JP2001523256A

JP2001523256A - 抗血栓物質

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Publication number: JP2001523256A
Application number: JP54739798A
Authority: JP
Inventors: バスティアン，ジョリー・エイ; チルガゼ，ニコライ・ワイ; デニー，マイケル・エル; フィッシャー，マシュー・ジェイ; フォグルソング，ロバート・ジェイ; ハーパー，リチャード・ダブリュー; ジョンソン，メアリー・ジー; クリムコースキー，バレンタイン・ジェイ; リン，ホ−シェン; リンチ，マイケル・ピー; マッコワン，ジェファーソン・アール; ミラー，ショーン・シー; マラニー，ジェフリー・ティ; リチェット，マイケル・イー; サル，ダニエル・ジェイ; スミス，ジェラルド・エフ; タケウチ，クミコ; ティンスリー，ジェニファー・エム; ワイリー，マイケル・アール; ジャン，ミンシェン
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1997-05-01
Filing date: 1998-04-30
Publication date: 2001-11-20
Also published as: US6541499B1; AU7270798A; EP1019047A1; DE69819539D1; ATE253359T1; EP1019047A4; CA2287984A1; EP1019047B1; ES2210747T3; WO1998048800A1; DE69819539T2

Abstract

(57)【要約】本願は、本明細書に定義する式（I）の新規化合物とそれらの薬学上許容し得る塩類、それらの製造法とその中間体、式（I）の新規化合物を含む医薬製剤、トロンビン阻害剤としての式（I）の化合物の使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】抗血栓物質本発明は、哺乳動物の有用な抗凝固剤であるトロンビンインヒビターに関するものである。特に本発明は、高い抗凝固活性および抗血栓活性を有するヘテロ環誘導体に関するものである。したがって本発明は、トロンビンの新規なインヒビター、活性成分として当該化合物を含有する薬用組成物、ならびに、血栓塞栓疾患、例えば静脈血栓症、肺塞栓症、動脈血栓症、特に心筋虚血、心筋梗塞および脳血栓症、全身的凝固亢進状態および局所的凝固亢進状態、例えば血管形成術および冠動脈バイパス手術後の、および炎症プロセスに関連して全身性化した組織損傷、の処置および予防のための抗凝固剤としての当該化合物の用途に関するものである。さらにこの抗血栓物質は、インビトロ適用で抗凝固剤として有用である。血液凝固のプロセスである血栓症は、トロンビンの形成を導く複雑な蛋白分解カスケードによって引き起こされる。トロンビンは、血漿可溶性のフィブリノーゲンのＡα鎖およびＢβ鎖から活性化ペプチドを蛋白分解的に除去して、不溶性フィブリンの形成を開始させる。抗凝固は現在ヘパリンおよびクマリンの投与により達成されている。凝固および血栓症の非経口的薬理学的制御は、ヘパリンの使用によってトロンビンを阻害することに基づいている。ヘパリンは、内因性抗トロンビンIII(トロンビンの主たる生理学的インヒビター)の阻害作用を加速することにより、トロンビンに間接的に作用する。抗トロンビンIIIのレベルは血漿中で相違し、また血餅に結合したトロンビンはこの間接的機構に対し抵抗性らしいため、ヘパリンは無効な処置となり得る。凝固検定は有効性および安全性に結びついていると信じられているため、ヘパリンレベルは、凝固検定によって監視せねばならない(特に、活性化部分トロンボプラスチン時間(APTT)検定)。クマリンは、プロトロンビンおよびこの型の他の蛋白の合成における翻訳後γ−カルボキシ化をブロックすることにより、トロンビンの生成を妨害する。その作用機構の故に、クマリンの効果は、投与の６−２４時間後、徐々にしか発現し得ない。その上それらは選択的抗凝固剤ではない。クマリンもまた凝固検定(特にプロトロンビン時間(PT)検定)による監視を必要とする。近年、トロンビンの強力な直接阻害を示す小さな合成分子への関心が高まってきている。例えば、ロバート・M.スカボロ、Annual Reports in Medicinal Chem istry(1995)、30、71−80を参照されたい。ヘパリンおよびクマリンは有効な抗凝固剤であるが、この小さな合成分子からは市販の薬品はまだ現れていない。そして、このクラスの化合物への期待が存続しているにも拘わらず、トロンビンに選択的に働き、そして抗トロンビンIIIとは無関係に、投与後短時間で、好ましくは経口投与後短時間で阻害作用を発現し、そして止血の維持に必要な血餅の溶解を妨げない抗凝固剤に対する必要性が、尚存在する。本発明は、下記定義による本発明に係る化合物が、経口投与後に高いバイオアベイラビリティーと有利な薬物動態を有し得る強力なトロンビンインヒビターである、という発見に向けられる。本発明によれば、式Ｉ：［式中、Ｅは、ＣＨ、ＣＲ^e（式中、Ｒ^eはメチル、メトキシまたはハロである）であり；Ｒは、ハロ、メチル、エチル、ヒドロキシ、メトキシ、カルバモイル、アミノメチルおよびヒドロキシメチルから独立して選択されるベンズ環上の0、1または 2個の置換基を表し；Ｒ¹はＲ^1a、Ｒ^1bまたはＲ^1cであって、Ｒ^1aは−ＣＨ₂−Ｒ^r（ここにＲ^rは５−テトラゾリル、２−カルボキシピロリジン−１−イルまたは２−[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]ピロリジン−１ −イルである）、２−カルボキシ−５−オキソピロリジン−１−イルまたは２− [[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]−５−オキソピロリジン−１−イルであり；Ｒ^1bは、−Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＳＲ^sＲ^tであり、ここにＸ¹は直接結合、メチレンまたはＯであり、ｓは１または２である；ただし、ｓが１である場合はＸ¹は直接結合であるものとし、さらに−(ＣＨ₂)_s−鎖は１または２個のメチルもしくはエチル置換基を持つか、trans−１,２−シクロヘキサンジイルの一部であってよいものとする；またＲ^sとＲ^tは独立して水素または(１−３Ｃ)アルキルであるか、ＮＲ^sＲ^t基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１ −ピラゾリル、１,２,４−トリアゾール−１−イル、またはベンジルアミノである；Ｒ^1cは、−Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＲ^sＲ^tであり、ここにＸ¹は直接結合、メチレンまたはＯでぁり、ｓは１または2である；ただし、ｓが１である場合はＸ¹は直接結合であるものとし、さらに−(ＣＨ₂)_s−鎖は１または２個のメチルもしくはエチル置換基を持つか、trans−１,２−シクロヘキサンジイルの一部であってよいものとする；またＮＲ_sＲ_t基は２−オキソピロリジン−１−イル、２,５−ジオキソピロリジン−１−イル、２−オキソオキサゾリジン−３−イル、２−オキソイミダゾリジン−１−イル、３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル、２−オキソピロリジン−３−イル、１−メチル−２−オキソピロリジン−３− イル、１−テトラゾリル、メチルスルホニルアミノまたはフェニルスルホニルアミノである；Ｒ²は、Ｒ^2a、Ｒ^2bまたはＲ^2cであって、Ｒ^2aは−Ｘ²−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^fであり、ここにＸ²は、直接結合、メチレンまたはＯであり；ｎは１、２または３であり；Ｒ^fは５−テトラゾリル、カルボキシ、[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニルまたはヒドロキシメチルであるか、（ｎが１であり、Ｘ²が直接結合であるという前提で）Ｒ^fは２−カルボキシピロリジン１−イル、２−[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]ピロリジン−１−イル、( カルボキシメチル)アミノ、[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニルメチル]アミノ、 (４−カルボキシメチルイミダゾール−１−イル)アミノ、[4-[[(1-4C)アルコキシ]カルボニルメチル]イミダゾール−１−イル]アミノ、(４−カルボキシベンジル)アミノ、[４−[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]ベンジル]アミノ、(３− アミノ−１,４−ジオキソ−４−ヒドロキシブチル)アミノまたは[３−アミノ− １,４−ジオキソ−[(１−４Ｃ)アルコキシ]ブチル]アミノである；Ｒ^2bは−Ｘ²−(ＣＨ₂)_m−ＮＲ^aＲ^bであって、ここにＸ²は、直接結合、メチレン、ＯまたはＳであり；ｍは１、２、３、４または５である；ただしｍが１である場合は、Ｘ²は直接結合であるものとする；またＲ^aとＲ^bは独立して水素または(１−３Ｃ)アルキルであるか、Ｒ^aとＲ^bの一方が水素またはメチルであって他方がｔ−ブチル、ベンジルまたはピリジルメチルであるか、もしくはＮＲ^aＲ^b基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリルまたは１,２,４−トリアゾール−４−イルである；または、Ｒ^2bは−[Ｘ²−(ＣＨ₂)_n]_p−Ｎ(Ｒ^a)−ＣＯ−Ａであって、ここにＸ²は直接結合、メチレンまたはＯであり；ｎは１、２、３または４であり；ｐは０または１であり、Ｒ^aは水素またはメチルであり；−ＣＯ−Ａは天然または非天然のα− アミノアシル基であって、これは１またはそれ以上の薬学上許容しうる保護基をもってもよく、さらにα−窒素が置換されていてもよい；Ｒ^2cは水素である；または、Ｒ^2cは−ＮＲ^a−ＣＯ−(ＣＨ₂)_m−Ｒ^bまたは−Ｏ−ＣＨ₂−Ｒ^bであって、ここにｍは０または１であり、Ｒ^aは水素またはメチルであり、Ｒ^bは式XIIまたは式X IIIの環構造：（式中、ＧはＯ、Ｓ、ＮＨまたはＣＨ₂であり、Ｒ_cは水素またはメチルであり、ＬはＮＲ^fまたはＣＨ₂であって、Ｒ^fは水素またはメチルである）である；または、Ｒ^2cは−ＮＨＣＯＲ^g（式中、Ｒ^gはＯ、ＳおよびＮから選択される2つのヘテロ原子を持つ五員ヘテロ芳香族環であり、カルボニル基は環ヘテロ原子ともう一つの環炭素の間に位置する環炭素に結合している）である；または、Ｒ^2cは−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^h、−Ｏ−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^hまたは−ＮＨ−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^h であって、ここにｎは０、１または２であり、Ｒ^hはシクロペンチル、シアノまたは−ＣＯＮＲⁱＲ^jである（式中、ＲⁱとＲ^jは独立して水素またはメチルであるか、ＮＲⁱＲ^j基がピロリジノ、ピペリジノまたはモルホリノである）；または、Ｒ^2cは−Ｘ²―(ＣＨ₂)_p−Ｒ^kまたは−Ｏ−ＣＨ₂−ＣＨ(ＣＨ₃)−Ｒ^kであって、ここにＸ²は直接結合、メチレンまたはＯであり、ｐは１、２または３である；ただしｐが１である場合、Ｘ²は直接結合であるものとする；またＲ^kは２−オキソピロリジン−１−イルまたはＮＨＣＯＲ^mである（式中、Ｒ^mは(１−３Ｃ）アルキル、フェニルまたはピリジルである）；または、Ｒ^2cは−ＮＨ−ＣＯ−ＮＲⁱＲ^jであって、ここにＲⁱとＲ^jは独立して水素またはメチルであるか、ＮＲⁱＲ^j基がピロリジノ、ピペリジノまたはモルホリノである；または、Ｒ^2cは−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^pＲ^qであって、ここにＲ^pとＲ^qは独立して水素、メチルまたはエチルであるか、ＮＲ^pＲ^q基がピロリジノ、ピペリジノまたはモルホリノである；または、Ｒ^2cは−ＮＨ−ＳＯ₂−Ｒ^rであって、ここにＲ^rは(１−３Ｃ)アルキルまたはフェニルである；ただし、Ｒ¹がＲ^1bであるか、Ｒ²がＲ^2bであるものとする］で示されるトロンビン阻害化合物（またはその薬学上許容し得る塩）の有効量を使用することを含む、トロンビンを阻害する方法が提供される。 α−アミノアシル基−ＣＯ−Ａは、便宜的に−ＣＯ−ＣＨ(Ｒ^b)−ＮＲ^fＲ^gと表してもよく、または標準的アミノ酸命名法で表示してもよい。したがって、− ＣＯ−Ａは、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、セリン、スレオニン、メチオニン、システイン、プロリン、アゼチジン−２−カルボン酸、ピペコリン酸、アスパラギン酸、アスパラギニン、グルタミン酸、グルタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン等から選ばれるα−アミノ酸［ここでアミノ基は、例えばｔ−ブトキシカルボニル保護基を持っていてよく；カルボキシ基はその（１−４Ｃ）アルキルエステルとして保護されていてよく；ヒドロキシ基は例えばベンジル保護基を持っていてよく；チオール基は例えばｔ−ブチル保護基を持っていてよい］から誘導されるα−アミノアシル基であってよい。さらに、−ＣＯ−Ａが−ＣＯ−ＣＨ(Ｒ^b)−ＮＲ^fＲ^gで表される時、Ｒ^fおよびＲ^gは各々水素もしくはメチルであるか、または−ＮＲ^fＲ^g はピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノもしくは１，１−ジオキソチオモルホリン−４−イル基であってよい（そしてＲ^bは、上に定義されたようにα−アミノアシル基の側鎖または保護された側鎖を示す）。