JP2001504453A - 改変カンプトテシン誘導体からの複合糖質（２０―ｏ―結合） - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 少なくとも１種の糖成分が、カンプトテシン誘導体の２０−ヒドロキシル基に結合されている改変カンプトテシン誘導体が開示される。また、それらの製造、および特にがん疾患に対する医薬品としてのそれらの使用が開示される。

Description

【発明の詳細な説明】 改変カンプトテシン誘導体からの複合糖質（２０−Ｏ−結合） 本発明は、少なくとも１種の炭水化物成分が、カンプトテシン誘導体の２０− ヒドロキシル基と、適当なスペーサーを介して結合されているカンプトテシン誘 導体の複合糖質に関する。さらにまた、本発明は、本発明による化合物を製造す る方法、および特にがんに関連する、医薬としてのそれらの使用に関する。 ２０（Ｓ）−カンプトテシンは、Wallらによって１９６６年に単離された５環 式アルカロイドである（J．Am．Chem．Soc．88，3888(1966)）。それは、多数の イン・ビトロおよびイン・ビボ試験において、潜在的に高い抗腫瘍活性をもつ。 しかしながら、不幸にも、有望な潜在力は、毒性と溶解度の問題のために、臨床 においては実現できなかった。 Ｅ環ラクトンの開環とナトリウム塩の形成によって、閉環型とｐＨ依存的平衡 関係にある水溶性化合物が得られた。ここでもまた、臨床研究は、今日まで成功 していなかった。 約２０年後、その生物活性が、トポイソメラーゼＩの酵素阻害に寄与している ことが見い出された。それ以来、研究活動が、イン・ビボで、より適合性と活性 のあるカンプトテシン誘導体を発見するために、再び、拡大されてきた。 水溶性を改良するために、イオン化基をもっているＡ環とＢ環を改変 したカンプトテシン誘導体および２０−Ｏ−アシル誘導体の塩が報告されている （Vishnuvajjala et al．米国特許第4943579号）。また、後者のプロドラッグ概 念は、後に、改変カンプトテシン誘導体にも適用された（Wani et al．ＷＯ 960 2546）。しかしながら、イン・ビボでは、前記２０−Ｏ−アシル・プロドラッグ は、非常に短い半減期をもち、そして非常に急速に切断されて元の構造を生成し た。 驚くべきことに、Ａ環とＢ環を改変されたカンプトテシン誘導体の２０−ヒドロ キシル基への、例えばペプチドスペーサーを介する炭水化物誘導体の結合が、 − ２０−ヒドロキシル基へのキャリヤー基のエステル様結合によって、作用 のために重要であるカンプトテシン誘導体におけるラクトン環が安定化される、 − この方法において得られる複合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）は、腫瘍細胞系 および腫瘍異種移植片に対する高いイン・ビトロ活性をもつ、 − 基礎になる毒素族と比べて、それらは、顕著に、より高い寛容性と腫瘍選 択性および特に水性媒質中での改良された溶解度をもつ、 − イン・ビボで、それらは、数用量段階にわたって優れた治療活性を発揮す る、 − 細胞外培質中および血液中で、それらは、上記カンプトテシンの２０−Ｏ −アシルプロドラッグよりも、かなり安定である： という高度に興味ある性質をもつ化合物類をもたらすことが、ここに見い出され た。 本発明は、一般式（Ｉ） Ａ−Ｃｐ−Ｂ （Ｉ） の化合物、およびそれらの異性体、異性体混合物および塩に関する。 上式中、 Ｃｐは、式 ［式中、 Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は、互いに独立して、水素、炭素原子３個までをもつ アルキル、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシルもしくはニトロを表すことができ、 または Ｒ²およびＲ³は、一緒になって、式 （この場合、ｍは値１もしくは２をもつことができる）の基を表し、そして Ｒ⁵は、Ｈ，−ＣＨ₂ＣＨ₃，−ＣＨ₂−Ｏ−^*，−ＣＨ₂−ＮＨ^*， を表すか、 または−ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）Ｒ⁶もしくは−ＣＨ₂−Ｎ^*Ｒ⁶ （式中、Ｒ⁶は、アリールメチルもしくはヘタリールメチルを表す）を表す］か 、 ［式中、 Ｒ⁷およびＲ⁸は、Ｒ²およびＲ³について定義されたとおりであり、そしてこれ らと同じでも異なっていてもよい］か、 ［式中、 Ｒ⁹は、水素、または−ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₃）₂を表し、そして Ｒ¹⁰は、水素またはエチルを表す］か、［式中、 Ｒ¹¹およびＲ¹²は、Ｒ²およびＲ³について定義されたとおりであり、そしてこ れらと同じでも異なっていてもよい］か、 あるいは ［式中、 Ｒ¹³およびＲ¹⁴は、Ｒ²およびＲ³について定義されたとおりであり、そしてこ れらと同じでも異なっていてもよい］ の基を表していて、 ここで、Ｃｐは、＃を付した位置においてＡに結合され、そして^*を付した位 置においてＢに結合されており、 Ａは、式 （ここで、１≦（ｎ＋ｏ＋ｐ）≦３）の基を表し、 Ｂは、水素か、または式（ここで、０≦（ｑ＋ｒ＋ｓ）≦３）の基を表すが、式中、 Ｍ¹およびＭ²は、互いに独立して各々、主鎖が、直線状態で２１個までの原子 を含む架橋基を表し、 Ｌ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵およびＬ⁶は、互いに独立して各々、複合糖質化学に おいて常用されるリンカー基を表し（参考文献、Lee Y.C．and Lee R．in Lecti ns and Cancer 1991，53-69，ed．by Gabius H.J．and Gabius S.，Springer-Ve rlag、参照）、 Ｓｐ¹，Ｓｐ²，Ｓｐ³，Ｓｐ⁴，Ｓｐ⁵およびＳｐ⁶は、互いに独 立して各々、各場合、場合によっては置換されてもよい、炭素原子１０個までを もつアリーレンを表すか、炭素原子８個までをもつアルキレンを表し、そして Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵およびＫ⁶は、互いに独立して各々、式（ＩＩ） ［式中、 Ｃは、メチル、ヒドロキシメチル、炭素原子６個までをもつアルコキシメチル 、炭素原子６個までをもつアシルオキシメチルか、または Ｄが式（ＩＩ）の基を表す式−ＣＨ₂−Ｄの基を表し、 Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷は、互いに独立して各々、水素、ヒドロキシル、場合に よってはヒドロキシル置換された炭素原子６個までをもつアルコキシ、炭素原子 ６個までをもつアルキルもしくはアシルによって場合によっては置換されてもよ いアミノ、ハロゲン、スルフェート、または式（式中、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子６ 個までをもつアルコキシを表すか、または炭素原子６個までをもつアルキルによ って場合によっては置換されてもよいアミノを表し、そしてｕおよびｖは、互い に独立して各々、値０，１，２，３もしくは４、特に値１，２，３もしくは４を もつことができる）の基を表すか、あるいは Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷は、互いに独立して各々、式（ＩＩ）の基を表すか、あ るいは 基Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷の２つが、一緒になって、エポキシ基を表す］ の基を表す。 本発明の文脈上、別に記述しない限り、用語「アルキル基」は、直鎖、分枝、 環式およびシクロアルキルの基を含有するアルキル基を含む。対応して、またこ の定義は、アルキル基を含有するすべての他の基、例えば、アルコキシ、アシル などにも適合する。 Ｒ⁶の定義において示された用語アリールメチルおよびヘタリールメチルは、 例えば、フェニルメチルもしくはピリジルメチルを表してもよい。 好適な化合物は、Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵およびＫ⁶が、互いに独立して各々 、次の場合の式（ＩＩ）の基を表すことのできる一般式（Ｉ）の化合物、および それらの異性体、異性体混合物および塩である。ここで、 Ｃは、メチル、ヒドロキシメチル、メトキシメチルもしくはアセトキシメチル を表し、 Ｒ¹⁵は、水素、ヒドロキシル、メトキシ、または式 ［式中、ｕおよびｖは、互いに独立して各々、値１もしくは２をもつことができ 、そして Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子４個まで をもつアルコキシを表す］の基を表すか、あるいは Ｒ¹⁵は、式（ＩＩ）の基を表し、 Ｒ¹⁶は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、炭素原子４個までをもつアルコキシ 、スルフェートまたは式 ［式中、ｕおよびｖは、互いに独立して各々、値１もしくは２をもつことができ 、そして Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子４個まで をもつアルコキシを表すか、または炭素原子４個までをもつアルキルによって、 場合によっては置換されてもよいアミノを表す］の基を表し、 Ｒ¹⁷は、ヒドロキシル、ヒドロキシルによって場合によっては置換されてもよ い炭素原子４個までをもつアルコキシ、炭素原子４個までをもつアルキルもしく はアシルによって場合によっては置換されてもよいアミノ、または式 ［式中、ｕおよびｖは、互いに独立して各々、値１もしくは２をもつことができ 、そして Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子４個まで をもつアルコキシを表す］の基を表すか、 あるいは、 Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって、エポキシ基を表す。 著しく特に好ましくは、Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵および／またはＫ⁶は次の場 合の式（ＩＩ）の基を表す。 Ｃは、メチル、ヒドロキシメチル、メトキシメチルもしくはアセトキシメチル を表し、 Ｒ¹⁵およびＲ¹⁷は、各々、ヒドロキシル基を表し、そして Ｒ¹⁶は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、炭素原子４個までをもつアルコキシ 、スルフェートまたは式 ［式中、ｕおよびｖは、互いに独立して各々、値１もしくは２をもつことができ 、そして Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子４個まで をもつアルコキシを表すか、または炭素原子４個までをもつアルキルによって場 合によっては置換されてもよいアミノを表す］の基を 表す。 特に好適な実施態様によれば、炭水化物構成単位Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴,Ｋ⁵およ び／またはＫ⁶は、各場合において最大で２つの単糖の構成単位を含む。 さらにまた、好適な化合物は、次の場合の一般式（Ｉ）の化合物、およびそれ らの異性体、異性体混合物および塩である。 Ｓｐ¹，Ｓｐ²，Ｓｐ³，Ｓｐ⁴，Ｓｐ⁵および／またはＳｐ⁶は、互いに独立して 各々、各場合、１個の基Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵もしくはＫ⁶およびＬ¹，Ｌ²， Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵もしくはＬ⁶に結合され、そしてまた、ヒドロキシル、カルボキシ ル、炭素原子４個までをもつカルボキシアルキル、ニトロ、シアノ、ハロゲン、 炭素原子４個までをもつアルキル、炭素原子４個までをもつハロゲノアルキルに よるか、または炭素原子４個までをもつアルコキシによって、場合によっては一 置換または多置換されてもよい、炭素原子１０個までをもつアリーレンを表して もよい。 Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵もしくはＫ⁶およびＬ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵もしく はＬ⁶を考慮しなければ、特に好ましくは、Ｓｐ¹，Ｓｐ²，Ｓｐ³，Ｓｐ⁴，Ｓｐ⁵ および／またはＳｐ⁶は、非置換であるか、またはハロゲン、ニトロ、炭素原子 ６個までをもつアルキル、炭素原子２個までをもつアルコキシ、−ＯＣＦ₃およ び／またはＣＦ₃によって、場合によっては置換されてもよい。 著しく特に好ましくは、Ｓｐ¹，Ｓｐ²，Ｓｐ³，Ｓｐ⁴，Ｓｐ⁵および／または Ｓｐ⁶は、互いにパラ位に結合している基Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴,Ｋ⁵もしくはＫ⁶お よび基Ｌ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵もしくはＬ⁶の各々とは別に、他の置換基を担持 しない。 さらにまた、好適な化合物は、Ｌ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵およびＬ⁶が、互いに 独立して各々、 ［式中、Ｒ²⁰は、塩素を表すか、または炭素原子６個までをもつヒドロキシアル キルアミノを表す］ を表す、一般式（Ｉ）の化合物である。 特に好ましくは、Ｌ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵およびＬ⁶は、各々、 を表す。 さらにまた、好適な化合物は、Ｍ¹およびＭ²が、互いに独立して各々、アミノ 官能基を介してＬ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵および／またはＬ⁶に結合され、アシル 官能基を介してＣｐに結合され、そしてアミノ酸構成単位が、場合によっては保 護基を担持していてもよいペプチドを表すことができる。一般式（Ｉ）の化合物 である。特に好適なものは、モノ−、ジ−およびトリペプチド、特にモノ−およ びジペプチドである。 アミノ酸構成単位は、好ましくは、グリシル、アラニル、バリル、ロイシル、 リジル、セリル、グルタミル、スレオニル、アスパラギル、イソロイシル、ジア ミノプロピオニル、ジアミノブチリール、アルギニル、 ヒスチジルおよび／またはオルニチルからなる群から選ばれる。 特に好適なアミノ酸構成単位は、グリシル、アラニル、バリル、ロイシル、リ ジル、セリル、アスパラギル、ヒスチジルおよび／またはグルタミルである。 本発明に従う化合物は、立体異性型において、例えば鏡像異性体またはジアス テレオマーとして、それらの混合物、例えばラセミ体として存在してもよい。本 発明は、純粋な立体異性体およびそれらの混合物の両方に関する。 必要であれば、立体異性体の混合物は、それ自体既知の方法、例えばクロマト グラフィーか、または結晶化法によって立体異性的に均一な成分に分割できる。 炭水化物構成単位Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵および／またはＫ⁶のアノマ一中心 における立体化学は、αまたはβである。さらにまた、それらは、ＤまたはＬ型 で存在することもできる。他の中心における立体化学は、グルコ、マンノ、ガラ クト、グロ、ラムノもしくはフコ配置をもたらすことができる。 アミノ酸構成単位は、各場合、ＤまたはＬ型で存在する。 カンプトテシン構成単位Ｃｐは、２０−（Ｒ）または２０−（Ｓ）立体配置で 存在するか、またはこれらの２つの立体異性体型の混合物として存在することが できる。好適なものは、２０−（Ｓ）立体配置である。 さらにまた、束縛回転のために、本発明による化合物は、各回転異性体の状態 か、それらの混合物として存在できる。本発明は、純粋な回転異性体およびそれ らの混合物の両方に関する。 回転異性体の混合物は、必要であれば、既知の方法を用いて、例えば クロマトグラフィー（例えばＨＰＬＣ）または結晶化法により、場合によっては 均一な成分に分離できる。これは、最終化合物の段階でも、また、適当であれば 、中間段階でも実施できる。適当であれば、回転異性的に純粋な最終生成物は、 回転異性的に純粋な中間体から、適当な様式における合成を実施することによっ て製造できる。 カンプトテシン構成単位の好適な例は、以下のものである： これらの例の中で、特に好適なものは、［Ａ３］，［Ａ７］，［Ａ８］，［Ａ ９］，［Ａ１０］，［Ａ１１］，［Ａ１４］，［Ｂ１］，［Ｂ２］，［Ｃ２］お よび［Ｄ１］である。 個々の基について与えられた好適な、または特に好適な意味を合わせることに よって、著しく特に好適な一般式（Ｉ）の化合物が、対応して提供される。 また、本発明による化合物は、それらの塩の型でも存在してもよい。一般に、 有機または無機塩基または酸との塩、そしてまた分子内塩が、ここに挙げられる 。 好ましくは、付加できる酸は、例えば、塩化水素酸および臭化水素酸、特に塩 化水素酸のようなハロゲン化水素酸類、さらにリン酸、硝酸、硫酸、例えば、酢 酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、マロン酸、シュウ酸、グルコン酸、コハク 酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、サリチル酸、ソルビン酸および乳酸のような ーおよび二官能性カルボン酸類ならびにヒドロキシカルボン酸類、そしてまた、 例えば、ｐ−トルエンスルホン酸、１，５−ナフタレンジスルホン酸または、カ ンファースルホン酸のようなスルホン酸類を包含する。 また、生理学的に許容しうる塩は、遊離カルボキシル基をもつ本発明による化 合物の金属またはアンモニウム塩であってもよい。特に好適な塩は、例えば、ナ トリウム、カリウム、マグネシウムもしくはカルシウム塩、そしてまた、アンモ ニアまたは有機アミン類、例えばエチルアミン、ジ−またはトリエチルアミン、 ジ−またはトリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエ タノール、アルギニン、リジン、エチレンジアミンもしくはフェネチルアミン、 から得られるアンモニウム塩である。 本発明による複合糖質は、例えば、改変カンプトテシン誘導体に、活性化され たカルボキシル成分を結合することによって製造することができ、それらの部分 は、保護されたアミノ酸、ペプチドまたは炭水化物で修飾されたペプチドの部分 であってもよい。 かくして、さらに本発明は、一般式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、一般 式（ＩＩＩ） Ｈ_B−Ｃｐ−Ｈ_A （ＩＩＩ） ［式中、Ｃｐは、先に定義されたとおりであり、そして水素原子Ｈ_Aお よびＨ_Bは、それぞれ、＃および＊を付した位置に位置する］の化合物が、適当 であれば、保護基によってＨ_Bを取り替えた後、適当な溶媒中、適当であれば塩 基の存在下で、慣用の方法によって、先に定義された基Ｍ¹に対応し、場合によ っては保護基を担持してもよい活性化されたカルボキシル成分Ｍ¹ _aと反応され、 １個、１個以上または全てのＭ¹の保護基が、適当であれば、既知の方法によっ て選択的に除去され、そして生成物が、一般式（ＩＶ） Ｋ¹−Ｓｐ¹−Ｌ¹ _a （ＩＶ） ［式中、Ｋ¹およびＳｐ¹は、各々、先に定義されたとおりであり、Ｌ¹ _aは、基Ｌ¹ の反応性前駆体を表す］の化合物と反応されるが、この場合、保護基は、適当 であれば、選択的に除去され、そして種々の基Ｋ²−Ｓｐ²−Ｌ²−およびＫ³−Ｓ ｐ³−Ｌ³−が、匹敵する方法で段階的に導入できる、そして、もし炭水化物成分 が、＊を付した位置に結合される必要があれば、Ｈ_Bを置換する保護基が、適当 であれば、既知の方法によって選択的に除去され、基Ｍ²、および所望のように 、式Ｋ⁴−Ｓｐ⁴−Ｌ⁴−、Ｋ⁵−Ｓｐ⁵−Ｌ⁵−およびＫ⁶−Ｓｐ⁶−Ｌ⁶−の基が、 前記方法で導入されるか、 あるいは、もしＭ¹および／またはＭ²が、ペプチドであれば、最初のアミノ酸 基が、場合によっては保護基を担持してもよい対応するカルボキシル成分の型に おいて、慣用の方法によって同様に導入され、保護基が、適当であれば除去され 、場合によっては保護基を担持してもよいアミノ酸基が結合され、保護基が、適 当であれば再び除去され、前記式Ｋ¹−Ｓｐ¹−Ｌ¹−、Ｋ²−Ｓｐ²−Ｌ²−、Ｋ³ −Ｓｐ³−Ｌ³−、Ｋ⁴−Ｓｐ⁴−Ｌ⁴−、Ｋ⁵−Ｓｐ⁵−Ｌ⁵−および／またはＫ⁶− Ｓｐ⁶−Ｌ⁶−の基が 導入され、そして必要であれば、保護基が除去される、 ことを特徴とする方法に関する。 反応は、種々の圧力と温度条件下、例えば０．５〜２ｂａｒ、−３０〜＋１０ ０℃で、適当な溶媒、例えばジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、テトラヒドロフ ラン（ＴＨＦ）、ジクロロメタン、クロロホルム、低級アルコール類、アセトニ トリル、ジオキサン、水もしくは前記溶媒の混合物中で、実施される。一般には 、ＤＭＦもしくはＴＨＦ／ジクロロメタン中、室温および常圧における反応が好 適である。 カルボキシル基の活性化のために、可能なカップリング剤は、例えば、 ptides，Proteins];Verlag Chemie 1982またはTetrahedr．Lett．34，6705(1993 )に記載のようなペプチド化学において既知のものである。 例えば、塩化アシル、無水Ｎ−カルボン酸もしくは混合無水物が好適である。 さらにまた、カルボキシル基の活性化のためには、カルボジイミド類、例えば Ｎ，Ｎ’−ジエチルー、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピル−、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキ シルカルボジイミド、塩酸Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチル カルボジイミド、メト−ｐ−トルエンスルホン酸Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ’−（ ２−モルホリノエチル）−カルボジイミド、またはカルボニル化合物、例えばカ ルボニルジイミダゾール、または１，２−オキサゾリウム化合物、例えば３−硫 酸２−エチル−５−フェニル−１，２−オキサゾリウムもしくは過塩素酸２−ｔ ｅｒｔ−ブチル−５−メチルーイソオキサゾリウム、またはアシルアミノ化合物 、例えば２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノ リン、または無水プロパンホスホン酸、またはクロロギ酸イソブチル、またはヘ キサフルオロリン酸１−ベンゾトリアゾリルオキシ−トリス（ジメチルアミノ） ホスホニウム、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルもしくはヒドロキシ スクシンイミドエステル、との付加物の形成が適当である。さらにまた、アミノ 酸成分も、Ｌｅｕｃｈｓ無水物の形成に使用することができる。 使用される塩基は、例えば、トリエチルアミン、エチル−ジイソプロピルアミ ン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンもしくはその他であってもよい 。 カンプトテシン部分におけるすべての他の反応性官能基、またはアミノ酸の第 ３官能基のために使用される保護基は、ペプチド化学において既知である、例え ばウレタン、アルキル、アシル、エステルもしくはアミドタイプの保護基であっ てもよい。 本発明の文脈上のアミノ保護基は、ペプチド化学において使用される慣用のア ミノ保護基である。 