JP2002501546A - チアゾフリンおよびその他のｃ−ヌクレオシドを作製する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 Ｃ₁位に複素環が提供されるよう一段階で糖が誘導体化され、次にさらなる一段階で複素環が芳香族化される方法により、ｃ−ヌクレオシドが合成される。一つのクラスの好ましい実施態様においては、シアノ糖がチオカルボキサミドに変換され、続いてアゾール環が形成されるよう縮合される。第二のクラスの好ましい実施態様においては、アゾール環が提供されるようシアノ糖がアミノ酸と縮合される。第三のクラスの好ましい実施態様においては、アゾール環が提供されるようハロ糖が予め形成された複素環と縮合される。

Description

【発明の詳細な説明】チアゾフリンおよびその他のＣ−ヌクレオシドを作製する方法 背景 Ｃ−ヌクレオシドは薬剤としての潜在的な活性を有する興味深い化合物である 。これらの化合物のうちの一つ、チアゾフリン［６、２−（β−Ｄ−リボフラノ シル）チアゾール−４−カルボキサミド）］は、ヒトリンパ細胞系（Ｆ．Ｅａｒ ｌｅおよびＲ．Ｉ．Ｇｌａｚｅｒ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１９８３，４３ １３３）、肺癌細胞系（Ｄ．Ｎ．Ｃａｒｎｅｘ，Ｇ．Ｓ．Ａｂｌｕｗａｌｉａ， Ｈ．Ｎ．Ｊａｙａｒａｍ，Ｄ．Ａ．ＣｏｏｎｅｙおよびＤ．Ｇ．Ｊｏｈｎｓ，Ｊ ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１９８５，７５ １７５）の両方およびマウス移 植ヒト卵巣癌（Ｊ．Ｐ．Ｍｉｃｈａ，Ｐ．Ｒ．Ｋｕｃｅｒａ，Ｃ．Ｎ．Ｐｒｅｖ ｅ，Ｍ．Ａ．Ｒｅｔｔｅｎｍａｉｅｒ，Ｊ．Ａ．Ｓｔｒａｔｔｏｎ，Ｐ．Ｊ．Ｄ ｉＳａｉａ，Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．１９８５，２１，３５１）に対して 有意な活性を有する。チアゾフリンは、急性骨髄性白血病の治療においても有効 性を示した（Ｇ．Ｔ．Ｔｒｉｃｏｔ，Ｈ Ｎ．Ｊａｓｙａｒａｍ Ｃ．Ｒ．Ｎｉ ｃｈｏｌｓ， Ｋ．Ｐｅｎｎｉｎｇｔｏｎ，Ｅ．Ｌａｐｉｓ，Ｇ．ＷｅｂｅｒおよびＲ．Ｈｏｆ ｆｍａｎ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１９９７，４７４９８８）。さらに、最近の 発見により、急性転化における慢性骨髄性白血病（ＧＭＬ）患者のための可能性 のある治療薬としてチアゾフリンが注目されるようになった（Ｇ．Ｗｅｂｅｒ、 米国特許第５，４０５，８３７号；１９９５年）。細胞内で、チアゾフリンは、 ＩＭＰデヒドロゲナーゼを阻害し、その結果としてグアノシン・ヌクレオチド・ プールを枯渇させる、その活性型代謝物、チアゾール−４−カルボキサイミドア デニンジヌクレオチド（ＴＡＤ）に変換される（Ｅ．Ｏｌａｈ，Ｙ．Ｎａｔｕｓ ｍｅｄａ，Ｔ．Ｉｋｅｇａｍｉ，Ｚ．Ｋｏｔｅ，Ｍ．Ｈｏｒａｎｙｉ，Ｉ Ｓｚ ｅｌｅｎｙｅ，Ｅ．Ｐａｕｌｉｋ，Ｔ．Ｋｒｅｍｍｅｒ，Ｓ．Ｒ．Ｈｏｌｌａｎ ，Ｊ．ＳｕｇａｒおよびＧ．Ｗｅｂｅｒ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃ ｉ．ＵＳＡ，１９８８，８５，６５３３）。 チアゾフリンは１５年以上前から知られており、現在ではヒトにおけるフェイ ズＩＩ／ＩＩＩ試験中であるが、大量製造に適した合成法は存在しない。チアゾ フリンは、最初、Ｍ．Ｆｕｅｒｔｅｓら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９７６，４１ ， ４０７６）およびＳｒｉｖａｓｔａｖａら（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ.，１９７７ ，２０，２５６）により別々に低収率で合成された。 いずれの方法においても、著者らは副生成物（即ち、化合物１２）を得ており、 生成物を精製するために各段階でカラムクロマトグラフィーを使用した。これら の方法の主要な欠点は、フラン誘導体の形成、そして毒性の強い硫化水素ガスの 利用である。 Ｗ．Ｊ．Ｈａｎｎｏｎら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８５，５０，１７４ １）は、１９％収率の多少異なるチアゾフリンの経路を開発した。Ｈａｎｎｏｎ の方法でも、やはり、低収率、Ｈ₂Ｓガスの使用、およびクロマトグラフィーに よる精製が問題となる。 さらに最近、Ｐ．Ｖｏｇｅｌら（Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ．，１９８９，７２ ，１８２５）は、２５％の収率で９段階でチアゾフリンを合成した。さらに 最近、Ｄ．Ｃ．Ｈｕｍｂｅｒら（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａ ｎｓ．１，１９９０，２８３）は、ベンジル（２，３，５−トリ−Ｏ−ベンゾイ ル−β−Ｄ−リボフラノシル）ペニシリネートを出発物質としてチアゾフリンの 合成を行った。 唯一知られている、大量製造に適している方法は、Ｐａｒｓｏｎｓ ら（米国特許第４，４５１，６８４号）による方法である。