好ましい式Ｉの化合物は次の式Ｉaの化合物である：［式中、ＥはＣＨまたはＣＲ^eであり、ここにＲ^eはメチル、メトキシまたはハロである；Ｒ¹は−Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＳＲ^sＲ^tであって、ここにＸ¹は直接結合、メチレンまたはＯであり、ｓは１または２である；ただしｓが１である場合、Ｘ¹は直接結合でぁるものとする；またＲ^sとＲ^tは独立して水素または(１−３Ｃ)アルキルであるか、ＮＲ^sＲ^t基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、１,２,４−トリアゾール−１−イル、またはベンジルアミノである；Ｒ²は水素または−Ｘ²−(ＣＨ₂)_m−ＮＲ^aＲ^bであって、ここにＸ²は、直接結合、メチレン、ＯまたはＳであり；ｍは１、２、３、４または５である；ただしｍが１である場合は、Ｘ²は直接結合であるものとする；またＲ^aとＲ^bは独立して水素または(１−３Ｃ)アルキルであるか、もしくはＮＲ^aＲ^b基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、Ｎ−(１,２,４ −トリアゾリル)または２−オキソピロリジン−１−イルである；Ｒ⁵は水素、ヒドロキシまたはメトキシである］。 −Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＲ^sＲ^tの具体例は、−ＣＨ₂−ＮＲ^sＲ^t（ここにＮＲ^sＲ^t はピロリジノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、１,２,４−トリアゾール− ４−イルまたはベンジルアミノである）または−Ｏ−(ＣＨ₂)₂−ＮＲ^sＲ^t（ここにＮＲ^sＲ^tはピロリジノである）、より具体的には−ＣＨ₂−ＮＲ^sＲ^tである。Ｒ²の具体例は−Ｏ−(ＣＨ₂)₂−ＮＲ^aＲ^bであって、ここにＮＲ^aＲ^bはピロリジノ、１−ピラゾリルまたは２−オキソピロリジン−１−イルである。Ｒ⁵の具体例はヒドロキシである。本発明はまた、処置を必要とする哺乳動物に、上記定義のいずれかを有する式Ｉのトロンビン阻害化合物の凝固阻害用量を投与することを含む、哺乳動物における凝固を阻害する方法を提供する。さらに本発明は、処置を必要とする哺乳動物に、上記定義のいずれかを有する式Ｉのトロンビン阻害化合物のトロンビン阻害用量を投与することを含む、トロンビンを阻害する方法を提供する。さらに本発明は、処置を必要とする哺乳動物に、上記定義のいずれかを有する式Ｉのトロンビン阻害化合物の有効量を投与することを含む、血栓塞栓疾患を処置する方法を提供する。加えて、血栓塞栓疾患の処置のための薬剤を製造するための、上記定義のいずれかを有する式Ｉのトロンビン阻害化合物の用途が提供される。本発明のさらなる態様として、プロドラッグを形成するであろう上記式Ｉのトロンビン阻害化合物（またはその薬学上許容し得る塩）のうちいずれかのプロドラッグが提供される。（式Ｉのトロンビン阻害化合物は、式Ｉで示される異なったトロンビン阻害化合物のためのプロドラッグとしての役割をも有することが理解できるであろう。）本発明のさらなる特徴として、上の記載のいずれかに示された式Ｉのトロンビン阻害化合物（またはその薬学上許容し得る塩）のプロドラッグを、薬学上許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、薬用製剤が提供される。一般に、式Ｉのトロンビン阻害化合物は新規であると信じられ、したがって本発明のさらなる態様を構成する。即ち本発明によれば、その化合物が新規でない化合物でない限り、式Ｉの化合物に関する上記定義のいずれかによる新規な式Ｉの化合物（またはその薬学上許容し得る塩）が提供される。本発明に係る抗血栓物質の薬学上許容し得る塩は、薬学上許容し得る陰イオンを提供する酸によって作られる酸付加塩であるもの、または、薬学上許容し得る陰イオンを提供する塩基によって作られる塩であるものを包含する。このような酸および塩基の例は下に述べる。このように、上に定義した式Ｉの新規化合物の薬学上許容し得る塩は、本発明の具体的一態様となる。本発明のさらなる態様として、上の記載のいずれかに示された式Ｉの新規化合物（またはその薬学上許容し得る塩）を、薬学上許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、薬用製剤が提供される。本明細書中では、別途記載の無い限り、以下の定義を使用する：ハロは、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードである。アルキル、アルコキシ等は直鎖および分枝鎖基の両者を示すが、「プロピル」といったような個々の基に対する言及は直鎖（「ノルマル」）基のみを包含し、「イソプロピル」のような分枝鎖異性体は個別に表示する。式Ｉで示される或る化合物（または塩もしくはプロドラッグ等）は、cis-またはtrans-異性体、および光学活性な、ラセミ体の、またはジアステレオマーの型を包含する異性体型で存在することがあり、且つそのような型で分離することができるということは理解できるであろう。本発明は、ジアステレオマーの混合物として、および個々のジアステレオマーの形での式Ｉの化合物を包含するという事、そして、本発明は、エナンチオマーの混合物としての、および個々のエナンチオマーの形での式Ｉの化合物を包含し、いずれの混合物または形もトロンビンに対する阻害的性質を有し、特定の形を製造または分離する方法、および下記の試験を包含する標準的試験によりトロンビンに対する阻害的性質を測定する方法が当分野で良く知られているという事は、理解されるべきである。さらに、式Ｉの化合物（または塩もしくはプロドラッグ等）は多形性を示すことがあり、または水もしくは有機溶媒との溶媒和物を形成し得る。本発明はまた、任意のこのような多形型、任意の溶媒和物もしくはそれらの任意の混合物をも包含する。基、置換基、および範囲について以下にあげる具体例は単なる例示であって、それらは、基および置換基の他の定義された意義またはその定義された範囲内の他の意義を排除するものではない。 (１−２Ｃ)アルキル基の具体例はメチルまたはエチルであり；(１−３Ｃ)アルキル基については、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルであり；(１ −４Ｃ）アルキル基については、メチル、エチル、プロピル、イソプロピルまたはｔ−ブチルであり；(１−５Ｃ)アルキル基については、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチルまたはペンチルであり；(１−４Ｃ)アルコキシ基については、メトキシ、エトキシ、イソプロボキシまたはt−ブトキシである。式Ｉの化合物は、式Ｉで示される既知の化合物または構造的に類似の化合物の製造のために化学分野で知られる方法を包含する方法によって、または、本明細書に記載する新規な方法によって製造することができる。式Ｉの新規化合物（またはその薬学上許容し得る塩）のための方法、式Ｉの化合物のための新規な方法、および上に定義された式Ｉの化合物の製造のための新規中間体は、本発明のさらなる特徴を提供するものであり、以下の方法により例示する（この中で、一般的な基の意味は、別途記載の無い限り、上に定義の通りである）。官能基は常套的保護基を用いて保護し、次いで式Ｉの化合物を得るためにこの保護基を除去する、という式Ｉの化合物の製造が好ましい、またはその必要がある、という事が、理解できるであろう。一般に、式Ｉの化合物は、反応式Ｉ（５位にＱ基が存在する式Ｉの化合物の製造を例示したもの）に概説し実施例に記載した経路［ここでＱ、Ｑ²、Ｑ³およびＱ⁵ は各々Ｑ、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁵基について定義した意義、係る基の保護された型、または係る基へとさらに合成できる基を表す］の一つに従って製造することができる。Ｑ、Ｑ²、Ｑ³またはＱ⁵基からＲ、Ｒ²、Ｒ³またはＲ⁵への最終変換は、使用する化学と矛盾しない、都合の良い時点で実施する。反応式Ｉしたがって、上の説明のいずれかに記載したような式Ｉの新規化合物（またはその薬学上許容し得る塩）を製造する方法が提供され、それは、式IIの対応するアミド（式Ｉaの化合物について言えば、式IIａの化合物）を、例えば下記実施例に記述するような不活性溶媒中で、それを加熱することによって環化し；その後、上の方法のいずれについても、官能基が保護基を用いて保護されている場合はその保護基を除去し；その後、上の方法のいずれについても、式Ｉの化合物の薬学上許容し得る塩が必要な場合は、係る式Ｉの化合物の塩基性または酸性型を、生理学上許容し得る対イオンを与える酸または塩基と反応させることにより、または他の任意の常法により、それを得ることができる、事を包含する、実施例に記載の任意の方法から選択される。式IIのアミドのような新規中間体または出発物質化合物は本発明のさらなる態様を提供する。上に述べたように、官能基が保護された式Ｉの化合物に対応する化合物は、式Ｉの化合物のための中間体として役立ちうる。したがって、式Ｉの新規化合物のためのこのような保護された中間体は、本発明のさらなる態様を提供する。即ち、本発明の一つの具体的態様として、Ｒが（例えばＲ⁵として）ヒドロキシであって、ただし対応する置換基がヒドロキシの代わりに−ＯＲ^p［式中、Ｒ^pはメチル以外のフェノール保護基である］である、上記定義による式Ｉの新規化合物に対応する化合物が提供される。フェノール保護基は当分野で良く知られており、例えばT.W.グリーンおよびP.G.M.ウッツ「Protecting Groups in Organic Synthes is」(1991)に記載されている。Ｒ^pの具体例として、例えばベンジルおよびアリルがある。さらに、Ｒ^pは、例えばH.V.メイヤーズ等、Molecular Diversity(199 5)、1、13−20に開示されるような官能基化された樹脂を表し得る。上に述べたように、本発明は、上記式Ｉにより定義されるトロンビン阻害化合物の薬学上許容し得る塩類を包含する。塩基性が十分に高い１またはそれ以上の官能基を持つ本発明の特定の化合物は、生理学上許容し得る対イオンを与える数多くの無機酸および有機酸のいずれとも反応して、薬学上許容し得る塩を形成する。薬学上許容し得る酸付加塩の形成のため一般に使用する酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、燐酸等のような無機酸、およびｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、蓚酸、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸、炭酸、琥珀酸、クエン酸、安息香酸、酢酸等のような有機酸である。したがって、このような薬学上許容し得る塩の例は、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、燐酸塩、燐酸一水素塩、燐酸二水素塩、メタ燐酸塩、ピロ燐酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、蟻酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、蓚酸塩、マロン酸塩、琥珀酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−1,4−二酸塩、ヘキシン−1,6−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２− スルホン酸塩、マンデル酸塩等である。好ましい薬学上許容し得る酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸および硫酸のような鉱酸を用いて製造されるものを包含する。酸性である式Ｉの化合物は、薬学上許容し得る塩基との塩を形成する。このような薬学上許容し得る塩は、薬学上許容し得る陽イオンを与える塩基を用いて製造でき、これはアルカリ金属塩（特にナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（特にカルシウムおよびマグネシウム塩）、アルミニウム塩およびアンモニウム塩、ならびに、トリエチルアミン、モルホリン、ピペリジンおよびトリエタノールアミンのような生理学上許容し得る有機塩基から製造される塩類を包含する。カリウムおよびナトリウム塩型が特に好ましい。市販品を入手できない場合、式Ｉの化合物の製造のための必要な出発物質は、芳香族およびヘテロ芳香族置換および変換を包含する有機化学の標準技術、既知の構造的に似かよった化合物の合成と類似の技術、および上記の方法または実施例に記載の方法と類似の技術、から選択される方法によって製造することができる。出発物質の製造には様々な連続的方法が利用できるということが当業者には明らかであろう。新規な出発物質は、本発明のもう一つの態様を提供する。上記式Ｉの化合物などの化合物の製造のための保護および脱保護の選択的方法は、当分野で良く知られている。一般に、本発明化合物は、酸付加塩の形で最も良好に分離される。上記のような酸を用いて製造した式Ｉの化合物の塩は、抗血栓物質の投与のための、およびそれらの物質の製剤の製造のための薬学上許容し得る塩として有用である。その他の酸付加塩は、当該化合物の分離および精製の際に製造し使用することができる。上記のように、式Ｉの化合物の光学活性異性体およびジアステレオマーもまたこの発明の一部と考えられる。係る光学活性異性体は、それら各々の光学活性前駆体から上記の方法によって、またはラセミ混合物を分割することによって製造することができる。この分割は、キラル試薬を用いる誘導体化とそれに続くクロマトグラフィーまたは反復結晶化により、実施できる。標準法によりキラルな補助部分を除去すると、本発明に係る化合物またはそれらの前駆体の実質上光学的に純粋な異性体が得られる。