JP2001269166A - 新規微生物 - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 鉄シアノ錯体を分解することが出来る新規微
生物を提供する。 【解決手段】 鉄シアノ錯体分解能を有するクレブシエ
ラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属の細菌。
生物を提供する。 【解決手段】 鉄シアノ錯体分解能を有するクレブシエ
ラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属の細菌。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、クレブシエラ（Ｋ
ｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属に属する細菌であって、弱アル
カリ性の生育条件下で、シアン化合物分解能を有する新
規な微生物に関するものである。
ｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属に属する細菌であって、弱アル
カリ性の生育条件下で、シアン化合物分解能を有する新
規な微生物に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】シアン化合物には、シアン化物と金属シ
アノ錯体と称される化合物群が含まれる。前記シアン化
物は、「遊離シアン」とも呼ばれているもので、一般式
Ａｎ（ＣＮ）ｘで表され、Ａには水素（Ｈ）、ナトリウ
ム（Ｎａ）、カリウム（Ｋ）、アンモニウム（Ｎ
Ｈ4 ）、カルシウム（Ｃａ）などがあり、シアン化合物
の中で最も毒性の高い形態である。又、前記金属シアノ
錯体は、シアン化水素の金属塩と金属とが過剰のシアン
化物イオン（ＣＮ- ）と結合したもので、一般式Ａｎ
［Ｍ（ＣＮ）ｘ］で表される。ここで、Ｍには銀（Ａ
ｇ）、金（Ａｕ）、カドミウム（Ｃｄ）、コバルト（Ｃ
ｏ）、銅（Ｃｕ）、鉄（Ｆｅ）、ニッケル（Ｎｉ）、亜
鉛（Ｚｎ）などの金属が該当し、溶液中に溶存、あるい
は懸濁状で存在している。
アノ錯体と称される化合物群が含まれる。前記シアン化
物は、「遊離シアン」とも呼ばれているもので、一般式
Ａｎ（ＣＮ）ｘで表され、Ａには水素（Ｈ）、ナトリウ
ム（Ｎａ）、カリウム（Ｋ）、アンモニウム（Ｎ
Ｈ4 ）、カルシウム（Ｃａ）などがあり、シアン化合物
の中で最も毒性の高い形態である。又、前記金属シアノ
錯体は、シアン化水素の金属塩と金属とが過剰のシアン
化物イオン（ＣＮ- ）と結合したもので、一般式Ａｎ
［Ｍ（ＣＮ）ｘ］で表される。ここで、Ｍには銀（Ａ
ｇ）、金（Ａｕ）、カドミウム（Ｃｄ）、コバルト（Ｃ
ｏ）、銅（Ｃｕ）、鉄（Ｆｅ）、ニッケル（Ｎｉ）、亜
鉛（Ｚｎ）などの金属が該当し、溶液中に溶存、あるい
は懸濁状で存在している。
【０００３】前記シアン化合物は、産業排水等に含まれ
ていることがあり、浄化処理で取り除かれるべき性質の
物質である。溶液（排水）中でのシアン化合物の存在形
態に関しては、排水処理分野で多くの研究が行われてお
り、その形態は大部分が前記遊離シアンと前記金属シア
ノ錯体であることが報告されている。これらのシアン化
合物を含有する排水の処理方法としては、アルカリ塩素
法、オゾン酸化法、電解酸化法、紺青法（難溶性錯化合
物沈殿法）、酸分解燃焼法、煮詰法（煮詰高温燃焼
法）、湿式加熱分解法、及び、吸着法などが知られてい
る。しかし、これらの処理方法においては、安定性の高
い金属シアノ錯体、例えば鉄、コバルト、銀、金のシア
ノ錯体については適用することができない場合があっ
た。又、反応条件が過酷である点、大規模な設備が必要
である点、これらの処理を施した結果生じる生成物が、
更に処理を要するものであることがある点で問題があっ
た。そこで、前述した問題を回避しつつ環境を修復する
技術として、生物機能を利用して浄化処理を行なう、所
謂、バイオレメディエーション（ｂｉｏｒｅｍｅｄｉａ
ｔｉｏｎ）が注目されており、前記シアン化合物分解能
を有する微生物の検索が行なわれている。
ていることがあり、浄化処理で取り除かれるべき性質の
