JP2002238554A - ウレアーゼ不活性化組成物及び飲食品 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 パーオキシダーゼ、チオシアン酸及び過酸化
水素を有効成分とするウレアーゼ不活性化組成物及び飲
食品を提供する。 【解決手段】 パーオキシダーゼ、チオシアン酸及び過
酸化水素を有効成分とするウレアーゼ不活性化組成物で
あって、パーオキシダーゼがラクトパーオキシダーゼ又
はミエロパーオキシダーゼのいずれかであること、並び
にパーオキシダーゼ、チオシアン酸及び過酸化水素を有
効成分とするウレアーゼ不活性化飲食品であって、パー
オキシダーゼがラクトパーオキシダーゼ又はミエロパー
オキシダーゼのいずれかであること、チオシアン酸が植
物から供給されること、過酸化水素が微生物によって供
給されること、及び飲食品が発酵乳であることを望まし
い態様としてもいる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、尿素の加水分解を
触媒するウレアーゼを不活性化する組成物及び飲食品に
関するものである。さらに詳しくは、本発明は、パーオ
キシダーゼ、チオシアン酸及び過酸化水素を有効成分と
するウレアーゼ不活性化組成物及び飲食品に関する。

【０００２】

【従来の技術】ウレアーゼは尿素を加水分解してアンモ
ニアと二酸化炭素を生成する酵素であり、植物や微生物
に広く分布することが知られている。

【０００３】ヒトでは肝臓で生成された尿素の約２０％
は循環によって腸管に達し、さらに腸管の内部に拡散し
て細菌のウレアーゼによる分解を受け、その結果、アン
モニアが合成される。ヒトの肝性脳症や肝性昏睡は、重
度の肝機能不全状態においてアンモニアを解毒できず、
血中に残存する高レベルのアンモニアによって脳が障害
される疾患である［マイクロバイオロジカル・レビュー
ズ（MicrobiologicalReviews）、第５３巻、第８５乃至
１０８頁、１９８９年］。肝性脳症や肝性昏睡の発病機
構は完全に解明されてはいないが、腸管に存在する尿素
分解性細菌が産生するアンモニアの関与が示唆されてい
る。微生物のウレアーゼによって産生されるアンモニア
は腸内腐敗産物の一種でもあり、多量のアンモニアは宿
主に対して毒性を示し、老化を早める要因になると考え
られている（腸内細菌学、光岡友足編、朝倉書店、第１
０２及び４０１頁、１９９０年）。

【０００４】微生物のウレアーゼは、病原因子および宿
主への定着因子としても機能することが知られている
［マイクロバイオロジカル・レビューズ（Microbiologi
cal Reviews）、第５９巻、第４５１乃至４８０頁、１
９９５年］。胃炎や胃潰瘍の原因菌であるヘリコバクタ
ー・ピロリ（Helicobacter pylori）のウレアーゼは、
尿素を分解してアンモニアを発生させることで胃酸を中
和する役割を担っている。乳児のおむつかぶれの原因の
一つには、糞便細菌のウレアーゼが尿中の尿素を分解し
てアンモニアを発生させ、その結果、おむつのｐＨが上
昇し、糞便中の各種蛋白分解酵素や脂質分解酵素が活性
化されることが明らかにされている［ペディアトリック
・ダーマトロジー（Pediatric Dermatology）、第３
巻、第１０２乃至１０６頁、１９８６年］。さらに、微
生物のウレアーゼは、失禁症の大人のおむつから発生す
る悪臭（アンモニア臭）の原因となることも報告されて
いる［ゲロントロジー（Gerontology）、第３０巻、第
２６１乃至２６６頁、１９８４年］。

【０００５】従って、ウレアーゼの効率的な不活性化は
健康の維持、感染症の予防に有効であると考えられる。

【０００６】特開平８−１９５９５号公報では、植物由
来のウレアーゼ阻害物質からなるアンモニア発生防止剤
（以下、従来技術１と記載する。）が開示されている。
しかし、従来技術１のアンモニア発生防止剤では、食品
や医薬品としての応用例は無く、経口的に摂取すること
による体内のアンモニアの低減効果は一切記載されてい
ない。特開平７−１１８１５３号公報では、抗ウレアー
ゼ剤（以下、従来技術２と記載する。）が開示されてい
るが、化学合成された化合物であり、長期間投与の点で
副作用などが問題となっていた。

【０００７】このような状況から、少量でウレアーゼを
不活化し、しかも安全で副作用が少ない、日常の食生活
から摂取することが可能なウレアーゼを不活性化する食
品の開発が望まれていた。

【０００８】パーオキシダーゼは微生物、植物及び動物
に広く分布する酵素である［Ｈ．シーゲルおよびＡ．シ
ーゲル編、メタル・イオンズ・イン・バイオロジカル・
システムズ（Metal Ions in Biological Systems）、マ
ルセル デッカー、ニューヨーク、第２５乃至７５頁、
１９９４年］。補酵素としてヘムを含有するラクトパー
オキシダーゼは、母乳や牛乳など、哺乳類の乳に存在
し、動物の組織や体液に広く含有されるチオシアン酸を
過酸化水素の存在下で酸化して抗菌物質である次亜チオ
シアン酸を生成させる。またミエロパーオキシダーゼ
は、哺乳類の白血球の一種である好中球のアズール顆粒
に含有されており、貪食胞にアズール顆粒が融合して形
成されるファゴリソソームの中で、過酸化水素の酸化力
を利用して塩素イオンから抗菌物質である次亜塩素酸を
生成する。

【０００９】ラクトパーオキシダーゼ及びミエロパーオ
キシダーゼの抗菌・抗ウィルスの作用機構として、微生
物の酵素の不活性化が報告されており、例えば、細菌の
呼吸鎖の酵素を不活性化すること［フェムス・マイクロ
バイオロジー・レターズ（FEMS Microbiology Letter
s）、第１０巻、第６７乃至７０頁、１９８１年］が知
られている。また、ラクトパーオキシダーゼは、解糖系
の酵素であるヘキソキナーゼを不活性化し［バイオキミ
カ・エト・バイオフィジカ・アクタ（Biochimicaet Bio
physica Acta）、第６５８巻、第２３８乃至２４７頁、
１９８１年］、ミエロパーオキシダーゼは、インフルエ
ンザ・ウィルスのシアリダーゼを不活性化することが明
らかにされている［ジャーナル・オブ・インフェクシャ
ス・ディシージーズ（Journal of Infectious Disease
s）、第１６４巻、第８乃至１４頁、１９９１年］。

