JPH09509943A - 抗血栓剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、式Ｉ： ［式中、Ｒ¹、ＸおよびＹは、明細書で定義した意味を有する］を有するＬ−アルギニンアルデヒド誘導体、さらにはまた、それらの化合物を含む医薬品製剤、並びにトロンビン阻害剤、凝固阻害剤および血栓塞栓障害薬としてのそれらの使用方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 抗血栓剤 本発明は、哺乳動物における有用な抗凝固剤であるトロンビン阻害剤に関する 。特に本発明は、高い抗凝固活性、および抗血栓活性を有するＬ−アルギニンア ルデヒド誘導体に関する。 血液凝固の過程、血栓形成は、トロンビンの形成をもたらす複雑なタンパク分 解カスケードがきっかけとなる。トロンビンは、血漿に可溶であるフィブリノー ゲンのＡα鎖およびＢβ鎖から活性化ペプチドをタンパク分解的に除去し、不溶 性のフィブリンの形成を開始させる。 抗凝固は、現在、ヘパリンおよびクマリンの投与により成されている。凝固お よび血栓形成の非経口による薬理学的制御は、ヘパリンの使用によるトロンビン の阻害に基づく。ヘパリンは、内因性抗トロンビンIII(トロンビンの主要な生理 学的阻害物質)の阻害作用を促進することにより、トロンビンに対して間接的に 作用する。抗トロンビンIIIのレベルは血漿中で異なり、また表面結合している トロンビンはこの間接的機構に耐性であるようなので、ヘパリンは無効な処置と なり得る。凝固アッセイは有効性および安全性と関連していると考えられるので 、ヘパリンレベルは凝固アッセイ(特に活性化部分トロンボプラスチン時間(ＡＰ ＴＴ)アッセイ)でモニターしなければならない。クマリンは、プロトロンビンお よびこの種の他のタンパクの合成における翻訳後のγ−カルボキシル化をブロッ クすることにより、トロンビンの生成を妨げる。それらの作用機構から、クマリ ンの効果は、投与後６−２４時間、徐々にしか現われない。さらに、クマリンは 選択的な抗凝固剤ではない。クマリンもまた凝固アッセイ(特にプロトロンビン 時間(ＰＴ)アッセイ)でモニターする必要がある。 近年、天然の基質と似た方法でタンパク分解酵素により認識される小さな合成 ペプチドへの関心が高まっている。Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe −Ｐro−Ａrg−Ｈ、およびＤ−ＭeＰhe−Ｐro−Ａrg−Ｈといったようなトリペ プチドアルデヒド［Ｂajuszら，Ｊ.Ｍed.Ｃhem.，３３，１７２９−１７３５（ １９９０）］は、トロンビンの強力な直接阻害を示す。多くの研究者が、薬剤を 開発しようと努力して、類似化合物を合成している［例えば、Ｓhumanら，Ｊ.Ｍ ed.Ｃhem. ，３６，３１４−３１９（１９９３）、さらにはまた欧州特許出願公 開番号第４７９４８９号、同第５４２５２５号および同第５３０１６７号］。 ヘパリンおよびクマリンは有効な抗凝固剤であり、薬物はまだ既知のトリペプ チドアルデヒドから出現していないが、この化合物群に対する有望性が存続して いるにもかかわらず、トロンビンに対して選択的に、また抗トロンビンIIIとは 無関係に作用し、投与後すぐに阻害作用を発揮し、また止血を持続するのに必要 とされる血餅の溶解を妨げない抗凝固剤の必要性が存在する。 本発明は、以下に定義する本発明の化合物が強力なトロンビン阻害剤であると いう発見に関する。 従って、本発明の主要な目的は、抗凝固剤として有用な強力なトロンビン阻害 剤である新規Ｌ−アルギニンアルデヒド誘導体を提供することである。 他の目的、特徴および利点は、以下の説明および請求の範囲から当業者に明ら かであろう。 本発明は、式： ｛式中、 Ｒ¹は水素であり； Ｘはプロリニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルであり； Ｙは基： ［式中、 Ｒはベンジル、フェニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル −ＣＨ₂−またはシクロヘキシル−ＣＨ₂−であり； Ｚは−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)_n−または単結合であり； Ｒ²はＣ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₁−Ｃ₂ペルフルオロアルキル、−(ＣＨ₂)_g−ＣＯ ＯＨ、Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ、(Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ)Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、シクロペ ンチル、シクロヘキシル、(Ｃ₅−Ｃ₆シクロアルキル)ＣＨ₂−、アミノ、モノ(Ｃ₁ −Ｃ₄)アルキルアミノ、ジ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルアミノ、非置換もしくは置換ア リール（ここで、アリールはフェニルまたはナフチルである）、非置換もしくは 置換ベンジル、(１個または２個のヘテロ原子を有し、これらのうち１個は窒素 であって、第２のヘテロ原子は硫黄、酸素および窒素から選択される)５員もし くは６員の非置換もしくは置換複素環、(１個の窒素原子または２個のヘテロ原 子を有し、これらのうち１個は窒素であって、第２のヘテロ原子は硫黄、酸素お よび窒素から選択される)５員もしくは６員の非置換もしくは置換複素環で置換 されたメチレン、または９員もしくは１０員の非置換もしくは置換縮合二環式複 素環であり； ｇは１、２または３であり；および ｎは１または２である］ である； ただし、Ｒがベンジル、フェニル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであ って、Ｚが−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−または単結合である場合、Ｒ²はＣ₁−Ｃ₆アルキル、 Ｃ₁−Ｃ₂ペルフルオロアルキルまたはＣ₁−Ｃ₆アルコキシ以外である｝ を有するトロンビン阻害化合物もしくは薬学上許容され得るそれらの塩；または 薬学上許容され得る該化合物もしくはそれらの塩の溶媒和物を提供する。 本発明の式Ｉの化合物の特定のサブグループは、 Ｒ¹が水素であり； Ｘがプロリニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルであり； Ｙが基： ［式中、 Ｒはベンジル、フェニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル −ＣＨ₂−またはシクロヘキシル−ＣＨ₂−であり； Ｚは−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)_n−または単結合であり； Ｒ²はＣ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₁−Ｃ₂ペルフルオロアルキル、Ｃ₁−Ｃ₆アルコキ シ、(Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ)Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、シクロペンチル、シクロヘキシル 、(Ｃ₅−Ｃ₆シクロアルキル)ＣＨ₂−、アミノ、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルアミノ 、ジ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルアミノ、非置換もしくは置換アリール（ここで、アリー ルはフェニルまたはナフチルである）、非置換もしくは置換ベンジル、(１個ま たは２個のヘテロ原子を有し、これらのうち１個は窒素であって、第２のヘテロ 原子は硫黄、酸素および窒素から選択される)５員もしくは６員の非置換もしく は置換複素環、(１個の窒素原子または２個のヘテロ原子を有し、これらのうち １個は窒素であって、第２のヘテロ原子は硫黄、酸素および窒素から選択される )５員もしくは６員の非置換もしくは置換複素環で置換されたメチレン、または ９員もしくは１０員の非置換もしくは置換縮合二環式複素環であり；および ｎは１または２である］ である（ただし、Ｒがベンジル、フェニル、シクロペンチルまたはシクロヘキシ ルであって、Ｚが−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−または単結合である場合、Ｒ²はＣ₁−Ｃ₆アル キル、Ｃ₁−Ｃ₂ペルフルオロアルキルまたはＣ₁−Ｃ₆アルコキシ以外である）式 Ｉの化合物もしくは薬学上許容され得るそれらの塩；または薬学上許容され得る 該化合物もしくはそれらの塩の溶媒和物からなる。 式Ｉの化合物に加えて、本発明は、式Ｉの化合物を、薬学上許容され得る担体 、希釈剤または賦形剤と共に含んでなる医薬品製剤を提供する。 本発明はまた、哺乳動物における凝固を防止する方法であって、処置を必要と する哺乳動物に式Ｉの化合物の凝固防止用量を投与することからなる方法も提供 する。 本発明はさらに、トロンビンを阻害する方法であって、処置を必要とする哺乳 動物に式Ｉの化合物のトロンビン阻害用量を投与することからなる方法を提供す る。 さらに、本発明は、血栓塞栓障害を治療する方法であって、治療を必要とする 哺乳動物に式Ｉの化合物の有効用量を投与することからなる方法を提供する。 本発明は、トロンビンの新規阻害剤、活性成分として該化合物を含む医薬組成 物、および静脈血栓症、肺塞栓症、動脈血栓症、特に心筋虚血、心筋梗塞並びに 脳血栓症、例えば、血管形成術並びに冠動脈バイパス手術、また炎症過程に関す る全身性組織傷害の後に起こるような全身凝固亢進状態並びに局所凝固亢進状態 といったような、血栓塞栓障害の予防および治療のための抗凝固剤としての該化 合物の使用に関する。 「アルキル」という用語は、それ自体で、または他の置換基の一部として、指 定された数の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状のアルキル基、例えば、メ チル、エチル、n−プロピル、イソプロピル、n−ブチル、t−ブチル、イソブチ ルおよびsec−ブチルを意味する。 「アルコキシ」という用語は、酸素原子により親部分に結合した、指定された 数の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状のアルキル基を意味する。「ハロ」 という用語は、クロロ、フルオロ、ブロモまたはヨードを意味する。 「ジ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノ」という用語は、基−Ｎ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)₂ （ここで、各々のアルキル基は独立して、指定された数の炭素原子を有する）を 意味する。 「ペルフルオロアルキル」という用語は、トリフルオロメチルおよびペンタフ ルオロエチルといったような、全ての有効原子価がフルオロ原子で置換されてい る、指定された数の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状のアルキル基を意味 する。 「５員または６員の複素環」という用語は、１個の窒素原子；１個の窒素原子 および１個の硫黄原子；１個の窒素原子および１個の酸素原子；または２個の窒 素原子を含む、安定な構造を与えるであろう、全ての５員または６員環を意味す る。複素環には、ピロリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チ アゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、ピラニル、ピリジニル、ピリミ ジニル、ピラジニルおよびオキサジニルが含まれる。 「９員または１０員の縮合二環式複素環」という用語は、先の５員または６員 環のいずれかがベンゼン環またはシクロヘキサン環に縮合している、安定な構造 を与えるであろう、全ての二環式基を意味する。これらの複素環には、インドリ ル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾピラゾリル、キノリ ニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリルおよびベンゾチアゾリルが含まれる 。 先の複素環は互変異性体形で存在し得る。そのような形は全て、本発明の範囲 内に含まれる。 基： は各々、プロリニルおよびアゼチジン−２−カルボニルと呼ばれ、また各々、Ｐ roおよびＡztと略記される。 Ｘのカルボニル官能基は、式Ｉに描かれているアミノ基に結合している。 先の複素環、フェニルおよびベンジルの芳香環は全て、置換されていないか、 またはハロ、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、カルボキシ 、アミノ(−ＮＨ₂)、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノ、ジ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)ア ミノ、−Ｎ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)₂、メルカプト、Ｃ₁−Ｃ₄アルキルチオ(−Ｓ(Ｏ)_p Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)、−ＮＨＳ(Ｏ)_p(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)、−ＮＨＣ(Ｏ)Ｃ₁−Ｃ₄ アルキル、−Ｓ(Ｏ)_pＮＨ₂、−Ｓ(Ｏ)_pＮＨ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)、および−Ｓ( Ｏ)_pＮ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)₂［ここで、ｐは１または２である］から独立して選 択される、安定な構造を与えるであろう、１つまたは２つの置換基で置換されて いる。 式Ｉおよび置換基Ｘにおける星印は、（Ｌ）であるキラル中心を示す。 さらに、ジアステレオマーがＹ置換基で存在して、該Ｙ置換基上の置換により 、さらなるジアステレオマーが存在し得る。本発明の化合物には、２つまたはそ れ以上のジアステレオマーの混合物、さらにはまた各々個々の異性体が含まれる 。 本発明の好ましい化合物には、 Ｒ²がＣ₁−Ｃ₆アルキル、アミノ、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノ、ジ(Ｃ₁− Ｃ₄アルキル)アミノ、または９員もしくは１０員の非置換もしくは一置換縮合二 環式複素環であり；および Ｘ、Ｒ、Ｒ¹およびＺは式Ｉに関して先に定義した通りである（ただし、Ｒが ベンジル、フェニル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであって、Ｚが−Ｃ (Ｃ＝Ｏ)−または単結合である場合、Ｒ²はＣ₁−Ｃ₆アルキル以外である）式Ｉ の化合物および薬学上許容され得るそれらの塩並びに溶媒和物が含まれる。 本発明の特に好ましい化合物の第一グループは、 Ｒ¹が水素であり； Ｘがプロリニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルであり； Ｒがベンジルまたはシクロヘキシル−ＣＨ₂−であり； Ｚが−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−であり； Ｒ²が１個の窒素原子を含む９員または１０員の非置換または一置換縮合二環 式複素環である（ここで、該置換基はＣ₁−Ｃ₄アルキル、アミノ、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄ アルキル)アミノ、ジ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノ、および−ＮＨＳＯ₂(Ｃ₁−Ｃ₄ アルキル)から選択される）； 式Ｉの化合物および薬学上許容され得るそれらの塩並びに溶媒和物である。 本発明の特に好ましい化合物の第二グループは、 Ｒ¹が水素であり； Ｘがプロリニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルであり； Ｚが−ＳＯ₂−であり； Ｒ²がＣ₁−Ｃ₆アルキル、アミノ、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノまたはジ(Ｃ₁ −Ｃ₄アルキル)アミノであり；および Ｒは式Ｉに関して先に定義した通りである； 式Ｉの化合物および薬学上許容され得るそれらの塩並びに溶媒和物である。 本発明の特に好ましい化合物の第三グループは、 Ｒ¹が水素であり； Ｘがプロリニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルであり； Ｚが単結合であり； Ｒ²が−(ＣＨ₂)_g−ＣＯＯＨであり； ｇが１、２または３であり(とりわけ、ｇは１であり)；および Ｒは式Ｉに関して先に定義した通りである； 式Ｉの化合物および薬学上許容され得るそれらの塩並びに溶媒和物からなる。こ れらの化合物は、カルボキシ基を欠く対応する化合物に比べて、思いがけなくも 、経口バイオアベイラビリティーを改善し、またＸa因子の阻害を増大した。 先に述べたように、本発明には、先の式Ｉにより定義した化合物の薬学上許容 され得る塩が含まれる。本発明の特定化合物は、１つまたはそれ以上の十分に塩 基性の官能基を有し得ることから、多くの無毒の無機および有機酸のいずれかと 反応して、薬学上許容され得る塩を形成する。酸付加塩を形成するのに一般に使 用される酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸等といったよう な無機酸、およびp−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、p−ブ ロモフェニルスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸等といっ たような有機酸である。従って、そのような薬学上許容され得る塩の例は、硫酸 塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩 、 リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢 酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イ ソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロ ン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩 、ブチン−１,４−二酸塩、ヘキシン−１,６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息 香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メト キシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル 酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ− ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパン スルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩 、マンデル酸塩等である。好ましい薬学上許容され得る酸付加塩は、塩酸、臭化 水素酸および硫酸といったような鉱酸を用いて形成される塩である。 先に述べたように、本発明には、式Ｉの化合物の溶媒和物および薬学上許容さ れ得るそれらの塩が含まれる。本発明の特定(particular)化合物または薬学上許 容され得るそれらの塩は、水または一般的な有機溶媒と溶媒和物を形成し得る。 そのような溶媒和物は、本発明の化合物の範囲内に含まれる。 式Ｉの化合物は、対応する式II： ［式中、グアニジノ基上のＰはアミノ保護基を示し、ＰＹは、Ｙに塩基性のＮＨ 部分が含まれる式Ｉの化合物に関しては、独立して選択されるアミノ保護基 Ｐ を有し得る基 Ｙを、またＹにカルボキシ残基が含まれる式Ｉの化合物に関して は、独立して選択されるカルボキシ保護基 Ｐを有し得る基Ｙを示す］ の化合物の保護基 Ｐを同時にまたは順次除去し；その後、式Ｉの化合物の塩を 必要とする場合は、薬学上許容され得る酸を用いて塩を形成することにより製造 する。例えば、アミノ保護基がベンジルオキシカルボニルであり、また酸保護基 が(もし存在するならば)ベンジルである式IIの化合物は、希エタノール性塩酸中 、炭素上パラジウム触媒で大気圧下に水素化分解することにより、対応する式Ｉ の化合物の塩酸塩に転換することができる。式IIの化合物はまた、式 ＰＹ(Ｃ＝ Ｏ)−Ｘ−Ａrg(Ｐ)−Ｈ［ここで、ＸはＰro(プロリニル)またはＡzt(アゼチジニ ル−２−カルボニル)である］によっても示される。 式Ｉの化合物は、既知のペプチド結合法により製造される。そのような方法の １つによれば、酸 ＰＹ−ＣＯＯＨ［式中、Ｙは式Ｉに関して定義した意味と同 じ意味を有し、またＰはアミノ保護基である］をカルボキシ保護プロリン(また は、アゼチジン−２−カルボキシエステル)と結合させて、ジペプチドを形成す る。Ｙにカルボキシ基が含まれる式Ｉの化合物に関しては、Ｐはまた、アミノ保 護基に加えて存在し得るカルボキシ保護基も示す。