JP2001519355A - 重水素化シクロスポリンアナログおよび免疫調節剤としてのそれらの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 天然に生じる、および他の現在公知であるシクロスポリンおよびシクロスポリン誘導体に勝る、向上した有効性および減少した毒性を有するシクロスポリン誘導体が開示される。本発明のシクロスポリン誘導体は、シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）分子の以下による化学的および同位体置換により生成される：（１）アミノ酸１の化学的置換および必要に応じて重水素置換；および（２）アミノ酸１、４、９のような、シクロスポリンＡ分子の代謝の鍵となる部位における重水素置換。最も活性な本発明の誘導体は、化学的および重水素置換の両方を有するものだった。シクロスポリン誘導体を生成する方法、および開示されるシクロスポリン誘導体を用いて毒性の減少した免疫抑制を産生する方法もまた、開示される。

Description

【発明の詳細な説明】

（関連出願の参照）

【０００１】 本出願は、１９９７年１０月８日に提出された米国仮出願番号第６０／０６１
，３６０号の一部継続である（これはその全体において信頼されそして援用され
る）。

【０００２】 （イントロダクションおよび背景） 本発明のシクロスポリン誘導体が開示され、これは、天然に生じる、および他
の現在公知であるシクロスポリンおよびシクロスポリン誘導体に勝る、向上した
有効性および減少した毒性を有する。本発明のシクロスポリン誘導体は、シクロ
スポリンＡ（ＣｓＡ）分子の以下による化学的および同位体置換により生成され
る： １．アミノ酸１の化学的置換および必要に応じて重水素置換；および ２．アミノ酸１、４、９のような、シクロスポリンＡ分子の代謝の鍵となる部
位における重水素置換。 本発明の最も活性な誘導体は、化学的および重水素置換の両方を有するものだっ
た。

【０００３】 シクロスポリンは、環の１位に新規の９炭素アミノ酸（ＭｅＢｍｔ）を含む、
中性の疎水性環状ウンデカペプチドのファミリーであり、これらは潜在的免疫抑
制性、駆虫性、殺菌性、および慢性抗炎症性を示す。構造的に関連した化合物の
このファミリーの天然に生じるメンバーは、種々の不全菌類（ｆｕｎｇｉ ｉｍ
ｐｅｒｆｅｃｔｉ）により産生される。シクロスポリンＡおよびＣが、主な成分
である。以下でさらに記述されるシクロスポリンＡが、化合物のシクロスポリン
ファミリーの特に重要なメンバーである。２４種の少量の代謝産物、およびオリ
ゴペプチドが同定されてきた：Ｌａｗｅｎら、Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ４
２、１２８３（１９８９）；Ｔｒａｂｅｒら、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ
７０、１３（１９８７）；Ｖｏｎ Ｗａｒｔｂｕｒｇ およびＴｒａｂｅｒ Ｐ
ｒｏｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２５、１（１９８８）。

【０００４】 シクロスポリンＡおよびＣの単離、ならびにＡの構造が、Ａ．Ｒｕｅｇｇｅｒ
ら、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ５９、１０７５（１９７６）；Ｍ．Ｄｒｅ
ｙｆｕｓｓら、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３、１２５（１９７６）に
より報告された。Ａのヨウ化誘導体の結晶および分子構造が、Ｔ．Ｊ．Ｐｅｔｃ
ｈｅｒら、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ５９、１４８０（１９７６）により
報告された。Ｃの構造は、Ｒ．Ｔｒａｂｅｒら、同上、６０、１２４７（１９７
７）により報告された。ＡおよびＣの産生は、Ｅ．Ｈａｒｒｉら、米国特許第４
，１１７，１１８号（１９７８、Ｓａｎｄｏｚに対して）により報告された。Ｂ
、Ｄ、Ｅの単離、特徴付け、および抗真菌活性、ならびにＡからＤまでの構造が
、Ｒ．Ｔｒａｂｅｒら、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ ６０、１５６８（１９
７７）により報告された。Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉの単離および構造：ｅｉｄｅｍ、
同上、６５、１６５５（１９８２）。［２−ジューテロ−３−フルオロ−Ｄ−Ａ
ｌａ］⁸−ＣｓＡが、ＰａｔｃｈｅｔｔらによりＧＢ２，２０６，１９９Ａ（１ ９８８年１２月２９日発行）において開示される。

【０００５】 シクロスポリンは、真菌抽出物のスクリーニングの間に、マウスにおいて抗体
産生を抑制することが観察される場合、免疫抑制性であることが発見された。詳
細には、その抑制効果は、Ｔ−細胞レセプター媒介活性化事象の阻害に関連する
と思われる。それは、カルモジュリンおよびシクロフィリン（ｃｙｃｌｏｐｈｉ
ｌｉｎ）（ペプチド性プロピルイソメラーゼ）の不活性化によりＴ−細胞活性化
の間のカルシウム依存性シグナル伝達を中断することにより、これを達成する。
それはまた、Ｔ−ヘルパー細胞によるリンフォカインの産生をインビトロで阻害
し、そして胸腺における成熟ＣＤ８およびＣＤ４細胞の発育を停止させる。他の
インビトロでの性質は、ＩＬ−２産生Ｔ−リンパ球および細胞毒性Ｔ−リンパ球
の阻害、活性化Ｔ−細胞により放出されたＩＬ−２の阻害、同種抗原および外因
性リンフォカインに対する応答における休止Ｔ−リンパ球の阻害、ＩＬ−１産生
の阻害、およびＩＬ−２産生Ｔ−リンパ球のマイトジェン活性化の阻害を含む。
さらなる証拠は、上記の効果が活性化および成熟段階のＴ−リンパ球を伴うこと
を示唆する。

【０００６】 Ｔ細胞の表面上での、主要組織適合（ＭＨＣ）分子上の外来の抗原によるＴＣ
Ｒ（Ｔ細胞レセプター）の刺激は、細胞質を通してＴＣＲシグナル伝達経路（正
確な伝達の方法は不明）の活性化をもたらし、これは、シグナルが核転写因子、
すなわちＴ−細胞活性化遺伝子の転写を調節する活性化Ｔ−細胞の核因子（ＮＦ
−ＡＴ）の活性化をもたらすことを引き起こす。これらの遺伝子は、リフォカイ
ンインターロイキン−２（ＩＬ−２）のものを含む。メッセージの翻訳に続いて
ＩＬ−２が分泌される。Ｔ−細胞の活性化はまた、細胞表面上のリンフォカイン
レセプターＩＬ−２Ｒの出現を含む。ＩＬ−２がＩＬ−２Ｒと結合した後、リン
フォカインレセプター（ＬＫＲ）シグナル伝達経路が活性化される。免疫抑制薬
、ラパマイシンはこの経路を阻害する。

【０００７】 ＣｓＡは、ＴＣＲ−媒介シグナル伝達経路の強力なインヒビターである。それ
は、ＮＦ−ＡＴのＩＬ−２エンハンサーへの結合を阻害し、従って転写活性化を
阻害する。ＣｓＡはシクロフィリンに結合し、これは、Ｔ−細胞シグナル伝達カ
スケードにおける鍵酵素であるカルシニュリンに結合する。

【０００８】 シクロフィリンは、原核および真核生物体において見いだされ、そして偏在し
、そして豊富である。シクロフィリンは、１６５のアミノ酸残基を持つシングル
ポリペプチド鎖である。それは、１７．８ｋＤの分子量を持つ。１７Åの半径を
持つ緩やかな球状の分子、シクロフィリンは、８本鎖の逆平行βバレルを有する
。バレルの内側で、きつく詰められた核は最も疎水性の側鎖を含む。ＣｓＡは多
数の疎水性側鎖を有し、これがＣｓＡをシクロフィリンβバレル内に合致させる
。シクロフィリンは、ペプチドおよびタンパク質基質のｐｅＧＩＦｄｙｌ−プロ
リルアミド結合の、シスおよびトランス回転異性体の相互変換を触媒する。シク
ロフィリンは、ペプチド性プロリルシス−トランスイソメラーゼを持つ構造にお
いて同一であり、そしてレチノール結合タンパク質（ＲＢＰ）のようなリガンド
を輸送するタンパク質のスーパーファミリーと構造的類似性を有する。これらの
タンパク質は、バレルの核中、リガンドを運ぶ。しかしシクロフィリンは、実際
にバレルの外側にリガンド結合部位を持つ。テトラペプチドリガンドは、βバレ
ルの１面と、Ｔｈｒ１１６−Ｇｌｙ１３０ループとの間で、タンパク質表面上の
長く深い溝に結合する。

【０００９】 さらなる性質がまた、ＣｓＡの生物学的活性の研究において報告されてきた：
Ｊ．Ｆ．Ｂｏｒｅｌら、Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎ ６、４６８（１９７６）
。薬理学：Ｅｉｄｅｍ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ３２、１０１７（１９７７）；
Ｒ．Ｙ．Ｃａｌｎｅ、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５、１（１９７９
）。ヒト研究：Ｒ．Ｙ．Ｃａｌｎｅら、Ｌａｎｃｅｔ ２、１３２３（１９７８
）；Ｒ．Ｌ．Ｐｏｗｌｅｓら、同上１３２７；Ｒ．Ｌ．Ｐｏｗｌｅｓら、同上
１、３２７（１９８０）。インビトロ活性（ブタＴ−細胞）：Ｄ．Ｊ．Ｗｈｉｔ
ｅら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ２７、５５（１９７９）。ヒトリンパ
細胞および骨髄細胞における効果：Ｍ．Ｙ．Ｇｏｒｄｏｎ、Ｊ．Ｗ．Ｓｉｎｇｅ
ｒ、Ｎａｔｕｒｅ ２７９、４３３（１９７９）。移植片−対−宿主の疾患にお
けるＣｓＡの臨床的研究：Ｐ．Ｊ．Ｔｕｔｓｃｈｋａら、Ｂｌｏｏｄ ６１、３
１８（１９８３）。