【００１０】これらパーオキシダーゼは、パーオキシダ
ーゼ、チオシアン酸および過酸化水素からなる反応系に
よって様々な効果を発揮している。例えばパーオキシダ
ーゼ−チオシアン酸イオン及び又はハロゲノイオン−過
酸化水素系を含む乳酸菌発酵食品の製造法（特開昭６２
−２２８２２４号公報）、二酵素系歯みがき（特公平４
−２５９２４号公報）、殺菌剤組成物（特開平１−６１
４２７号公報）など、すでに多様な用途への応用が開示
されている。

【００１１】しかしながら、これらパーオキシダーゼ、
チオシアン酸および過酸化水素からなる反応系がウレア
ーゼを不活性化させるという報告は未だなされていな
い。

【００１２】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、ヒトの
健康及び感染症におけるウレアーゼとの因果関係、及び
その重要性に注目し、安全性且つ経済性の観点から天然
に存在する安価な物質でウレアーゼを不活性化する方法
について鋭意研究を行っていたところ、パーオキシダー
ゼ、チオシアン酸および過酸化水素の反応系によるウレ
アーゼの不活性化機構を発見した。その結果、パーオキ
シダーゼ、チオシアン酸および過酸化水素のいずれか一
つ又は二つの組み合わせでは、ウレアーゼを不活性化す
る効果は確認されなかったにもかかわらず、三つを組み
合わせた系により、ウレアーゼを効果的に不活性化させ
る性質を見出し、この発明を完成させた。

【００１３】本発明は前記事情に鑑みてなされたもので
あり、安全性に優れ、効果的にウレアーゼを不活性化す
るウレアーゼ不活性化組成物及び飲食品を提供すること
を課題とする。

【００１４】

【課題を解決するための手段】前記課題を解決する本発
明の第一の発明は、パーオキシダーゼ、チオシアン酸及
び過酸化水素を有効成分とするウレアーゼ不活性化組成
物である。

【００１５】前記課題を解決する本発明の第一の発明に
おける望ましい態様は、パーオキシダーゼがラクトパー
オキシダーゼ又はミエロパーオキシダーゼのいずれかで
あることである。

【００１６】前記課題を解決する本発明の第二の発明
は、パーオキシダーゼ、チオシアン酸及び過酸化水素を
有効成分とするウレアーゼ不活性化飲食品である。

【００１７】前記課題を解決する本発明の第二の発明に
おける第一の望ましい態様は、パーオキシダーゼがラク
トパーオキシダーゼ又はミエロパーオキシダーゼのいず
れかであることである。

【００１８】前記課題を解決する本発明の第二の発明に
おける第二の望ましい態様は、チオシアン酸が植物から
供給されることである。

【００１９】前記課題を解決する本発明の第二の発明に
おける第三の望ましい態様は、過酸化水素が微生物によ
って産生されること、及び該微生物が乳酸菌であること
である。

【００２０】前記課題を解決する本発明の第二の発明に
おける第四の望ましい態様は、飲食品が発酵乳であるこ
とである。次に、本発明について具体的に説明する。

【００２１】

【発明の実施の形態】本明細書において百分率（％）
は、特に断りのない限り重量による表示である。また、
特に低い濃度の表示には百万分率（ｐｐｍ）を用いる。

【００２２】本発明に使用されるパーオキシダーゼは、
哺乳類のヘム・パーオキシダーゼであれば、どのような
動物の体液や組織から分離されたものでも可能である
が、中でもラクトパーオキシダーゼ及びミエロパーオキ
シダーゼが好ましく、特に牛乳から分離されたラクトパ
ーオキシダーゼが最も安価に得られるので好適である。

【００２３】ラクトパーオキシダーゼの製造は、例えば
生菌含有液状組成物（特開平５−４１９８１公報）に開
示された方法のように未加熱のホエーまたは脱脂乳から
工業的に製造することが好ましく、更に、市販の天然物
由来のラクトパーオキシダーゼ、又は組換え型ラクトパ
ーオキシダーゼ｛例えば、シンらの方法［バイオケミカ
ル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コミュニュ
ケーションズ（Biochemical and Biophysical Research
Communications）、第２７１巻、第８３１乃至８３６
頁、２０００年］によって発現・精製された組換え型ラ
クトパーオキシダーゼ、又は市販の組換え型ラクトパー
オキシダーゼ｝を使用することも可能である。

【００２４】ミエロパーオキシダーゼは、例えばモリタ
らの方法［ジャーナル・オブ・バイオケミストリー（Jo
urnal of Biochemistry）、第９９巻、第７６１乃至７
７０頁、１９８６年］によって、血液中の好中球から精
製されたミエロパーオキシダーゼが好ましいが、更に、
市販の天然物由来のミエロパーオキシダーゼ、又は組換
え型ミエロパーオキシダーゼ｛例えば、シンらの方法
［バイオケミカル・アンド・バイオフィジカル・リサー
チ・コミュニュケーションズ（Biochemical andBiophys
ical Research Communications）、第２７１巻、第８３
１乃至８３６頁、２０００年］によって発現・精製され
た組換え型ミエロパーオキシダーゼ、又は市販の組換え
型ミエロパーオキシダーゼ｝を使用することも可能であ
る。

【００２５】本発明に使用されるチオシアン酸には、チ
オシアン酸の薬学的に許容される塩類、哺乳類の乳に含
有されるチオシアン酸、並びにキャベツ、ブロッコリ
ー、カリフラワー、及びカブ等の１種又は２種以上から
選択される野菜に含有されるチオシアン酸など、様々な
形態のチオシアン酸を利用することが可能である。尚、
食品への使用に関しては、安全性の面を考慮すると、チ
オシアン酸は植物から供給されることが好ましく、特に
野菜を磨り潰す又はミキサーなどで粉砕することなどに
よって液状化して調製された野菜汁を使用してウレアー
ゼ不活性化飲食品を製造することが特に好ましい。

【００２６】本発明に使用される過酸化水素は、試薬の
過酸化水素及び過酸化水素塩、並びに低い酸化還元電位
を持つため酸素分子を還元することによって過酸化水素
の発生源となるヒドロキシヒドロキノン等のポリフェノ
ール、並びにグルコースオキシダーゼ及びキサンチンオ
キシダーゼ等のオキシダーゼとその基質であるグルコー
ス及びキサンチン等から生成される過酸化水素、並びに
ラクトバシルス（Lactobacillus）及びストレプトコッ
カス（Streptococcus）等が産生する過酸化水素など、
パーオキシダーゼが基質として利用できる過酸化水素で
あればよいが、食品への使用に関しては、安全性の面を
考慮すると、過酸化水素は乳酸菌から供給されることが
好ましい。