次いで、プロリン部分のカル ボキシ保護エステル基を除去(脱ブロッキングまたは脱エステル化)して、遊離酸 型のジペプチドをラクタム型のアルギニンと結合させる。先の反応順序を以下の 反応式１で説明する： ［式中、Ｐはアミノ保護基を示す］。 不活性溶媒または溶媒の混合物中、結合させたＡrg(Ｐ)ラクタム生成物（ｃ）を 水素化物還元剤、好ましくは水素化アルミニウムリチウムまたはトリ−tert−ブ トキシアルミノ水素化リチウムと反応させて、ラクタム環を還元し、式 ＰＹ(Ｃ ＝Ｏ)−Ｐro−Ａrg(Ｐ)−Ｈで示されるアルギニンアルデヒド型のトリペプチド を得る。 金属触媒での水素化のような当業者に知られている方法により、保護基を除去 する。 ラクタム型のアルギニンは、アミノ保護アルギニン［Ａrg−ＯＨ］の分子内結 合により得られる。例えば、式： ［ここで、Ｂocはt−ブチルオキシカルボニルであり、およびＣbzはベンジルオ キシカルボニルである］ で示されるＢoc−Ａrg(Ｃbz)ＯＨを、まず最初にクロロギ酸エステル、例えば、 クロロギ酸エチル〜クロロギ酸イソブチルで活性混合無水物のような活性エステ ル型に転換する。エステル形成は、Ｎ−メチルモルホリンのような第三級アミン の存在下に行う。トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミといったよ うな、さらなる、または他の第三級アミン塩基の添加して、内部アシル化を起こ し、以下に示すようなラクタム型のジアミノ保護アルギニンを得る。 先の反応式において示すようなＰＹ(Ｃ＝Ｏ)−Ｐro−ＯＨとの結合で使用する前 に、Ｂocまたは他のアミン保護基をトリフルオロ酢酸またはＨＣlで選択的に除 去して、必要な遊離アミノ基を得る。 ＰＹＣＯＯＨ化合物のプロリンエステルとの結合は、Ｙが式Ｉに関して先に定 義した通りである場合、まず最初にアミノ酸のアミノ基を保護することにより行 う。アミノ基の一時的な保護またはブロッキングに一般に使用される従来のアミ ノ保護基を使用する。 アミノ保護基とは、化合物上の他の官能基を反応させる間、アミノ官能基をブ ロックまたは保護するために一般に使用されるアミノ基の置換基を示す。そのよ うなアミノ保護基（Ｐ）の例には、ホルミル基、トリチル基、フタルイミド基、 トリクロロアセチル基、クロロアセチル、ブロモアセチルおよびヨードアセチル 基、ウレタン型保護基、例えば、ベンジルオキシカルボニル、t−ブトキシカル ボニル、４−フェニルベンジルオキシカルボニル、２−メチルベンジルオキシカ ルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、４−フルオロベンジルオキ シカルボニル、４−クロロベンジルオキシカルボニル、３−クロロベンジルオキ シカルボニル、２−クロロベンジルオキシカルボニル、２,４−ジクロロベンジ ルオキシカルボニル、４−ブロモベンジルオキシカルボニル、３−ブロモベンジ ルオキシカルボニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、４−シアノベンジ ルオキシカルボニル、２−(４−キセニル)イソプロポキシカルボニル、１,１− ジフェニルエチ−１−イルオキシカルボニル、１,１−ジフェニルプロピ−１− イルオキシカルボニル、２−フェニルプロピ−２−イルオキシカルボニル、２− (p−トルイル)プロピ−２−イルオキシカルボニル、シクロペンタニルオキシカ ルボニル、１−メチルシクロペンタニルオキシカルボニル、シクロヘキサニルオ キシカルボニル、１−メチルシクロヘキサニルオキシカルボニル、２−メチルシ クロヘキサニルオキシカルボニル、２−(４−トルイルスルホニル)エトキシカル ボニル、２−(メチルスルホニル)エトキシカルボニル、２−(トリフェニルホス フィノ)エトキシカルボニル、９−フルオロエニルメトキシカルボニル(「ＦＭＯ Ｃ」)、２−(トリメチルシリル)エトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル 、１−(トリメチルシリルメチル)プロペ−１−エニルオキシカルボニル、５−ベ ンゾイソキサリルメトキシカルボニル、４−アセトキシベンジルオキシカルボニ ル、２,２,２−トリクロロエトキシカルボニル、２−エチニル−２−プロポキシ カルボニル、シクロプロピルメトキシカルボニル、４−(デシルオキシ)ベンジル オキシカルボニル、イソボルニルオキシカルボニル、１−ピペリジルオキシカル ボニル等；ベンゾイルメチルスルホニル基、２−(ニトロ)フェニルスルフェニル 基、 ジフェニルホスフィン オキシド基等のアミノ保護基が含まれる。誘導体化され たアミノ基が、該分子の他の位置での後の反応条件に対して安定であり、また分 子の他の部分を分解することなく適当な時点で除去することができる限り、使用 するアミノ保護基の種類は重要ではない。好ましいアミノ保護基は、ベンジルオ キシカルボニル、アリルオキシカルボニル、t−ブトキシカルボニル、およびト リチル基である。セファロスポリン、ペニシリンおよびペプチドの技術で使用さ れる同様のアミノ保護基もまた、先の用語に包含される。先の用語により示され る基のさらなる例は、Ｊ.Ｗ.Ｂarton，「Ｐrotective Ｇroups in Ｏrganic Ｃh emistry」，Ｊ.Ｇ.Ｗ.ＭcＯmie編，Ｐlenum Ｐress，Ｎew Ｙork，Ｎ.Ｙ.，１９ ７３，第２章、およびＴ.Ｗ.Ｇreene，「Ｐrotective Ｇroups in Ｏrganic Ｓy nthesis」，Ｊohn Ｗiley and Ｓons，Ｎew Ｙork，Ｎ.Ｙ.，１９８１，第７章 に記載されている。関連用語「保護アミノ」は、先に論じたアミノ保護基で置換 されているアミノ基を定義する。 結合反応を行う際、プロリンに対するエステル保護基を使用するが、これはア ミノ保護基が無傷で残る条件により除去可能である。従って、アシル化酸 ＰＹ ＣＯＯＨのアミノ保護基は、後にアルギニンラクタム化合物と結合させて、（ｃ ）を形成する間、アミノ基の保護に適切な位置に残っている。 本明細書中で使用するカルボキシ保護エステル基は、反応が化合物の他の官能 基上で行なわれている間、カルボン酸基をブロックする、または保護するのに一 般に使用されるカルボン酸基のエステル誘導体の１つを示す。そのようなカルボ ン酸保護基の例には、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、ベンジル、４−ニトロベンジル、４− メトキシベンジル、３,４−ジメトキシベンジル、２,４−ジメトキシベンジル、 ２,４,６−トリメトキシベンジル、２,４,６−トリメチルベンジル、ペンタメチ ルベンジル、３,４−メチレンジオキシベンジル、ベンズヒドリル、４,４'−ジ メトキシベンズヒドリル、２,２',４,４'−テトラメトキシベンズヒドリル、t− ブチル、t−アミル、トリチル、４−メトキシトリチル、４,４'−ジメトキシト リチル、４,４',４"−トリメトキシトリチル、２−フェニルプロピ−２−イル、 トリメチルシリル、t−ブチルジメチルシリル、フェナシル、２,２,２−トリク ロロエチル、２−(トリメチルシリル)エチル、２−(ジ(n−ブチル)メチルシリル )エチル、p−トルエンスルホニルエチル、４−ニトロベンジルスルホニルエチル 、アリル、シンナミル、１−(トリメチルシリルメチル)−プロペ−１−エン−３ −イル、および同様の部分が含まれる。誘導体化されたカルボン酸が、該分子の 他の位置での後の反応条件に対して安定であり、また分子の他の部分を分解する ことなく適当な時点で除去することができる限り、使用するカルボキシ保護基の 種類は重要ではない。特に、カルボキシ保護された分子を、強い求核塩基または ラネーニッケルのような非常に活性化された金属触媒を使用する還元的条件に付 さないことが重要である(そのような厳しい除去条件は、以下に論じるアミノ保 護基を除去する場合にもまた際にも避けるべきである)。好ましいカルボキシ保 護基は、Ｃ₁−Ｃ₃アルキルおよびベンジルである。これらの基のさらなる例は、 Ｅ.Ｈaslam，「Ｐrotective Ｇroups in Ｏrganic Ｃhemistry」，Ｊ.Ｇ.Ｗ.Ｍc Ｏmie編，Ｐlenum Ｐress，Ｎew Ｙork，Ｎ.Ｙ.，１９７３，第５章、およびＴ. Ｗ.Ｇreene，「Ｐrotective Ｇroups in Ｏrganic Ｓynthesis」，Ｊohn Ｗiley and Ｓons，Ｎew Ｙork，Ｎ.Ｙ.，１９８１，第５章に見い出される。 Ｘがアゼチジニル(またはプロリニル)である式Ｉの化合物は、既知のペプチド 結合法により、同様の方法で製造される。そのような方法の１つによれば、以下 に示すように、環状ラクタム型のアルギニン（ｅ）を製造し、アミノ保護アゼチ ジン−２−カルボン酸（ｄ）と結合させて、ジペプチド（ｆ）を得る： ［ここで、Ｐはベンジルオキシカルボニル(Ｃbz)基、t−ブトキシカルボニル(Ｂ oc)、p−トルエンスルホニル等といったようなアミノ保護基を示す］。好ましく は、使用するアミノ保護基は、水素化または弱い酸(例えば、トリフルオロ酢酸) もしくは強酸(例えば、ＨＣl)での処理により除去可能である。他の適当なアミ ノ保護基の例は、「Ｐrotective Ｇroups in Ｏrganic Ｓynthesis」，第２版， Ｔ.Ｗ.ＧreeneおよびＰ.Ｇ.Ｍ.Ｗuts，第７章，３０９−４０５頁（１９９１） ，Ｊohn Wiley ＆ Ｓons,Ｉnc.出版に提供されている。Ｂocまたは他の適当な保 護基をアゼチジン環の窒素から除去した後、これを所望のアミノ酸アシル基でア シル化して、以下に示すトリペプチドを得る。 Ｘがアゼチジニル−２−カルボニルである本発明の化合物に関して説明および 記載したが、当業者は、これらの手順を使用して、Ｘがプロリニルである本発明 の化合物を得ることもできることを認識するであろう。 不活性溶媒または溶媒の混合物中、水素化物還元剤、好ましくは水素化アルミ ニウムリチウムまたはトリ−tert−ブトキシアルミノ水素化リチウムを用いて、 結合させたＡrg(Ｐ)ラクタム生成物（ｇ）を還元し、ラクタムを還元して、式Ｐ Ｙ(Ｃ＝Ｏ)−Ａzt−Ａrg(Ｐ)−Ｈ［ここで、Ｐはアミノ保護基を示す］で示され るアルギニンアルデヒド型のトリペプチドを得る。金属触媒での水素化のような 当業者に知られている手順により、保護基を除去する。保護基は、使用された保 護基により、Ｙ基から、またアルギナール基から同時にまたは順次除去すること ができる。 あるいはまた、本発明の化合物は、ＰＹＣＯＯＨ酸をカルボキシ保護２−アゼ チジン−カルボン酸と結合させることにより製造される。カルボキシをジペプチ ドとして脱保護した後、これを先に記載したようにして製造したラクタム型のア ミノ保護アルギニンと結合させる。次いで、トリペプチドを還元して、先に記載 したようなアミノ保護アルギナールトリペプチドを得る。 ＰＹＣＯＯＨ化合物の結合は、まず最初に該アミノ酸のアミノ基(および保護 を必要とする全ての他の官能基)を保護することにより行う。アミノ基の一時的 な保護またはブロッキングに一般に使用される従来のアミノ保護基を使用する。 そのような保護基の例は、先に記載されている。 上記結合反応は低温、好ましくは約−２０℃〜約１５℃の間の温度で行う。結 合反応は、不活性有機溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトア ミド、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、クロロホルム等の一般溶媒またはそ のような溶媒の混合物中で行う。通例、結合反応においてアシル化酸の活性エス テルを使用する場合は、無水条件を使用する。 本発明の化合物は、酸付加塩の形で最も良く単離される。先に述べた酸を用い て形成された式Ｉの化合物の塩は、抗血栓剤の投与のための、またこれらの薬剤 の製剤の製造のための薬学上許容され得る塩として有用である。他の酸付加塩を 製造して、該ペプチドの単離および精製に使用することができる。例えば、メタ ンスルホン酸、n−ブタンスルホン酸、p−トルエンスルホン酸およびナフタレン スルホン酸といったようなスルホン酸類を用いて形成される塩をそのように使用 することができる。 式Ｉの化合物を精製すると同時に、所望の安定な塩の形を製造するための好ま しい方法は、米国特許第５,２５０,６６０号に記載されている方法である。この 方法によれば、水性成分がpＨ２.５で硫酸または塩酸から成り、またアセトニト リルが有機成分であるＣ₁₈逆相クロマトグラフィーでの分取精製により、安定な 硫酸塩または塩酸塩が得られる。酸性の溶離液のpＨをヒドロキシル型の塩基性 陰イオン交換樹脂、例えば、Ｂio−Ｒad ＡＧ−１Ｘ８で約pＨ４〜約６の間に調 節する。pＨを調節した後、トリペプチド硫酸塩または塩酸塩の溶液を凍結乾燥 して、純粋な塩を乾燥粉末の形で得る。該工程の一例においては、粗製のＮ−エ チルスルホニル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−Ｐro−Ｌ−Ａrg−Ｈ 塩酸塩を水 に溶解して、その溶液をＶydac Ｃ₁₈ＲＰＨＰＬＣの５cm×５０cmのカラムにロ ードする。１０時間にわたる２−２０％のＢのグラジエント(Ａ＝０.０５％ Ｈ Ｃl；Ｂ＝アセトニトリル)を使用する。複数の画分を集めて、分析用ＲＰＨＰＬ Ｃにより決定された生成物含有画分をプールする。プールした画分のpＨをヒド ロキシド型のＡＧ−１Ｘ８樹脂(Ｂio−Ｒad，３３００ Ｒagatta Ｂlvd.，Ｒich mond，ＣＡ ９４８０４)でpＨ４.０−４.５に調節する。その溶液を濾過し、濾 液を凍結乾燥して、純粋なＤ−,Ｌ−,Ｌ−トリペプチドアルデヒドを塩酸塩の形 で得る。 Ｙ置換基のジアステレオマーの光学活性異性体もまた、本発明の一部と考えら れる。そのような光学活性異性体は、上記手順により、それらの各々の光学活性 前駆体から、またはラセミ混合物を分割することにより、製造することができる 。この分割は、キラル試薬を用いて誘導体化した後、クロマトグラフィーにかけ るか、または繰返し結晶化することにより行うことができる。標準的な方法によ るキラル補助物の除去は、実質的には、本発明化合物またはそれらの前駆体の光 学的に純粋な異性体を与える。分割に関するさらなる詳細は、Ｊacquesら，Ｅna ntiomers，Ｒacemates，and Ｒesolutions ，Ｊohn Wiley ＆ Ｓons，１９８１で 得ることができる。 本発明の化合物の合成における最初の出発物質として使用する化合物は周知で あり、市販されていない範囲まで、当業者により一般に使用される標準的な方法 によって容易に合成される。 以下の実施例は、本発明をさらに説明するために提供されるものであって、本 発明を限定しようとするものではない。 実施例で使用する分析用ＨＰＬＣ法は、以下の通りであった： 方法 １ ０.４６cm×１０cmのＶydac Ｃ₁₈逆相カラムを使用するＷaters ６ ００Ｅ。Ａ＝０.１％(ｖ／ｖ)ＴＦＡを含む水およびＢ＝０.１％(ｖ／ｖ)ＴＦＡ を含むアセトニトリルのグラジエントを使用し、２１４nＭでＬＤＣによって、 クロマトグラムをモニターした。 方法 ２ ０.４６cm×１０.０cmのＶydac Ｃ₁₈逆相カラム測定を使用するＰha rmacia ＦＰＬＣ。Ａ＝０.１％(ｖ／ｖ)ＴＦＡを含む水またはＢ＝０.１％(ｖ／ ｖ)ＴＦＡを含むアセトニトリルのいずれかのグラジエントを使用し、２１４ nＭでＰharmacia ＵＶ−Ｍによって、モニターを行った。 本明細書中で使用する略語は、以下の意味を有する。 アミノ酸：Ａrg＝アルギニン、Ｐro＝プロリン、Ｐhe＝フェニルアラニン、Ａ zt＝アゼチジン−２−カルボン酸。 Ａc＝アセチル。 Ｂoc＝t−ブチルオキシカルボニル(ｔ−ブトキシカルボニル)。 ＢzlまたはＢn＝ベンジル。 Ｃbz＝ベンジルオキシカルボニル。 Ｃha＝シクロヘキシルアラニル。 Ｃhg＝シクロヘキシルグリシニル。 ＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミド。 ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド。 ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド。 ＥtＯＡc＝酢酸エチル。 Ｅt₂Ｏ＝ジエチルエーテル。 ＥtＯＨ＝エタノール。 ＦＡＢ−ＭＳ＝高速原子衝撃質量スペクトル。 ＦＤ−ＭＳ＝電界脱離質量スペクトル。 ＨＯＢＴ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物。 ＨＰＬＣ＝高性能液体クロマトグラフィー。 ＭＯＣ＝メトキシカルボニル。 ＮＭＩ＝Ｎ−メチルインドリル−２−カルボニル。 Ｐh＝フェニル。 Ｐhg＝フェニルグリシニル。 ＩＲ＝赤外スペクトル。 ＬＡＨ＝水素化アルミニウムリチウム。 ＮＭＲ＝核磁気共鳴。 ＲＰＨＰＬＣ＝逆相高性能液体クロマトグラフィー。 ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸。 ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン。 ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー。 別途記載の無い限り、pＨ調節および後処理は、酸または塩基の水溶液を用い る。０.１％水性(ｖ／ｖ)ＨＣl(実施例では「Ａ」と示す)およびアセトニトリル (実施例では「Ｂ」と示す)を使用して、ＲＰＨＰＬＣを行う。ＡおよびＢの混合 物はｖ：ｖである。¹Ｈ−ＮＭＲを示す場合には、その反応で得られた生成物を プロトンＮＭＲにより特性決定して、所望の化合物が得られたことを確認した。 実施例 １ Ｎ−(１−メチルインドリル−２−カルボニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）Ｂoc−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl ０℃の、ジクロロメタン(６００ml)中のＢoc−Ｄ−Ｐhe−ＯＨ(８９.１ｇ、３ ３６mmol)、Ｐro−ＯＢzl・ＨＣl(８１.２ｇ、３３６mmol)、ＨＯＢＴ(５０ｇ、 ３７０mmol)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(１７６ml、１,００８mm ol)の溶液に、１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミド ・ＨＣl(７１ｇ、３７０mmol)を加えた。１８時間撹拌した後、その混合物をジ エチルエーテル(１Ｌ)で希釈して、１Ｎ クエン酸(２５０ml)で３回洗浄し、水( ２５０ml)で１回洗浄し、飽和水性ＮaＨＣＯ₃(２５０ml)で３回洗浄し、また飽 和水性ＮaＣl(２５０ml)で１回洗浄した。有機相を乾燥し(Ｎa₂ＳＯ₄)、濾過し 、減圧下に濃縮して、淡黄色の泡状物質１４０ｇ(９２.５％)を得た。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４５２（Ｍ⁺）。¹ Ｈ ＮＭＲ。 Ｂ）ＴＦＡ・Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl ０℃の、ジクロロメタン(５０ml)中のＢoc−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl(６８ｇ 、１５０mmol)の撹拌溶液に、アニソール(２０ml)を加えた後、トリフルオロ酢 酸(４００ml)を加えた。３時間撹拌した後、溶媒を減圧下に蒸発させ、粘稠な油 状残 留物をジエチルエーテル(１.５Ｌ)に溶解して、冷蔵した(７２時間)。白色の沈 殿を濾過し、ジエチルエーテル(３００ml)で洗浄し、乾燥して、白色の粉末状物 質５９.４ｇ(８５％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 Ｃ）ＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl 無水テトラヒドロフラン(４５ml)中のＮ−メチルインドール−２−カルボン酸 (２.６ｇ、１４.９mmol)の溶液に、ペンタフルオロフェノール(３ｇ、１６.５mm ol)を加えた後、１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミ ド(３.２ｇ、１６.５mmol)を加えた。その混合物を還流温度で３.５時間撹拌し た後、室温まで冷却した。次いで、この混合物に、テトラヒドロフラン(２５ml) 中のＴＦＡ・Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl(７ｇ、１４.９mmol)およびＮ,Ｎ−ジイソ プロピルエチルアミン(４ｇ、３０mmol)の溶液を加えた。さらに２時間撹拌した 後、溶媒を減圧下に除去して、残留物を酢酸エチル(５００ml)に溶解し、次いで 、０.１Ｎ 水性ＮaＨＳＯ₄(２５０ml)で３回洗浄し、また１Ｎ 水性Ｋ₂ＣＯ₃(２ ５０ml)で３回洗浄した。有機相を乾燥し(Ｎa₂ＳＯ₄)、濾過し、減圧下に濃縮し て、非晶質の固形物質(ペンタフルオロフェノールが混入した、所望の生成物の 混合物)６.５ｇを得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ５０９（Ｍ⁺）。 Ｄ）ＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＨ p−ジオキサン(１５０ml)中のＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl(８.８ｇ、１ ７.３mmol)の撹拌溶液に、水(７５ml)中のＬiＯＨ・Ｈ₂Ｏ(３.６ｇ、８６.３mmo l)の溶液を加えた。４時間撹拌した後、その溶液の体積を減圧下に約５０mlまで 減らして、その溶液を１Ｎ ＮaＯＨ(１０ml)で希釈した。