残念なことに、Ｐａ ｒｓｏｎｓの方法では、シアン化水銀と硫化水素の両方が使用され、これらはい ずれも安全面および環境面での問題を有している。また、Ｐａｒｓｏｎｓの方法 では、生成物の混合物が得られる。 チアゾフリンの大量製造に伴う上述の問題は、その他のＣ−ヌクレオシドの大 量製造にも当てはまる。例えば、チオカルボキサミドの製造においては、既知の 方法の大部分が、シアノ基を対応するチオカルボキサミド基に変換するための試 薬として硫化水素ガスを使用している。そのような方法は、固有の環境的な問題 を有している。Ｃ−ヌクレオシド全般の製造において、既知の合成法の大部分ま たは全てにより、閉環工程において生成物の混合物が得られる。このように、依 然として、チアゾフリンおよびその他のＣ−ヌクレオシドの大量製造のための新 規な方法が必要とされている。発明の概要 本発明は、複素環が提供されるよう一段階で糖のＣ₁位が誘導体化され、次に さらなる一段階で複素環が芳香族化される、Ｃ−ヌクレオシドを合成するための 新規な方法に関する。 一つのクラスの好ましい実施態様においては、シアノ糖がチオカルボキサミド に変換され、続いてアゾール環が形成されるよう縮合される。第二のクラスの好 ましい実施態様においては、アゾール環が提供されるようシアノ糖がアミノ酸と 縮合される。第三のクラスの好ましい実施態様においては、アゾール環が提供さ れるようハロ糖が予め形成された複素環と縮合される。 本方法には多くの利点がある。一つの利点は、本方法には、環境的に危険な硫 化水素ガスが必要でない点である。もう一つの利点は、従来の方法と比較して収 率が実質的に改善されている点である。第三の利点は、本方法にはクロマトグラ フィーによる精製過程が不要であり、従って製造コストが低い点である。 これらおよびその他の様々な本発明の目的、特徴および利点は、以下の本発明 の好ましい実施態様の詳細な説明を、添付の図面と合わせて参照することにより 、さらに明らかとなるであろう。図面において、同じ数字は同じ成分を表す。図面の簡単な説明 図１は、本発明の様々な実施態様を示す一連の反応図式である。 図２は、本発明の様々な実施態様を示す別の一連の反応図式 である。 図３は、本発明の様々な実施態様を示す別の一連の反応図式である。詳細な説明 本発明を実施するための３つの好ましいクラスの方法が存在する。それらを、 それぞれ、チアゾフリンの製造に関して図１、２および３で例示する。 一つの好ましいクラスの実施態様においては、シアノ糖がチオカルボキサミド に変換され、続いてアゾール環が形成されるよう縮合される。図１に示されてい る特別な例においては、保護（ブロック）されたシアノ糖（２）がチオカルボキ サミド（３）に変換され、続いてチアゾフリン中間体（４）が得られるようエチ ルブロモピルビン酸と縮合される。示されたプロセスは、副生成物（１２または４ のα異性体）なしに定量的な収率でチアゾフリンを供給する。 第二の好ましいクラスの実施態様においては、アゾール環が提供されるようシ アノ糖がアミノ酸と縮合される。図２に示されている特別な例においては、閉環 した生成物（９）が得られるよう既知のシアノ（８）がシステインアルキルエス テル塩酸 塩と縮合され、それが次にチアゾフリン中間体（１０）が提供されるよう活性化 二酸化マンガンで芳香族化される。この重要な中間体（１０）は、良好な収率で 便利にチアゾフリンに転換される。 第三の好ましいクラスの実施態様においては、アゾール環が提供されるようハ ロ糖が予め形成された複素環と縮合される。 図１に示されている特別な例においては、チアゾフリンを容易に誘導することが できる重要な中間体（４）が提供されるよう、予め形成された複素環（１３）が 既知のハロ糖（１４）と縮合される。 当然、本明細書に開示された本発明の方法は、チアゾフリンの作製に限定され ず、容易に一般化することができ、特に、第二および第三のクラスの方法は事実 上全てのＣ−ヌクレオシドに一般化することができる。一般的に、本発明に係る Ｃ−ヌクレオシドは、一般構造Ａ（ここで、ＡはＯ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮＲであ り（ここで、ＲはＨまたは保護基である。）；ＸはＯ、Ｓ、ＳｅまたはＮＨであ り；Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は独立にＨまたは低級アルキルであり、かつＺ₁、 Ｚ₂およびＺ₃は独立にＨまたは非Ｈである。）に含まれる。 構造Ａに包含される様々な化合物を達成するため、分子の糖部分は極めて多様 であってもよい。特に、糖自体は単純なフランである必要がない。例えば、酸素 が、チオ糖が形成されるよう硫黄に置換されていてもよいし、アミノ糖が形成さ れるよう窒素に置換されていてもよい。さらに、糖は、Ｃ２’位、Ｃ３’位およ びＣ４’位において水素以外の基で置換されていてもよい。またさらに、糖はＤ 配置を有していても、またはＬ配置を有していてもよく、アルファ異性体であっ ても、ベータ異性体であってもよい。またさらに、糖は合成の様々な段階におい て保護基を有していてもよい。これらの組み合わせは全て、構造Ｂ（ここで、Ａ はＯ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮＲであり（ここで、ＲはＨまたは保護基である。）； Ｂ₁、Ｂ₂およびＢ₃は独立に保 護基または低級アルキルであり、かつＺ₁、Ｚ₂およびＺ₃は独立にＨまたは非Ｈ である。）