JPH09201187A - 耐塩性アンモニア酸化細菌 - Google Patents
耐塩性アンモニア酸化細菌Info
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- JPH09201187A JPH09201187A JP8009996A JP999696A JPH09201187A JP H09201187 A JPH09201187 A JP H09201187A JP 8009996 A JP8009996 A JP 8009996A JP 999696 A JP999696 A JP 999696A JP H09201187 A JPH09201187 A JP H09201187A
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- Japan
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Abstract
(57)【要約】
【課題】高塩濃度排水の生物硝化脱窒法に利用できる、
海水以上の塩濃度に耐性を有し、かつ高濃度の基質存在
下でも生育可能な新規な海洋性アンモニア酸化細菌の提
供。 【解決手段】海水またはそれ以上の塩濃度に耐性を有
し、かつ高濃度の基質存在下でも生育可能なニトロモナ
ス属に属する海洋性の耐塩性アンモニア酸化細菌ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４９６６。
海水以上の塩濃度に耐性を有し、かつ高濃度の基質存在
下でも生育可能な新規な海洋性アンモニア酸化細菌の提
供。 【解決手段】海水またはそれ以上の塩濃度に耐性を有
し、かつ高濃度の基質存在下でも生育可能なニトロモナ
ス属に属する海洋性の耐塩性アンモニア酸化細菌ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４９６６。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は排水・し尿処理及び
発電所で発生する排水の処理など、生物による硝化脱窒
反応による排水処理に利用される、新規な耐塩性アンモ
ニア酸化細菌に関するものである。
発電所で発生する排水の処理など、生物による硝化脱窒
反応による排水処理に利用される、新規な耐塩性アンモ
ニア酸化細菌に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】従来、硝化菌はアンモニア酸化細菌とし
て４属、亜硝酸酸化細菌として３属が知られているが、
殆どの菌株は淡水性であり、海水またはそれ以上の塩濃
度に耐性を有する菌株は知られていない。また、天然の
海水中には淡水性硝化菌よりも高い耐塩性を有すると考
えられる海洋性の硝化菌が存在するが、その存在量は非
常に少なく、純粋分離が困難であるため、淡水性硝化菌
に比べてその研究は遅れている。さらに、一般に海洋性
硝化菌は排水のような高濃度の基質（窒素として数十〜
数百ｐｐｍ）存在下では生育できないため、高塩濃度排
水の処理に利用することは困難である。
て４属、亜硝酸酸化細菌として３属が知られているが、
殆どの菌株は淡水性であり、海水またはそれ以上の塩濃
度に耐性を有する菌株は知られていない。また、天然の
海水中には淡水性硝化菌よりも高い耐塩性を有すると考
えられる海洋性の硝化菌が存在するが、その存在量は非
常に少なく、純粋分離が困難であるため、淡水性硝化菌
に比べてその研究は遅れている。さらに、一般に海洋性
硝化菌は排水のような高濃度の基質（窒素として数十〜
数百ｐｐｍ）存在下では生育できないため、高塩濃度排
水の処理に利用することは困難である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は高塩濃度排水
の生物硝化脱窒法に利用できるアンモニア酸化細菌を課
題とし、海水以上の塩濃度に耐性を有し、かつ高濃度の
基質存在下でも生育可能な新規な耐塩性アンモニア酸化
細菌の提供を意図してなされたものである。
の生物硝化脱窒法に利用できるアンモニア酸化細菌を課
題とし、海水以上の塩濃度に耐性を有し、かつ高濃度の
基質存在下でも生育可能な新規な耐塩性アンモニア酸化
細菌の提供を意図してなされたものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は上記課題を解決
する手段として、海水またはその以上の塩濃度に耐性を
有し、かつ高濃度の基質存在下でも生育可能なニトロソ
モナス属に属する海洋性の耐塩性アンモニア酸化細菌
ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６ を提供する。
する手段として、海水またはその以上の塩濃度に耐性を
有し、かつ高濃度の基質存在下でも生育可能なニトロソ
モナス属に属する海洋性の耐塩性アンモニア酸化細菌
ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６ を提供する。
【０００５】
【発明の実施の形態】上記目的を達成するために、本発
明者らは海水魚蓄養装置の硝化槽の担体に付着させてい
る硝化細菌に着目した。海水魚蓄養装置とは、水揚げさ