【００１０】 （シクロスポリンＡ作用の機構） シクロスポリンＡ−シクロフィリンＡ複合体 ＣｓＡは、上記で記載されるように、シクロフィリンβバレルと結合する。１
３個のＣｙＰ Ａ残基が、ＣｓＡ結合部位を定義する。これらの残基は、Ａｒｇ
５５、Ｐｈｅ６０、Ｍｅｔ６１、Ｇｌｎ６３、Ｇｌｙ７２、Ａｌａ１０１、Ａｓ
ｎ１０２、Ａｌａ１０３、Ｇｌｎ１１１、Ｐｈｅ１１３、Ｔｒｐ１２１、Ｌｅｕ
１２２、Ｈｉｓ１２６である。最も大きい側鎖の動きは、Ａｒｇ５５に対する１
．３Ａ、ならびにＰｈｅ６０、Ｇｌｎ６３、およびＴｒｐ１２１に対する０．７
Ａまでである。ＣｙＰ ＡとＣｓＡとの間に４個の直接の水素結合が存在する。
ＣｓＡの残基４、５、６、７、８は、溶媒中へ突き出ており、そしてエフェクタ
ータンパク質、カルシニュリンの結合に関与すると考えられる（Ｐｆｌｕｇｌ，
Ｇ．、Ｋａｌｌｅｎ，Ｊ．、Ｓｃｈｉｒｍｅｒ，Ｔ．、Ｊａｎｓｏｎｉｕｓ，Ｊ
．Ｎ．、Ｚｕｒｉｎｉ，Ｍ．Ｇ．Ｍ．、およびＷａｌｋｉｎｓｈａｗ，Ｍ．Ｄ．
（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ ３６１、９１〜９４）。

【００１１】 ＣｓＡ−ＣｙＰ Ａ複合体の機能 ＣｓＡ−ＣｙＰ Ａ複合体は、ヘテロ二量体タンパク質セリン／トレオニンホ
スファターゼまたはカルシニュリンのホスファターゼ活性を阻害する（Ｌｉｕ，
Ｊ．、Ｆａｒｍｅｒ，Ｊ．Ｄ．、Ｌａｎｅ，Ｗ．Ｓ．、Ｆｒｉｅｄｍａｎ，Ｊ．
、Ｗｅｉｓｓｍａｎ，Ｉ．、およびＳｃｈｒｅｉｂｅｒ，Ｓ．Ｌ．（１９９１）
Ｃｅｌｌ ６６、８０７〜１５；Ｓｗａｎｓｏｎ，Ｓ．Ｋ．、Ｂｏｒｎ，Ｔ．、
Ｚｙｄｏｗｓｋｙ，Ｃ．Ｄ．、Ｃｈｏ，Ｈ．、Ｃｈａｎｇ，Ｈ．Ｙ．、およびＷ
ａｌｓｈ，Ｃ．Ｔ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ ８９、３６８６〜９０）。ＣｙＰ Ａは、約１０ｎＭの親和性でＣｓＡと結
合する。次いで、複合体はカルシニュリンに提示される（Ｌｉｕ，Ｊ．、Ｆａｒ
ｍｅｒ，Ｊ．Ｄ．、Ｌａｎｅ，Ｗ．Ｓ．、Ｆｒｉｅｄｍａｎ，Ｊ．、Ｗｅｉｓｓ
ｍａｎ，Ｉ．、およびＳｃｈｒｅｉｂｅｒ，Ｓ．Ｌ．（１９９１）Ｃｅｌｌ ６
６、８０７〜１５）。

【００１２】 カルシニュリンは、Ｔ−細胞の細胞質に見いだされる転写因子ＮＦＡＴを脱ホ
スホリル化する。脱ホスホリル化は、ＮＦＡＴを核へ転位させ、ｊｕｎ／ｆｏｓ
遺伝子と組合せさせ、そして細胞周期の進行の原因であるＩＬ−２遺伝子の転写
を活性化させて、免疫応答を導く。ＣｓＡ−ＣｙＰ Ａ複合体は、カルシニュリ
ンのホスファターゼ活性および最後に免疫抑制を阻害する。（Ｅｔｚｋｏｒｎ，
Ｆ．Ａ．、Ｃｈａｎｇ，Ｚ．、Ｓｔｏｌｚ，Ｌ．Ａ．、およびＷａｌｃｈ，Ｃ．
Ｔ．（１９９４）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３３、２３８０〜２３８８）。Ｃ
ｓＡまたはＣｙＰ Ａ単独のいずれも、免疫学的に重要ではない。それらの複合
体のみが重要である（Ｌｉｕ，Ｊ．、Ｆａｒｍｅｒ，Ｊ．Ｄ．、Ｌａｎｅ，Ｗ．
Ｓ．、Ｆｒｉｅｄｍａｎ，Ｊ．、Ｗｅｉｓｓｍａｎ，Ｉ．、およびＳｃｈｒｅｉ
ｂｅｒ，Ｓ．Ｌ．（１９９１）Ｃｅｌｌ ６６、８０７〜１５）。

【００１３】 シクロスポリンの代謝： シクロスポリンは、肝臓、小腸、および腎臓で、３０個より多い代謝産物へ代
謝される。１３種の代謝産物および２種の第ＩＩ期代謝産物の構造が同定され、
そして少なくとも２３種のさらなる代謝産物がＨＰＬＣにより単離され、そして
それらの構造が質量分析により特徴付けされてきた。シクロスポリンの第Ｉ期代
謝に含まれる反応は、ヒドロキシル化、脱メチル化、ならびにアミノ酸１におけ
る酸化および環化である。いくつかの臨床研究および報告は、シクロスポリン代
謝産物の血液濃度と、神経−または腎臓毒性との間の関連を示した。インビトロ
実験は、代謝産物が明らかにＣｓＡよりも免疫抑制性が少なく、そしてより毒性
が高いことを示唆する。

【００１４】 ＣｓＡが有用であることを見い出された示唆のこれまでに発展してきている列
挙により例示されたように、化合物のシクロスポリンファミリーは、拒絶の予防
、または器官および骨髄の移植において；ならびに、乾癬、および多数の自己免
疫性障害（例えば、１型真性糖尿病、多発性硬化症、自己免疫性ブドウ膜炎、お
よびリウマチ性関節炎など）の処置において有用性を見いだしている。さらなる
示唆が以下に議論される。

【００１５】 当業者により一般に受け入れられるように、インターロイキン−２（ＩＬ−２
）および他のリンフォカインのリンパ球からの分泌の阻害は、シクロスポリンア
ナログの固有免疫抑制活性の有用な指標である。シクロスポリンの使用および作
用機構の最近の総説については、Ｗｅｎｇｅｒら、Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ：
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏ
ｎｓｈｉｐｓ ａｎｄ Ｍｏｄｅ ｏｆ Ａｃｔｉｏｎ，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉ
ｎ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
、第２巻、１７６（１９８６）を参照のこと。

【００１６】 シクロスポリンＡは、いくつかのＮ−メチルアミノ酸を含み、そして８−位に
Ｄ−アラニンを含む環状ペプチドである。シクロスポリンＡ^aの構造は以下に与 えられる：

【００１７】

【化１８】 ^a他に明記されない限り、開示されるシクロスポリンの各アミノ酸は、Ｌ−配置 である。

【００１８】 当該分野における実施であるように、特定のシクロスポリンアナログは、アナ
ログがどのようにシクロスポリンＡと異なっているかを区別する省略された表記
を使用して名付けられ得る。従って、２−位のトレオニンでシクロスポリンＡと
異なっているシクロスポリンＣは、［Ｔｈｒ］²−シクロスポリンまたは［Ｔｈ ｒ］²−ＣｓＡとして区別され得る。同様に、シクロスポリンＢは［Ａｌａ］²−
ＣｓＡであり；シクロスポリンＤは［Ｖａｌ］²−ＣｓＡであり；シクロスポリ ンＥは［Ｖａｌ］¹¹−ＣｓＡであり；シクロスポリンＦは［３−デスオキシＭｅ
Ｂｍｔ］²−ＣｓＡであり；シクロスポリンＧは［ＮＶａ］²−ＣｓＡであり；そ
してシクロスポリンＨは［Ｄ−ＭｅＶａｌ］¹¹−ＣｓＡである。

【００１９】 Ｄ−セリンおよびＤ−トレオニンは、生合成によりシクロスポリンＡの８−位
に導入され、これは活性化合物をもたらした。Ｒ．Ｔｒａｂｅｒら、Ｊ．Ａｎｔ
ｉｂｉｏｔｉｃｓ ４２、５９１（１９８９）を参照のこと。Ｄ−クロロアラニ
ンもまた、生合成によりシクロスポリンＡの８−位に導入された。Ａ．Ｌａｗｅ
ｎら、Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ５２、１２８３（１９８９）を参照のこと
。

【００２０】 （シクロスポリン治療についてのイントロダクション） 免疫調節の異常性は、全身性紅斑性狼瘡、慢性リウマチ性関節炎、１型真性糖
尿病、炎症性腸疾患、胆汁閉鎖肝硬変、ブドウ膜炎、多発硬化症、および他の疾
患（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎、水疱性天疱瘡、類肉腫症、乾癬、魚鱗
癬、およびグレーブス眼症など）を含む、広範な種類の自己免疫および慢性炎症
疾患に存在することが示されてきた。これらの状態のそれぞれの下にある病因は
非常に異なるものであり得るが、それらは、種々の自己抗体および自己反応性リ
ンパ球の出現を共通して有する。そのような自己反応性は、部分的に、その下で
通常の免疫系が作動する恒常性制御の損失のためであり得る。