物質である。溶液（排水）中でのシアン化合物の存在形
態に関しては、排水処理分野で多くの研究が行われてお
り、その形態は大部分が前記遊離シアンと前記金属シア
ノ錯体であることが報告されている。これらのシアン化
合物を含有する排水の処理方法としては、アルカリ塩素
法、オゾン酸化法、電解酸化法、紺青法（難溶性錯化合
物沈殿法）、酸分解燃焼法、煮詰法（煮詰高温燃焼
法）、湿式加熱分解法、及び、吸着法などが知られてい
る。しかし、これらの処理方法においては、安定性の高
い金属シアノ錯体、例えば鉄、コバルト、銀、金のシア
ノ錯体については適用することができない場合があっ
た。又、反応条件が過酷である点、大規模な設備が必要
である点、これらの処理を施した結果生じる生成物が、
更に処理を要するものであることがある点で問題があっ
た。そこで、前述した問題を回避しつつ環境を修復する
技術として、生物機能を利用して浄化処理を行なう、所
謂、バイオレメディエーション（ｂｉｏｒｅｍｅｄｉａ
ｔｉｏｎ）が注目されており、前記シアン化合物分解能
を有する微生物の検索が行なわれている。
【０００４】現在、シアン化カリウム、シアン化ナトリ
ウムなどの前記遊離シアンの微生物分解に関しては、遊
離シアンの分解菌としてＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕ
ｔｉｄａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．、Ａｃｉｎ
ｅｔｏｂａｃｔｏｒ ｓｐ．、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓ
ｐ．などの微生物が単離、同定されたという報告があ
る。
ウムなどの前記遊離シアンの微生物分解に関しては、遊
離シアンの分解菌としてＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕ
ｔｉｄａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．、Ａｃｉｎ
ｅｔｏｂａｃｔｏｒ ｓｐ．、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓ
ｐ．などの微生物が単離、同定されたという報告があ
る。
【０００５】そして、前記金属シアノ錯体に関しては、
ニッケル−シアノ錯体（［Ｋ2 Ｎｉ（ＣＮ）4 ］）の分
解微生物として、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ、Ｔ
ｒｉｃｈｏｄｅｒｕｍ ｐｏｌｙｓｐｏｒｕｍが報告さ
れている。又、鉄シアノ錯体であるフェロシアン化カリ
ウム（［Ｋ4 Ｆｅ（ＣＮ）6 ］）の分解菌としては、Ｆ
ｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ、Ｓｃｙｔａｌｉ
ｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ ｍｉｃｚｙｎｓｋｉが報告されている（いず
れもＫｎｏｗｌｅｓ Ｃ．Ｊ． ｅｔ． ａｌ．， Ｅ
ｎｚｙｍｅ ａｎｄ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｔｅｃｈｎ
ｏｌｏｇｙ ２２：２２３−２３１，（１９９８））。
ニッケル−シアノ錯体（［Ｋ2 Ｎｉ（ＣＮ）4 ］）の分
解微生物として、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ、Ｔ
ｒｉｃｈｏｄｅｒｕｍ ｐｏｌｙｓｐｏｒｕｍが報告さ
れている。又、鉄シアノ錯体であるフェロシアン化カリ
ウム（［Ｋ4 Ｆｅ（ＣＮ）6 ］）の分解菌としては、Ｆ
ｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ、Ｓｃｙｔａｌｉ
ｄｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ ｍｉｃｚｙｎｓｋｉが報告されている（いず
れもＫｎｏｗｌｅｓ Ｃ．Ｊ． ｅｔ． ａｌ．， Ｅ