【００２７】パーオキシダーゼ、過酸化水素およびチオ
シアン酸の反応系によるウレアーゼの不活性化の効果を
調べるために使用するウレアーゼは、植物由来のウレア
ーゼ、及び微生物由来のウレアーゼ等を使用することが
可能である。

【００２８】本発明のウレアーゼ不活性化組成物は、ウ
レアーゼが触媒する尿素の加水分解によって発生するア
ンモニアを低減する目的で、おむつの吸収剤に添加した
り、トイレやペットの消臭剤に添加して、製品として製
造することが可能である。

【００２９】本発明のウレアーゼ不活性化飲食品は、ウ
レアーゼが触媒する尿素の加水分解によって発生するア
ンモニアが原因で起こると考えられる健康へのリスク、
感染症、悪臭発生など、体内のアンモニアを低減させる
目的で摂取することが可能であり、例えば、加工乳、コ
ーヒー飲料、及び流動食などの液状食品、並びにヨーグ
ルト（プレーンヨーグルト、フルーツヨーグルト、ハー
ドヨーグルト、ドリンクヨーグルト、フローズンヨーグ
ルト）を中心とした発酵乳などのペースト状及びゲル状
の食品で行われることを望ましい態様としている。

【００３０】尚、本発明のウレアーゼ不活性化組成物及
び飲食品を製造するにあたっては、本発明の有効成分の
供給源の如何に関わらず、ウレアーゼの残存活性が５０
％以下となるような効果を示すことが好ましい。植物由
来のウレアーゼを不活性化するためには、パーオキシダ
ーゼが０．１３ｐｐｍ以上、チオシアン酸が１．２ｐｐ
ｍ以上、及び過酸化水素が０．３１ｐｐｍ以上含有する
ことが望ましく、また、微生物由来のウレアーゼを不活
性化するためには、パーオキシダーゼが０．０６ｐｐｍ
以上、チオシアン酸が１．２ｐｐｍ以上、及び過酸化水
素が０．６３ｐｐｍ以上含有することが望ましいが、ウ
レアーゼ不活性化組成物及び飲食品を製造するにあたっ
ては、パーオキシダーゼが０．１３ｐｐｍ以上、チオシ
アン酸が１．２ｐｐｍ以上、及び過酸化水素が０．６３
ｐｐｍ以上含有することが特に望ましい。次に試験例を
示して本発明を詳細に説明する。

【００３１】試験例１ この試験は、パーオキシダーゼ、チオシアン酸および過
酸化水素を含む組成物による、植物由来のウレアーゼに
対する不活性化作用を調べるために行った。 （１）試料の調製 植物由来のウレアーゼであるナタ豆ウレアーゼ、パーオ
キシダーゼ、チオシアン酸、及び過酸化水素の各試料は
以下のとおり調製した。

【００３２】即ち、植物由来のウレアーゼは、ナタ豆か
ら精製されたウレアーゼ（和光純薬社製。以下、ナタ豆
ウレアーゼ溶液と記載する。）を１００ミリ単位／ｍｌ
の濃度となるように、５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ
６．６）に溶解して調製した。パーオキシダーゼは、精
製ウシラクトパーオキシダーゼ（シグマ社製。以下、ラ
クトパーオキシダーゼ溶液と記載する。）を、１６０ｐ
ｐｍの濃度になるように５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６．６）に溶解してラクトパーオキシダーゼ溶液と
し、また、ヒトミエロパーオキシダーゼ（アテンズ・リ
サーチ・アンド・テクノロジー社製。以下、ミエロパー
オキシダーゼ溶液と記載する。）を１６０ｐｐｍの濃度
になるように５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）
に溶解してミエロパーオキシダーゼ溶液として調製し
た。チオシアン酸は、チオシアン酸ナトリウムを５００
ｐｐｍの濃度になるように溶解して、チオシアン酸ナト
リウム溶液を調製した。過酸化水素は、２００ｐｐｍの
濃度になるように、５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ
６．６）に溶解して調製した。

【００３３】（２）試験方法 １２穴マイクロタイタープレート（ファルコン社製）
に、ナタ豆ウレアーゼ溶液を０．２ｍｌ添加し、次に、
ラクトパーオキシダーゼ溶液を０．１ｍｌ、チオシアン
酸ナトリウム溶液を０．２ｍｌおよび５０ミリモルリン
酸緩衝液（ｐＨ６．６）１．３ｍｌをそれぞれ添加し、
試験群１ａとした。これとは別に、試験群１ａのラクト
パーオキシダーゼ溶液の代わりに、ミエロパーオキシダ
ーゼ溶液を０．１ｍｌを添加して行った試験を試験群１
ｂとした。次に、マイクロタイタープレートを３７℃で
１０分間予備的に加温し、最後に、過酸化水素溶液を
０．２ｍｌ添加した。この溶液の最終容量は２ｍｌであ
り、８ｐｐｍのパーオキシダーゼ、５０ｐｐｍのチオシ
アン酸ナトリウム、及び２０ｐｐｍの過酸化水素を含
む。尚、対照試験として、パーオキシダーゼ、チオシア
ン酸、過酸化水素のいずれの成分も添加していない条件
である、試験群１ａのラクトパーオキシダーゼ溶液、試
験群１ｂのミエロパーオキシダーゼ溶液、チオシアン酸
ナトリウム溶液、及び過酸化水素溶液を、すべて５０ミ
リモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）に変更して添加した
条件で、同様の試験を行って、対照試験群１とした。各
溶液を添加してから１時間経過した時点で、１０ミリモ
ルアジ化ナトリウム溶液を２ｍｌ混合することによって
パーオキシダーゼ反応を停止した。この溶液に残存した
ウレアーゼ活性を、タケベらの方法［ケミカル・アンド
・ファーマシューティカル・ブレティン（Chemical and
Pharmaceutical Bulletin）、第３６巻、第６９３乃至
６９９頁、１９８８年］に従って測定した。ウレアーゼ
活性は、パーオキシダーゼ、チオシアン酸、過酸化水素
のいずれの成分も添加していない条件でインキュベート
した場合の活性に対する残存活性として求め、試験を３
回実施して平均値を計算した。