れた活魚を生きたまま飼育しておく装置であり、魚自身
の排泄するアンモニアが水中に数ｐｐｍ蓄積すると魚を
死滅させてしまうので、飼育水槽の水はアンモニア除去
のための生物処理槽（硝化槽）に送られ、担体に付着保
持された微生物（硝化細菌）によりアンモニアを亜硝酸
イオンを経て無害な硝酸イオンに酸化させ、処理後の飼
育水は再度水槽に戻し循環使用する。本発明者らは海水
魚蓄養装置の硝化槽内担体を分離源として、高濃度の基
質を含む培地を用いてスクリーニングを行い、海水、ま
たはそれ以上の塩濃度に耐性を有し、かつ高濃度の基質
存在下でも生育可能な海洋性アンモニア酸化細菌を単離
するに至った。該アンモニア酸化細菌についての研究を
重ね、Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ ＳＰ．ＭＡ−６と命
名し、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に
「特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関するブダ
ペスト条約」に基づく原寄託を行い、平成７年１月１０
日に（受託番号）ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６として受託
された。
明者らは海水魚蓄養装置の硝化槽の担体に付着させてい
る硝化細菌に着目した。海水魚蓄養装置とは、水揚げさ
れた活魚を生きたまま飼育しておく装置であり、魚自身
の排泄するアンモニアが水中に数ｐｐｍ蓄積すると魚を
死滅させてしまうので、飼育水槽の水はアンモニア除去
のための生物処理槽（硝化槽）に送られ、担体に付着保
持された微生物（硝化細菌）によりアンモニアを亜硝酸
イオンを経て無害な硝酸イオンに酸化させ、処理後の飼
育水は再度水槽に戻し循環使用する。本発明者らは海水
魚蓄養装置の硝化槽内担体を分離源として、高濃度の基
質を含む培地を用いてスクリーニングを行い、海水、ま
たはそれ以上の塩濃度に耐性を有し、かつ高濃度の基質
存在下でも生育可能な海洋性アンモニア酸化細菌を単離
するに至った。該アンモニア酸化細菌についての研究を
重ね、Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ ＳＰ．ＭＡ−６と命
名し、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に
「特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関するブダ
ペスト条約」に基づく原寄託を行い、平成７年１月１０
日に（受託番号）ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６として受託
された。
【０００６】なお、本発明にいう海水またはそれ以上の
塩濃度とは、各種の塩分の総量が海水の塩分濃度または
はそれ以上であることを意味し、具体的にはいわゆる標
準海水（海水１ｋｇ中に３５．０ｇの塩類を含むもの）
である。
塩濃度とは、各種の塩分の総量が海水の塩分濃度または
はそれ以上であることを意味し、具体的にはいわゆる標
準海水（海水１ｋｇ中に３５．０ｇの塩類を含むもの）
である。
【０００７】さらに本発明にいう高濃度の基質とは、具
体的には窒素として１０〜１，０００ｐｐｍを含有する
ものをいう。
体的には窒素として１０〜１，０００ｐｐｍを含有する
ものをいう。
【０００８】
耐塩性アンモニア酸化細菌の単離 〔１〕スクリーニング方法 海水魚蓄養装置の硝化槽内より、微生物の付着担体であ
る多孔質セラミックビーズ（５ｍｍφ）を採取した。約
１ｇのセラミックビーズを海水１０ｍｌの入った試験管
に加えて激しく撹拌し、担体表面に付着した微生物を海
水中に遊離、懸濁させた。この懸濁海水の全量を、２０
０ｍｌのアンモニア酸化細菌用培地に接種し、２８℃で
集積培養を行った。使用した培地の組成を表１に示す。
一般に、海洋性硝化菌の培地の基質量はアンモニア態窒
素として１０ｐｐｍ程度であるのに対して、この培地は
高濃度の基質（アンモニア態窒素２００ｐｐｍ）を含有
している。なお、表１中のＨＥＰＥＳとはＮ−２−ヒド
ロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸
の略称であり、天然海水として神奈川県城ケ島で採取し
た海水を使用した。
る多孔質セラミックビーズ（５ｍｍφ）を採取した。約
１ｇのセラミックビーズを海水１０ｍｌの入った試験管
に加えて激しく撹拌し、担体表面に付着した微生物を海
水中に遊離、懸濁させた。この懸濁海水の全量を、２０
０ｍｌのアンモニア酸化細菌用培地に接種し、２８℃で
集積培養を行った。使用した培地の組成を表１に示す。
一般に、海洋性硝化菌の培地の基質量はアンモニア態窒
素として１０ｐｐｍ程度であるのに対して、この培地は
高濃度の基質（アンモニア態窒素２００ｐｐｍ）を含有
している。なお、表１中のＨＥＰＥＳとはＮ−２−ヒド
ロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸
の略称であり、天然海水として神奈川県城ケ島で採取し
た海水を使用した。
【０００９】
【表１】
【００１０】３〜４週間に１度、集積培養液２０ｍｌを