に包含される。基ＬはＣＮ、ハロゲンまたはＣＨＯのような反応性の 官能基である。 再び第二のクラスの好ましい実施態様に注目すると、システインアルキルエス テル塩酸塩の使用は、構造Ｃ（ここで、ＸはＯ、Ｓ、ＳｅまたはＮＨであり；Ｙ はＨまたは低級アルキルであり；かつＲ₄はＨまたは低級アルキルである。）で 表される化合物の使用に一般化されうる。 同様に、第三のクラスの好ましい実施態様において、予め形成された複素環の 使用は、構造Ｄ（ここで、Ｒ₄はＨまたは低級アルキルである。）で表される化 合物の使用に一般化されうる。 当然、多数の適当な保護基が存在する。特に、ベンゾイル、ベンジル、シリル 、またはイソプロピリデンを使用することができる。さらに、構造Ｅで表される ように、糖のＣ２’位およびＣ３’位における保護基にイソプロピリデン基を形 成させることも考慮される。 イソプロピリデン基は、トリフルオロ酢酸、ギ酸、酢酸、有機溶媒中のＨ⁺樹 脂、またはメタノール中のヨウ素からなる群より選択される試薬による処理を含 む、多くのプロセスにより除去されうる。本方法を構造Ｅに適用することにより 、構造Ｆで 表される化合物（ここで、Ｒ５はＨ、低級アルキル、アミンまたはアリルである 。）が得られる。 実施態様は、活性化二酸化マンガンまたはその他の試薬により構造Ｆを芳香族 化し、その後チアゾフリンまたは関連Ｃ−ヌクレオシドが提供されるよう保護基 を脱保護することを含む。 本発明の主題に係る特に好ましい実施態様は、以下に示される反応Ａまたは反 応Ｂを含む。 これらおよびその他の特徴は以下の実施例により理解されうる。実施例は、請 求の範囲に記載された主題の様々な態様を例示するためのものであり、請求の範 囲に記載された主題の範囲に関して限定するものではない。実験 実施例１ ２，３，５−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル−１−カルボニ トリル（２）：このカルボニトリルは、Ｒｏｂｉｎｓら（ＰＣＴ／ＵＳ９６／０ ２５１２）により確立された手法により調製した。 実施例２ ２，５−アンヒドロ−３，４，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル− Ｄ−アロンチオアミド（３）：方法Ａ：硫化水素を冷却され、（５℃）撹拌され た２’，３’，５’−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシルシアニド （２、５０ｇ）１０６．１６ｍｍｏｌ）を含む無水ＥｔＯＨ（９００ｍｌ）の懸 濁液中に５分間通し、次にＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１．２ｇ、１０ｍ ｍｏｌ）を一度に添加した。攪拌された反応混合物に５時間硫化水素をゆっくり と通した（反応フラスコからの排出チューブは、５％ＮａＯＨ中に作製された漂 白溶液に通した）。５時間後、フラスコを密閉し、２５℃末満で１６時間、攪拌 を継続した。最後の微量のＨ₂Ｓを除去するため、１時間、反応混合物にアルゴ ンを通した。懸濁液を０℃で２時間撹拌し、分離された固体を濾過し、冷無水Ｅ ｔＯＨで洗浄し、真空下、Ｐ₂Ｏ₅で乾燥させた。収量５２ｇ(９７％)；融点１３ ３〜１３５℃。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ４．７２（ｍ，２Ｈ）４．７４（ ｍ，１Ｈ），５．１２（ｄ，１Ｈ），５．７１（ｔ，１Ｈ），５．９８（ｔ，１ Ｈ），７．３０−７．６０（ｍ，１０Ｈ），７．８６（ｄ，２Ｈ），８．１４（ ｍ，４Ｈ）および８．４６（ｂｓ，１Ｈ）。 方法Ｂ：２’，３’，５’−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ −リボフラノシルシアニド（２、４．７１ｇ、１０．００ｍｍｏｌ）およびチオ アセトアミド（１．５０ｇ、２０．００ｍｍｏｌ）を含む無水ＤＭＦ（５０ｍｌ ）を無水塩化水素で飽和し、７０〜６０℃で２時間加熱した。反応物を冷却し、 蒸発乾燥させた。残さを塩化メチレン（１５０ｍｌ）に溶解させ、飽和ＮａＨＣ Ｏ₃溶液（１００ｍｌ）、水（１００ｍｌ）および食塩水（７０ｍｌ）で洗浄し た。有機抽出物を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍｌ） で洗浄した。合わせた濾液を、蒸発乾燥させた。残さを最少量の無水エタノール に溶解させ、冷却すると純粋な生成物が得られた。収量４．２０ｇ（８３％）。 この生成物の融点およびスペクトル特性は、前記の方法Ａで調製された生成物と 一致した。 実施例３ エチル２−（２’，３’，５’−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノ シル）チアゾール−４−カルボキシレート（４）：２，５−アンヒドロ−３’， ４’，６’−トリ−Ｏ−ベンゾイル−Ｄ−アロンチオアミド（３、１０．１２ｇ 、２０．００ｍｍｏｌ）および固体ＮａＨＣＯ₃（１６．８ｇ、２００ｍｍｏｌ ）の混合物を含む攪拌されている無水１，２− ジメトキシエタン（６０ｍｌ）に、０℃で、アルゴン雰囲気で、１０分間かけて 、エチルブロモピルビン酸（７．８ｇ、４０．００ｍｍｏｌ）を添加した。添加 後、０℃でアルゴン下で６時間、反応混合物を攪拌した。