水相をジエチルエーテ ルで３回洗浄した後、５Ｎ ＨＣlでpＨ ２まで酸性とし、次いで、酢酸エチルで ３回抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を飽和水性ＮaＣl(２００ml)で洗浄し 、 乾燥し(ＭgＳＯ₄)、濾過し、濃縮して、白色の固形物質５.４ｇ(７５％)を得た 。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４１９（Ｍ⁺）。 Ｅ）Ｂoc−Ａrg(Ｃbz)−ＯＨ ３ツ頚フラスコ中、Ｂoc−Ａrg(ＨＣl)−ＯＨ(８２.１ｇ、２５０mmol)を５Ｎ ＮaＯＨ(２４０ml)に溶解した。その反応混合物を−５℃まで冷却して、クロロ ギ酸ベンジル(１４３ml、１.０mol)を滴加する間(５５分)、５Ｎ ＮaＯＨ(２５ ０ml)を用いて、そのpＨを１３.２−１３.５で維持した。その反応混合物を−５ ℃でさらに１時間撹拌して、水(１００ml)およびジエチルエーテル(５００ml)で 希釈した。水相を分離して、ジエチルエーテル(５００ml)で２回抽出した。次い で、その水相を３Ｎ Ｈ₂ＳＯ₄(５６０ml)でpＨ３.０まで酸性として、酢酸エチ ル(５５０ml)で抽出した。その水相を分離して、酢酸エチルで１回抽出した。合 わせた酢酸エチル相を水で洗浄し、乾燥し(ＭgＳＯ₄)、減圧下に濃縮して、白色 の固形物質６６.１ｇ(６５％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ４０８（Ｍ⁺）。 Ｆ）Ｂoc−Ａrg(Ｃbz)−ラクタム Ｂoc−Ａrg(Ｃbz)−ＯＨ(６６.０ｇ、０.１６２mol)をテトラヒドロフラン(２ ３０ml)に溶解して、−１０℃まで冷却した。この溶液に、Ｎ−メチルモルホリ ン(１８.７ml、０.１７mol)を加えた後、クロロギ酸イソブチル(２２.５ml、０. １７mol)を加えた。−１０℃で５分撹拌した後、トリエチルアミン(２３.５ml、 ０.１７mol)を加えた。−１０℃でさらに１時間後、その混合物を室温まで温め て、室温で１時間撹拌し続けた。次いで、その反応混合物を氷水１Ｌに注ぎ入れ て、その結果得られた沈殿を濾過し、冷水で洗浄して、減圧下に乾燥した。生成 物を酢酸エチルから結晶化して、白色の固形物質３８ｇ(６０％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ３９１（ＭＨ⁺）。 Ｇ）２ＨＣl・Ａrg(Ｃbz)−ラクタム −１０℃の、ジクロロメタン(３Ｌ)に溶解したＢoc−Ａrg(Ｃbz)−ラクタム( ６４１ｇ、１.６４mol)の溶液に、ＨＣl(ｇ)飽和酢酸エチル(７.２Ｌ)の溶液を ３０分かけて滴加した。−１０℃で１時間後、冷浴を取り外して、その溶液を３ 時間かけて室温まで温めた。ジエチルエーテル(１２Ｌ)を加えて、その結果得ら れた沈殿を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、減圧下に乾燥して、５８０ｇ( ９７％)を得た。 ＦＤ−ＭＳ ２９１(ＭＨ⁺)。 Ｈ）ＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg(Ｃbz)−ラクタム フラスコ１では、ＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＨ(５.３ｇ、１２.５mmol)をジ メチルホルムアミド(６０ml)に溶解し、−１５℃まで冷却して、Ｎ−メチルモル ホリン(１.３ｇ、１２.５mmol)を加えた後、クロロギ酸イソブチル(１.７ｇ、１ ２.５mmol)を加えた。その反応混合物を−１５℃で１０分間撹拌した。 フラスコ２では、２ＨＣl・Ａrg(Ｃbz)−ラクタム(４.５ｇ、１２.５mmol)を ジメチルホルムアミド(６０ml)に溶解し、０℃まで冷却して、Ｎ,Ｎ−ジイソプ ロピルエチルアミン(３.２ｇ、２５mmol)を加えた。 フラスコ２の内容物をフラスコ１に一度に加えた後、冷浴を取り外して、その 反応混合物を徐々に室温まで温めた(２４時間)。次いで、飽和水性ＮaＨＣＯ₃( １００ml)を加えて、溶媒を減圧下に除去した。残留物を酢酸エチルと水との間 で分配して、相を分離した。有機相を０.０１Ｎ ＨＣlで２回洗浄し、飽和ＮaＨ ＣＯ₃で２回洗浄し、またブラインで１回洗浄した。有機相を乾燥して(Ｎa₂ＳＯ₄ )、濾液を減圧下に濃縮した。残留物を、９５：５の酢酸エチル：アセトニトリ ルで溶出する、シリカゲルでのクロマトグラフィーにかけた後、生成物を含む画 分(ＴＬＣにより判定した)を合わせ、濃縮して、淡黄色の泡状物質５ｇ(５８％) を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ６９１（Ｍ⁺）。 Ｃ₃₈Ｈ₄₁Ｎ₇Ｏ₆に関する分析： 計算値 ： Ｃ ６５.９８， Ｈ ５.９７， Ｎ １４.１７； 実測値 ： Ｃ ６６.２８， Ｈ ６.１１， Ｎ １３.９４。 Ｉ）ＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl −７８℃の、テトラヒドロフラン(６０ml)中のＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg (Ｃbz)−ラクタム(４.８ｇ、６.９mmol)の撹拌溶液に、テトラヒドロフラン中の １Ｎ 水素化アルミニウムリチウム(４.８ml、４.８mmol)の溶液を徐々に加えた 。３０分後、その反応混合物を、冷たい１Ｎ ＨＣl(１０ml)およびテトラヒドロ フラン(２５ml)の撹拌溶液に注ぎ入れた。次いで、その溶液を飽和水性ＮaＣl( ５０ml)で希釈して、酢酸エチル(１００ml)で２回抽出した。合わせた酢酸エチ ル抽出物を乾燥し(ＭgＳＯ₄)、濾過し、濃縮して、黄色の泡状物質５.４ｇを得 た。 次いで、その泡状物質をエタノール(７５ml)および水(２５ml)に溶解して、こ の溶液を、エタノール(７５ml)、水(２５ml)および１Ｎ ＨＣl(１０ml)の撹拌溶 液に加えた。次いで、この撹拌溶液に、５％ 炭素上のＰd(２.４ｇ)を加えた。 次いで、その溶液にＨ₂を１.５時間通気した後、その反応物をＮ₂でフラッシュ して、ケイ藻土パッドで濾過した。エタノールを減圧下に３５℃で除去した後、 残留物を水(２５ml)に再び溶解した。その水溶液のpＨをＢio Ｒad ＡＧ−１Ｘ ８イオン交換樹脂(塩基性型)で４.１に調節し、濾過し、凍結乾燥して、綿毛状 の淡黄色の固形物質３.４ｇを得た。次いで、その生成物をＲＰＨＰＬＣ(８０／ ２０(Ａ／Ｂ)、８０分；６５／３５(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、３２０分；３８０分 まで保持する、０／１００(Ａ／Ｂ)まで４４０分、５００分まで保持する)によ り精製して、純粋なＮＭＩ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物１.９７ ｇ(７３％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５６０（ＭＨ⁺）。 Ｃ₃₀Ｈ₃₇Ｎ₇Ｏ₄・Ｈ₂Ｏ・１.２ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５７.９８， Ｈ ６.５２， Ｎ １５.７８； 実測値 ： Ｃ ５８.２５， Ｈ ６.６１， Ｎ １５.３３。 実施例 ２ Ｎ−(イソキノリニル−２−カルボニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ｎ−（イソキノリン−２−カルボニル）−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｃ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同 じ方法により、Ｎ−メチルインドール−２−カルボン酸の代わりにイソキノリン −２−カルボン酸を使用して、Ｎ−(イソキノリン−２−カルボニル)−Ｄ−Ｐhe −Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl ２.２ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９０／１０(Ａ／ Ｂ)、９０分；７０／３０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、３９０分；０／１００(Ａ／Ｂ )まで傾斜する、４５０分；５１０分まで保持する)により、Ｎ−(イソキノリン −２−カルボニル)−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５５８（ＭＨ⁺）。 Ｃ₃₀Ｈ₃₅Ｎ₇Ｏ₄・１.１ＨＣl・０.５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５９.３９， Ｈ ６.１６， Ｎ １６.１６， Ｃl ６.４３； 実測値 ： Ｃ ５９.６２， Ｈ ５.９８， Ｎ １６.１１， Ｃl ６.３８。 実施例 ３ Ｎ−（ニコチノイル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ｎ−ニコチノイル−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｃ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同 じ方法により、Ｎ−メチルインドール−２−カルボン酸の代わりにニコチン酸を 使用して、Ｎ−ニコチノイル−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物２.８ ｇを製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５０８（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₆Ｈ₃₃Ｎ₇Ｏ₄・１.３ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５４.５０， Ｈ ６.３９， Ｎ １７.１１； 実測値 ： Ｃ ５４.８５， Ｈ ６.１４， Ｎ １６.７４。 実施例 ４ Ｎ−(３−ピリジルアセチル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 二塩酸塩の製造 Ｎ−(α−(３−ピリジル)アセチル)−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・２ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｃ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同 じ方法により、Ｎ−メチルインドール−２−カルボン酸の代わりにα−(３−ピ リジル)酢酸を使用して、Ｎ−(α−(３−ピリジル)アセチル)−Ｄ−Ｐhe−Ｐro −Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物２.２ｇを製造した。また、−７８℃でＬＡＨという よりはむしろ−２３℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを使用して、トリペプチドアル ギニンラクタムの還元を行った。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５２３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₇Ｈ₃₅Ｎ₇Ｏ₄・２.４ＨＣl・３.５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４８.２５， Ｈ ６.６６， Ｎ １４.５９， Ｃl １２.６６； 実測値 ： Ｃ ４８.６０， Ｈ ６.３４， Ｎ １４.３２， Ｃl １２.８６。 実施例 ５ Ｎ−(１−メチルインドリル−２−カルボニル)−Ｄ− シクロヘキシルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＮＭＩ−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ａ、１−Ｂ、１−Ｃ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに 記載した方法と同じ方法により、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe−ＯＨの代わりにＢoc−Ｄ−Ｃ ha−ＯＨを使用して、ＮＭＩ−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物２.１ ４ｇを製造した。また、−７８℃でＬＡＨというよりはむしろ−２３℃でＬiＡl (Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを用いて、トリペプチドアルギニンラクタムを還元した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５６６（ＭＨ⁺）。 Ｃ₃₀Ｈ₄₃Ｎ₇Ｏ₄・１.２ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５９.１２， Ｈ ７.３１， Ｎ １６.０９， Ｃl ６.９８； 実測値 ： Ｃ ５９.１７， Ｈ ７.０４， Ｎ １５.８８， Ｃl ６.９５。 実施例 ６ Ｎ−(イソキノリニル−２−カルボニル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル− Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ｎ−(イソキノリニル−２−カルボニル)−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １に記載した方法と同じ方法により、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe−Ｏ Ｈの代わりにＢoc−Ｄ−Ｃha−ＯＨを使用して、またＮ−メチルインドール−２ −カルボン酸の代わりにイソキノリン−２−カルボン酸を使用して、Ｎ−(イソ キノリン−２−カルボニル)−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物３.２ｇ を製造した。また、−７８℃でＬＡＨというよりはむしろ−２３℃でＬiＡl(Ｏ −t−Ｂu)₃Ｈを用いて、トリペプチドアルギニンラクタムを還元した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５６５（ＭＨ⁺）。 Ｃ₃₀Ｈ₄₁Ｎ₇Ｏ₄・１.３ＨＣl・１.１Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５７.１１， Ｈ ７.１１， Ｎ １５.５４， Ｃl ７.３１； 実測値 ： Ｃ ５７.０４， Ｈ ６.７４， Ｎ １５.３６， Ｃl ６.９３。 実施例 ７ Ｎ−(メチルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）ＭeＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl ０℃の、テトラヒドロフラン(１００ml)中のＴＦＡ・Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl (１０ｇ、２１.４mmol)の撹拌溶液に、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(１ ５ml、８５mmol)を加えた後、塩化メタンスルホニル(２ml、２４mmol)を加えた 。冷浴を取り外して、その反応物を徐々に室温まで温めた。２４時間撹拌した後 、溶媒を減圧下に除去して、残留物を酢酸エチル(２００ml)に溶解した。その酢 酸エチル溶液を１Ｎ クエン酸(１００ml)で２回洗浄し、水(１００ml)で１回洗 浄し、飽和水性ＮaＨＣＯ₃(１００ml)で２回洗浄し、またブライン(１００ml)で １回洗浄した。次いで、その有機溶液をＭgＳＯ₄で乾燥し、濾過して、濃縮した 。その結果得られた泡状物質を、１：１のヘキサン／酢酸エチルで溶出する、シ リカゲルでのクロマトグラフィーにより精製した。ＴＬＣにより判定した、生成 物を含む画分を合わせ、濃縮して、オフホワイト色の泡状物質７.２ｇ(７９％) を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４３０（Ｍ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₅Ｓに関する分析： 計算値 ： Ｃ ６１.３８， Ｈ ６.０９， Ｎ ６.５１； 実測値 ： Ｃ ６１.６１， Ｈ ６.０１， Ｎ ６.４４。 Ｂ）ＭeＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同じ方法に より、ＭeＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物３１０mgをＭeＳＯ₂ −Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzlから製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、６ ０／４０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、３６０分)により、ＭeＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro −Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４８１（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₁Ｈ₃₂Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４７.１４， Ｈ ６.５９， Ｎ １５.７１； 実測値 ： Ｃ ４７.３３， Ｈ ６.４９， Ｎ １５.６６。 実施例 ８ Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にＥtＳＯ₂Ｃlを使用して、ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和 物０.５ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、３０分；８０／２０( Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２７０分)により、ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４９５（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・２ＨＣl・１.５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４４.５６， Ｈ ６.３７， Ｎ １４.１７； 実測値 ： Ｃ ４４.７３， Ｈ ６.４１， Ｎ １４.０８。 実施例 ９ Ｎ−(n−プロピルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 n−Ｐr−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にn−Ｐr−ＳＯ₂Ｃlを使用して、n−Ｐr−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ ＨＣl 水和物０.４７ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、６０／４ ０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、n−Ｐr−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro− Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５０９（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣl・１.５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４８.２９， Ｈ ７.０５， Ｎ １４.６９； 実測値 ： Ｃ ４８.００， Ｈ ６.７１， Ｎ １４.５４。 実施例 １０ Ｎ−(n−ブチルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 n−Ｂu−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にn−Ｂu−ＳＯ₂Ｃlを使用して、n−Ｂu−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ ＨＣl ０.９４ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、６０／４０(Ａ ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、n−Ｂu−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg −Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５２３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₄Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５１.５６， Ｈ ７.０３， Ｎ １５.０３； 実測値 ： Ｃ ５１.６５， Ｈ ７.２２， Ｎ １４.７９。 