【００３４】（３）試験結果 この試験の結果は表１に示すとおりである。表１は、パ
ーオキシダーゼ、チオシアン酸、過酸化水素を含む組成
物のナタ豆由来のウレアーゼに対する作用を示した表で
ある。８ｐｐｍパーオキシダーゼ、２０ｐｐｍ過酸化水
素および５０ｐｐｍチオシアン酸から構成される試験群
１ａ及び試験群１ｂは、ナタ豆由来のウレアーゼの残存
活性を完全に消失させた。ウレアーゼ活性は、アジ化ナ
トリウムを添加することによってパーオキシダーゼ反応
を停止した後に測定したため、ウレアーゼは不活性化さ
れたことが判明した。更に、パーオキシダーゼ、チオシ
アン酸、過酸化水素を含む組成物を含有しない対照試験
群１は、ウレアーゼの不活性化が認められなかったこと
から、ウレアーゼの不活性化には、パーオキシダーゼ、
チオシアン酸、過酸化水素を含む組成物が必須であり、
その際、パーオキシダーゼはラクトパーオキシダーゼ又
はミエロパーオキシダーゼのいずれにおいても、ウレア
ーゼを不活性化させることが判明した。

【００３５】

【表１】

【００３６】試験例２ この試験は、パーオキシダーゼ、チオシアン酸および過
酸化水素を含む組成物による、微生物由来のウレアーゼ
に対する不活性化作用を調べるために行った。 （１）試料の調製 微生物由来のウレアーゼは以下のとおり調製した。即
ち、ヘリコバクター・ピロリ菌ＡＴＣＣ４３５０４株は
ヤマザキらの方法［ジャーナル・オブ・インフェクショ
ン・アンド・ケモセラピー（Journal of Infection and
Chemotherapy）、第３巻、第８５乃至８９頁、１９９
７年］に従って培養し、６０００×ｇ、１５分間、５℃
の条件で遠心分離することによってヘリコバクター・ピ
ロリ菌体画分を回収し、更に菌体に５０ミリモルのリン
酸緩衝液（ｐＨ６．６）を加えて懸濁した。このとき、
菌体懸濁液に含有されるウレアーゼの活性は５４．５ミ
リ単位／ｍｌであり、これをヘリコバクター・ピロリ菌
由来のウレアーゼ溶液（以下、ピロリ菌ウレアーゼ溶液
と記載する。）とした。

【００３７】また、ラクトパーオキシダーゼ溶液、ミエ
ロパーオキシダーゼ溶液、チオシアン酸ナトリウム溶
液、及び過酸化水素溶液については、試験例１と同様に
試料を調製した。

【００３８】（２）試験方法 この試験は、試験例１の試験群１ａ及び試験群１ｂのナ
タ豆ウレアーゼ溶液をピロリ菌ウレアーゼ溶液に変更し
た以外は、同様の方法によって試験を行い、試験群１ａ
及び試験群１ｂ に対応する試験群を、それぞれ試験群
２ａ及び試験群２ｂ とした。また、対照試験は対照試
験群１と同様に行い、対照試験群２とした。

【００３９】（３）試験結果 この試験の結果は表２に示すとおりである。表２は、パ
ーオキシダーゼ、チオシアン酸、過酸化水素を含む組成
物の微生物由来のウレアーゼに対する作用を示した表で
ある。その結果、試験群２ａ及び試験群２ｂは、ヘリコ
バクター・ピロリ菌由来のウレアーゼの残存活性を完全
に消失させた。更に、パーオキシダーゼ、チオシアン
酸、過酸化水素を含む組成物を含有しない対照試験群２
は、ウレアーゼの不活性化が認められなかった。

【００４０】従って、パーオキシダーゼ、チオシアン
酸、過酸化水素を含む組成物は、微生物由来のウレアー
ゼに対して不活性化の作用を示すことが判明した。

【００４１】

【表２】

【００４２】試験例３ この試験は、ラクトパーオキシダーゼの濃度と植物由来
のウレアーゼの不活性化効果との関係を調べるために行
った。 （１）試料の調製 パーオキシダーゼとして、ラクトパーオキシダーゼを使
用し、ラクトパーオキシダーゼの濃度が、１６０、２
０、１０、５、２．６、１．２、０．６及び０．３ｐｐ
ｍとなるように５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．
６）を使用して希釈した溶液を調製し、それぞれ試料１
ａ、試料１ｂ、試料１ｃ、試料１ｄ、試料１ｅ、試料１
ｆ、試料１ｇ、及び試料１ｈとした。植物由来のウレア
ーゼ溶液として用いるナタ豆ウレアーゼ溶液、チオシア
ン酸ナトリウム溶液、及び過酸化水素溶液は、試験例１
と同様の濃度にそれぞれ調製した。

【００４３】（２）試験方法 この試験は、試験例１の試験群１ａのラクトパーオキシ
ダーゼ溶液を試料１ａ乃至試料１ｈに変更した以外は同
様の方法で行い、試料１ａ乃至試料１ｈを用いた試験群
をそれぞれ試験群３ａ乃至試験群３ｈとした。試験群３
ａ乃至試験群３ｈのラクトパーオキシダーゼの最終濃度
は、それぞれ８、１、０．５、０．２５、０．１３、
０．０６、０．０３、及び０．０１６ｐｐｍである。ま
た、対照試験は、試料１ａを５０ミリモルリン酸緩衝液
（ｐＨ６．６）に変更して同様に試験を行い、対照試験
群３とした。

【００４４】（３）試験結果 この試験の結果は表３に示すとおりである。表３はラク
トパーオキシダーゼの濃度による植物由来のウレアーゼ
の不活性化の割合を示す表である。その結果、植物由来
のウレアーゼを不活性化する好ましい活性である、ウレ
アーゼ残存活性が５０％以下となる活性を得るために
は、ラクトパーオキシダーゼの濃度は０．１３ｐｐｍで
あればよいと考えられる。

【００４５】

【表３】

【００４６】試験例４ この試験は、ラクトパーオキシダーゼの濃度と微生物由
来のウレアーゼの不活性化効果との関係を調べるために
行った。 （１）試料の調製 試験例３の試料１ａ乃至試料１ｈを使用し、さらに微生
物由来のウレアーゼ溶液は、試験例２のピロリ菌ウレア
ーゼ溶液と同様に調製した。チオシアン酸ナトリウム溶
液及び過酸化水素溶液は、試験例１と同様に調製した。

【００４７】（２）試験方法 この試験は、試験例３のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ
菌ウレアーゼ溶液に変更した以外は試験例３と同様に試
験を行い、試料１ａ乃至試料１ｈを用いた試験群をそれ
ぞれ試験群４ａ乃至試験群４ｈとした。また、対照試験
は、試料１ａを５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．
６）に変更して同様に試験を行い、対照試験群４とし
た。

【００４８】（３）試験結果 この試験の結果は表４に示すとおりである。表４はラク
トパーオキシダーゼの濃度による微生物由来のウレアー
ゼの不活性化の割合を示す表である。その結果、微生物
由来のウレアーゼを不活性化する好ましい活性である、
ウレアーゼ残存活性が５０％以下となる活性を得るため
には、ラクトパーオキシダーゼの濃度は０．０６ｐｐｍ
であればよいと考えられる。

