JP2002513568A - T細胞同時刺激シグナル2(b7/cd28相互作用)を遮断することによる免疫抑制 - Google Patents
T細胞同時刺激シグナル2(b7/cd28相互作用)を遮断することによる免疫抑制Info
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Abstract
Description
臓器の供給が限定されていることは、多くの患者が、移植される臓器(例えば、
腎臓、心臓、または肝臓)を受ける機会がほとんどかまたは全くないことを意味
する。これらの人々の非常に多くが、臓器を待っている間に死亡する。1つの潜
在的な解決案は、「異種移植」、すなわち、ヒト以外の(「異種」)動物ドナー
由来の臓器の使用である。
学的および生理学的にヒトに類似しており、そして供給が豊富であるからである
。しかし、ブタの臓器は、超急性拒絶反応(HAR)と呼ばれる体液性のプロセ
スによって、血管再生の際に迅速に拒絶される。これは、異種移植片の内皮細胞
(EC)上の抗原を認識し、そしてそれと交差反応する、レシピエント中に天然
に存在する抗体によって引き起こされる。この認識は、補体カスケードを誘発し
、これは次いで拒絶を導く。
子が、臓器レシピエント中の補体の完全な活性化を防止するために、異種移植片
上で発現されるべきであることを示唆する。このアプローチは、超急性拒絶を生
き延びるように設計された臓器を有するトランスジェニック動物を作製するため
に開発および応用されている(例えば、参考文献1および2)。
る。これは、レシピエントの炎症性細胞の浸潤および移植片血管の血栓(虚血を
導く)によって特徴づけられる。WO98/42850は、異種移植片の表面上
での凝固インヒビターの発現が、この型の拒絶の血栓症的局面を阻害し得ること
を示す。
種抗原に対して感作され得る、「直接」および「間接」の2つの経路が存在する
。直接経路には、異種のドナー細胞上のT細胞とMHC分子との間の相互作用が
含まれる。一方、間接経路には、MHCクラスIIの状況における宿主APCに
よるプロセスされた異種抗原の提示が含まれる。間接T細胞応答は、同種抗原に
対してよりも異種抗原に対してより強力であり(3)、これは、直接経路につい
ての知見(4)とは対照的であり、これは、異種抗原に対する直接および間接の
ヒトT細胞応答の両方が、異種移植が効果的である場合には抑制されなければな
らないことを示す。
うである(5,6)。持続的な間接的免疫原性に起因する慢性異種移植片拒絶を
予防するのに必要とされる免疫抑制のレベルを維持することは、従来の全身的免
疫抑制薬物を使用したのでは、感染および新生物形成の危険性が増大するために
、実行することができない(例えば、7)。異種移植が臨床的に成功すべき場合
、移植片特異的免疫抑制を促進するための方法が、全身性治療の必要性を減少さ
せるために必要となる。
単独で、続く抗原への曝露の後のIL−2を産生することができないとして規定
される寛容の状態(「アネルギー」)を誘導する。完全な活性化が生じるために
は、その細胞は、シグナル2で同時刺激されなければならない。
自己MHCと複合体化した抗原性ペプチドのいずれかとの相互作用によって提供
される;シグナル2は、T細胞上の抗原提示細胞(APC)およびCD28上の
B7分子(B7.1およびB7.2、それぞれCD80およびCD86としても
知られる)間の相互作用によって供給される。
果たしてきた。シグナル1は、TCR/CD3複合体に対して指向されるmAb
によって供給され得、そしてCD28に対して指向されるmAbは、シグナル2
を提供し得る。実際、T細胞は、2つの適切なmAbによって、APCの非存在
下でさえ、活性化され得る。活性化はまた、mAbを使用して、提供されるとい
うよりもむしろ、防止され得る。シグナル2は、例えば、B7またはCD28の
いずれかを遮断するmAbを使用して遮断され得る。
用して遮断され得る。CTLA−4は、T細胞活性化の天然の負の調節因子であ
り、活性化されたT細胞上でのCTLA−4に対するB7結合は、B7/CD2
8相互作用によって提供される同時刺激シグナルをアンタゴナイズする。抗体の
定常ドメインに結合したCTLA−4の細胞外ドメインからなるCTLA−4の
可溶性形態は、T細胞活性化を遮断するように構築されている(8,9)。これ
らの分子(「CTLA4−Ig」または「CTLA4−Fc」)は、抗B7抗体
に対して類似の様式で振る舞い、そしてインビトロおよびインビボで、B7の同
時刺激機能を予防するため、従って、寛容を促進するために使用されてきた(1
0)。
相互作用を標的化することは、移植片生存を増強する有効なストラテジーである
ことが示されている。CTLA4−Igを使用して、延長された生存が種々の同
種移植片モデルにおいて(例えば、11)、およびヒト対マウス島異種移植片モ
デルにおいて(12)、得られている。異種移植片モデルにおいて、CTLA4
−Ig投与は、直接反応性T細胞をアネルギー性にすることによって、異種抗原
に対して完全な寛容を引き起こした。
提供することである。特に、本発明の目的は、異種移植された臓器のT細胞媒介