実施例 １１ Ｎ−(イソプロピルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 i−Ｐr−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にi−Ｐr−ＳＯ₂Ｃlを使用して、i−Ｐr−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ ＨＣl 水和物１ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、６０／４０(Ａ ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、i−Ｐr−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg −Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５０９（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₃₇Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣl・１.２５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４８.６７， Ｈ ７.０１， Ｎ １４.８０； 実測値 ： Ｃ ４８.８３， Ｈ ６.８５， Ｎ １４.９１。 実施例 １２ Ｎ−(ジメチルアミノスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ｍe₂ＮＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にＭe₂ＮＳＯ₂Ｃlを使用して、Ｍe₂ＮＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物１.１ｇを製造した。また、−７８℃でＬＡＨというよりはむしろ−２３ ℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを用いて、トリペプチドアルギニンラクタムを還元 した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、６０／４０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２ ４０分)により、Ｍe₂ＮＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５１０（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₃₅Ｎ₇Ｏ₅Ｓ・ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４４.２７， Ｈ ６.５７， Ｎ １６.０８， Ｃl １１.２８； 実測値 ： Ｃ ４４.５５， Ｈ ５.８９， Ｎ １６.０５， Ｃl １０.８２。 実施例 １３ Ｎ−(フェニルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＰhＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にＰhＳＯ₂Ｃlを使用して、ＰhＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 二水 和物２.３ｇを製造した。また、−７８℃でＬＡＨというよりはむしろ−２３℃ でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを用いて、トリペプチドアルギニンラクタムを還元し た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５４３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₆Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・１.２ＨＣl・２.１Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５０.０１， Ｈ ６.３９， Ｎ １３.４６， Ｃl ６.８１； 実測値 ： Ｃ ４９.８８， Ｈ ６.１６， Ｎ １３.１０， Ｃl ６.６３。 実施例 １４ Ｎ−(２,４−ジフルオロフェニルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ２,４−Ｆ−ＰhＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に２,４−ジフルオロフェニル−ＳＯ₂Ｃlを使用して、２,４−ジフルオロフェニ ル-ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物０.９４ｇを製造した。ま た、−７８℃でＬＡＨというよりはむしろ−２３℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを 用いて、トリペプチドアルギニンラクタムを還元した。ＲＰＨＰＬＣ(９５／５( Ａ／Ｂ)、７０／３０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、２,４−Ｆ−Ｐh ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５７９（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₆Ｈ₃₃Ｆ₂Ｎ₆Ｏ₅Ｓに関する正確な質量： 計算値 ： ５７９.２２０１２２； 実測値 ： ５７９.２１８９００。 Ｃ₂₆Ｈ₃₂Ｆ₂Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・１.５ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４７.９５， Ｈ ５.４９， Ｎ １２.９０； 実測値 ： Ｃ ４７.９２， Ｈ ５.１９， Ｎ １２.７８。 実施例 １５ Ｎ−(２,５−ジメトキシフェニルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ２,５−(ＭeＯ)₂−ＰhＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に２,５−ジメトキシフェニル−ＳＯ₂Ｃlを使用して、２,５−ジメトキシフェニ ル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物５ｇを製造した。また、 −７８℃でＬＡＨというよりはむしろ−２３℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを用い て、トリペプチドアルギニンラクタムを還元した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ６０３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₈Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₇Ｓ・１.５ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４９.７９， Ｈ ６.１９， Ｎ １２.４４； 実測値 ： Ｃ ５０.３２， Ｈ ６.１７， Ｎ １２.０５。 実施例 １６ Ｎ−(３,５−ジメチル−４−イソオキサゾリルスルホニル)−Ｄ− フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ３,５−Ｍe−４−イソオキサゾリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に３,５−ジメチル−４−イソオキサゾリル−ＳＯ₂Ｃlを使用して、３,５−ジメ チル−４−イソオキサゾリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和 物０.４３ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、６５／３５(Ａ／Ｂ) まで傾斜する、２４０分)により、３,５−ジメチル−４−イソオキサゾリル−Ｓ Ｏ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５６２（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₅Ｈ₃₅Ｎ₇Ｏ₆Ｓ・１.４ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４７.６１， Ｈ ６.１４， Ｎ １５.５５； 実測値 ： Ｃ ４７.９７， Ｈ ５.９１， Ｎ １５.２２。 実施例 １７ Ｎ−(８−キノリニルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 二塩酸塩の製造 ８−キノリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・２ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に８−キノリル−ＳＯ₂Ｃlを使用して、８−キノリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro −Ａrg−Ｈ・２ＨＣl ０.０５０ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９５／５(Ａ／Ｂ) 、７０／３０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、８−キノリル−ＳＯ₂− Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５９４（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₉Ｈ₃₆Ｎ₇Ｏ₅Ｓに関する正確な質量： 計算値 ： ５９４.２４９９； 実測値 ： ５９４.２５０５。 Ｃ₂₉Ｈ₃₅Ｎ₇Ｏ₅Ｓ・４ＨＣl・２Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４４.９１， Ｈ ５.５９， Ｎ １２.６４； 実測値 ： Ｃ ４４.９７， Ｈ ５.０９， Ｎ １０.３２。 実施例 １８ Ｎ−（４−カルボキシフェニルスルホニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）４−(ＢzlＯ₂Ｃ)−Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₂Ｃl ジクロロメタン(５００ml)およびジメチルホルムアミド(１５０ml)中のp−ク ロロスルホニル安息香酸(２５ｇ、１１３mmol)の溶液に、塩化オキサリル(１２. ３ml、１４１mmol)を加えた。２時間撹拌した後、溶媒を減圧下に除去した。 次いで、残留物をベンジルアルコール(９５ml)と室温で混合すると、熱の発生 が起こった。熱を放散させた後、その混合物を水と酢酸エチルとの間で分配した 。相を分離して、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相をＮa₂ＳＯ₄ で乾燥し、濾過した後、もとの体積の約１／４まで濃縮し、次いで、一晩冷蔵 した。翌朝、沈殿を濾過し、乾燥して、標記生成物２.８ｇ(８％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ３１０（Ｍ⁺）。 Ｂ）Ｃbz−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu 実質的には実施例 １−Ａに記載した方法と同じ方法により、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe −ＯＨの代わりにＣbz−Ｄ−Ｐhe−ＯＨを、またＨＣl・Ｐro−ＯＢzlの代わり にＨＣl・Ｐro−Ｏ−t−Ｂuを使用して、Ｃbz−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu ２ ９ｇ(９０％)を製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４５２（Ｍ⁺）。 Ｃ）Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu エタノール(５００ml)中のＣbz−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu(２９ｇ、６４m mol)の溶液に、５％ Ｐd／Ｃ(１４.５ｇ)を加えた。水素化装置を用いて、その 混合物をＨ₂下に４.１バール(６０psi)で１６時間振盪した。次いで、その溶液 をケイ藻土パッドに通して濾過し、減圧下に濃縮して、粘稠な油状物質１７.５ ｇ(８６％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ３１９（ＭＨ⁺）。 Ｃ₁₈Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₃に関する分析： 計算値 ： Ｃ ６７.９０， Ｈ ８.２３， Ｎ ８.８０； 実測値 ： Ｃ ６７.６６， Ｈ ８.１９， Ｎ ８.６７。 Ｄ）４−(ＢzlＯ₂Ｃ)−Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu 実質的には実施例 ７−Ａに記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代 わりに４−(ＢzlＯ₂Ｃ)−Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₂Ｃlを、またＴＦＡ・Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ Ｂzlの代わりにＤ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂuを使用して、４−(ＢzlＯ₂Ｃ)−Ｃ₆ Ｈ₄ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu １１.３ｇ(５０％)を製造した。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ５９２（Ｍ⁺）。 Ｅ）４−(ＢzlＯ₂Ｃ)−Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＨ ４−(ＢzlＯ₂Ｃ)−Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu(１１.３ｇ、１ ９mmol)をトリフルオロ酢酸(１００ml)およびアニソール(５ml)に溶解した。２ 時間撹拌した後、溶媒を回転蒸発により除去した。残留物をジエチルエーテル( ３００ml)と飽和水性ＮaＨＣＯ₃(３００ml)との間で分配した。相を分離して、 水相を５Ｎ ＨＣlでpＨ ２まで酸性とした後、酢酸エチル(２００ml)で３回抽出 し た。合わせた酢酸エチル抽出物を乾燥し(ＭgＳＯ₄)、濾過し、減圧下に濃縮して 、粘稠な淡褐色の油状物質６.５ｇ(６４％)を得た。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ５３８（ＭＨ⁺）。 Ｆ）４−(ＨＯ₂Ｃ)−Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同じ方法により、４ −(ＨＯ₂Ｃ)−Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物０.８ｇ を製造した。−７８℃でＬＡＨというよりはむしろ−２３℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂ u)₃Ｈを用いて、トリペプチドアルギニンラクタムを還元した。生成物にはトリ ペプチドアルギニンアルコールが混入していたが、これをＲＰＨＰＬＣにより除 去することはできなかった。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５８７（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₇Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₇Ｓ・１.３ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４９.７３， Ｈ ５.７７， Ｎ １２.８９； 実測値 ： Ｃ ４９.６０， Ｈ ５.７６， Ｎ １２.９３。 実施例 １９ Ｎ−(２−チアゾリルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）２−チアゾリル−ＳＯ₂Ｃl −７８℃の、テトラヒドロフラン(６００ml)中のチアゾール(１０ｇ、１１８m mol)の溶液に、ヘキサン中の１.６Ｍ n−ブチルリチウムの溶液(７３ml、１１８ mmol)を徐々に加えた。１時間後、アリコートが湿らせたpＨ試験紙に対して酸性 となるまで、その溶液にＳＯ₂(ｇ)を通気した。次いで、冷浴を取り外して、そ の溶液を室温まで温めた。次いで、その溶液をヘキサン(１.５Ｌ)に注ぎ入れて 、その結果得られた沈殿を濾過し、乾燥して、淡黄色の固形物質１６.７ｇを得 た。 次いで、その固形物質(１０ｇ)をジクロロメタン(６０ml)に懸濁させ、０℃ま で冷却して、Ｎ−クロロスクシンイミド(８.６ｇ、６４.５mmol)で処理した。２ 時間撹拌した後、その溶液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、黄色の油状物質 ６.２ｇを得た。次いで、その油状物質をジエチルエーテルに溶解し、濾過し、 減圧下に濃縮して、油状物質４.４ｇ(３４％)を得た。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ １８３（Ｍ⁺）。 Ｂ）２−チアゾリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg(Ｃbz)−ラクタム 実質的には実施例 ７−Ａ、１−Ｄおよび１−Ｈに記載した方法と同じ方法に より、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わりに２−チアゾリル−ＳＯ₂Ｃlを使用して、２−チア ゾリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg(Ｃbz)−ラクタム７.７ｇを製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ６８２（Ｍ⁺）。 Ｃ₃₁Ｈ₃₅Ｎ₇Ｏ₇Ｓに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５４.６１， Ｈ ５.１７， Ｎ １４.３８； 実測値 ： Ｃ ５４.３８， Ｈ ５.２７， Ｎ １４.０９。 Ｃ）２−チアゾリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｉに記載した方法と同じ方法により、ＬＡＨを使用し て、２−チアゾリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg(Ｃbz)−ラクタムを還元し た。次いで、ペルフルオロカーボン装置中、液体ＨＦ(１０ml)およびアニソール (１.０ml)を用いて０℃で１時間処理することにより、Ｃbz保護基を取り除き、 ＨＦを蒸発させ、Ｅt₂Ｏで沈殿させた後、粗製の２−チアゾリル−ＳＯ₂−Ｄ− Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＦ １.１ｇを得た。次いで、ＲＰＨＰＬＣ(９８／２( Ａ／Ｂ)、４０分；８０／２０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２８０分)により、その粗 生成物を精製して、純粋な２−チアゾリル−ＳＯ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ ・ＨＣl ２８０mgを得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５５０（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₃₁Ｎ₇Ｏ₅Ｓ₂・１.１ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４５.４５， Ｈ ５.６５， Ｎ １６.１３， Ｃ １６.４２； 実測値 ： Ｃ ４５.２９， Ｈ ５.３５， Ｎ １５.８６， Ｃ １６.７２。 実施例 ２０ Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−フェニルグリシニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｐhg−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ａ、１−Ｂ、７−Ａ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに 記載した方法と同じ方法により、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe−ＯＨの代わりにＢoc−Ｄ−Ｐ hg−ＯＨを、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わりにＥtＳＯ₂Ｃlを、また−７８℃でＬＡＨを使 用する代わりに−２３℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを使用して、ＥtＳＯ₂−Ｄ− Ｐhg−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物４５０mgを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８ ／２(Ａ／Ｂ)、６０／４０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、ＥtＳＯ₂ −Ｄ−Ｐhg−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４８１（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₁Ｈ₃₂Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・ＨＣl・１.