分割に関するさらなる詳細は、ジャックス等、Enan tiomers,Racemates,and Resolutions、ジョン・ウィレイ・アンド・サンズ、１９８１に記載がある。本発明化合物は、身体の天然の血餅溶解能を認め得るほどに妨害することなく（該化合物はフィブリン溶解に対しては阻害効果が低い）、血液凝価に関与する他のプロテイナーゼおよび非酵素蛋白に比較してトロンビンを選択的に阻害すると信じられる。さらにこのような選択性は、血栓溶解およびフィブリン溶解を実質上妨害せずに血栓溶解物質との使用を可能にすると信じられる。本発明は、その態様に一つにおいて、処置を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物の有効な（トロンビン阻害）用量を投与することを含む、哺乳動物においてトロンビンを阻害する方法を提供する。別の態様において本発明は、処置を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物の有効な（血栓塞栓疾患治療および／または予防量の）用量を投与することを含む、血栓塞栓疾患を処置する方法を提供する。別の態様において本発明は、処置を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物の有効な（凝固阻害）用量を投与することを含む、哺乳動物の凝固を阻害する方法を提供する。本方法により企図されるトロンビン阻害、凝固阻害および血栓塞栓疾患処置は、適宜、医学的治療および／または予防処置の両者を包含する。さらなる態様において本発明は、人間または動物においてトロンビンの阻害が必要な状態の処置に関するものである。本発明化合物は、人間を包含する動物において、血栓症ならびに血液および組織の凝固性亢進の処置または予防に役立つと予想される。該化合物が有用性を有する可能性のある疾患は、血栓症ならびに血液および組織の凝固性亢進の処置または予防である。該化合物が処置および／または予防に有用性を有する可能性のある疾患は、静脈血栓症および肺塞栓症、動脈血栓症、例えば心筋虚血、心筋梗塞、不安定アンギーナ、血栓症に基づく卒中および末梢動脈血栓症を包含する。さらに、該化合物は、冠動脈疾患、脳動脈疾患および末梢動脈疾患のようなアテローム性動脈硬化異常（疾患）の処置または予防に有用性が期待される。さらに、該化合物は、心筋梗塞の際、血栓溶解剤との併用で有用であると期待される。さらに、該化合物は、血栓溶解、経皮経管腔血管形成術(PTCA)および冠状動脈バイパス手術後の再閉鎖の予防に有用性が期待できる。さらに該化合物は、顕微手術後の再血栓症の防止に有用性が期待できる。さらに該化合物は、人工臓器および心臓弁に関連する抗凝固処置に有用であると期待される。さらに該化合物は、血液透析および播種性血管内凝固における抗凝固処置に有用性が期待できる。期待されるさらなる有用性は、患者にインビボで使用するカテーテルおよび器具をすすぐ際に、そして血液、血漿およびその他の血液産物のィンビトロの保存のための抗凝固剤としてである。さらに該化合物は、血液凝固が二次的な病状の原因または基本的な寄与過程となり得るその他の疾患、例えば転移を含む癌、関節炎を含む炎症性疾患、および糖尿病に有用性が期待される。この抗凝固化合物は、経口的に、非経口的に、例えば静脈内注入 (iv)、筋肉内注射(im)または皮下(sc)投与する。治療的および／または予防的効果を得るために本発明に従って投与される化合物の個々の用量は、無論、例えば投与される化合物、投与速度、投与経路、および処置される状態を包含する、その症例を取り巻く個々の状況によって決定されるであろう。上の用途の各々のための典型的な日用量は、約0.01mg/kgおよび約1000mg/kgの間である。用量計画は変わり得、例えば予防的使用のためには、日用量を一回投与することができ、または１日に３または５回といった複数回投与が適当であるかも知れない。重症管理状況では、本発明化合物を約0.01mg/kg/hおよび約20mg/ kg/hの間の速度で、好ましくは約0.1mg/kg/hおよび約5mg/kg/hの間の速度でiv注入により投与する。本発明方法はさらに、血餅溶解物質、例えば組織プラスミノーゲンアクチベーター(t-PA)、修飾ｔ−ＰＡ、ストレプトキナーゼまたはウロキナーゼと共に実施する。血餅の生成が起き、動脈または静脈が部分的にまたは完全に遮断された場合、通常、血餅溶解剤を使用する。本発明化合物はこの溶解剤の前に、またはこれと共に、またはその使用後に投与することができ、さらに好ましくは、血餅の形成が再度起こるのを防止するためアスピリンと共に投与する。本発明方法はまた、血小板凝集を阻害する血小板糖蛋白レセプター(IIb/IIIa) アンタゴニストと共に実施する。本発明化合物は、血餅形成が起こるのを、または再度起こるのを防止するため、IIb/IIIaアンタゴニストの前に、またはこれと共に、またはその使用後に投与することができる。本発明方法はアスピリンと共に実施することもできる。本発明化合物は、血餅形成が起こるのを、または再度起こるのを防止するため、アスピリンの前に、またはこれと共に、またはその使用後に投与することができる。上に述べたように、好ましくは本発明化合物は血餅溶解剤およびアスピリンと共に投与する。本発明はまた、上記の治療方法に使用する薬用製剤を提供する。本発明に係る薬用製剤は、式Ｉの化合物の有効なトロンビン阻害量を、薬学上許容し得る担体、賦形剤または希釈剤と共に含む。経口投与のためには、この抗血栓化合物を、結合剤、潤滑剤、崩壊剤等のような賦形剤を含有してよいカプセルまたは錠剤に調合する。非経口投与のためには、抗血栓物質を、例えば生理食塩水(0.9パーセント)、５パーセントデキストロース、リンゲル液等のような薬学上許容し得る希釈剤中に調合する。本発明化合物は、約0.1mgおよび約1000mgの間の用量を含む単位投薬製剤に調合することができる。好ましくは該化合物は、例えば硫酸塩、酢酸塩または燐酸塩といったような薬学上許容し得る塩の形である。単位投薬製剤の一例は、10mL の滅菌ガラスアンプル中の薬学上許容し得る塩としての本発明化合物5mgを含む。単位投薬製剤の別の例は、滅菌アンプルに入れた20mLの等張食塩水中の、薬学上許容し得る塩としての本発明化合物約10mgを含む。本化合物は、経口、直腸内、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、および経鼻を包含する様々な経路で投与することができる。本発明化合物は好ましくは投与前に調合する。本発明の別の態様は、式Ｉの新規化合物またはその薬学上許容し得る塩もしくは溶媒和物の有効量を、薬学上許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と共に含む薬用製剤である。このような製剤中の活性成分は、その製剤の0.1パーセントないし99.9パーセント（重量）を構成する。「薬学上許容し得る」とは、その担体、希釈剤または賦形剤が製剤の他の成分と共存でき、且つ被投与者にとって有害でないことを意味する。本薬用製剤は、既知の容易に入手し得る成分を用いて既知の方法により製造する。本発明に係る組成物は、当分野で良く知られる方法を用いることにより、患者への投与後に活性成分の迅速な、持続的な、または遅延された放出を行うよう、調合することができる。本発明に係る組成物の製造にあたり、活性成分は通常、担体と混合し、または担体により希釈し、または、カプセル、サシェー、紙もしくはその他の容器の形であってよい担体中に封入する。担体が希釈剤としての役割を有する場合、それは、活性成分のために媒質、賦形剤もしくは媒体として働く固体、半固体または液体材料であってよい。したがって、本組成物は、錠剤、丸剤、散剤、トローチ剤、サシェー剤、カシェー剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、溶液、シロップ剤、エアゾール（固体として、または液体媒質中の）、軟および硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、無菌注射溶液、無菌充填粉末等の形とすることができる。以下の製剤例は例示に過ぎず、いかなるやり方によっても本発明の範囲の限定を意図するものではない。「活性成分」とは、無論、式Ｉの化合物またはその薬学上許容し得る塩もしくは溶媒和物を意味する。製剤例１：硬ゼラチンカプセル剤を以下の成分を用いて製造する：量（mg/カプセル）活性成分２５０乾燥澱粉２００ステアリン酸マグネシウム１０計４６０ｍｇ製剤例２：錠剤を以下の成分を用いて製造する：量(mg/錠) 活性成分２５０微結晶性セルロース４００二酸化珪素、フュームド１０ステアリン酸５計６６５ｍｇ成分を混和し圧縮して、各々665mg重量の錠剤を製造する。製剤例３：以下の成分を含有するエアゾール溶液を製造する：重量活性成分０．２５エタノール２５．７５プロペラント２２（クロロジフルオロメタン）７０．００計１００．００活性化合物をエタノールと混合し、混合物をプロペラント２２の一部に加え、 −30℃に冷却し、充填器具に移す。次いで必要量をステンレススチール容器に入れ、プロペラントの残量で希釈する。次いでこの容器にバルブユニットを取り付ける。製剤例４：活性成分60mgを各々含有する錠剤を以下のように製造する：活性成分６０ｍｇ澱粉４５ｍｇ微結晶性セルロース３５ｍｇポリビニルピロリドン（10%水溶液として）４ｍｇカルボキシメチル澱粉ナトリウム４．５ｍｇステアリン酸マグネシウム０．５ｍｇタルク１ｍｇ計１５０ｍｇ活性成分、澱粉およびセルロースをNo.45メッシュU.S.篩に通し、完全に混合する。ポリビニルピロリドンを含有する水溶液を、得られた粉末と混合し、次いでこの混合物をNo.14メッシュU.S.篩に通す。このようにして製造した顆粒を50 ℃で乾燥し、No.18メッシュU.S.篩に通す。次に、予めNo.60メッシュU.S.篩に通しておいたカルボキシメチル澱粉ナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクをこの顆粒に加え、混合後、打錠機で圧縮して、各々150mg重量の錠剤を得る。製剤例５：活性成分80mgを各々含有するカプセル剤を以下のように製造する：活性成分８０ｍｇ澱粉５９ｍｇ微結晶性セルロース５９ｍｇステアリン酸マグネシウム２ｍｇ計２００ｍｇ活性成分、セルロース、澱粉、およびステアリン酸マグネシウムを混和し、 No.45メッシュU.S.篩にかけ、200mgの量を硬ゼラチンカプセル中に充填する。製剤例６：活性成分225mgを各々含有する坐剤を以下のように製造する：活性成分２２５ｍｇ飽和脂肪酸グリセリド２０００ｍｇ計２２２５ｍｇ活性成分をNo．60メッシュU.S.篩にかけ、予め必要最小限の熱で融解した飽和脂肪酸グリセリドに懸濁する。次いで混合物を公称２ｇ容量の坐剤鋳型中に注ぎ、放冷する。製剤例７：5ml用量当たり活性成分50mgを含有する懸濁剤を以下のように製造する：活性成分５０ｍｇカルボキシメチルセルロースナトリウム５０ｍｇシロップ１．２５ｍＬ安息香酸溶液０．１０ｍＬ香料適量着色料適量精製水で計５mLとする活性成分をNo．45メッシュU.S.篩にかけ、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよびシロップと混合し、滑らかなペーストを作成する。安息香酸溶液、香料および着色料を一部の水で希釈して攪拌しながら加える。次いで、必要な容量とするに充分な水を加える。製剤例８：静脈内製剤を以下のように製造する：活性成分１００ｍｇ等張食塩水１０００ｍＬ上の成分の溶液は、一般に毎分１mLの速度で対象に静脈内投与する。本発明化合物の有効且つ経口活性なトロンビンインヒビターである能力は、１またはそれ以上の下記の検定で評価する。本発明により提供される化合物（式Ｉ）は、哺乳動物においてトロンビンの作用を選択的に阻害する。トロンビンの阻害は、トロンビンが色素生成基質Ｎ−ベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリル−Ｌ−アルギニル−ｐ−ニトロアニリド、Ｎ−ベンゾイル−Ｌ−Phe−Ｌ−Val−Ｌ−Arg−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する検定で測定されるトロンビンのアミダーゼ活性のインビトロ阻害によって立証する。この検定は、緩衝液（0.03Mトリス、0.15M NaCl、pH7.4）50μLを、ヒトトロンビン溶液（精製ヒトトロンビン、エンザイム・リサーチ・ラボラトリーズ（インディアナ州サウスベンド）、8NIH単位/mL）25μLおよび溶媒（50%水性メタノール(v:v)）中の被験化合物25μLと混合することにより実施する。次に色素生成基質の水溶液(0.25mg/mL)150μLを加え、基質の加水分解速度を、ｐ−ニトロアニリンの放出について405nmで反応を監視することにより測定する。遊離トロンビン濃度に対し加水分解速度をプロットすることにより標準曲線を作成する。次いで、被験化合物で観測される加水分解速度を標準曲線を用いてそれぞれの検定における「遊離トロンビン」値に変換する。結合トロンビン（被験化合物に結合したトロンビン）は、各検定で観察された遊離トロンビンの量を、その検定で用いたトロンビンのわかっている最初の量から差し引くことによって算出する。各検定での遊離インヒビターの量は、結合トロンビンのモル数を、添加したインヒビター（被験化合物）のモル数から差し引くことによって算出する。 Kass値は、トロンビンおよび被験化合物(I)の間の反応に対する仮定的平衡定数である。 Kassを被験化合物の濃度範囲について算出し、平均値をL/moleの単位で記録する。一般に、本発明に係る式Ｉのトロンビン阻害化合物は0.05x10⁶L/moleまたはこれよりはるかに高いKassを示す。ヒトトロンビンについて上に記載した方法に実質上従い、別のヒト血液凝固系セリンプロテアーゼを使用し、そして下に定義する適当な色素生成基質と共にフィブリン溶解系セリンプロテアーゼを使用することにより、凝固因子セリンプロテアーゼおよびフィブリン溶解性セリンプロテアーゼに関して本発明化合物の選択性を、ヒト血漿血餅フィブリン溶解の妨害の実質的欠如と共に評価する。