JP2002503706A5

JP2002503706A5 -

Info

Publication number: JP2002503706A5
Application number: JP2000532147A
Authority: JP
Filing date: 1999-02-19
Publication date: 2008-09-25
Anticipated expiration: 2019-02-19

Description

【特許請求の範囲】
【請求項１】ヒトＤ因子に結合し、約1.5:1（抗体：Ｄ因子）のモル比でヒト血液中での第二経路を介する補体活性化を完全に阻害する、抗体又はその断片。
【請求項２】アメリカンタイプカルチャーコレクションにHB-12476の受託番号で寄託されているハイブリドーマにより産生される抗体166-32が結合する、Ｄ因子の同一エピトープに結合する、抗体又はその断片。
【請求項３】ヒトＤ因子に結合し、治療用途に有効な抗体：Ｄ因子のモル比でヒト血液中での第二経路を介する補体活性化を完全に阻害する、抗体又はその断片。
【請求項４】補体活性化の阻害は、１０％又は９０％ヒト血清の存在下における未感作ウサギ赤血球の第二経路溶血の阻害を指標として体外で測定される請求項１又は３記載の抗体又はその断片。
【請求項５】 (i) ヒトＤ因子のアミノ酸残基Cys154とCys170の間に位置する領域、又は(ii) Cys154とCys170の間の領域を含むヒトＤ因子の領域に結合する抗体又はその断片。
【請求項６】前記抗体又はその断片は精製されたものである請求項１、２、３又は５記載の抗体又はその断片。
【請求項７】 (i) アミノ酸残基Arg156及びHis159が存在しないヒトＤ因子突然変異体、又は(2) アミノ酸残基Leu168が存在しないヒトＤ因子突然変異体には結合しない請求項１、２、３又は５記載の抗体又はその断片。
【請求項８】抗体が、モノクローナル抗体、キメラ抗体、脱免疫化(deimmunized)抗体、ヒト化抗体、又はヒト抗体である請求項１、２、３又は５記載の抗体又はその断片。
【請求項９】 Fab、(Fab')₂、Fv又は単鎖Fvである請求項１、２、３、５、６又は８記載の抗体断片。
【請求項１０】マウスの可変領域とヒトの定常領域とを含むキメラFabである請求項９記載の抗体断片。
【請求項１１】アメリカンタイプカルチャーコレクションにHB-12476の受託番号で寄託されているハイブリドーマにより産生されるモノクローナル抗体166-32又はその断片。
【請求項１２】 Fab、(Fab')₂、Fv又は単鎖Fvである請求項１１記載のモノクローナル抗体166-32の断片。
【請求項１３】請求項１１記載のモノクローナル抗体166-32の可変領域とヒト定常領域とを含む、キメラ抗体又はその断片。
【請求項１４】請求項１１記載のモノクローナル抗体166-32のヒト化抗体又はその断片。
【請求項１５】 Fab、(Fab') ₂ 、Fv又は単鎖Fvである請求項１３又は１４記載の抗体断片。
【請求項１６】アメリカンタイプカルチャーコレクションにHB-12476の受託番号で寄託されている、モノクローナル抗体166-32を産生するハイブリドーマ。
【請求項１７】請求項１３若しくは１４記載の抗体若しくはその断片、又は請求項９、１２若しくは１５記載の抗体断片を産生するセルライン。
【請求項１８】請求項１、２、３、５、６、８又は９に記載の抗体又はその断片を含む医薬。
【請求項１９】請求項１１、１２、１３又は１４に記載の抗体又はその断片を含む医薬。
【請求項２０】補体系の過度の又は制御できない活性化により媒介される疾病又は状態の治療剤である請求項１８又は１９記載の医薬。
【請求項２１】前記疾病又は状態は、虚血−再潅流に起因する組織損傷、炎症性疾患、移植拒絶、医薬品副作用、又は自己免疫疾患である請求項２０記載の医薬。
【請求項２２】前記疾病又は状態は、急性心筋梗塞に付随する組織損傷、心−肺バイパスに付随する組織損傷、動脈瘤、卒中、出血性ショック、圧挫損傷、多臓器不全、低血液量性ショック若しくは腸虚血、超急性異種移植片拒絶、IL-2誘導性血管漏出症候群若しくはラジオグラフィーコントラスト媒体アレルギー、火傷、内毒素血症、敗血症性ショック、成人呼吸窮迫症候群、血液透析、アナフィラキシーショック、重症喘息、血管浮腫、クローン病、鎌状細胞貧血、後連鎖球菌性腎炎若しくは膵炎、全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、リウマチ性関節炎、アルツハイマー症又は多発性硬化症である請求項２０記載の医薬。
【請求項２３】静脈内注射、静脈内大量注射、又は腹腔内、皮内、筋肉内、皮下、鼻内、気管内、脊髄内、頭蓋内、生体外若しくは経口経路によって患者に投与するのに適した剤形である、請求項１８、１９、２０、２１又は２２記載の医薬を含む医薬製剤。
【請求項２４】心−肺バイパスに付随する組織損傷の治療用製剤であって、生体外経路による投与用の剤形である請求項２３記載の医薬製剤。

発明の概要
本発明は、ヒトＤ因子に結合し、補体活性化の第二経路を包含するＤ因子補体活性化の機能活性をブロックする、抗体及びその断片を包含する。抗体及びその断片は、抗体分子、並びにFab、(Fab')₂及びFvのような免疫グロブリン断片を包含する。