これらは、好ましくは、ベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベン ジルオキシカルボニル、３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、２，４ −ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニ ル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンジルオキシカルボニ ル、２−ニトロ−４，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、メトキシカル ボニル、エトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、アリ ルオキシカルボニル、ビニルオキシカルボニル、３，４，５−トリメトキシベン ジルオキシカルボニル、フタロイル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニ ル、２，２，２−トリクロロ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、メンチルオキシ カルボニル、４−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−９−メトキシカ ルボニル（Ｆｍｏｃ）、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、２− クロロアセチル、２−ブロモアセチル、２，２，２−トリフルオロアセチル、２ ，２，２−トリクロロアセチル、ベンゾイル、ベンジル、４−クロロベンゾイル 、４−ブロモベンゾイル、４−ニトロベンゾイル、フタルイミド、イソバレロイ ルもしくはベンジルオキシメチレン、４−ニトロベンジル、２，４−ジニトロベ ンジル、４−ニトロフェニルもしくは２−ニトロフェニルスルフェニルを含む。 Ｆｍｏｃ基およびＢＯＣ基は、特に好適である。 好適なカルボキシル保護基は、直鎖または分枝Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルエステルで ある。 架橋基Ｍ¹および／またはＭ²と結合されるカンプトテシン誘導体は、種々の方 法およびリンカー基を用いて、炭水化物基により改変することができる。例えば 、ｐ−アミノ−フェニル配糖体をイソチオシアン酸エステルおよび例えばアミノ 基をもつ結合に転化するのが好適である。さらにまた、カルボキシアルキルまた はアミノアルキル配糖体をアミノまたはカルボキシル基とカップリングさせるこ とも容易にできる。 適当な反応段階における保護基の除去は、例えば、酸または塩基の作用によっ て、その他の方式で水素化分解的または還元的に実施できる。 生物学的試験 １．細胞障害性の定量のための増殖抑制試験： ヒト大腸細胞系ＳＷ４８０およびＨＴ２９（ＡＴＣＣ Ｎｏ．ＣＣＬ２２８お よびＨＢＴ３８）、およびマウス黒色腫細胞系Ｂ１６Ｆ１０を、 Ｒｏｕｘフラスコ中、１０％ＦＣＳ添加のＲＰＭＩ １６４０培地において増殖 させた。次いで、それらを、トリプシン分解させ、そしてＲＰＭＩ＋１０％ＦＣ Ｓ中に採取して、細胞数５０，０００細胞／ｍｌにした。細胞懸濁液１００μｌ ／ウエルを、９６穴ミクロウエルプレートに添加し、そしてＣＯ₂培養器中３７ ℃で１日間培養した。次いで、さらなるＲＰＭＩ培地１００μｌと試験物質を含 有するＤＭＳＯ １μｌを添加した。増殖を、３日および６日後にチェックした 。この最後に、Ｈ₂Ｏ初発濃度５ｍｇ／ｍｌを含むＭＴＴ溶液（臭化３−（４， ５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリン）４０ μｌを各ミクロウエルに添加した。培養を、ＣＯ₂培養器中３７℃で５時間実施 した。次いで、培地を吸引し、そしてｉ−プロパノール１００μｌ／ウエルを添 加した。Ｈ₂Ｏ１００μｌと３０分間振盪した後、吸光を、Ｔｉｔｅｒｔｅｋ Ｍｕｌｔｉｓｃａｎ ＭＣＣ／３４０（Ｆｌｏｗ）を用いて５４０ｎｍにおいて 測定した。 細胞障害作用を、ＳＷ４８０およびＨＴ２９、およびＢ１６Ｆ１０細胞系につ いて、各場合ＩＣ₅₀値として表１に示した：表１： ２．基礎になる活性化合物と比較した複合糖質の造血活性： 材料および方法： 骨髄細胞を、マウス大腿骨から洗い落とした。１０⁵細胞を、組み換えマウス ＧＭ−ＣＳＦ（Genzyme;幹細胞コロニー形成）および物質（１０^-4〜１００μｇ ／ｍｌ）とともにＭｃＣｏｙ５Ａ培地（０．３％寒天）において、３７℃、７％ ＣＯ₂で培養した。７日後、コロニー（＜５０細胞）およびクラスター（１７〜 ５０細胞）をカウントした。 結果： 表２に示すように、供試複合糖質は、基礎になる活性化合物と比較して骨髄幹 細胞増殖の著しく低い抑制を示す。表２： マウス骨髄幹細胞のＣＳＦに誘導される増殖の抑制 ３．ヌードマウス・モデルにおけるイン・ビボの腫瘍成長の抑制 材料： 腫瘍成長の抑制研究のための全てのイン・ビボ実験では、無胸腺のヌードマウ ス（ＮＭＲＩｎｕ／ｎｕ株）を使用した。選択されたラージ・セル（ｌａｒｇｅ −ｃｅｌｌ）肺がん腫ＬＸＦＬ５２９を、ヌードマウスにおける連続継代によっ て成長させた。腫瘍のヒト起源を、ィソ酵素的および免疫組織化学的方法によっ て確認した。 実験の組立て： 腫瘍を、６〜８週令のｎｕ／ｎｕマウスの両脇腹の皮下に移植した。処理を、 倍加時間に応じて、腫瘍が直径５〜７ｍｍに達してから直ぐに開始した。マウス を、処理群と対照群（８〜１０個の評価しうる腫瘍をもつ１群あたり５匹のマウ ス）にランダムに割り当てた。対照群の個々の腫瘍全ては、進行的に成長した。 腫瘍サイズを、スライドゲージを用いて２次元において測定した。次いで、細 胞数とよく相関する腫瘍体積を、あらゆる評価のために使用した。体積は、式「 長さｘ巾ｘ巾／２」（［ａｘｂ²］／２、ａおよびｂ は、直角における２つの直径）にしたがって計算した。 相対腫瘍体積（ＲＴＶ）の値は、Ｘ日目の腫瘍サイズを０日目（ランダム化の 時点）の腫瘍サイズで割ることによって各個々の腫瘍について計算した。次いで 、ＲＴＶの平均値をさらなる評価のために使用した。 腫瘍体積増大（試験群／対照群の腫瘍体積、Ｔ／Ｃ、％）の抑制は、最終測定 値であった。 処理： 化合物の投与を、ランダム化後１，２および３日目に腹腔内（ｉ.ｐ.）に実施 した。 結果： 例１．１からの化合物を用いて、本発明による複合糖質の治療効力を、ラージ ・セルヒト肺腫瘍異種移植片ＬＸＦＬ５２９と比較した。最大許容用量（ＭＴＤ ）および１／２ＭＴＤの場合において、治療は、顕著な腫瘍寛解をもたらす。表３： 両イン・ビトロおよびイン・ビボで、本発明による化合物は、非悪性細胞に比 べて高い選択性を合わせもちつつ、種々の腫瘍、特に、肺および大腸の腫瘍に対 して、驚くほど強い抗腫瘍活性をもつ。 したがって、それらは、がん、特に、肺および大腸のがんを治療するのに適当 である。 本発明は、無毒で、不活性な薬物学的に適当な添加物に加えて、１種以上の本 発明による化合物を含有するか、または１種以上の本発明による活性化合物から なる医薬調製物、およびこれらの調製物の製造方法を含む。 活性化合物は、場合によっては、１種以上の前記添加物中、およびま たミクロカプセル剤形中に存在してもよい。 好ましくは、治療学的に活性な化合物は、上記医薬調製物中、全混合物の約０ ．１〜９９．５、好ましくは約０．５〜９５重量％の濃度で存在すべきである。 本発明による化合物とは別に、また、上記医薬調製物は、さらなる薬物学的に 活性な化合物を含んでもよい。 一般に、本発明による活性化合物を、所望の成績を達成するために、適当であ ればいくつかの個別用量の剤形において、総量約０．５〜約５００、好ましくは ５〜１００ｍｇ／体重ｋｇで投与することが、ヒトおよび動物医学の両方におい て有利であることが証明される。個別用量は、本発明による活性化合物を、好ま しくは、約１〜約８０、特に３〜３０ｍｇ／体重ｋｇの量において含有する。 実施例 炭水化物出発物質 例Ｉ．１： ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド Ｉ．１．ａ）ｐ−ニトロフェニル３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド： 無水メタノール３００ｍｌ中ｐ−ニトロフェニルβ−Ｌ−フコピラノシド６ｇ （２１ｍｍｏｌ）を、酸化ジブチルスズ７．８４ｇ（３１．５ ｍｍｏｌ）で処理し、そして還流下で２時間加熱する。次いで、混合液を濃縮し 、残渣を乾燥し、次いで、ＤＭＦ３００ｍｌ中に採取する。ヨウ化メチル１５． ７ｍｌの添加後、全液を７０℃４０時間撹拌する。溶媒を減圧下で除去し、残渣 を、ジクロロメタン３００ｍｌ中に採取する。その懸濁液を濾過し、残りの溶液 を再び濃縮し、そしてフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノ ール ９９：１）にかける。濃縮により、標的生成物３．８２ｇ（６１％）を得 る。 Ｉ．１）ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド： ｐ−ニトロフェニル３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド３．８１ｇ（１ ２．７３ｍｍｏｌ）をメタノール中に溶解し、そして二酸化プラチナの添加後、 水素雰囲気中、弱加圧下で水素化する。触媒を濾別し、エーテルで沈殿させた後 、標的生成物３ｇ（８８％）を得る。[ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノール９ ：１ Ｒ_f＝０．５３］。 例Ｉ．２： ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシド Ｉ．２．ａ）ｐ−ニトロフェニル３−Ｏ−メトキシカルボニルメチル−β−Ｌ −フコピラノシド： メタノール５０ｍｌ中ｐ−ニトロフェニルβ−Ｌ−フコピラノシド１ｇ（３． ５ｍｍｏｌ）および酸化ジブチルスズ１．３ｇ（５．２ｍｍｏｌ）を、還流下で ２時間加熱する。その溶液を濃縮し、残渣を、ジオキサン５０ｍｌ中に採取し、 ブロモ酢酸メチル２ｍｌおよびヨウ化テトラブチルアンモニウム１００ｍｇを混 合し、そして混合液を、還流下で１６時間加熱する。溶媒を蒸発させ、そして生 成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール ９９： １）によって精製する。適当な画分を濃縮し、メタノール／エーテルから沈殿さ せた後、標的生成物４５５ｍｇ（３７％）を得る。 Ｉ．２）ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノ シド： ｐ−ニトロフェニル３−メトキシカルボニルメチル−β−Ｌ−フコピラノシド ２８２ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）をメタノール２０ｍｌ中に溶解し、そして２Ｎ 水酸化リチウム水溶液４４０μｌと混合する。混合液を室温で２時間撹拌し、次 いで、酸性イオン交換体ＳＣ１０８を用いてｐＨ３に調整し、濾過する。活性炭 素担持パラジウム２５０ｍｇを濾液に添加する。続いて、混合液を、やや水素加 圧下で１．５時間水素化し、そして触媒を濾別し、メタノールで洗浄する。濃縮 し、水に採取し、そして凍結乾燥して、標的生成物（２１２ｍｇ）を８６％収率 で得る。［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸５：１：０．２ Ｒ_f＝０．２ ４］。 