５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４６.３６， Ｈ ６.６７， Ｎ １５.４５； 実測値 ： Ｃ ４６.６６， Ｈ ６.３５， Ｎ １５.３１。 実施例 ２１ Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ａ、１−Ｂ、７−Ａ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに 記載した方法と同じ方法により、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe−ＯＨの代わりにＢoc−Ｄ−Ｃ ha−ＯＨを、またＭeＳＯ₂Ｃlの代わりにＥtＳＯ₂Ｃlを使用して、ＥtＳＯ₂−Ｄ −Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl １.３ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９８／２( Ａ／Ｂ)、６０／４０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、ＥtＳＯ₂−Ｄ− Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５０１（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₄₀Ｎ₆Ｏ₅Ｓ・１.８ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４６.６６， Ｈ ７.４４， Ｎ １４.８４； 実測値 ： Ｃ ４７.０５， Ｈ ７.０５， Ｎ １４.６５。 実施例 ２２ Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−シクロヘキシルグリシニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）ＨＣl・Ｄ−Ｃhg−ＯＭe メタノール(７５０ml)中のＤ−Ｃhg−ＯＨ・ＨＣl(３７.８ｇ、２４０mmol)の 懸濁液にＨＣl(ｇ)を約２０分間通気した。この間に、固体が全て溶解した。そ の溶液を４８時間撹拌した後、ジエチルエーテル(１.５Ｌ)を加えた。その結果 得られた沈殿を濾過し、乾燥して、淡褐色の固形物質３２.１ｇ(６４％)を得た 。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ １７２（ＭＨ⁺）。 Ｂ）ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−ＯＭe 実質的には実施例 ７−Ａに記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代 わりにＥtＳＯ₂Ｃlを使用して、ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−ＯＭe １４.２ｇ(７５％) をＨＣl・Ｄ−Ｃhg−ＯＭeから製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ２６３（Ｍ⁺）。 Ｃ₁₁Ｈ₂₁ＮＯ₄Ｓに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５０.１７， Ｈ ８.０４， Ｎ ５.３２； 実測値 ： Ｃ ５０.０７， Ｈ ８.１３， Ｎ ５.３１。 Ｃ）ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−ＯＨ 実質的には実施例 １−Ｄに記載した方法と同じ方法により、ＥtＳＯ₂−Ｄ− Ｃhg−ＯＨ １２.５ｇ(９４％)をＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−ＯＭeから製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ２５０（ＭＨ⁺）。 Ｃ₁₀Ｈ₁₉ＮＯ₄Ｓに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４８.１７， Ｈ ７.６８， Ｎ ５.６２； 実測値 ： Ｃ ４８.４０， Ｈ ７.９３， Ｎ ５.２３。 Ｄ）ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ａ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同 じ方法により、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe−ＯＨの代わりにＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−ＯＨを使 用して、ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl ０.２５ｇを製造した。 ＲＰＨＰＬＣ(９８／２(Ａ／Ｂ)、３０分；７５／２５(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、 ２７０分)により、ＥtＳＯ₂−Ｄ−Ｃhg−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物を精製 した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４８７（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₁Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₆Ｓ・１.５ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４５.０９， Ｈ ７.４８， Ｎ １５.０２； 実測値 ： Ｃ ４４.７６， Ｈ ７.２７， Ｎ １５.０２。 実施例 ２３ Ｎ−(アセチル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａc−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に塩化アセチルを使用して、Ａc−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 二水和物 ２１０mgを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９５／５(Ａ／Ｂ)、８０分；７５／２５(Ａ ／Ｂ)まで傾斜する、３２０分；３６０分まで保持する)により、Ａc−Ｄ−Ｐhe −Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４４５（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₃₂Ｎ₆Ｏ₄・２ＨＣl・２Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４７.７４， Ｈ ６.９２， Ｎ １５.１８； 実測値 ： Ｃ ４７.４０， Ｈ ６.８３， Ｎ １４.８８。 実施例 ２４ Ｎ−(メトキシアセチル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＣＨ₃ＯＣＨ₂ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にＣＨ₃ＯＣＨ₂(ＣＯ)Ｃlを使用して、ＣＨ₃ＯＣＨ₂ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａr g−Ｈ・ＨＣl １１０mgを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９５／５(Ａ／Ｂ)、８０分； ７５／２５(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、３２０分；３６０分まで保持する)により、 ＣＨ₃ＯＣＨ₂ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４７５（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅・ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５４.０６， Ｈ ６.９０， Ｎ １６.４４， Ｃl ６.９４； 実測値 ： Ｃ ５４.３３， Ｈ ６.６９， Ｎ １６.５４， Ｃl ６.９４。 実施例 ２５ Ｎ−(トリフルオロアセチル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＣＦ₃ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に無水トリフルオロ酢酸を使用して、ＣＦ₃ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ ＨＣl エタノレート３.６mgを製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４９９（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₂₉Ｆ₃Ｎ₆Ｏ₄・１.５ＨＣl・Ｈ₂Ｏ−ＥtＯＨに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４６.６２， Ｈ ６.４４， Ｎ １３.５９； 実測値 ： Ｃ ４６.３２， Ｈ ６.１９， Ｎ １３.７０。 実施例 ２６ Ｎ−(フェニルアセチル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＰhＣＨ₂ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に塩化フェニルアセチルを使用して、ＰhＣＨ₂ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ ・ＨＣl ３.５ｇを製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５２１（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₈Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₄・１.２ＨＣl・Ｈ₂Ｏ・０.５ＥtＯＨに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５７.５３， Ｈ ７.０３， Ｎ １３.８８； 実測値 ： Ｃ ５７.６３， Ｈ ６.６６， Ｎ １３.５２。 実施例 ２７ Ｎ−(シクロヘキサノイル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 シクロヘキシル−ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり に塩化シクロヘキサンカルボニルを使用して、シクロヘキシル−ＣＯ−Ｄ−Ｐhe −Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl ５.３ｇを製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ５１３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₇Ｈ₄₀Ｎ₆Ｏ₄・ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５９.０６， Ｈ ７.５３， Ｎ １５.３１； 実測値 ： Ｃ ５９.００， Ｈ ７.３４， Ｎ １５.０７。 実施例 ２８ Ｎ−(アセチル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａc−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ａ、１−Ｂ、７−Ａ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに 記載した方法と同じ方法により、Ｂoc−Ｄ−Ｐhe−ＯＨの代わりにＢoc−Ｄ−Ｃ ha−ＯＨを使用して、またＭeＳＯ₂Ｃlの代わりに塩化アセチルを使用して、Ａc −Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl ０.６２ｇを製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９５ ／５(Ａ／Ｂ)を７０／３０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)により、Ａc−Ｄ− Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４５１（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₄・２ＨＣl・０.５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４９.６２， Ｈ ７.７６， Ｎ １５.７８； 実測値 ： Ｃ ４９.６３， Ｈ ７.６１， Ｎ １５.８１。 実施例 ２９ Ｎ−(４−ジ−n−プロピルアミノスルホニルベンゾイル)−Ｄ− フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）４−(n−Ｐr₂ＮＳＯ₂)−Ｃ₆Ｈ₄ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl ジクロロメタン(１００ml)中の４−(n−Ｐr₂ＮＳＯ₂)−Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ(２.５ ｇ、８.８mmol)の溶液に、実質的には実施例 １−Ｂに従って製造したＴＦＡ・ Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl(４.１ｇ、８.８mmol)、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチル アミン(８.０ml、４４mmol)、およびＨＯＢＴ(１.２ｇ、８.８mmol)を加えた後 、１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミド・ＨＣl(１. ９ｇ、９.６mmol)を加えた。１６時間撹拌した後、溶媒を減圧下に除去して、残 留物を酢酸エチルに溶解した。有機溶液を１Ｎ クエン酸で２回洗浄し、飽和水 性ＮaＨＣＯ₃で２回洗浄し、水で２回洗浄し、またブラインで１回洗浄した。次 いで、酢酸エチルを減圧下に除去して、残留物を、１：１の酢酸エチル：ヘキサ ンで溶出する、シリカゲルでのクロマトグラフィーにかけた。ＴＬＣにより判定 した、生成物を含む画分を合わせ、減圧下に濃縮して、白色の泡状物質３.３２ ｇ(６１％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ６１９（Ｍ⁺）。 Ｃ₃₄Ｈ₄₁Ｎ₃Ｏ₆Ｓに関する分析： 計算値 ： Ｃ ６５.８９， Ｈ ６.６７， Ｎ ６.７８； 実測値 ： Ｃ ６５.７９， Ｈ ６.８６， Ｎ ６.５５。 Ｂ）４−(n−Ｐr₂ＮＳＯ₂)−Ｃ₆Ｈ₄ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同じ方法に より、−７８℃でＬＡＨを使用する代わりに−２３℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈ を使用して、４−(n−Ｐr₂ＮＳＯ₂)−Ｃ₆Ｈ₄ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ ＨＣl １.４ｇを４−(n−Ｐr₂ＮＳＯ₂)−Ｃ₆Ｈ₄ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl から製造した。ＲＰＨＰＬＣ(９５／５(Ａ／Ｂ)を６０／４０(Ａ／Ｂ)まで傾斜 する、２４０分)により、４−(n−Ｐr₂ＮＳＯ₂)−Ｃ₆Ｈ₄ＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro −Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ６７０（ＭＨ⁺）。 Ｃ₃₃Ｈ₄₇Ｎ₇Ｏ₆Ｓ・ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５６.１２， Ｈ ６.８５， Ｎ １３.８８， Ｃl ５.０２； 実測値 ： Ｃ ５６.４０， Ｈ ６.８１， Ｎ １３.７８， Ｃl ５.０６。 実施例 ３０ Ｎ−(シクロヘキシルメチル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）シクロヘキシル−ＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu エタノール(１３５ml)中のＣbz−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ｏ−t−Ｂu(１１.２ｇ、２ ４.７mmol)およびシクロヘキサンカルボキシアルデヒド(４.４ml、３７.６mmol) の溶液に、５％ Ｐd／Ｃ(２ｇ)を加えた。その懸濁液をＨ₂(４.１バール、６０p si)雰囲気下に一晩振盪した。次いで、その溶液を濾過して、減圧下に濃縮した 。次いで、残留物をメタノールに溶解し、アクロディスクに通して濾過した後、 減圧下に濃縮した。次いで、残留物をジエチルエーテルに溶解し、濾過して、１ Ｎ クエン酸で３回抽出した。合わせた水性酸相を２Ｎ ＮaＯＨでpＨ １０に調 節して、クロロホルムで３回抽出した。合わせたクロロホルム抽出物をＮa₂ＳＯ₄ で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮して、透明な油状物質６.５ｇ(６４％)を得た 。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４１５（ＭＨ⁺）。 Ｂ）Ｃbz−Ｎ−シクロヘキシル−ＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＨ ０℃の、ジクロロメタン(１００ml)中のシクロヘキシル−ＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe− Ｐro−Ｏ−t−Ｂu(６.３ｇ、１５.２mmol)の溶液に、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエ チルアミン(１０.４ml、６２.６mmol)を加えた。この撹拌溶液に、ジクロロメタ ン(２５ml)中のクロロギ酸ベンジル(３.８ml、１６.８mmol)の溶液を徐々に加え た。１.５時間後、クロロホルム(１００ml)を加えて、その溶液を１Ｎ ＨＣlで ３回洗浄し、また水で１回洗浄した。次いで、有機相をＮa₂ＳＯ₄で乾燥し、濾 過して、減圧下に濃縮した。 残留物を、０℃の、トリフルオロ酢酸(５０ml)中のアニソール(５ml)の溶液に 溶解して、５時間撹拌した。次いで、溶媒を減圧下に除去して、残留物をジエチ ルエーテルと飽和水性ＮaＨＣＯ₃との間で分配した。ジエチルエーテル相を再び 飽和水性ＮaＨＣＯ₃で３回抽出し、また水で３回抽出した。合わせた水性抽出物 を１Ｎ ＨＣlでpＨ ２まで酸性として、クロロホルムで３回抽出した。合わせた クロロホルム抽出物を乾燥し(Ｎa₂ＳＯ₄)、濾過し、減圧下に濃縮して、淡黄色 の泡状物質６.３ｇ(８４％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４９３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₉Ｈ₃₆Ｎ₂Ｏ₅・０.１５ＣＨＣl₃に関する分析： 計算値 ： Ｃ ６８.５８， Ｈ ７.１４， Ｎ ５.４８； 実測値 ： Ｃ ６８.３６， Ｈ ７.２１， Ｎ ５.３０。 Ｃ）シクロヘキシル−ＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同じ方法により、シ クロヘキシル−ＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 二水和物３.４ｇをＣ bz−Ｎ−シクロヘキシル−ＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＨから製造した。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４９９（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₇Ｈ₄₂Ｎ₆Ｏ₃・２.