【００４９】

【表４】

【００５０】試験例５ この試験は、チオシアン酸の濃度と植物由来のウレアー
ゼの不活性化効果との濃度の関係を調べるために行っ
た。 （１）試料の調製 チオシアン酸としてチオシアン酸ナトリウムを用いて、
チオシアン酸の濃度が５００、１２５、６３、３１、１
６、７．８、及び３．９ｐｐｍとなるように５０ミリモ
ルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）を使用して希釈した溶液
を調製し、それぞれ試料２ａ、試料２ｂ、試料２ｃ、試
料２ｄ、試料２ｅ、試料２ｆ、及び試料２ｇとした。植
物由来のウレアーゼ溶液として使用するナタ豆ウレアー
ゼ溶液、ラクトパーオキシダーゼ溶液、及び過酸化水素
溶液は、試験例１と同様に調製した。

【００５１】（２）試験方法 この試験は、試験例１の試験群１ａのチオシアン酸ナト
リウム溶液を試料２ａ乃至試料２ｇに変更した以外は同
様の方法で行い、試料２ａ乃至試料２ｇを用いた試験群
をそれぞれ試験群５ａ乃至試験群５ｇとした。試験群５
ａ乃至試験群５ｇのチオシアン酸の最終濃度は、それぞ
れ５０、１２．５、６．３、３．１、１．６、０．７
８、及び０．３９ｐｐｍである。また、対照試験は、試
料２ａを５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）に変
更して同様に試験を行い、対照試験群５とした。

【００５２】（３）試験結果 この試験の結果は表５に示すとおりである。表５はチオ
シアン酸の濃度による植物由来のウレアーゼの不活性化
の割合を示す表である。その結果、植物由来のウレアー
ゼを不活性化する好ましい活性である、ウレアーゼ残存
活性が５０％以下となる活性を得るためには、チオシア
ン酸の濃度は１．６ｐｐｍであればよいと考えられる。

【００５３】

【表５】

【００５４】試験例６ この試験は、チオシアン酸の濃度と微生物由来のウレア
ーゼの不活性化効果との濃度の関係を調べるために行っ
た。 （１）試料の調製 試験例５の試料２ａ乃至試料２ｇを使用し、さらに微生
物由来のウレアーゼ溶液は、試験例２のピロリ菌ウレア
ーゼ溶液と同様に調製した。ラクトパーオキシダーゼ溶
液及び過酸化水素溶液は、試験例１と同様に調製した。

【００５５】（２）試験方法 この試験は、試験例５のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ
菌ウレアーゼ溶液に変更した以外は試験例５と同様に試
験を行い、試料２ａ乃至試料２ｇを用いた試験群をそれ
ぞれ試験群６ａ乃至試験群６ｇとした。また、対照試験
は、試料２ａを５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．
６）に変更して同様に試験を行い、対照試験群６とし
た。

【００５６】（３）試験結果 この試験の結果は表６に示すとおりである。表６はチオ
シアン酸の濃度による微生物由来のウレアーゼの不活性
化の割合を示す表である。その結果、微生物由来のウレ
アーゼを不活性化する好ましい活性である、ウレアーゼ
残存活性が５０％以下となる活性を得るためには、チオ
シアン酸の濃度は１．６ｐｐｍであればよいと考えられ
る。

【００５７】

【表６】

【００５８】試験例７ この試験は、過酸化水素の濃度と植物由来のウレアーゼ
の不活性化効果との関係を調べるために行った。 （１）試料の調製 過酸化水素の濃度が５０、２５、１２．５、６．３、
３．１、１．６、及び０．８ｐｐｍとなるように５０ミ
リモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）を使用して希釈した
溶液を調製し、それぞれ試料３ａ、試料３ｂ、試料３
ｃ、試料３ｄ、試料３ｅ、試料３ｆ、及び試料３ｇとし
た。植物由来のウレアーゼ溶液として使用するナタ豆ウ
レアーゼ溶液、ラクトパーオキシダーゼ溶液、及びチオ
シアン酸ナトリウム溶液は、試験例１と同様に調製し
た。

【００５９】（２）試験方法 この試験は、試験例１の試験群１ａの過酸化水素溶液を
試料３ａ乃至試料３ｇに変更した以外は同様の方法で行
い、試料３ａ乃至試料３ｇを用いた試験群をそれぞれ試
験群７ａ乃至試験群７ｇとした。試験群７ａ乃至試験群
７ｇの過酸化水素の最終濃度は、それぞれ２０、２．
５、１．２５、０．６３、０．３１、０．１６、及び
０．０８ｐｐｍである。また、対照試験は、試料３ａを
５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）に変更して同
様に試験を行い、対照試験群７とした。

【００６０】（３）試験結果 この試験の結果は表７に示すとおりである。表７は過酸
化水素の濃度による植物由来のウレアーゼの不活性化の
割合を示す表である。その結果、植物由来のウレアーゼ
を不活性化する好ましい活性である、ウレアーゼ残存活
性が５０％以下となる活性を得るためには、過酸化水素
の濃度は０．３１ｐｐｍであればよいと考えられる。

【００６１】

【表７】

【００６２】試験例８ この試験は、過酸化水素の濃度と微生物由来のウレアー
ゼの不活性化効果との関係を調べるために行った。 （１）試料の調製 試験例７の試料３ａ乃至試料３ｇを使用し、さらに微生
物由来のウレアーゼ溶液は、試験例２のピロリ菌ウレア
ーゼ溶液と同様に調製した。ラクトパーオキシダーゼ溶
液及びチオシアン酸ナトリウム溶液は、試験例１と同様
に調製した。

【００６３】（２）試験方法 この試験は、試験例７のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ
菌ウレアーゼ溶液に変更した以外は試験例７と同様に試
験を行い、試料３ａ乃至試料３ｇを用いた試験群をそれ
ぞれ試験群８ａ乃至試験群８ｇとした。また、対照試験
は、試料３ａを５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．
６）に変更して同様に試験を行い、対照試験群８とし
た。

【００６４】（３）試験結果 この試験の結果は表８に示すとおりである。表８は過酸
化水素の濃度による微生物由来のウレアーゼの不活性化
の割合を示す表である。その結果、微生物由来のウレア
ーゼを不活性化する好ましい活性である、ウレアーゼ残
存活性が５０％以下となる活性を得るためには、過酸化
水素の濃度は０．６３ｐｐｍであればよいと考えられ
る。