ＴＬＣにより、出発物 質が完全に単一の生成物に変換されたことが示された（Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ、７ ：３）。アルゴン下、ドライアイス／ＣＣｌ₄中、反応液を−１５℃に冷却した 。無水トリフルオロ酢酸（１２．６ｇ、６０．００ｍｍｏｌ）および２，６−ル チジン（１２．８４ｇ、１２０ｍｍｏｌ）が溶解した無水１，２−ジメトキシエ タン（２０ｍｌ）の溶液を、１５分間かけて徐々に添加した。添加後、反応液を アルゴン雰囲気下−１５℃で２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、無水塩化メ チレン（１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた濾液を減圧下、蒸発乾燥させた。残 さをＣＨ₂Ｃｌ₂（２００ｍｌ）に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液でｐＨを７に 調節した。有機抽出物を１Ｎ ＨＣｌ（１００ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ₃（２０ ０ｍｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾 燥させ、濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（１００ｍｌ）で洗浄し、蒸発乾燥させた。粗物質 をそのまま次の反応に用いた。溶出液としてヘキサン−酢酸 エチルを用いたシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより少量を精製 した。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ１．３６（ｔ，３Ｈ），４．４０（ｍ，２ Ｈ），４．６２（ｄｄ，１Ｈ），４．７４（ｍ，１Ｈ），４．８６（ｄｄ，１Ｈ ），５．７４（ｄ，１Ｈ），５．８４（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．６０（ｍ， ９Ｈ），７．９１（ｄ，２Ｈ），７．９８（ｄ，２Ｈ），８．０８（ｍ，２Ｈ） および８．１２（ｓ，１Ｈ）。 実施例４ エチル２−（β−Ｄ−リボフラノシル）チアゾール−４−カルボキシレート（５ ）：アルゴン雰囲気下、未精製のエチル（２’，３’，５’−トリ−Ｏ−ベン ゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル）チアゾール−４−カルボキシレート（４、１ ５．００ｇ）を無水エタノール（１００ｍｌ）に溶解させ、ナトリウムエトキシ ド粉末（１．３６ｇ、２０ｍｍｏｌ）で処理した。アルゴン下で１２時間室温で 反応混合物を撹拌した。溶液をダウェックス（Ｄｏｗｅｘ）５ＯＷ−Ｘ８Ｈ⁺樹 脂で中和し、濾過し、メタノール（１００ｍｌ）で洗浄した。濾液を蒸発乾燥さ せた。残さを水（１００ｍｌ）およびクロロホルム（１５０ｍｌ）に分配させた 。水層をクロロホルム（１００ｍｌ）で洗浄し、蒸発乾 燥させた。残さをメタノール（１００ｍｌ）に溶解させ、シリカゲル（１５ｇ） を添加し、蒸発乾燥させた。シリカゲルに吸着した乾燥した化合物をＣＨ₂Ｃｌ₂ に充填されたシリカカラム（５×２０ｃｍ）の上部に載せた。カラムを、ＣＨ₂ Ｃｌ₂／アセトン（７：３；５００ｍｌ）で溶出し、その後ＣＨ₂Ｃｌ₂／メタノ ール（９５：５；１０００ｍｌ）で溶出した。ＣＨ₂Ｃｌ₂／メタノール画分を合 わせ、蒸発させると純粋な５が得られた。少量を、無色生成物として２−プロパ ノール／エーテルから結晶化した。収量４．８ｇ（８３％）；融点６２〜６４℃ 。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１．３６（ｔ，３Ｈ），３．５２（ｍ，２ Ｈ），３．８４（ｍ，２Ｈ），４．０６（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｍ，２Ｈ）， ４．９４（ｔ，１Ｈ），４．９８（ｄ，１Ｈ），５．０８（ｄ，１Ｈ），５．４ ６（ｄ，１Ｈ）および８．５２（ｓ，１Ｈ）。 実施例５ ２−β−Ｄ−リボフラノシルチアゾール−４−カルボキサミド（チアゾフリン ）（６）：未精製のエチル２−（β−リボフラノシル）チアゾール−４−カルボ キシレート（５、４．６ｇ、１５．９２ｍｍｏｌ）をスチール・ボンベに投入し 、新たに調 製されたメタノール性アンモニア（０℃で飽和、７０ｍｌ）と混合した。反応混 合物を室温で１２時間撹拌した。スチール・ボンベを冷却し、注意深く開け、内 容物を蒸発乾燥させた。残さを無水エタノール（６０ｍｌ）で粉砕し、蒸発乾燥 させた。残さを無水エタノール（６０ｍｌ）で処理し、粉砕すると明るい黄色の 固体が得られた。固体を濾過し、酢酸エチルで洗浄し、乾燥させた。固体をエタ ノール／酢酸エチルから結晶化すると純粋な生成物が得られた。収量３．６ｇ（ ８７％）；融点１４２〜１４４℃。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ３．５７ （ｍ，２Ｈ），３．８９（ｂｓ，２Ｈ），４．０６ （ｍ，１Ｈ），４．８４（ ｔ，１Ｈ），４．９３（ｄ，１Ｈ），５．０６（ｍ，１Ｈ），５．３７（ｄ，１ Ｈ），７．