ｎｚｙｍｅ ａｎｄ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｔｅｃｈｎ
ｏｌｏｇｙ ２２：２２３−２３１，（１９９８））。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、前記鉄
シアノ錯体の分解に関する報告は、すべて真菌によるも
のであって、放線菌を含めた細菌による分解例は報告さ
れていない。従って、前記鉄シアノ錯体分解菌の生育ｐ
Ｈ域は弱酸性域に限られている。ここで、前記鉄シアノ
錯体を含む排水の処理について考えると、弱酸性条件下
では、前記鉄シアノ錯体は難溶性の塩を形成して存在し
ているので、前記排水中の鉄シアノ錯体は、前記処理の
過程で、流路や処理槽に沈殿し易い。そのため、前記鉄
シアノ錯体分解菌を用いて排水処理を行なうとしても、
分解効率が低かったり、その効率を上げるために激しく
攪拌する等の操作が必要となる。よって、実質的には、
前記鉄シアノ錯体分解菌を、前記鉄シアノ錯体を含む排
水の処理に適用することは困難であった。
シアノ錯体の分解に関する報告は、すべて真菌によるも
のであって、放線菌を含めた細菌による分解例は報告さ
れていない。従って、前記鉄シアノ錯体分解菌の生育ｐ
Ｈ域は弱酸性域に限られている。ここで、前記鉄シアノ
錯体を含む排水の処理について考えると、弱酸性条件下
では、前記鉄シアノ錯体は難溶性の塩を形成して存在し
ているので、前記排水中の鉄シアノ錯体は、前記処理の
過程で、流路や処理槽に沈殿し易い。そのため、前記鉄
シアノ錯体分解菌を用いて排水処理を行なうとしても、
分解効率が低かったり、その効率を上げるために激しく
攪拌する等の操作が必要となる。よって、実質的には、
前記鉄シアノ錯体分解菌を、前記鉄シアノ錯体を含む排
水の処理に適用することは困難であった。
【０００７】従って、本発明の目的は、上記欠点に鑑
み、鉄シアノ錯体を分解することが出来る新規微生物を
提供することにある。
み、鉄シアノ錯体を分解することが出来る新規微生物を
提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】発明者らは、上記課題を
解決すべく、大気を対象としてスクリーニングを行なっ
て、アルカリ性の生育条件においてもシアン化合物分解
能を有する新規微生物を分離することに成功し、本発明
を完成させた。
解決すべく、大気を対象としてスクリーニングを行なっ
て、アルカリ性の生育条件においてもシアン化合物分解
能を有する新規微生物を分離することに成功し、本発明
を完成させた。
【０００９】即ち、本発明は、アルカリ性の生育条件に
おいてもシアン化合物を分解可能なクレブシエラ（Ｋｌ
ｅｂｓｉｅｌｌａ）属の新規微生物であり、具体的に
は、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌ
ａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）ＡＮ−１株である。又、前
記シアン化合物は、具体的には、金属シアノ錯体であ
り、更に具体的には、鉄シアノ錯体である。
おいてもシアン化合物を分解可能なクレブシエラ（Ｋｌ
ｅｂｓｉｅｌｌａ）属の新規微生物であり、具体的に
は、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌ
ａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）ＡＮ−１株である。又、前
記シアン化合物は、具体的には、金属シアノ錯体であ
り、更に具体的には、鉄シアノ錯体である。
【００１０】発明者らは、以下の様にして、本発明に係
る新規微生物を単離した。フラスコに入れた滅菌フェロ
シアン液体培地を大気中に放置し、この培地中で生育し
た微生物を、滅菌フェロシアン寒天平板培地上に接種し
た後、３０℃で培養し、形成されたコロニーを分離し
た。尚、前記フェロシアン寒天培地及びフェロシアン液
体培地の前記組成及び調製方法は、以下に示す通りであ
る。
る新規微生物を単離した。フラスコに入れた滅菌フェロ
シアン液体培地を大気中に放置し、この培地中で生育し
た微生物を、滅菌フェロシアン寒天平板培地上に接種し