拒絶を、臓器レシピエントのT細胞が臓器に対する免疫応答を高めることを防止
することによって阻害することである。より詳細には、この免疫応答を、異種移
植された臓器を認識するレシピエントのT細胞におけるアネルギーを誘導し、結
果として異種移植片特異的T細胞寛容を生じることによって防止することが目的
である。
種反応性T細胞の活性化を予防するために、同時刺激シグナル2の送達を遮断す
ることによって阻害するための方法および生物学的試薬を提供する。
面は、単独で、または種々の組み合わせで使用され得る。さらに、従来の免疫抑
制技術は、本発明の技術とともに使用され得る。
る。
種ドナー臓器からの可溶性形態のCTLA−4を投与することによって防止され
る。例えば、ブタ臓器(ドナー)がヒト(レシピエント)に移植された場合、可
溶性形態のブタCTLA−4(以下を参照のこと)が、ヒトに投与される。
由来のB7に結合し得るが、最も高いアビディティーが、同種異系B7に対して
見出される。従って、ドナー生物由来の可溶性CTLA−4は、レシピエントB
7(正常細胞上の)およびドナーB7(異種移植された細胞上の)の両方に結合
し得るが、それは、優先的に異種移植片上のB7に結合する。これは、全身性の
免疫抑制を導く傾向があるレシピエント生物からのCTLA−4の投与とは異な
り、異種移植片特異的免疫抑制を生じる。異種ドナー細胞上のB7とレシピエン
トT細胞上のCD28との間の相互作用を遮断することにより、同時刺激シグナ
ル2は、レシピエントのT細胞に送達されない。それゆえ、異種反応性レシピエ
ントT細胞は、アネルギー性にされる。
を提供し、この方法は、そのレシピエントに、異種ドナー生物由来の可溶性形態
のCTLA−4タンパク質を投与する工程を包含する。
るドナー生物由来のCTLA−4のフラグメントを含む。このフラグメントは、
好ましくは、CTLA−4の完全な細胞外ドメインである。
IgG1のCγ1鎖)をさらに含む。好ましくは、これは、この分子のこの部分
に対する免疫応答を予防するために、レシピエント生物由来である。
ク質は、ヒトCγ1配列に融合したブタCTLA−4の細胞外ドメインを包含し
得る。
LA−4/ヒトIgγ1定常領域)および9(マウスCTLA−4/ヒトIgγ
1)に記載される。
薬の調製における異種CTLA−4の可溶性形態の使用を提供する。
は、レシピエントが異種細胞への曝露を包含する前移植免疫プログラムを実行し
ているとき、最も有用である。
たCTLA−4である、配列番号1として図2に示されるアミノ酸配列を含むタ
ンパク質を提供する。これは、本発明における使用のためのCTLA−4の好ま
しい形態である。このタンパク質の細胞外ドメインはまた、図2に示される。
る核酸を提供する。これは、好ましくは、配列番号2として図3に示されるヌク
レオチド配列を含む。
ーで形質転換された細胞を提供する。
LA−4についてのリガンドを発現することによってアンタゴナイズされる。こ
のリガンドは、レシピエントの活性化されたT細胞上のCTLA−4に結合し、
そしてドナーB7とレシピエントCD28との間の相互作用によって提供される
同時刺激シグナルをアンタゴナイズする。これは、異種反応性T細胞をアネルギ
ー性にする。
ンパク質(すなわち、異なるタンパク質の領域を1つのタンパク質へ組み合わせ
ることによって産生されるタンパク質)である。従って、その最も単純な形態に
おいて、タンパク質は、このように、融合タンパク質である。
−4に結合し得るように、細胞膜に結合していることを意味する。そのタンパク
質を細胞膜に結合させるために、そのタンパク質は、例えば、膜タンパク質から
の膜貫通配列、またはGPIアンカーを含み得る。好ましい膜貫通配列は、CD
4またはCD8の膜貫通配列である。あるいは、そのタンパク質は、それをその
タンパク質自体が細胞膜に挿入されることなしに、膜タンパク質と細胞外で結合
するようにする配列を含み得る。
通領域(例えば、CD8細胞質ドメイン)と通常結合する細胞質ドメインを含む
こともまた望ましいかもしれない。同様に、そのタンパク質が、CTLA−4結
合ドメインが細胞膜から分離するために、細胞膜と直に並列する細胞外配列(例
えば、CD4ドメイン3および4)を含むことは望ましいかもしれない。グリシ
ンリンカーのような合成リンカーは、同じ目的で使用され得る。
る特異性を有する抗体を含む。これは、好ましくは、1本鎖抗体(sFv)であ
る。それは、好ましくは、レシピエント生物のCTLA−4に対して特異的であ
る。
介してCD8の膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインに融合した1本鎖抗体を含
み得る。
形質転換された細胞を提供する。
する送達システム、およびこの材料を標的細胞に送達する手段を提供する。
結合し得るように、その表面上に第2の局面のタンパク質を発現する細胞を提供
する。
、その表面上にMHC(クラスIまたはクラスII)を発現する。従って、適切
には、本発明の細胞は、ドナープロフェッショナルAPCである。しかし、抗C
TLA−4タンパク質によって提供されるアンタゴニスト的シグナルのために、
これらのプロフェッショナルAPCは、B7ネガティブ細胞として機能的に振る