【００２１】 同様に、骨髄または器官移植に続いて、宿主のリンパ球は、外来組織の抗原を
認識し、そして移植片拒絶を導く抗体を産生し始める。

【００２２】 自己免疫または拒絶プロセスの１つの結末は、炎症性細胞およびそれらが放出
するメディエータにより引き起こされる組織破壊である。ＮＳＡＩＤ（非ステロ
イド系抗炎症薬）のような抗炎症剤、およびコルチコステロイドは、主にこれら
のメディエータの効果、または分泌をブロックすることにより作用するが、しか
し疾患の免疫の基部を改変することは何もしない。他方で、シクロホスファミド
のような細胞毒性薬剤は、通常および自己免疫応答の両方が遮断されるような非
特異的様式で作用する。実際、そのような非特異的免疫抑制剤で処置される患者
は、彼らが彼らの自己免疫疾患に罹患するのと同じくらい感染に罹患するようで
ある。

【００２３】 一般に、シクロスポリンＡのようなシクロスポリンは、細胞毒性でも骨髄毒性
でもない。それは、単球の移動も阻害しないし、顆粒性白血球およびマクロファ
ージの作用も阻害しない。その作用は特異的であり、そして最も確立された免疫
応答をそのままに残す。しかしながら、それは、腎臓毒性であり、そして以下の
望ましくない副作用を引き起こすことが知られている： （１）異常肝臓機能； （２）多毛症； （３）歯肉肥大； （４）ふるえ； （５）神経毒； （６）知覚過敏；および （７）胃腸の不快感。

【００２４】 多数のシクロスポリンおよびアナログが、特許文献において記載されてきた： 米国特許第４，１０８，９８５号（Ｒｕｅｇｇｅｒらに、１９７８年８月２２
日に発行、表題「ジヒドロシクロスポリンＣ」）は、シクロスポリンＣの水素化
により生成され得るジヒドロシクロスポリンＣを開示している。

【００２５】 米国特許第４，１１７，１１８号（Ｈａｒｒｉらに、１９７８年９月２６日に
発行、表題「有機化合物」）は、シクロスポリンＡおよびＢ、ならびに発酵によ
るそれらの生成物を開示している。

【００２６】 米国特許第４，２１０，５８１号（Ｒｕｅｇｇｅｒらに、１９８０年７月１日
に発行、表題「有機化合物」）は、シクロスポリンＣおよびシクロスポリンＣの
水素化により生成され得るジヒドロシクロスポリンＣを開示している。

【００２７】 米国特許第４，２２０，６４１号（Ｔｒａｂｅｒらに、１９８０年９月２日に
発行、表題「有機化合物」）は、シクロスポリンＤ、ジヒドロシクロスポリンＤ
、およびイソシクロスポリンＤを開示している。

【００２８】 米国特許第４，２８８，４３１号（Ｔｒａｂｅｒらに、１９８１年９月８日に
発行、表題「シクロスポリン誘導体、それらの生成、およびそれらを含む薬学的
組成物」）は、シクロスポリンＧ、ジヒドロシクロスポリンＧ、およびイソシク
ロスポリンＧを開示している。

【００２９】 米国特許第４，２８９，８５１号（Ｔｒａｂｅｒらに、１９８１年９月１５日
に発行、表題「シクロスポリン誘導体を生成するためのプロセス」）は、シクロ
スポリンＤ、ジヒドロシクロスポリンＤ、およびイソシクロスポリンＤ、ならび
にこれをを生成するためのプロセスを開示している。

【００３０】 米国特許第４，３８４，９９６号（Ｂｏｌｌｉｎｇｅｒらに、１９８３年５月
２４日に発行、表題「新規シクロスポリン」）は、２−位にβ−ビニレン−α−
アミノ酸残基を、および／または８−位にβ−ヒドロキシ−α−アミノ酸残基を
有するシクロスポリンを開示している。開示されるシクロスポリンは、１−位に
ＭｅＢｍｔまたはジヒドロ−ＭｅＢｍｔのいずれかを含んだ。

【００３１】 米国特許第４，３９６，５４２号（Ｗｅｎｇｅｒに、１９８３年８月２日に発
行、表題「シクロスポリンの全合成のための方法、新規シクロスポリン、および
新規中間体、ならびにそれらの生成のための方法」）は、シクロスポリンの合成
を開示しており、ここで１−位の残基はＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、お
よび保護中間体のいずれかである。

【００３２】 米国特許第４，６３９，４３４号（Ｗｅｎｇｅｒらに、１９８７年１月２７日
に発行、表題「新規シクロスポリン」）は、１、２、５、および８位に置換され
た残基を持つシクロスポリンを開示している。

【００３３】 米国特許第４，６８１，７５４号（Ｓｉｅｇｅｌに、１９８７年７月２１日に
発行、表題「シクロスポリンの器官毒性の中和（ｃｏｕｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ）
」）は、コ−デルゴクリン（ｃｏ−ｄｅｒｇｏｃｒｉｎｅ）を含むシクロスポリ
ンの使用法を開示している。

【００３４】 米国特許第４，７０３，０３３号（Ｓｅｅｂａｃｈに、１９８７年１０月２７
日に発行、表題「新規シクロスポリン」）は、１、２、および３位に置換された
残基を持つシクロスポリンを開示している。３−位の置換は、ハロゲンを含む。

【００３５】 Ｈ．ＫｏｂｅｌおよびＲ．Ｔｒａｂｅｒ、Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｂｉｏｓｙｎｔ
ｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｓ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ａｐｐ
ｌｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、１４、２３７Ｂ２４０（
１９８２）は、発酵によるシクロスポリンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、およびＧの生合成を
開示している。

【００３６】 さらなるシクロスポリンアナログは、米国特許第４，７９８，８２３号（発行
Ｗｉｔｚｅｌ、表題、修飾された「Ｃ−９アミノ酸」を持つ新規シクロスポリン
アナログ）において開示され、これは１−位に硫黄含有アミノ酸を持つシクロス
ポリンアナログを開示している。

【００３７】 （発明の要旨） 本発明は、シクロスポリンＡおよび関連シクロスポリンの、化学的置換および
重水素化アナログに関する。

【００３８】 本発明の目的は、効力を向上した、ならびに薬物動態学的および薬力学的パラ
メーターを変更した、新規シクロスポリンアナログを提供することである。本発
明の別の目的は、免疫調節障害および疾患の、予防、制御、および処置を含む、
それらのケアのためのシクロスポリンアナログを提供することである。本発明の
さらなる目的は、１種以上の本発明の活性免疫抑制剤を、処置を必要としている
患者に投与するための薬学的組成物を提供することである。本発明のなおさらな
る目的は、そのような処置を必要としている哺乳動物種に、十分な量の１種以上
の新規免疫抑制剤を投与することによる、移植片拒絶、自己免疫および慢性炎症
疾患を制御する方法を提供することである。最後に、本発明の活性化合物を調製
するためのプロセスを提供することは、本発明の目的である。

【００３９】 シクロスポリン分子の置換および重水素化は、変化した物理化学的および薬物
動態学的性質をもたらし、これらは、移植拒絶、宿主対移植片疾患、移植片対宿
主疾患、無形成性貧血、巣状および分節性糸球体硬化症、重症筋無力症、乾癬性
関節炎、再発性多発性軟骨炎、および潰瘍性大腸炎の処置におけるその有用性を
向上する。

【００４０】 本発明の実施態様はＣｓＡ誘導体を含み、ここでアミノ酸１、３、および９の
位置の１個以上の水素原子は重水素原子で置換されており、そしてここでシクロ
スポリンＡ誘導体は必要に応じて、アミノ酸９位において化学的に置換されてい
る。本発明のさらなる特定の実施態様は、式Ｉにより表されるＣｓＡ誘導体であ
る：

【００４１】

【化１９】 ここで、Ｒは（ｉ）重水素であるか、または（ｉｉ）２〜１６個の炭素原子の飽
和または不飽和の直鎖または分岐脂肪族鎖であって、そして重水素原子、あるい
は炭素鎖のエステル、ケトン、またはアルコールを１個以上含み、そして必要に
応じて、ハロゲン、ニトロ、アミノ、アミド、芳香族、および複素環式から選択
される置換基を１個以上含むか、または（ｉｉｉ）Ｒは、必要に応じて重水素原
子を含む芳香族または複素環式基であるか、または（ｉｖ）Ｒはメチル基であり
、そしてＸ、Ｙ、およびＺは水素または重水素であるが、ただしＸ、Ｙ、および
Ｚのうち少なくとも１個は重水素であり、そしてＲ’はＯＨまたはエステルであ
るか、あるいはＯであって、そしてアミノ酸１の二重結合に隣接する炭素と一緒
に五員環のような複素環式環を形成し、ここでヘテロ原子は酸素である。本発明
の他の特定の実施態様は、式ＩのＣｓＡ誘導体を含み、ここでＲは、１個以上の
重水素を含む、２〜３個の炭素原子の飽和または不飽和の炭素鎖である。さらな
る特定の実施態様は、以下の式５ｇおよび５ｅのものを含む：