た後、３０℃で培養し、形成されたコロニーを分離し
た。尚、前記フェロシアン寒天培地及びフェロシアン液
体培地の前記組成及び調製方法は、以下に示す通りであ
る。
【００１１】
【表１】 ＊ＮａＯＨ溶液、ＨＣｌ溶液で培地をｐＨ７．２（±
０．２）に調整して、蒸留水で全量を１リットルにす
る。Ｋ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ以外の成分を１
２０℃、２０分間オートクレーブ殺菌した後に、フィル
タ滅菌したＫ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ溶液を添
加する。
０．２）に調整して、蒸留水で全量を１リットルにす
る。Ｋ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ以外の成分を１
２０℃、２０分間オートクレーブ殺菌した後に、フィル
タ滅菌したＫ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ溶液を添
加する。
【００１２】
【表２】 ＊ＮａＯＨ溶液、ＨＣｌ溶液で培地をｐＨ７．２（±
０．２）に調整して、蒸留水で全量を１リットルにす
る。Ｋ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ以外の成分を１
２０℃、２０分間オートクレーブ殺菌した後に、フィル
タ滅菌したＫ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ溶液を添
加する。
０．２）に調整して、蒸留水で全量を１リットルにす
る。Ｋ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ以外の成分を１
２０℃、２０分間オートクレーブ殺菌した後に、フィル
タ滅菌したＫ4 ［Ｆｅ（ＣＮ）6 ］・３Ｈ2 Ｏ溶液を添
加する。
【００１３】更に、滅菌したフラスコに滅菌したフェロ
シアン液体培地１００ｍｌを分注し、前述の分離した菌
株を１白金耳接種し、３０℃で１週間、振とう培養（１
５０〜１７０ｒｐｍ）した。培養後、培養液中のフェロ
シアン（全シアン）含有量は、「低質土壌のＣＮ含有量
測定方法（環水管１２７号１４．２項）」に記載されて
いる「シアンの蒸留前操作方法（土壌中の全シアンの加
熱蒸留方法）」に従って、培養物（培養液、菌体）全量
を蒸留し、得られた蒸留液を全自動シアン測定装置（ア
ナテック・ヤナコ製Ｔ−ＣＮ５０１）に供試し、フェロ
シアン（全シアン）含有量を測定して求めた。この様に
して、前記フェロシアン液体培地中のフェロシアンを分
解する菌株を選抜した結果、フェロシアン分解能を有す
る菌株が得られ、これをＡＮ−１株と命名した。なお、
フェロシアンの分解率は以下の式により求めた。 フェロシアン分解率＝培養後のフェロシアン含有量／無
菌振とう後のフェロシアン含有量×１００（％）
シアン液体培地１００ｍｌを分注し、前述の分離した菌
株を１白金耳接種し、３０℃で１週間、振とう培養（１
５０〜１７０ｒｐｍ）した。培養後、培養液中のフェロ
シアン（全シアン）含有量は、「低質土壌のＣＮ含有量
測定方法（環水管１２７号１４．２項）」に記載されて
いる「シアンの蒸留前操作方法（土壌中の全シアンの加
熱蒸留方法）」に従って、培養物（培養液、菌体）全量
を蒸留し、得られた蒸留液を全自動シアン測定装置（ア
ナテック・ヤナコ製Ｔ−ＣＮ５０１）に供試し、フェロ
シアン（全シアン）含有量を測定して求めた。この様に
して、前記フェロシアン液体培地中のフェロシアンを分
解する菌株を選抜した結果、フェロシアン分解能を有す
る菌株が得られ、これをＡＮ−１株と命名した。なお、
フェロシアンの分解率は以下の式により求めた。 フェロシアン分解率＝培養後のフェロシアン含有量／無
菌振とう後のフェロシアン含有量×１００（％）
【００１４】前記ＡＮ−１株をＳＣＤ寒天平板上に塗抹
して３０℃で１日間培養し、純粋培養であることを確認
した後に、下記の菌学的性質を有するＡＮ−１株の分類
学上の位置を、「バージェイズ・マニュアル・オブ・シ
ステマチック・バクテリオロジー 第１版」（Ｂｅｒｇ