舞う。
物を提供する。
、このプロセスは、その生物学的組織を、それがその細胞の表面上の第2の局面
に従う1つ以上のタンパク質を発現するように処理する工程を包含する。
ば、ヒト)へ、本発明に従う生物学的組織を移植する工程を包含する移植の方法
を提供する。
が移植される前にレシピエントT細胞において誘導される寛容をもたらす。この
ような前移植レジメンにおいて使用される細胞が、好ましくは、MHCクラスI
Iを発現するのに対し、その細胞はプロフェッショナルAPCである必要はない
ことが理解される。
たは核酸を提供する。
の製造における、第2の局面に従うタンパク質、核酸、ベクター、または送達シ
ステムの使用を提供する。
表面上で、レシピエント生物MHCクラスIIを発現することによって防止され
る。例えば、ブタ臓器(ドナー)が、ヒト(レシピエント)に移植される場合、
そのブタ臓器は、ヒトMHCクラスIIを発現する。
局面の一方または両方を利用することによって回避される場合でも、間接的活性
化は、なお生じ得、レシピエントAPCによるMHCクラスIIに対する異種抗
原のプロセシングおよび提示を包含する。
ドナー細胞は、自己MHCクラスIIの状況において異種抗原をレシピエントT
細胞に提示する。ドナー細胞がB7を発現しない場合、またはB7が遮断されて
いる場合、異種反応性レシピエントT細胞は、同時刺激シグナル2を受けず、そ
してそのレシピエントのAPCが異種抗原自体を提示する機会を有する前に、ア
ネルギー性になる。
する細胞を提供する。好ましくは、これは、その表面上にヒトMHCクラスII
を発現するブタ細胞である。
ましくは、その特定のレシピエントと最大適合性の組織型である。これは、代表
的には、例えば、異種ドナー細胞上に発現されるHLA−DRが、特定のレシピ
エントのHLA−DRと整合するはずであることを確実にすることを包含する。
ミラーの溝内に提示することを確実にするために、その細胞は、以下の3つのタ
ンパク質(そのそれぞれが、抗原プロセッシングにおいて重要な役割を有する(
不変鎖(invariant chain)、HLA−DRα、およびHLA−
DRβ))の1つ以上をまた、発現するはずであることが好ましい。
しない。従って、代表的には、ドナー細胞は、プロフェッショナルAPCではな
い。しかし、トランスフェクトされた非免疫原性APC(例えば、B7+であり
得る、未成熟樹状細胞)であり得る。
物を提供する。
、そのプロセスは、それが異種MHCクラスIIをその細胞の表面上に発現する
ように、その生物学的組織を処置する工程を包含する。
時刺激シグナルを提供し得ない細胞、例えば、B7ネガティブ細胞)を単離する
工程、およびこれらの細胞をHLA−DRでトランスフェクトする工程を包含す
る。HLA−DRは、特定のレシピエントに対して好ましい組織型である。さら
に、その細胞はまた、効率的な抗原プロセッシングのために必要とされる他のタ
ンパク質でトランスフェクトされ得る。適切な非免疫原性細胞の例には、B7ネ
ガティブであり、そして同種異系移植の齧歯類モデルにおける寛容を誘導するこ
とが示されている腎尿細管上皮細胞が含まれる。
ば、ヒト)へ、第3の局面に従う生物学的組織を移植する工程を包含する移植の
方法を提供する。
が移植される前にレシピエントT細胞において誘導される、寛容をもたらす。
る。
第3の局面に従う細胞または生物学的組織の使用を提供する。
HCクラスIIまたは異種MHCクラスIIをコードする核酸の使用を提供する
。
改変された核酸および合成核酸もまた、含まれる。例えば、核酸は、合成(例え
ば、PNA)であり得るか、または改変されたヌクレオチド間連結(例えば、ホ
スホロチオエート)を有し得る。さらに、その用語は、センスおよびアンチセン
ス核酸配列の両方、ならびに二本鎖配列を含む。
配列を含む。この発現は、好ましくは、細胞特異的制御、誘導性制御、または時
間的制御のように、制御され得る。
分子を意味し、そして多数の適切なベクターが当該分野で公知である。
ある。例えば、トランスジェニックブタの生成のために適切なベクターは、参考
文献13、14、15、16、および17に記載される。
送達するための手段をいう。
、特定の送達システムはまた、固有にベクターであり得るが、必ずしもそうであ
るとは限らない。例えば、ウイルスベクターはまた、送達システムとして機能し
得るが、リポソーム送達システムは、ベクターではない。送達システムは、ウイ
ルスであってもよく、またはウイルスでなくてもよい。リポソームのような非ウ
イルスシステムは、大規模産生の費用、発現の持続性の悪さ、安全性に関する懸
念のような、ウイルスベースのシステムに関連するいくつかの困難性を回避する
。好ましくは、送達システムは、遺伝子療法において使用するのに適している。
多数の適切な送達システムが、当該分野で公知である。
細胞、または移植されている細胞によって取り込まれるように、標的化される。
より好ましくは、送達システムは、これらの細胞に特異的である。例えば、送達
システムは、特定の臓器(例えば、心臓または腎臓)、または特定の細胞型(例
えば、内皮細胞またはプロフェッショナルAPC)に標的化され得る。