【００４２】

【化２０】 （発明の詳細な説明） 普通の水素の重水素置換、およびプロチオ（ｐｒｏｔｉｏ）代謝産物に対する
重水素化基質は、生体系において著しい変化を生成し得る。同位体で変更された
薬物は、広範に逸脱した薬理学的効果を示した。Ｐｅｔｔｅｒｓｅｎらは、重水
素化５，６−ベンジリデン−ｄｌ−Ｌ−アスコルビン酸（Ｚｉｌａｓｃｏｒｂ）
による抗ガン効果の増加を見いだした［Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１２、
３３（１９９２）］。

【００４３】 シクロスポリンのメチル基における重水素置換は、重水素置換されていないＣ
−Ｈ結合の酸化速度と比較して、より遅いＣ−Ｄ結合の酸化速度をもたらす。同
位体効果は、脱メチル化代謝産物の形成を減少させるように作用し、そしてそれ
により薬物の薬理学的パラメーターを変更する。酸化、代謝、および排出のより
遅い速度は、より大きなおよびより持続した生物学的活性をもたらす。重水素化
は、薬物の効能を増加するために、薬物の毒性を減少するために、薬理学的活性
部分の排出を減少するために、および分子の安定性を改善するために、シクロス
ポリン分子の種々の部位を標的とする。

【００４４】 （同位体置換：） 安定な同位体（例えば、重水素、¹³Ｃ、¹⁵Ｎ、¹⁸Ｏ）は、非放射性同位体であ
り、これらはそれぞれの原子の通常の豊富な同位体よりも１個余計に中性子を含
む。重水素化化合物は、非重水素化親化合物の作用機構および代謝経路の評価に
より、化合物のインビボでの代謝結果を調査するための、薬学的調査において使
用されてきた（Ｂｌａｋｅら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６４、３、３６７〜３
９１、１９７５）。そのような代謝研究は、患者に投与されるインビボ活性化合
物、または親化合物から生成される代謝産物が毒性であるかまたは発ガン性であ
るかを実証するためのいずれかのため、安全で、効果的な、治療薬物の設計にお
いて重要である（Ｆｏｓｔｅｒら、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓ
ｅａｒｃｈ 第１４巻、２〜３６頁、Ａｃａｄｅｍｉｃ ｐｒｅｓｓ、Ｌｏｎｄ
ｏｎ、１９８５）。

【００４５】 重原子の組み込み、特に水素の重水素置換は、薬物の薬物動態を変更し得る同
位体効果を起こし得る。この効果は通常、標識が分子の代謝的に不活性な位置に
おかれる場合には、ほんのわずかである。

【００４６】 薬物の安定な同位体標識化は、ｐＫａおよび液体溶解性のようなその物理化学
的性質を変更し得る。これらの変化は、身体を通るその経過にそった異なる工程
において薬物の結末に影響し得る。吸収、分配、代謝、または排泄が変更され得
る。吸収および分配は、主に分子の大きさおよび基質の脂肪親和性に依存してプ
ロセスされる。これらの効果および変更は、同位体置換がリガンド−レセプター
相互作用に含まれる範囲に影響を及ぼす場合、薬物分子の薬力学的応答に影響を
及ぼし得る。

【００４７】 薬物代謝は、重水素原子との化学結合の切断がプロセスにおける律速段階であ
る場合、大きな同位体効果を起こし得る。安定な同位体−標識化分子の物理的性
質のいくつかは未標識化分子のものと異なっていながら、１つの重要な例外をの
ぞいて化学的および生物学的性質は同じである：重い同位体の増加した質量のた
め、重い同位体および別の原子を含む任意の結合が、軽い同位体とその原子との
間の同じ結合よりも強くなる。この結合の切断が律速段階である任意の反応にお
いて、重い同位体を持つ分子に対しては「力学的同位体効果」のため、反応はよ
りゆっくりと進行する。Ｃ−Ｄ結合の切断を含む反応は、Ｃ−Ｈ結合の切断を含
む同様な反応よりも７００％までゆっくりになり得る。Ｃ−Ｄ結合が代謝産物を
導く工程のいずれにも含まれない場合、薬物の挙動を変更し得るどのような効果
も存在し得ない。重水素が薬物の代謝に含まれる部位に置かれる場合、同位体効
果は、Ｃ−Ｄ結合の切断が律速段階である場合にのみ観測される。脂肪族Ｃ−Ｈ
結合の切断が生じる（通常は、混合機能オキシダーゼにより触媒される酸化によ
る）ときはいつでも、重水素による水素の置換が観測可能な同位体効果を導くこ
とを示す証拠が存在する。代謝の部位における重水素の組み込みが、その速度を
、重水素により置換されていない炭素原子におけるアタックにより生成される別
の代謝産物が主要な経路になる点まで遅くすることを理解することがまた重要で
あり、プロセスは「代謝スイッチ」と呼ばれる。芳香族系を含む化合物の最も重
要な代謝経路の１つが、３または４位の炭素置換基であるフェノール性基を導く
ヒドロキシル化であることがまた観測される。この経路はＣ−Ｈ結合の切断を含
むが、この結合の切断が大抵は律速段階に含まれないため、しばしば同位体効果
を伴わない。立体中心における水素の重水素による置換は、薬物の活性に、より
大きな効果を誘導する。

【００４８】 （シクロスポリン誘導体の合成：） 本発明の化合物の調製のための出発物質は、シクロスポリンＡである。本発明
の化合物を調製するためのプロセスは、図３のスキームＩにおいて示されるよう
に例示される。式Ｉを持つ他の化合物が、以下に示される合成において適切な反
応物および薬剤を置換することにより合成され得ることが、以下に描写される合
成経路を総覧することで、当業者に容易に明らかになる。

【００４９】 重水素化シクロスポリンアナログを作製するためのプロセスにおける第一の工
程は、鍵となる中間体３および６の調製である。これは、アミノ酸１の二重結合
の酸化によりなし遂げられ得る。シクロスポリンの、無水酢酸および過剰のジメ
チルアミノピリジンでの処理は、ヒドロキシル保護アセチルシクロスポリン２を
提供した。次いで、２をオゾン、またはＫＭｎＯ₄／ＮａＩＯ₄で処理することに
より、二重結合の切断がなし遂げられ得たが、ＯｓＯ₄／ＮａＩＯ₄が、アルデヒ
ド生成物３への変換のために選択される試薬であることが見いだされた。反応は
一般に、よりきれいで、所望の物質を生成し、そして高収率で進行することが見
いだされた。この反応の欠点は、ＯｓＯ₄が高価で非常に毒性であり、それゆえ 、その使用が制限されることである。しかし、触媒量で存在するＯｓＯ₄ととも にＨ₂Ｏを使用することにより、結果はより経済的になし遂げられ得る。アルカ リ溶液中のｔ−ブチルヒドロキシドおよびＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド
が、このプロセスにおいてＨ₂Ｏ₂と置き換えられ得る。アルデヒド化合物３はさ
らに、種々の重水素化アルキル、またはアリールトリフェニルホスホニウム誘導
体（ウィッティッヒ試薬）で処理され、そしてアルカリ溶液による加水分解が最
終誘導体（５ａ〜ｈ）を提供した。本発明者らはまた、図４のスキームＩＩにお
いて示されるような種々の化合物を得るための一般的手順を開発した。

【００５０】 このアプローチにおいて、アルデヒド誘導体３は、標準的な手順を使用して調
製されたウィッティッヒ試薬で処理された。穏やかな酸加水分解で得られる生成
物は、鍵となる中間体、アルデヒド生成物６を提供した。これはさらに、第二の
重水素化アルキル、またはアリールトリフェニルホスホニウムハロゲン化物試薬
を用いて、必要とされる生成物を与えられる穏やかな酸加水分解で処理される。
この方法は、ジエン系の拡張にわたる制御を提供する。このアプローチを使用す
ることにより、オレフィン性二重結合が段階的に導入され得る。

【００５１】 重水素化化合物５ａ〜ｈを調製するための第三のアプローチは、先に記載され
た重水素化されていないシクロスポリンアナログを、重水、重水素化酢酸のよう
な重水素化溶媒中、酸または塩基触媒の存在下加熱することによるものである。

【００５２】 本発明の好適なシクロスポリンは、式ＩＩのもののような、アミノ酸１に重水
素および化学的置換の両方を含むものである：

【００５３】

【化２１】 ここでＸは、

【００５４】

【化２２】 （実施例：） 実施例１． 室温で、撹拌したシクロスポリン１（１．０１ｇ、０．８４ｍｍｏｌ）の無水酢
酸（２０ｍＬ）溶液に、ＤＭＡＰ（１５０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ、１．５当量
）を加えた。一晩撹拌した後、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）および水（２５
ｍｌ）の間で分配した。次いで、分離したＥｔＯＡｃ層を水（５０ｍＬ）および
ブライン（５０ｍＬ）で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、そして溶媒を減圧除去し て、粗生成物をガラス状の固体として得た。シリカのショートカラムでのフラッ
シュクロマトグラフィー（２％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）による精製およびベンゼン
からの凍結乾燥で、２を綿毛状の無色固体として得た（１．０４４ｇ、０．８４
ｍｍｏｌ、定量）；

【００５５】

【数１】 実施例２ ジオキサンおよび水（５ｍＬ）の１：１混合液中の化合物２（２８９ｍｇ、０．
２３ｍｍｏｌ）の溶液に、最初にメタ過ヨウ素酸ナトリウム（１００ｍｇ、０．
４７ｍｍｏｌ、２当量）を、次に四酸化オスミウムの溶液（５ｍＬ；２５０ｍＬ
の溶媒中０．５ｇのＯｓＯ₄）を加えた。２段階の後処理、フラッシュカラムク ロマトグラフィーによる精製（石油エーテル中４０％のアセトン）、およびベン
ゼンからの凍結乾燥で、化合物３を綿毛状の無色固体として得た（２２６ｍｇ、
０．１８ｍｍｏｌ、８０％）；