ヒト因子Ｘ、Ｘａ、IXa、XIａおよびＸIIａはエンザイム・リサーチ．ラボラトリーズ（インディアナ州サウスベンド）より；ヒトウロキナーゼはレオ・ファーマシューティカルズ（デンマーク）より購入し；そして組換え活性化プロテインＣ(aPC)は米国特許４９８１９５２に実質上従ってイーライ・リリー・アンド・カンパニーで製造する。色素生成基質：N-ベンゾイル-Ile-Glu-Gly-Arg-p-ニトロアニリド（因子Xa用）；N-Cbz-D-Arg-Gly-Arg-p-ニトロアニリド（因子Xa基質として因子IXa検定用）；ピログルタミル-Pro-Arg-p-ニトロアニリド（因子XI aおよびaPC用）；H-D-Pro-Phe-Arg-p-ニトロアニリド（因子XIIa用）；およびピログルタミル-Gly-Arg-p-ニトロアニリド（ウロキナーゼ用）；は、カビ・ヴィトゥルム（スウェーデン・ストックホルム）またはミドウエスト・バイオテク（インディアナ州フィッシャーズ）より購入する。牛トリプシンはワージントン・バイオケミカルズ（ニュージャージー州フリーホールド）より購入し、ヒト血漿カリクレインはカビ・ヴィトゥルム（スウェーデンン・ストックホルム）より購入する。血漿カリクレィン用の色素生成基質H-D-Pro-Phe-Arg-p-ニトロアニリドはカビ・ヴィトゥルム（スウェーデン・ストックホルム）より購入する。ヒトトロンビンおよびトリプシンの基質であるN-ベンゾイル-Phe-Val-Arg-p-ニトロアニリドは、本発明化合物について上に記載の方法に従い、既知のペプチドカップリング法を用いて、入手し得る市販の反応体から合成するか、またはミドウエスト・バイオテク（インディアナ州フィッシャーズ）より購入する。ヒトプラスミンはベーリンガー・マンハイム（インディアナ州インディアナポリス）より購入し；nt-PAはアメリカン・ダイアグノスティカ（コネティカット州グリーンウィッチ）から一本鎖活性対照として購入し；修飾t-PA6(mt-PA6)は当分野で既知の方法（ビュルク等、J.Biol.Chem.、265、5120-5177(1990)を参照されたい）によりイーライ・リリー・アンド・カンパニーで製造する。プラスミン色素生成基質H-D-Val-Leu-Lys-p-ニトロアニリドおよび組織プラスミノーゲンアクチベーター(t-pA)基質H-D-Ile-Pro-Arg-p-ニトロアニリドはカビ・ヴィトゥルム（スウェーデン・ストックホルム）より購入する。上記の色素生成基質において、三文字の記号Ile、Glu、Gly、Pro、Arg、Phe、 Val、LeuおよびLysはそれぞれ対応するアミノ酸基イソロィシン、グルタミン酸、グリシン、プロリン、アルギニン、フェニルアラニン、バリン、ロイシンおよびリジンを指すのに使用する。トロンビンインヒビターは、好ましくはウロキナーゼ、組織プラスミノーゲンアクチベーター(t−pA)およびストレプトキナーゼにより誘導されるフィブリン溶解を温存すべきである。この事は、ストレプトキナーゼ、t−PAまたはウロキナーゼの血栓溶解療法の併用薬としての係る物質の治療的使用にとって、そして内因性フィブリン溶解を温存する（t-PAおよびウロキナーゼに関して）抗トロンビン物質としての係る物質の使用にとって、重要となるであろう。フィブリン溶解性プロテアーゼのアミダーゼ活性妨害の欠如に加えて、このようなフィブリン溶解系の温存を、ヒト血漿血餅の使用、およびそれぞれのフィブリン溶解プラスミノーゲンアクチベーターによるそれらの溶解によって研究することができる。材料イヌ血漿は、静脈穿刺により、意識のある雑種猟犬から3.8パーセントクエン酸中に取得する（両性をバトラー・ファームズ（米国ニューヨーク州クライド）より）。フィブリノーゲンは新鮮なイヌ血漿から調製し、ヒトフィブリノーゲンは前の方法および明細書に従って、当日のACDヒト血液の画分I−2から調製する。スミス、Biochem.J.、185、1-11(1980)；およびスミス等、Biochemistry、11 、2958-2967(1972)。ヒトフィブリノーゲン（純度98パーセント／無プラスミン）はアメリカン．ダイアグノスティカ（コネティカット州グリーンウィッチ）からのものである。フィブリノーゲンI−2調製物の放射標識はかつて報告されたように実施する。スミス等、Biochemistry、11、2958−2967(1972)。ウロキナーゼはレオ・ファーマシューティカルズ（デンマーク）から、2200プローグ単位／バイアルとして購入する。ストレプトキナーゼはヘキストールーセル・ファーマシューティカルズ（ニュージャージー州サマヴィル）より購入する。方法 − t-PAによるヒト血漿血餅の溶解に及ぼす効果 0.0229μCiの125-ヨウ素で標識したフィブリノーゲンを含有するヒト血漿100 μLにトロンビン50μL（73NIH単位/mL）を添加することにより、微小試験管中でヒト血漿血餅を形成させる。この血餅にウロキナーゼまたはストレプトキナーゼ（50、100、または1000単位/mL）50μLを積層し、室温で20時間インキュベートすることにより、血餅の溶解を研究する。インキュベーション後、試験管をベックマン・マイクロフュージで遠心する。ガンマ線計数のため、上清25μLを0.03M トリス/0.15M NaCl緩衝液1.0mL容量に加える。100パーセント溶解の計数対照をトロンビンを除去する（そして緩衝液に置き換える）事によって得る。当該化合物を１、５、および10μg/mL濃度で積層溶液に加えることにより、起こり得るフィブリン溶解の妨害についてトロンビンインヒビターを評価する。フィブリン溶解物質の特定の濃度に関して50パーセントの溶解を表す値をデータの点から線形外挿することにより、ＩＣ₅₀値のおよその近似値を見積もる。抗凝固活性材料イヌ血漿およびラット血漿は、静脈穿刺により、意識のある雑種猟犬（両性をバトラー・ファームズ（米国ニューヨーク州クライド）より）または麻酔した雄スプラーグ−ドーリーラット（ハーラン・スプラーグ−ドーリー、インコーポーテッド（米国インディアナ州インディアナポリス））から3.8パーセントクエン酸中に取得する。フィブリノーゲンは前の方法および明細書に従って当日のＡＣＤヒト血液の画分I−2から調製する。スミス、Biochem.J.、185、1-11(1980)；およびスミス等、Biochemistry、11、2958−2967(1972)。ヒトフィブリノーゲンは純度98パーセント／無プラスミンとして、やはりアメリカン・ダイアグノスティカ（コネティカット州グリーンウィッチ）から購入する。凝固試薬アクチン、トロンボプラスチン、インノビンおよびヒト血漿はバクスター・ヘルスケア・コーポレーション、デイド・ディヴィジョン（フロリダ州マイアミ）からのものである。パーク−デイヴィス（ミシガン州デトロイト）からの牛トロンビンを血漿中の凝固検定に使用する。方法抗凝固測定凝固検定法はかつて記載された通りである。スミス等、Thrombosis Research 、 50、163-174(1988)。全ての凝固検定の測定にCoAスクリーナー凝固装置（アメリカン・レイバー、インコーポレーテッド）を使用する。生理食塩水0.05mLおよびトロンボプラスチン−Ｃ試薬または組換えヒト組織因子試薬（インノヴィン）0. 05mLを被験血漿0.05mLに添加することにより、プロトロンビン時間(PT)を測定する。活性化部分トロンボプラスチン時間(APTT)は、被験血漿0.05mLをアクチン試薬0.05mLと共に120秒間インキュベートし、次いでCaCl₂0.05mL(0.02M)を加えることにより測定する。トロンビン時間(TT)は、生理食塩水0.05mLおよびトロンビン0.05mL(10NIH単位/mL)を被験血漿0.05mLに添加することにより測定する。式Ｉの化合物を広範囲の濃度でヒトまたは動物の血漿に加えて、APTT、PT、およびTT 検定に及ぼす延長効果を測定する。線形外挿法を行い、各検定について凝固時間を二倍にするのに必要な濃度を見積もる。動物雄スプラーグ・ドーリーラット(350-425g、ハーラン・スプラーグ・ドーリー・インコーポレーテッド(インディアナ州インディアナポリス)をキシラジン(20m g/kg、s.c.)およびケタミン(120mg/kg、s.c.)で麻酔し、温水ブランケット(37℃ )上に維持する。注入を可能にするため頚静脈にカニューレを挿入する。動脈−静脈シャントモデル左頚静脈および右頚動脈に長さ20cmのポリエチレンPE60管を挿管する。管腔に綿糸(5cm)を入れた、より大きな管(PE190)の中央部分６cmを、より長い部分の間に摩擦で固定して、動脈−静脈シャント回路を完成する。シャントに15分間血液を循環させた後、糸を注意深く抜き取って秤量する。濡れた糸の重量を、糸および血栓の総重量から差し引く(J.R.スミス、Br J Pharmacol、77:29、1982を参照されたい)。このモデルにおいて本発明に係る好ましい化合物は、i.v.用量33.17 6μmol/kg/hで正味の血餅重量を対照のおよそ25-30%、またはそれ以上低下させる。動脈損傷のFeCl₃モデル頚動脈を正中腹側頚部切開により分離する。熱電対を各動脈の下に置き、血管温度を連続して連続記録紙に記録する。縦に切った管(0.058ID x 0.077OD x 4mm 、バクスター・Med.グレード・シリコーン)でできたカバーを、熱電対の真上で各頚動脈に巻き付ける。FeCl₃六水和物を水に溶解し、濃度(20パーセント)をFeC l₃ のみの実重量で表す。動脈を損傷し血栓症を誘発するため、2.85μLをピペットでカバーの中に入れて、熱電対プローブ上部の動脈を浸す。動脈の閉塞は温度の急激な低下で示される。閉塞までの時間は分で記録し、これはFeCl₃の適用と血管温度の急激な低下との間の経過時間を表す(K.D.クルツ、Thromb.Res.、60:269 、1990を参照されたい)。自発的血栓溶解モデルインビトロデータは、トロンビンインヒビターはトロンビンを阻害し、且つ、高濃度ではプラスミンおよび組織プラスミノーゲンアクチベーターのような他のセリンプロテアーゼを阻害し得ることを示唆している。本化合物がインビボでフィブリン溶解を阻害するか否かを評価するため、標識した全血液血餅を肺循環中に埋め込むことにより、自発的血栓溶解の速度を測定する。ラットの血液(1mL) を牛トロンビン(4IU、パーク・デイヴィス)および¹²⁵Iヒトフィブロゲン(5μCi 、ICN)と速やかに混合し、直ちにシラスチック管に吸引し、37℃で１時間インキュベートする。経時した血栓を管から排出し、１cmのセグメントに切り取り、正常食塩水で３回洗浄し、各セグメントをガンマカウンターで計数する。計数値のわかったセグメントをカテーテル中に吸引し、続いてこれを頚静脈中に埋め込む。カテーテル先端を右心房の近くへ進めて血餅を排出し、肺循環中に浮遊させる。埋込の１時間後、心臓および肺を摘出し、別々に計数する。血栓溶解をパーセントで表す。ここで、埋め込まれた血餅のフィブリン溶解性溶解は時間に依存して起こる(J.P.クロッツェル、Cardiovas.Pharmacol.、12:520、1988を参照されたい)。凝固パラメータ血漿トロンビン時間(TT)および活性化部分トロンボプラスチン時間(APTT)はフィブロメーターで測定する。頸部カテーテルから血液試料を採取し、クエン酸ナトリウム(3.8パーセント血液９部に対して１部)を入れた注射筒に集める。TTを測定するため、ラット血漿(0.1mL)を生理食塩水(0.1mL)および牛トロンビン (0.1mL、トリス緩衝液中30U/mL；パーク・デイヴィス)と37℃で混合する。APTT のためには、血漿(0.1mL)およびAPTT溶液(0.1mL、オーガノン・テクニカ)を５分間インキュベートし(37℃)、凝固を開始させるためCaCl₂(0.1mL、0.025M)を加える。検定は二重に行い、平均する。バイオアベイラビリティーの指標生物活性の尺度のため、観察されたTTの増加は親化合物のみによるトロンビン阻害に起因するものであるという仮定の下に、血漿トロンビン時間(TT)を親化合物の検定のための代替値として扱う。TTに及ぼすトロンビン阻害効果の時間経過を、麻酔したラットへのi.v.ボーラス投与の後に、そして拘束した意識のあるラットへの経口処置の後に測定する。血液容量が限定されているため、そして処置の時間から反応が処置前の値に戻るまでの時間経過を測定するのに必要な点の数が限定されていることから、２群のラットを使用する。それぞれの試料群は連続する時点を代わる代わる表す。この時間経過にわたる平均TTを用いて曲線下面積 (AUC)を算出する。バイオアベイラビリティーの指標は下記の式により算出し、相対活性パーセントとして表現する。血漿TT時間経過の曲線下面積(AUC)を決定し、用量について調節する。このバイオアベイラビリティーの指標は「相対活性％」と名付け、で算出する。化合物化合物の溶液は規定食塩水中で毎日新しく作成し、ボーラスとしての注射、または15分前に開始して実験的摂動の間中続ける注入を行うが、その摂動は、動脈静脈シャントモデルでは15分間であり、動脈損傷のFeCl₃モデルおよび自発的血栓溶解モデルでは60分間である。ボーラス注射の容量はi.v.で1mL/kg、p.o.で5m L/kg、そして注入容量は3mL/hrである。統計結果は平均値+/-SEMとして表現する。分散の一元分析を用いて統計上有意な差異を検出し、次いでダネット試験を適用してどの平均値が異なっているのかを決定する。等しい平均値の帰無仮説の棄却のための有意水準はP<0.05である。動物雄の犬（ビーグル；18ヶ月−２年；12-13kg、マーシャル・ファームズ（14516 ニューヨーク州ノースローズ））を一晩絶食させ、薬物投与の240分後にピュリーナ保証プレスクリプション・ダイエット（ピュリーナ・ミルズ（ミズーリ州セントルイス））を与える。水は自由に摂取できる。室温は６６−７４°F、相対湿度45-50パーセントに維持し、6:00-18:00まで点灯する。薬動力学的モデル被験化合物は、滅菌した0.9パーセント食塩水に溶解して5mg/mL製剤とすることにより投与の直前に調合する。被験化合物2mg/kg用量を１回、経口経管栄養によって犬に与える。血液試料(4.5mL)を、投与の0.25、0.5、0.75、１、２、３、４および６時間後に頭部静脈から採取する。