JP2001511652A - サトウキビの生産 - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.下記の工程: (1)外植体から未熟胚を培養する工程、 (2)これらの未熟胚から成熟したサトウキビの体細胞胚を培養する工程 を有すること特徴とするサトウキビ外植体からサトウキビの体細胞胚を製造する ことを含む方法。 2.少なくとも工程(2)が、懸濁液培養で行われる請求項1に記載の方法。 3.工程(1)における胚発生組織の成長及び続く工程(2)における胚の成熟 への発育が、液体培地中で行われる請求項1又は2に記載の方法。 4.サトウキビ植物が、サトウキビ植物の形質形成分裂組織又は分裂組織細胞に 由来する請求項1〜3のいずれかに記載の方法。 5.外植体材料が、根由来又は成熟した胚を含む請求項1〜4のいずれかに記載 の方法。 6.外植体材料が、サトウキビ植物材料にストレスを加えることにより導かれる 成熟胚を含む請求項5に記載の方法。 7.ストレスが、植物材料を冷却することにより行われる請求項6に記載の方法 。 8.植物材料を5〜15℃にて1〜3ヶ月間冷却する請求項7に記載の方法。 9.ストレスが、アルコール処理により行われる請求項6〜8のいずれかに記載 の方法。 10.外植体から未熟胚を培養する方法(工程1)が、下記の工程: a)培地で外植体材料を培養して体細胞胚を形成する工程、 b)外植体材料に由来する体細胞を選別又は増殖させる工程、 c)体細胞を、ある期間培地で培養し、その体細胞から未熟なサトウキビ胚を 誘導する工程 を含む請求項1〜9のいずれかに記載の方法。 11.固体培地で胚発生カルスとして、或いは液体培地における又は固体及び液 体培地の両方の組合せにおける胚発生細胞の懸濁培養として、未熟胚を、成長開 始させ、そしてそれを維持する請求項1〜10のいずれかに記載の方法。 12.オーキシン、シトキニン、ギベレリン、離層酸、抗オーキシン、キネチン 、ゼアチン及び/又は活性炭等の植物成長調整剤を、培地処方中に、単独或いは 組み合わせて含む請求項1〜11のいずれかに記載の方法。 13.主な炭水化物構成成分としてスクロースを含む培地中で実施する請求項1 〜12のいずれかに記載の方法。 14.使用されるスクロース濃度が10〜60g/Lの範囲にある請求項13に 記載の方法。 15.外植体材料が、ワックスで被覆した露出した切断端部を有するサトウキビ 植物組織に由来する請求項1〜14のいずれかに記載の方法。 16.実質的に体細胞のみの選択を、培養材料のふるい分け、熱処理又は攪拌の 内の少なくとも1手段を施すことにより行う請求項1〜15のいずれかに記載の 方法。 17.100〜50μmメッシュサイズの第1の篩い、及び続く50〜38μm メッシュサイズの第2の篩いを用いる請求項16に記載の方法。 18.未成熟胚の形成中に、明暗サイクルを使用する請求項1〜17のいずれか に記載の方法。 19.未成熟胚の培養が、副次培養のために新しい培地を用いて、初期培養から 副次培養を成長させることを包含する請求項1〜3及び8〜18のいずれかに記 載の方法。 20.外植体の初期培養が、固体培地上で外植体から胚発生カルスの培養を開始 させ、次いで液体培地中で外植体から胚発生カルスを副次培養して、胚発生細胞 懸濁培養液を確立、維持する工程を包含する請求項1〜19のいずれかに記載の 方法。 21.葉外植体由来の培養液を使用し、カルス初期固体培地及び胚発生懸濁液体 培地の構成成分としてアスコルビン酸を包含する請求項1〜20のいずれかに記 載の方法。 22.カルスからの懸濁培養の開始が、約50〜200mg/Lのアスコルビン 酸を含んだ状態で行われる請求項21に記載の方法。 