【００５６】

【数２】 実施例３ 方法Ａ：０℃で、化合物３（３１５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ
）溶液に、ｄ₅−エチルトリフェニルホスホニウムヨージドから調製した重水素 −リンイリド（２．６７ｍｍｏｌ、約１０当量）の溶液を加えた。後処理後、フ
ラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中、３０％〜６０％のアセト
ン）およびＨＰＬＣ（水中６０％〜６５％のＭｅＣＮ）による精製、次いでベン
ゼンからの凍結乾燥で、化合物４を綿毛状の無色固体として得た（１５３ｍｇ、
０．１２ｍｍｏｌ、４７％）。 方法Ｂ：Ａｒ下−７８℃で、撹拌した化合物３（２８７ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ
）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、リンイリドの溶液（Ａｒ下室温で、ｄ₅−エチル トリフェニルホスホニウムヨージド（４８０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、約５当量
）のＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液に、ヘキサメチルジシリルアミドナトリウム（１
．０Ｍ；２．２５ｍＬ、２．２５ｍｍｏｌ、約１０当量）を加えることにより形
成した）を注意深く加えた。室温まで徐々に暖めながら２時間撹拌した後、反応
混合物を０℃に冷却し、そして１０％ＡｃＯＨ／ＴＨＦ（１０ｍＬ）を加えるこ
とによりクエンチした。反応混合物を減圧濃縮し、そして水（２０ｍＬ）および
ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）の間で分配した。水層をさらにＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）
で抽出し、そして合わせた有機抽出物を、次いで１ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）およ
び水（２０ｍＬ）で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、そして溶媒を減圧除去して粗 生成物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製（石油エーテル
中４０％のアセトン）、およびベンゼンからの凍結乾燥で、化合物４ｄを綿毛状
の無色固体として得た（８４ｍｇ、６７μｍｏｌ、２９％）；

【００５７】

【数３】 実施例４ 室温で、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）および水（２．５ｍＬ）中の４ｄ（８４ｍｇ、６７
μｍｏｌ）の攪拌溶液に、炭酸カリウム（９９ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ、約１０
当量）を加えた。一晩撹拌した後、ＭｅＯＨを減圧除去し、そして水性残渣をＥ
ｔＯＡｃ（１０ｍＬ）および５％クエン酸溶液（１０ｍＬ）の間で分配した。次
いで、ＥｔＯＡｃ層を水（１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗い、乾燥
し（ＭｇＳＯ₄）、そして溶媒を減圧除去して粗生成物を得た。ＨＰＬＣ精製（ 水中６０％〜６５％のＭｅＣＮ）およびベンゼンからの凍結乾燥で、化合物５ｄ
を綿毛状の無色固体として得た（５９ｍｇ、４９μｍｏｌ、７０％）；

【００５８】

【数４】 実施例５ ベンゼン（３ｍＬ）中の化合物３（４９ｍｇ、３９．８μｍｏｌ）および重水素
化ｄ₃−アリルトリフェニルホスホニウムブロミド（３１１ｍｇ、８１２μｍｏ ｌ、約２０当量）の室温で激しく撹拌した混合物に、１ＮのＮａＯＨ（３ｍＬ）
を加えた。撹拌を室温で５日間続け、その後２層を分離し、ベンゼン層を水（５
ｍＬ）で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、そして溶媒を減圧除去して粗生成物を得 た。ＨＰＬＣ精製（水中２０％〜６０％のＭｅＣＮ）およびベンゼンからの凍結
乾燥で、化合物４ｇを綿毛状の無色固体として得た（２３ｍｇ、１８．３μｍｏ
ｌ、４７％）；

【００５９】

【数５】 実施例６ ベンゼン（３ｍＬ）中の化合物３（５６ｍｇ、４５．５μｍｏｌ）および重水素
化ｄ₄−クロチルトリフェニルホスホニウムブロミド（３６０ｍｇ、９０７μｍ ｏｌ、約２０当量）の室温で激しく撹拌した混合物に、１ＮのＮａＯＨ（３ｍＬ
）を加えた。撹拌を室温で５日間続け、その後２層を分離し、ベンゼン層を水（
５ｍＬ）で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、そして溶媒を減圧除去して粗生成物を 得た。ＨＰＬＣ精製（水中２０％〜６０％のＭｅＣＮ）およびベンゼンからの凍
結乾燥で、化合物４ｅを綿毛状の無色固体として得た（２３ｍｇ、１８．１μｍ
ｏｌ、４０％）；

【００６０】

【数６】 実施例７ ＭｅＯＨ（５ｍＬ）および水（１ｍＬ）中の化合物４ｇ（２０ｍｇ、１５．９μ
ｍｏｌ）の室温で撹拌した溶液に、炭酸カリウム（３０ｍｇ、２１７μｍｏｌ）
を加えた。一晩撹拌した後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）および５％水
性クエン酸（１０ｍＬ）の間で分配した。水層をさらにＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で
抽出し、次いで、合わせた有機層を５％クエン酸（１０ｍＬ）およびブライン（
１０ｍＬ）で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、そして溶媒を減圧除去して粗生成物 を得た。ＨＰＬＣ精製（６５％のＭｅＣＮ）およびベンゼンからの凍結乾燥で、
化合物５ｇを綿毛状の無色固体として得た（１０ｍｇ、８．２μｍｏｌ、５２％
）；

【００６１】

【数７】 実施例８ メタノール（５ｍＬ）および水（１ｍＬ）中の４ｅ（１８ｍｇ、１４．２μｍｏ
ｌ）の室温で撹拌した溶液に、炭酸カリウム（３５ｍｇ、２５４μｍｏｌ）を加
えた。一晩撹拌した後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）および５％水性ク
エン酸（１０ｍＬ）の間で分配した。水層をさらにＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で抽出
し、次いで、合わせた有機層を５％クエン酸（１０ｍＬ）およびブライン（１０
ｍＬ）で洗い、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、そして溶媒を減圧除去して粗生成物を得 た。ＨＰＬＣ精製（６５％のＭｅＣＮ）およびベンゼンからの凍結乾燥で、化合
物５ｅを綿毛状の無色固体として得た（１０ｍｇ、８．１μｍｏｌ、５７％）；

【００６２】

【数８】 実施例９ 重水素化シクロスポリンアナログについて、以下に記載されるように免疫抑制活
性を試験した。化合物５ｅおよび化合物５ｇは、親シクロスポリンよりも強力で
あった。カルシニュリン活性を、Ｆｒｕｍａｎら（Ａ Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａ
ｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、１９９２）により先に記載された方法の改変したもの
を使用してアッセイした。オカダ酸、ホスファターゼ１型および２型インヒビタ
ーの存在下、³²Ｐ−標識１９アミノ酸ペプチド基質を脱ホスホリル化する全血溶
解物の能力についてそれらを評価した。バックグラウンドのホスファターゼ２Ｃ
活性（ＣｓＡおよびオカダ酸耐活性）を測定し、そして各サンプルから減算した
。このときアッセイを、過剰に加えられたＣｓＡの存在下および非存在下で行っ
た。残りのホスファターゼ活性を、カルシニュリン活性として解釈した。カルシ
ニュリンアッセイの結果は、図５に表される。結果は、平均±平均の標準誤差と
して示される。結果を、ＣｓＡ誘導体濃度（ｕｇ／Ｌ）対カルシニュリン阻害の
割合としてプロットする。アッセイされた化合物の構造は、以下を含む：

【００６３】

【化２３】 実施例１０ 混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイを、シクロスポリンおよび化合物５ｅお
よび化合物５ｇで行った。結果は図６に表され、そして４つの実験の平均として
プロットされ、これはシクロスポリンまたは誘導体の濃度対阻害割合を示す。

【００６４】 ＭＬＲアッセイは、ＣｓＡ誘導体を生物学的（免疫抑制）活性で同定するのに
、および親ＣｓＡ分子の免疫抑制活性と比較してこの活性を定量するために有用
である。