試料はクエン酸添加したバキュテイナー管に集め、氷上に維持した後、遠心により血漿へと減量する。血漿試料をHP LC MSにより分析する。被験化合物の血漿濃度を記録し、薬動力学的パラメータ：排泄速度定数、Ke；総クリアランス、Clt；分布容量、Vd；血漿中最大被験化合物濃度の時間、Tmax；Tmaxの最大被験化合物濃度、Cmax；血漿半減期、t0.5；および曲線下面積、A.U.C.；吸収された被験化合物の画分、Ｆ、の算出に使用する。冠動脈血栓症の犬モデル犬の外科的処置および機器使用は、ジャクソン等、Circulation、82、930-940 (1990)に記載の通りである。雑種猟犬（6-7月齢、いずれかの性、バトラー・ファームズ（米国ニューヨーク州クライド））をペントバルビタールナトリウム（静脈内30mg/kg、i.v.）で麻酔し、挿管し、室内の空気で換気する。一回換気量および呼吸数を、血液のPO₂、PCO₂、およびｐＨが正常範囲内に維持されるよう調節する。誘導II ECGを記録するため、皮下注射針電極を挿入する。左の中外側頸部切開により、左頚静脈および総頸動脈を分離する。動脈血圧(A BP)を、頚動脈に挿入した前もって検定したミラー変換器（モデル（MPC-500、ミラー・インストゥルメンツ（米国テキサス州ヒューストン））で連続測定する。頚静脈は実験中の血液試料採取のためカニューレを挿入する。さらに、被験化合物の投与のため、両後脚の大腿静脈にカニューレを挿入する。第五肋間で左開胸を行い、心臓を心膜揺籃中に懸架する。左回旋冠動脈(LCX) の１ないし２cmのセグメントを、最初の主要な対角心室分岐の近くで分離する。 3-4mm長の26ゲージ針の先端を有する針金の陽極電極（テフロン被覆、30ゲージ銀メッキの銅線）をLCX中に挿入し、この動脈の内膜表面に接触させて留置する（実験の終了時に確認する）。陰極を皮下(s.c.)部位に留置することにより、刺激回路を完成する。調節可能なプラスチック製閉塞器をLCXの周りに電極領域の上方に設置する。前もって検定した電磁気流プローブ（カロリナ・メディカル・エレクトロニクス（米国ノースカロライナ州キング））を、LCXの周りに、冠動脈血流(CBF)測定のための陽極の近くに設置する。閉塞器は、LCXを10秒間機械的に閉鎖した後に観察される充血血流反応の40-50パーセント阻害をもたらすよう調節する。全ての血液動態およびECG測定値を記録し、データ取得システム（モデルM3000、モデュラー・インストゥルメンツ（米国ペンシルヴァニア州マルヴァーン））で分析する。血栓形成および化合物の投与計画陽極に100μAの直流(DC)を適用することにより、LCXの内膜に電解的損傷を作成する。この電流は６０分間維持し、次いでその血管が閉塞しているか否かに拘わらず中止する。血栓形成は、LCXが完全に閉塞するまで自発的に進行する（ゼロCBFおよびS-Tセグメントの増加として測定される）。閉鎖している血栓を１時間経時させた後に化合物の投与を開始する。0.5および１mg/kg/h用量の本発明化合物の２時間の注入を、血栓溶解剤（例えば組織プラスミノーゲンアクチベーター、ストレプトキナーゼ、APSAC）の注入と同時に始める。被験化合物の投与後、再灌流を３時間行う。血栓溶解がうまくいった後の冠動脈の再閉鎖を、少なくとも30分間持続したゼロCBFと定義する。血液学およびテンプレート出血時間の測定全血球数、ヘモグロビン、およびヘマトクリット値を、クエン酸(3.8パーセント)添加血液（クエン酸１部：血液9部）40μLの試料について血液学分析機（セルーディン900、セコイア−ターナー（米国カリフォルニア州マウント・ビュー））を用いて測定する。歯肉テンプレート出血時間を、シンプレートII出血時間装置（オーガノン・テクニカ（米国ノースカロライナ州ダーラム））で測定する。この装置を用いて、犬の上または下の左顎の歯肉に２個の水平切開を施す。各切開は幅３mm ｘ深さ２mmである。切開を施し、ストップウォッチを用いて出血がどれだけの時間起こるか測定する。綿棒を用いて切開からにじみ出る血液を吸い取る。テンプレート出血時間は、切開から出血の停止までの時間である。出血時間は、被験化合物の投与直前（０分）、注入後６０分、被験化合物の投与終了時（120分）、および実験終了時に測定する。全てのデータを分散の一元分析(ANOVA)、引き続きステューデント−ニューマン−クエルスの事後ｔ検定により分析して有意水準を決定する。この実験の最中、時点の間における有意な差異を測定するために、反復法ANOVAを用いる。値は少なくともp<0.05のレベルで統計的に相違すると決定する。全ての数値は平均値 ±SEMである。全ての研究は、米国物理学会の指導原理に従って実施する。方法に関するさらなる詳細はジャクソン等、J.Cardiovasc.Pharmacol.、(1993)、21 、587-599に記載されている。以下の実施例および代表的な中間体化合物の製造例は本発明をさらに説明するために供するものであり、本発明を限定するものと解してはならない。実施例で使用する略語、記号および用語は以下の意味を有する。 Ac＝アセチル AIBN＝アゾビスイソブチロニトリル Anal.＝元素分析 BnまたはBzl＝ベンジル Bu＝ブチル n-BuLi＝ブチルリチウム calcd＝理論値 DCC＝ジシクロヘキシルカルボジイミド DIBAL-H＝水素化ジイソブチルアルミニウム DMF＝ジメチルホルムアミド DMSO＝ジメチルスルホキシド Et＝エチル EtOAc＝酢酸エチル Et₃N＝トリエチルアミン Et₂O＝ジエチルエーテル EtOH＝エタノール EtSH＝エタンチオール FAB＝高速原子衝撃（質量分光法） FDMS＝電場脱離質量スペクトル Hex＝ヘキサン類 HOAt＝１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール HPLC＝高速液体クロマトグラフィー HRMS＝高分解能質量スペクトル i-PrOH＝イソプロパノール IR＝赤外スペクトル LAH＝水素化アルミニウムリチウム Me＝メチル MeI＝沃化メチル MeOH＝メタノール MPLC＝中圧液体クロマトグラフィー NBS＝Ｎ−ブロモスクシンイミド NMR＝核磁気共鳴 Ph＝フェニル PPA＝ポリ燐酸 i-Pr＝イソプロピルロシェル塩＝酒石酸ナトリウムカリウム RPHPLC＝逆相高速液体クロマトグラフィー SiO₂＝シリカゲル SM＝出発物質 TBS＝tert-ブチルジメチルシリル TEA＝トリエチルアミン Temp.＝温度 TFA＝トリフルオロ酢酸 THF＝テトラヒドロフラン TIPS＝トリイソプロピルシリル TLC＝薄層クロマトグラフィートリフリック酸＝トリフルオロメタンスルホン酸別途記載の無い限り、pH調節および後処理は酸または塩基水溶液によって行う。PrepLCは、「Prep Pak(TM)」シリカカートリッジを用いる調製用液体クロマトグラフィーを指し；円形クロマトグラフィーは、「クロマトトロン(TM)」装置を用いる調製用クロマトグラフィーを指す。実施例１ 5-ヒドロキシ-1-[3-メトキシ-4-[(1,2,4-トリアゾール-1-イル)メチル]ベンジル ]-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二シュウ酸塩の製造 A．1-[4-(ブロモメチル)-2-メトキシフェニル]-1-プロパノン 4−メチルサリチル酸（20g，131.5mmol）、CH₃I（74.7g，526.3mmol）、K₂CO₃ （36.2g，262mmol）およびアセトン（250mL）の混合物を4日間、還流状態に維持した。濾過後、ろ液を減圧下に濃縮し、得られた残渣をEt₂Oに取り出し、2N NaO Hで洗浄した。その有機抽出物を減圧下に濃縮した。この粗製物から10g（55.6mm ol）をCCl₄（100mL）とN-ブロモスクシンイミド（10.8g，61.1mmol）に取り出し、触媒量のAIBNを加えた。その混合物を4時間加熱還流した後、Et₂Oで10倍希釈した。その有機分を25%NaOH（水溶液）で洗浄し、減圧下に濃縮した。粗生成物をEtOAc-ヘキサン類から再結晶して、所期の臭化物14.2g（99%）を得た。B．4-(ジメチル−t−ブチルシロキシ)-2-ニトロアニリン 4-アミノ-3-ニトロフェノール（20g，128.9mmol）に塩化tert-ブチルジメチルシリル（21.5g，142.9mmol）、イミダゾール（13.3g，194.8mmol）およびDMF（1 00mL）を加えた。その混合物を室温で3時間撹拌した後、Et₂Oで希釈し、H₂Oで洗浄した。有機分を減圧下に濃縮し、得られた固体をEt₂O-H₂Oから再結晶して、生成物26.5g（76%）を得た。 C．4-[4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-2-ニトロフェニルアミノ]メチル- 2-メトキシ安息香酸メチル上記の臭化物（実施例1のA；2.6g，9.65mmol）に、K₂CO₃（0.89g，6.44mmol）、アニリン（実施例1のB；1.72g，6.44mmol）およびCH₃CN（30mL）を加えた。その混合物を一晩80℃に加熱した。EtOAcで20倍希釈した後、有機分をH₂Oで洗浄し、減圧下に濃縮して、フラッシュクロマトグラフィー（SiO₂，7:1のヘキサン類：EtOAc）後に1.5g（52%）の所期の生成物を得た。D．4-[2-アミノ-4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)フェニルアミノ]メチル- 2-メトキシ安息香酸メチル上記のニトロ化合物（実施例1のC；0.5g，1.11mmol）に、PtO₂（アダムス）触媒（0.025g）とEtOH（無水，40mL）を加えた。その混合物を水素雰囲気（風船）下に1.5時間、迅速に撹拌した後、珪藻土のパッドを通して濾過することにより、触媒を除去した。ろ液を減圧下に濃縮して所期の生成物460mg（99%）を得た。 E．4-[4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンゾイルアミノ]フェニルアミノ]メチル-2-メトキシ安息香酸メチル CH₂Cl₂（2ml）中の4−[2−(1−ピロリジニル)エトキシ]安息香酸（350mg，1.2 9mmol）に塩化オキサリル（327mg，2.58mmol）と触媒量のDMFを加えた。その混合物を室温で1時間撹拌した後、減圧下に濃縮した。その酸塩化物を一晩真空乾燥した。ピリジン（0.158g，2.34mmol）およびCH₂Cl₂（3mL）中、0℃、N₂下の上記アニリン（実施例1のD；0.49g，1.17mmol）に、前もって形成させたCH₂Cl₂4mL 中の酸塩化物（実施例5のDを参照されたい）を滴下した。添加が完了したら、その混合物を室温で15分間撹拌した後、飽和NaHCO₃の添加によって反応を停止した。生成物をEtOAcで抽出し、有機分をH₂Oで洗浄し、減圧下に濃縮して、フラッシュクロマトグラフィー（SiO₂，CHCl₃中の10%MeOH）後に583mgの所期の生成物を得た。 F．5-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-1-(3-メトキシ-4-メトキシカルボニルベンジル)-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール上記のアミド（実施例1のE；3.95g，6.23mmol）にo-キシレン（50mL）を加え、その混合物を一晩加熱還流した。減圧下に濃縮した後、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂，CHCl₃中の5%MeOHに1%Et₃N（v/v）を添加）で精製して、所期の生成物3.1g（82%）を得た。G．5-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-1-[4-(ヒドロキシメチル)-3-メトキシカルボニルベンジル]-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール N₂下、0℃のTHF（10mL）中のLAH（31mg，0.829mmol）に、上記のエステル（実施例1のF；O.51g，0.829mmol）を加えた。その混合物を0℃で25分間撹拌した後、室温で25分間撹拌した。30μLのH₂O、30μLの15%NaOHおよび90μLのH₂Oを順番に使ってクエンチした後、その混合物を1時間撹拌し、珪藻土のパッドを通して濾過することによって、得られたアルミニウム塩を除去し、次いでEtOAcで洗浄した（25mL×3）。次にろ液を減圧下に濃縮し、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂，CHCl₃中の10%MeOH）で精製して、所期のベンジルアルコール283mg（58%）を得た。 H．5-ヒドロキシ-1-[3-メトキシh-4-[(1,2,4-トリアゾール-1-イル)メチル]ベンジル]-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二シュウ酸塩上記のベンジルアルコール（実施例1のG；50mg，0.085mmol）にCBr₄（42mg，0 .128mmol）、PPh₃（29mg，0.128mmol）およびTHF（0.5mL）を加えた。その混合物を室温で45分間撹拌した後、THF（1mL）中の1,2,4-トリアゾールのナトリウム塩（17mg，0.255mmol）を加えた。そのトリアゾールのナトリウム塩はTHF中の当該トリアゾールに等しい当量数のNaH（60%）を添加することによって調製し、その混合物を45分間撹拌した。トリアゾールの添加後、その混合物を3時間撹拌し、次にEtOAcで25倍希釈した。有機分をH₂Oで洗浄し、減圧下に濃縮した。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂、CHCl₃中の15%MeOH）で精製した。次にその化合物をTFA（2mL）に取り出し、1時間静置した後、減圧下に濃縮した。次にその物質をEtOAcに取り出し、2等量の0.1Nシュウ酸（EtOAc中）を加え、得られた固体を遠心分離によって集めて、10mgの白色固体（17%）を得た。