るレセプターに標的化されたレセプター媒介送達システムであり得る。例えば、
送達システムは、心臓細胞上に見出されるレセプター、好ましくは、心臓細胞上
に独占的に見出されるレセプターに標的化され得るか、または内皮細胞上に見出
されるレセプター、好ましくは、内皮細胞上に独占的に見出されるレセプターに
標的化され得る。
る。例えば、送達システムは、配偶子、接合子、または胚幹細胞に標的化され得
る。
明に従う細胞を生成するために使用され得る。トランスフェクションは、インビ
ボまたはエキソビボで生じ得る。
(collection)が含まれる。従って、その定義には、例えば、線維芽
細胞、角膜、神経組織、心臓、肝臓、または腎臓が含まれる。
しくは、異種移植のための臓器および/または本発明の細胞(例えば、異種移植
片レシピエントへの前異種移植片投与のための細胞)の作製に適切である。好ま
しくは、その動物は哺乳動物であり、そしてより好ましくは、それはトランスジ
ェニックブタまたはトランスジェニックヒツジである。
子治療によって処置される)ように、生存している間に処置され得る。好ましく
は、生存動物は、トランスジェニック動物を産生するために、本発明に従うベク
ターでトランスフェクトされる。例えば、本発明に従うベクターは、異種移植の
ために適切な生物学的組織を産生するためにブタの心臓に特異的に送達され得る
。
ランスジェニック動物を作製するための多くの適切なアプローチが、当該分野で
公知である(例えば、参考文献18、19、20)。例えば、DNAのマイクロ
インジェクションによる接合子または初期胚の直接的操作は、周知であり、胚幹
細胞のような多能性の細胞のインビトロ操作も同様である。初期胚のレトロウイ
ルス感染は、種々の種で成功していることが証明されており、そして帯を含まな
い(zona−free)卵のアデノウイルス感染が報告されている。ヒツジの
核移入による遺伝子導入およびクローニングがまた記載されている(例えば、W
O97/07668)。
合、その生物学的組織は、インビボまたはエキソビボのいずれかでそのようにさ
れ得る。例えば、動物の臓器は、本発明のベクターでインビボでトランスフェク
トされ得るか、または臓器は、移植前にエキソビボでもしくは移植後にインビボ
でトランスフェクトされ得る。
ーニングした。RNAを、標準的な技術を用いて調製し、そしてpCTLA−4
を、以下のプライマーを用いてPCRによって増幅した:
pBluescriptにサブクローニングし、そしてそのヌクレオチド配列を
、標準的なT3プライマーおよびT7プライマーを用いて決定した。単一のクロ
ーンの配列を図3に示す。この図はまた、ヒトおよびウシのCTLA−4配列と
の比較を示す。
に示す。重要なことは、残基97における推定アミノ酸の差異であり、この残基
はB7結合において重要であり、保存されたヘキサペプチドモチーフMYPPP
Yの一部である。pCTLA4において、残基97はロイシンである(LYPP
PYとなる)のに対し、(ロイシンもまた、ウシCD28において見出さされて
いるが(21))他の種はメチオニンを有する。この重要なアミノ酸差異は、p
CTLA4のヒトおよびブタB7への有利に異なる結合の重要な鍵であると考え
られる。
マーを用いて増幅した:
ードする18塩基対のセグメントを導入し、そしてPstI部位(太字)を導入
してヒトIgG1のヒンジ領域へのインフレーム連結を可能にした。得られた5
00bpのフラグメントを、HindIII/PstI消化したpBluesc
ript−IgG1(ゲノムDNAコードイントロン性配列ならびにPstI/
Not1部位の間のヒトIgG1のヒンジ、CH2、CH3および3’非翻訳エ
キソンを含む)にサブクローニングした。得られた可溶性pCTLA4−Igの
アミノ酸配列を図4に示す。
グメントとしてpBluescriptから遊離させ、そして発現ベクターpH
OOK−3TM(Invitrogen)にサブクローニングした。これを使用し
て、標準的なリン酸カルシウム沈殿を用いてDAP.3細胞またはCHO−K1
細胞をトランスフェクトした。G418耐性細胞を、CaptureTecTMシ
ステムを用いて分離した。これらのトランスフェクト細胞を、組織培養フラスコ
中でコンフルエントになるまで増殖させ、コンフルエントになった時点で、培地
を交換し、そして細胞を培養物中でさらに3日間維持した。この段階で、培地を
採取し、そしてプロテインGカラムを通して灌流した。pCTLA−4−Igを
酸性条件下で溶出させた。この溶出したタンパク質の濃度を、ヒトIgG1に対
する抗体および標準的なヒトIgG1骨髄腫タンパク質を用いるELISAを用
いて計算した。
かでトランスフェクトしたヒト線維芽細胞を用いるフローサイトメトリー分析を
使用して、ヒトCTLA4−Igの結合特徴と比較した。これらの実験に関して
、ブタおよびヒトのCTLA4−Igの濃度は、ELISAによってアッセイし
たとき、等しかった。図5に例示したように、ヒトおよびブタCTLA4−Ig
は、ブタB7を発現するヒト細胞において類似の結合特徴を有するようであった
。しかし、ヒトCTLA4−Igとは異なり、pCTLA4−IgはヒトB7に
