JP2001518107A - 腫瘍壊死因子（ｔｎｆ）の過剰産生により特徴づけられる病的状態の処置のための医薬を調製するための動物器官から抽出可能なタンパク質類の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 ほ乳類の肝臓、特にヤギの肝臓から過塩素酸を用いて抽出可能なタンパク質類は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の血中濃度を低下させることができるので、ＴＮＦの過剰産生によって特徴づけられる多発性硬化症、リウマチ様関節炎、敗血症性ショック及び他の病状の処置に使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】 腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の過剰産生により特徴づけられる病的状態の処置のた めの医薬を調製するための動物器官から抽出可能なタンパク質類の使用 本発明は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の過剰産生により特徴づけられる病的状態 の処置のための医薬を調製するための、動物器官から抽出可能なタンパク質類の 使用に関する。 カケクチンとしても知られるＴＮＦは、感染症及びがんにおける免疫応答の引 金を引く他のサイトカイン類及び因子類の連鎖反応の開始においてＩＬ−１と共 に重要な役割を担っている前炎症サイトカインである。この応答は、感染症及び 転移性過程の完全な消散に卓越しているが、非制御された方法で生ずることがで き、したがって宿主に障害を与える。ＴＮＦ過剰産生は、敗血症性ショック、腫 瘍悪液質、自己免疫疾患群(リウマチ様関節炎、多発性硬化症)、髄膜炎菌性敗血 症、Chron疾患等のような多数の病的状態に関与すると考えられている。 WO92/10197は、ほ乳類の器官から過塩素酸で抽出可能なタンパク質画分及びそ れらの抗がん剤としての用途を開示している。これらの画分中には、３つの主要 成分が同定でき、ゲル電気泳動による分子量はそれぞれ５０、１４及び１０kDa である。以下、これら３つの成分を含有する精製された抽出物をＵＫ １０１と いうであろう。上述の活性について応答することができる唯一のタンパク質では ないにしても主要成分であるこの１４kDa成分の配列が、WO96/02567に報告され ており、他の著者ら（Levy−Favatier，Eur．Biochem．1903，212（3）665-73） によって記載されている配列と関連することが判明し、該著者らは新規に同定さ れた配列がシャペロニン類として知られるタンパク質の群に属するものと推定し ており、この群にはＨＳＰｓ（熱ショックタンパク質類）自体が属する。 WO92/10197に記載されたタンパク質類及びWO96/02567に記載されたタンパク質 類（以下、ＵＫ １１４という）は、シャペロニン類やこれに類似のタンパク質 類においてこれまでに観察されていない性質を示す。特に、該タンパク質が、Ｔ ＨＦの血中濃度を顕著に低下させることができること、それ故、それらはＴＮＦ の過剰産生に特徴づけられる病的状態の処置に使用することができること が現今見出された。 本発明は、特に精製されたタンパク質ＵＫ １１４の使用に関する。 更に、本発明はＵＫ １１４に対して少なくとも８０％、特に９０％以上の高 い相同性を示すタンパク質の使用を含む。 タンパク質ＵＫ １０１及びＵＫ １１４の活性は、以下に報告されるように、 イン・ビトロで末梢血由来の単核白血球において、及びイン・ビボでマウス脾細 胞による産生に対するＵＫ １０１の投与の効果を評価することによって証明さ れてきている。 イン・ビトロ試験 末梢血由来単核白血球（ＰＢＭＣ）を、１０⁶個／mlの濃度において、イン・ ビトロで、リポ多糖（１００ng/ml）と共に、４時間、ＵＫ １１４（１μg/ml、 及び１０μg/ml）の不在下又は存在下で刺激した。 ＴＮＦ濃度をＥＬＩＳＡにより測定した。 結果 ＰＢＭＣによるＴＮＦ産生は、イン・ビトロでＵＫ １１４の添加によって阻 害された。 この低下は、ＵＫ １１４の用量１μg/mlでは９０％、ＵＫ １１４の用量１ ０μg/mlでは７０％であった。 イン・ビボ試験 処置： マウスを、１００μｇ／マウスのＵＫ １０１で隔日に１５日間（７回注射） 処置した。 最初の注射後４８時間後及び最後の投与から４８時間後にＴＮＦを測定した。 細胞の調製及びＴＮＦ測定 脾細胞（４×１０⁶個/ml）を、１０μg/mlのポリクローナルマイトジェンであ るコンカナバリン−Ａ（With-A）存在下、３７℃、５％ＣＯ₂において４８時間 培養した。 上清中に遊離したＴＮＦの産生量を、免疫酵素法（ＥＬＩＳＡ）を用いて求め た。 結果 ＵＫ １０１での処置は、マウス脾細胞によるＴＮＦ産生を顕著に減少させた 。この効果は最初の投与後４８時間で明らかになり、第７回目の投与後４８時間 にも依然として存在する。 ＴＮＦ、pg／ml 生理食塩水 ＵＫ−１０１ 第１回目投与後４８時間 ３８７±７２ ２４７±３０° 第７回目投与後４８時間 ３６６±４６ ２６４±７６．１° °＝ｐ値 したがって、ＵＫ １０１及びＵＫ １１４は、多発性硬化症、リウマチ様関節 炎、腫瘍形態、敗血症性ショック、Chron疾患等のようなＴＮＦの過剰産生に特 徴づけられる病的状態の進行を緩和しあるいは阻止することができる。 本発明のタンパク質類は、適当な処方、好ましくは注射可能な形態で投与する ことができる。 投与手順（投与量、投与頻度等）は、状況に応じて、患者の状態、疾患の進行 度のような多数の因子に依存する環境に従って決定されるだろう。それでもやは り、１〜１００mgの範囲の１日用量が適当であろう。

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Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．ＴＮＦ過剰産生によって特徴づけられる病状の予防及び処置のための医薬類 の調製のためのほ乳類の肝臓からの過塩素酸で抽出可能なタンパク質類の使用。 ２．前記タンパク質が下記の配列： を有する、請求項１に記載の使用。 ３．用いられる前記タンパク質が、請求項２記載のタンパク質と比べて少なくと も８０％の相同性を有するタンパク質である、請求項１に記載の使用。