JP2001505763A

JP2001505763A - Ｈｉｖｐ―１７ペプチドフラグメント、それを含有する組成物並びにその製造及び使用方法

Info

Publication number: JP2001505763A
Application number: JP50985698A
Authority: JP
Inventors: ジマーマン，ダニエル・エイチ; サリン，プレム・エス
Original assignee: バイラル・テクノロジーズ・インコーポレーテツド
Priority date: 1996-08-09
Filing date: 1997-08-08
Publication date: 2001-05-08
Also published as: CA2262432A1; AU731367B2; US6258945B1; IL128412A0; WO1998006429A1; EP0969864A1; AU3910997A; CN1233187A

Abstract

(57)【要約】位置７５から位置１２９までに及ぶ領域を含む約３０な約５０個のアミノ酸のクレイドＣからのＨＩＶ−１のｐ１７ｇａｇタンパク質のペプチドフラグメントは、クレイドＡ、クレイドＢ、クレイドＥ及びｐ１７ｇａｇタンパク質の同じ範囲を占めないが重なる部分のペプチドを初めとする他のサブタイプを認識する抗体を生じる。目的のペプチドをコードするためにＤＮＡ配列を用いることができる。本発明のクレイドＣペプチドの例は以下の配列、

Description

【発明の詳細な説明】ＨＩＶＰ−１７ペプチドフラグメント、それを含有する組成物並びにその製造及び使用方法発明の背景（１）発明の分野本出願はヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）のＰ−１７ｇａｇタンパク質のある種のペプチドフラグメント、ペプチドフラグメントを含有する組成物、並びにワクチンを初めとする治療及び診断目的のためのその使用、ペプチドフラグメントをコードするＤＮＡ、並びにペプチドフラグメント及びそれらのフラグメントをコードするＤＮＡの製造及び使用方法に関する。より具体的には、本発明は約３０ないし約５０個のアミノ酸を有し、ｐ−１７ｇａｇタンパク質の共通Ｃクレイド（ＣｏｎｓｅｎｓｕｓＣｃｌａｄｅ）（サブタイプ）に相当する、すなわち、特定の株により、位置７５から１２９までのアミノ酸を含んだ領域に及ぶペプチドフラグメント及びこの領域をコードするＤＮＡフラグメントに関する。（２）先行技術の説明過去数年にわたって、まず、ＡＩＤＳの原因を同定するために詳細な研究がなされ、そして原因微生物としてＨＩＶと一般的に呼ばれるレトロウイルスが明白に同定された後は、遺伝的構成のより詳細な分析、分子生物学、発病学、生化学、ウイルス及び抗体の検出の非常に高感度の方法の開発、並びに処置、並びに治療に労力が集中している。これらの分野の全てにおいて大きな進歩がなされているが、なお、ＡＩＤＳの蔓延と効果的に闘うために多くの研究がなされなければならない。プロテアーゼインヒビターを利用する組み合わせ治療の非常に最近の開発は治療処置としてかなり成功しているが、それはなお非常に費用がかかり、且つあらゆる場合に有効ではない。それ故、非常に感染性のＨＩＶウイルスの蔓延と闘い、そしてすでに感染した個体において疾病を処置するための方法の依然として本質的な部分は、免疫系の適切な成分を刺激する有効なワクチン及び免疫療法剤の開発である。エピトープ認識に基づく防御抗体の同定により、ＡＩＤＳまたは前ＡＩＤＳ疾患の段階づけ及び／または診断のためのより有効な手段が与えられる。血清陽性個体のそのような段階づけ及び初期診断により、次に、血清陽性個体を処置するために適切な防御免疫反応を生じるようにワクチン接種を準備することができる。米国第４，９８３，３８７号には、ＨＩＶ−１のｐ１７ｇａｇタンパク質の少なくとも約位置９２から約位置１０９までに及ぶ抗原ペプチドが記述されており、特に、式のトリアコンタペプチドが記述されている。以下、ＨＧＰ−３０と称するこのトリアコンタペプチドはある臨床試験及びＳＣＩＤマウスでのインビボＨＩＶ攻撃研究において後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の原因微生物のＨＩＶに対する治療薬として有望な結果を示している。ＨＧＰ−３０及びｐ−１７ペプチドの利点の一つは、一般的に、このＨＩＶタンパク質が例えばエンベロープタンパク質よりＨＩＶのサブタイプ及び株にわたって高度に保存されている傾向があることである。実際、予防接種を受けた個体においてＨＧＰ−３０に対して生じた抗体が、ＨＧＰ−３０配列により表される株以外のものを表すペプチド配列に対して試験された場合に認識されることが見いだされている。異なるサブタイプに見いだされるように、１個または数個のアミノ酸の付加または欠失または置換のようにペプチドの性質を変えることはＢ及びＴ細胞の刺激、細胞障害性及びリンパ増殖反応のような異なる反応を誘導できることが知られているが、そのような操作がエピトープを認識する作製された抗体のサブクラスに影響を与えることができるかまたはその可能性があるかどうかを予測することは困難である。さらに、１つの特定の株またはサブタイプからのペプチドフラグメントに対して生じた抗体はしばしば、他の株またはサブタイプの対応するペプチド領域に対して生じた抗体に比較した場合に異なる免疫原性を示す。今回、意外にも、ＨＧＰ−３０に相当するが共通Ｃクレイドに由来するペプチドがＨＧＰ−３０より強く且つ広範な免疫反応を引き起こし、特に、共通Ｃ配列に対して生じた抗体が異なるサブタイプ及び株からのＨＩＶペプチドを認識することができ、ＨＧＰ−３０に対する抗体よりそれらに対して高い力価を生じることができることが見いだされ、そしてこのことが本発明の基礎をなす。従って、本発明は、ＨＩＶ微生物をアッセイするための診断補助としてそして／またはＡＩＤＳの処置もしくはＡＩＤＳの形成の抑制のための予防及び治療薬として有用で、Ｔ細胞エピトープ、好ましくはＢ細胞エピトープも保有し、そしてＨＩＶの異なるサブタイプ及び株に対して生じた抗体により認識される能力を有する新規なペプチドを提供する。発明の要約本発明はその一つの態様として以下の配列配列中、位置１のＸａａはＡｒｇ、ＬｙｓまたはＩｌｅであり；位置４のＸａａはＴｙｒ、ＰｈｅまたはＨｉｓであり；位置８のＸａａはＡｌａまたはＶａｌであり：位置９のＸａａはＴｈｒまたはＶａｌであり；位置１１のＸａａはＴｙｒまたはＴｒｐであり；位置１２のＸａａはＣｙｓまたはＳｅｒであり：位置１５のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり；位置１６のＸａａはＧｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＡｒｇであり；位置１８のＸａａはＧｌｕまたはＴｈｒであり：位置１９のＸａａはＶａｌまたはＩｌｅであり；位置２０のＸａａはＡｒｇまたはＧｌｎであり；位置２８のＸａａはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＧｌｕであり：位置２９のＸａａはＩｌｅまたはＬｅｕであり；位置３０のＸａａはＧｌｕまたはＬｙｓであり：位置３６のＸａａはＩｌｅ、ＳｅｒまたはＣｙｓであり；位置４０のＸａａはＴｈｒであるかまたは直接結合であり；位置４１のＸａａはＬｙｓであるかまたは直接結合であり：位置４３のＸａａはＧｌｎであるかまたは直接結合であり；位置４４のＸａａはＧｌｎ、Ｌｙｓであるかまたは直接結合であり：位置４５のＸａａはＡｌａであるかまたは直接結合あり；位置４６のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり；位置４７のＸａａはＴｈｒ、ＡｌａまたはＧｌｕであり：位置５０のＸａａはＬｙｓ、Ａｓｎまたは直接結合であり；そして位置５２のＸａａはＬｙｓまたはＧｌｎである、の一部または全部から選ばれた約３０ないし約５０個の連続したアミノ酸を有するペプチドを提供する。特に好ましい態様として、抗原ペプチドは配列番号２の配列を有する。また、本発明はまた式（Ｉ）：Ｃ＊−Ｘ−Ｐ＊（Ｉ）式中、Ｃ＊は免疫属性担体物質を表し；Ｐ＊は配列番号１を有するペプチドを表し；そしてＸは免疫属性担体物質Ｃ＊及びペプチドＰ＊を連結する直接結合または共有結合を表す、を有するペプチド−担体構築物を含んでなる免疫学的に活性のあるペプチドを提供する。別の態様として、本発明は上記のような式Ｃ＊−Ｘ−Ｐ＊の免疫学的に活性のあるペプチド及び免疫反応アジュバントを含んでなる、それを必要とするヒト患者に投与した場合にＴＨ１免疫反応を引き起こすために有効な組成物を提供する。