５７（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｓ，１Ｈ）および８．２１（ｓ，１Ｈ ）。 実施例６ ５−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル−１−カルボニトリル（７）： ２’，３’，５’−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル−１−カル ボニトリル（２、６１ｇ、１２９．４０ｍｍｏｌ）を含むクロロホルムの溶液（ ２００ｍｌ）を、攪拌しながら、アルゴン雰囲気下、氷冷飽和無水メタノー ル性アンモニア（５００ｍｌ）に添加した。反応混合物を０℃で４．５時間攪拌 した。ＴＬＣにより、出発物質が完全に変換されたことが示された。反応混合物 を蒸発乾燥させた。残さを酢酸エチル（５００ｍｌ）に溶解させ、飽和ＮａＨＣ Ｏ₃溶液（１００ｍｌ）、水（３００ｍｌ）および食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄 した。有機層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、酢酸エチル（１００ｍｌ） で洗浄し、濾液を合わせ、蒸発乾燥させると、暗茶色の液体が得られた。液体を ベンゼン（１００ｍｌ）に溶解させ、ヘキサン（５０ｍｌ）およびアセトン（１ ５ｍｌ）で希釈した。溶液を室温で一晩放置すると、結晶が得られた。固体を濾 過し、ヘキサンで洗浄し、乾燥させた。収量２９ｇ（８５％）；融点１１６〜１ １７℃。 実施例７ ５−Ｏ−ベンゾイル−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノシ ル−１−カルボニトリル（８）：固体の５’−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフ ラノシル−１−カルボニトリル（７、２６．３ｇ、１００ｍｍｏｌ）を７２％過 塩素酸（４ｍｌ）を含む２，２−ジメトキシプロパン（３０ｍｌ）および無水ア セトン（１５０ｍｌ）の撹拌中の溶液に、アルゴン雰囲 気下、一度に添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した。溶液を水酸化アン モニウムで中和し、蒸発乾燥させた。残さをクロロホルム（２５０ｍｌ）に溶解 させ、水（２×２００ｍｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。有機層を 無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、クロロホルム（５０ｍｌ）で洗浄し、濾液 を蒸発乾燥させた。残さをエーテル−ヘキサンから結晶化すると、無色の結晶が 得られた。収量２８．５ｇ（９５％）；融点６２〜６３℃。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ Ｃｌ₃）：δ１．３５（ｓ，３Ｈ），１．５２（ｓ，３Ｈ），４．５１（ｍ，２ Ｈ），４．５９（ｍ，２Ｈ），４．７７（ｄ，１Ｈ），４．８７（ｄ，１Ｈ）， ５．１０（ｍ，１Ｈ），７．４６（ｍ，２Ｈ），７．５７（ｍ，１Ｈ）および８ ．０７（ｍ，２Ｈ）。 実施例８ エチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β −Ｄ−リボフラノシル）チアゾリン−４−カルボキシレート（９）：５’−Ｏ− ベンゾイル−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノシル−１ −カルボニトリル（８、４．７１ｇ、１５．５５ｍｍｏｌ）を含む無水塩化メチ レン（１５０ｍｌ）の撹拌されている溶液に、アルゴ ン雰囲気下、室温で、０時間後、２時間後、４時間後および６時間後に、システ インエチルエステル塩酸塩（１．４９ｇ、８ｍｍｏｌ）および（０．８１ｇ、８ ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温でアルゴン雰囲気下で２４時間攪拌し た。反応物を塩化メチレン（１００ｍｌ）で希釈し、水（２００ｍｌ）および食 塩水（１５０ｍｌ）で洗浄した。ＣＨ₂Ｃｌ₂抽出物を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ 、濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍｌ）で洗浄し、濾液を蒸発乾燥させた。残さを次 の反応にそのまま用いた。溶出液としてヘキサン／酢酸エチルを用いたシリカゲ ルでのフラッシュクロマトグラフィーにより少量の粗生成物を精製し、プロトン スペクトル分析により特徴決定した。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ１．２４（ｔ ，３Ｈ），１．３５（ｓ，３Ｈ），１．５２（ｓ，３Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ ），４．２０（ｍ，２Ｈ），４．４２（ｍ，３Ｈ），４．８０（ｍ，２Ｈ），５ ．１２（ｍ，２Ｈ），７．４２（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｍ，１Ｈ）および８． ０８（ｍ，２Ｈ）。 