例えば、次の誘導体が、さらに、炭水化物構成単位として使用できる： ｐ−アミノフェニルβ−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル２−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル２−Ｏ−ヒドロキシエチル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル４−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メチル−α−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−ｎ−プロピル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３−デオキシ−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３，４−ジデオキシ−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３，４−エポキシ−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル４−デオキシ−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メトキシカルボニルメチル−β−Ｌ−フコピラノ シド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−ヒドロキシエチル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル２−Ｏ−カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−サクシニル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３，４−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−カルバモイルメチル−β−Ｌ−フコピラノシド ｐ−アミノフェニルα−Ｌ−ラムノピラノシド ｐ−アミノフェニルβ−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル２−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル４−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル６−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル２，４−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル２，６−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル３，４−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド、 酢酸塩 ｐ−アミノフェニル３，６−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル４，６−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル２，３，４−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノ シド ｐ−アミノフェニル２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノ シド ｐ−アミノフェニル２，４，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノ シド ｐ−アミノフェニル３，４，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノ シド ｐ−アミノフェニル３−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル３，４−ジデオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシ ド ｐ−アミノフェニル６−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メトキシカルボニルメチル−β−Ｄ−ガラクトピ ラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−カルボキシメチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド 、ナトリウム塩 ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−カルバモイルメチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシ ド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−（Ｎ−メチル−カルバモイルメチル）−β−Ｄ− ガラクトピラノシド ｐ−アミノフェニルα−Ｄ−マンノピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メチル−α−Ｄ−マンノピラノシド ｐ−アミノフェニル２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−マンノピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−メトキシカルボニルメチル−α−Ｄ−マンノピラ ノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−カルボキシメチル−α−Ｄ−マンノピラノシド ｐ−アミノフェニル３−Ｏ−カルバモイルメチル−α−Ｄ−マンノピラノシド ｐ−アミノフェニル４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グル コピラノシド ｐ−アミノフェニル４−Ｏ−（３’−硫酸−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）− β−Ｄ−グルコピラノシド、ナトリウム塩 ｐ−アミノフェニル４−Ｏ−（３’−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシ ル）−β−Ｄ−グルコピラノシド ｐ−アミノフェニル２−Ｏ−メチル−４−Ｏ−（３’−Ｏ−メチル−β−Ｄ− ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシド ｐ−アミノフェニル４−Ｏ−（３’，４’−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−ガラク トピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシド 次の炭水化物構成単位の合成は、既に、欧州特許第501 250号に記述されてい る。 カルボキシメチルβ−Ｌ−フコピラノシド ５−カルボキシペンチルβ−Ｌ−フコピラノシド これらの２つの構成単位は、欧州特許第501250号記載の方法でペプチド複合体 （ｐｅｐｔｉｄｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）と結合することができる。 複合糖質 例１．１： ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ− メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカ ルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン： １．１．ａ） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブト キシカルボニル）−アラニル］−カンプトテシン： 無水ジメチルホルムアミド１００ｍｌ中２０（Ｓ）−７−エチル−カンプトテ シン（S．Sawadaetal.，Chem．Pharm．Bull.，39（1991）1446-1454）１．８８ ｇ（５．０ｍｍｏｌ）溶液を、無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−ア ラニン−Ｎ−カルボン酸２．１５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）および４−（Ｎ，Ｎ− ジメチルアミノ）−ピリジン１５０ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）と撹拌しながら混合 する。室温で３時間後、さらに無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−ア ラニン−Ｎ−カルボン酸２．１５ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）および４−（Ｎ，Ｎ− ジメチルアミノ）−ピリジン１５０ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）を添加し、そして混 合液を室温で一夜撹拌する。続いて、混合液を、減圧濃縮し、そして残 渣を、フラッシュクロマトグラフィー［石油エーテル／酢酸エチル２：１→１： １→酢酸エチル］によって精製する。これにより、無色の結晶（２．０２ｇ，７ ３．８％）を得る；ＴＬＣ［酢酸エチル］：Ｒ_f＝０．５６；ｍ．ｐ．＝２０６ −２１２℃；ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５４８（Ｍ＋Ｈ⁺）。 １．１．ｂ） ２０（Ｓ）−２０−Ｏ−アラニル−７−エチル−カンプトテシ ン，トリフルオロ酢酸塩： ジクロロメタン７０ｍｌおよび無水トリフルオロ酢酸７ｍｌの混合液中化合物 １．１．ａ（１．８１ｇ，３．３ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で９０分間撹拌する 。減圧下で、混合液を小容量まで濃縮し、次いで、生成物を、ジエチルエーテル で沈殿させ、ジエチルエーテルで徹底的に洗浄する。生成物を、明黄色結晶（１ ．３４ｇ，７２．３％）として得る；ＴＬＣ［酢酸エチル］：Ｒ_f＝０．０５； ｍ．ｐ.＝２４２℃（分解）。 １．１．ｃ） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−［Ｎ^α，Ｎ^ε−ジ−（ｔ ｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−リジル−アラニル］−カンプトテシン： Ｎ，Ｎ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−リジン１．５７ｇ（４．５ ５ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物９２３ｍ ｇ（６．８３ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド３５ｍｌ中に溶解する。Ｎ− エチル−Ｎ’−（ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩１．０９ｇ （５．７ｍｍｏｌ）およびエチルジイソプロピルアミン９９０μｌ（５．７ｍｍ ｏｌ）の添加後、混合液を、室温で３０分間撹拌する。続いて、ジメチルホルム アミド３５ｍｌ中化合物１．１．ｂ（１．３ｇ，２．３２ｍｍｏｌ）溶液および エチルジイ ソプロピルアミン４０８μｌ（２．３２ｍｍｏｌ）を添加し、そのバッチを室温 でさらに１６時間撹拌する。減圧濃縮およびフラッシュクロマトグラフィー［石 油エーテル／酢酸エチル２：１→１：１→酢酸エチル］による精製により、明黄 色結晶（１．３８ｇ，７５．３％）を得る；ＴＬＣ［酢酸エチル］：Ｒ_f＝０． ５３；ｍ．ｐ．＝１２５℃（分解）。 １．１．ｄ） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−（リジル−アラニル）− カンプトテシン、ジ−トリフルオロ酢酸塩： ジクロロメタン（５０ｍｌ）中上記化合物（１．１８ｇ，１．５ｍｍｏｌ）の 懸濁液を、無水トリフルオロ酢酸（５ｍｌ）と混合し、そして得られる溶液を、 室温で１時間撹拌する。小容積まで減圧濃縮続した後、生成物を、ジエチルエー テルの添加によって析出させる。沈殿物を濾別し、酢酸エチルから再結晶化する 。これにより、黄色結晶（８６２ｍｇ，７１．５％）を得る；ＴＬＣ［酢酸エチ ル］：Ｒ_f＝０．０５；ｍ．ｐ．＝１３７℃（分解）。 １．１） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ− （３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミ ノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン： ジオキサン／水１：１（１Ｏｍｌ）中ｐ−アミノフェニル−３−Ｏ−メチル− β−Ｌ−フコピラノシド（例Ｉ．１）２６９．４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）溶液を 、チオホスゲン（１５０μｌ，２．０ｍｍｏｌ）と撹拌しながら混合する。１０ 分間混合後、混合液を、エチルジイソプロピルアミン４当量と混合し、続いて、 減圧濃縮し、そして残渣を、オイルポンプ真空下で１時間乾燥する。