５ＨＣl・２Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５１.８２， Ｈ ７.８１， Ｎ １３.４３； 実測値 ： Ｃ ５１.９４， Ｈ ７.５０， Ｎ １３.２５。 実施例 ３１ Ｎ−メチル−Ｄ−シクロヘキシルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 二塩酸塩の製造 Ａ）Ｃbz−Ｄ−Ｃha−Ｐro−ＯＨ 実質的には実施例 １８−Ｅに記載した方法と同じ方法により、Ｃbz−Ｄ−Ｃh a−Ｐro−ＯＨ １６.６ｇ(８６％)をＣbz−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ｏ−t−Ｂuから製 造した。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４０３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₅に関する分析： 計算値 ： Ｃ ６５.６５， Ｈ ７.５１， Ｎ ６.９６； 実測値 ： Ｃ ６６.１０， Ｈ ７.４４， Ｎ ７.５５。 Ｂ）Ｃbz−Ｎ−Ｍe−Ｄ−Ｃha−Ｐro−ＯＨ ０℃の、テトラヒドロフラン(１００ml)中のＫＨ(１９.３ｇ、２５％ 油中懸 濁液、１２０mmol)の懸濁液に、テトラヒドロフラン(５０ml)中のＣbz−Ｄ−Ｃh a-Ｐro−ＯＨ(１６.８ｇ、４１.７mmol)の溶液を徐々に(２５分かけて)加えた。 このようにして加える間、内部温度をモニターして、１０℃未満で維持した。次 いで、この溶液に、ヨウ化メチル(５ml、８０mmol)および１８−クラウン−６( ６６１mg、２.５mmol)の溶液を徐々に加え、内部温度を再び１０℃未満に維持し た。２時間後、酢酸(１０ml)を滴加した後、水(１０ml)を滴加した。次いで、そ の溶液を冷水に注ぎ入れて、pＨを２Ｎ ＮaＯＨで９に調節した。水性塩基をジ エチ ルエーテルで２回洗浄した後、濃ＨＣlでpＨ ２まで酸性として、クロロホルム で４回抽出した。そのクロロホルム抽出物を合わせ、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過 し、減圧下に濃縮して、淡黄色の固形物質１５.７ｇ(９０％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４１７（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₃₂Ｎ₂Ｏ₅に関する分析： 計算値 ： Ｃ ６６.３３， Ｈ ７.７４， Ｎ ６.７３； 実測値 ： Ｃ ６６.４９， Ｈ ７.８６， Ｎ ６.６７。 Ｃ）Ｍe−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・２ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同じ方法により、− ７８℃でＬＡＨを使用する代わりに−２３℃でＬiＡl(Ｏ−t−Ｂu)₃Ｈを使用し て、Ｍe−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・２ＨＣl 二水和物２.２ｇをＣbz−Ｎ−Ｍ e−Ｄ−Ｃha−Ｐro−ＯＨから製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４２３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₁Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₃・２ＨＣl・２Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４７.４５， Ｈ ８.３４， Ｎ １５.８１， Ｃl １３.３４； 実測値 ： Ｃ ４７.０７， Ｈ ７.９５， Ｎ １５.６１， Ｃl １３.７７。 実施例 ３２ Ｎ−(エチルアミノカルボニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）ＥtＮＨＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl ジクロロメタン(１５０ml)中のＴＦＡ・Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzl(１０ｇ、２ １.４mmol)の溶液に、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(３.７３ml、２１.４ mmol)を加えた後、イソシアン酸エチル(１.８６ml、２３.５mmol)を加えた。１ ６時間撹拌した後、その溶液を１Ｎ ＨＣlで３回洗浄し、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、 濾過し、減圧下に濃縮して、白色の泡状物質９.７ｇ(１０７％)を得た。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４２４（ＭＨ⁺）。 Ｂ）ＥtＮＨＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同じ方法に より、ＥtＮＨＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物１.２ｇをＥtＮ ＨＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢzlから製造した。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４７４（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₃₅Ｎ₇Ｏ₄・２.１ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４８.６２， Ｈ ６.９４， Ｎ １７.２６； 実測値 ： Ｃ ４８.７９， Ｈ ６.８８， Ｎ １６.９０。 実施例 ３３ Ｎ−(エトキシカルボニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＥtＯＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 ７に記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わり にクロロギ酸エチルを使用して、ＥtＯＣＯ−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl ２.５ｇを製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４７５（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅・１.７ＨＣl・Ｈ₂Ｏ・０.６ＥtＯＨに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４９.９３， Ｈ ７.１５， Ｎ １４.４３； 実測値 ： Ｃ ５０.０４， Ｈ ６.７６， Ｎ １４.１４。 実施例 ３４ Ｎ−(エトキシカルボニル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＥtＯＣＯ−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 実質的には実施例 １−Ａ、１−Ｂ、７−Ａ、１−Ｄ、１−Ｈおよび１−Ｉに 記載した方法と同じ方法により、ＭeＳＯ₂Ｃlの代わりにクロロギ酸エチルを使 用し、またＢoc−Ｄ−Ｐhe−ＯＨの代わりにＢoc−Ｄ−Ｃha−ＯＨを使用して、 ＥtＯＣＯ−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl 水和物０.６ｇを製造した。ＲＰ ＨＰＬＣ(９５／５(Ａ／Ｂ)を６０／４０(Ａ／Ｂ)まで傾斜する、２４０分)によ り、ＥtＯＣＯ−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlを精製した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４８１（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₃Ｈ₄₀Ｎ₆Ｏ₅・２.８ＨＣl・Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４５.９９， Ｈ ７.５２， Ｎ １３.９９； 実測値 ： Ｃ ４５.８６， Ｈ ７.１５， Ｎ １３.７０。 実施例 ３５ Ｎ−(カルボキシメチル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ− アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 Ａ）Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢn・ＨＣlの製造 塩化メチレン中のＢoc−Ｄ−フェニルアラニン(４２.４ｇ、１６０mmol)の懸 濁液に、プロリンベンジルエステル塩酸塩(３８.７ｇ、１６０mmol)、１−ヒド ロキシベンゾトリアゾール水和物(２１.６ｇ、１６０mmol)およびジイソプロピ ルエチルアミン(８３ml、４８０mmol)を加えた。その溶液が均一となったら、１ −(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミド塩酸塩(４０ｇ、 ２００mmol)を加えた。この混合物を室温で１６時間撹拌した後、減圧下に濃縮 した。残留物を酢酸エチル(５００ml)に溶解して、この溶液を飽和水性塩化アン モニウム(４００ml)で２回洗浄し、飽和水性重炭酸塩(４００ml)で２回洗浄し、 またブライン(４００ml)で２回洗浄した。その有機溶液を乾燥し(ＭgＳＯ₄)、濾 過し、減圧下に濃縮して、淡黄色のシロップ状物質７４.６ｇ(１０３％)を得た 。このシロップ状物質をp−ジオキサン(４００ml)に溶解し、無水ＨＣlガスを１ ５分間通気して、室温で３時間撹拌した。その溶液を減圧下に濃縮して、フラス コの側壁についた黄色の泡状物質を得た。その泡状物質をジエチルエーテルで数 回洗浄して、溶媒をデカントした。その泡状物質を高減圧下に乾燥して、６１ｇ (９８％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ３５３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₁Ｈ₂₄Ｎ₂Ｏ₃・ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ６４.８６， Ｈ ６.４４， Ｎ ７.２１； 実測値 ： Ｃ ６５.４８， Ｈ ６.７５， Ｎ ７.９４。 Ｂ）t−ＢuＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢnの製造 アセトニトリル(４００ml)中のＤ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢn・ＨＣl(３０ｇ、７７m mol)の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(４０ml、２３１mmol)およびt−ブ チルブロモアセテート(１３.７ml、８５mmol)を加えた。この溶液を還流温度と して、そのまま３時間維持した。室温まで冷却した後、その溶液を減圧下に濃縮 した。残留物を酢酸エチル(３００ml)に溶解して、この溶液を飽和水性塩化アン モニウム(２００ml)で２回洗浄し、飽和水性重炭酸ナトリウム(２００ml)で２回 洗浄し、またブライン(２００ml)で２回洗浄した。有機相を乾燥し(ＭgＳＯ₄)、 濾過し、減圧下に濃縮して、橙色の油状物質を得、これを、ヘキサンから１：１ のヘキサン／酢酸エチルまでのグラジエントで溶出するシリカゲルクロマトグラ フィーにより精製した。生成物を含む画分(ＴＬＣにより判定した)を合わせ、濃 縮して、無色の油状物質２３.６ｇ(６６％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４６６（Ｍ⁺）。 Ｃ）Ｂoc−t−ＢuＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢnの製造 ＴＨＦ(２００ml)中のt−ＢuＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢn(２２.５ｇ 、４８mmol)の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン(１２.５ml、７２mmol)およ びジ−t−ブチルジカーボネート(１１.６ｇ、５３mmol)を加えた。この溶液を穏 やかに還流して、１６時間維持した。加熱を止めて、一度冷却し、その溶液を減 圧下に濃縮した。残留物を酢酸エチル(４００ml)に溶解して、１.０Ｍ クエン酸 (２００ml)で２回洗浄し、飽和水性重炭酸ナトリウム(２００ml)で２回洗浄し、 またブライン(２００ml)で２回洗浄した。その有機溶液を乾燥し(ＭgＳＯ₄)、濾 過し、減圧下に濃縮して、黄色の油状物質を得、これを、ヘキサンから２：１の ヘキサン／酢酸エチルまでのグラジエントで溶出するシリカゲルクロマトグラフ ィーにより精製した。生成物を含む画分(ＴＬＣにより判定した)を合わせ、濃縮 して、無色の油状物質２３.７ｇ(８７％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ５６６（Ｍ⁺）。 Ｄ）Ｂoc−t−ＢuＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＨの製造 酢酸エチル(２５０ml)中のＢoc−t−ＢuＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＢn (２３ｇ、４１mmol)の溶液に、５％Ｐd／Ｃ触媒(５ｇ)を加えた。この溶液を減 圧下に数回脱気した。水素を充填したバルーンを使用して、そのガスを導入した 。その混合物を水素雰囲気下に２時間撹拌した。バルーンを取り除き、ケイ藻土 を加えて、そのスラリーをケイ藻土パッドで濾過した。濾液を減圧下に濃縮して 、白色の泡状物質１８.７ｇ(９６％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４７６（Ｍ⁺）。 Ｅ）ＨＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlの製造 実質的には実施例 １−Ｈおよび１−Ｉに記載した方法と同じ方法により、粗 製のＢoc−t−ＢuＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlをＢoc−t− ＢuＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−ＯＨから製造した。粗製の残留物を、０℃の 、５％アニソール／トリフルオロ酢酸に再び溶解した。これを１時間冷却撹拌し 、その時点で溶媒を減圧下に除去した。残留物を０.１Ｎ ＨＣlに入れて、ジエ チルエーテルで２回洗浄した。水相を体積３０mlまで濃縮した後、生成物をＲＰ ＨＰＬＣ法Ａにより精製して、純粋なＨＯＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｐhe−Ｐro−Ａrg− Ｈ・ＨＣl ５５０mg(２２％)を得た。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４６１.３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₃₂Ｎ₆Ｏ₅・１.５ＨＣlに関する分析： 計算値 ： Ｃ ５１.２９， Ｈ ６.５５， Ｎ １６.３１； 実測値 ： Ｃ ５１.４０， Ｈ ６.４２， Ｎ １６.１５。 実施例 ３６ Ｎ−(カルボキシメチル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド 塩酸塩の製造 ＨＯＣＣＨ₂−Ｄ−Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣlの製造 実質的には実施例 ３５に記載した方法と同じ方法により、ＨＯＣＣＨ₂−Ｄ− Ｃha−Ｐro−Ａrg−Ｈ・ＨＣl ４５３mgをＢoc−Ｄ−Ｃhaから製造した。¹ Ｈ ＮＭＲ。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４６７.３（ＭＨ⁺）。 Ｃ₂₂Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₅・１.５ＨＣl・０.５Ｈ₂Ｏに関する分析： 計算値 ： Ｃ ４９.８３， Ｈ ７.７０， Ｎ １５.８５； 実測値 ： Ｃ ４９.５６， Ｈ ７.３６， Ｎ １５.８２。 本発明の化合物は、身体の天然の血餅溶解能に対し認め得るほどの干渉をする ことなく(該化合物は、フィブリン溶解に対する阻害作用が低い)、血液凝固に関 与する他のプロテイナーゼおよび非酵素タンパク以上に、選択的にトロンビンを 阻害すると考えられる。さらにそのような選択性は、血栓崩壊およびフィブリン 溶解に対し実質的な干渉をすることなく、血栓崩壊剤と共に使用することを可能 にすると考えられる。 本発明は、その態様の１つにおいて、哺乳動物においてトロンビンを阻害する 方法であって、処置を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物の有効(トロンビン 阻害)用量を投与することからなる方法を提供する。 その態様の別の１つにおいて、本発明は、血栓塞栓障害を治療する方法であっ て、治療を必要とする哺乳動物に式Ｉの化合物の有効用量(血栓塞栓障害治療お よび／または予防量)を投与することからなる方法を提供する。 本発明は、その態様の別の１つにおいて、哺乳動物における凝固を防止する方 法であって、処置を必要とする哺乳動物に式Ｉの化合物の有効(凝固防止)用量を 投与することからなる方法を提供する。 本発明の方法により意図されるトロンビン阻害、凝固防止および血栓塞栓障害 治療には、医学的治療および／または予防的処置の両方が適宜含まれる。 さらなる一態様において、本発明は、ヒトまたは動物における、トロンビンの 阻害が必要とされる状態の処置に関する。本発明の化合物は、人間を含む動物に おける、血栓症および血液並びに組織での凝固能亢進の処置または予防に有用で あろうと思われる。該化合物が可能な有用性を有する障害は、血栓症および血液 並びに組織での凝固能亢進の処置または予防における疾患状態である。該化合物 が処置および／または予防において可能な有用性を有する障害には、静脈血栓症 並びに肺塞栓症、動脈血栓症、例えば、心筋虚血、心筋梗塞、不安定なアンギナ 、血栓形成に基づく発作および末梢動脈血栓症におけるものが含まれる。さらに 該化合物は、冠動脈疾患、脳動脈疾患および末梢動脈疾患といったようなアテロ ーム性動脈硬化疾患の治療または予防における有用性が期待されている。さらに 該化合物は、心筋梗塞における血栓崩壊剤との併用に有用であろうと思われる。 さ らに該化合物は、血栓崩壊、経皮経管冠動脈形成術(ＰＴＣＡ)および冠動脈バイ パス手術後の再閉塞に対する予防における有用性が期待されている。さらに該化 合物は、顕微手術後の再血栓形成の防止における有用性が期待されている。さら に該化合物は、人工器官および心臓弁に関連する抗凝固処置に有用であろうと思 われる。さらに該化合物は、血液透析および散在性血管内凝固での抗凝固処置に おける有用性が期待されている。さらなる期待される有用性は、患者にインビボ において使用されたカテーテルおよび機械装置の濯ぎにおける有用性、および血 液、血漿並びに他の血液製品のインビトロにおける保存のための抗凝固剤として の有用性である。またさらに該化合物は、転移を含む癌、関節炎を含む炎症性疾 患、および糖尿病といったような、血液凝固が基本的寄与工程または二次的病状 の原因となり得る他の障害(疾患)における有用性が期待されている。該抗凝固化 合物は、経口で、非経口で、例えば、静脈内注入(iv)、筋肉内注射(im)または皮 下(sc)により投与される。 治療的および／または予防的効果を得るために本発明により投与する化合物の 具体的な用量は、勿論、例えば、投与する化合物、投与速度、投与経路、および 処置する状態を含む、その症例を取り巻く個々の状況により決定されるであろう 。 先の各々の有用性に対する典型的な１日用量は、約０.０１mg／kg〜約１００ ０mg／kgの間である。用量レジメは変えることができ、例えば、予防的使用には 、１日１回の用量を投与することができ、または１日３もしくは５回といったよ うな複数回用量が適当であり得る。重篤な治療状況では、本発明の化合物をiv注 入により、約０.０１mg／kg／時間〜約２０mg／kg／時間の間、また好ましくは 約０.１mg／kg／時間〜約５mg／kg／時間の間の速度で投与する。 本発明の方法はまた、血餅溶解剤、例えば、組織プラスミノーゲン活性化因子 (t−ＰＡ)、修飾されたt−ＰＡ、ストレプトキナーゼまたはウロキナーゼと共に も実施される。血餅形成が起こって、動脈または静脈が部分的に、もしくは完全 に遮断された場合には、通常、血餅溶解剤を使用する。本発明の化合物は、該溶 解剤の前、もしくは該溶解剤と共に、または該溶解剤の使用後に投与することが でき、また血餅形成の再発を防ぐために、アスピリンと共に投与するのがさらに 好ましい。 本発明の方法はまた、血小板凝集を阻害する血小板糖タンパクレセプター(IIb ／IIIa)アンタゴニストと共にも実施される。本発明の化合物は、血餅形成の発 生または再発を防ぐために、該IIb／IIIaアンタゴニストの前、もしくは該IIb／ IIIaアンタゴニストと共に、または該IIb／IIIaアンタゴニストの使用後に投与 することができる。 