は結合しなかった。このことは、pCTLA4−IgがブタB7に優先的に結合
し、そして種特異的試薬として有用であることを意味する。
阻害した。これらのアッセイにおいて、T細胞応答の同時刺激は、プロフェッシ
ョナルAPCにおいてトランスフェクションまたは天然のいずれかによって発現
された、ブタまたはヒトのいずれかのB7によって提供された。これらの実験を
、図6および7において実証する。
たはブタB7のいずれかを発現する)を用いる実験について、hCTLA4−I
gは全ての増殖応答を阻害した(図6、白四角および白菱形)。対照的に、pC
TLA4−Igのみが、刺激剤がブタB7を発現した場合の応答を完全に阻害し
た(白三角);ヒトB7を発現する細胞に対する増殖応答は、最小限に影響され
たのみであった(白丸)。
7を発現するヒト細胞への増殖応答に対する有意な阻害効果を有しなかったが、
ブタ刺激剤に対する応答は阻害した(図7)。
合のpCTLA4−Igの有効な阻害特性を強調する。同時刺激がヒトB7によ
って媒介される場合にT細胞増殖を防止できないことはまた、種特異的作用を実
証する。pCTAL4−Igは、ブタB7に対して種特異的結合を示し、ブタB
7の機能的効果の阻害を示すが、ヒトB7に対しては種特異的結合を示さず、そ
の機能的効果の阻害も示さないと、結論付け得る。
合特徴は、例えば、以下の試験を用いて、hCTLA4−Igの結合特徴と比較
され得る: (i)ブタおよびヒトのAPCに対する結合、およびブタまたはヒトのB7を
発現するトランスフェクタントに対する結合のフローサイトメトリー分析(上記
を参照のこと) (ii)BiacoreTMを用いる結合の定量的特徴づけ (iii)ヒト抗ブタおよびヒト同種異系混合したリンパ球培養物に対するC
TLA4−Igの効果の機能的分析 (iv)pCTLA4−IgのB6マウスへの移植後のブタ島異種移植生存を
延長する能力の機能的評価。
たはマウスのCTLA4−IgおよびコントロールヒトIgG1骨髄腫タンパク
質を用いてスクリーニングした。4回のスクリーニング後にヒトCTLA4−I
gタンパク質への差示的な結合を提示するファージからsFvを単離し、そして
標準的な技術を用いて精製した。そのヌクレオチド配列および推測したアミノ酸
配列を、図8、9、10、および11に示す。
て増幅した。プライマーの遠位部分は、pHOOK1内の配列に基づいた。5’
プライマーはApaI部位を含み、そして3’プライマーはSalI部位を含ん
だ。これらは両方とも、独特であると予測された。得られたsFvを、配列決定
のためにpBluescriptにサブクローニングして、忠実な増幅を決定し
た。次いでApaI/SalIフラグメントを、pHOOK1にサブクローニン
グした。ここでは、ApaI/SalIフラグメントは、上流ではマウスIgκ
鎖からのインフレームのシグナル配列および血球凝集素Aエピトープ配列に、そ
して下流では2つのインフレームのmyc配列およびPDGFレセプターからの
膜貫通配列に隣接する。
の5’プライマー:
tI/PstI消化したpBluescriptにサブクローニングした。
せ、そしてEcoRI/PstI消化したpBluescript−IgG1に
、NotI/PstI PCR産物とともに連結した(図12)。この構築物は
、CTLA−4特異的sFvの可溶性Ig融合物をコードする。真核生物細胞に
おける発現のために、この構築物を、pHOOK3にHindIII/BstX
Iフラグメントとしてサブクローニングした。
DR分子およびヒトB7を発現している細胞にトランスフェクトした。G418
またはミコフェノール酸(使用したベクターに依存する)に耐性である細胞を、
培養において増殖させた。その細胞表面上で抗CTLA4−sFv構築物を発現
する細胞を、hCTLA4−Igを使用してフローサイトメトリー分析によって
同定した。これらの細胞を、限定希釈によってクローニングし、そして5日間の
培養におけるT細胞の増殖の刺激剤として使用した。1つの実験の結果を図13
に示す。抗hCTLA4 sFvを発現する細胞は、T細胞増殖を刺激しないが
(白四角)、一方コントロールsFvを発現する細胞は、正常細胞と同じ方法で
増殖を刺激した(白丸)。
ントを、ヒトCD8の膜貫通ドメインおよび細胞質ドメイン(pBluescr
ipt−hCD8由来のSalI/BamHIフラグメントとして単離した)と
ともに、EcoRI/BamHI消化したpBluescriptに同時連結し
た(図14)。
ベクターpHβApr−1−neoまたはシスターベクターpHβApr−1−
gptにサブクローニングした。これらを、既にHLA−DR分子およびB7を
発現している細胞にトランスフェクトし、そしてpHOOK構築物について上記
のように選択した。
え、抗CTLA4−sFvの機能的特徴を試験するために、ヒトまたはマウスの
CTLA4の細胞外ドメインをコードするDNA配列、ならびにヒトCD8の膜
貫通/細胞質配列を含むキメラ構築物を作製した。これらの構築物を発現する細
胞を、抗CTLA4−sFvタンパク質の研究のために使用し得る。
CTLA4を、以下のプライマーを用いてPCR増幅した: HindIII部位を導入する(5’プライマー)