【００６５】 この目的に有用なリンパ球増殖アッセイ手順の例は、以下の通りである： １． ２個の個体から血液を採取し（各２０ｍｌ）、そしてＦｉｃｏｌｌ−Ｐａ
ｑｕｅ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を使用してリンパ球を単離する
。 ２． ２％酢酸（ｖ／ｖ）の１：１０希釈で、リンパ球を計数する。 ３． ＤＭＥＭ／２０％ＦＣＳ（ｖ／ｖ）中１×１０⁶細胞／ｍｌで、１０ｍｌ の各リンパ球集団（Ａ＋Ｂ）を調製する。 ４． ９６ウェルの滅菌組織培養プレート、平底（Ｓａｒｓｔｅｄｔ、ｃａｔ＃
８３．１８３５）をセットアップする。各ウェルに以下を加える： ５． １ウェルのリンパ球集団Ａあたり１００μｌに等分する。 ６． １ウェルのリンパ球集団Ｂあたり１００μｌに等分する。 ７． ０、２．５、５、１０、２５、５０、および１００μｇ／ＬでＤＭＥＭ中
補助物なしで３つ作った薬物（ＣＳＡおよびＣＳＡ誘導体）を、１ウェルあたり
２０μｌに等分する。 ８． 増殖における薬物の効果を測定するために、プレートを、５％ＣＯ₂雰囲 気下３７℃で５日間インキュベートする。 ９． ６日目に、メチル−³Ｈ−チミジン（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｌｉｆｅ Ｓｃ ｉｅｎｃｅ、ｃａｔ＃ＴＲＫ １２０）のＤＭＥＭ中補助物なしの１：５０希釈
物を３．２ｍｌ調製する。１ウェルあたり３０μｌを加え、そして５％ＣＯ₂雰 囲気下３７℃で１８時間インキュベートする。 １０． ７日目に、Ｃｅｌｌ−Ｈａｒｖｅｓｔｏｒ（Ｓｋａｔｒｏｎ、ｃａｔ＃
１１０１９）を使用して、細胞をガラスマイクロファイバーフィルターＧＦ／Ａ
（Ｗｈａｔｍａｎ、ｃａｔ＃１８２００２４）上に採取する。細胞を１．０ｍｌ
の減菌蒸留水で３回洗う。 注：全ての手順を生物学的フローフード（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｌｏｗ ｈ
ｏｏｄ）中滅菌技術を使用して行う。 １１． フィルターを、シンチレーションバイアルに置き、そして１．５ｍｌの
ＳｃｉｎｉＳａｆｅ Ｐｌｕｓ ５０％シンチレーション液体（Ｆｉｓｈｅｒ、
ｃａｔ＃ＳＸ−２５−５）を加える。 １２． β線カウンター（Ｍｉｃｒｏｍｅｄｉｃ Ｓｙｓｔｅｍ Ｉｎｃ．、Ｔ
ＡＵＲＵＳ Ａｕｔｏｍａｔｉｃ Ｌｉｑｕｉｄ Ｓｃｉｎｔｉｌａｔｉｏｎ
Ｃｏｕｎｔｅｒ）を使用して、リンパ球に組み込まれた放射活性の量を１．０分
間測定する。 １３． 各薬物について平均および標準偏差を計算し、そして結果を以下のよう
に表す：

【００６６】

【数９】 ＭＬＲアッセイは、生物学的に活性なＣＳＡ代謝産物および親ＣＳＡ分子に結
合する本発明の抗体を選択するのに利用され得る。抗体はまた、生物学的に不活
性な代謝産物に対する反応性について選択され得る。

【００６７】 カルシニュリンアッセイおよび混合リンパ球反応アッセイの結果から、アミノ
酸１位で化学的に置換された、および重水素化されたシクロスポリンが顕著な免
疫抑制活性を保持し得ることが見いだされた。誘導体５ｅおよび５ｇの場合、Ｃ
ｓＡよりも明らかに大きい免疫抑制活性が得られた。

【００６８】 実施例１１ 調製された本発明の他のシクロスポリン誘導体は、以下を含む：

【００６９】

【化２４】

【００７０】

【化２５】

【００７１】

【化２６】

【００７２】

【化２７】

【００７３】

【化２８】

【００７４】

【化２９】

【００７５】

【化３０】 （薬物組成物処方物および免疫抑制の顕現化） 開示されるシクロスポリン誘導体の、物理化学的、薬力学的、毒物学的、およ
び薬物動態学的性質の決定は、標準的な化学的および生物学的アッセイを使用し
て、ならびに化学および薬理学／毒物学分野で公知の数学モデル化法の使用を通
して成され得る。治療的有用性および投薬レジメンは、そのような技術の結果か
ら、および適切な薬物動態および／または薬力学モデルの使用を通して推定され
得る。

【００７６】 本発明の化合物は、ニートで、または薬学的キャリアとともに、それらを必要
としている温血動物へ投与され得る。薬学的キャリアは、固体または液体であり
得る。

【００７７】 本発明はまた、活性成分としての開示されるシクロスポリンの投与を含む、免
疫調節異常を罹患している患者を処置する方法に関する。

【００７８】 免疫不整（ｉｍｍｕｎｏｉｒｒｅｇｕｌａｒｉｔｙ）により引き起こされるこ
れらの状態および疾患の処置のために、重水素化シクロスポリンは、経口、局所
的、非経口、吸入スプレーにより、または従来の非毒性の薬学的に受容可能なキ
ャリア、アジュバント、およびビヒクルを含む投薬単位処方物で直腸から、投与
され得る。本明細書中で使用されるとおり、用語非経口は、皮下注射、静脈、筋
肉内、胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌ）注射または注入法を含む。

【００７９】 活性生物を含む薬学的組成物は、例えば、錠剤、トローチ、飴剤、水性もしく
は油性懸濁液、分散可能な粉末もしくは顆粒、エマルジョン、硬もしくは軟カプ
セル、またはシロップ剤もしくはエリキシル剤として、経口使用に適した形態に
あるものであり得る。経口使用を意図する組成物は、薬学的組成物の製造につい
て当該分野で公知である任意の方法に従い調製され得、そしてそのような組成物
は、薬学的に洗練された、そして口に合う調製物を提供するために、甘味料、香
味料、着色料、および保存料からなる群より選択される１種以上の薬剤を含み得
る。活性成分を非毒性の薬学的に受容可能な賦形剤との混合物中に含む錠剤がま
た、公知の方法により製造され得る。使用される賦形剤は、例えば（１）炭酸カ
ルシウム、乳糖、リン酸カルシウム、またはリン酸ナトリウムのような不活性な
希釈剤；（２）コーンスターチ、またはアルギニン酸のような顆粒化および崩壊
剤；（３）デンプン、ゼラチン、またはアカシアのような結合剤、および（４）
ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクのような潤滑剤であり
得る。錠剤は未コーティングであり得るか、またはそれらは、胃腸管での分解お
よび吸収を遅らせ、そしてそれにより長時間にわたる持続した作用を提供するた
めに、公知の方法によりコーティングされ得る。例えば、モノステアリン酸グリ
セリル、またはジステアリン酸グリセリルのような時間遅延物質が用いられ得る
。錠剤はまた、制御された放出のための浸透性治療用錠剤を形成するために、米
国特許第４，２５６，１０８号；第４，１６０，４５２号；および第４，２６５
，８７４号において記載される技術によりコーティングされ得る。

【００８０】 いくつかの場合において、経口使用のための処方物は硬ゼラチンカプセルの形
態にあるものであり得、ここで活性成分は、例えば炭酸カルシウム、リン酸カル
シウム、またはカオリンのような不活性固体希釈剤と混合されている。それらは
また、軟ゼラチンカプセルの形態にあるものであり得、ここで活性成分は、水、
または例えば落花生油、液体パラフィン、またはオリーブ油のような油媒体と混
合されている。

【００８１】 水性懸濁液は通常、活性物質を、水性懸濁液の製造に適した賦形剤との混合物
中で含む。そのような賦形剤は、以下のものであり得る： （１）カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキ
シプロピルメチルセルロース、アルギニン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン
、トラガカントゴム、およびアカシアゴムのような、懸濁剤； （２）以下のものであり得る懸濁剤または湿潤剤： （ａ）レシチンのような天然に生じるリン脂質、 （ｂ）例えばポリオキシエチレンステアレートのような、アルキレンオキシ
ドの脂肪酸との縮合生成物、 （ｃ）例えばヘプタデカエチレンオキシセタノールのような、エチレンオキ
シドの長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、 （ｄ）ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエートのような、エチレン
オキシドの、脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生
成物、または （ｅ）例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートのような、エチ
レンオキシドの、脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導される部分エステル
との縮合生成物。

【００８２】 水性懸濁液はまた、１種以上の保存料（例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル
またはｎ−プロピル）；１種以上の着色料；１種以上の香味料；および１種以上
の甘味料（例えば、ショ糖、アスパルテーム、またはサッカリン）を含み得る。

【００８３】 油性懸濁液は、活性成分を、植物油（例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油
、またはココナッツ油）に、または液体パラフィンのような鉱物油に懸濁するこ
とにより処方され得る。油性懸濁液は、濃化剤（例えば蜜鑞、硬パラフィン、ま
たはセチルアルコール）を含み得る。甘味料および香味料は、口に合う経口調製
物を提供するために加えられ得る。これらの組成物は、アスコルビン酸のような
抗酸化剤を加えることにより、保存され得る。

【００８４】 分散可能な粉末および顆粒は、水性懸濁液の調製に適している。それらは、活
性成分を、分散剤もしくは湿潤剤、懸濁剤、および１種以上の保存剤との混合物
として提供する。適した分散剤または湿潤剤、および懸濁剤は、上記ですでに記
述されたものにより例示される。さらなる賦形剤、例えば上記で記載される甘味
料、香味料、および着色料もまた、存在し得る。

【００８５】 本発明の薬学的組成物はまた、水中油エマルジョンの形態にあるものであり得
る。油相は、オリーブ油または落花生油のような植物油、または液体パラフィン
のような鉱物油、あるいはそれらの混合物であり得る。適した乳化剤は以下のも
のであり得る：（１）アカシアゴムおよびトラガカントゴムのような天然に生じ
るゴム、（２）ダイズおよびレシチンのような天然に生じるリン脂質、（３）脂
肪酸およびヘキシトール無水物から誘導されるエステルまたは部分エステル（例
えば、ソルビタンモノオレエート）、（４）上述の部分エステルのエチレンオキ
シドとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）
。エマルジョンはまた、甘味料および香味料を含み得る。

【００８６】 シロップ剤およびエリキシル剤は、甘味料（例えば、グリセロール、プロピレ
ングリコール、ソルビトール、アスパルテーム、またはショ糖）とともに処方さ
れ得る。そのような処方物はまた、粘滑剤、保存剤、ならびに香味料および着色
料を含み得る。