【００６５】

【表８】

【００６６】参考例１ キャベツ１ｋｇを家庭用ミキサーにかけ、粉砕して得ら
れた液体を濾紙で濾過することによって野菜汁を作成し
た。この野菜汁のチオシアン酸濃度をバスらの方法［イ
ンディアン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー・アン
ド・ファーマコロジー（Indian Journal of Physiology
and Pharmacology）、第３０巻、第２４１乃至２４７
頁、１９８６年］を用いて測定したところ、４８ｐｐｍ
であった。

【００６７】試験例９ この試験は、植物由来のウレアーゼの不活性化におけ
る、植物由来のチオシアン酸供給能を調べるために行っ
た。 （１）試料の調製 参考例１の野菜汁に、５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ
６．６）を添加して、４０、２０、１０、５、及び２．
５％野菜汁を調製し、それぞれ試料４ａ、試料４ｂ、試
料４ｃ、試料４ｄ、及び試料４ｅとした。また、植物由
来のウレアーゼ溶液として使用するナタ豆ウレアーゼ溶
液、ラクトパーオキシダーゼ溶液、及び過酸化水素溶液
は、試験例１と同様に調製した。

【００６８】（２）試験方法 この試験は、試験例１の試験群１ａの方法と同様に行
い、試料４ａ乃至試料４ｅを使用する試験群をそれぞれ
試験群９ａ乃至試験群９ｅとした。具体的な試験方法は
以下のとおりである。即ち、１２穴マイクロタイタープ
レート（ファルコン社製）に、試料４ａ乃至試料４ｅを
それぞれ１ｍｌ添加し、次いで、ナタ豆ウレアーゼ溶液
を０．２ｍｌ、ラクトパーオキシダーゼ溶液を０．１ｍ
ｌ添加した。更に、５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ
６．６）を０．５ｍｌ添加した後、マイクロタイタープ
レートを３７℃で１０分間予備的に加温して、最後に、
過酸化水素溶液を０．２ｍｌ添加した。この反応系にお
ける試験群９ａ乃至試験群９ｅの野菜汁の最終濃度は、
それぞれ２０、１０、５、２．５、及び１．３％であ
る。各溶液を添加してから１時間経過した時点で、１０
ミリモルアジ化ナトリウム溶液を２ｍｌ混合することに
よってパーオキシダーゼ反応を停止して、残存したウレ
アーゼ活性を測定した。また、対照試験は、試料４ａ乃
至試料４ｅの代わりに、５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６．６）を１ｍｌ添加して、同様の試験を行って対照
試験群９とした。

【００６９】（３）試験結果 この試験の結果は表９に示すとおりである。表９は、野
菜汁に含まれるチオシアン酸による植物由来のウレアー
ゼの不活性化の割合を示す表である。その結果、チオシ
アン酸の代わりに野菜汁を添加すると、植物由来のウレ
アーゼは不活性化されることが確認された。従って、チ
オシアン酸の供給源として植物を利用することが可能で
あると判明した。また、植物由来のウレアーゼを不活性
化する好ましい活性である、ウレアーゼ残存活性が５０
％以下となる活性を得るためには、チオシアン酸の供給
源として植物を利用した場合、２．５％以上の野菜汁を
含有し、その際のチオシアン酸の濃度は１．２ｐｐｍ以
上であればよいと考えられる。

【００７０】

【表９】

【００７１】試験例１０ この試験は、微生物由来のウレアーゼの不活性化におけ
る、植物由来のチオシアン酸供給能を調べるために行っ
た。 （１）試料の調製 微生物由来のウレアーゼとして使用するピロリ菌ウレア
ーゼ溶液は、試験例２と同様に調製した。また、試験例
９のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ菌ウレアーゼ溶液に
変更した以外は、すべて試験例９で用いる試料を同様に
調製した。

【００７２】（２）試験方法 この試験は、試験例９のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ
菌ウレアーゼ溶液に変更した以外は同様に行い、試料４
ａ乃至試料４ｅを使用する試験群をそれぞれ試験群１０
ａ乃至試験群１０ｅとした。また、対照試験として、対
照試験群９のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ菌ウレアー
ゼ溶液に変更した以外は同様に試験を行って、対照試験
群１０とした。

【００７３】（３）試験結果 この試験の結果は表１０に示すとおりである。表１０
は、野菜汁に含まれるチオシアン酸による微生物由来の
ウレアーゼの不活性化の割合を示す表である。その結
果、チオシアン酸の代わりに野菜汁を添加すると、微生
物由来のウレアーゼは不活性化されることが確認され
た。従って、チオシアン酸の供給源として植物を利用す
ることが可能であると判明した。また、微生物由来のウ
レアーゼを不活性化する好ましい活性である、ウレアー
ゼ残存活性が５０％以下となる活性を得るためには、チ
オシアン酸の供給源として植物を利用した場合、２．５
％以上の野菜汁を含有し、その際のチオシアン酸の濃度
は１．２ｐｐｍ以上であればよいと考えられる。

【００７４】

【表１０】

【００７５】試験例１１ この試験は、植物由来のウレアーゼの不活性化におけ
る、乳酸菌由来の過酸化水素供給能を調べるために行っ
た。 （１）試料の調製 乳酸菌は、市販のラクトバシラス・ブルガリカス（Lact
obacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）を使用し
た。乳酸菌を、２％乳糖を添加したＭＲＳ培地（ディフ
コ社製）に接種して４２℃で１２時間培養し、６０００
×ｇ、１５分間、５℃の条件で遠心分離することによっ
て乳酸菌を回収し、４％グルコースを含む５０ミリモル
リン酸緩衝液（ｐＨ６．６）に、１０⁹／ｍｌになるよ
うに懸濁して、試料５ａとした。更に、試料５ａを、４
％グルコースを含む５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ
６．６）を１０⁸、１０⁷、及び１０⁶／ｍｌとなるよう
に希釈して、それぞれ試料５ｂ、試料５ｃ、及び試料５
ｄとした。尚、乳酸菌の菌数は、乳酸菌懸濁液を生理食
塩水で１０倍ずつ希釈し、ＢＣＰ加プレートカウント寒
天培地（栄研化学社製）に混釈して３７℃で３日間培養
して、形成されるコロニーを数えることによって測定し
た。また、植物由来のウレアーゼ溶液として使用するナ
タ豆ウレアーゼ溶液、ラクトパーオキシダーゼ溶液、及
びチオシアン酸ナトリウム溶液は、試験例１と同様に調
製した。