別の態様として、本発明は配列番号１のペプチドの薬理学的に有効な量及び製薬学的に有効な担体を含有する製薬学的組成物を提供する。本発明の特別な態様として、配列番号１のペプチドをコードする核酸配列を含有する単離された核酸分子が提供される。本発明のこの態様の好ましい態様として、単離された核酸分子は配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２または配列番号２３を有する核酸配列を含有する。また、本発明は配列番号１のペプチドをコードする少なくとも１つの核酸配列を含む組み換え発現ベクターも提供する。発現ベクターは真核生物の発現ベクターまたは原核生物の発現ベクターであってもよい。本発明のなおさらに別の態様として、上記のような組み換えベクターを保有する宿主細胞が提供される。図面の簡単な説明図１はＢクレイドで免疫を受けた動物の各種ペプチドに対するＥＬＩＳＡアッセイをグラフにより示したものであり；図２はＣクレイドで免疫を受けた動物の各種ペプチドに対するＥＬＩＳＡアッセイをグラフにより示したものであり；そして図３はＥクレイドで免疫を受けた動物の各種ペプチドに対するＥＬＩＳＡアッセイをグラフにより示したものである。本発明及び好ましい態様の詳細な記述可能性があるＨＩＶワクチンにより誘導される抗体またはＴ細胞がＨＩＶ−１の他のサブタイプ（「クレイド」としても知られている）を認識する能力は現在まで問題を抱えている。例えば、エンベロープ配列を用いるワクチンは、一つにはエンベロープタンパク質における高い多型のために、近縁の株のみを認識する抗体を誘導した。それ故、株及びクレイドにわたってより高度に保存されているｇａｇタンパク質、有名なものとしてｐ１７が世界的使用のためのワクチン抗原としてそして診断手段としてより有用である。最近の研究から、ＨＧＰ−３０が細胞性及び体液性免疫反応の両方を引き出すことが示されている。サブタイプ及びクレイド間でアミノ酸配列内にいくつかの変異が見られるが、ＨＧＰ−３０に対応するｐ１７領域内にはエンベロープ配列内より著しく少ない変異が見られる（約５０％に対して１０〜３０％）。以下に記述される試験において、ＨＧＰ−30の明礬アジュバント配合物により誘導される抗血清はＢ及びＣサブタイプからのＨＩＶを、そしてより低い程度でＥサブタイプからのＨＩＶ−１を認識した。他のアジュバントはさらに優れた異種間認識を生じた。全く予期せず、今回、同様の試験を実施したが、共通ＣからのＨＧＰ−３０の相同物に対する抗血清を用いた場合に、ＨＩＶサブタイプの全ての型及びクラスに対する実質的により強い認識が得られることが見いだされた。ところで、本明細書に用いられる場合、「に相当する」（“ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｔｏ”）及び「の相同な」（“ｈｏｍｏｌｏｇｕｅｓｏｆ”）及び類似した用語は、異なる株またはサブタイプからのペプチドフラグメントに関連及び関係して用いられる場合、ペプチドフラグメントを含有するタンパク質種のそれぞれのアミノ酸配列を付合または整列する場合に当該技術分野でよく理解されている技術により最も類似した適合を与えるペプチドフラグメント配列をさすと考えられる。以下に特定されるように、ＨＧＰ−３０（配列番号３）、またはクレイドＣ（配列番号５）、クレイドＢ（配列番号４）、クレイドＥ（配列番号６）からの対応する共通配列の相同な３０−ｍｅｒペプチド、または改変されたＨＧＰ−３０（配列番号７）、またはコントロールペプチドのいずれかに対する抗−ｐ１７抗血清の免疫反応性を測定するために以下の試験を用いた。具体的には、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の各種株及びサブタイプ（クレイド）の交差反応性を示すために、以下の試験を実施した。Ａ．ペプチド合成これらの実験に用いたペプチドは固相ＦＭＯＣ法及び最初の８残基には二重カップリングプロトコルを用いてＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（ＱＣＢ）（Ｈｏｐｋｉｎｔｏｎ、ＭＡ）により合成された。これらのペプチドは通常カルボキシル末端でアミド形態として調製された。ペプチドの全ては分取ＨＰＬＣを用いてＱＣＢで精製され、分析ＨＰＬＣ及び質量分析法により分析された。ペプチドはＨＰＬＣ規準により９５％より高い、通常９８％より高い純度であり、質量はロットと期待値間で２原子質量単位以内であった。ＱＣＢから得た乾燥ペプチドを−２０℃で乾燥剤を用いてガラスバイアル中で保存した。（備考：タイＡ共通配列は少なくとも位置８５ないし１１４のアミノ酸を含むｐ１７のこの領域にわたってタイＥ共通配列に相当する）上記及び以下に開示される及び本明細書に記述される実験において用いられるペプチドに対して、それらのアミノ酸配列は以下のように単一の同定文字記号により記述される。Ｂ．コンジュゲートの調製グルタルアルデヒド連結法により（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬからのような）カギアナカサガイ（ＫｅｙｈｏｌｅＬｉｍｐｅｔ）ヘモシアニン（ＫＬＨ）をペプチド抗原に連結させた（Ｎａｙｌｏｒ等、１９８７、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：２９５１−５）。リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）に溶解した連結されたＫＬＨ−ペプチドをＢＣＡタンパク質アッセイを用いてペプチドに関して分析し、２００〜４００μｇ／ｍｌの間の全量ペプチドを含有するように調整し、アジュバントとの使用のために整ったアリコートで４℃で保存した。Ｃ．免疫、抗−血清採取及び処理１０〜１６週齢のメスのＢＡＬＢ／ｃマウス（ＴａｃｏｎｉｃＦａｒｍｓ、Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ、Ｎ．Ｙ．）の群（群当たり５−１０匹）を以下のスケジュールに従って免疫し、試験瀉血した：０日、１４日目に免疫；２８及び４２日目に試験瀉血。明礬（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌ）アジュバントで製造業者の使用説明書に従って抗原を調製した。接種材料は（ＫＬＨコンジュゲートとして）２５μｇのペプチドを含有した。後部眼窩瀉血及び耳の標識のためにマウスをＭｅｔｏｆａｎｅ^TM（Ｐｉｔｍａｎ−Ｍｏｏｒｅ、Ｍｕｎｄｅｌｅｉｎ、ＩＬ）で麻酔した。個々のマウスからの血液を特定の日に集め、処理して抗血清を集め、ＥＬＩＳＡによる分析まで凍結保存した。Ｄ．ＥＬＩＳＡアッセイＺｉｍｍｅｒｍａｎ、等、１９９６、Ｖａｃｃ．Ｒｅｓ．５：１０３により記述されたような間接ＥＬＩＳＡにより抗体の存在に関して血清を試験した。ＨＧＰ−３０（配列番号３）、クレイドＢ（配列番号４）、クレイドＥ（配列番号６）、クレイドＣ（配列番号５）もしくは改変されたクレイドＢＨＧＰ−３０（ＡＴＬＹＳＶＨＱＲＩＤＶＫＤＴＫＥＡＬＥＫＩＥＥＥＱＮＫＳ）（配列番号７）（上記のように調製した）、またはコントロールペプチドに特異的に結合するサンプル中の抗体の存在をＥＬＩＳＡ法でアッセイする。コントロールペプチドＡはＨＩＶｅｎｖ、ｇｐ１２０Ｖ₃IIIＢループペプチド３０３〜３１３に由来する（Ｐａｌｋｅｒ、等、１９８８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：１９３２−３６を参照）。全てのペプチドを１μｇ／ｍｌの濃度で被覆した。得られた結果を以下の表Ｃ及びＤに示す。このデータから、ＨＧＰ−３０に対して作製された抗体が異なるサブタイプ（クレイド）のペプチドを認識することが明らかである。ＨＩＶの各種株間の交差反応性をさらに示すために、以下のさらなる実験を実施した。用いたＫＬＨがｂｉｏｓｙｎＡｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌＧｍｂＨ、Ｆｅｌｌｂａｃｈ、Ｇｅｒｍａｎｙから購入したＩｍｍｕｃｏｔｈｅｌ^R（商標）であり、そしてＰＢＳに溶解したＫＬＨ−ペプチドコンジュゲートが１ないし５ｍｇ／ｍｌの間の全量ペプチドを含有するように調整し、４℃で保存したことを除いて、上に記述したものと同じ方法を用いて免疫を実施して、上記のようにＫＬＨに連結し、アジュバントとして明礬を用いた、クレイドＢ、クレイドＣ及びクレイドＥの上記のペプチドに対して生じる抗体を作製した。抗原ぺプチドの各々との交差反応性そしてまた改変されたＨＧＰ−３０（ｍＨＧＰ−３０）（配列番号７）に対しても１／２００のサンプル希釈でＥＬＩＳＡアッセイを実施した。