criptにサブクローニングし、そしてそのヌクレオチド配列を、標準的なT
3プライマーおよびT7プライマーを用いて決定した。単一のクローンの配列を
、図15に示す。これは、ヒトCTLA−4についてのGenBankリスト配
列とは1つの塩基(439位)が異なる。hCTLA4の推定アミノ酸配列もま
た示す。
イマーを用いて増幅した:
コードする15塩基のセグメント(下線を付した)を、独特のSalI部位(強
調表示)とともに含んでいだ。得られたフラグメントを、HindIII/Sa
lI消化したpBluescriptにサブクローニングし、そして配列決定し
た。
criptにサブクローニングし、そしてそのヌクレオチド配列を、標準的なT
3プライマーおよびT7プライマーを用いて決定した。単一のクローンの配列を
、図16に示す。このクローンは、GenBankに登録された配列とは4つの
位置で異なっていたが、これらはいずれも、続いて増幅した領域内では存在しな
かった。
’プライマーおよび以下の5’プライマーを用いて増幅した:
コードする15塩基のセグメント(下線を付した)を、独特のSalI部位(強
調表示)とともに含んでいた。得られたフラグメントを、HindIII/Sa
lI消化したpBluescriptにサブクローニングし、そしてpBlue
script−hCD8と称した。
I/SalIフラグメントとして切り出し、そしてCD8のTM−ICドメイン
を、SalI/BamHIフラグメントとして切り出した。これらをともに、E
coRI/BamHI消化したpBluescriptに再び連結した。次いで
、全CTLA−4−CD8キメラを単一のEcoRIフラグメントとして取り出
し、そしてヒトT細胞白血病株J6への発現のための多数の発現ベクターにサブ
クローニングした。
付けられ得る: (i)膜結合抗CTLA4−sFv−CD8タンパク質を発現する細胞と、可
溶性ヒトCTLA4−Igを発現する細胞との間の相互作用のフローサイトメト
リー評価 (ii)BiacoreTMを用いる、可溶性抗CTLA4−sFv−Ig融合
タンパク質と可溶性ヒトCTLA4−Igとの間の相互作用の定量的評価 (iii)抗CTLA4−sFv−CD8融合タンパク質を発現するJ6トラ
ンスフェクタントへの可溶性ヒトCTLA4−Igの結合から生じるシグナル伝
達事象についての分析 (iv)同種異系混合リンパ球応答における刺激が、HLA−DRポジティブ
、B7ポジティブ、抗CTLA4−sFv−CD8ポジティブ細胞株によって提
供される場合のT細胞応答(例えば、増殖、サイトカイン産生、アネルギー誘導
)の分析。
の単層から、pZipSVU19 DNA(22)を用いる核内マイクロインジ
ェクションにより生成した。不死化細胞(IPEC)から、B7ネガティブクロ
ーンを、hCTLA4−IgおよびmCTLA4−Igを用いてフローサイトメ
トリースクリーニングによって同定した(図17を参照のこと)。次いで、これ
らを、プラスミド発現ベクターpcExV1−gptおよびpHβApr−1n
eo中のHLA−DRAおよびDRB1*0101をコードするcDNAでトラ
ンスフェクトし、そして細胞を、MXHおよびG418での選択下に置いた。比
較のために、B7−ポジティブIPECコントロールを同様に生成した(4)。
トの別のシリーズもまた、マウスにおける実験のために生成した。
クローナル抗体L243(HLA−DRに特異的)(図18)またはM5−11
4(マウスMHCクラスIIに特異的)を用いて検出した。MHCクラスIIポ
ジティブ細胞は、限界希釈によるクローニングの前に数回の蛍光活性化細胞ソー
ティングを受けた。
DMAおよびHLA−DMBおよびp31Ii(不変鎖)をコードするさらなる
トランスフェクトcDNAを用いて正確に同じ方法で調製した。
セイのために、ガラス繊維フィルターへの採取の16時間前に1マイクロCi3
H−チミジンの添加の前に、T細胞を、一定数の照射した刺激細胞(stimu
lator cell)とともに5日間インキュベートした。このフィルターを
、シンチレーションカウンターにおいて読み取った。
ネガティブIPECは任意の増殖応答を開始しなかった(図19)。
23)。一次寛容性誘導工程において、B7ポジティブIPECとともにインキ
ュベートしたT細胞を、プライムされた二次免疫応答(3日で最大)の動力学を
用いる二次工程における抗DR1増殖応答をマウントした。しかし、一次工程に
おいてB7ネガティブIPECとともにインキュベートしたT細胞は、DR1に
対して寛容になり、そしてB7ポジティブIPECにおいて発現されたDR1に
対する続く曝露の際に、応答をマウントしなかった(図20)。
) DR1を発現する個体由来のCD4+T細胞を、標準的な手順に従って精製し
た。一次増殖アッセイにおいて、それらは、HLA−DR1でトランスフェクト
したB7ポジティブIPECに増殖した。このことは、DR1が、ブタペプチド
特異的T細胞についての制限エレメントとして機能し得ることを示す。B7ポジ
ティブおよびB7ネガティブDR1+トランスフェクタントに対する増殖応答を
比較するアッセイを行っている。
ネガティブブタ細胞がHLA−DR拘束ヒトT細胞においてアネルギーを誘導す
