JP2001503989A - 骨髄に由来するTGFβ1応答細胞 - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.選択されて均質な骨髄由来TGFβ1応答細胞の集団。 2.前記細胞が前間葉前駆細胞またはストロマ細胞である、請求項1に記載の細 胞の集団。 3.前間葉前駆細胞が多能性の芽球様細胞である、請求項2に記載の細胞の集団 。 4.TGFβ1が細胞外マトリックス結合部位を含むTGFβ1融合タンパク質である 、請求項1〜3のいずれか1項に記載の細胞の集団。 5.細胞外マトリックス結合部位がTGFβ1を細胞外マトリックスにターゲティ ングする、請求項4に記載の細胞の集団。 6.細胞外マトリックス結合部位がコラーゲン結合部位で、細胞外マトリックス がコラーゲンである、請求項5に記載の細胞の集団。 7.コラーゲン結合部位がフォンビルブラント因子由来のコラーゲン結合部位で ある、請求項6に記載の細胞の集団。 8.in vitroで骨髄細胞をTGFβ1タンパク質で処理し、それにより前記細胞か らTGFβ1タンパク質に応答性の細胞の集団を選択することを含んでなる、骨髄 からの骨髄由来TGFβ1応答細胞の集団の選択方法。 9.骨髄由来TGFβ1応答細胞が前間葉前駆細胞またはストロマ細胞である、請 求項8に記載の方法。 10.前間葉前駆細胞が多能性の芽球様細胞である、請求項9に記載の方法。 11.TGFβ1が細胞外マトリックス結合部位を含むTGFβ1融合タンパク質である 、請求項8〜10のいずれか1項に記載の方法。 12.細胞外マトリックス結合部位がTGFβ1を細胞外マトリックスにターゲティ ングする、請求項11に記載の方法。 13.細胞外マトリックス結合部位がコラーゲン結合部位で、細胞外マトリックス がコラーゲンである、請求項12に記載の方法。 14.コラーゲン結合部位がフォンビルブラント因子由来のコラーゲン結合部位で ある、請求項13に記載の方法。 15.治療用タンパク質をコードするDNAセグメントを含む、形質導入された骨髄 由来TGFβ1応答細胞の均質集団。 16.前記細胞が前間葉前駆細胞またはストロマ細胞である、請求項15に記載の細 胞の集団。 17.前間葉前駆細胞が多能性の芽球様細胞である、請求項16に記載の細胞の集団 。 18.TGFβ1が細胞外マトリックス結合部位を含むTGFβ1融合タンパク質である 、請求項15〜17のいずれか1項に記載の細胞の集団。 19.細胞外マトリックス結合部位がTGFβ1を細胞外マトリックスにターゲティ ングする、請求項18に記載の細胞の集団。 20.細胞外マトリックス結合部位がコラーゲン結合部位で、細胞外マトリックス がコラーゲンである、請求項19に記載の細胞の集団。 21.コラーゲン結合部位がフォンビルブラント因子由来のコラーゲン結合部位で ある、請求項20に記載の細胞の集団。 22.DNAセグメントがヒトIX因子をコードする、請求項15または20に記載の細胞 の集団。 23.骨髄由来細胞から組換えタンパク質を発現させる方法であって、a)in vitro で骨髄細胞をTGFβ1タンパク質で処理し、それにより前記細胞からTGFβ1タン パク質に応答性の細胞の集団を選択し、そしてb)TGFβ1応答細胞中に治療用タ ンパク質をコードするDNAセグメントを挿入して、TGFβ1応答細胞から治療用タ ンパク質を発現させる、ステップを含んでなる方法。 24.TGFβ1が細胞外マトリックス結合部位を含むTGFβ1融合タンパク質である 、請求項23に記載の方法。 25.TGFβ1融合タンパク質を細胞外マトリックスにターゲティングするステッ プをさらに含む、請求項24に記載の方法。 26.細胞外マトリックス結合部位がコラーゲン結合部位で、細胞外マトリックス がコラーゲンである、請求項25に記載の方法。 27.骨髄細胞がヒト細胞である、請求項23に記載の方法。 28.TGFβ1応答細胞が前間葉前駆細胞またはストロマ細胞である、請求項26 に記載の方法。 29.前間葉前駆細胞が多能性の芽球様細胞である、請求項28に記載の方法。 30.DNAセグメントがウイルスベクターによりin vitroでTGFβ1応答細胞に挿入 される、請求項23に記載の方法。 31.ウイルスベクターがレトロウイルスベクターである、請求項30に記載の方法 。 32.DNAセグメントがヒトIX因子をコードする、請求項23〜31のいずれか1項に 記載の方法。 33.哺乳動物に治療用タンパク質を供給する方法であって、骨髄由来のTGFβ1 応答細胞を哺乳動物に導入することを含み、骨髄由来TGFβ1応答細胞が、(a)骨 髄サンプルからTGFβ1応答細胞を選択するためにin vitroでTGFβ1タンパク質 により処理され、かつ(b)治療用タンパク質をコードするDNAセグメントをTGFβ 1応答細胞に挿入するようにin vitroで処理されたものであり、前記細胞が前記 哺乳動物の体内で治療に有効な量の治療用タンパク質を発現する、上記方法。 34.TGFβ1タンパク質が細胞外マトリックス結合部位を含むTGFβ1融合タンパ ク質である、請求項33に記載の方法。 35.TGFβ1融合タンパク質を細胞外マトリックスにターゲティングするステッ プをさらに含む、請求項34に記載の方法。 36.細胞外マトリックス結合部位がコラーゲン結合部位で、細胞外マトリックス がコラーゲンである、請求項35に記載の方法。 37.TGFβ1応答細胞が前間葉前駆細胞またはストロマ細胞である、請求項36に 記載の方法。 38.前間葉前駆細胞が多能性の芽球様細胞である、請求項37に記載の方法。 39.DNAセグメントがウイルスベクターによりin vitroでTGFβ1応答細胞に挿入 されている、請求項33に記載の方法。 40.ウイルスベクターがレトロウイルスベクターである、請求項39に記載の方法 。 41.DNAセグメントがヒトIX因子をコードする、請求項33〜40のいずれか1 項に記載の方法。 42.遺伝子治療法であって、 a)TGFβ1タンパク質をコラーゲンマトリックスにターゲティングするフ ォンビルブラント因子由来のコラーゲン結合部位を含むTGFβ1融合タンパ ク質を含浸させたコラーゲンマトリックス中で低血清条件下に、TGFβ1応 答性の骨髄由来細胞を捕捉し、 b)捕捉した細胞を増殖させて、分化した細胞コロニーを形成させ、 c)増殖した細胞の形質導入をin vitroで治療用タンパク質をコードする遺 伝子を含むウイルスベクターを用いておこない、それにより形質導入細胞に 治療に有効な量の治療用タンパク質を発現させ、そして d)形質導入細胞を哺乳動物に導入して治療成果を引き出す、 各ステップを含んでなる方法。 43.ステップ(a)および(b)の間に追加のTGFβ1を供給する、請求項42に記載の 方法。 44.TGFβ1応答性の骨髄由来細胞が前間葉前駆細胞またはストロマ細胞である 、請求項42または43に記載の方法。 45.ウイルスベクターがレトロウイルスベクターである、請求項42に記載の方法 。
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