得られるイ ソチオシアン酸エステルを、 無水ジメチルホルムアミド５０ｍｌ中に溶解し、そして化合物１．１．ｄ３６１ ．７ｍｇ（０．４５ｍｍｏｌ）およびエチル−ジイソプロピルアミン３１７μｌ （１．８ｍｍｏｌ）と混合する。混合液を、室温で１６時間撹拌し、次いで減圧 濃縮し、そして残渣を、フラッシュクロマトグラフィー［アセトニトリル／水１ ５：１→１０：１→５：１］によって精製する。生成物を、ジエチルエーテルを 用いてジクロロメタン／メタノールから再結晶化する。これにより、標的生成物 ２０３．３ｍｇ（３７．７％）を黄色結晶として得る；ｍ.ｐ.＝１９６−１９８ ℃（分解）。 例１．２： ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ− カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミ ノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン、２ナトリウム塩 ： 例１．１の方法によって、複合糖質を、ペプチド複合体１．１．ｄ３６１．７ ｍｇ（０．４５ｍｍｏｌ）およびｐ−アミノフェニル−３−Ｏ−カルボキシメチ ル−β−Ｌ−フコピラノシド（例Ｉ．２）３１３．３ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）か ら製造する。 フラッシュクロマトグラフィー［アセトニトリル／水１０：１→５：１］によ る精製。０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液２当量を用いる２ナトリウム塩への転 化。これにより、黄色無定形固形物（１６２．８ｍｇ，２７．２％）を得る；Ｔ ＬＣ［アセトニトリル／水５：１］；Ｒ_f＝０．０９。 例１．３： ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−カル ボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ− チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン、塩酸塩： １．３．ａ） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−［Ｎ^ε−（フルオレニル −９−メトキシカルボニル）−リジル−アラニル］−カンプトテシン、トリフル オロ酢酸塩： 例１．１．ｃの操作方法によって、例１．１．ｂからの複合体を、Ｎ^α−（ｔ ｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^ε−（フルオレニル−９−メトキシカルボニ ル）−リジンに結合させ、続いて、例１．１．ｄによりα−アミノ官能基におい て脱ブロックする。 １．３．ｂ） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ −カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルア ミノ−チオカルボニル］−Ｎ^ε−［フルオレニル−９−メトキシカルボニル］− リジル−アラニル｝−カンプトテシン： 例１．１の方法によって、例１．３．ａからの化合物を、例Ｉ．２からの炭水 化物誘導体１．２当量と反応させる。 １．３） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−カ ルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ −チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン、塩酸塩： 複合体１．３．ｂを、ＤＭＦ中ピペリジンを用いて脱ブロックする。３０分後 、混合液を濃縮し、そして残渣を、ジクロロメタンで２回蒸解する。次いで、残 渣をＤＭＦ中に採取し、そしてメタノール／エーテルで沈殿させる。生成物を、 吸引濾別し、エーテルで洗浄し、次いで、ジオキサン／水から凍結乾燥する。凍 結乾燥物を、続いて、水中に再び採取し、０．０１Ｎ ＨＣｌ溶液１当量と混合 し、そしてもう１回凍結乾燥する。 例１．４： ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−カルボキシメ チル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカル ボニル］−リジル−バリル｝−カンプトテシン、塩酸塩： 化合物を、例１．３の方法によって製造する。 例１．５： ７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラ ノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニル］−リジル−バリ ル｝−カンプトテシン、塩酸塩： １．５．ａ） ２０−Ｏ−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−バリル］ −７−エチル−カンプトテシン： １．１．ａに記載の方法を用いて、化合物を、２０（Ｓ）−７−エチル−カン プトテシン（S．Sawada et al.，Chem．Pharm．Bull.，39（1991）1446-1454） １．８８ｇ（５．０ｍｍｏｌ）および無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル ）−バリン−Ｎ−カルボン酸２．４３ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）から製造する。こ れにより、ベージュ色結晶１．４６ｇ（５１％）を得る［ＴＬＣ（アセトニトリ ル）：Ｒ_f＝０．８６；ｍ．ｐ．＝２２４−２２７℃（分解）；ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ＝５７６（Ｍ＋Ｈ⁺）］。 １．５．ｂ） ７−エチル−２０−Ｏ−バリル−カンプトテシン，トリフルオ ロ酢酸塩： 化合物１．５．ａ（１．４４ｇ，２．５ｍｍｏｌ）から、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブ トキシカルボニル）基を、１．１．ｂ記載のように開裂する。これにより、黄色 結晶６２６ｍｇ（４３％）を得る［ＴＬＣ（アセトニトリル）：Ｒ_f＝０．４５ ；ｍ．ｐ．＝１６０℃（分解）］。 １．５．ｃ） ２０−Ｏ−［Ｎ^α−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^α −（フルオレニル−９−メトキシカルボニル）−リジル−バリル］ −７−エチル−カンプトテシン： 例１．１．ｃの方法によって、Ｎ^α−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^ε −（フルオレニル−９−メトキシカルボニル）−リジン７９７ｍｇ（１．７ｍ ｍｏｌ）を、化合物１．５ｂ（５９０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）と反応させる。減 圧濃縮およびフラッシュクロマトグラフィー［石油エーテル／酢酸エチル１：２ ］による精製により、ベージュ色結晶を得る。収量：２８７ｍｇ（３１％）［Ｔ ＬＣ（酢酸エチル）：Ｒ_f＝０．５０：ｍ．ｐ．＝１７２℃（分解）］。 １．５．ｄ） ７−エチル−２０−Ｏ−［Ｎ^ε−（フルオレニル−９−メトキ シカルボニル）−リジル−バリル］−カンプトテシン、トリフルオロ酢酸塩： 上記化合物（２７７．８ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン中トリフ ルオロ酢酸を用いて、前述のように脱保護する。これにより、黄色結晶２０９ｍ ｇ（７４％）を得る［ＴＬＣ（酢酸エチル）：Ｒ_f＝０．０６；ｍ．ｐ．＝１９ ９℃（分解）］。 １．５．ｅ） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−（Ｏ−（３−Ｏ −メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオ カルボニル］−Ｎ^ε−［フルオレニル−９−メトキシカルボニル］−リジル−バ リル｝−カンプトテシン： 例１．１の方法によって、例１．５．ｄからの化合物を、例Ｉ．１からの炭水 化物誘導体１．２当量と反応させ、そして生成物を、ジエチルエーテルを用いて ジクロロメタン／メタノール１：１からの沈殿によって精製する。これにより、 ベージュ色結晶を収率３５％で得る［ＴＬＣ（アセトニトリル／酢酸エチル１： １）：Ｒ_f＝０．６８］。 １．５） ２０（Ｓ）−７−エチル−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−メ チル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカル ボニル］−リジル−バリル｝−カンプトテシン、塩酸塩： 複合体１．５．ｅを、ＤＭＦ中ピペリジンを用いて脱ブロックする。３０分後 、混合液を濃縮し、そして残渣を、ジエチルエーテルを用いてジクロロメタン／ メタノール１：１から２回沈殿させる。続いて、生成物を、水中に採取し、０． ０１Ｎ ＨＣｌ溶液１当量と混合し、そして凍結乾燥する。 例２．１： ２０（Ｒ，Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε− ビス−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ− フェニルアミノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン ２．１．ａ） ２０（Ｒ，Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−カンプトテ シン： このカンプトテシン誘導体は、Wall et al.(J．Med．Chem.，29(1986)，2358) によりラセミ三環式化合物から製造される。 ２．１．ｂ） ２０（Ｒ，Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ− アラニル−カンプトテシン、トリフルオロ酢酸塩： 無水ジメチルホルムアミド３０ｍｌ中２０（Ｒ，Ｓ）−１０，１１−メチレン ジオキシ−カンプトテシン３００ｍｇ（０．７６５ｍｍｏｌ）溶液を、撹拌しな がら、無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アラニン−Ｎ−カルボン酸 ３３０ｍｇ（１．５３ｍｍｏｌ）および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−ピリ ジン３０ｍｇと混合する。室温で撹拌２４時間後、各場合２回、同量の無水Ｎ− （ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アラニン−Ｎ−カルボン酸および４−（Ｎ ，Ｎ−ジメチルアミノ）−ピリジン３０ｍｇを添加する。反応終了後、混合液を 減圧濃縮する。エーテルを用いてジクロロメタンからの沈殿により、保護された 中間体を、８０％の収率で得る。［ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノール９５： ５ Ｒ_f＝０．３８］。中間体を、ジクロロメタン１０ｍｌ中に採取し、そして ０℃において、無水トリフルオロ酢酸２ｍｌを添加する。１５分後、混合液を濃 縮し、生成物を、エーテルを用いてジクロロメタン／メタノールからの沈殿させ る。 収率：９７％［ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４６４＝Ｍ＋Ｈ］。 ２．１） ２０（Ｒ，Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α ，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒ ドロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニル］−リジル −アラニル｝−カンプトテシン １．１．ｃ、１．１．ｄおよび１．