実施例２ 5-ヒドロキシ-1-[4-[(1-イミダゾリル)メチル]-3-メトキシベンジル]-2-[4-[2-( 1-ピロリジニル)エトキシ]フェニルベンズイミダゾール・二シュウ酸塩の製造上記ベンジルアルコール（実施例1のG；310mg，0.528mmol）にCBr₄（262mg,0. 792mmol）、PPh₃（179mg，0.792mmol）およびTHF（1mL）を加えた。その混合物を室温で1時間撹拌した後、THF中の等モル量のNaHから前もって1時間形成させておいたイミダゾールのナトリウム塩（108mg，1.58mmol、2.5mLのTHF中）の混合物を加えた。その反応混合物を室温で3.5時間撹拌した後、EtOAcで25 倍希釈した。有機分をH₂Oで洗浄し、減圧下に濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（SiO₂，CHCl₃中の10%MeOH）で精製した。得られた固体に1.0M TBAF（0 .31mL，0.314mmol）を加え、その溶液を室温で2.5時間撹拌した。EtOAcで25倍希釈した後、有機分をH₂Oで洗浄し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂，CHCl₃中の15%MeOH）で精製した。得られた泡状物をEtOAc（5mL）に取り出した後、2等量の0.1Nシュウ酸（EtOAc中）を加え、灰白色固体（77mg，37%）を遠心分離で集めることによって、二シュウ酸塩を形成させた。実施例３ 5-ヒドロキシ-1-[3-メトキシ-3-[(1-ピラゾリル)メチル]ベンジル]-2-[4-[2-(1 −ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二シュウ酸塩の製造基本的に実施例2に詳述した方法に従って、上記ベンジルアルコール（実施例1 のG）とピラゾールのナトリウム塩から67%の収率で表題の化合物を製造した。実施例４ 1-[4-(ベンジルアミノ)メチル-3-メトキシベンジル]-5-ヒドロキシ-2-[4-[2-(1- ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール二塩酸塩の製造 A．1-[4-(ベンジルアミノ)メチル-3-メトキシベンジル]-5-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール上記のベンジルアルコール（実施例1のG，50mg，0.085mmol）にN-メチルモルホリン-N-オキシド（15mg，0.128mmol）、4Åモレキュラーシーブ（43mg，粉末）、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（1.5mg，0.05mmol）およびCH₂ Cl₂（0.25mL）を加えた。その混合物をN₂下で35分間撹拌した後、EtOAcで25倍希釈した。そのスラリーをシリカゲル60のプラグを通して濾過し、EtOAc（25mL）で洗浄し、ろ液を減圧下に濃縮した。得られたアルデヒドにNaCNBH₃ （6mg,0.091mmol）、MeOH（0.28mL）中の10%HOAcおよびMeOH（0.28mL）中のベンジルアミン（18mg，0.175mmol）を加えた。その混合物を室温で1時間撹拌した後、減圧下に濃縮した。得られた残渣をEtOAc（25mL）に取り出した後、有機分を飽和NaHCO₃溶液とH₂Oで洗浄し、減圧下に濃縮した。それをフラッシュクロマトグラフィー（SiO₂，CHCl₃中の15%MeOH）で精製して、22mg（38%）を得た。 B．1-[4-(ベンジルアミノ)メチル-3-メトキシベンジル]-5-ヒドロキシ-2-[4-[2- (1-ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二塩酸塩上記ベンジルアミン（実施例4のA；20mg，0.03mmol）に6N HCl（1mL）を加え、その混合物を室温で1時間撹拌した。その溶液をH₂Oで5倍希釈し、Et₂Oで洗浄し、水層を減圧下に濃縮して、所期の生成物17mg（89%）を得た。実施例５ 1-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジル]-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二シュウ酸塩の製造A．4-ヒドロキシ安息香酸メチル 4-ヒドロキシ安息香酸（138g，1.00mol）のメタノール（1000mL）溶液に濃硫酸（20mL）を加え、その反応を20時間加熱還流した。その反応混合物を減圧下に元の体積の半分に濃縮した後、酢酸エチル（1000mL）と水（1000mL）で分配した。有機層を1N水酸化ナトリウム水溶液（300mL×2）、水（300mL）、塩水（300mL ）で洗浄し、乾燥（MgSO₄）した。溶媒を減圧下に除去し、周囲温度で真空乾燥した後、当該エステルを白色固体（106.62g，70%）として得た。 B．4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]安息香酸メチル 4-ヒドロキシ安息香酸メチル（4.56g，30mmol）の乾燥DMF（60mL）溶液に、炭酸セシウム（31.3g，96mmol，3.2等量）と1-(2-クロロエチル)ピロリジン塩酸塩（8.1g，48mmol，1.6等量）を加えた。その反応を80℃で20時間加熱した。その反応混合物を周囲温度に冷却した後、水（240mL）を加えた。その混合物を酢酸エチル（250mL）で分配した。水層を酢酸エチル（50mL）で抽出した。合わせた抽出物を水（240mL）、塩水（50mL）で洗浄し、乾燥（Na₂SO₄）し、濾過した後、減圧下に濃縮乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（90：5：5のヘキサン：THF：TEA）で精製して、所期の生成物を油状物（5.3g，71%）として得た。 C．4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]安息香酸塩酸塩 1N HCl水溶液（50mL）中の4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]安息香酸メチル（ 5.3g，21.2mol）を18時間加熱還流した。その反応混合物を酢酸エチル（20mL×2 ）で洗浄した。水性溶媒を減圧下に除去し、周囲温度で真空乾燥した後、所期の酸を白色固体（5.55g，96％）として得た。 D．4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンズアミド乾燥ジクロロメタン（10mL）に懸濁した4−[2−(1−ピロリジニル)エトキシ] 安息香酸塩酸塩（750mg，2.76mmol）に、塩化オキサリル（0.481mL，5.62mmol， 2.0等量）を加え、次に触媒量のDMFを加えた。1時間後、その反応混合物を珪藻土のパッドを通してろ過し、次に溶媒を減圧下で除去した。残渣を過剰の、TNF 中の濃水酸化アンモニウム（各5mL）で処理した。塩水（10mL）の添加によって層を分離した後、水層をTHF（20mL×2）で抽出した。合わせた抽出物を減圧下に濃縮乾固し、周囲温度で真空乾燥した後、所期のアミドを白色固体として得た（ 602mg，93％）。 E．4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジルアミン水素化アルミニウムリチウム（132mg，3.49mmol，2.1等量）を4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンズアミド（389mg，1.66mmol）の乾燥THF（25mL）溶液に加えた後、その反応を20時間加熱還流した。その反応を室温まで冷ました後、水（ 0.250mL）でクエンチした。水酸化ナトリウム水溶液（15%（w/v）溶液0.250mL）を加えてから水（0.750mL）を加え、その反応を30分間撹拌した。その反応混合物を珪藻土のパッドに通し、その珪藻土をTHF（15mL×3）で洗浄した。合わせた有機分を減圧下に濃縮してアミンを油状物として得て（373mg，＞100%）、それをさらに精製することなく使用した。 F．N-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジル]-2-ニトロアニリン 2-フルオロニトロベンゼン（0.175mL，1.66mmol，1.0等量）、4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジルアミン（366mg，1.66mmol）および無水炭酸カリウム（460mg，3.32mmol，2.0等量）を乾燥THF（16mL）中で混合し、周囲温度で18時間撹拌した。その反応混合物を珪藻土のベッドを通して濾過した後、溶媒を減圧下に除去した。その粗製油状物をフラッシュクロマトグラフィー（溶出液は20： 1のCHCl₃：MeOH，0.5%TFA）で精製して、上記の置換ニトロアニリンを明黄色油状物として得た（252mg，44％）。 G．N¹-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジル]-1,2-ベンゼンジアミンアダムス触媒（50mg，20重量%）を、無水エタノール（5mL）中のN-[4-[2-(1- ピロリジニル)エトキシ]ベンジル]-2-ニトロアニリン（240mg，0.703mmol）の脱気した溶液に加えた。雰囲気を水素に置換した後、その反応を、tlc（9：1のCHC l₃：MeOH，1%TEA）で窒素化合物がすべて消費されたと決定されるまで、周囲温度で激しく撹拌した。その反応混合物を珪藻土のベッドを通して濾過した後、溶媒を減圧下に除去して、所期の生成物を黄褐色油状物（218mg，100%）として得た。 H．N^I-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジル-N²-[4-[2-(1-ピロリジニル) エトキシ]ベンゾイル]-1,2-ベンゼンジアミン乾燥ジクロロメタン（2mL）に溶解したN¹-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ] ベンジル]-1,2-ベンゼンジアミン（220mg，0.706mmol）に、ピリジン（0.114mL ，1.41mmol，2.0等量）を加えた。得られた溶液に、乾燥ジクロロメタン（3mL）に懸濁した塩化4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンゾイル（179mg，0.706mmol ，1.0等量）を0℃で滴下し、反応をtlc（9：1のCHCl₃：MeOH，1%TEA）で追跡した。アニリンが消費されたら、反応を周囲温度まで温めた。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（15mL）の添加によって反応をクエンチした後、酢酸エチル（60mL）で希釈した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（15mL）、水（15mL）、塩水（15mL）で洗浄し、MgSO₄で乾燥し、濾過した後、減圧下で溶媒を除去した。フラッシュクロマトグラフィー（溶出液；20：1のCHCl₃：MeOH，0.5%TEA）の後、所期の生成物を褐色泡状物（361mg，97%）として得た。 I．1-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジル]-2-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]フェニルベンズイミダゾール・二シュウ酸塩 N¹-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンジル]-N²-[4-[2-(1-ピロリジニル)エトキシ]ベンゾイル]-1,2-ベンゼンジアミン（361mg，0.683mmol）をo-キシレン（6mL）に溶解した後、150℃で加熱し、反応をtlc（9：1のCHCl₃：MeOH， 1%TEA）で追跡することにより、表題の化合物を製造した。アミドが消費されたら、反応を周囲温度まで冷ました。溶媒を減圧下に除去した。フラッシュクロマトグラフィー（溶出液；20：1のCHCl₃：MeOH，0.5%TEA）を行い、減圧下で溶媒を除去してガラス質（218mg，62%）を得ることにより、所期の生成物を得た。酢酸エチル（1mL）に溶解した後、シュウ酸の酢酸エチル溶液（0.1M溶液0.426mL）を添加することによってシュウ酸塩を形成させた。得られたゴム質の上清をデカントし、そのゴム質を酢酸エチル（2mL×1）で洗浄した。そのゴム質をジエチルエーテルで摩砕して、より扱いやすい固体（185mg，57%）を得た。実施例６ 1-[3-メトキシ-4-(1-ピロリジニル)メチルベンジル]-2-[4-[2-(1-ピラゾリル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二塩酸塩の製造 A．3-メトキシ-4-(1-ピロリジニル)メチル安息香酸塩酸塩 3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]安息香酸メチル（実施例1のAの方法で、3-メトキシ-4-メチル安息香酸メチルを臭素化した後、ピロリジンで処理することによって製造）（11.56g，46.4mmol）を無水エタノール（95mL）中の水酸化ナトリウム（3.71g，92.7mmol，2.00等量）と混合した。72時間後、濃塩酸の添加により、その反応混合物をpHまで酸性にした。溶媒を減圧下に除去して、対応する酸塩酸塩を白色固体として得た（17.92g，99%）。 B．3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンズアミド 3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]安息香酸塩酸塩（15.93g，41.lmmol ）をジクロロメタン（200mL）に懸濁し、数滴のDMFを加えた。