23.カルスからの懸濁培養の開始が、アスコルビン酸とクエン酸を含んだ状態 で行われる請求項21又は22に記載の方法。 24.液体培地中にアブシジン酸を含む請求項1〜23のいずれかに記載の方法 。 25.未成熟胚からサトウキビの成熟体細胞胚の培養が、下記の工程: (1)外植体から未熟胚の液体懸濁培養液を調製する工程、 (2)この懸濁液をバイオ反応器で培養し、体細胞胚を形成する工程 を含むことを特徴とする請求項1〜24のいずれかに記載の方法。 26.工程(1)及び工程(2)の培養が、バイオ反応器で行われる請求項25 に記載の方法。 27.形成された成熟胚が、発芽前にカプセル化される請求項1〜26のいずれ かに記載の方法。 28.カプセル化剤が、穀類の粉/水ペーストを含む請求項27に記載の方法。 29.穀類の粉が、モロコシ穀粉である請求項28に記載の方法。 30.工程(2)で使用される根由来培養が、粘ちょう性材料を産出し、この産 出が約35℃で、無菌条件において、根を水中に沈めて行われる請求項1〜29 のいずれかに記載の方法。 31.工程(2)において、根由来未成熟胚を、次いで2,4−Dオーキシンを 実質的に含まない液体培地に移送する請求項30に記載の方法。 32.工程(2)において、2,4−Dオーキシンを含まない液体培地に移送さ れた葉及び苗条由来懸濁培養体、活性炭又は他の酸化防止剤が、培地中に含まれ ている請求項1〜31のいずれかに記載の方法。 33.カプセル化が、下記の工程: (1)穀粉/水混合物を形成する工程、 (2)このペーストに体細胞胚を加える工程、 (3)ペースト中にカプセル化された個々の胚を水中に入れて、胚の周囲にカ プセルを形成する工程、 (4)そのカプセルを乾燥する工程 を含むことを特徴とする請求項27に記載の方法。 34.乾燥(工程(4))の前に、カプセルを殺菌剤及び/又は殺バクテリア剤 等の殺微生物剤に浸漬することを特徴とする請求項33に記載の方法。 35.乾燥(工程(4))の前の胚のカプセル化が、下記の工程: a)アルギン酸ナトリウムをカプセルに加える工程、 b)次いでそのカプセルを塩化カルシウム溶液に入れる工程 をさらに含むことを特徴とする請求項33に記載の方法。 36.サトウキビ苗を、体細胞胚の成熟により生産し、胚の発芽による若木を植 え、これにより個々の体細胞胚を、ポリテンフォーム上に担持された液体培地中 で培養することを特徴とする請求項1〜35のいずれかに記載の方法。 37.体細胞胚が、遅い魚雷型段階にあり、そして2,4−Dオーキシンを含ま ない液体培地で培養し、そしてこの液体培地がアブシジン酸(ABA)を含むこ とを特徴とする請求項36に記載の方法。 38.下記の工程: (1)外植体から未熟胚を培養する工程、 (2)これらの未熟胚から成熟したサトウキビの体細胞胚を培養する工程 を含む方法により得られるサトウキビの体細胞胚。 39.下記の工程: (1)外植体から未熟胚を培養する工程、 (2)これらの未熟胚から成熟したサトウキビの体細胞胚を培養する工程、 (3)これらの体細胞胚を発芽させて、少なくとも1種のサトウキビ植物を形 成する工程 を含む方法により得られるサトウキビ植物。 40.上記方法が、工程(3)の前に、カプセル化剤中で、工程(2)において 形成される成熟した体細胞胚をカプセル化する付加工程を含むことを特徴とする 請求項39に記載のサトウキビ植物。 41.サトウキビ以外の植物源、特に木、ナツメヤシ及びジャガイモに由来する 植物材料に適用した場合の請求項1〜37のいずれかに記載の方法。
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