１に関する操作方法によって、複合糖質を 、例２．１．ｂからのアラニル複合体から製造する。 収率：８７％［ＴＬＣ：アセトニトリル／水１０：１ Ｒ_f＝０．３３］［Ｆ ＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１２１４＝Ｍ＋Ｈ］。 例２．２： ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス −［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェ ニルアミノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン ２．２．ａ） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−カンプトテシン ： このカンプトテシン誘導体は、Wall et al.(J．Med．Chem.，29(1986)，2358) により、ラセミ体の分割によって得られるＳ−立体配置の鏡像異性的に純粋な三 環式化合物から製造される。 ２．２） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α， Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロ キシ−フェニルアミノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシ ン 例２．１の方法によって製造。 例２．３： ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３ −Ｏ−カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニ ルアミノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カ ンプトテシン、塩酸塩： ２．３．ａ） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−アラ ニル−カンプトテシン、トリフルオロ酢酸塩： この複合体は、２．１．ｂの方法によって、化合物２．２．ａから製造する。 収率：２段階にわたって７２％［ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４６４＝Ｍ＋Ｈ］。 ２．３．ｂ） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^ε −［フルオレニル−９−メトキシカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプ トテシン、トリフルオロ酢酸塩： 例１．１．ｃの操作方法によって、例２．３．ａからの複合体を、Ｎ^α−（ｔ ｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^ε−（フルオレニル−９−メトキシカルボニ ル）−リジンと結合させ、続いて、トリフルオロ酢酸の作用によってα−アミノ 官能基において脱ブロックする。 収率：２段階にわたって５２％。 ２．３．ｃ） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α −［Ｏ−（３−Ｏ−カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒド ロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニル］−Ｎ^ε−［フルオレニル−９−メト キシカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン： 例１．１の方法によって、例２．３ｂからの化合物を、例Ｉ．２からの炭水化 物誘導体１．２当量と反応させる。粗生成物を、水と撹拌し、続いて、エーテル を用いるジクロロメタン／メタノールからの沈殿によって精製する。 収率：８８％［ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノール／１７％濃度アンモニア １５：４：０．５ Ｒ_f＝０．２７］。 ２．３） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α− ［Ｏ−（３−Ｏ−カルボキシメチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキ シ−フェニルアミノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン 、塩酸塩： 複合体２．３．ｃを、ＤＭＦ中ピペリジンを用いて脱ブロックする。２０分後 、混合液を濃縮し、そして残渣を、ジクロロメタンで２回蒸解する。生成物を吸 引濾別し、エーテルで再度洗浄し、次いで、ジオキサン／水から凍結乾燥する。 凍結乾燥物を、続いて、ジオキサン／水中に採取し、０．１Ｎ ＨＣｌ溶液１当 量と混合し、そしてもう１回凍結乾燥する。 収率：定量的［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸５：１：０．２ Ｒ_f＝ ０．２６］［ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９４７＝Ｍ＋Ｈ］。例２．４： ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３ −Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ− チオカルボニル］−リジル−ロイシル｝−カンプトテシン、塩酸塩 ２．４．ａ） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−ロイ シル−カンプトテシン、トリフルオロ酢酸塩 例２．１．ｂの方法および２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−カン プトテシン（化合物２．２．ａ）から出発することによって、標的化合物を、無 水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−ロイシン−Ｎ−カルボン酸を用いて 製造する。 ２．４．ｂ） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^ε −［フルオレニル−９−メトキシカルボニル］−リジル−ロイシル｝−カンプ トテシン、トリフルオロ酢酸塩： 例１．１．ｃの操作方法によって、例２．４．ａからの複合体を、Ｎ^α −（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^ε−（フルオレニル−９−メトキシ カルボニル）−リジンと結合させ、続いて、トリフルオロ酢酸の作用によってα −アミノ官能基において脱ブロックする。 収率：２段階にわたって６９％。 ２．４．ｃ） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α −［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フ ェニルアミノ−チオカルボニル］−Ｎ^ε−［フルオレニル−９−メトキシカルボ ニル］−リジル−ロイシル｝−カンプトテシン： 例１．１の方法によって、例２．４．ｂからの化合物を、例Ｉ．１からの炭水 化物誘導体１．２当量と反応させる。粗生成物を、エーテルを用いるジクロロメ タン／メタノールからの沈殿によって精製する。 収率：９５％［ＴＬＣ：アセトニトリル／水２０：１ Ｒ_f＝０．４８］。 ２．４） ２０（Ｓ）−１０，１１−メチレンジオキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α− ［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニ ルアミノ−チオカルボニル］−リジル−ロイシル｝−カンプトテシン、塩酸塩 複合体２．４．ｃを、ＤＭＦ中ピペリジンを用いて脱ブロックする。２０分後 、混合液を濃縮し、そしてジクロロメタン添加後、各場合２回蒸留する。生成物 を、ジクロロメタン／メタノールからエーテルを用いて沈殿させる。続いて、そ れを、水中に採取し、０．１Ｎ ＨＣｌ溶液１当量と混合し、そして凍結乾燥す る。 収率：７５％［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸５：１：０．２ Ｒ_f＝０．４７］。 例３．１： ２０（Ｓ）−９−アミノ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ− メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカ ルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン ３．１．ａ） ２０（Ｓ）−９−ニトロ−カンプトテシン： この誘導体は、Wall et al.(J．Med．Chem.，29(1986)，2358)の操作によって 製造される。 ３．１．ｂ） ２０（Ｓ）−９−ニトロ−２０−Ｏ−アラニル−カンプトテシ ン、トリフルオロ酢酸塩： 無水ジメチルホルムアミド５５ｍｌ中例３．１．ａからの化合物５１６ｍｇ（ １．３１ｍｍｏｌ）溶液を、撹拌しながら、無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカル ボニル）−アラニン−Ｎ−カルボン酸８４６ｍｇ（３． ９ｍｍｏｌ）および４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−ピリジン５５ｍｇと混合 する。４時間後、混合液を減圧濃縮し、そして残渣を、ジクロロメタン／酢酸エ チル２：１を用いてシリカゲル上でクロマトグラフィーを行う。回収された出発 物質を、同条件下でもう１度反応させて、保護された中間体を、５４％の収率で 得る。［ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノール９５：５ Ｒ_f＝０．５］。中間 体を、ジクロロメタン４０ｍｌ中に採取し、そして０℃において、無水トリフル オロ酢酸４ｍｌを添加する。１５分後、混合液を濃縮し、生成物を、エーテルを 用いて粉砕して精製する。収率：８０％。 ３．１．ｃ） ２０（Ｓ）−９−アミノ−２０−Ｏ−アラニル−カンプトテシ ン、トリフルオロ酢酸塩： ３．１．ｂからの化合物３２０ｍｇ（０．５５ｍｍｏｌ）を、エタノール３０ ｍｌ中に採取し、そして二酸化プラチナ１０ｍｇで１５分間水素化する。触媒を 濾別し、溶液を濃縮し、そしてメタノールを用いてジクロロメタンから沈殿させ た後、生成物を次の段階に使用する。 ３．１．ｄ） ２０（Ｓ）−９−アミノ−２０−Ｏ−（リジル−アラニル）− カンプトテシン、２トリフルオロ酢酸塩： ジメチルホルムアミド５ｍｌ中Ｎ，Ｎ−ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル ）−リジン３１ｍｇ（０．０９ｍｍｏｌ）を、Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミド １５ｍｇ（０．１３５ｍｍｏｌ）およびジシクロヘキシル−カルボジイミド２２ ｍｇ（０．１１ｍｍｏｌ）により２時間予備活性化する。続いて、化合物３．１ ．ｃ（６０ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）およびエチル−ジイソプロピルアミン３１ μｌを添加し、そしてそのバッチを、室温でさらに１６時間撹拌する。減圧濃縮 およびフラッシュクロ マトグラフィー［トルエン／エタノール８：１］による精製によって、中間体を 、４７％の収率で得る。［ＴＬＣ：ジクロロメタン／メタノール９：１ Ｒ_f＝ ０．３１］。ジクロロメタン（１０ｍｌ）中３０ｍｇ（０．０３９ｍｍｏｌ）を 、無水トリフルオロ酢酸（２ｍｌ）と混合し、得られる溶液を、室温で３０分間 撹拌する。混合液を濃縮し、次いで、生成物を、エーテルを用いてジクロロメタ ン／メタノールから沈殿させる（２０ｍｇ，５７％）。［ＴＬＣ：アセトニトリ ル／水／氷酢酸１０：５：３ Ｒ_f＝０．４４］。 ３．