塩化オキサリル（ 676mg，58%）を滴下し、その添加が完了した後、3時間、反応を撹拌した。その反応を珪藻土のベッドを通して濾過し、溶媒を減圧下に除去した。残渣を過剰の濃水酸化アンモニウム（20mL）とTHF（40mL）で処理した。水層を塩化ナトリウムで飽和させた後、THF（4×50mL）で徹底的に抽出した。溶媒を減圧下に除去して所期の生成物を黄褐色固体として得た（11.2g，99%）。C．3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジルアミン 3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンズアミド（11.2g，47.8mmol）を乾燥THF（320mL）中の水素化アルミニウムリチウム（3.8g，100mmol，2.10等量）と混合した。その反応を、tlc（9：1のCHCl₃：MeOH，1%TEA）で出発アミドがすべて消費されるまで、加熱還流した。その反応混合物を室温まで冷ました後、水（5mL）をゆっくり加えた。15分後、水酸化ナトリウム水溶液（15%w/v溶液5mL ）を加え、次に水（15mL）をさらに加えた。10分後、珪藻土のパッドを通して反応混合物を濾過した。溶媒を減圧下に除去して、アミンを琥珀色の油状物として得た（7.95g，76％）。 D．N-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル-2-ニトロアニリン 2-フルオロニトロベンゼン（0.358mL，3.4mmol，1.0等量）、3-メトキシ-4-[( 1-ピロリジニル)メチル]ベンジルアミン（750mg，3.4mmol）および無水炭酸カリウム（471mg，3.4mmol，1.0等量）を乾燥THF（35mL）中で混合した後、周囲温度で48時間撹拌した。その反応混合物を珪藻土のベッドを通して濾過した後、溶媒を減圧下に除去した。その粗製油状物をフラッシュクロマトグラフィー（溶出液：20：1のCHCl₃：MeOH，0.5%TEA）で精製して、所期の生成物を明橙色油状物（6 76mg，58%）として得た。 E．N¹-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-1,2-ベンゼンジアミン無水エタノール（25mL）中のN-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-2-ニトロアニリン（1.6g，4.69mmol）の脱気した溶液にアダムス触媒（16 0mg，10重量%）を添加することにより、表題の化合物を製造した。雰囲気を水素で置換した後、ニトロ化合物がすべて消費されたことがtlc（9：1のCHCl₃：MeOH ，1%TEA）で決定されるまで、反応を周囲温度で激しく撹拌した。その反応混合物を珪藻土のべッドを通して濾過した後、溶媒を減圧下に除去することにより、ジアミンを黄褐色油状物として得た（1.46g，100%）。F．4-(2-ブロモエトキシ)安息香酸メチル 4-ヒドロキシ安息香酸メチル（5.0g，2.86mmol）を1,2−ジブロモエタン（35m L）および炭酸カリウム（6.8g，49.23mmol，1.5等量）と混合した後、18時間加熱還流した。その反応混合物を減圧下に濃縮し、残渣をエチルエーテル（500mL ）と水（200mL）に分配した。そのエーテルを2N水酸化ナトリウム（50mL ×5）で抽出した。溶媒を減圧下に除去して、所期の生成物を白色固体として得た（8.47g，99%）。 G．4-[2-(1-ピラゾリル)エトキシ安息香酸塩酸塩ピラゾール（788mg，11.6mmol，3.0等量）をTHF（10mL）中の水素化ナトリウム懸濁液（60%w/w懸濁液463mg，11.6mmol，3.0等量）に加えた。1時間後、そのようにして形成されたピラゾールのナトリウム塩の懸濁液を、乾燥THF（10mL）に溶解した4-(2-ブロモエトキシ)安息香酸メチル（1.0g，3.86mmol）と触媒量のヨウ化テトラブチルアンモニウムに加えた。その反応混合物を減圧下で濃縮した後、残渣を酢酸エチル（150mL）と2N水酸化ナトリウム（50mL）に分配した。水層を濃塩酸でpH３まで酸性にし、得られた固体を吸引濾過によって集め、風乾して、上記の酸を白色固体として得た（690mg，77%）。 H．N¹-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-N²-[4-[2-(1-ピラゾリル)エトキシ]ベンゾイル]-1,2-ベンゼンジアミン 3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]安息香酸塩酸塩（250mg,1.08mmol）をジクロロメタン（10mL）に懸濁し、DMFを1滴加えた。塩化オキサリル（0.197m L，2.26mmol，2.1等量）を滴下し、その添加が完了した後、2時間、その反応を撹拌した。その反応を珪藻土のベッドを通して濾過し、溶媒を減圧下に除去した。N¹-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル）メチル]ベンジル]-1,2-ベンゼンジアミン（上記E）と上述の酸塩化物から、実施例5のHと基本的に同じ方法に従って、表題の化合物を56%の収率で製造した。 I．1-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-2-[4-[2-(1-ピラゾリル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二塩酸塩 N¹-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-N²-[4-[2-(1-ピラゾリル)エトキシ]ベンゾイル]-1,2-ベンゼンジアミン（67mg，0.127mmol）を。o- キシレン（10mL）に溶解し、150℃で18時間加熱することにより、表題の化合物を製造した。反応を周囲温度に冷まし、溶媒を減圧下に除去した。非極性不純物を除去するために、30：1のCHCl₃：MeOH（0.5%TEA）を使って、残渣をシリカゲルのプラグに通した。残渣を調製用逆相HPLCで精製して、表題の化合物を二塩酸塩（11mg，15%）として得た。実施例７ 1-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-2-[4-[2-(2-オキソピロリジン-1-イル)エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・シュウ酸塩の製造 A．4-[2-(2-オキソピロリジン-1-イル)エトキシ]安息香酸 2-ピロリジノン（0.859mL，11.3mmol，2.6等量）をTHF（10mL）中の水素化ナトリウムの懸濁液（60%w/w懸濁液452mg，11.3mmol，2.6等量）に加えた。1時間後、そのようにして形成させた2-ピロリジノンのナトリウム塩の懸濁液を、乾燥 THF（10mL）に溶解した4-(2-ブロモエトキシ)安息香酸メチル（1.17g，4.52mmol ）と触媒量のヨウ化テトラブチルアンモニウムに加えた。その反応を18時間加熱還流した。その反応混合物を減圧下に濃縮した後、残渣を酢酸エチル（150mL）と2N水酸化ナトリウム（50mL）に分配した。水層を濃塩酸でpH３まで酸性にし、次いで溶媒を減圧下に除去した。得られた固体を酢酸エチルで摩砕して、上記の酸を白色固体として得た（523mg，46％）。 B．N¹-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-N²-[4-[2-(2-オキソピロリジン-1-イル)エトキシ]ベンゾイル]-1,2-ベンゼンジアミン乾燥ジクロロメタン（10mL）に懸濁した4-[2-(2-オキソピロリジン-1-イル)エトキシ]安息香酸に塩化オキサリル（0.184mL，2.1mmol，2.1等量）を加え、次に触媒量のDMFを加えた。1時間後、溶媒を減圧下に除去した。残渣を乾燥ジクロロメタン（9mL）に懸濁した後、乾燥ジクロロメタン（1mL）とピリジン（0.1821mL ，2.25mmol，2.25等量）に溶解したN¹-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル ]ベンジル]-1,2-ベンゼンジアミン（実施例6のEに従って製造）（292mg，0.94mm ol，0.94等量）に、tlc（9：1のCHCl₃：MeOH）でアニリンがすべて消費されるまで、0℃で少しずつ加えた。その反応混合物を周囲温度まで温めた後、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（10mL）の添加によってクエンチした。その反応混合物を酢酸エチル（50mL）で希釈した後、層を分離した。有機層を乾燥（MgSO₄）し、濾過し、次に減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（CHCl₃中、2〜10%MeOH，0.5％TEA）後に、上記のアミドが黄褐色泡状物（1 40mg，26%）として得られた。 C．1-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-2-[4-[2-(2-オキソピロリジン-1-イル)]エトキシ]フェニル]ベンズイミダゾール・二シュウ酸塩実施例5のIと基本的に同じ方法に従い、1,2-N-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-N'-[4-[2-[(2-オキソピロリジン-1-イル)エトキシ]ベンゾイル]フェニレンジアミンから、35%の収率で表題の化合物を製造した。 FDMS m/e=525（M＋H）実施例８ 1-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル)メチル]ベンジル]-2-フェニルベンズイミダゾール・二シュウ酸塩の製造乾燥ジクロロメタン（5mL）に溶解したN¹-[3-メトキシ-4-[(1-ピロリジニル) メチル]ベンジル]-1,2-ベンゼンジアミン（100mg，0.32mmol）に、ピリジン（0. 052mL，0.64mmol，2.0等量）を加えた。アニリンを塩化ベンゾイル（0.037mL，0 .32mmol，1.0等量）で、3回に分けて0℃で滴定した。その反応混合物を周囲温度に温め、酢酸エチル（35mL）で希釈した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（20mL ）で洗浄した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（20：1のCHCl₃：Me0H，0. 5%TEA）で精製して、中間体アミド（55mg，0.132mmol，41%）を得た。そのアミド（55mg，0.132mmol）をo-キシレン（1mL）に溶解した後、150℃で加熱して、その反応をtlc（9：1のCHCl₃：MeOH，1%TEA）で追跡した。アミドが消費されたら、反応を周囲温度に冷ました。溶媒を減圧下に除去した。フラッシュクロマトグラフィー（溶出液；20：1のCHCl₃：MeOH，0.5％TEA）でベンズイミダゾールをガラス質（22.2mg，43%）として得た後、酢酸エチル（1mL）に溶解してシュウ酸の酢酸エチル溶液（0.1M溶液0.558mL，1.0等量）を添加することにより、シュウ酸塩を形成させた。溶媒を減圧下に除去して、表題の塩を黄褐色のガラス質（27 mg，100％）として得た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｃ０７Ｄ 403/10 Ｃ０７Ｄ 403/10 403/12 403/12 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者デニー，マイケル・エルアメリカ合衆国46131インディアナ州フランクリン、イースト・アーミービル・ロード6867番 (72)発明者フィッシャー，マシュー・ジェイアメリカ合衆国46033インディアナ州カーメル、アーモン・コート4106番 (72)発明者フォグルソング，ロバート・ジェイアメリカ合衆国27712ノースカロライナ州ダーラム、ヘイゼン・コート６番 (72)発明者ハーパー，リチャード・ダブリューアメリカ合衆国46240インディアナ州インディアナポリス、シルバン・リッジ・ロード7310番 (72)発明者ジョンソン，メアリー・ジーアメリカ合衆国27712ノースカロライナ州ダーラム、ヘイゼン・コート３番 (72)発明者クリムコースキー，バレンタイン・ジェイアメリカ合衆国46033インディアナ州カーメル、キャメロット・レイン4504番 (72)発明者リン，ホ−シェンアメリカ合衆国46217インディアナ州インディアナポリス、トレベリアン・ウェイ 8128番 (72)発明者リンチ，マイケル・ピーアメリカ合衆国27615ノースカロライナ州ローリー、フラム・プレイス201番 (72)発明者マッコワン，ジェファーソン・アールアメリカ合衆国46208インディアナ州インディアナポリス、クレセント・ヒル・レイン2653番 (72)発明者ミラー，ショーン・シーアメリカ合衆国46060インディアナ州ノーブルズビル、ハーディン・オーク・ドライブ7359番 (72)発明者マラニー，ジェフリー・ティアメリカ合衆国46236インディアナ州インディアナポリス、ウェルカー・ドライブ 6153番 (72)発明者リチェット，マイケル・イーアメリカ合衆国46250インディアナ州インディアナポリス、バロン・コート5832番 (72)発明者サル，ダニエル・ジェイアメリカ合衆国46142インディアナ州グリーンウッド、レジャー・レイン376番 (72)発明者スミス，ジェラルド・エフアメリカ合衆国46217インディアナ州インディアナポリス、クイーンズウッド・コート825番 (72)発明者タケウチ，クミコアメリカ合衆国46268インディアナ州インディアナポリス、ロビンズロック・ドライブ6342番 (72)発明者ティンスリー，ジェニファー・エムアメリカ合衆国46151インディアナ州マーティンズビル、ステイト・ロード・39・ノース4542番 (72)発明者ワイリー，マイケル・アールアメリカ合衆国46268インディアナ州インディアナポリス、ラングウッド・ドライブ 7725番 (72)発明者ジャン，ミンシェンアメリカ合衆国07059ニュージャージー州ウォーレン、シューアマン・テラス31番