ｅｒｙ´ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉ
ｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ １ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏ
ｎ （１９８４））」を参照にして検索した。前記ＡＮ
−１株の菌学的性質を、表３に記す。
して３０℃で１日間培養し、純粋培養であることを確認
した後に、下記の菌学的性質を有するＡＮ−１株の分類
学上の位置を、「バージェイズ・マニュアル・オブ・シ
ステマチック・バクテリオロジー 第１版」（Ｂｅｒｇ
ｅｒｙ´ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉ
ｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ １ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏ
ｎ （１９８４））」を参照にして検索した。前記ＡＮ
−１株の菌学的性質を、表３に記す。
【００１５】
【表３】
【００１６】この結果、前記ＡＮ−１株は、クレブシエ
ラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍ
ｏｎｉａｅ）であると判定された。しかし、公知のクレ
ブシエラ属菌に属し、鉄シアノ錯体の分解可能を有する
ものは、今までに報告が無く、この点で、前記ＡＮ−１
株は、公知の菌株と区別される新菌株である。クレブシ
エラ・ニューモニエ ＡＮ−１株と判定された本菌株
は、工業技術院生命工学工業技術研究所に、受託番号Ｆ
ＥＲＭ Ｐ−１７７９２号として寄託されている。
ラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍ
ｏｎｉａｅ）であると判定された。しかし、公知のクレ
ブシエラ属菌に属し、鉄シアノ錯体の分解可能を有する
ものは、今までに報告が無く、この点で、前記ＡＮ−１
株は、公知の菌株と区別される新菌株である。クレブシ
エラ・ニューモニエ ＡＮ−１株と判定された本菌株
は、工業技術院生命工学工業技術研究所に、受託番号Ｆ
ＥＲＭ Ｐ−１７７９２号として寄託されている。
【００１７】尚、ＳＣＤ寒天培地の組成は、以下の表４
に示す通りである。
に示す通りである。
【００１８】
【表４】
【００１９】本発明にかかるクレブシエラ・ニューモニ
エ ＡＮ−１株は、細菌に分類される新規微生物であ
る。一般的に、細菌は、中性から弱アルカリ性のｐＨ域
で生育するものであり、発明者らは、後述する生育試験
によって、前記クレブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１
株も、中性から弱アルカリ性の生育条件で、前記鉄シア
ノ錯体を分解して生育できることを明らかにしている。
従って、この菌株をシアン化合物を含む排水の処理に用
いる場合、液性を弱アルカリ性として、難溶性の前記鉄
シアノ錯体を排水中に溶存した状態とし、効率よく分解
することが出来る。更に、前記クレブシエラ・ニューモ
ニエ ＡＮ−１株は、生育中に、培養液のｐＨを上昇さ
せることができるので、前記鉄シアノ錯体を可溶化し
て、前記鉄シアノ錯体の分解に適した環境を自ら作り出
すこともできる。上述の如く、前記クレブシエラ・ニュ
ーモニエ ＡＮ−１株は、中性から弱アルカリ性のｐＨ
域で、シアン化合物、特に鉄シアノ錯体を分解可能であ
るので、バイオレメディエーションによる排水処理に用
いるのに適した微生物といえる。又、土壌中でのシアン
の存在形態は、大部分が鉄とシアンの錯体であるフェロ
シアンであることが知られているため、本発明に係るク
レブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１株を用いて土壌中
のフェロシアンを分解除去することによって、シアン化
合物に汚染された土壌を浄化することが出来ると考えら
れる。
エ ＡＮ−１株は、細菌に分類される新規微生物であ
る。一般的に、細菌は、中性から弱アルカリ性のｐＨ域