本発明の方法はまた、アスピリンと共にも実施される。本発明の化合物は、血 餅形成の発生または再発を防ぐために、アスピリンの前、もしくはアスピリンと 共に、またはアスピリンの使用後に投与することができる。上述のように、好ま しくは本発明の化合物を血餅溶解剤およびアスピリンと共に投与する。 本発明はまた、上記治療法において使用するための医薬品製剤も提供する。本 発明の医薬品製剤は、薬学上許容され得る担体、賦形剤または希釈剤と共に、有 効なトロンビン阻害量の式Ｉの化合物を含んでなる。経口投与には、該抗血栓化 合物を、結合剤、潤滑剤、崩壊剤等といったような賦形剤を含み得るゼラチンカ プセル剤または錠剤に製剤化する。非経口投与には、該抗血栓化合物を、薬学上 許容され得る希釈剤、例えば、生理食塩水(０.９％)、５％デキストロース、リ ンゲル溶液等に製剤化する。 本発明の化合物は、約０.１mg〜約１０００mgの間の用量を含んでなる単位投 与製剤に製剤化することができる。好ましくは該化合物は、例えば、硫酸塩、酢 酸塩またはリン酸塩といったような、薬学上許容され得る塩の形である。単位投 与製剤の一例は、１０mlの無菌ガラス製アンプル中に本発明の化合物５mgを薬学 上許容され得る塩として含んでなる。単位投与製剤の別の例は、無菌アンプルに 入れた等張食塩水２０ml中に本発明の化合物約１０mgを薬学上許容され得る塩と して含んでなる。 該化合物は、経口、直腸、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、および鼻腔内を含む 種々の経路により投与することができる。本発明の化合物は、投与前に製剤化す るのが好ましい。本発明の別の態様は、薬学上許容され得る担体、希釈剤もしく は賦形剤と共に、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学上許容され得る塩もしく は溶媒和物を含んでなる医薬品製剤である。 そのような製剤中の活性成分は、該製剤の０.１重量％〜９９.９重量％を構成 する。「薬学上許容され得る」とは、担体、希釈剤または賦形剤が製剤の他の成 分と共存可能でなければならず、またそのレシピエントに対して有害であっては ならないことを意味する。 本発明の医薬品製剤は、周知かつ容易に入手可能な成分を用いる既知の手順に より製造される。本発明の組成物は、当業界において周知の手順を利用すること により、患者に投与した後、活性成分を迅速に、持続的に、または遅延して放出 するよう、製剤化することができる。本発明の組成物を製造する際は、通常、活 性成分を担体と混合するか、または担体で希釈するか、またはカプセル、サシェ 、紙もしくは他の容器の形態であり得る担体内に充填する。担体が希釈剤として 働く場合、担体は、該活性成分に対してビヒクル、賦形剤もしくは媒体として作 用する、固体、半固体または液体の物質であってよい。従って、該組成物は、錠 剤、丸剤、粉末剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、 乳剤、溶液剤、シロップ剤、エアゾール剤(固体として、または液体媒体中の)、 軟および硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、無菌注射用溶液剤、無菌包装粉末剤等の 形にすることができる。 以下の製剤例は単に説明するだけのものであって、本発明の範囲を何ら制限し ようと意図するものではない。「活性成分」は、勿論、式Ｉで示される化合物ま たはその薬学上許容され得る塩もしくは溶媒和物を意味する。 製剤例 １ 以下の成分を用いて、硬ゼラチンカプセル剤を製造する。 量（mg／カプセル剤） 活性成分 ２５０ デンプン，乾燥 ２００ ステアリン酸マグネシウム １０ 合 計 ４６０mg 製剤例 ２ 以下の成分を用いて、錠剤を製造する。 量（mg／錠剤） 活性成分 ２５０ セルロース，微晶質 ４００ 二酸化ケイ素，フュームド １０ ステアリン酸 ５ 合 計 ６６５mg 各成分を混合し、圧縮して、各々の重量が６６５mgである錠剤を成形する。 製剤例 ３ 以下の成分を含むエアゾール溶液剤を製造する。 量 活性成分 ０.２５ エタノール ２５.７５ プロペラント ２２（クロロジフルオロメタン） ７０.００ 合 計 １００.００ 活性成分をエタノールと混合して、その混合物をプロペラント ２２の一部に加 え、−３０℃まで冷却して、充填装置へ移す。次いで、必要量をステンレススチ ール製の容器に入れ、残りのプロペラントで希釈する。次いで、バルブ装置を容 器に取り付ける。 製剤例 ４ 活性成分を各々６０mg含む錠剤を以下のようにして製造する。 活性成分 ６０mg デンプン ４５mg 微晶質セルロース ３５mg ポリビニルピロリドン（１０％水溶液として） ４mg カルボキシメチルデンプンナトリウム ４.５mg ステアリン酸マグネシウム ０.５mg タルク １mg 合 計 １５０mg 活性成分、デンプンおよびセルロースをＮo.４５メッシュＵ.Ｓ.篩に通して、完 全に混合する。ポリビニルピロリドンを含む溶液をその結果得られた粉末と混合 した後、その混合物をＮo.１４メッシュＵ.Ｓ.篩に通す。このようにして製造し た顆粒を５０℃で乾燥し、Ｎo.１８メッシュＵ.Ｓ.篩に通す。次いで、その顆粒 に、あらかじめＮo.６０メッシュＵ.Ｓ.篩に通しておいたカルボキシメチルデン プンナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを加え、混合した後、 これを打錠機で圧縮して、各々の重量が１５０mgの錠剤を得る。 製剤例 ５ 活性成分を各々８０mg含むカプセル剤を以下のようにして製造する。 活性成分 ８０mg デンプン ５９mg 微晶質セルロース ５９mg ステアリン酸マグネシウム ２mg 合 計 ２００mg 活性成分、セルロース、デンプンおよびステアリン酸マグネシウムを混合し、Ｎ o.４５メッシュＵ.Ｓ.篩に通して、硬ゼラチンカプセルに２００mg量を充填する 。 製剤例 ６ 活性成分を各々２２５mg含む坐薬を以下のようにして製造する。 活性成分 ２２５mg 飽和脂肪酸グリセリド ２,０００mg 合 計 ２,２２５mg 活性成分をＮo.６０メッシュＵ.Ｓ.篩に通して、あらかじめ必要最小限の熱を用 いて溶融しておいた飽和脂肪酸グリセリドに懸濁させる。次いで、その混合物を 容量２ｇの坐薬型に注ぎ入れて、放冷した。 製剤例 ７ ５ml用量につき活性成分を各々５０mg含む懸濁剤を以下のようにして製造する 。 活性成分 ５０mg カルボキシメチルセルロースナトリウム ５０mg シロップ １.２５ml 安息香酸溶液 ０.１０ml 香料 適 量 着色料 適 量 精製水を加えて全量５mlとする 活性成分をＮo.４５メッシュＵ.Ｓ.篩に通し、カルボキシメチルセルロースナト リウムおよびシロップと混合して、滑らかなペーストとする。安息香酸溶液、香 料、および着色料を少量の水で希釈して、撹拌しながら加える。次いで、十分水 を加え、所望の容量とする。 製剤例 ８ 静脈内注射用製剤は、以下のようにして製造することができる。 活性成分 １００mg 等張食塩水 １,０００ml 先の成分の溶液を１分間につき１mlの割合で被験者に静脈内投与する。 本発明により提供する化合物(式１)は、哺乳動物においてトロンビンの作用を 選択的に阻害する。 本発明の化合物が有効なトロンビン阻害剤である能力を以下の１つまたはそれ 以上のアッセイで評価する。 トロンビンの阻害は、トロンビンが色原体基質であるＮ−ベンゾイル−Ｌ−フ ェニルアラニル−Ｌ−バリル−Ｌ−アルギニル−p−ニトロアニリド、Ｎ−ベン ゾイル−Ｐhe−Ｖal−Ａrg−p−ニトロアニリドを加水分解するアッセイで測定 する、トロンビンのアミダーゼ活性のインビトロにおける阻害により実証される 。 該アッセイは、緩衝液(０.０３Ｍ トリス、０.１５Ｍ ＮaＣl、pＨ７.４)５０ μl、８ＮＩＨ単位／mlのヒトトロンビン溶液(精製ヒトトロンビン、Ｅnzyme Ｒ esearch Ｌaboratories、Ｓouth Ｂend、Ｉndiana)２５μlおよび溶媒(５０％ 水性メタノール(ｖ：ｖ))中の試験化合物２５μlを混合することにより行う。次 いで、色原体基質の水溶液(０.２５mg／ml)１５０μlを加えて、反応をp−ニト ロアニリンの放出に関して４０５nmでモニターすることにより、該基質の加水分 解速度を測定する。加水分解速度に対して遊離トロンビン濃度をプロットするこ とにより、標準曲線を作成する。次いで、その標準曲線を用いることにより、試 験化合物で観察された加水分解速度を各々のアッセイでの「遊離トロンビン」値 に変換する。アッセイで使用したトロンビンの既知の初期量から各々のアッセイ で観察された遊離トロンビンの量を減ずることにより、結合した(試験化合物に 結合した)トロンビンを算出する。加えた阻害剤(試験化合物)のモル数から結合 したトロンビンのモル数を減ずることにより、各々のアッセイでの遊離阻害剤の 量を算出する。 Ｋass値は、トロンビンと試験化合物（Ｉ）との間の反応に関する仮定平衡定 数である。 Ｋassを試験化合物の濃度範囲に関して算出し、その平均値を１モル当たりの リットル単位で報告する。 実質的には、ヒトトロンビンに関して先に記載した方法に従って、以下に指定 する適当な色原体基質と共に、他のヒト血液凝固系セリンプロテアーゼを使用し 、またフィブリン溶解系セリンプロテアーゼを使用することにより、凝固因子セ リンプロテアーゼに関する、またフィブリン溶解セリンプロテアーゼに関する本 発明の化合物の選択性を、さらにはまたヒト血漿血餅フィブリン溶解に対する実 質的な干渉の欠如を評価する。 ヒトのＸ、Ｘa、IXa、XIa、およびXIIa因子をＥnzyme Ｒesearch Ｌaboratori es、Ｓouth Ｂend、Ｉndianaから購入し；ヒトウロキナーゼをＬeo Ｐharmaceut icals、Ｄenmarkから購入し；また組換え活性化プロテインＣ(aＰＣ)は、実質的 には、米国特許第４,９８１,９５２号により、Ｅli Ｌilly and Ｃo.で製造する 。色原体基質：Ｎ−ベンゾイル−Ｉle−Ｇlu−Ｇly−Ａrg−p−ニトロアニリド( Ｘa因子用)；Ｎ−Ｃbz−Ｄ−Ａrg−Ｇly−Ａrg−p−ニトロアニリド(Ｘa因子基 質としてIXa因子アッセイ用)；ピログルタミル−Ｐro−Ａrg−p−ニトロアニリ ド(XIa因子用およびaＰＣ用)；Ｈ−Ｄ−Ｐro−Ｐhe−Ａrg−p−ニトロアニリド( XIIa因子用)；およびピログルタミル−Ｇly−Ａrg−p−ニトロアニリド(ウロキ ナーゼ用)；をＫabi Ｖitrum、Ｓtockholm、Ｓwedenから、またはＭidwest Ｂio tech、Ｆishers、Ｉndianaから購入する。ウシトリプシンをＷorthington Ｂioc hemica ls、Ｆreehold、Ｎew Ｊerseyから、またヒト血漿カリクレインをＫabi Ｖitrum 、Ｓtockholm、Ｓwedenから購入する。ヒトトロンビンに対する、またトリプシ ンに対する基質であるＮ−ベンゾイル−Ｐhe−Ｖal−Ａrg−p−ニトロアニリド は、本発明の化合物に関して先に記載した方法により、市販されている反応体か ら既知のペプチド結合法を用いて合成するか、またはＭidwest Ｂiotech、Ｆish ers、Ｉndianaから購入した。 ヒトプラスミンをＢoehringer Ｍannheim、Ｉndianapolis、Ｉndianaから購入 し；nt−ＰＡを一本鎖活性対照標準としてＡmerican Ｄiagnostica、Ｇreenwich 、Ｃonnecticutから購入し；修飾t−ＰＡ６(mt−ＰＡ６)は、当業界で既知の方 法により、Ｅli Ｌilly and Ｃompanyで製造する［Ｂurckら、Ｊ.Ｂiol.Ｃhem. 、２６５、５１２０−５１７７（１９９０）を参照］。プラスミン色原体基質で あるＨ−Ｄ−Ｖal−Ｌeu−Ｌys−p−ニトロアニリドおよび組織プラスミノーゲ ン活性化因子(t−ＰＡ)基質であるＨ−Ｄ−Ｉle−Ｐro−Ａrg−p−ニトロアニリ ドをＫabi Ｖitrum、Ｓtockholm、Ｓwedenから購入する。 上記色原体基質では、三文字記号であるＩle、Ｇlu、Ｇly、Ｐro、Ａrg、Ｐhe 、Ｖal、ＬeuおよびＬysを使用して、各々、対応するアミノ酸基であるイソロイ シン、グルタミン酸、グリシン、プロリン、アルギニン、フェニルアラニン、バ リン、ロイシンおよびリジンを示す。 以下の第１表は、式Ｉで表される、示された化合物に関して得られたＫass値 を列挙している。 トロンビン阻害剤は、好ましくは、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲン活性 化因子(t−ＰＡ)およびストレプトキナーゼにより誘発されるフィブリン溶解を 温存すべきである。このことは、ストレプトキナーゼ、t−ＰＡまたはウロキナ ーゼの血栓崩壊療法に対する補助物としての、そのような薬剤の治療的使用に、 また内因性フィブリン溶解温存性(t−ＰＡおよびウロキナーゼに関する)抗血栓 剤としての、そのような薬剤の使用に重要であろう。フィブリン溶解プロテアー ゼのアミダーゼ活性に対する干渉の欠如に加えて、そのようなフィブリン溶解系 温存を、ヒト血漿血餅および各々のフィブリン溶解プラスミノーゲン活性化因子 によるヒト血漿血餅の溶解によって研究することができる。 材料 イヌ血漿を、意識のある雑種の猟犬(どちらか一方の性別、Ｈazelton−ＬＲＥ 、Ｋalamazoo、Ｍichigan、Ｕ.Ｓ.Ａ.)から静脈穿刺により３.８％ クエン酸塩 中に採取する。フィブリノーゲンは、新鮮なイヌの血漿から調製し、またヒトフ ィブリノーゲンは、先の方法および仕様書により、イン−デート(in−date)のＡ ＣＤヒト血液から画分Ｉ−２として調製する［Ｓmith、Ｂiochem.Ｊ.、１８５、 １−１１（１９８０）；およびＳmithら、Ｂiochemistry、１１、２９５８−２ ９６７（１９７２）］。ヒトフィブリノーゲン(純度 ９８％／プラスミンを含ま ない)をＡmerican Ｄiagnostics、Ｇreenwich、Ｃonnecticutから得る。フィブ リノーゲンＩ−２調製物の放射能標識を先に報告したように行う［Ｓmithら、Ｂ iochemistry 、１１、２９５８−２９６７（１９７２）］。ウロキナーゼを２２ ００プローグ(Ｐloug)単位／バイアルとしてＬeo Ｐharmaceuticals、Ｄenmark から購入する。ストレプトキナーゼをＨoechst−Ｒoussel Ｐharmaceuticals、 Ｓomerville、Ｎew Ｊerseyから購入する。 方法−ヒト血漿血餅の溶解に対するt−ＰＡの効果 ０.０２２９uＣiの１２５−ヨウ素で標識したフィブリノーゲンを含むヒト血 漿１００ulに、トロンビン５０ul(７３ＮＩＨ単位／ml)を加えることにより、ヒ ト血漿血餅を微小試験管内で形成させる。その血餅に５０ulのウロキナーゼまた はストレプトキナーゼ(５０、１００、または１０００単位／ml)を積層して、室 温で２０時間インキュベートすることにより、血餅溶解を調べる。インキュベー ション後、その管をＢeckman Ｍicrofugeで遠心分離する。γ計数するために、 上清２５ulを１.０ml体積の０.０３Ｍトリス／０.１５Ｍ ＮaＣl緩衝液中に加え る。トロンビンを省く(また緩衝液を代用する)ことにより、計数対照の１００％ 溶解を得る。その積層溶液中にトロンビン阻害剤を１、５、および１０ug／mlの 濃度で含ませることにより、フィブリン溶解に対して起こり得る干渉に関して該 トロンビン阻害剤を評価する。データポイントからその特定濃度のフィブリン溶 解物質に関して５０％溶解を示す値までの直線外挿により、概算のＩＣ₅₀値を見 積る。 抗凝固活性 材料 イヌ血漿およびラット血漿を、意識のある雑種の猟犬(どちらか一方の性別、 Ｈazelton−ＬＲＥ、Ｋalamazoo、Ｍichigan、Ｕ.Ｓ.Ａ.)、または麻酔した雄の Ｓprague−Ｄawleyラット(Ｈarlan Ｓprague−Ｄawley,Ｉnc.、Ｉndiana、Ｕ.Ｓ .Ａ.)から、静脈穿刺により３.８％ クエン酸塩中に採取する。フィブリノーゲ ンは、先の方法および仕様書により、イン−デートのＡＣＤヒト血液から画分Ｉ −２として調製する［Ｓmith、Ｂiochem.Ｊ.、１８５、１−１１（１９８０）； およびＳmithら、Ｂiochemistry、１１、２９５８−２９６７（１９７２）］。 ヒトフィブリノーゲンをまたＡmerican Ｄiagnostica、Ｇreenwich、Ｃonnectic utから純度 ９８％／プラスミンを含まないものとして購入する。凝固試薬であ るＡＣＴＩＮ、トロンボプラスチン、およびヒト血漿をＢaxter Ｈealthcare Ｃ orp.、Ｄade Ｄivision、Ｍiami、Ｆloridaから得る。Ｐarke−Ｄavis(Ａnn Ａr bor、Ｍichigan)から得るウシトロンビンを血漿中での凝固アッセイに使用する 。 方法 抗凝固測定 凝固アッセイ方法は、先に記載した通りである［Ｓmithら、Ｔhrombosis Ｒes earch 、５０、１６３−１７４（１９８８）］。ＣoＡＳcreener凝固装置(Ａmeri can ＬＡＢor,Ｉnc.)を全ての凝固アッセイ測定に使用する。試験血漿０.０５ml に、食塩水０.０５mlおよびトロンボプラスチン−Ｃ試薬０.０５mlを加えること により、プロトロンビン時間(ＰＴ)を測定する。試験血漿０.０５mlをアクチン 試薬０.０５mlと共に１２０秒間インキュベートした後、ＣaＣl₂(０.０２Ｍ)０. ０５mlを加えることにより、活性化部分トロンボプラスチン時間(ＡＰＴＴ)を測 定する。試験血漿０.０５mlに、食塩水０.０５mlおよびトロンビン(１０ＮＩＨ 単位／ml)０.０５mlを加えることにより、トロンビン時間(ＴＴ)を測定する。式 Ｉの化合物を広範囲の濃度にわたりヒトまたは動物の血漿に加えて、ＡＰＴＴ、 ＰＴ、およびＴＴアッセイに対する延長効果を測定する。直線外挿を行って、各 々のアッセイに関して凝固時間を二倍とするのに必要な濃度を見積る。 動物 雄のＳprague−Ｄawleyラット(３５０−４２５gm、Ｈarlan Ｓprague−Ｄawle y,Ｉnc.、Ｉndianapolis、ＩＮ)をキシラジン(２０mg／kg、s.c.)およびケタミ ン(１２０mg／kg、s.c.)で麻酔して、温めたウォーターブランケット(３７℃)上 で保持する。頸静脈にカニューレ挿入して、注入を可能とする。 動脈−静脈シャントモデル 左頸静脈および右頸動脈に長さ２０cmのポリエチレン ＰＥ６０管をカニュー レ挿入する。管腔内に綿糸(５cm)を有する、より大きな管(ＰＥ１９０)の中央部 分６cmを、より長い部分の間に摩擦装着して、動脈−静脈シャント回路を完成す る。そのシャントに血液を１５分間循環させた後、糸を注意深く取り除いて、重 量を測定する。糸および血栓の合計重量から湿った糸の重量を減ずる［Ｊ.Ｒ.Ｓ mith、Ｂr.Ｊ.Ｐharmacol.、７７：２９、１９８２を参照］。 動脈損傷のＦeＣl₃モデル 頸動脈を正中腹側頸部切開により単離する。熱電対を各々の動脈下に配置して 、血管温度をストリップチャートで連続的に記録する。管のカフ(０.０５８ＩＤ ×０.０７７ＯＤ×４mm、Ｂaxter・Ｍed．Ｇrade Ｓilicone)を縦に切断し、熱 電対上の各々の頸動脈の周囲に直接巻き付ける。ＦeＣl₃六水和物を水に溶解し て、濃度(２０％)を実際のＦeＣl₃のみの重量に換算して示す。動脈を損傷して 、血栓症を誘発するために、２.８５ulをカフ中にピペットで分注して、熱電対 プローブ上の動脈を濡らす。動脈閉塞は、温度の急速な下降により示される。閉 塞までの時間を分単位で報告して、ＦeＣl₃の適用と血管温度の急速な下降との 間の経過時間を示す［Ｋ.Ｄ.Ｋurz、Ｔhromb.Ｒes.、６０：２６９、１９９０］ 。 自発的血栓崩壊モデル インビトロにおけるデータは、ペプチドトロンビン阻害剤がトロンビンを阻害 し、またより高濃度ではプラスミンおよび組織プラスミノーゲン活性化因子とい ったような他のセリンプロテアーゼを阻害し得ることを示唆する。該化合物がイ ンビボにおいてフィブリン溶解を阻害するかどうかを評価するために、標識した 全血血餅を肺循環中に移入することにより、自発的血栓崩壊の速度を測定する。 ラット血液(１ml)をウシトロンビン(４ＩＵ、Ｐarke Ｄavis)および¹²⁵Ｉ ヒト フィブロゲン(５μＣi、ＩＣＮ)と迅速に混合し、直ちにシラスティック管中に 吸引して、３７℃で１時間インキュベートする。経時した血栓を管から取り出し 、１cmのセグメントに切り分け、標準食塩水中で３回洗浄して、各々のセグメン トをγカウンターで計数する。既知の計数を有するセグメントをカテーテル中に 吸引した後、これを頸静脈中に移入する。そのカテーテルの先端を右心房付近ま で進め、血餅を取り出して、肺循環中に浮遊させる。移入してから１時間後、心 臓および肺を摘出して、別々に計数する。血栓崩壊は、 の％として示される。移入した血餅のフィブリン崩壊性溶解は、時間に依存して 起こる［Ｊ.Ｐ.Ｃlozel、Ｃardiovas.Ｐharmacol.、１２：５２０、１９８８を 参照］。 凝固パラメータ 血漿トロンビン時間(ＴＴ)および活性化部分トロンボプラスチン時間(ＡＰＴ Ｔ)をフィブロメーターで測定する。血液を頸静脈カテーテルから採取して、ク エン酸ナトリウム(３.８％、血液９部に対して１部)の入ったシリンジ中に集め る。ＴＴを測定するために、ラット血漿(０.１ml)を食塩水(０.１ml)およびウシ トロンビン(０.１ml、トリス緩衝液中、３０Ｕ／ml；Ｐarke Ｄavis)と３７℃で 混合する。ＡＰＴＴの場合には、血漿(０.１ml)およびＡＰＴＴ溶液(０.１ml、 Ｏrganon Ｔeknika)を５分間(３７℃)インキュベートし、ＣaＣl₂(０.０１ml、 ０.０２５Ｍ)を加えて、凝固を開始させる。アッセイを二回行って、平均する。 バイオアベイラビリティー指数 生物活性の尺度、血漿トロンビン時間(ＴＴ)は、ＴＴの増加が親化合物による トロンビン阻害のみから起こるという仮定の下に、親化合物のアッセイに代わる 物として役立つ。