【００８７】 薬学的組成物は、滅菌の注入可能な水性または油質懸濁液の形態にあるもので
あり得る。この懸濁液は、上記で記載された適した分散もしくは湿潤剤、および
懸濁剤を使用して、公知の方法に従って処方され得る。滅菌の注入可能な調製物
はまた、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤または溶媒中の滅菌の注入可能な
溶液または懸濁液（例えば１，３−ブタンジオールの溶液として）であり得る。
受容可能なビヒクルおよび溶媒のなかで、用いられ得るのは、水、リンゲル液、
および等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌不揮発性油が、溶媒また
は懸濁媒体として習慣的に用いられる。この目的のために、合成モノ−またはジ
グリセリドを含む任意の調合不揮発性油が用いられ得る。さらに、オレイン酸の
ような脂肪酸が、注入可能物の調製における使用を見いだしている。

【００８８】 開示されるシクロスポリンはまた、薬物の直腸投与のための坐剤の形態で投与
され得る。これらの組成物は、薬物を適した非刺激性の賦形剤（これは通常の温
度では固体であるが、直腸温度では液体であり、そしてそれ故に直腸内で融けて
薬物を放出する）と混合することにより調製され得る。そのような物質は、ココ
アバターおよびポリエチレングリコールである。

【００８９】 局所的使用のために、開示されるシクロスポリンを含むクリーム、軟膏、ゼリ
ー、溶液、または懸濁液などが、用いられる。

【００９０】 約０．０５ｍｇ〜約５０ｍｇ／体重ｋｇ／日の程度の投薬レベルが、上記で示
される状態の処置において有用である（約２．５ｍｇ〜約２．５ｇ／患者／日）
。

【００９１】 単一の投薬形態を生成するためにキャリア物質と合わせられ得る活性成分の量
は、処置される宿主、および投与の特定の形態に依存して変化する。例えば、ヒ
トの経口投与を予定する処方物は、２．５ｍｇ〜２．５ｇの合成された活性剤を
、全組成物の約５〜約９５％変化し得る、適切なそして簡便な量のキャリア物質
とともに含み得る。投薬単位形態は一般に、約５ｍｇ〜約５００ｍｇの活性成分
を含む。

【００９２】 しかしながら、任意の特定の患者のための特定の投薬レベルが、用いられる特
定の化合物の活性、年齢、体重、身体全体の健康、性別、規定食、投与の時間、
投与の経路、排出速度、薬物の組合せ、および治療を受けている特定の疾患の重
篤度を含む種々の因子に依存する。

【００９３】 本明細書中で列挙される全ての参考文献は、参考として援用される。コンフリ
クトする場合、出願の文章が調節される。開示される化合物および方法の修飾お
よび変更は当業者に明らかである。そのような修飾および変更は、本開示および
本明細書に添付される特許請求の範囲により包含されることが意図される。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１は、アミノ酸３位に重水素化部位を示す、シクロスポリンＡの構造である
。

【図２】 図２は、アミノ酸９位に重水素化部位を示す、シクロスポリンＡの構造である
。

【図３】 図３は、シクロスポリン誘導体の合成のスキームＩである。

【図４】 図４は、シクロスポリン誘導体の合成のスキームＩＩである。

【図５】 図５は、実施例９のカルシニュリンアッセイの結果のグラフである。

【図６】 図６は、実施例１０の混合リンパ球反応アッセイの結果のグラフである。

【手続補正書】

【提出日】平成１２年１１月１６日（２０００．１１．１６）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

【化１】 ここで： Ｒは： （ｉ）重水素； （ｉｉ）１〜１６個の炭素原子の飽和または不飽和の直鎖または分岐脂肪族炭
素鎖であって、そして必要に応じて、１個以上の、重水素原子、あるいは該炭素
鎖のエステル、ケトン、またはアルコールを含み、そして必要に応じて、ハロゲ
ン、ニトロ、アミノ、アミド、芳香族、および複素環式から選択される置換基を
１個以上含む； （ｉｉｉ）１個以上の重水素原子を含む芳香族または複素環式基；または （ｉｖ）メチル基、であり；そして Ｘ、Ｙ、およびＺは水素または重水素であるが、ただしＲがメチル、エチル、 フェニル、 または−ＣＨ₂ＯＨである場合、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち少なくとも １個は重水素であり；そしてここでＲ’はＯＨまたはアセテートまたは他のエス
テルであるか、あるいはＯであって、そしてアミノ酸１の二重結合に隣接する炭
素と一緒に複素環式環を形成する。

【化２】 ここで： Ｒは： （ｉ）重水素； （ｉｉ）１〜１６個の炭素原子の飽和または不飽和の直鎖または分岐脂肪族炭
素鎖であって、そして必要に応じて、１個以上の重水素原子を含み、そして必要
に応じて、ハロゲン、ニトロ、アミノ、アミド、芳香族、および複素環式から選
択される置換基を１個以上含む；または （ｉｉｉ）１個以上の重水素原子を含む芳香族または複素環式基、であり； Ｘ、Ｙ、およびＺは水素または重水素であり；そして Ｒ’はＯＨまたはアセテートまたは他のエステルであるか、あるいはＯであっ
て、そしてアミノ酸１の二重結合に隣接する炭素と一緒に複素環式環を形成し、
ただし、Ｒが重水素原子を含まない場合は、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくと
も１個は重水素である。

【化３】

【化４】

【化５】 ここで： Ｒは、水素、必要に応じてニトロ、アミノ、およびアミドから選択される置換
基を１個以上含む、２〜１６個の炭素原子の不飽和の直鎖または分岐脂肪族炭素
鎖であり；そして Ｒ’は、ＯＨであるか、あるいはＯであって、そしてアミノ酸１の二重結合に
隣接する炭素と一緒に複素環式環を形成する。

【化６】

【化７】

【化８】

【化９】

【化１０】

【化１１】

【化１２】

【化３１】 （ここで、Ｒは−ＣＤ₃であり、そしてＲ’は−ＯＣＯＣＨ₃または−Ｈである） 。

【化１３】 ここで、Ｒは、Ｈ、Ｄ、−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＤ₂、−Ｃ Ｄ＝ＣＤ₂、−ＣＨ＝ＣＨ₂、または−ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃であり、Ｘ、Ｙ、および Ｚは水素であり、そしてＲ’はアセテートであり、 該方法は、式（２）：

【化１４】 のアルデヒドを式（３）： ＲＣＨ＝ＰＰｈ₃Ｐ⁺Ｉ^- （ここで、Ｒは、上記で定義した通りである）のウィティッヒ試薬を用いて、必
要に応じて水酸化ナトリウムの存在下で、縮合する工程を包含する、方法。

【化１５】 ここで、Ｒは、Ｈ、Ｄ、−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＤ₂、−Ｃ Ｄ＝ＣＤ₂、−ＣＨ＝ＣＨ₂、または−ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃であり、Ｘ、Ｙ、および Ｚは水素であり、そしてＲ’は−ＯＨであり、 該方法は、式（Ｉ）の化合物（ここでＲ’はアセテートである）を炭酸カリウム
で処理する工程を包含する、方法。

【化１６】 ここで、Ｒは、Ｄまたは−ＣＤ₃であり、そしてＲ’は−ＯＨであり、 該方法は、式（４）：

【化１７】 のアルデヒドを以下の式： ＲＣＤ＝ＰＰｈ₃Ｐ⁺Ｉ^- （ここで、Ｒは、上記で定義した通りである）のウィティッヒ試薬を用いて縮合
し、続いて炭酸カリウムで処理する工程を包含する、方法。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４１

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４１】

【化１９】 ここで、Ｒは（ｉ）重水素であるか、または（ｉｉ）２〜１６個の炭素原子の飽
和または不飽和の直鎖または分岐脂肪族鎖であって、そして１個以上の重水素原
子、あるいは炭素鎖のエステル、ケトン、またはアルコールを含み、そして必要
に応じて、ハロゲン、ニトロ、アミノ、アミド、芳香族、および複素環式から選
択される置換基を１個以上含むか、または（ｉｉｉ）Ｒは、必要に応じて重水素
原子を含む芳香族または複素環式基であるか、または（ｉｖ）Ｒはメチル基であ
り、そしてＸ、Ｙ、およびＺは水素または重水素であるが、ただしＸ、Ｙ、およ
びＺのうち少なくとも１個は重水素であり、そしてＲ’はＯＨまたはエステルで
あるか、あるいはＯであって、そしてアミノ酸１の二重結合に隣接する炭素と一
緒に五員環のような複素環式環を形成し、ここでヘテロ原子は酸素である。本発
明の他の特定の実施態様は、式ＩのＣｓＡ誘導体を含み、ここでＲは、１個以上
の重水素を含む、２〜３個の炭素原子の飽和または不飽和の炭素鎖である。さら
なる特定の実施態様は、以下の式５ｇおよび５ｅのものを含む：

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ， ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，Ｄ Ｋ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ， ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，Ｌ Ｕ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ， ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，Ｕ Ｇ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (71)出願人 アイソテクニカ インコーポレイテッド カナダ国 ティー５エス １イー８ アル バータ， エドモントン， 108 アベニ ュー 17208 (72)発明者 ナイッカー， エス． セルバラージ カナダ国 ティー６ジェイ ３ジェイ４ アルバータ， エドモントン， 117ティ ーエイチ ストリート 3304 (72)発明者 ヤッツコフ， ランドール ダブリュー. カナダ国 ティー６アール ２ビー７ ア ルバータ， エドモントン， ブッカナン クローズ 215 (72)発明者 フォスター， ロバート ティー. カナダ国 ティー６ジェイ １エックス９ アルバータ， エドモントン， 120 ストリート 4211 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA06 AA07 BA01 BA09 BA18 BA24 MA01 NA05 NA07 NA14 ZB022 ZB082 ZB112 ZB322 ZB392 4H045 AA10 AA20 AA30 BA16 BA35 BA51 EA22 GA22 HA03