１） ２０（Ｓ）−９−アミノ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ− （３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミ ノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン 例１．１の方法によって、複合糖質を、３．１．ｄおよび１．１からの化合物 から製造する。収率：５８％［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸５：１：０ ．２ Ｒ_f＝０．６］。例４．１： ２０（Ｓ）−７−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フ コピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニル］−リジル −アラニルオキシメチル｝−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ− メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカ ルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン ４．１．ａ） ２０（Ｓ）−７−ヒドロキシメチル−カンプトテシン： この化合物は、Miyasaka et al.(Chem．Pharm．Bull.，39（1991）2574)の操 作によって製造される。 ４．１．ｂ） ２０（Ｓ）−７−（アラニルオキシメチル）−２０−Ｏ−アラ ニル−カンプトテシン、２トリフルオロ酢酸塩： ＤＭＦ１００ｍｌ中に、２０（Ｓ）−７−ヒドロキシメチル−カンプトテシン １ｇ（２．６４ｍｍｏｌ）を溶解し、次いで、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリ ジン１００ｍｇおよび無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−アラニ ン−Ｎ−カルボン酸１．５当量と混合し、そして懸濁液を、室温で１６時間撹拌 する。完全な二重アシル化を達成するために、さらなる４−Ｎ，Ｎ−ジメチルア ミノピリジン１００ｍｇお よび無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アラニン−Ｎ−カルボン酸１ ．５当量を添加し、そして混合液を室温でさらに１６時間放置する。混合液を濃 縮し、そして酢酸エチル／石油エーテル１：１を用いるフラッシュクロマトグラ フィーによって精製する。精製物質を、ジクロロメタン３０ｍｌ中に採取し、そ して０℃において、トリフルオロ酢酸５ｍｌと混合する。混合液を３０分間撹拌 し、次いで、濃縮し、そしてアミノ脱ブロックされた生成物を、ジクロロメタン ／エーテルから沈殿させ、続いて、ジオキサン／水から凍結乾燥する。［ＴＬＣ ：アセトニトリル／水／氷酢酸１０：５：５ Ｒ_f＝０．１７］［ＦＡＢ−ＭＳ ：ｍ／ｚ＝７７７＝Ｍ＋Ｈ｝。 ４．１） ２０（Ｓ）−７−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル− β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニル ］−リジル−アラニルオキシメチル｝−２０−Ｏ−｛Ｎ^α，Ｎ^ε−ビス−［Ｏ− （３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミ ノ−チオカルボニル］−リジル−アラニル｝−カンプトテシン 例１．１．ｃ，１．１．ｄおよび１．１の方法によって、複合体を、例４．１ ．ｂの化合物から製造するが、全段階において、問題の反応物量を２倍量用いる 。［ＴＬＣ：アセトニトリル／水１０：１ Ｒ_f＝０．２］［ＭＡＬＤＩ−ＭＳ ：ｍ／ｚ＝２０４７＝Ｍ（＋３）＋Ｎａ］。 例５．１： ２０（Ｓ）−７−［４−（メチルピペラジノ）メチル］−１０，１１−（エチ レンジオキシ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピ ラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオ カルボニル］−リジル−ロイシル｝−カンプトテシン、塩酸塩 ５．１．ａ） ２０（Ｓ）−７−［（メチルピペラジノ）メチル］−１０，１ １−（エチレンジオキシ）−カンプトテシン、トリフルオロ酢酸塩 この誘導体は、Luzzio et al.(J．Med．Chem．38(1995)，396)の操作にしたが って製造される。 ５．１．ｂ） ２０（Ｓ）−７−［４−（メチルピペラジノ）メチル］−１０ ，１１−（エチレンジオキシ）−２０−Ｏ−ロイシル−カンプトテシン、３トリ フルオロ酢酸塩 例２．１．ｂの方法によって、標的化合物を、例５．１．ａ）からの化合物か ら出発し、そして無水Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−ロイシン−Ｎ− カルボン酸（１０当量）を用いて製造する。Ｂｏｃ保護された中間体を、フラッ シュクロマトグラフィー［ジクロロメタン／ メタノール／１７％濃度アンモニア１５：１：０．１］によって精製する。収率 ：２段階にわたって６２％［ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６３２＝Ｍ＋Ｈ；ｍ／ｚ＝ ６５４＝Ｍ＋Ｎａ］。 ５．１．ｃ） ２０（Ｓ）−７−［４−（メチルピペラジノ）メチル］−１０ ，１１−（エチレンジオキシ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^ε−［フルオレニル−９−メト キシカルボニル］−リジル−ロイシル｝−カンプトテシン、３トリフルオロ酢酸 塩： 例１．１．ｃの操作方法によって、例５．１．ｂからの複合体を、Ｎ^α−（ｔ ｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^ε−（フルオレニル−９−メトキシカルボニ ル）−リジンと結合させ、続いて、トリフルオロ酢酸の作用によってα−アミノ 官能基において脱ブロックする。Ｂｏｃ保護された中間体を、フラッシュクロマ トグラフィー［ジクロロメタン／メタノール１０：１］によって精製する。収率 ：２段階にわたって５３％［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸５：１：０． ２ Ｒ_f＝０．１３］ ［ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝９８２＝Ｍ＋Ｈ］。 ５．１．ｄ） ２０（Ｓ）−７−［４−（メチルピペラジノ）メチル］−１０ ，１１−（エチレンジオキシ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル− β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニル ］−Ｎ^ε−［フルオレニル−９−メトキシカルボニル］−リジル−ロイシル｝− カンプトテシン： 例１．１の方法によって、例５．１．ｃからの化合物を、例Ｉ．１からの炭水 化物誘導体１．２当量と反応させる。粗生成物を、エーテルを用いるメタノール からの沈殿によって精製する。収率：８３％［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷 酢酸５：１：０．２ Ｒ_f＝０．２１］。 ５．１） ２０（Ｓ）−７−［４−（メチルピペラジノ）メチル］−１０，１ １−（エチレンジオキシ）−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β− Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニル］− リジル−ロイシル｝−カンプトテシン、塩酸塩 複合体５．１．ｄを、ＤＭＦ中ピペリジンを用いて脱ブロックする。２０分後 、混合液を濃縮し、そしてジクロロメタン添加後、残渣を２回蒸留する。生成物 を、ジクロロメタン／メタノールからエーテルを用いて沈殿させる。続いて、そ れを、水中に採取し、０．１Ｎ ＨＣｌ溶液１当量を混合し、そして凍結乾燥す る。収率：９５％［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸１０：３：１．５ Ｒ_f ＝０．１５］［ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１０７１＝Ｍ＋Ｈ］。例６．１： ７−エチル−１０−ヒドロキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α−［Ｏ−（３−Ｏ−メチル −β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニルアミノ−チオカルボニ ル］−リジル−バリル｝−カンプトテシン、塩酸塩： ６．１．ａ） ２０−Ｏ−［Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル） −バリル］−７−エチル−１０−ヒドロキシ−カンプトテシン： １．１．ａに記載の方法を用いて、化合物を、２０（Ｓ）−７−エチル−１０ −ヒドロキシ−カンプトテシン（S．Sawada et al.，Chem．Pharm．Bull.，39（ 1991）3183-3188）３９２．４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）および無水Ｎ−（ｔｅｒ ｔ−ブトキシカルボニル）−バリン−Ｎ−カルボン酸を６日間にわたって全２． ４３ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）から製造する。フラッシュクロマトグラフィー［石 油エーテル／酢酸エチル５：１→２：１→１：１］により、明黄色結晶３５３ｍ ｇ（４５％）を得る［ＴＬＣ：アセトニトリル／酢酸エチル１：１ Ｒ_f＝０． ６３；ｍ．ｐ．＝９５−９７℃］。 ６．１．ｂ） ７−エチル−１０−ヒドロキシ−２０−Ｏ−バリル−カンプト テシン，トリフルオロ酢酸塩： 化合物６．１．ａ（３４０ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）から、Ｎ−（ｔｅｒｔ− ブトキシカルボニル）基を、１．１．ｂ記載のように切り離す。これにより、黄 色結晶２５５ｍｇ（９８％）を得る［ＴＬＣ（アセトニトリル／酢酸エチル１： １）：Ｒ_f＝０．０４；ｍ．ｐ．＝１８９℃（分解）］。 ６．１．ｃ） ２０−Ｏ−［Ｎ^α−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^ε −（フルオレニル−９−メトキシカルボニル）−リジル−バリル］−７−エチル −１０−ヒドロキシ−カンプトテシン： 例１．１．ｃの方法によって、Ｎ^α−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ^ε −（フルオレニル−９−メトキシカルボニル）−リジン５６２．３ｍｇ（１． ２ｍｍｏｌ）を、化合物６．１．ｂ（２４２．２ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）と反応 させる。減圧濃縮およびフラッシュクロマトグ ラフィー［石油エーテル／酢酸エチル５：１→３：１→１：１］による精製によ り、黄色結晶を得る。収量：２５１ｍｇ（６７％）［ＴＬＣ（アセトニトリル／ 酢酸エチル１：１）：Ｒ_f＝０．６８；ｍ．ｐ．＝１６３℃（分解）］。 ６．１．ｄ） ７−エチル−２０−Ｏ−［Ｎ^ε−（フルオレニル−９−メトキ シカルボニル）−リジル−バリル］−１０−ヒドロキシ−カンプトテシン、トリ フルオロ酢酸塩： 上記化合物（２４４．９ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン中トリ フルオロ酢酸を用いて、前述のように脱保護する。これにより、黄色結晶１１５ ｍｇ（４６％）を得る［ＴＬＣ（アセトニトリル／酢酸エチル１：１）：Ｒ_f＝ ０．０５；ｍ．ｐ．＝１９６℃（分解）］。 ６．１．