CN100523168C - 活性生化菌的培养制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种高效活性生化菌的培养制备方法,以解决生产中对有益微生物的需要,生化降解纤维素、半纤维素、木质素,增加秸秆粗蛋白质、氨基酸含量的问题,其解决的技术方案是:将采到的反刍家畜瘤胃内容物或胃液加入水,接种于由食盐、甘草粉、碳酸氢铵等组成的培养基中进行一级生化,在适宜的温度和PH值下进行厌氧发酵,扩繁后再加入水及培养基在与一级生化相同的条件下进行二级生化制成活性生化菌(液)即可,本发明方法简单,培植效果好,其生化菌用途广,价值大,有广阔的开发应用前景及巨大的经济效益。

Description

活性生化菌的培养制备方法
一、技术领域
本发明涉及一种有多种功效的高效活性生化菌的培养制备方法。
二、背景技术
农业微生物在农作物种植业、畜禽养殖业、水产养殖业、农产品加工、农业环境保护及农业生产技术等领域有广阔的应用前景。目前发达国家在农业生产中应用微生物技术十分广泛,从过去单一菌种的应用发展到高活性菌群,广泛用于生产生物有机肥、生物农药和生物饲料,用于农产品保鲜或用于环境保护(污水垃圾处理),如日本的酵素菌、EM、万田发酵三大品牌。我国目前农业微生物库保藏菌种3000多株,而用于生物肥料中的有益微生物2003年统计才80多种,尤其用于肥料生产的菌种种类少、菌量少。我国利用微生物生产生物有机肥料才开始起步,还很落后。随着科技的发展和生产实际需要,截止到2003年末已有300家生物有机肥产品在农业部登记、生产,还有许多正在申报登记,总产量超过350万吨,是1995年的8倍。从以上看出农业微生物在有机肥料上的应用发展势头喜人,形势逼人,大有发展前途。21世纪是一个生物学更加深刻影响人类社会各个领域的世纪。但是,由于种种原因,我国目前有益微生物的繁殖量小,不能满足生产中的实际需要,研究开发培植菌种、多功能的优良微生物菌群,是我国科技界面临的重大课题,有益微生物的培养繁殖是正在努力解决的问题。
三、发明内容
针对以上情况,本发明之目的就是提供一种高效活性生化菌的培养制备方法,以解决生产中对有益微生物的需要,生化降解纤维素、半纤维素、木质素,增加秸秆粗蛋白质、氨基酸含量的问题,其解决的技术方案是:将采到的反刍家畜瘤胃内容物或胃液加入水,接种于由食盐、甘草粉、碳酸氢铵等组成的培养基中进行一级生化,在适宜的温度和PH值下进行厌氧发酵,扩繁后再加入水及培养基在与一级生化相同的条件下进行二级生化制成活性生化菌(液)即可,本发明方法简单,培植效果好,其生化菌用途广,价值大,有广阔的开发应用前景及巨大的经济效益。
四、具体实施方式
以下结合实际情况对本发明的具体实施方式作详细说明。
本发明是首先提取瘤胃液,瘤胃液是指反刍家畜瘤胃的内容物或胃液,方法是从宰杀的健康反刍家畜胃中直接获取或用导管从健康反刍的家畜瘤胃内吸出,加水扩菌液后,再加入培养基进行分级原菌扩菌培养(瘤胃液内含有的有益活性生化菌称为原菌),先一级生化扩菌培养,再进行二级生化及菌种继代,所说的一级生化原菌扩大培养,是在种子缸内放入温度为45℃,体积为瘤胃液6倍量的水制成瘤胃液原菌7倍量的原菌水混液备用,再将由以原菌水混液重量计的秸秆粉2%、精料玉米粉或优质干草0.5%、食盐0.1%和碳酸氢铵0.6%-0.8%混合搅拌均匀制成培养基,在PH值为7.2±0.2,温度为42℃±2℃时,将已制成的原菌水混液接种在培养基中,立即用塑料布封口、加盖,造成厌氧环境,密封2-3天后,观察滤纸崩解情况,作为分解纤维、木质素的指标,如滤纸崩解即可;然后再进行二级生化及菌种继代;
所说的二级生化及菌种继代,是将一级生化扩大培殖好的菌液加入其体积3倍量的水制成二级扩菌液(即一级生化后的菌液加水扩大4倍成二级扩菌液),再接种在PH为7.2±0.2,温度为42℃±2℃的培养基中,培养基由以二级扩菌液重量计的:秸杆粉2%、精料玉米粉或优质干草0.5%、食盐0.1%和碳酸氢铵0.6-0.8%混合搅拌均匀制成,接种后,立即用塑料布封口,加盖,造成厌氧环境,密封2-3天后,过滤纸崩解,纤维分解率为1.5-3%,其蛋白质约增加50%,即可为所需活性生化菌(液)。菌种继代一般可持续2-3个月。优质种子(菌)液的纤维分解率一般为15%-30%,真蛋白质约增加50%。如果达不到这两项指标,而且种子(菌)液生化能力下降,滤纸在2-3天内不能崩解,则应重新制种。如有必要,还可进行三级、四级等多级扩菌,方法同一、二级,不一一多述。
所说的反刍家畜一般为牛或羊;为了保证原菌的足够数量,在从反刍的家畜瘤胃中取瘤胃液(胃中的胃液)前尽量增加瘤胃内菌种的数量,方法是,在提取瘤胃液前3-5天,要给反刍家畜(牛、羊)补饲适量的精料玉米粉或优质豆科牧草等。所说的秸杆粉为玉米杆或麦秸或花生秧或红薯秧粉碎制成的粉。精料也可为麦麸、常用的精饲料,豆饼、花生饼等。
上述所说的各种原料市场上均有售。本发明的巨大意义在于:
1、用高效活性生化菌制作生化饲料用于饲喂猪、鸡、鸭和鱼等,可以替代50%-80%的精料,经实验,用含有60%的秸秆生化饲料喂猪,日增重550克,出栏时每头猪可节约精料100千克,喂鸭25天,在平均每只增重相当的情况下,可节约饲料费用约0.6元。一般日饲喂2-3次,每日饲喂量不超过精料的80%。秸秆经过生化处理后营养成分可大大改善,质地变软、黏,并具有酸香味,家畜喜食。生化后的秸秆有15%-20%的粗纤维被分解,最高可达35%;真蛋白质增加50%以上,且含有18种氨基酸;粗脂肪增加60%以上,挥发性脂肪酸也显著增加。用生化饲料喂牛,可以替代50%-90%的精料。
2、本发明培植的高效活性生化菌用于生产有机肥不仅含有氮、磷、钾、微量元素,而且还有多种维生素、氨基酸、糖类化合物。质类化合物、纤维素、核酸及SOD等多种酶,可有效疏松土壤,培肥地力,保水保肥,提高土壤CEC值,降低EC值,提高地温2-4度,根系发达,生长茁壮,座果率提高15-25%,提前成熟8-12天,保持土壤适当的PH值,有改良盐碱地的作用;减少病虫害发生,减少化学农药用量和次数,提高作物品质,大大降低农产品硝酸盐含量,糖度提高2-2.5度,耐储藏;农作物提高产量25%以上,降低成本,投入产出比高,技术容易掌握;
3、本发明高效活性生化菌可用于生化中药,制作农用杀菌剂、杀虫剂等。微生物生化中药剂,靠代谢产生的有机酸、醇和酶等物质,溶解中药中的矿元素,分解、转化中药中的植物碱、黄酮类、萜稀类等杀菌成分,提高药效30倍以上,加上代谢产生的几十种高菌素,能大大提高防治病虫害的效果。中药杀菌剂、杀虫剂,还可以配合化学农药使用,不仅可以减少一半农药用量,还可以增加药效,而且喷施后5-7天可以降解农药,大大减少农药在农药产品中的残留量。
4、成本低,效益高。
由本发明制成的活性生化菌用于生产生化饲料,其生化饲料与尿素氨化饲料相比,成本仅为尿素氨化饲料的70%。氨化饲料一般要在秸秆中加入4%左右的尿素,即每1000千克秸秆需用40千克的尿素;而生化饲料仅需加入0.5-1.0千克活性生化菌,既降低了成本,又缓解了畜牧业与农业争化肥的矛盾,且肉质也得到了很大的提高。
5、农作物秸杆得到了充分利用,克服了因秸杆的焚烧对空气环境造成的污染。
总之,本发明的研制成功,开拓了微生菌类的应用,其推广开来,经济和社会效益巨大,造益于全社会。