ることを実証するために行い得る。
てプロセスされたブタペプチドと、HLA−DRでトランスフェクトしたIPE
CのMHCクラスIIにおいて提示されるものとの間の重複) 野生型IPECに対するヒトT細胞株を、ヒトPBMCから得た。この株の増
殖応答は、ヒトAPCの存在に依存し、そしてHLA−DRに対する抗体によっ
て阻害可能であり、これらのことは、この株が、ヒトAPCによって提示される
、プロセスされたブタ異種抗原(xenoantigen)に対する間接的な特
異性を有した。
APCによって間接的に提示されることを意味する、B7ポジティブHLA−D
R1でトランスフェクトされたIPECに対して増殖したこの株(図21)もま
た、トランスフェクトされたブタ細胞によって提示された。
ocin)処置した糖尿病マウスの腎臓被膜下に移植され得る。島異種移植片(
非血管性である)は、T細胞によって単に拒絶される。ブタ島を、末梢麻酔下で
ブタの膵臓から調製し、そしてレシピエントにおけるその生存を、正常血糖値の
維持によって評価する。マウスに、ブタ島の移植前に、B7ネガティブのI−A b を発現するIPECを静脈内注射する。このストラテジーを、本発明の他の局
面と組み合わせて、T細胞認識の直接経路を寛容化し、直接経路を介する拒絶が
生じないことを確実にする。特定のストラテジーが特異的T細胞寛容性を誘導し
たか否かを評価するために、島保有腎臓の腎摘出を、同一のブタ島または第三者
のブタ島の再移植の前に行う(生存する腎臓の被膜下)。
に残る間は改変がなされ得ることが理解される。
c)細胞(または、間接的活性化経路においては、異種抗原(xenoanti
gen)提示レシピエントAPC)を示し、「T」はレシピエントT細胞を示す
。実施態様Iにおいて、同時刺激シグナル2の送達は、CTLA−4の可溶性形
態を用いることによって妨げられる。実施態様IIにおいて、抗CTLA−4を
使用して、シグナル2を拮抗する。実施態様IIIにおいて、Xはレシピエント
MHC−IIを発現するが、B7を発現しない。
を「*」によって例示する:シグナルペプチド/細胞外ドメイン;細胞外ドメイ
ン/膜貫通ドメイン;膜貫通ドメイン/細胞質ドメイン。ヒト配列とウシ配列と
アラインメントもまた示される。pCTLA4との相同性は以下のとおりである
: ドメイン ヒト ウシ シグナルペプチド 67.6% 86.5% 細胞外ドメイン 83.8% 84.6% 膜貫通ドメイン 96.1% 100% 細胞質ドメイン 100% 100% 全体 85.2% 89.2%
。相同性は以下のとおりである: ドメイン ヒト ウシ シグナルペプチド 76% 81.3% 細胞外ドメイン 85.2% 86.3% 膜貫通ドメイン 92.3% 96.2% 細胞質ドメイン 96.5% 97.7% 全体 86.1% 88.3%
は、可撓性リンカーGGSGGAAを示し、これはまた、pCTLA4ドメイン
とIgG1ドメインとの間の接合部を示す。
かでトランスフェクトしたヒト線維芽細胞に結合するhCTLA4−Ig(白丸
および白四角)およびpCTLA4−Ig(白菱形および白三角)のフローサイ
トメトリー分析の結果を示す。
)によって同時刺激した場合の、hCTLA4−Ig(白四角および白菱形)と
比較した、pCTLA4−Ig(白丸および白三角)による増殖の選択的阻害を
示す。
B)を5日間混合した白血球反応における刺激剤として使用した場合の、hCT
LA4−Ig(白四角)またはpCTLA4−Ig(白菱形)によるヒトCD4 + T細胞増殖の阻害を示す。
したセリン−グリシンリンカーによって重鎖および軽鎖が連結される。
。図11に示したセリン−グリシンリンカーによって重鎖および軽鎖が連結され
る。
を示す。
白丸)のいずれかを発現する細胞によるT細胞増殖の阻害を示す。
B)を示す。開始コドンに下線を付す。−21位では、その配列はGenBan
k配列L15006とは異なり、そして110位では、その配列はL15006
およびM74363の両方と異なる。
T→G)、244位(A→G)、266位(T→C)、および437位(T→C
)においてGenBank配列と異なる。
めの、ヒトおよびマウスのCTLA4−IgのIPECへの結合を示す。
する結合を示す。
細胞による増殖を示す。
ン下2日後の、ヒトT細胞増殖アッセイの結果を示す。X軸は、増殖アッセイの
第2工程において使用した刺激細胞を示す。黒棒は、B7ポジティブトランスフ
ェクタントでプライムしたCD4 T細胞での結果を示す;白棒(見るのは困難
である)は、B7ネガティブトランスフェクタントでプライムした後の結果を示
す。第1のグラフは、3日で採取した細胞での結果を示す;第2のグラフは、6
日目での採取物からの結果を示す。
T細胞株の増殖を示す。刺激剤集団を、X軸上に示す。
Claims (28)
- 【請求項1】 レシピエントにおいて異種反応性T細胞の活性化を防止する
ために同時刺激シグナル2の送達を遮断することによって、異種移植された臓器
のT細胞媒介拒絶を阻害し得る、生物学的試薬。 - 【請求項2】 異種移植された臓器のT細胞媒介拒絶を阻害するための方法
であって、レシピエントにおける異種反応性T細胞の活性化を防止するために、
