征在于，由鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮、鱼粉和权利要求1所述的复合微生物菌剂经发酵制成。
5.根据权利要求4所述的一种促进羊肚菌生长的生物有机肥，其特征在于，按重量份配比，鸡粪40～60份、牛粪20～40份、猪粪5～15份、玉米秸秆30～40份、稻壳粉10～20份、褐煤腐植酸5～15份、麸皮8～12份、鱼粉3～7份；复合微生物菌剂的加入量为，每立方米鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮和鱼粉的混合物中加入0.2kg复合微生物菌剂。
6.一种促进羊肚菌生长的生物有机肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)按重量份配比，将40～60份鸡粪、20～40份牛粪、5～15份猪粪、30～40份玉米秸秆、10～20份稻壳粉、5～15份褐煤腐植酸、8～12份麸皮和3～7份鱼粉，用混拌机充分混匀后，加水搅拌至含水量为50～60％，得混合料；
2)将混合料在GALLUS设备中进行发酵处理，进入发酵仓的混合料，通过扣压摩擦使机体内被处理的混合料温度自行升高，处理温度达到55～60℃，立刻进行排堆；
3)将步骤2)的产物进行排堆翻拌发酵处理，排堆翻拌发酵经过物料温度上升期、高温期和降温期，中间采用多次翻堆，在发酵开始降温，温度达到35～40℃时，结合翻拌加入权利要求1所述的复合微生物菌剂，继续翻拌至发酵终点，形成生物有机肥。
7.根据权利要求6所述的一种促进羊肚菌生长的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤3)中，温度上升期指从常温上升到50℃、温度高温期为60～65℃；所述的发酵终点是指堆温达到室内温度，水分≤30％，或翻拌后温度升高微弱或不再升高。
8.根据权利要求6所述的一种促进羊肚菌生长的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤3)中，复合微生物菌剂的加入量为，每立方米鸡粪、牛粪、猪粪、玉米秸秆、稻壳粉、褐煤腐植酸、麸皮和鱼粉的混合物中加入0.2kg复合微生物菌剂。
9.权利要求4或5所述的促进羊肚菌生长的生物有机肥在栽培羊肚菌中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，方法如下：在播种前，首先将土壤灌透水分，使0～40cm深土壤含水达到含水量30％～40％，经过一遍机耕翻地，于土壤中施用权利要求4或5所述的生物有机肥，施加量为500kg/亩；在播种前20天将含有生物有机肥的土壤再翻耕一遍，栽培羊肚菌。
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