B. 抗Ｄ因子抗体及びその断片の適用
本発明の抗Ｄ結合抗体及び断片は、静脈内注射、静脈内大量注射、並びに腹腔内、皮内、筋肉内、皮下、鼻内、気管内、脊髄内、頭蓋内及び経口経路を包含する種々の経路によって、適当な医薬製剤として患者に投与することができる。このような投与により、それらが内発性Ｄ因子と結合することが可能となり、C3b、C3a及びC5aアナフィラトキシン並びにC5b-9の生成が阻害される。

抗Ｄ因子抗体及びその断片は、生体内における補体活性化及び／又は第二補体経路、並びにマクロファージ、好中球、血小板及びマスト細胞の補充及び活性化、並びに浮腫及び組織損傷のような、それに付随する炎症徴候を阻害する機能を果たすことができる。これらの抗体及びその断片は、補体系の過度の又は制御できない活性化により媒介される疾患または症状の治療に用いることができる。これらは、(1)急性心筋梗塞、動脈瘤、卒中、出血性ショック、圧挫損傷、多臓器不全、低血液量性ショック及び腸虚血のような虚血−再潅流に起因する組織損傷、(2)例えば火傷、内毒素血症及び敗血症性ショックのような炎症性疾患、成人呼吸窮迫症候群、心−肺バイパス、血液透析、アナフィラキシーショック、重症喘息、血管浮腫、クローン病、鎌状細胞貧血、後連鎖球菌性腎炎並びに膵炎、(3)例えば超急性異種移植片拒絶のような移植拒絶、並びに(4)例えば薬剤アレルギー、IL-2誘導性血管漏出症候群及びラジオグラフィーコントラスト媒体アレルギーのような医薬品副作用を包含するがこれらに限定されるものではない。全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、リウマチ性関節炎、アルツハイマー症及び多発性硬化症を包含し、これらに限定されない自己免疫疾患もまた、本発明の抗体又はその断片で治療することができる。

C. 抗Ｄ因子抗体及びその断片の治療効果の動物モデル
上記した種々の疾患徴候における抗Ｄ因子抗体及びその断片の治療活性は、種々の炎症性及び自己免疫性徴候のための利用可能な動物モデルを用いることによって確認することができる。実施例において後述する生体外試験は、その有効性を確立するのに十分である。

ヒトにおける種々の補体関連臨床疾患に関する動物モデルもまた、抗Ｄ因子抗体及びその断片の生体内効果を確認するために用いることができる。これらは、心筋虚血／再潅流損傷(H.F. Weisman et al., Science, 1990; 249: 146-151)、心筋梗塞(J. W. Homeister et al., J. Immunol. 1993; 150: 1055-1064)、全身性エリテマトーデス及び腎炎(S.K. Datta. Meth. Enzymol., 1988; 162: 385-442; D.J. SalvantとA.V. Cybulsky, Meth. Enzymol., 1988; 162: 421-461)、リウマチ性関節炎(Y. Wang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 1995; 92: 8955-8959)、成人呼吸窮迫症候群(R. Rabinovici et al., J. Immunol. 1992; 149: 1744-1750)、臓器移植における超急性拒絶(T.J. Kroshus et al., Transplantation, 1995; 60: 1994-1202)、火傷(M.S. Mulliganら、J. Immunol., 1992; 148: 1479-1485)、及び心−肺バイパス(C.S. Rinder, J. Clin. Invest., 1995; 96: 1564-1572)を包含するがこれらに限定されるものではない。

図１１は、MAb 166-32がＤ因子/Hu、Ｄ因子/Pighu及びＤ因子/VDAと反応するが、Ｄ因子/Pig、Ｄ因子/Hupig、Ｄ因子/RH及びＤ因子/Lとは反応しないことを示している。ＥＬＩＳＡの結果は、ヒトＤ因子のArg156、His159及びLeu168のアミノ酸残基がMAb 166-32の結合に必須であることを示している。これは、MAb 166-32が、ヒトＤ因子のＣ末端部分をブタのそれと置換したＤ因子/Hupigと反応しなかったという事実と符合する。アミノ酸残基Arg156、His159及びLeu168は、メチオニン残基が１６９位に位置する、Cys154とCys170との間のジスルフィド結合により構成されるいわゆる「メチオニンループ」中に位置する(J.E. Volanakisら、In: The Human Complement System in Health and Disease, J.E. Volanakis及びM.M. Franks編、Marcel Dekker, 1998, pp.49-81)。構造的に、「メチオニンループ」は、剛性タイプ１βターンのメンバーである。Ｘ線結晶解析研究に基づき、それはＤ因子の表面上に露出していることがわかっている(S.V.L. Narayanaら、J. Mol. Biol., 1994, 235: 695-708)。しかしながら、Ｄ因子の基質特異性及び触媒作用に対する「メチオニンループ」の寄与は研究されたことがない(J.E. Volanakisら、Protein Sci., 1996; 5: 553-564)。ここでのデータは、「メチオニンループ」がＤ因子の機能活性において重要な役割を果たすことを初めて示したものである。MAb 166-32及びそのFabは、Ｄ因子のこの領域に結合すると、Ｂ因子の触媒作用を効率的に阻害することができる。