で生育するものであり、発明者らは、後述する生育試験
によって、前記クレブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１
株も、中性から弱アルカリ性の生育条件で、前記鉄シア
ノ錯体を分解して生育できることを明らかにしている。
従って、この菌株をシアン化合物を含む排水の処理に用
いる場合、液性を弱アルカリ性として、難溶性の前記鉄
シアノ錯体を排水中に溶存した状態とし、効率よく分解
することが出来る。更に、前記クレブシエラ・ニューモ
ニエ ＡＮ−１株は、生育中に、培養液のｐＨを上昇さ
せることができるので、前記鉄シアノ錯体を可溶化し
て、前記鉄シアノ錯体の分解に適した環境を自ら作り出
すこともできる。上述の如く、前記クレブシエラ・ニュ
ーモニエ ＡＮ−１株は、中性から弱アルカリ性のｐＨ
域で、シアン化合物、特に鉄シアノ錯体を分解可能であ
るので、バイオレメディエーションによる排水処理に用
いるのに適した微生物といえる。又、土壌中でのシアン
の存在形態は、大部分が鉄とシアンの錯体であるフェロ
シアンであることが知られているため、本発明に係るク
レブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１株を用いて土壌中
のフェロシアンを分解除去することによって、シアン化
合物に汚染された土壌を浄化することが出来ると考えら
れる。
【００２０】
【実施例】以下、本発明に係る微生物を用いたフェロシ
アン分解の実験例について説明する。クレブシエラ・ニ
ューモニエ ＡＮ−１株を下記の条件で培養し、培地中
のフェロシアン（全シアン）含有量を測定し、培養開始
前後のフェロシアン（全シアン）含有量より分解率を求
めた。フェロシアンの分解率は以下の式により求めた。 フェロシアン（全シアン）分解率＝ＡＮ−１株を添加培
養後のフェロシアン含有量／無菌振とう後のフェロシア
ン含有量×１００（％）
アン分解の実験例について説明する。クレブシエラ・ニ
ューモニエ ＡＮ−１株を下記の条件で培養し、培地中
のフェロシアン（全シアン）含有量を測定し、培養開始
前後のフェロシアン（全シアン）含有量より分解率を求
めた。フェロシアンの分解率は以下の式により求めた。 フェロシアン（全シアン）分解率＝ＡＮ−１株を添加培
養後のフェロシアン含有量／無菌振とう後のフェロシア
ン含有量×１００（％）
【００２１】滅菌した試験管に滅菌したフェロシアン液
体培地１０ｍｌを分注し、ここにクレブシエラ・ニュー
モニエ ＡＮ−１株を１白金耳接種して、３０℃で振と
う培養（１５０〜１７０ｒｐｍ）した。培養開始から１
週間後に、この培地の一部を分取し、培地中のフェロシ
アン（全シアン）含有量を、前述した「低質土壌のＣＮ
含有量測定方法（環水管１２７号１４．２項）」に記載
されている「シアンの蒸留前操作方法（土壌中の全シア
ンの加熱蒸留方法）」に従って測定した。この結果を、
表５に示す。
体培地１０ｍｌを分注し、ここにクレブシエラ・ニュー
モニエ ＡＮ−１株を１白金耳接種して、３０℃で振と
う培養（１５０〜１７０ｒｐｍ）した。培養開始から１
週間後に、この培地の一部を分取し、培地中のフェロシ
アン（全シアン）含有量を、前述した「低質土壌のＣＮ
含有量測定方法（環水管１２７号１４．２項）」に記載
されている「シアンの蒸留前操作方法（土壌中の全シア
ンの加熱蒸留方法）」に従って測定した。この結果を、
表５に示す。
【００２２】
【表５】
【００２３】表５に示すように、前記クレブシエラ・ニ
ューモニエ ＡＮ−１株は、フェロシアン分解活性を有
し、フェロシアンの初期濃度が夫々１０、５０、１００
ｐｐｍであった培地において、培養開始から１週間後
に、夫々４０、２４、９％分解していた。
ューモニエ ＡＮ−１株は、フェロシアン分解活性を有
し、フェロシアンの初期濃度が夫々１０、５０、１００
ｐｐｍであった培地において、培養開始から１週間後
に、夫々４０、２４、９％分解していた。
【００２４】又、このときの培地ｐＨの変化をみると、
フェロシアンの初期濃度が１０．５ｐｐｍで初発ｐＨが
６．６であったものが、前記クレブシエラ・ニューモニ
エＡＮ−１株の培養開始から一週間で、ｐＨ８．２まで
上昇していた（表６参照）。