Claims (4)

1、一种活性生化菌的培养制备方法,其特征在于,首先提取瘤胃液,再进行分级原菌扩菌培养,方法是从宰杀的健康反刍家畜胃中直接获取,进行一级生化原菌扩大培养,即在种子缸内放入温度为45℃、体积为瘤胃液6倍量的水、制成瘤胃液原菌7倍量的原菌水混液备用,再将由以原菌水混液重量计的秸秆粉2%、玉米粉或优质干草0.5%、食盐0.1%和碳酸氢铵0.6%-0.8%混合搅拌均匀制成培养基,在PH值为7.2±0.2,温度为42℃±2℃时,将已制成的原菌水混液接种在培养基中,立即用塑料布封口、加盖,造成厌氧环境,密封2-3天后,达到滤纸崩解,然后再进行二级生化及菌种继代,所说的二级生化及菌种继代,是将一级生化扩大培殖好的菌液加入其体积3倍量的水制成二级扩菌液,再接种在PH为7.2±0.2,温度为42℃±2℃的培养基中,培养基由以二级扩菌液重量计的:秸杆粉2%、精料玉米粉或优质干草0.5%、食盐0.1%和碳酸氢铵0.6-0.8%混合搅拌均匀制成,接种后,立即用塑料布封口,加盖,造成厌氧环境,密封2-3天后,达到滤纸崩解、纤维分解率为1.5-3%、蛋白质增加50%,即为所需活性生化菌。
2、根据权利要求1所述的活性生化菌的培养制备方法,其特征在于,所说的反刍家畜为牛或羊。
3、根据权利要求1所述的活性生化菌的培养制备方法,其特征在于,在所说的提取反刍家畜瘤胃液前3-5天,给反刍家畜补饲适量的玉米粉或优质豆科牧草。
4、根据权利要求1所述的活性生化菌的培养制备方法,其特征在于,秸杆粉为玉米杆或麦秸或花生秧或红薯秧粉碎制成的粉。
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采用未培养技术对荷斯坦奶牛瘤胃细菌多样性进行初步分析. 王远亮,杨瑞红,毛爱军等.微生物学报,第45卷第6期. 2005
采用未培养技术对荷斯坦奶牛瘤胃细菌多样性进行初步分析. 王远亮,杨瑞红,毛爱军等.微生物学报,第45卷第6期. 2005 *

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