Ｂクレイド免疫マウス、Ｃクレイド免疫マウス及びＥクレイド免疫マウスに対してそれぞれ図１、２及び３に棒グラフで結果を図式的に示す。各場合で異なるアイソタイプに対して結果を得、それらはＩｇＧ１及びＩｇＧ２ａに対して示される。ＨＧＰ−３０からの抗血清を用いた先のように、これらの異なるクレイドに対する抗血清は異なるサブタイプからの及び改変されたＨＧＰ−３０の場合にはＨＩＶの異なる部分にわたる各種抗原ペプチドを認識した。しかしながら、全く予期せず、Ｃクレイドペプチド免疫マウスは図１及び３からの結果と図２からの結果を比較することによりわかるように実質的により強い免疫性反応を示した。上記の試験の結果に基づくと、アフリカ及びインドで特に優勢であると思われるＣクレイド共通配列が、ＨＩＶに対する兵器庫（ａｒｓｅｎａｌ）において広範囲に有用な治療または予防薬を提供すること及び世界中で診断アッセイで使用することができる有効な診断手段を提供することができる予想外に高い可能性を有することは明らかである。従って、ＨＩＶ−１のｐ１７ｇａｇタンパク質の共通Ｃクレイドの７５ないし８５の範囲のアミノ酸残基で始まり、１１４ないし１２８の範囲のアミノ酸残基で終わり、そして少なくとも約３０ないし約５０個のアミノ酸を含有する配列を含むあらゆる抗原ペプチドは、ワクチンにおける免疫原としてあるいは免疫を誘導するかまたはＡＩＤＳと関係するウイルス血症を減少する目的のためにワクチンにおいて有用なウイルスまたはウイルス感染細胞に対して誘導される抗体もしくはイディオタイプ抗体及び／または免疫細胞性反応を生じるためあるいはＨＩＶウイルスの検出のための診断アッセイまたはアッセイキットの成分として有用である。本発明のペプチドはＨＩＶ−１のｐ１７ｇａｇペプチドの共通Ｃ配列に由来し、以下の配列配列中、位置１のＸａａはＡｒｇ、ＬｙｓまたはＩｌｅであり；位置４のｘａａはＴｙｒ、ＰｈｅまたはＨｉｓであり；位置８のＸａａはＡｌａまたはＶａｌであり：位置９のＸａａはＴｈｒまたはＶａｌであり；位置１１のＸａａはＴｙｒまたはＴｒｐであり；位置１２のＸａａはＣｙｓまたはＳｅｒであり：位置１５のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり；位置１６のＸａａはＧｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＡｒｇであり；位置１８のＸａａはＧｌｕまたはＴｈｒであり：位置１９のＸａａはＶａｌまたはＩｌｅであり；位置２０のＸａａはＡｒｇまたはＧｌｎであり；位置２８のＸａａはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＧｌｕであり：位置２９のＸａａはＩｌｅまたはＬｅｕであり；位置３０のＸａａはＧｌｕまたはＬｙｓであり：位置３６のＸａａはＩｌｅ、ＳｅｒまたはＣｙｓであり；位置４０のＸａａはＴｈｒであるかまたは直接結合であり；位置４１のＸａａはＬｙｓであるかまたは直接結合であり：位置４３のＸａａはＧｌｎであるかまたは直接結合であり；位置４４のＸａａはＧｌｎ、Ｌｙｓであるかまたは直接結合であり：位置４５のＸａａはＡｌａまたはＧｌｕであり；位置４６のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり；位置４７のＸａａはＴｈｒ、ＡｌａまたはＧｌｕであり：位置５０のＸａａはＬｙｓ、Ａｓｎまたは直接結合であり；そして位置５２のＸａａはＬｙｓまたはＧｌｎである、の一部または全部から選ばれた約３０ないし約５０個の連続したアミノ酸を有する。好ましくは、本発明のペプチドは以下の配列配列中、位置８のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり：位置９のＸａａはＧｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＡｒｇであり；位置１１のＸａａはＧｌｕまたはＴｈｒであり；位置１２のＸａａはＶａｌまたはＩｌｅであり：位置１３のＸａａはＡｒｇまたはＧｌｎであり；位置２１のＸａａはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＧｌｕであり；位置２２のＸａａはＩｌｅまたはＬｅｕであり：位置２３のＸａａはＧｌｕまたはＬｙｓであり；位置２９のＸａａはＩｌｅ、ＳｅｒまたはＣｙｓであり；位置３３のＸａａはＴｈｒであるかまたは直接結合であり：そして位置３４のＸａａはＬｙｓであるかまたは直接結合である（配列番号２）に対応する約３０ないし約３３個の連続したアミノ酸を有する。さらにより好ましいものは、３０ないし３２個のアミノ酸を有する配列番号２を有し、そして配列中の最初のアミノ酸が位置１から４まで、特に位置１または２のアミノ酸で始まり且つ配列中、位置１１のＸａａがＧｌｕであり；位置１２のＸａａがＶａｌであり：位置１３のＸａａがＡｒｇであり；位置２１のＸａａがＬｙｓであり；位置２２のＸａａがＩｌｅであり：位置３３のＸａａが直接結合であり；そして位置３４のＸａａが直接結合であるペプチドである。ＨＩＶ−１のｐ１７の７つの特定の共通Ｃ株の（共通Ｃに対して番号をつけて）位置７５または（ＨＩＶＵＧ２６８に対して番号をつけて）位置７６で始まり位置１２５ないし１２９までの適当なＣクレイドペプチドグラグメントの特定の例を以下の表１に示す。表１及び以下の表２に報告される配列はＧ．Ｍｙｅｒｓ等により編集された報告「ＨｕｍａｎＲｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓａｎｄＡＩＤＳ１９９４、ＡＣｏｍｐｉｌａｔｉｏｎａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄａｎｄＡｍｉｎｏＡｃｉｄＳｅｑｕｅｎｃｅｓ」、ＴｈｅｏｒｅｔｉｃａｌＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃｓ、ＧｒｏｕｐＴ−１０、ＬｏｓＡｌａｍｏｓＮａｔｉｏｎａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ、ＬｏｓＡｌａｍｏｓ、ＮｅｗＭｅｘｉｃｏから引用された。上の表１において、小文字は特定の共通配列の対立遺伝子変異、遺伝的浮動及び突然変異の結果生じるアミノ酸変異の位置を表し、「？」記号の存在は共通配列のその位置のアミノ酸に関して一致した合意がないことを表し、「ダッシュ」（−）は共通配列で記述された同じアミノ酸を表し、そして「ドット」（．）はその位置のアミノ酸が存在しないことを表す。さらに、上の表の配列内で位置８のＡｌａまたはアミノ酸位置９のＴｈｒで始まり、Ｃ末端に向かって約３０アミノ酸に及ぶ部分フラグメントは、これらの３０−ｍｅｒペプチドフラグメントがＣＴＬ並びにＴ細胞及びＢ細胞エピトープを含むので特に好ましい。上に記載したように、配列番号１のペプチドはＨＩＶ−１のｐ１７タンパク質のクレイドＣサブタイプに由来し、配列番号１の最初のアミノ酸残基は位置７５または位置７６のアミノ酸残基に対応する。これに関連して、後者の番号づけがクレイドＣの株ＨＩＶＵＧ２６８の配列に基づき、一方、前者は共通配列に基づくことが指摘される。しかしながら、ｇａｇタンパク質配列中にＨＩＶサブタイプ間でいくつかの変異があるだけでなく、同じサブタイプの異なるＨＩＶ株間でアミノ酸残基の特定の番号づけに違いもある。従って、重要であるのは天然の配列の特定の番号づけよりむしろ、ＨＩＶサブタイプ間で見られる変異を考慮するアミノ酸配列自体であることが認識されるべきである。上記のアミノ酸配列のいずれにおいても、所望する生物学的活性に不都合に影響を与えない保存的アミノ酸置換のような特定のアミノ酸の変異が本発明の範囲内と考えられることも理解されるべきである。特に、前述の配列はＨＩＶの特定のクレイド、すなわち、共通Ｃに基づき、そして共通Ｃ内の他の天然に存在する及び自発的に生じる変異体は本発明の抗原ペプチドの範囲内に含まれることが認識される。そのような天然及び自発的に生じるアミノ酸変異は具体的に本発明における使用のために意図される。さらに、ある場合では、ペプチドの混合物を用いることが有益である可能性があり、その配列の少なくとも一つは上に示されるガイドラインの範囲内に入り、そしてもう一つまたは残りはＨＩＶの他の天然及び自発的に生じる変異体；ＨＩＶの他のサブタイプ及びＨＩＶのｐ１７ｇａｇの他の領域または他のペプチドフラグメントに相当する。本発明の抗原ペプチドと組み合わせて用いられる可能性のあるそのような他のペプチドの例は、配列：ＨＩＶ−１のｐ２４タンパク質からのフラグメント；エンベロープタンパク質またはペプチドフラグメント、例えばｇｐ１２０、ｇｐ１６０、ｇｐ４１等を有する、例えば、ＨＧＰ−３０、改変されたＨＧＰ −３０を含む。