同時刺激シグナル2の送達を遮断する工程を包含する、方法。 - 【請求項3】 異種ドナー生物由来の可溶性形態のCTLA−4タンパク質
を、前記レシピエントに投与することを包含する、請求項2に記載の方法。 - 【請求項4】 前記可溶性タンパク質が、ヒトCγ1配列に融合したブタC
TLA−4の細胞外ドメインを含む、請求項3に記載の方法。 - 【請求項5】 医薬として使用するための、可溶性形態の異種CTLA−4
。 - 【請求項6】 配列番号1のアミノ酸配列を含む、タンパク質。
- 【請求項7】 請求項6に記載のタンパク質をコードする、核酸。
- 【請求項8】 前記試薬が、CTLA−4に結合し得る膜結合タンパク質で
ある、請求項1に記載の生物学的試薬。 - 【請求項9】 CTLA−4に特異的な一本鎖抗体を含む、請求項8に記載
のタンパク質。 - 【請求項10】 請求項8または請求項9に記載のタンパク質をコードする
、核酸。 - 【請求項11】 その表面に請求項8または請求項9に記載のタンパク質を
発現する、細胞。 - 【請求項12】 請求項11に記載の細胞を含む、生物学的組織。
- 【請求項13】 請求項11に記載の細胞および/または請求項12に記載
の生物学的組織を含む、動物。 - 【請求項14】 ドナー動物から異種レシピエント動物へ、請求項12に記
載の生物学的組織を移植する工程を包含する、移植法。 - 【請求項15】 生物学的組織を異種移植に適切にするためのプロセスであ
って、該生物学的組織が請求項8または請求項9に記載のタンパク質をその細胞
表面上に発現するように、該生物学的組織を処置する工程を包含する、プロセス
。 - 【請求項16】 医薬として使用するための、請求項8もしくは請求項9に
記載のタンパク質、または請求項10に記載の核酸。 - 【請求項17】 異種移植片レシピエントまたはドナーに投与するための処
方物の調製における、請求項8もしくは請求項9に記載のタンパク質、または請
求項10に記載の核酸の、使用。 - 【請求項18】 前記試薬が、異なる生物のMHCクラスIIをその表面上
に発現する細胞である、請求項1に記載の生物学的試薬。 - 【請求項19】 前記細胞が、ヒトMHCクラスIIをその表面に発現する
ブタ細胞である、請求項18に記載の細胞。 - 【請求項20】 前記細胞が、その表面上にB7を発現しない、請求項18
または請求項19に記載の細胞。 - 【請求項21】 前記細胞が、トランスフェクトされた未成熟樹状細胞であ
る、請求項18または請求項19に記載の細胞。 - 【請求項22】 請求項18、19、20、または21のいずれか1項に記
載の細胞を含む、生物学的組織。 - 【請求項23】 請求項22に記載の生物学的組織を含む、動物。
- 【請求項24】 ドナー動物から異種レシピエント動物へ、請求項22に記
載の生物学的組織を移植する工程を包含する、移植法。 - 【請求項25】 生物学的組織を異種移植に適切にするためのプロセスであ
って、該生物学的組織がその細胞の表面上に異種MHCクラスIIを発現するよ
うに、該生物学的組織を処置する工程を包含する、プロセス。 - 【請求項26】 医薬として使用するための、請求項18、19、20、ま
たは21のいずれか1項に記載の細胞。 - 【請求項27】 異種移植レシピエントに投与するための処方物の製造にお
ける、請求項22に記載の生物学的組織の使用。 - 【請求項28】 異種移植ドナーに投与するための処方物の調製における、
異種MHCクラスIIまたは異種MHCクラスIIをコードする核酸の、使用。
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MXPA02011534A (es) * | 2000-05-26 | 2004-08-12 | Bristol Myers Squibb Co | Moleculas mutantes ctla4 solubles y uso de las mismas. |
US7094874B2 (en) | 2000-05-26 | 2006-08-22 | Bristol-Myers Squibb Co. | Soluble CTLA4 mutant molecules |
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KR100927261B1 (ko) * | 2001-01-17 | 2009-11-18 | 트루비온 파마슈티칼스, 인코포레이티드 | 결합 도메인-면역글로불린 융합 단백질 |
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ITRM20010408A1 (it) | 2001-07-10 | 2003-01-10 | Univ Napoli Federico Ii | Mini-anticorpo umano citotossico per cellule tumorali che esprimono il recettore erbb2. |
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