【００７６】（２）試験方法 試料５ａ乃至試料５ｄを使用する試験群をそれぞれ試験
群１１ａ乃至試験群１１ｄとして、以下の試験方法のと
おり試験を行った。即ち、１２穴マイクロタイタープレ
ート（ファルコン社製）に、ナタ豆ウレアーゼ溶液を
０．２ｍｌ添加し、次に、ラクトパーオキシダーゼ溶液
を０．１ｍｌ、チオシアン酸ナトリウム溶液を０．２ｍ
ｌおよび５０ミリモルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）１．
３ｍｌをそれぞれ添加した。次に、マイクロタイタープ
レートを３７℃で１０分間予備的に加温し、最後に、試
料５ａ乃至試料５ｄをそれぞれ０．２ｍｌ添加した。こ
の反応系における、試験群１１ａ乃至試験群１１ｄの乳
酸菌の最終含量は、それぞれ１０⁸、１０⁷、１０⁶、及
び１０⁵／ｍｌである。各溶液を添加してから１時間経
過した時点で、１０ミリモルアジ化ナトリウム溶液を２
ｍｌ混合することによってパーオキシダーゼ反応を停止
して、残存したウレアーゼ活性を測定した。また、対照
試験は、試料５ａ乃至試料５ｄの代わりに、５０ミリモ
ルリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）を０．２ｍｌ添加して、
同様の試験を行って対照試験群１１とした。

【００７７】（３）試験結果 この試験の結果は表１１に示すとおりである。表１１
は、乳酸菌が産生する過酸化水素による植物由来のウレ
アーゼの不活性化の割合を示す表である。その結果、乳
酸菌が産生する過酸化水素によって、植物由来のウレア
ーゼは不活性化されることが確認された。従って、過酸
化水素の供給源として乳酸菌を利用することが可能であ
ると判明した。また、植物由来のウレアーゼを不活性化
する好ましい活性である、ウレアーゼ残存活性が５０％
以下となる活性を得るためには、過酸化水素の供給源と
して乳酸菌を利用した場合、１０⁶／ｍｌ以上の乳酸菌
を含有すればよいと考えられる。

【００７８】

【表１１】

【００７９】試験例１２ この試験は、微生物由来のウレアーゼの不活性化におけ
る、乳酸菌由来の過酸化水素供給能を調べるために行っ
た。 （１）試料の調製 微生物由来のウレアーゼとして使用するピロリ菌ウレア
ーゼ溶液は、試験例２と同様に調製した。また、試験例
１１のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ菌ウレアーゼ溶液
に変更した以外は、すべて試験例１１で用いる試料を同
様に調製した。

【００８０】（２）試験方法 この試験は、試験例１１のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロ
リ菌ウレアーゼ溶液に変更した以外は同様に行い、試料
５ａ乃至試料５ｄを使用する試験群をそれぞれ試験群１
２ａ乃至試験群１２ｄとした。また、対照試験として、
対照試験群１１のナタ豆ウレアーゼ溶液をピロリ菌ウレ
アーゼ溶液に変更した以外は同様に試験を行って、対照
試験群１２とした。

【００８１】（３）試験結果 この試験の結果は表１２に示すとおりである。表１２
は、乳酸菌が産生する過酸化水素による微生物由来のウ
レアーゼの不活性化の割合を示す表である。その結果、
乳酸菌が産生する過酸化水素によって、微生物由来のウ
レアーゼは不活性化されることが確認された。従って、
過酸化水素の供給源として乳酸菌を利用することが可能
であると判明した。また、微生物由来のウレアーゼを不
活性化する好ましい活性である、ウレアーゼ残存活性が
５０％以下となる活性を得るためには、過酸化水素の供
給源として乳酸菌を利用した場合、１０⁷／ｍｌ以上の
乳酸菌を含有すればよいと考えられる。

【００８２】

【表１２】

【００８３】試験例１３ この試験は、乳酸菌を使用して、発酵乳を製造した際の
発酵乳中の過酸化水素濃度を測定するために行った。

【００８４】即ち、乳脂肪含量３．５％、無脂乳固形分
含量９．２％の生乳１０ｋｇを均質化し、９０〜９２℃
で１０分間加熱殺菌した。約４２℃に冷却し、スタータ
ーとして市販のストレプトコッカス・サーモフィルス
（Streptococcus thermophilus）およびラクトバシラス
・ブルガリカス（Lactobacillus delbrueckii subsp. b
ulgaricus）の牛乳カルチャーをそれぞれ１００ｇずつ
添加した。発酵タンク内で充分に攪拌し、４２〜４５℃
で４時間静置して発酵させた。この発酵乳を攪拌しなが
ら５〜８℃に冷却し、次いでホモゲナイザーで均質化す
ることによって均質化発酵乳を得た。

【００８５】この発酵乳の過酸化水素濃度をギリランド
の方法［ジャーナル・オブ・デイリー・サイエンス（Jo
urnal of Dairy Science）、第５２巻、第３２１乃至３
２４頁、１９６９年］で測定したところ、１．４ｐｐｍ
であった。

【００８６】試験例１４ この試験は、本発明のウレアーゼ不活性化飲食品のウレ
アーゼ不活性化の効果、及びアンモニア濃度への影響を
検討するために行った。 （１） 試料の調製 実施例１の（２）と同様の製造方法により製造したドリ
ンクヨーグルトを試験試料とした。また、実施例１の
（２）に記載の製造方法において、ラクトパーオキシダ
ーゼ溶液および野菜汁の代わりに５０ミリモルリン酸緩
衝液（ｐＨ６．６）を添加して製造したドリンクヨーグ
ルトを対照試料とした。

【００８７】（２） 試験方法 ４週齢のＢＡＬＢ／Ｃ雌性マウス（日本エス・エル・シ
ー社から購入）を１０匹ずつ２群に分けて糞食防止ネッ
トを配設したケージに入れ、固形飼料で一週間馴化飼育
した。次に、水の代わりに試験試料を無菌パック（ムサ
シ社製）から一週間自由摂取させて飼育したマウスを試
験試料群とした。また、試験試料の代わりに対照試料を
摂取させて飼育したマウスを対照試料群とした。飼育終
了後、各群のマウスを解剖して盲腸を摘出した。盲腸の
内容物の重量を測定して、その１０倍量の５０ミリモル
リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）を添加して均質
化した。該均質化盲腸内容物の一部を、リングらの方法
［ジャーナル・オブ・ニュートリション（Journal of N
utrition）、第１２４巻、第１８乃至２３頁、１９９４
年］に従って抽出し、試験例１の試験群１ａの方法を参
考にしてウレアーゼ活性を測定した。ウレアーゼの活性
は、１分当たり１マイクロモルの尿素を分解する量を１
単位とし、蛋白質１ｍｇ当たりの単位数で表した。ま
た、該均質化盲腸内容物の残りの一部について、アンモ
ニアテスト・ワコー（和光純薬社製）を使用してアンモ
ニア含量を測定した。