当該技術分野でも認識されているように、２個またはそれ以上のペプチドフラグメントの混合物が用いられる場合、異なるペプチドを相互に直接連結するかまたは既知の連結基もしくはスペーサーを介して連結するかまたは共通の担体に連結すること等ができる。また、２個またはそれ以上の同じペプチドフラグメントを相互に直接または共通の担体を介して連結することも知られており、これも本明細書において意図される。なおさらに、当該技術分野においてよく認識されているように、例えば、特定の結合部位を生じるためにかまたはペプチドの放射性もしくは蛍光標識のために、特定のアミノ酸置換を作製することがしばしば有益である。そのような「設計された」アミノ酸配列も本発明の抗原ペプチドの範囲内である。各種ＨＩＶ株間のアミノ酸の変異に加えて、Ｎ末端及びＣ末端のアミノ酸が遊離酸（アミノもしくはカルボキシル基）としてまたはその塩、エステル、エーテルもしくはアミドとして存在する可能性があることも認識される。特に、Ｃ末端のアミド末端基及びＮまたはＣ末端のアセチル化、例えばミリスチル等はペプチドの免疫学的特性に影響を与えずにしばしば有用である。同様に、官能側基の反応によりアミノ酸の１個またはそれ以上が化学的に誘導されている「化学的誘導体」も、必要な活性を維持するかまたは化学誘導化を逆にすることにより回復することができるかぎり一般的に「保存的置換」の範囲内に入る。本発明のペプチドを例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、Ｒ．Ｂ．、１９６３、Ｊ．ｏｆＡｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、８５：２１４９−２１５４により記述されたような、固相ペプチド合成のようなタンパク質を合成するための常法により調製することができる。遺伝子工学技術により本発明の新規なペプチドを製造することも本発明の範囲内及び当該技術分野の技術内である。本発明において、あらゆる抗原クレイドＣペプチドフラグメントを免疫属性担体物質に結合するために用いて抗原性ペプチド−担体構築物を製造することができる。一般的に、抗原の調製に通常用いられる高分子量を有する天然及び合成のタンパク質を免疫属性担体物質として用いることができる。しかしながら、さらに、タフトシン（ｔｕｆｔｓｉｎ）（テトラペプチド）、タフトシンの類似体、並びにムラミルジペプチド及びその類似体のようなより小さいペプチドまたは分子も「免疫属性担体物質」として用いることができる。本明細書に用いられる場合、「免疫属性担体物質」という用語は宿主動物において免疫属性反応を独立して引き出す特性を有し、そしてポリペプチド中の遊離カルボキシル、アミノもしくはヒドロキシル基と免疫属性担体物質上の対応する基の間のペプチドもしくはエステル結合の形成により直接かまたは通常の２官能基連結基を通してつなぐかのいずれかによりペプチドに共有結合的に結合することができる物質を含むことを意味する。そのような担体の例はウマ血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ウサギ血清アルブミン、ヒト血清アルブミン、ヒツジ血清アルブミン等のような動物血清のアルブミン；ウマ血清グロブリン、ウマ血清グロブリン、ウサギ血清グロブリン、ヒト血清グロブリン、ヒツジ血清グロブリン等のような動物血清のグロブリン；ウマチログロブリン、ヒトチログロブリン、ヒツジチログロブリン等のような動物のチログロブリン；ウマヘモグロブリン、ウシヘモグロブリン、ウサギヘモグロブリン、ヒトヘモグロブリン、ヒツジヘモグロブリン等のような動物のヘモグロブリン；カギアナカサガイヘモシアニン（ＫＬＨ）等のような動物のヘモシアニン；カイチュウから抽出されたタンパク質；ポリリシン、ポリグルタミン酸、リシン−グルタミン酸コポリマー、リシンもしくはオルニチンを含有するコポリマー等を含む。最近、免疫属性担体物質としてジフテリアトキソイドまたは破傷風トキソイドを用いてワクチンが製造されており、これらのトキソイド物質も本明細書において用いることができる。さらに他の適当なトキソイド物質はコレラ、ＰＰＤ、ボルデテラペルツッシス等を含む。ワクチン、有機ポリマー等を初めとする、他の適当な担体は例えば、米国特許番号第４，５７５，４９５法に開示されている。ハプテン−担体カップリング剤のような、抗原の調製に通常用いられるものを広く用いることができる。これらの薬剤の特定の例はチロシン、ヒスチジン、トリプトファン等を架橋するためのジアゾニウム化合物、例えば、ビスジアゾ化ベンジジン（ＢＤＢ）等；アミノ基をアミノ基と架橋するための脂肪族ジアルデヒド、例えば、グリオキサール、マロンジアルデヒド、グルタルアルデヒド、スクシンアルデヒド、アジポアルデヒド等のようなＣ₂−Ｃ₇アルカナール；チオ基をチオ基と架橋するためのジマレイミド化合物、例えば、Ｎ，Ｎ’ −ｏ−フェニレンジマレイミド、Ｎ，Ｎ’−ｍ−フェニレンジマレイミド等；アミノ基をチオール基と架橋するためのマレイミドカルボキシル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、例えば、メタマレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、４−（マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシル−Ｎ’−ヒドロキシスクシンイミドエステル等；アミノ基及びカルボキシル基からアミド結合が形成される通常のペプチド結合形成反応で用いられる薬剤、例えば、カルボジイミド、例えば、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−エチル−Ｎ’−ジメチルアミノ−カルボジイミド、１−エチル−３− ジイソプロピルアミノカルボジイミド、１−シクロヘキシル−３−（２−モルホリニル−４−エチル）カルボジイミド等のような脱水及び縮合剤を含む。前述のハプテン−担体カップリング剤のように、上記の脱水及び縮合剤のような通常のペプチド結合形成剤と組み合わせてｐ−ジアゾニウムフェニル酢酸等のようなジアゾニウムアリールカルボン酸を用いることも可能である。免疫属性担体物質への本発明のペプチドの共有結合カップリングを当該技術でよく知られているように実施することができる。従って、例えば、直接共有結合カップリングに対しては、カップリング剤としてカルボジイミド、最も好ましくはジシクロヘキシルカルボジイミドまたは１ −エチル−３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）カルボジイミドを利用することが可能である。そのような直接カップリングにおいて、この段階にはわずかに酸性の反応媒質、例えば、約３ないし６．５の範囲、最も好ましくは約４ないし６．５の範囲のｐＨを有する媒質を利用することが望ましい。中性またはアルカリ性であるペプチドをハプテンとして用いて抗原を調製するためのカップリング反応を同様であるが、水溶液または７ないし１０のｐＨを有する通常のバッファー溶液中、好ましくは８ないし９のｐＨを有するバッファー溶液中で約０℃ないし４０℃、好ましくはほぼ室温の温度で実施することができる。通例、約１ないし約２４時間、好ましくは１３ないし１５時間以内に反応を終える。上記の工程に用いることができるバッファー溶液の代表的な例は、０．２Ｍ水酸化ナトリウム−０．２ホウ酸０．２Ｍ塩化カリウムバッファー溶液；０．２Ｍ炭酸ナトリウム−０．２Ｍホウ酸０．２Ｍ塩化カリウムバッファー溶液；０．０５Ｍ四ホウ酸塩溶液−０．２Ｍホウ酸０．２塩化ナトリウムバッファー溶液；０．１Ｍリン酸二水素カリウム０．０５Ｍ四ホウ酸ナトリウムバッファー溶液を含む。上記で、ハプテン、ハプテン−担体カップリング剤及び担体の割合を適切に決定することができるが、ハプテンを約１ないし約１０倍、好ましくは約１ないし約５倍の量で用い、ハプテン及びハプテン−担体カップリング剤の重量をハプテンのモルの約５ないし約１０倍の量で用いることが好ましい。上記の反応により、担体はハプテン−担体カップリング剤を介してハプテンに結合されてペプチド−担体複合体からなる所望する抗原を得る。反応の完了後、このようにして得られた抗原を透析法、ゲル濾過法、分画沈殿法等の手段により容易に単離及び精製をすることができる。このようにして得られた抗原は１ｍｏｌのタンパク質当たりそれに平均して５０ないし６００ｍｏｌのペプチドを含み、そして続いて抗原に対して高い特異性を有する抗体を調製することができる。