ＴＴに対するトロンビン阻害剤の効果の時間経過を、麻酔した ラットへのi.v.ボーラス投与後、また断食した意識のあるラットの経口処置後に 測定する。血液量の制限、および処置時間から反応が処置前の値に戻る時間まで の時間経過を測定するために必要なポイントの数の制限のため、２つのラット集 団を使用する。各々の試料集団が交互連続的時間ポイントを示す。その時間経過 全体にわたる平均のＴＴを用いて、曲線下面積(ＡＵＣ)を算出する。バイオアベ イラビリティー指数を以下に示す式により算出して、相対活性(％)として示す。 血漿ＴＴ時間経過の曲線下面積(ＡＵＣ)を測定して、用量を調節する。このバ イオアベイラビリティー指数は、「相対活性(％)」と呼ばれて、 として算出される。 化合物 化合物溶液を標準食塩水中で毎日新たに調製して、ボーラスとして注射するか 、または実験摂動１５分前に開始して、動静脈シャントモデルでは１５分間、ま た動脈損傷のＦeＣl₃モデルおよび自発的血栓症モデルでは６０分である実験摂 動中ずっと続けて注入する。ボーラス注射量は、i.v.の場合には１ml／kg、また p.o.の場合には５ml／kgであって、注入量は３ml／時間である。 統計 結果を平均＋／−ＳＥＭとして示す。分散の一元分析を用いて、統計的に有意 な差を見つけ出した後、ダンネット(Ｄunnet)試験を適用して、どの平均が異な っているかを決定する。等しい平均値の帰無仮説の棄却に対する有意レベルは、 Ｐ＜０.０５である。 動物 雄のイヌ(ビーグル；１８ヶ月−２年；１２−１３kg、Ｍarshall Ｆarms、Ｎo rth Ｒose、Ｎew Ｙork １４５１６)を一晩断食させて、投薬してから２４０分 後にピューリナ(Ｐurina)保証処方飼料(Ｐurina Ｍills、Ｓt.Ｌouis、Ｍissour i)を与える。水は自由に摂取させる。室温を６６−７４°Ｆ；相対湿度を４５− ５０％に保ち；また０６００−１８００時間点灯する。 薬物動態学モデル ０.９％ 無菌食塩水に溶解して、５mg／mlの調製物とすることにより、試験化 合物を投与する直前に製剤化する。イヌに１回２mg／kg用量の試験化合物を経口 栄養により与える。投薬してから０.２５、０.５、０.７５、１、２、３、４お よび６時間後に血液試料(４.５ml)を頭部静脈から採取する。試料をクエン酸入 りバキュテイナー(citrated Ｖacutainer)管中に集めて、氷上に置いた後、遠心 分離により血漿にする。血漿試料をジニトロフェニルヒドラジンで誘導体化して 、メタノール／リン酸でpＨ７に調節した５００mＭ 酢酸ナトリウム(６０：４０ 、ｖ／ｖ)で溶出するＨＰＬＣ(Ｚorbax ＳＢ−Ｃ８カラム)により分析する。試 験化合物の血漿濃度を記録して、薬物動態学パラメーター：排泄速度定数、Ｋe ；総クリアランス、Ｃlt：分布容量、Ｖ_D；最大血漿試験化合物濃度の時間、Ｔm ax；Ｔmaxでの試験化合物の最大濃度、Ｃmax；血漿半減期、ｔ_0.5；曲線下面積 、Ａ.Ｕ.Ｃ.；および吸収された試験化合物の割合、Ｆを算出するのに使用する 。 イヌの冠動脈血栓症モデル イヌの外科手術上の準備および器具使用は、Ｊacksonら、Ｃirculation、８２ 、９３０−９４０（１９９０）に記載されている通りである。雑種の猟犬(６− ７ヶ月齢、どちらか一方の性別、Ｈazelton−ＬＲＥ、Ｋalamazoo、ＭＩ、Ｕ.Ｓ .Ａ.)をペントバルビタールナトリウム(静脈内に３０mg／kg、i.v.)で麻酔し、 挿管して、室内の空気で換気する。１回換気量および呼吸速度を調節して、血液 のＰＯ₂、ＰＣＯ₂およびpＨを正常限度内に保つ。皮下針電極を、リード(lead)I I Ｅ ＣＧを記録するために挿入する。 左頸静脈および総頸動脈を左の中外側頸部切開によって単離する。動脈血圧( ＡＢＰ)を、頸動脈に挿入した、あらかじめ検定しておいたミラー(Ｍillar)変換 器(モデルＭＰＣ−５００、Ｍillar Ｉnstruments、Ｈouston、ＴＸ、Ｕ.Ｓ.Ａ. )で連続的に測定する。実験中に血液を採取するために、この頸静脈にカニュー レ挿入する。さらに、試験化合物を投与するために、両後足の大腿静脈にカニュ ーレ挿入する。 左胸部フィステル形成術を第五肋間隙で行って、心臓を心膜離被架に懸架する 。左回旋冠動脈(ＬＣＸ)の１〜２cmのセグメントを、第一主要対角線の心室枝付 近で単離する。長さ３−４mmの２６ゲージ針を先端とする針金の陽極電極(テフ ロンで被覆された、３０ゲージの銀メッキされた銅線)をＬＣＸに挿入して、動 脈の内膜表面に接触するよう配置する(実験が終了した時点で確認した)。陰極を 皮下(s.c.)部位に配置することにより、刺激回路を完成する。調節可能なプラス チック製オクルダーを電極領域上のＬＣＸの周囲に配置する。冠血流(ＣＢＦ)を 測定するために、あらかじめ検定しておいた電磁流プローブ(Ｃarolina Ｍedica l Ｅlectronics、Ｋing、ＮＣ、Ｕ.Ｓ.Ａ.)を、陽極と隣接したＬＣＸの周囲に 配置する。オクルダーを調節して、ＬＣＸの１０秒の機械的閉塞後に観察される 充血血流反応の４０−５０％の阻害を引き起こす。血流力学の、およびＥＣＧの 測定値を全て記録して、データ取得システム(モデル Ｍ３０００、Ｍodular Ｉn struments、Ｍalvern、ＰＡ、Ｕ.Ｓ.Ａ.)で分析する。 血栓の形成および化合物の投与レジメ 陽極に１００μＡの直流(ＤＣ)を流すことにより、ＬＣＸの内膜に電解損傷を 引き起こす。その電流を６０分間保った後、血管が閉塞しているか否かに拘らず 停止する。血栓形成は、ＬＣＸが完全に閉塞されるまで自発的に進行する(０の ＣＢＦ、およびＳ−Ｔセグメントの増加により判断した)。閉塞している血栓を １時間経時させた後、化合物の投与を開始する。本発明の化合物の０.５および １mg／kg／時間の用量での２時間の注入を、血栓崩壊剤(例えば、組織プラスミ ノーゲン活性化因子、ストレプトキナーゼ、ＡＰＳＡＣ)の注入と同時に開始す る。試験化合物の投与後３時間、再灌流が続いて起こる。血栓崩壊が成功した後 の冠動脈の再閉塞は、≧３０分間持続した０のＣＢＦとして定義する。 血液学およびテンプレート出血時間の測定 全血球数、ヘモグロビン、およびヘマトクリット値を、クエン酸入り(３.８％ )血液(クエン酸塩１部：血液９部)試料４０μlに関して血液学アナライザー(Ｃe ll−Ｄyn ９００、Ｓequoia−Ｔurner、Ｍount Ｖiew、ＣＡ、Ｕ.Ｓ.Ａ.)で測定 する。歯肉テンプレート出血時間をシンプレート(Ｓimplate)II出血時間装置(Ｏ rganon Ｔeknika Ｄurham、Ｎ.Ｃ.、Ｕ.Ｓ.Ａ.)で測定する。その装置を使用し て、イヌの左の下顎または上顎どちらかの歯肉を２ケ所水平に切開する。切開は 各々、幅３mm×深さ２mmである。切開を行なって、ストップウォッチを使用して 、どれだけの時間出血が起こるかを測定する。綿棒を使用して、切開部から滲み 出る血液を吸い取る。テンプレート出血時間とは、切開から出血停止までの時間 である。出血時間は、被験化合物を投与する直前(０分)、注入に入って６０分、 試験化合物の投与が終了した時点(１２０分)、および実験が終点した時点で測定 する。 データは全て、分散の一元分析(ＡＮＯＶＡ)により分析した後、Ｓtudent−Ｎ euman−Ｋuels post hoc t検定により分析して、有意レベルを測定する。反復測 定ＡＮＯＶＡを使用して、実験中の時間ポイント間の有意差を測定する。値は、 少なくともｐ＜０.０５のレベルで統計上異なると判断する。値は全て、平均 ± ＳＥＭである。研究は全て、米国生理学会の指針に従って行う。その方法に関 するさらなる詳細は、Ｊacksonら、Ｊ.Ｃardiovasc.Ｐharmacol.、２１、５８７ −５９９（１９９３）に記載されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/55 ＡＣＢ 9159−4Ｃ Ｃ０７Ｄ 401/12 ２０７ Ｃ０７Ｄ 401/12 ２０７ 9159−4Ｃ 403/12 ２０７ 403/12 ２０７ 9159−4Ｃ 413/12 ２０７ 413/12 ２０７ 9053−4Ｃ 417/12 ２０７ 417/12 ２０７ 9356−4Ｈ Ｃ０７Ｋ 5/083 Ｃ０７Ｋ 5/083 9356−4Ｈ 5/087 5/087 9356−4Ｈ 14/47 14/47 9454−4Ｃ Ａ６１Ｋ 31/425 // Ｃ０７Ｋ 105:00 9051−4Ｃ 37/64 ＡＣＢ Ａ６１Ｋ 31/425 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)， ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ， ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ， ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 スミス，ジェラルド・フロイド アメリカ合衆国46217インディアナ州 イ ンディアナポリス、クィーンズウッド・コ ート 825番 (72)発明者 ウィッケル，ジェイムズ・ハワード アメリカ合衆国46142インディアナ州 グ リーンウッド、サンシャイン・ウェイ4068 番 (72)発明者 ワイリー，マイケル・ロバート アメリカ合衆国46268インディアナ州 イ ンディアナポリス、ラングウッド・ドライ ブ 7725番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式： ｛式中、 Ｒ¹は水素であり； Ｘはプロリニルまたはアゼチジニル−２−カルボニルであり； Ｙは基： ［式中、 Ｒはベンジル、フェニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル −ＣＨ₂−またはシクロヘキシル−ＣＨ₂−であり； Ｚは−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−、−Ｓ(Ｏ)_n−または単結合であり； Ｒ²はＣ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₁−Ｃ₂ペルフルオロアルキル、−(ＣＨ₂)_g−ＣＯ ＯＨ、Ｃ₁−Ｃ₆アルコキシ、(Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ)Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、シクロペ ンチル、シクロヘキシル、(Ｃ₅−Ｃ₆シクロアルキル)ＣＨ₂−、アミノ、モノ(Ｃ₁ −Ｃ₄)アルキルアミノ、ジ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルアミノ、非置換もしくは置換ア リール（ここで、アリールはフェニルまたはナフチルである）、非置換もしくは 置換ベンジル、(１個または２個のヘテロ原子を有し、これらのうち１個は窒素 であって、第２のヘテロ原子は硫黄、酸素および窒素から選択される)５員もし くは６員の非置換もしくは置換複素環、(１個の窒素原子または２個のヘテロ原 子を有し、これらのうち１個は窒素であって、第２のヘテロ原子は硫黄、酸素お よび窒素から選択される)５員もしくは６員の非置換もしくは置換複素環で置換 されたメチレン、または９員もしくは１０員の非置換もしくは置換縮合二環式複 素環であり； ｇは１、２または３であり；および ｎは１または２である］ である； ただし、Ｒがベンジル、フェニル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであ って、Ｚが−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−または単結合である場合、Ｒ²はＣ₁−Ｃ₆アルキル、 Ｃ₁−Ｃ₂ペルフルオロアルキルまたはＣ₁−Ｃ₆アルコキシ以外である｝ を有する化合物もしくは薬学上許容され得るそれらの塩；または薬学上許容され 得る該化合物もしくはそれらの塩の溶媒和物。 ２．Ｒ²がＣ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₁−Ｃ₂ペルフルオロアルキル、Ｃ₁−Ｃ₆アル コキシ、(Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ)Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、シクロペンチル、シクロヘキ シル、(Ｃ₅−Ｃ₆シクロアルキル)ＣＨ₂−、アミノ、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルア ミノ、ジ(Ｃ₁−Ｃ₄)アルキルアミノ、非置換もしくは置換アリール（ここで、ア リールはフェニルまたはナフチルである）、非置換もしくは置換ベンジル、(１ 個または２個のヘテロ原子を有し、これらのうち１個は窒素であって、第２のヘ テロ原子は硫黄、酸素および窒素から選択される)５員もしくは６員の非置換も しくは置換複素環、(１個の窒素原子または２個のヘテロ原子を有し、これらの うち１個は窒素であって、第２のヘテロ原子は硫黄、酸素および窒素から選択さ れる)５員もしくは６員の非置換もしくは置換複素環で置換されたメチレン、ま たは９員もしくは１０員の非置換もしくは置換縮合二環式複素環であり；および ｎが１または２である； 請求項１に記載の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物。 ３．アルキルが、それ自体で、または他の置換基の一部として、メチル、エチ ル、n−プロピル、イソプロピル、n−ブチル、t−ブチル、イソブチルまたはsec −ブチルであり； ハロがクロロ、フルオロ、ブロモまたはヨードであり； ペルフルオロアルキルがトリフルオロメチルまたはペンタフルオロエチル であり； ５員または６員の複素環がピロリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオ キサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、ピラニル、ピリ ジニル、ピリミジニル、ピラジニルまたはオキサジニルであり；および ９員または１０員の縮合二環式複素環がインドリル、ベンゾオキサゾリル 、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾピラゾリル、キノリニル、イソキノリニル、 ベンゾイミダゾリルまたはベンゾチアゾリルであり； またさらに、いずれかの複素環、フェニルまたはベンジルの芳香環が、置 換されていないか、またはハロ、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₁−Ｃ₄アル コキシ、カルボキシ、アミノ(−ＮＨ₂)、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノ、ジ(Ｃ₁ −Ｃ₄アルキル)アミノ、−Ｎ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)₂、メルカプト、Ｃ₁−Ｃ₄アル キルチオ(−Ｓ(Ｏ)_pＣ₁−Ｃ₄アルキル)、−ＮＨＳ(Ｏ)_p(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)、− ＮＨＣ(Ｏ)Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、−Ｓ(Ｏ)_pＮＨ₂、−Ｓ(Ｏ)_pＮＨ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキ ル)、および-Ｓ(Ｏ)_pＮ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)₂［ここで、ｐは１または２である］ から独立して選択される、安定な構造を与えるであろう、１つまたは２つの置換 基で置換されている； 請求項１または２に記載の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物。 ４．Ｒ²がＣ₁−Ｃ₆アルキル、アミノ、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノ、ジ(Ｃ₁ −Ｃ₄アルキル)アミノ、または９員もしくは１０員の非置換もしくは一置換縮 合二環式複素環である、請求項２または３に記載の化合物またはそれらの塩もし くは溶媒和物。 ５．Ｒがベンジルまたはシクロヘキシル−ＣＨ₂−であり； Ｚが−Ｃ(Ｃ＝Ｏ)−であり；および Ｒ²が１個の窒素原子を含む９員または１０員の非置換または一置換縮合 二環式複素環であり、ここで、該置換基がＣ₁−Ｃ₄アルキル、アミノ、モノ(Ｃ₁ −Ｃ₄アルキル)アミノ、ジ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノ、および−ＮＨＳ Ｏ₂(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)から選択される； 請求項４に記載の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物。 ６．Ｚが−ＳＯ₂−であり；および Ｒ²がＣ₁−Ｃ₆アルキル、アミノ、モノ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノまたは ジ(Ｃ₁−Ｃ₄アルキル)アミノである； 請求項４に記載の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物。 ７．Ｚが単結合であり； Ｒ²が−(ＣＨ₂)_g−ＣＯＯＨであり；および ｇが１、２または３である； 請求項１または３に記載の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物。 ８．ａ．Ｎ−(１−メチルインドリル−２−カルボニル)−Ｄ−フェニルアラニ ル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド； ｂ．Ｎ−(キノリニル−２−カルボニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プ ロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド； ｃ．Ｎ−(１−メチルインドリル−２−カルボニル)−Ｄ−シクロヘキシル アラニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド；および ｄ．Ｎ−(キノリニル−２−カルボニル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル− Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド； から選択される、請求項５に記載の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物。 ９．ａ．Ｎ−(メチルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド； ｂ．Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリニル− Ｌ−アルギニンアルデヒド； ｃ．Ｎ−(n−プロピルスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロリ ニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド； ｄ．Ｎ−(ジメチルアミノスルホニル)−Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−プロ リニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド； ｅ．Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−フェニルグリシニル−Ｌ−プロリニル −Ｌ−アルギニンアルデヒド； ｆ．Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル−Ｌ−プロリ ニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド；および ｇ．Ｎ−(エチルスルホニル)−Ｄ−シクロヘキシルグリシニル−Ｌ−プロ リニル−Ｌ−アルギニンアルデヒド； から選択される、請求項６に記載の化合物またはそれらの塩もしくは溶媒和物。 １０．化合物がＮ−(カルボキシメチル)−Ｄ−シクロヘキシルアラニル−Ｌ− プロリニル−Ｌ−アルギニンアルデヒドである、請求項１に記載の化合物または それらの塩もしくは溶媒和物。 １１．請求項１〜１０のいずれかに記載の式Ｉの化合物、または薬学上許容さ れ得るそれらの塩もしくは溶媒和物を、薬学上許容され得る担体、希釈剤または 賦形剤と共に含んでなる医薬品製剤。 １２．請求項１〜１０のいずれかに記載の式： を有する化合物を製造するための方法であって、対応する式II： ［式中、グアニジノ基上のＰはアミノ保護基を示し、ＰＹは、Ｙに塩基性のＮＨ 部分が含まれる式Ｉの化合物に関しては、独立して選択されるアミノ保護基 Ｐ を有し得る基 Ｙを、またＹにカルボキシ残基が含まれる式Ｉの化合物に関して は、独立して選択されるカルボキシ保護基 Ｐを有し得る基 Ｙを示す］ の化合物の保護基 Ｐを同時にまたは順次除去し；その後、式Ｉの化合物の塩を 必要とする場合は、薬学上許容され得る酸を用いて塩を形成することからなる方 法。 １３．哺乳動物においてトロンビンを阻害する方法であって、トロンビン阻害 を必要とする哺乳動物に、請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物、または薬 学上許容され得るそれらの塩もしくは溶媒和物の有効用量を投与することからな る方法。