【００８８】（３） 試験結果 この試験の結果は、表１３に示すとおりである。表１３
は、試験試料及び対照試料を摂取したマウスのウレアー
ゼ活性及びアンモニア濃度の変化を示した表である。そ
の結果、対照試料群では５２ミリ単位／ｍｇのウレアー
ゼ活性と１０．６ミリモルのアンモニアが検出された。
このウレアーゼ活性は、腸内細菌に由来し、ウレアーゼ
による尿素の分解でアンモニアが生成されたと考えられ
る。一方、試験試料群では、２４ミリ単位／ｍｇのウレ
アーゼ活性と８．７ミリモルのアンモニアが検出され、
対照試料群に比して、ウレアーゼ活性及びアンモニア濃
度が効果的に抑制された。従って、本発明のウレアーゼ
不活性化飲食品は、ウレアーゼ活性及びアンモニア濃度
の低減に有効であることが判明した。

【００８９】

【表１３】

【００９０】次に実施例を示して本発明を更に詳細に説
明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものでは
ない。

【００９１】

【実施例】実施例１ （１）ラクトパーオキシダーゼの製造 未加熱のホエー１０００ｋｇを、１０リットルのＣＭ−
セファデックスＣ−５０（ファルマシア社製）を充填し
たカラムに通液した。次いで水１００ｋｇでセファデッ
クスゲルを洗浄し、０．３モル食塩を含む２０ミリモル
リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）２０リットルを
通液し、セファデックス樹脂に吸着したラクトパーオキ
シダーゼを溶出した。溶出液を分画分子量１０，０００
の限外濾過膜（旭化成社製）で濃縮して脱塩した。得ら
れた濃縮液約１リットルをメンブランカートリッジ（ナ
ルゲン社製）で無菌濾過し、凍結乾燥して粉末状の無菌
ラクトパーオキシダーゼ４０ｇを得た。

【００９２】このラクトパーオキシダーゼ標品を、アク
リルアミド濃度が１０〜２０％のＳＤＳ−ポリアクリル
アミドゲルを用いて電気泳動を行い、クマシーブリリア
ントブルーＲ２５０（シグマ社製）で染色して、画像処
理装置（アトー社製）で分析したところ、純度は約５０
％であった。

【００９３】（２）パーオキシダーゼ、チオシアン酸お
よび過酸化水素を含有するドリンクヨーグルトの製造 乳脂肪含量３．５％、無脂乳固形分含量９．２％の生乳
１０ｋｇを均質化し、９０〜９２℃で１０分間加熱殺菌
した。約４２℃に冷却し、スターターとして市販のスト
レプトコッカス・サーモフィルス（Streptococcus ther
mophilus）およびラクトバシラス・ブルガリカス（Lact
obacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）の牛乳カ
ルチャーをそれぞれ１００ｇずつ添加した。発酵タンク
内で充分に攪拌し、４２〜４５℃で４時間静置して発酵
させた。この発酵乳を攪拌しながら５〜８℃に冷却し、
次いでホモゲナイザーで均質化することによって均質化
発酵乳を調製した。

【００９４】次に、１７％のグラニュウ糖（東洋精糖社
製）液５ｋｇにペクチン（三栄源ＦＦＩ社製）６０ｇを
添加して、９０〜９２℃で１０分間殺菌した後、５〜８
℃に冷却して糖液を調製した。また、キャベツ３ｋｇを
家庭用ミキサーにかけて濾紙（ワットマン社製）で濾過
し、９０〜９２℃で１０分間殺菌した後、５〜８℃に冷
却して野菜汁９００ｇを調製した。更に、前記（１）で
製造したラクトパーオキシダーゼ０．８ｇを水４０ｇに
溶解し、メンブラン・フィルター（ミリポア社製）で無
菌濾過してラクトパーオキシダーゼ溶液を得た。

【００９５】これらの方法で調製した均質化発酵乳、糖
液、野菜汁、及びラクトパーオキシダーゼ溶液のそれぞ
れ全量をタンク内で十分に混合し、１００ｇずつ紙容器
に充填した後、密封してドリンクヨーグルト１００個を
製造した。

【００９６】

【発明の効果】以上記載したとおり、本発明はパーオキ
シダーゼ、チオシアン酸および過酸化水素を有効成分と
するウレアーゼ不活性化組成物及び飲食品に関するもの
であり、本発明により奏される効果は次のとおりであ
る。 （１）天然に存在する物質から構成されるため、副作用
がなく、安全性が高い。 （２）植物及び微生物由来のウレアーゼを効果的に不活
性化する。 （３）ウレアーゼが触媒する尿素の加水分解によって発
生するアンモニアを効果的に低減する。 （４）アンモニアが原因で起こる健康へのリスクや悪臭
発生などの局面で摂取することによって、健康の維持に
効果的である。

フロントページの続き (72)発明者 山内 恒治 神奈川県座間市東原五丁目１番83号 森永 乳業株式会社栄養科学研究所内 (72)発明者 新 光一郎 神奈川県座間市東原五丁目１番83号 森永 乳業株式会社栄養科学研究所内 Ｆターム(参考） 4B001 AC21 AC25 AC31 EC05 4B018 LB07 LB08 MD01 MD53 MD71 MD86 MD90 ME02 ME09 MF02 4B050 CC07 DD07 DD11 FF05E FF09E KK01 LL02

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 パーオキシダーゼ、チオシアン酸及び過
   酸化水素を有効成分とするウレアーゼ不活性化組成物。
2. 【請求項２】 パーオキシダーゼがラクトパーオキシダ
   ーゼ又はミエロパーオキシダーゼのいずれかである請求
   項１に記載のウレアーゼ不活性化組成物。
3. 【請求項３】 パーオキシダーゼ、チオシアン酸及び過
   酸化水素を有効成分とするウレアーゼ不活性化飲食品。
4. 【請求項４】 パーオキシダーゼがラクトパーオキシダ
   ーゼ又はミエロパーオキシダーゼのいずれかである請求
   項３に記載のウレアーゼ不活性化飲食品。
5. 【請求項５】 チオシアン酸が植物から供給される請求
   項３又は請求項４に記載のウレアーゼ不活性化飲食品。
6. 【請求項６】 過酸化水素が微生物によって産生される
   請求項３乃至請求項５のいずれかに記載のウレアーゼ不
   活性化飲食品。
7. 【請求項７】 微生物が乳酸菌である請求項６に記載の
   ウレアーゼ不活性化飲食品。
8. 【請求項８】 飲食品が発酵乳である請求項３乃至請求
   項７のいずれかに記載のウレアーゼ不活性化飲食品。