特に、１ｍｏｌのタンパク質当たり平均して５０ないし２００ｍｏｌ、好ましくは８０ないし２００ｍｏｌの量でペプチドが結合している抗原は、より高い特異性を有し、そして高い活性及び感度を有する抗体を得ることができるのでそれらが好ましい。本発明のペプチド−担体構築物を式（Ｉ）：Ｃ＊−Ｘ−Ｐ＊（Ｉ）式中、Ｃ＊は上に定義されたような免疫属性担体物質を表し；Ｐ＊は配列番号１に対応する、約３０ないし約５０個のアミノ酸のクレイドＣペプチドフラグメントを表し；そしてＸは免疫属性担体Ｃ＊及びペプチドＰ＊を連結する直接結合または共有結合を表す、により一般的に表すことができる。ペプチド構築物を形成するためのあらゆる既知の方法を本発明に用いることができる。例えば、Ｚｉｅｇｅｒｓ、等、１９９０、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．、１３０：１９５−２００から適応した方法を用いて、ＰＢＳ中０．２％のグルタルアルデヒドに対する４℃で１６時間の透析及び続くＰＢＳに対する透析（３回、各５００ｍｌ）によりＫＬＨを活性化することにより抗原クレイドＣペプチドをＫＬＨまたは他の適当な免疫性担体物質に結合させる。ペプチドを活性化されたＫＬＨに添加し（１００：１のモル比）、混合物を４℃で１６時間撹拌する。未反応の活性化ＫＬＨをブロックするためにリシンを２０ｍＭの最終濃度まで添加し、４℃で２時間撹拌する。過剰のペプチド及びリシンをＰＢＳに対して４℃で透析する（２回、各２００ｍｌ）。上記のようなペプチド構築物に加えて、本発明の抗原クレイドＣペプチドを「ヘテロ機能性（ｈｅｔｅｒｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）免疫学的コンジュゲート」の形態で、すなわち、Ｔ細胞の特定のクラスまたはサブクラスに結合する異なるＴ細胞特異的結合リガンドに共有結合されたＴＨ１関連抗体を引き出すことができる抗原ペプチドであるＴ細胞特異的結合リガンドとして用いることも可能である。そのような「ヘテロ機能性免疫学的構築物」は例えばＷＯ第８９／１２４５８号により詳細に記述されている。ペプチド−担体構築物をあらゆる他の抗原化合物または免疫系生物学的反応調節剤ないし用いることができるが、予防処置または治療処置としてであろうとも、ＡＩＤＳ治療では「カクテル」法を採用することがしばしば有益である可能性がある。従って、配列番号１の抗原ペプチドをそのようなものとして、または式（Ｉ）のペプチド−担体構築物としてまたはヘテロ機能性免疫学的コンジュゲートとして別の抗原物質と組み合わせることも本発明の範囲内である。そのような別の抗原物質を細胞障害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）反応またはＴヘルパー（Ｔｈ）反応を引き出すために有効な１つまたはそれ以上のエプトープを含有する既知のまたは以後に見いだされる抗原物質のいずれかの中から選択することができ、そしてそれらはＨＩＶ−１のｇａｇ、例えば、ｐ７、ｐ１７、ｐ２４；ｅｎｖ、例えば、ｇｐ１２０、ｇｐ１６０、ｇｐ４１またはｐｏｌタンパク質のいずれかに由来するかまたはそれらに基づき、その多くがすでに当業者によく知られている。そのような組成物において、本発明のクレイドＣ抗原ペプチドまたはペプチド −担体構築物またはヘテロ機能性免疫学的構築物を他の抗原物質と共に単一の組成物中でまたは組み合わせて投与される別個の配合物として投与することができる。さらに、当該技術分野でもよく知られているように、クレイドＣ抗原ペプチドまたはペプチド−担体構築物またはヘテロ機能性コンジュゲートを相互に直接かまたは適当な架橋基を介して連結してもよい。本発明の別の特徴として、上記のペプチドフラグメントまたはペプチド−担体構築物またはヘテロ機能性免疫学的コンジュゲートまたはペプチドフラグメントもしくはペプチド−担体構築物もしくはヘテロ機能性免疫学的コンジュゲートと別の抗原物質との混合物の代わりに、そのようなペプチドまたは構築物またはコンジュゲートまたはそれらの混合物をコードする対応するＤＮＡ配列を提供することができる。これらの核酸配列を次に当該技術分野でよく知られているように適切な開始、終結、プロモーター配列等につなぐことができる。これに関連して、いくつかの処置方法において配列番号１のペプチドまたは配列番号２ないし１４のペプチドのいずれかをコードするＤＮＡ配列をそれを必要とする患者に投与することが有益である可能性がある。もちろん、当該技術分野でよく知られているように、通常の遺伝子工学技術のいずれかにより対応するコードされるペプチドの製造のためにＤＮＡ配列を用いることができる。従って、本発明は本発明のペプチドをコードする核酸配列を含む単離された核酸分子（ＤＮＡ）を意図する。配列番号８のクレイドＣペプチドのＤＮＡ共通配列を以下及び以下の表２にも記述する。以下の表２に配列番号９ないし１５として同定されるペプチド及び配列番号８の共通配列をコードするＤＮＡ配列を記述する。しかしながら、遺伝暗号には縮合がある、すなわち、暗号は大部分の場合において余分であり、そして以下の表２に記述されるコドンの大部分を特定のアミノ酸に対応する別のコドンにより置き換えることができることを当業者は理解する。例えば、ロイシン（ＬｅｕまたはＬ）は次のヌクレオチドトリプレット（コドン）：ＴＴＴ及びＴＴＣによりコードされ；トレオニン（ＴｈｒまたはＴ）はＡＣＴ、ＡＣＣ、ＡＣＡ及びＡＣＧによりコードされ；リシン（ＬｙｓまたはＫ）はＡＡＡ及びＡＡＧによりコードされる等であり、ここで、ヌクレオチド塩基Ａ、Ｃ、Ｇ及びＴはアデニン、シトシン、グアニン及びチミンをそれぞれ表す。核酸配列中に１個またはそれ以上の変異を含有するが、なお本明細書に記述される抗原ペプチドをコードすることができるＤＮＡ配列を生じるそのようなＤＮＡ配列は、以下に記述されるような配列に機能的に同等であり、本発明により包含されると考えられる。上の表２で、表１と同様に、小文字は特定の共通配列の対立遺伝子変異、遺伝的浮動及び突然変異から生じる核酸変異の位置を表し；「？」記号の存在は共通配列のその位置のヌクレオチドの一致した同意がないことを表し；「ダッシュ」（−）は共通配列に記述された同じヌクレオチドを表し：そして「ドット」（．）はその位置のヌクレオチドが存在しないことを表す。前述の配列はＨＩＶの特定のクレイド、すなわち、共通Ｃに基づき、そして共通Ｃ内の他の天然に存在する及び自発的に生じる変異体は本発明の抗原ペプチド及びペプチド−担体構築物をコードする核酸配列の範囲内に入ることが認識される。本発明のペプチドをコードするＤＮＡ配列を組み換え遺伝子技術に関してよく知られている技術のいずれによっても調製することができ、例えば、米国第５，１４２，０２４号中の組み換えＨＩＶ（ＨＴＬＶ−III）タンパク質及びペプチドの開示及びその中に記載される文献の本文を参照。従って、本発明は本発明の抗原ペプチドまたは式（Ｉ）のペプチド−担体構築物またはヘテロ機能性免疫学的コンジュゲートをコードする核酸配列の全部または一部を含んでなる組み換えＤＮＡ分子及びベクターも提供する。本発明における使用のために適当な発現ベクターは、核酸配列に機能的に連結された少なくとも１つの発現制御成分を含んでなる。発現制御成分は核酸配列の発現を制御及び調節するためにベクター中に挿入される。発現制御配列の例はｌａｃ系、ファージラムダのオペレーター及びプロモーター領域、酵母プロモーター、並びにポリオーマ、アデノウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルスまたはＳＶ４０由来のプロモーターを含むがそれらに限定されない。さらなる好ましいまたは必要な機能できる成分はリーダー配列、終止コドン、ポリアデニル化シグナル及び宿主系における核酸配列の適切な転写及びそれに続く翻訳のために必要であるかまたは好ましいあらゆる他の配列を含むがそれらに限定されない。必要なまたは好ましい発現制御成分の適切な組み合わせが選択される宿主系によることは当業者により理解される。発現ベクターが宿主系において核酸配列を含有する発現ベクターの導入及びそれに続く複製のために必要なさらなる成分を含むべきであることがさらに理解される。そのような成分の例は複製起点及び選択可能なマーカーを含むがそれらに限定されない。そのようなベクターは常法を用いて容易に構築されるかまたは市販されていることは当業者によりさらに理解される。本発明の別の態様は本発明の抗原ペプチドまたは式（Ｉ）のペプチド−担体構築物またはヘテロ機能性コンジュゲートをコードする核酸配列の全部または一部を含有する組み換え発現ベクターが挿入されている宿主生物に関する。本発明により包含される核酸配列で形質転換される宿主細胞は、動物、植物、昆虫及び酵母細胞のような真核生物並びに大腸菌のような原核生物を含む。