実施例９ エチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−β −Ｄ−リボフラノシル）チアゾール−４−カ ルボキシレート（１０）： 方法Ａ：未精製のエチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−２’，３’−Ｏ−イソ プロピリデン−β−Ｄ−リボフラノシル）チアゾリン−４−カルボキシレート（９ 、７．０ｇ）を含む塩化メチレン（３００ｍｌ）の激しく攪拌されている溶液 に、室温で、活性化二酸化マンガン（２７．８ｇ）を添加した。反応混合物を室 温で２４時間攪拌し、セライトで濾過し、アセトン（２００ｍｌ）で洗浄した。 濾液を合わせ、蒸発乾燥させると、油状の残さが得られた。収量５．９ｇ（シア ノ糖８から８８％）。溶出液としてＣＨ₂Ｃｌ₂−酢酸エチルを用いたシリカゲル でのフラッシュクロマトグラフィーにより少量の粗生成物を精製し、プロトンス ペクトル分析により特徴決定した。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ１．３９（ｔ ，６Ｈ），１．６３（ｓ，３Ｈ），４．３９（ｍ，３Ｈ），４．６０（ｍ，２Ｈ ），４．８４（ｍ，１Ｈ），５．２６（ｍ，１Ｈ），５．４０（ｄ，１Ｈ），７ ．４０（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｍ，１Ｈ），７．８９（ｍ，２Ｈ）および８． ０２（ｓ，１Ｈ）。 方法Ｂ：未精製のエチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−２’，３’−Ｏ−イソ プロピリデン−β−Ｄ−リボフラノシル）チア ゾリン−４−カルボキシレート（９、７．０ｇ）および活性化二酸化マンガン（ ２７．８ｇ）の混合物を含む無水ベンゼン（１５０ｍｌ）を８０℃で２時間加熱 した。反応混合物をセライトで濾過し、アセトン（２００ｍｌ）で洗浄した。濾 液を合わせ、蒸発乾燥させると、油状の残さが得られた。収量６．０ｇ（シアノ 糖８から８９％）。溶出液としてＣＨ₂Ｃｌ₂−酢酸エチルを用いたシリカゲルで のフラッシュクロマトグラフィーにより少量の粗生成物を精製し、プロトンスペ クトル分析により特徴決定した。両方法により得られた生成物は、全ての点で同 一であることが見出された。 方法Ｃ：未精製のエチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−２’，３’−Ｏ−イソ プロピリデン−β−Ｄ−リボフラノシル）チアゾリン−４−カルボキシレート（９ 、２．０ｇ）を含む塩化メチレン（１００ｍｌ）の激しく撹拌されている溶液 に、室温で過酸化ニッケル（１０．０ｇ）を添加した。反応混合物を室温で２４ 時間撹拌し、セライトで濾過し、アセトン（２００ｍｌ）で洗浄した。濾液を合 わせ、蒸発乾燥させると、油状の残さが得られた。収量５．９ｇ（シアノ糖８か ら８８％）。この方法により得られた生成物は、方法ＡおよびＢにより得られた 生成 物と全ての点で同一であることが見出された。 実施例１０ エチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル）チアゾール− ４−カルボキシレート（１１）：エチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−２’，３ ’−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラノシル）チアゾール−４−カルボ キシレート（１０、４．５ｇ、１０．３９ｍｍｏｌ）を含むトリフルオロ酢酸： テトラヒドロフラン：水（３０：２０：６ｍｌ）の混合物の溶液を室温で１時間 撹拌した。反応混合物を蒸発乾燥させた。残さを塩化メチレン（１００ｍｌ）に 懸濁させ、冷却し、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液で中和した。水溶液をＣＨ₂Ｃｌ₂（２ ×１００ｍｌ）で抽出し、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液（１００ｍｌ）、水（１００ｍ ｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。有機抽出物を無水ＭｇＳＯ₄で乾 燥させ、濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（１００ｍｌ）で洗浄し、濾液を蒸発乾燥させた。 残さをエタノール／水（１：１）から結晶化すると、無色の結晶が得られた。固 体を濾過し、真空下、Ｐ₂Ｏ₅で乾燥させた。収量４．０ｇ（９８％）；融点８２ 〜８５℃。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ１．３３（ｔ，３Ｈ），４．３１（ｍ ，４Ｈ），４．４５（ｍ， ３Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｍ，１Ｈ），５．３２（ｄ，１Ｈ） ，７．３７（ｍ，２Ｈ），７．５１（ｍ，１Ｈ）および７．９９（ｍ，３Ｈ）。