ｅ） ２０（Ｓ）−７−エチル−１０−ヒドロキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α −（Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フ ェニルアミノ−チオカルボニル］−Ｎ^ε−［フルオレニル−９−メトキシカルボ ニル］−リジル−バリル｝−カンプトテシン 例１．１の方法によって、例６．１．ｄからの化合物を、例Ｉ．１からの当量 の炭水化物誘導体と反応させ、そして生成物を、フラッシュクロマトグラフィー ［石油エーテル／酢酸エチル１：１→２：３→１：２］によって精製する。ベー ジュ色結晶を収率３６％で得る［ＴＬＣ（アセトニトリル／酢酸エチル１：１） ：Ｒ_f＝０．５５］。 ６．１） ２０（Ｓ）−７−エチル−１０−ヒドロキシ−２０−Ｏ−｛Ｎ^α− ［Ｏ−（３−Ｏ−メチル−β−Ｌ−フコピラノシル）−４−ヒドロキシ−フェニ ルアミノ−チオカルボニル］−リジル−バリル｝−カ ンプトテシン、塩酸塩： 複合体６．１．ｅを、ＤＭＦ中ピペリジンを用いて脱ブロックする。２時間後 、混合液を濃縮し、そして残渣を、ジエチルエーテルを用いてジクロロメタン／ メタノール１：１から２回沈殿させる。次いで、沈殿物を水中に採取し、０．０ １Ｎ ＨＣｌ溶液１当量を混合し、そして凍結乾燥する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ， ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ， ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ (72)発明者 バウムガルテン，イエルク ドイツ連邦共和国デー―42115ブツペルタ ール・ヘンゼルベーク13 (72)発明者 シユペルツエル，ミヒヤエル ドイツ連邦共和国デー―42275ブツペルタ ール・ノルマネンシユトラーセ31

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 一般式（Ｉ） の化合物、およびそれらの異性体、異性体混合物および塩。 Ａ−Ｃｐ−Ｂ （Ｉ） 式中、 Ｃｐは、式 ［式中、 Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は、互いに独立して、水素、炭素原子３個までをもつ アルキル、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシルもしくはニトロを表すことができる か、または Ｒ²およびＲ³は、一緒になって、式 （ここで、ｍは値１もしくは２をもつことができる）の基を表し、そして Ｒ⁵は、Ｈ，−ＣＨ₂ＣＨ₃，−ＣＨ₂−Ｏ−^*，−ＣＨ₂−ＮＨ^*， を表すか、 または−ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）Ｒ⁶もしくは−ＣＨ₂−Ｎ^*Ｒ⁶ （式中、Ｒ⁶は、アリールメチルもしくはヘタリールメチルを表す）を表す］か 、［式中、 Ｒ⁷およびＲ⁸は、Ｒ²およびＲ³について定義されたとおりであり、そしてこれ らと同じでも異なっていてもよい］か、 ［式中、 Ｒ⁹は、水素、または−ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₃）₂を表し、そして Ｒ¹⁰は、水素またはエチルを表す］か、 ［式中、 Ｒ¹¹およびＲ¹²は、Ｒ²およびＲ³について定義されたとおりであり、そしてこ れらと同じでも異なっていてもよい］か、 あるいは［式中、 Ｒ¹³およびＲ¹⁴は、Ｒ²およびＲ³について定義されたとおりであり、そしてこ れらと同じでも異なっていてもよい］ の基を表していて、 この場合、Ｃｐは、＃を付した位置においてＡに結合され、そして^*を付した 位置においてＢに結合される、 Ａは、式 （ここで、１≦（ｎ＋ｏ＋ｐ）≦３）の基を表し、 Ｂは、水素か、または式 （ここで、０≦（ｑ＋ｒ＋ｓ）≦３）の基を表すが、式中、 Ｍ¹およびＭ²は、互いに独立して各々、主鎖が、直線状態で２１個までの原子 を含む架橋基を表し、 Ｌ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵およびＬ⁶は、互いに独立して各々、複合糖質化学に おいて常用されるリンカー基を表し、 Ｓｐ¹，Ｓｐ²，Ｓｐ³，Ｓｐ⁴，Ｓｐ⁵およびＳｐ⁶は、互いに独立して各々、各 場合、場合によっては置換されてもよい、炭素原子１０個までをもつアリーレン を表すか、炭素原子８個までをもつアルキレンを表し、そして Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵およびＫ⁶は、互いに独立して各々、式（ＩＩ） ［式中、 Ｃは、メチル、ヒドロキシメチル、炭素原子６個までをもつアルコキシメチル 、炭素原子６個までをもつアシルオキシメチルか、または Ｄが式（ＩＩ）の基を表す式−ＣＨ₂−Ｄの基を表し、 Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷は、互いに独立して各々、水素、ヒドロキシル、場合に よってはヒドロキシル置換される炭素原子６個までをもつアルコキシ、炭素原子 ６個までをもつアルキルもしくはアシルによって場合によっては置換されてもよ いアミノ、ハロゲン、スルフェート、または式 （式中、Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子６ 個までをもつアルコキシを表すか、または炭素原子６個までをもつアルキルによ って場合によっては置換されてもよいアミノを表し、そしてｕおよびｖは、互い に独立して各々、値０，１，２，３もしくは４をもつことができる）の基を表す か、あるいは Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷は、互いに独立して各々、式（ＩＩ）の基を表すか、あ るいは 基Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷の２つが、一緒になって、エポキシ基を表す］ の基を表す。 ２． Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵およびＫ⁶が、互いに独立して各々、次の場合 の式（ＩＩ）の基を表すことができ、ここで Ｃは、メチル、ヒドロキシメチル、メトキシメチルもしくはアセトキシメチル を表し、 Ｒ¹⁵は、水素、ヒドロキシル、メトキシ、または式 ［式中、ｕおよびｖは、互いに独立して各々、値１もしくは２をもつことができ 、そして Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子４個まで をもつアルコキシを表す］の基を表すか、あるいは Ｒ¹⁵は、式（ＩＩ）の基を表し、 Ｒ¹⁶は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、炭素原子４個までをもつアルコキシ 、スルフェートまたは式 ［式中、ｕおよびｖは、互いに独立して各々、値１もしくは２をもつことができ 、そして Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子４個まで をもつアルコキシを表すか、または炭素原子４個までをもつアルキルによって場 合によっては置換されてもよいアミノを表す］の基を表し、 Ｒ¹⁷は、ヒドロキシル、ヒドロキシルによって場合によっては置換されてもよ い炭素原子４個までをもつアルコキシ、炭素原子４個までをもつアルキルもしく はアシルによって場合によっては置換されてもよいアミノ、または式 ［式中、ｕおよびｖは、互いに独立して各々、値１もしくは２をもつことができ 、そして Ｒ¹⁸およびＲ¹⁹は、互いに独立して各々、ヒドロキシルか、炭素原子４個まで をもつアルコキシを表す］の基を表すか、 あるいは、 Ｒ¹⁵およびＲ¹⁶は、一緒になって、エポキシ基を表す、請求の範囲１記載の一 般式（Ｉ）の化合物、およびそれらの異性体、異性体混合物および塩。 ３． Ｓｐ¹，Ｓｐ²，Ｓｐ³，Ｓｐ⁴，Ｓｐ⁵およびＳｐ⁶は、互いに独立して各 々、各場合、１個の基Ｋ¹，Ｋ²，Ｋ³，Ｋ⁴，Ｋ⁵もしくはＫ⁶およびＬ¹，Ｌ²，Ｌ³ ，Ｌ⁴，Ｌ⁵もしくはＬ⁶に結合され、そしてまた、ヒドロキシル、カルボキシル 、炭素原子４個までをもつカルボキシアルキル、ニトロ、シアノ、ハロゲン、炭 素原子４個までをもつアルキル、炭素原子４個までをもつハロゲノアルキルによ るか、または炭素原子４個までをもつアルコキシによって、場合によっては一置 換または多置換されてもよい、炭素原子１０個までをもつアリーレンを表す、請 求の範囲１記載の一般式（Ｉ）の化合物、およびそれらの異性体、異性体混合物 および塩。 ４． Ｌ¹，Ｌ²，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵およびＬ⁶が、互いに独立して各々、 ［式中、Ｒ²⁰は、塩素を表すか、または炭素原子６個までをもつヒドロキシアル キルアミノを表す］ を表す、請求の範囲１記載の一般式（Ｉ）の化合物、およびそれらの異性体、異 性体混合物および塩。 ５． Ｍ¹およびＭ²が、互いに独立して各々、アミノ官能基を介してＬ¹，Ｌ² ，Ｌ³，Ｌ⁴，Ｌ⁵および／またはＬ⁶に結合され、アシル官能基を介してＣｐに結 合され、そしてアミノ酸構成単位が、場合によっては保護基を担持していてもよ いペプチドを表す、請求の範囲１記載の一般式（Ｉ）の化合物、およびそれらの 異性体、異性体混合物および塩。 ６． Ｍ¹および／またはＭ²が、モノ−、ジ−またはトリペプチドを表すこと を特徴とする、請求の範囲５記載の化合物。 ７． ペプチドが、場合によっては保護基を担持していてもよい、グリシル、 アラニル、バリル、ロイシル、リジル、セリル、グルタミル、スレオニル、アス パラギル、イソロイシル、ジアミノプロピオニル、ジアミノブチリル、アルギニ ル、ヒスチジルおよび／またはオルニチルからなる群から選ばれる、アミノ酸構 成単位を含有することを特徴とする、請求の範囲５または６記載の化合物。 ８． 請求の範囲１記載の一般式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、一般式 （ＩＩＩ） Ｈ_B−Ｃｐ−Ｈ_A （ＩＩＩ） ［式中、Ｃｐは、先に定義されたとおりであり、そして水素原子Ｈ_AおよびＨ_Bは 、それぞれ、＃および＊を付した位置に位置する］の化合物が、適当であれば、 保護基によってＨ_Bを取り替えた後、適当な溶媒中、適当であれば塩基の存在下 で、慣用の方法によって、先に定義された基Ｍ¹に対応し、場合によっては保護 基を担持してもよい活性化されたカルボキシル成分Ｍ¹ _aと反応され、１個、１個 以上または全てのＭ¹の保護基が、適当であれば、既知の方法によって選択的に 除去され、そして生成物が、一般式（ＩＶ） Ｋ¹−Ｓｐ¹−Ｌ¹ _a （ＩＶ） ［式中、Ｋ¹およびＳｐ¹は、各々、先に定義されたとおりであり、Ｌ¹ _aは、基Ｌ¹ の反応性前駆体を表す］の化合物と反応されるが、この場合、保護基は、適当 であれば、選択的に除去され、そして種々の基Ｋ²−Ｓｐ²−Ｌ²−およびＫ³−Ｓ ｐ³−Ｌ³−が、同様の方法で段階的に導入できる、そして、もし炭水化物成分が 、＊を付した位置に結合される必要があれば、Ｈ_Bを取り替える保護基が、適当 であれば、既知の方法によって選択的に除去され、基Ｍ²、および所望のように 、式Ｋ⁴−Ｓｐ⁴−Ｌ⁴−、Ｋ⁵−Ｓｐ⁵−Ｌ⁵−およびＫ⁶−Ｓｐ⁶−Ｌ⁶−の基が、 前記方法で導入されるか、 あるいは、もしＭ¹および／またはＭ²が、ペプチドであれば、最初のアミノ酸 基が、場合によっては保護基を担持してもよい対応するカルボキシル成分の状態 で、慣用の方法によって同様に導入され、保護基が、適当であれば除去され、場 合によっては保護基を担持してもよいアミノ酸基が結合され、保護基が、適当で あれば再び除去され、前記式Ｋ¹−Ｓｐ¹−Ｌ¹−、Ｋ²−Ｓｐ²−Ｌ²−、Ｋ³−Ｓ ｐ³−Ｌ³−、Ｋ⁴−Ｓｐ⁴−Ｌ⁴−、Ｋ⁵−Ｓｐ⁵−Ｌ⁵−および／またはＫ⁶−Ｓｐ⁶ −Ｌ⁶−の基が導入され、そして必要であれば、保護基が除去される、 そしてさらにまた、必要であれば、立体異性体が、慣用の方法によって分離さ れ、そして化合物が、必要であれば、それらの塩に転化される、ことを特徴とす る方法。 ９． 医薬を製造するための請求の範囲１記載の一般式（Ｉ）の化合物の使用 。 １０．請求の範囲１記載の一般式（Ｉ）の化合物を含有する医薬。