遺伝子を保有するベクターを細胞中に導入することができる手段は微量注入、エレクトロポレーション、形質導入またはＤＥＡＥ−デキストラン、リポフェクチン、リン酸カルシウムを用いるトランスフェクションまたは当業者に知られている他の方法を含むがそれらに限定されない。この態様の好ましい態様として、真核細胞で機能する真核生物の発現ベクターを用いる。そのようなベクターの例はレトロウイルスベクター、ワクシニアウイルスベクター、アデノウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクター、ニワトリポックスウイルスベクター、ｐＣＤＮＡ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）のようなプラスミドまたはバキュロウイルス導入ベクターを含むがそれらに限定されない。好ましい真核細胞系はＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＮＩＨ／３Ｔ３細胞、２９３細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１５７３）、Ｔ２細胞、樹状細胞、単球またはエプスタイン−バーウイルスでトランスフォームされたＢ細胞を含むがそれらに限定されない。タンパク質の適切なプロセシング及び修飾を保証するために、ＮＩＨ／３Ｔ３、ＣＯＳ−７、ＣＨＯ、２９３細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１５７３）、Ｔ２細胞、樹状細胞または単球のような哺乳類細胞が一般的に好ましい。宿主細胞により発現される組み換えタンパク質を粗ライセートとして得ることができ、または当該技術分野で知られている標準的なタンパク質精製方法により精製することができ、それは分画沈殿、分子ふるいクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、等電点電気泳動、ゲル電気泳動、アフィニティー及び免疫アフィニティークロマトグラフィー等を含むことができる。免疫アフィニティークロマトグラフィーの場合には、抗原ペプチドに特異的な抗体を結合している樹脂を含有するカラムに通すことにより組み換えタンパク質を精製することができる。単離されたタンパク質をＨＰＬＣまたは他の精製方法によりさらに精製することができる。本発明の抗原ペプチドまたはそのペプチド−担体構築物を予防的または治療的のいずれかでワクチンとして用いることができる。予防的に与えられる場合、ワクチンはウイルス感染のいずれかの証拠の前に与えられる。本発明のワクチンの予防的投与は哺乳類においてＡＩＤＳを防ぐかまたは弱毒化するように働くはずである。好ましい態様として、ＡＩＤＳの高い危険にさらされたヒトが、本発明のワクチンで予防的に処置される。治療的に与えられる場合には、ワクチンはＨＩＶ抗原に対する患者自身の免疫反応を高めるために与えられる。免疫原として作用するワクチンは抗原ペプチドもしくはペプチド−担体構築物をコードする組み換え発現ベクターでトランスフェクトされた細胞からの細胞、細胞ライセート、または発現されたタンパク質を含有する培養上清であってもよい。あるいは、免疫原は本発明のペプチドまたはペプチド−担体構築物をコードする部分的または実質的に精製された組み換えタンパク質、ペプチドまたはその類似体である。免疫原を純粋または実質的に純粋な形態で投与することが可能であるが、製薬学的組成物、製剤または調製物としてそれを与えることが好ましい。臨床及びヒト使用の両方のための本発明の製剤は、上記のような免疫原を１種またはそれ以上の製薬学的に許容できる担体及び場合により他の治療成分と共に含んでなる。担体は製剤の他の成分と適合し、その受容体に対して有害でないという意味において「許容でき」なけらばならない。通常、製剤を単位剤形で与えることができ、そして製薬技術においてよく知られているあらゆる方法により調製することができる。全ての方法は有効成分を１種またはそれ以上の副成分を構成する担体と会合させる工程を含む。一般的に、製剤は有効成分を液状担体もしくは細かく分けられた固形担体またはその両方と均一且つよく会合させ、次に、必要な場合、生成物を所望する製剤に造形することにより調製される。静脈内、筋肉内、皮下または腹腔内投与のために適当な製剤は、通常、有効成分の滅菌した水溶液を好ましくは受容体の血液と等張である溶液と共に含んでなる。通常、塩化ナトリウム（例えば、０．１〜２．０Ｍ）、グリシン等のような生理的に適合しうる物質を含有し、そして生理的条件と適合しうる調節されたｐＨを有する水に固体有効成分を懸濁または溶解して水溶液または懸濁液を生じ、そしてその溶液を滅菌することによりそのような製剤を調製することができる。これらを単位または複数投与量容器、例えば、密封アンプルまたはバイアルで与えることができる。本発明の製剤は安定剤を含んでもよい。実例となる安定剤はポリエチレングリコール、タンパク質、糖類、アミノ酸、無機酸及び有機酸であり、それらをそれら自体でまたは混合物としてのいずれかで用いることができる。これらの安定剤は、用いられる場合、好ましくは免疫原の重量で１当たり重量で約０．１ないし約１０，０００の割合の量で混和される。２種またはそれ以上の安定剤が用いられる場合には、それらの全量は好ましくは上に特定される範囲内である。これらの安定剤は適切な濃度及びｐＨで水溶液中で用いられる。そのような水溶液の特定の浸透圧は通例約０．１ないし約３．０ｏｓｍｏｌｅｓの範囲、好ましくは約０．８ないし約１．２の範囲である。水溶液のｐＨは約５．０ないし約９．０の範囲内、好ましくは６〜８の範囲内であるように調整される。本発明の免疫原の配合には、抗吸着剤を用いてもよい。作用の期間を制御するためにさらなる製薬学的方法を用いることができる。タンパク質またはそれらの誘導体と複合体を形成するかまたはそれらを吸収するためのポリマーの使用により制御された放出製剤を得ることができる。適切な高分子（例えば、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリビニル、ピロリドン、エチレンビニルアセテート、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたは硫酸プロタミン）及び高分子の濃度並びに放出を制御するための混和方法を選択することにより制御された運搬を実施することができる。制御された放出製剤により作用の期間を制御するための別の可能な方法は、ペプチドまたはペプチド−担体構築物を例えば、ポリエステル、ポリアミノ酸、ヒドロゲル、ポリ（乳酸）、ポリグリコール酸、これらの酸のコポリマーまたはエチレンビニルアセテートコポリマーのようなポリマー物質の粒子中へ混和することである。あるいは、これらの薬剤をポリマー物質中に混和する代わりに、例えば、液滴形成技術によりもしくは界面重合により調製されるマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシ −メチルセルロースもしくはゼラチン−マイクロカプセル及びポリ（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中、またはコロイド薬剤運搬系、例えば、リポソーム、アルブミン微小球、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル中またはマクロエマルジョン中にこれらの物質を閉じ込めることが可能である。経口製剤が所望される場合、とりわけ、ラクトース、ショ糖、澱粉、タルク、ステアリン酸マグネシウム、結晶セルロース、メチルセルロール、カルボキシメチルセルロース、グリセリン、アルギン酸ナトリウムまたはアラビアゴムのような典型的な担体と組成物を組み合わせることができる。本発明のペプチドを単独でキットの形態でまたは上記のような製薬学的組成物の形態で供給することができる。常法によりワクチン接種を実施することができる。例えば、食塩水もしくは水のような適当な希釈剤または完全もしくは不完全アジュバント中で免疫原を用いることができる。さらに、タンパク質を免疫性にするためまたはタンパク質の免疫性を高めるために免疫原を担体に結合してもよいしまたはしなくてもよい。そのような担体分子の例はウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、カギアナカサガイヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド等を含むがそれらに限定されない。また、免疫原をリポタンパク質、脂質または脂肪酸と結合してもよく、またはリポソームの形態でかもしくはアジュバントと共に投与してもよい。