実施例１１ ２−β−Ｄ−リボフラノシルチアゾール−４−カルボキサミド（チアゾフリン ）（６）：エチル２−（５’−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−リボフラノシル）チア ゾール−４−カルボキシレート（１１、３．７ｇ、９４２ｍｍｏｌ）をスチール ・ボンベに投入し、新たに調製された冷メタノール性アンモニア（７０ｍｌ、０ ℃で飽和）と混合した。混合物を湿気から保護し、室温で１２時間攪拌した。ス チール・ボンベを０℃に冷却し、注意深く開け、粘着性の泡状物質へと蒸発させ た。残さを無水トルエン（３×５０ｍｌ）で粉砕し、トルエン層を捨てた。得ら れた残さを無水エタノール（６０ｍｌ）で処理し、粉砕すると明るい黄色の固体 が得られた。固体を濾過し、酢酸エチルで洗浄し、乾燥させた。固体をエタノー ル−酢酸エチルから結晶化すると２．２５ｇ（９０％）の純粋な生成物：融点１ ４５〜１４７℃が得られた。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ３．５７（ｍ， ２Ｈ），３．８９）（ｓ，２Ｈ），４．０７（ｍ，１Ｈ）， ４．８３（ｔ，１Ｈ），４．９２（ｄ，１Ｈ），５．０５（ｄ，１Ｈ），５．３ ６（ｄ，１Ｈ），７．５６（ｓ，１），７．６９（ｓ，１）および８．２０（ｓ ，１）。 このように、チアゾフリンおよびその他のＣ−ヌクレオシドを得る方法の具体 的な実施態様および応用を開示した。しかし、当業者には、既に記述されたもの の他に、本明細書の本発明の概念から逸脱することなく、さらなる多くの改変が 可能であることが明らかとなるはずである。従って、本発明の主題は、添付の請 求の範囲の精神以外には制限されない。

【手続補正書】 【提出日】平成１２年１１月７日（２０００．１１．７） 【補正内容】 請求の範囲 １．構造Ｂ（ここで、Ｌは反応基である。）で表される化合物を準備すること、 一段階で、複素環を有する構造Ｄが形成されるよう構造ＢのＬを反応させること 、および 一段階で、複素環を芳香族化することを含む、構造Ａで表されるヌクレオシドを 合成する方法。（ここで、ＡはＯ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮＲであり（ここで、ＲはＨまたは保護基 である。）；ＸはＯ、Ｓ、ＳｅまたはＮＨであり；Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は独 立にＨまたは低級アルキルであり；Ｒ₅はＨＮ低級アルキル、アミンまたはアリ ールであり； Ｂ₁、Ｂ₂およびＢ₃は独立に保護基または低級アルキルであり、か つＺ₁、Ｚ₂およびＺ₃は独立にＨまたは非Ｈである。） ２．Ｌが−ＣＮまたは−ＣＨＯである、請求項１の方法。 ３．構造Ｄが形成されるよう構造ＢのＬを反応させる工程が、構造Ｂを構造Ｃ（ ここで、ＹはＨまたは低級アルキルである。） と反応させることを含む、請求項 ２の方法。 ４．構造Ｂで表される化合物が構造Ｅである、請求項１の方法。 ５．構造Ｄが形成されるようＬを反応させる工程が、構造Ｅを構造Ｃ（ここで、 ＹはＨまたは低級アルキルである。） と反応させることを含む、請求項４の方法 。 ６．Ｌを置換する工程が反応Ａを含む、請求項１の方法。 ７．Ｌが構造Ｄで置換される、請求項２の方法。 ８．構造Ｆ（ここで、Ｒ₅はＨ、低級アルキル、アミンまたはアリールである。 ）で表される中間体が生成するよう、アミノ酸および置換されたアミノ酸からな る群より選択される試薬と化合物を反応させることをさらに含む、請求項７の方 法。 ９．アミノ酸がシステインアルキルエステル塩酸塩である、請求項８の方法。 １０．構造Ｆの化合物を芳香族化することをさらに含む、請求項８の方法。１１．芳香族化の工程が、構造Ｆの化合物を活性化二酸化マンガンで処理するこ とを含む、請求項８の方法。 １２．Ｌを反応させる工程が反応Ｂを含む、請求項１の方法。 １３．化合物がイソプロピリデン基を含み、かつイソプロビリデン基がトリフル オロ酢酸、ギ酸、酢酸、有機溶媒中のＨ⁺樹脂、およびメタノール中のヨウ素か らなる群より選択される試薬による処理により除去される、請求項１１の方法。 １４．ヌクレオシドがチアゾフリンである、請求項１〜１３のいずれか一項の方 法。 １５．構造Ｂの化合物がＬ−リボースを含む、請求項１〜１３のいずれか一項の 方法。 １６．Ｚ₁、Ｚ₂およびＺ₃のうちの少なくとも一つがＨでない、請求項１５の方 法。 １７．構造Ｂの化合物がアルファ異性体である、請求項１〜１３のいずれか一項 の方法。 １８．構造Ｂの化合物がベータ異性体である、請求項１〜１３のいずれか一項の 方法。 １９．ＡがＮＲであり、ＲがＣＯＣＨ₃であり、かつＸがＳでない、請求項１〜 １３のいずれか一項の方法。 ２０．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する化合物。 ２１．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有し、糖部分がアルファ異性体である化合物。 ２２．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する化合物において、糖部分がＬ配置を有する化合物。 ２３．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する化合物において、糖部分がアルファ異性体である化合物。 ２４．