フェロシアンの初期濃度が１０．５ｐｐｍで初発ｐＨが
６．６であったものが、前記クレブシエラ・ニューモニ
エＡＮ−１株の培養開始から一週間で、ｐＨ８．２まで
上昇していた（表６参照）。
【００２５】
【表６】
【００２６】前記クレブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−
１株は、中性から弱アルカリ性域でフェロシアンを分解
している。このとき、前記培地中のフェロシアンは、前
記培地に溶解した状態で存在していると考えられる。こ
のように、前記クレブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１
株は、可溶化したフェロシアンを分解することが出来る
ので、工業排水等の浄化処理に使用する菌株として好適
である。従って、本発明にかかる新規微生物であるクレ
ブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１株を用いることによ
り、排水中のフェロシアンを効率的に分解することが可
能である。また、土壌中でのシアンの存在形態の大部分
が、鉄シアン錯体であるフェロシアンであることが知ら
れている。従って、本発明の新規微生物クレブシエラ・
ニューモニエ ＡＮ−１株を用いて、他の浄化方法に見
られるような過酷な処理を行なうことなく、土壌中のフ
ェロシアンを分解することも出来ると考えられる。
１株は、中性から弱アルカリ性域でフェロシアンを分解
している。このとき、前記培地中のフェロシアンは、前
記培地に溶解した状態で存在していると考えられる。こ
のように、前記クレブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１
株は、可溶化したフェロシアンを分解することが出来る
ので、工業排水等の浄化処理に使用する菌株として好適
である。従って、本発明にかかる新規微生物であるクレ
ブシエラ・ニューモニエ ＡＮ−１株を用いることによ
り、排水中のフェロシアンを効率的に分解することが可
能である。また、土壌中でのシアンの存在形態の大部分
が、鉄シアン錯体であるフェロシアンであることが知ら
れている。従って、本発明の新規微生物クレブシエラ・
ニューモニエ ＡＮ−１株を用いて、他の浄化方法に見
られるような過酷な処理を行なうことなく、土壌中のフ
ェロシアンを分解することも出来ると考えられる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 篠原 正文 大阪府大阪市中央区平野町四丁目１番２号 大阪瓦斯株式会社内 Ｆターム(参考） 4B065 AA29X AC20 BB02 BC01 CA56 4D004 AA41 AB05 AC07 CA18 CC07 4D040 DD03 DD14
Claims (3)
- 【請求項１】 鉄シアノ錯体分解能を有するクレブシエ
ラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属の細菌。 - 【請求項２】 鉄シアノ錯体分解能を有するクレブシエ
ラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍ
ｏｎｉａｅ）。 - 【請求項３】 シアン化合物分解能を有する新菌株クレ
ブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎ
ｅｕｍｏｎｉａｅ） ＡＮ−１株（ＦＥＲＭＰ−１７７
９２）。
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|---|---|---|---|---|
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| JP2012070729A (ja) * | 2010-08-30 | 2012-04-12 | Showa Denko Kk | 固体培地プレート、及びそのプレートを用いるシアン化合物分解微生物のスクリーニング方法 |
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