静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、鼻、経口等のような、抗体生産、ヘルパーＴ細胞活性化及び／または細胞障害性Ｔリンパ球生産のために適切なあらゆる経路で免疫原を投与することができる。例えば、ＨＩＶ抗原に対して誘導されるＣＤ４⁺もしくはＣＤ８⁺ Ｔ細胞または抗体の著しい力価が得られるまで、免疫原を１回または定期的間隔で投与することができる。特に、本発明の特に好ましい態様として、上記のように、本発明の抗原性ペプチドはＴＨ１関連抗体及びＴＨ１免疫反応の他の特徴を引き出す。免疫原を間欠的に投与された抗原提示細胞に反応したサイトカイン分泌を測定することにより細胞の存在を評価することができる。通常の免疫アッセイを用いて血清中の抗体を検出することができる。上に記述したように、本発明のワクチンまたは免疫原の投与は予防または治療目的のいずれかのためであってもよい。予防的に与えられる場合、特に高い危険の患者において、ＨＩＶ感染のいずれかの証拠の前にかまたはＡＩＤＳによるいずれかの症状の前に免疫原は与えられる。免疫原の予防的投与はヒトにおいてＡＩＤＳを防ぐかまたは弱毒化するように働く。治療的に与えられる場合、疾病の発症時（もしくは後）または疾病のいずれかの症状の発症時に免疫原は与えられる。免疫原の治療的投与は宿主の免疫反応を刺激するように働く。例として、組み換え発現ベクターを用いて調製されたワクチンを用いることができる。個体にワクチンを与えるために、上記のように、抗原ペプチドまたはペプチド−担体構築物の全部または一部をコードする遺伝子配列を発現ベクター中に挿入し、免疫される哺乳類中に導入する。上記のワクチンに用いることができるベクターの例は欠損レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、ＣＭＶベクター、ワクシニアウイルスベクター、ポックスウイルスベクターまたは他のウイルスベクター（例えば、Ｍｕｌｌｉｇａｎ、Ｒ．Ｃ．、（１９９３）Ｓｃｉｅｎｃｅ２６０：９２６−９３２を参照）を含むがそれらに限定されない。ＡＩＤＳまたは前ＡＩＤＳに苦しむ哺乳類においてＡＩＤＳもしくは前ＡＩＤＳのいずれかの証拠または疾病の進展をもたらす前に核酸配列を保有するウイルスベクターを哺乳類中に導入することができる。哺乳類中にウイルスベクターを投与するための方法の例はエクスビボでのウイルスへの細胞の露出、または冒された組織中へのレトロウイルスもしくはウイルスのプロデューサー細胞系の注入またはウイルスの静脈内投与を含むがそれらに限定されない。投与される抗原ペプチドまたはペプチド−担体構築物をコードする適切な核酸配列を保有するウイルスベクターの量はウイルス粒子の力価に基づく。例として、投与される免疫原の範囲は哺乳類、好ましくはヒト当たり約１０⁶ないし約１０¹¹ウイルス粒子であってもよい。免疫後に、特定のサイトカイン生産または疾病の退行により評価されるように、抗原を認識する抗体または免疫細胞の生産によりワクチンの効能を評価することができる。当業者は上記のパラメーターを評価するための常法を知っている。免疫される個体がすでにＡＩＤＳまたは前ＡＩＤＳに苦しんでいる場合、ワクチンを他の治療処置と共に投与することができる。他の治療処置の例はＡＩＤＳの処置で現在実施されるような、プロテアーゼインヒビター、逆転写酵素、インテグラーゼ及びそれらに基づく薬剤組み合わせ処置、または以後に開発される可能性のあるような処置を含むがそれらに限定されない。さらに、本発明のペプチド及びペプチド−担体構築物並びにそれらをコードするＤＮＡ配列を米国第５，５９３，９７２号に開示されたような遺伝子免疫技術に用いることができる。遺伝子免疫技術に従って、核酸分子を投与する個体の細胞における発現を可能にする調節配列にヌクレオチド配列を機能的に連結する。次に、得られる細胞を予防または治療免疫のために用いることができる。同様に、例えば、最近公表された米国特許第５，５８０，８５９号及び第５，５８９，４６６号において示されるような、裸のＤＮＡを免疫反応を誘導するために用いることができる。本発明はまた式（Ｉ）のペプチド−担体構築物の治療的に有効な量をそれを必要とするヒト患者に投与することにより後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を処置または予防するための方法に関する。本発明により、ＴＨ１に特徴的な抗体ＩｇＧ２ａ（マウス）及びおそらくそれによるＩｇＧ３（ヒト）の例により明白に示されるように、ＨＩＶの１７タンパク質からの配列番号１のクレイドＣペプチドに対する免疫反応を少なくとも所望するＴＨ１反応に対して誘導することができる。しかしながら、これらのペプチドは、ＴＨ１により引き出される免疫反応に加えて、ＴＨ２免疫反応、特に混合ＴＨ１／ＴＨ２免疫反応を引き出す。従って、本発明の抗原ペプチドはＨＩＶによる感染を防ぐかまたはＨＩＶが感染した細胞を処置するために潜在的に有効なワクチンを与える。ＡＩＤＳの危険の危険にさらされているかまたはＨＩＶ、特にＨＩＶ−１にさらされた患者を免疫にするため、及びＡＩＤＳ関連コンプレックス（Ｃｏｍｐｌｅｘ）または明白なＡＩＤＳの患者を処置するためにそのようなワクチン組成物を用いることができる。ワクチンとして用いる場合、最も好都合には注射、筋肉内、皮内、非経口的、鼻内、経口的または皮下でワクチンを宿主中に導入することができる。ワクチン運搬のためのあらゆる一般的な液体または固体のビヒクルを用いることができ、それらは宿主に対して許容でき、そして宿主に対するいかなる不都合な副作用またはワクチンに対するいかなる有害な作用も有さない。生理的ｐＨ、例えば、ｐＨ６．８ないし７．２、好ましくはｐＨ７のリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を単独でかまたは適当なアジュバントと共に担体として用いることができる。免疫性抗原の濃度は動物における前臨床研究では約０．２ｍｌのような通例約０．１から１ｍｌまでの臨床溶媒の容量で注入当たり約２５μｇ／ｋｇのような約０．５から２００μｇ／ｋｇまで、そしてヒトでは約１ｍｌのような約０．５ｍｌから約２ｍｌまでで変わる可能性がある。最初の注入後に複数の注入が必要である可能性があり、そして複数の注入が与えられる場合には、動物では約２から１２週まで、例えば約２週、そしてヒトでは約８週の間隔で与えることができる。約６カ月から２年までまたはさらに長いようなブースター免疫を投与することができ、またはそれらが有益である可能性がある。ＣＴＬエプトープを含むペプチドで免疫されたヒト志願者で細胞障害性Ｔ細胞反応が観察されているが、しかしながら、ＣＴＬ反応は部分的に少なくともワクチン中の免疫性抗原の濃度に依存するようである。１０ないし２５μｇ／ｋｇの投与量を受けたｇａｇペプチドワクチンのより高い割合が５０ないし１００μｇ／ｋｇのより高い投与量を受けたワクチンよりＣＴＬ反応を示した。これらの結果から、細胞性免疫に関与しているＴＨ−１型細胞がＣＴＬを含むペプチドワクチンのより低い投与量で誘導されることが示唆される。より高い投与量のペプチドで免疫されたワクチン間のより低い割合のＣＴＬ反応は、より高いワクチン投与量が主に体液性免疫反応に関与するＴＨ−２型細胞を誘導することを示唆する。さらに、本発明のワクチンにおける免疫性抗原の好ましい濃度は１０ないし２５μｇ／ｋｇの範囲であるが、しかしながら、必要な場合、より低いまたはより高い投与量を投与することができる。以下のものは本発明の抗原ペプチド及び構築物及び組成物の各種態様のための応用の例であるが、本発明は以下に記述される実施例に限定されないと理解される。態様１：本発明のペプチド配列がＨＩＶ感染を防ぐためにＴＨ１／ＴＨ２による免疫反応に対して予防ワクチンとして免疫反応を誘導するための担体としてのＫＬＨコンジュゲートの使用。態様２：本発明の配列がＨＩＶ感染者においてＴＨ１／ＴＨ２による免疫反応に対して治療ワクチンとして免疫反応を誘導するための担体としてのＫＬＨコンジュゲートの使用で、それをウイルスの負荷を減少し、そしてＨＩＶ感染を制御または治療するための他の治療と共に用いることができる。態様３：本発明のペプチド配列がＨＩＶ感染を防ぐためにＴＨ１／ＴＨ２による免疫反応に対して予防ワクチンとして免疫反応を誘導するための担体としてコンジュゲート中で使用するためのヒトＩｇＧ、ウシもしくはヒト血清アルブミンまたは他の担体タンパク質の使用。態様４：本発明のペプチド配列を単独でかまたはウイルス負荷を減少し、そしてＨＩＶ感染を制御または治療するための他の治療と共にＨＩＶ感染者においてＴＨ１／ＴＨ２による免疫反応に対して治療ワクチンとして免疫反応を誘導するための担体としてコンジュゲート中で使用するためのヒトＩｇＧ、ウシもしくはヒト血清アルブミンまたは他の担体タンパク質の使用。