Claims (26)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 シクロスポリンＡ誘導体、もしくはその薬学的に受容可能な
   塩：ここで、１、３、および９、またはそれらの組み合わせからなる群から選択
   されるアミノ酸位置における、１個以上の水素原子は重水素原子で置換されてお
   り、そしてここで該シクロスポリンＡ誘導体は必要に応じて、アミノ酸９位にお
   いて化学的に置換される。
2. 【請求項２】 式（Ｉ）によって表されるシクロスポリンＡ誘導体、もしく
   はその薬学的に受容可能な塩： 【化１】 ここで： Ｒは： （ｉ）重水素； （ｉｉ）１〜１６個の炭素原子の飽和または不飽和の直鎖または分岐脂肪族炭
   素鎖であって、そして必要に応じて、１個以上の、重水素原子、あるいは該炭素
   鎖のエステル、ケトン、またはアルコールを含み、そして必要に応じて、ハロゲ
   ン、ニトロ、アミノ、アミド、芳香族、および複素環式から選択される置換基を
   １個以上含む； （ｉｉｉ）１個以上の重水素原子を含む芳香族または複素環式基；または （ｉｖ）メチル基、であり；そして Ｘ、Ｙ、およびＺは水素または重水素であるが、ただしＲがメチルまたは−Ｃ
   Ｈ₂ＯＨである場合、Ｘ、Ｙ、およびＺのうち少なくとも１個は重水素であり； そしてここでＲ’はＯＨまたはアセテートまたは他のエステルであるか、あるい
   はＯであって、そしてアミノ酸１の二重結合に隣接する炭素と一緒に複素環式環
   を形成する。
3. 【請求項３】 式（ＩＩ）によって表されるシクロスポリンＡ誘導体、もし
   くはその薬学的に受容可能な塩： 【化２】 ここで： Ｒは： （ｉ）重水素； （ｉｉ）１〜１６個の炭素原子の飽和または不飽和の直鎖または分岐脂肪族炭
   素鎖であって、そして必要に応じて、１個以上の重水素原子を含み、そして必要
   に応じて、ハロゲン、ニトロ、アミノ、アミド、芳香族、および複素環式から選
   択される置換基を１個以上含む；または （ｉｉｉ）１個以上の重水素原子を含む芳香族または複素環式基、であり； Ｘ、Ｙ、およびＺは水素または重水素であり；そして Ｒ’はＯＨまたはアセテートまたは他のエステルであるか、あるいはＯであっ
   て、そしてアミノ酸１の二重結合に隣接する炭素と一緒に複素環式環を形成し、
   ただし、Ｒが重水素原子を含まない場合は、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくと
   も１個は重水素である。
4. 【請求項４】 請求項３に記載のシクロスポリンＡ誘導体、もしくはその薬
   学的に受容可能な塩： Ｒは： （ｉ）重水素；または （ｉｉ）１〜１６個の炭素原子の飽和または不飽和の直鎖または分岐脂肪族炭
   素鎖であって、そして必要に応じて、１個以上の重水素原子を含み、そして必要
   に応じて、ハロゲン、ニトロ、アミノ、あるいはアミドから選択される置換基を
   １個以上含む； Ｘ、Ｙ、およびＺは水素または重水素であり；そして Ｒ’はＯＨまたはアセテートであり、ただし、Ｒが重水素原子を含まない場合
   は、Ｘ、Ｙ、およびＺのうちの少なくとも１個は重水素である。
5. 【請求項５】 請求項４に記載のシクロスポリンＡ誘導体：ここで、Ｒが、
   −Ｄ、ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＤ−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＤ₃、−ＣＤ＝ＣＤ−Ｃ Ｄ₃、−ＣＤ＝ＣＨ−ＣＤ＝ＣＤ−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＤ−ＣＤ₃、 −ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＤ₂、−ＣＤ＝ＣＨ−ＣＤ＝ＣＤ₂、−ＣＨ＝ＣＤ₂、ま たは−ＣＤ＝ＣＤ₂であり； Ｘ、Ｙ、およびＺは、水素であり；そして Ｒ’は、ＯＨである。
6. 【請求項６】 式（ＩＩＩ）を有する、請求項５に記載のシクロスポリンＡ
   誘導体、またはその薬学的に受容可能な塩： 【化３】
7. 【請求項７】 式（ＩＶ）を有する、請求項５に記載のシクロスポリンＡ誘
   導体、またはその薬学的に受容可能な塩： 【化４】
8. 【請求項８】 式（Ｖ）によって表されるシクロスポリンＡ誘導体、または
   その薬学的に受容可能な塩： 【化５】 ここで： Ｒは、水素、必要に応じてニトロ、アミノ、およびアミドから選択される置換
   基を１個以上含む、２〜１６個の炭素原子の不飽和の直鎖または分岐脂肪族炭素
   鎖であり；そして Ｒ’は、ＯＨであるか、あるいはＯであって、そしてアミノ酸１の二重結合に
   隣接する炭素と一緒に複素環式環を形成する。
9. 【請求項９】 式（ＶＩ）を有する、請求項８に記載のシクロスポリンＡ誘
   導体、またはその薬学的に受容可能な塩： 【化６】
10. 【請求項１０】 式（ＶＩＩ）を有する、請求項８に記載のシクロスポリン
    Ａ誘導体、またはその薬学的に受容可能な塩： 【化７】
11. 【請求項１１】 請求項２に記載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬学
    的に受容可能な塩および薬学的に受容可能なキャリアを含有する薬学的組成物。
12. 【請求項１２】 請求項３〜７のいずれかに記載のシクロスポリンＡ誘導体
    またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能なキャリアを含有する
    薬学的組成物。
13. 【請求項１３】 請求項８〜１０のいずれかに記載のシクロスポリンＡ誘導
    体またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能なキャリアを含有す
    る薬学的組成物。
14. 【請求項１４】 被験体において免疫抑制を提供するのに使用される方法の
    ための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項２に記載のシクロスポ
    リンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能なキャリ
    アを含有する、薬学的組成物。
15. 【請求項１５】 被験体において免疫抑制を提供するのに使用される方法の
    ための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項３〜７のいずれかに記
    載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的に受
    容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
16. 【請求項１６】 被験体において免疫抑制を提供するのに使用される方法の
    ための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項８〜１０のいずれかに
    記載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的に
    受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
17. 【請求項１７】 被験体において自己免疫性疾患を予防または改善するのに
    使用される方法のための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項２に
    記載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的に
    受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
18. 【請求項１８】 被験体において自己免疫性疾患を予防または改善するのに
    使用される方法のための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項３〜
    ７のいずれかに記載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩
    および薬学的に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
19. 【請求項１９】 被験体において自己免疫性疾患を予防または改善するのに
    使用される方法のための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項８〜
    １０に記載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩および薬
    学的に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
20. 【請求項２０】 以下からなる群から選択されるシクロスポリンＡ誘導体、
    またはその薬学的に受容可能な塩： 【化８】 【化９】 【化１０】 【化１１】 【化１２】
21. 【請求項２１】 請求項２０に記載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬
    学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成
    物。
22. 【請求項２２】 被験体において免疫抑制を提供するのに使用される方法の
    ための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項２０に記載のシクロス
    ポリンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能なキャ
    リアを含有する、薬学的組成物。
23. 【請求項２３】 被験体において自己免疫性疾患を予防または改善するのに
    使用される方法のための薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、請求項２０
    に記載のシクロスポリンＡ誘導体またはその薬学的に受容可能な塩および薬学的
    に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
24. 【請求項２４】 式（Ｉ）のシクロスポリンＡ誘導体を調製するための方法
    であって： 【化１３】 ここで、Ｒは、Ｈ、Ｄ、−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＤ₂、−Ｃ Ｄ＝ＣＤ₂、−ＣＨ＝ＣＨ₂、または−ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃であり、Ｘ、Ｙ、および Ｚは水素であり、そしてＲ’はアセテートであり、 該方法は、式（２）： 【化１４】 のアルデヒドを式（３）： ＲＣＨ＝ＰＰｈ₃Ｐ⁺Ｉ^- （ここで、Ｒは、上記で定義した通りである）のウィティッヒ試薬を用いて、必
    要に応じて水酸化ナトリウムの存在下で、縮合する工程を包含する、方法。
25. 【請求項２５】 式（Ｉ）の化合物を調製する方法であって： 【化１５】 ここで、Ｒは、Ｈ、Ｄ、−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＤ₃、−ＣＨ＝ＣＤ₂、−Ｃ Ｄ＝ＣＤ₂、−ＣＨ＝ＣＨ₂、または−ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃であり、Ｘ、Ｙ、および Ｚは水素であり、そしてＲ’は−ＯＨであり、 該方法は、式（Ｉ）の化合物（ここでＲ’はアセテートである）を炭酸カリウム
    で処理する工程を包含する、方法。
26. 【請求項２６】 式（Ｉ）の化合物を調製する方法であって： 【化１６】 ここで、Ｒは、Ｄまたは−ＣＤ₃であり、そしてＲ’は−ＯＨであり、 該方法は、式（４）： 【化１７】 のアルデヒドを以下の式： ＲＣＤ＝ＰＰｈ₃Ｐ⁺Ｉ^- （ここで、Ｒは、上記で定義した通りである）のウィティッヒ試薬を用いて縮合
    し、続いて炭酸カリウムで処理する工程を包含する、方法。