Claims

【特許請求の範囲】 1. 次の式Ｉの化合物（または薬学上許容し得るその塩）：［式中、Ｅは、ＣＨ、ＣＲ^e（式中、Ｒ^eはメチル、メトキシまたはハロである）であり；Ｒは、ハロ、メチル、エチル、ヒドロキシ、メトキシ、カルバモイル、アミノメチルおよびヒドロキシメチルから独立して選択されるベンズ環上の0、1または 2個の置換基を表し；Ｒ¹はＲ^1a、Ｒ^1bまたはＲ^1cであって、Ｒ^1aは−ＣＨ₂-Ｒ^r（ここにＲ^rは５−テトラゾリル、２−カルボキシピロリジン−１−イルまたは２−[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]ピロリジン−１− イルである）、２−カルボキシ−５−オキソピロリジン−１−イルまたは２−[[ (１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]−５−オキソピロリジン−１−イルであり；Ｒ^1bは−Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＳＲ^sＲ^tであり、ここにＸ¹は直接結合、メチレンまたはＯであって、ｓは１または２である；ただし、ｓが１である場合はＸ¹は直接結合であるものとし、さらに−(ＣＨ₂)_s−鎖は１または２個のメチルもしくはエチル置換基を持つか、trans−１,２−シクロヘキサンジイルの一部であってよいものとする；またＲ^sとＲ^tは独立して水素または(１−３Ｃ)アルキルであるか、ＮＲ^sＲ^t基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１ −ピラゾリル、１,２,４−トリアゾール−１−イル、またはベンジルアミノである；Ｒ^1cは−Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＲ^sＲ^tであり、ここにＸ¹は直接結合、メチレンまたはＯであって、ｓは１または2である；ただし、ｓが１である場合はＸ¹は直接結合であるものとし、さらに−(ＣＨ₂)_s−鎖は１または２個のメチルもしくはエチル置換基を持つか、trans−１,２−シクロヘキサンジイルの一部であってよいものとする；またＮＲ^sＲ^t基は２−オキソピロリジン-1-イル、２,５−ジオキソピロリジン−１−イル、２−オキソオキサゾリジン−３−イル、２−オキソイミダゾリジン−１−イル、３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル、２ −オキソピロリジン−３−イル、１−メチル−２−オキソピロリジン−３−イル、１−テトラゾリル、メチルスルホニルアミノまたはフェニルスルホニルアミノである；Ｒ²は、Ｒ^2a、Ｒ^2bまたはＲ^2cであって、Ｒ^2aは−Ｘ²−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^fであり、ここにＸ²は、直接結合、メチレンまたはＯであり；ｎは１、２または３であり；Ｒ^fは５−テトラゾリル、カルボキシ、[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニルまたはヒドロキシメチルであるか、（ｎが１であり、Ｘ²が直接結合であるという前提で）Ｒ^fは２−カルボキシピロリジン１−イル、２−[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]ピロリジン−１−イル、( カルボキシメチル)アミノ、[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニルメチル]アミノ、(４−カルボキシメチルイミダゾール−１−イル)アミノ、[4-[[(1-4C)アルコキシ]カルボニルメチル]イミダゾール−１−イル]アミノ、(４−カルボキシベンジル)アミノ、[４−[[(１−４Ｃ)アルコキシ]カルボニル]ベンジル]アミノ、(３ −アミノ−１，４−ジオキソ−４−ヒドロキシブチル)アミノまたは[３−アミノ −１,４−ジオキソ−[(１−４Ｃ)アルコキシ]ブチル]アミノである；Ｒ^2bは−Ｘ²−(ＣＨ₂)_m−ＮＲ^aＲ^bであって、ここにＸ²は直接結合、メチレン、ＯまたはＳであり；ｍは１、２、３、４または５である；ただしｍが１である場合は、Ｘ²は直接結合であるものとする；またＲ^aとＲ^bは独立して水素または( １−３Ｃ)アルキルであるか、Ｒ^aとＲ^bの一方が水素またはメチルであって他方がｔ−ブチル、ベンジルまたはピリジルメチルであるか、もしくはＮＲ^aＲ^b基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリルまたは１,２,４−トリアゾール−４−イルである；または、Ｒ^2bは−[Ｘ²−(ＣＨ₂)_n]_p−Ｎ(Ｒ^a)−ＣＯ−Ａであって、ここにＸ²は直接結合、メチレンまたはＯであり；ｎは１、２、３または４であり；ｐは０または１であり、Ｒ^aは水素またはメチルであり；−ＣＯ−Ａは天然または非天然のα− アミノアシル基であって、これは１またはそれ以上の薬学上許容しうる保護基をもってもよく、α−窒素がさらに置換されていてもよい；Ｒ^2cは水素である；または、Ｒ^2cは−ＮＲ^a−ＣＯ−(ＣＨ₂)_m−Ｒ^bまたは−Ｏ−ＣＨ₂−Ｒ^bであって、ここにｍは０または１であり、Ｒ^aは水素またはメチルであり、Ｒ^bは式XIIまたは式X IIIの環構造：（式中、ＧはＯ、Ｓ、ＮＨまたはＣＨ₂であり、Ｒ^cは水素またはメチルであり、ＬはＮＲ^fまたはＣＨ₂であって、Ｒ^fは水素またはメチルである）である；または、Ｒ^2cは−ＮＨＣＯＲ^g（式中、Ｒ^gはＯ、ＳおよびＮから選択される2つのヘテロ原子を持つ五員ヘテロ芳香族環であり、カルボニル基は環ヘテロ原子ともう一つの環炭素の間に位置する環炭素に結合している）である；または、Ｒ^2cは−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^h、−Ｏ−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^hまたは−ＮＨ−(ＣＨ₂)_n−Ｒ^h であって、ここにｎは０、１または２であり、Ｒ^hはシクロペンチル、シアノまたは−ＣＯＮＲⁱＲ^jである（式中、ＲⁱとＲ^jは独立して水素またはメチルであるか、ＮＲⁱＲ^j基がピロリジノ、ピペリジノまたはモルホリノである）；または、Ｒ^2cは−Ｘ²−(ＣＨ₂)_p−Ｒ^kまたは−Ｏ−ＣＨ₂−ＣＨ(ＣＨ₃)−Ｒ^kであって、ここにＸ²は直接結合、メチレンまたはＯであり、ｐは１、２または３である；ただしｐが１である場合、Ｘ²は直接結合であるものとする；またＲ^kは２− オキソピロリジン−１−イルまたはＮＨＣＯＲ^mである（式中、Ｒ^mは(１−３Ｃ) アルキル、フェニルまたはピリジルである）；または、Ｒ^2cは−ＮＨ−ＣＯ−ＮＲⁱＲ^jであって、ここにＲⁱとＲ^jは独立して水素またはメチルであるか、ＮＲⁱＲ^j基がピロリジノ、ピペリジノまたはモルホリノである；または、Ｒ^2cは−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^pＲ^qであって、ここにＲ^pとＲ^qは独立して水素、メチルまたはエチルであるか、ＮＲ^pＲ^q基がピロリジノ、ピペリジノまたはモルホリノである；または、Ｒ^2cは−ＮＨ−ＳＯ₂−Ｒ^rであって、ここにＲ^rは(１−３Ｃ)アルキルまたはフェニルである；ただし、Ｒ¹がＲ^1bであるか、Ｒ²がＲ^2bであるものとする］。 2. α−アミノアシル基−ＣＯ−Ａが、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、セリン、スレオニン、メチオニン、システイン、プロリン、アゼチジン−２−カルボン酸、ピペコリン酸、アスパラギン酸、アスパラギニン、グルタミン酸、グルタミン、リジン、アルギニンおよびヒスチジンから選択されるα−アミノ酸から誘導されるα−アミノアシル基（ここでアミノ基はｔ−ブトキシカルボニル保護基を持っていてよく；カルボキシ基はその（１−４Ｃ）アルキルエステルとして保護されていてよく；ヒドロキシ基はベンジル保護基を持っていてよく；チオール基はｔ−ブチル保護基を持っていてよい）であるか、もしくは α-アミノアシル基−ＣＯ−Ａが−ＣＯ−ＣＨ(Ｒ^b)−ＮＲ^fＲ^gとして表され、ここにＲ^bはグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、チロシン、セリン、スレオニン、メチオニン、システイン、アスパラギン酸、アスパラギニン、グルタミン酸、グルタミン、リジン、アルギニンおよびヒスチジンから選択されるα-アミノ酸から誘導されるα−アミノアシル基の側鎖（ここでアミノ基はｔ−ブトキシカルボニル保護基を持っていてよく；カルボキシ基はその（１−４Ｃ）アルキルエステルとして保護されていてよく；ヒドロキシ基はベンジル保護基を持っていてよく；チオール基はｔ−ブチル保護基を持っていてよい）であり、Ｒ^fおよびＲ^gは各々水素もしくはメチルであるか、または−ＮＲ^fＲ^gがピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノもしくは１,１−ジオキソチオモルホリン−４−イル基である、請求項1の化合物（またはその塩）。 3. 式Iの化合物が次の式Ｉaの化合物である請求項1の化合物（またはその塩）：［式中、ＥはＣＨまたはＣＲ^eであり、ここにＲ^eはメチル、メトキシまたはハロである；Ｒ¹は−Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＳＲ^sＲ^tであって、ここにＸ¹は直接結合、メチレンまたはＯであり、ｓは１または２である；ただしｓが１である場合、Ｘ¹は直接結合であるものとする；またＲ^sとＲ^tは独立して水素または(１−３Ｃ)アルキルであるか、ＮＲ^sＲ^t基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、１,２,４−トリアゾール−１−イル、またはベンジルアミノである；Ｒ²は水素または−Ｘ²−(ＣＨ₂)_m−ＮＲ^aＲ^bであって、ここにＸ²は、直接結合、メチレン、ＯまたはＳであり；ｍは１、２、３、４または５である；ただしｍが１である場合は、Ｘ²は直接結合であるものとする；またＲ^aとＲ^bは独立して水素または（１−３Ｃ）アルキルであるか、もしくはＮＲ^aＲ^b基がピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、Ｎ−(１,２, ４−トリアゾリル)または２−オキソピロリジン−１−イルである；Ｒ⁵は水素、ヒドロキシまたはメトキシである］。 4. −Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＲ^sＲ^tが−ＣＨ₂−ＮＲ^sＲ^t（ここにＮＲ^sＲ^tはピロリジノ、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、１,２,４−トリアゾール−４−イルまたはベンジルアミノである）または−Ｏ−(ＣＨ₂)₂−ＮＲ^sＲ^t（ここにＮＲ^s Ｒ^tはピロリジノである）である請求項1〜3のいずれかの化合物（またはその塩）。 5. −Ｘ¹−(ＣＨ₂)_s−ＮＲ^sＲ^tが−ＣＨ₂―ＮＲ^sＲ^tである請求項４の化合物（またはその塩）。 6. Ｒ²が−Ｏ−(ＣＨ₂)₂−ＮＲ^aＲ^b（式中、ＮＲ^aＲ^bはピロリジノ、１−ピラゾリルまたは２−オキソピロリジン−１−イルである）である請求項1および3 〜5のいずれかの化合物（またはその塩）。 7. Ｒ⁵がヒドロキシである請求項3〜6のいずれかの化合物（またはその塩）。 8. ハロがフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードであり、（１−２Ｃ）アルキル基がメチルまたはエチルであり、(１−３Ｃ)アルキル基がメチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルであり、(１−４Ｃ)アルキル基がメチル、エチル、プロピル、イソプロピルまたはブチルであり、(１−５Ｃ)アルキル基がメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチルまたはペンチルであり、(１−４Ｃ)アルコキシ基がメトキシ、エトキシ、イソプロポキシまたはt−ブトキシである請求項1〜7のいずれかの化合物（またはその塩）。 9. 薬学上許容し得る陰イオンを与える酸で作られる酸付加塩または薬学上許容し得る陰イオンを与える塩基で作られる塩である請求項1〜8のいずれかに記載の式Iの化合物の薬学上許容し得る塩。 10．上記請求項1〜9のいずれかに記載の式Iの化合物（またはその薬学上許容し得る塩）を薬学上許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と共に含む医薬製剤。 11．式IIの対応するアミド（式Ｉaの化合物については、式IIａの化合物）を、それを加熱することによって環化し；その後、官能基が保護基を用いて保護されている場合はその保護基を除去し；その後、式Ｉの化合物の薬学上許容し得る塩が必要な場合は、その式Ｉの化合物の塩基性または酸性型を、生理学上許容し得る対イオンを与える酸または塩基と反応させることにより、または他の任意の常法により、それを得る；（式中、E、R、R¹、R²およびR⁵は請求項1〜9のいずれかに定義された意義のいずれかをもつ）ことからなる上記請求項1〜9のいずれかに記載の式Iの化合物（またはその薬学上許容し得る塩）の製造法。 12．請求項1〜9のいずれかに記載の式Iのトロンビン阻害化合物の有効量を用いることを含んでなるトロンビン阻害法。