実施例図１、２及び３に関して上記と同じ免疫マウスを用いて、４２日目にマウスから血液を抜き取り、ＥＬＩＳＡプレート上に被覆された免疫のために用いた対応する抗原ペプチドの各々に対するＢクレイド、Ｃクレイド及びＥクレイド免疫マウスの各々の交差認識（多価反応）に関するＥＬＩＳＡアッセイにおいてそれぞれのサンプルを試験した。１／２００、１／２０００及び１／２００００の抗血清希釈物をアッセイに用いた。結果を以下の表３に示す。先のように、表３に報告される結果は４表３に報告される結果から、再び、クレイドＣサブタイプに由来し、そして位置７５ないし位置８５の領域のアミノ酸で始まり、位置１１４ないし１２８の領域のアミノ酸まで約３０から約５０個までのアミノ酸に及ぶアミノ酸配列を有する抗原ペプチドが、異なるサブタイプからのＨＩＶペプチドの強い認識を示す抗体を誘導できることが観察される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 37/04 Ａ６１Ｐ 37/04 Ｃ０７Ｋ 14/16 Ｃ０７Ｋ 14/16 Ｃ１２Ｎ 1/15 Ｃ１２Ｎ 1/15 1/19 1/19 1/21 1/21 5/10 5/00 Ａ //(Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡＣ１２Ｒ 1:92） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】１．以下の配列配列中、位置１のＸａａはＡｒｇ、ＬｙｓまたはＩｌｅであり；位置４のＸａａはＴｙｒ、ＰｈｅまたはＨｉｓであり；位置８のＸａａはＡｌａまたはＶａｌであり：位置９のＸａａはＴｈｒまたはＶａｌであり；位置１１のＸａａはＴｙｒまたはＴｒｐであり；位置１５のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり；位置１６のＸａａはＧｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＡｒｇであり；位置１８のＸａａはＧｌｕまたはＴｈｒであり：位置１９のＸａａはＶａｌまたはＩｌｅであり；位置２０のＸａａはＡｒｇまたはＧｌｎであり；位置２８のＸａａはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＧｌｕであり：位置２９のＸａａはＩｌｅまたはＬｅｕであり；位置３０のＸａａはＧｌｕまたはＬｙｓであり：位置３６のＸａａはＩｌｅ、ＳｅｒまたはＣｙｓであり；位置４０のＸａａはＴｈｒであるかまたは直接結合であり；位置４１のＸａａはＬｙｓであるかまたは直接結合であり：位置４３のＸａａはＧｌｎであるかまたは直接結合であり；位置４４のＸａａはＧｌｎ、Ｌｙｓであるかまたは直接結合であり：位置４５のＸａａはＡｌａまたはＧｌｕあり；位置４６のＸａａはＬｙｓ、Ｇ１ｕまたはＡｌａであり；位置４７のＸａａはＴｈｒ、ＡｌａまたはＧｌｕであり：位置５０のＸａａはＬｙｓ、Ａｓｎまたは直接結合であり；そして位置５２のＸａａはＬｙｓまたはＧｌｎである、の一部または全部から選ばれる約３０ないし約５０個の連続したアミノ酸を有するペプチド。２．以下の配列配列中、位置４のＸａａはＴｙｒまたはＴｒｐであり；位置５のＸａａはＣｙｓまたはＳｅｒであり；位置８のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり：位置９のＸａａはＧｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＡｒｇであり；位置１１のＸａａはＧｌｕまたはＴｈｒであり；位置１２のＸａａはＶａｌまたはＩｌｅであり：位置１３のＸａａはＡｒｇまたはＧｌｎであり；位置２１のＸａａはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＧｌｕであり；位置２２のＸａａはＩｌｅまたはＬｅｕであり：位置２３のＸａａはＧｌｕまたはＬｙｓであり；位置２９のＸａａはＩｌｅ、ＳｅｒまたはＣｙｓであり；位置３３のＸａａはＴｈｒであるかまたは直接結合であり：そして位置３４のＸａａはＬｙｓであるかまたは直接結合であるの一部または全部から連続して選ばれる約３０ないし約３３個のアミノ酸を有するペプチド。３．配列番号２を有し、そして配列が位置１から４までのアミノ酸で始まり且つ位置４のＸａａがＴｙｒであり；位置１１のＸａａがＧｌｕであり；位置１２のＸａａがＶａｌであり：位置１３のＸａａがＡｒｇであり；位置２１のＸａａがＬｙｓであり；位置２２のＸａａがＩｌｅであり：位置３３のＸａａが直接結合であり：そして位置３４のＸａａが直接結合である約３０ないし３２個のアミノ酸を有するペプチド４．配列番号９の式を有するペプチド。５．配列番号５の式を有するペプチド。６．式（Ｉ）：Ｃ＊−Ｘ−Ｐ＊（Ｉ）式中、Ｃ＊は免疫属性担体物質を表し；Ｐ＊は配列番号１のペプチドを表し、そしてＸは免疫属性担体物質Ｃ＊及びペプチドＰ＊を連結する直接結合または共有結合を表す、を有するペプチド−担体構築物を含んでなる免疫学的に活性のあるペプチド。７．請求の範囲第１項記載のペプチドの薬理学的に有効な量及び製薬学的に有効な担体を含んでなる製薬学的組成物。８．ペプチドが以下の配列、配列中、位置４のＸａａはＴｙｒまたはＴｒｐであり；位置５のＸａａはＣｙｓまたはＳｅｒであり；位置８のＸａａはＬｙｓ、ＧｌｕまたはＡｌａであり：位置９のＸａａはＧｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、ＧｌｕまたはＡｒｇであり；位置１１のＸａａはＧｌｕまたはＴｈｒであり；位置１２のＸａａはＶａｌまたはＩｌｅであり：位置１３のＸａａはＡｒｇまたはＧｌｎであり；位置２１のＸａａはＬｙｓ、ＡｒｇまたはＧｌｕであり；位置２２のＸａａはＩｌｅまたはＬｅｕであり：位置２３のＸａａはＧｌｕまたはＬｙｓであり；位置２９のＸａａはＩ１ｅ、ＳｅｒまたはＣｙｓであり；位置３３のＸａａはＴｈｒであるかまたは直接結合であり：そして位置３４のＸａａはＬｙｓであるかまたは直接結合であるから連続して選ばれる約３０ないし約３３個のアミノ酸を有する請求の範囲第７項記載の組成物。９．ペプチドが配列中の最初のアミノ酸が位置１から位置４までのアミノ酸で始まり且つ位置４のＸａａがＴｙｒであり；位置１１のＸａａがＧｌｕであり；位置１２のＸａａがＶａｌであり：位置１３のＸａａがＡｒｇであり；位置２１のＸａａがＬｙｓであり；位置２２のＸａａがＩｌｅであり：位置３３のＸａａが直接結合であり：そして位置３４のＸａａが直接結合である約３０ないし３２個のアミノ酸を有する配列番号２のペプチドである請求の範囲８の組成物。１０．ペプチドが配列番号９を有するペプチドである請求の範囲第９項記載の組成物。１１．ペプチドが配列番号５を有するペプチドである請求の範囲第９項記載の組成物。１２．請求の範囲第６項記載の式（Ｉ）の免疫学的に活性のあるペプチド− 担体構築物及びＣＴＬエピトープまたはＴｈエピトープの少なくとも１つを含み、そしてＨＩＶ−１のｅｎｖ、ｇａｇまたはｐｏｌタンパク質に由来する抗原ペプチドを含んでなるＡＩＤＳの予防または治療処置のために有効な組成物。１３．請求の範囲第１項記載のペプチドをコードする核酸配列を含んでなる単離された核酸分子。１４．であるヌクレオチド配列を含んでなる単離された核酸分子。１５．請求の範囲第１３項記載の単離された核酸分子及びＣＴＬエピトープまたはＴｈエピトープの少なくとも１つを含み、そしてＨＩＶ−１のｅｎｖ、ｇａｇまたはｐｏｌタンパク質に由来する抗原ペプチドをコードする核酸分子を含んでなるＨＩＶ−１による感染の予防または治療処置のために有効な組成物。１６．配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２及び配列番号２３よりなる群から選択されるヌクレオチド配列を含んでなる単離された核酸分子。１７．請求の範囲第１２項記載の少なくとも１つの核酸配列を含んでなる組み換え発現ベクター。１８．請求の範囲第１７項記載のベクター及びＣＴＬエピトープまたはＴｈエピトープの少なくとも１つをコードし、そしてＨＩＶ−１のｅｎｖ、ｇａｇまたはｐｏｌタンパク質に由来する核酸配列を含んでなる組み換え発現ベクターを含んでなるＨＩＶ−１による感染の予防または治療処置のために有効な組成物。１９．発現ベクターが真核生物の発現ベクターまたは原核生物の発現ベクターである請求の範囲第１５項記載のベクター。２０．請求の範囲第１６項記載の組み換え発現ベクターを含有する宿主細胞。