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する化合物において、Ｚ₁、Ｚ₂およびＺ₃のうちの少なくとも一つ がＨでない化合物。 【図１】【図２】【図３】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ， ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ， ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，Ｅ Ｅ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ， ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，Ｍ Ｄ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ， ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，Ｕ Ｚ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 バンダル，ラージヤニカンス アメリカ合衆国、カリフオルニア・92612、 アービン、ジヨーダン・アベニユー・ 17626、アパートメント・ナンバー・29・ ビー (72)発明者 アベレツト，デブロン アメリカ合衆国、カリフオルニア・92653、 アービン、トリニテイ・26

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．構造Ｂ（ここで、Ｌは反応基である。）で表される化合物を準備すること、 一段階で、複素環を有する構造Ｄが形成されるよう構造ＢのＬを反応させること 、および 一段階で、複素環を芳香族化することを含む、構造Ａで表されるヌクレオシドを 合成する方法。 （ここで、ＡはＯ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮＲであり（ここで、ＲはＨまたは保護基 である。）；ＸはＯ、Ｓ、ＳｅまたはＮＨであり；Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は独 立にＨまたは低級アルキルであり；Ｂ₁、Ｂ₂およびＢ₃は独立に保護基または低 級アルキルであり、かつＺ₁、Ｚ₂およびＺ₃は独立にＨまたは非Ｈである。） ２．Ｌが−ＣＮまたは−ＣＨＯである、請求項１の方法。 ３．構造Ｄが形成されるよう構造ＢのＬを反応させる工程が、構造Ｂを構造Ｃと 反応させることを含む、請求項２の方法。 ４．構造Ｂで表される化合物が構造Ｅである、請求項１の方法。 ５．構造Ｄが形成されるようＬを反応させる工程が、構造Ｅを構造Ｃと反応させ ることを含む、請求項４の方法。 ６．Ｌを置換する工程が反応Ａを含む、請求項１の方法。７．Ｌが構造Ｄで置換される、請求項２の方法。 ８．構造Ｆ（ここで、Ｒ₅はＨ、低級アルキル、アミンまたはアリルである。） で表される中間体が生成するよう、アミノ酸および置換されたアミノ酸からなる 群より選択される試薬と化合物を反応させることをさらに含む、請求項７の方法 。 ９．アミノ酸がシステインアルキルエステル塩酸塩を含む、請求項８の方法。 １０．構造Ｆの化合物を芳香族化することをさらに含む、請求項８の方法。 １１．芳香族化の工程が、構造Ｆの化合物を活性化二酸化マンガンで処理するこ とを含む、請求項８の方法。１２．Ｌを反応させる工程が反応Ｂを含む、請求項１の方法。 １３．化合物がイソプロビリデン基を含み、かつイソプロピリデン基がトリフル オロ酢酸、ギ酸、酢酸、有機溶媒中のＨ⁺樹脂、またはメタノール中のヨウ素か らなる群より選択される試薬による処理により除去される、請求項１１の方法。 １４．ヌクレオシドがチアゾフリンである、請求項１〜１３の いずれか一項の方法。 １５．構造Ｂの化合物がＬ−リボースを含む、請求項１〜１３のいずれか一項の 方法。 １６．Ｚ₁、Ｚ₂およびＺ₃のうちの少なくとも一つがＨでない、請求項１５の方 法。 １７．構造Ｂの化合物がアルファ異性体である、請求項１〜１３のいずれか一項 の方法。 １８．構造Ｂの化合物がベータ異性体である、請求項１〜１３のいずれか一項の 方法。 １９．ＡがＮＲであり、ＲがＣＯＣＨ₃であり、かつＸがＳでない、請求項１〜 １３のいずれか一項の方法。 ２０．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する、チアゾフリン以外の化合物。 ２１．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有し、チアゾフリン以外の化合物において、糖部分がアルファ異性体 である化合物。 ２２．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する化合物において、糖部分が Ｌ配置を有する化合物。 ２３．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する化合物において、糖部分がアルファ異性体である化合物。 ２４．請求項１〜１３のいずれか一項の方法により作製され、かつ構造Ａで表さ れる構造を有する化合物において、Ｚ₁、Ｚ₂およびＺ₃のうちの少なくとも一つ がＨでない化合物。