新鮮培地１８０ｍｌに植え継ぎ、２８℃で合計１２ヵ月
間集積培養を行った。集積培養の間、アンモニア酸化菌
の増殖に伴う培養液中のアンモニアの減少をインドフェ
ノール青吸光光度法〔ＪＩＳＫ０１０２：アンモニウム
イオンが次亜塩素酸イオンの共存のもとで、フェノール
と反応して生じるインドフェノール青の吸光度（波長６
３０ｎｍ付近）を測定してアンモニウムイオンを定量す
る方法〕により測定、確認した。集積培養液を滅菌海水
（表１の天然海水を滅菌したもの）を用いて適当な濃度
に希釈し、平板培地に塗沫、培養した。平板培地は、表
１の培地に Bull. Jpn.Soc. Microbiol. Ecol.,4 (198
9) p.101 に記載されたゲランガムを１０ｇ／リットル
添加して作成し、培養は２８℃で１ヵ月間行った。平板
培養後、出現したコロニーを釣菌して５ｍｌの液体培地
（表１の培地）に接種し、２８℃で１ヵ月間培養した。
培養液中のアンモニア濃度を測定し、アンモニア濃度の
減少の認められた株を選択し、これを海洋性アンモニア
酸化細菌ＭＡ−６株と命名した。
新鮮培地１８０ｍｌに植え継ぎ、２８℃で合計１２ヵ月
間集積培養を行った。集積培養の間、アンモニア酸化菌
の増殖に伴う培養液中のアンモニアの減少をインドフェ
ノール青吸光光度法〔ＪＩＳＫ０１０２：アンモニウム
イオンが次亜塩素酸イオンの共存のもとで、フェノール
と反応して生じるインドフェノール青の吸光度（波長６
３０ｎｍ付近）を測定してアンモニウムイオンを定量す
る方法〕により測定、確認した。集積培養液を滅菌海水
（表１の天然海水を滅菌したもの）を用いて適当な濃度
に希釈し、平板培地に塗沫、培養した。平板培地は、表
１の培地に Bull. Jpn.Soc. Microbiol. Ecol.,4 (198
9) p.101 に記載されたゲランガムを１０ｇ／リットル
添加して作成し、培養は２８℃で１ヵ月間行った。平板
培養後、出現したコロニーを釣菌して５ｍｌの液体培地
（表１の培地）に接種し、２８℃で１ヵ月間培養した。
培養液中のアンモニア濃度を測定し、アンモニア濃度の
減少の認められた株を選択し、これを海洋性アンモニア
酸化細菌ＭＡ−６株と命名した。
【００１１】〔II〕ＭＡ−６株の菌学的性質：ＭＡ−６
株の菌学的性質を調べた結果を、表２に示す。
株の菌学的性質を調べた結果を、表２に示す。
【００１２】
【表２】
【００１３】上記したＭＡ−６株の菌学的性質は、海水
培地で生育可能である点を除きニトロソモナス属（Ｎｉ
ｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）の基準株であるニトモ
ソモナス エウロパーエア（Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ
ｅｕｒｏｐａｅａ）ＡＴＣＣ２５９７８の菌学的性質
とよく類似していたので、ＭＡ−６株の帰属をニトロソ
モナス属とした。
培地で生育可能である点を除きニトロソモナス属（Ｎｉ
ｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）の基準株であるニトモ
ソモナス エウロパーエア（Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ
ｅｕｒｏｐａｅａ）ＡＴＣＣ２５９７８の菌学的性質
とよく類似していたので、ＭＡ−６株の帰属をニトロソ
モナス属とした。
【００１４】ＭＡ−６株は、耐塩性を有し、高濃度の基
質存在下でも生育能を有するため、高塩濃度排水の生物
硝化脱窒法に利用すると多大な効果を発揮する。本菌
株、Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ ｓｐ．ＭＡ−６株は、
前記のように平成７年１月１０日付けで工業技術院生命
工学技術研究所に受託番号：ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６
として国際寄託してある。
質存在下でも生育能を有するため、高塩濃度排水の生物
硝化脱窒法に利用すると多大な効果を発揮する。本菌
株、Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ ｓｐ．ＭＡ−６株は、
前記のように平成７年１月１０日付けで工業技術院生命
工学技術研究所に受託番号：ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６
として国際寄託してある。
【００１５】〔実施例２〕 耐塩性試験：ＭＡ−６株を表１の培地で培養集菌し、滅
菌海水に懸濁した後、この懸濁液５ｍｌ（懸濁液中の菌
濃度：１０7 個／ｍｌ）を耐塩性試験用培地４５ｍｌに
接種し、２８℃で７日間培養した。耐塩性試験用培地に
は表１の培地組成の海水を蒸留水に代えたものを用い、
塩濃度は人工海水粉末（ハイペット（株）製、商品名ス
ウィングハイマリン）の添加量を変えることにより、海
水同等，２倍，３倍及び４倍濃度になるように調整し
た。
菌海水に懸濁した後、この懸濁液５ｍｌ（懸濁液中の菌
濃度：１０7 個／ｍｌ）を耐塩性試験用培地４５ｍｌに
接種し、２８℃で７日間培養した。耐塩性試験用培地に
は表１の培地組成の海水を蒸留水に代えたものを用い、
塩濃度は人工海水粉末（ハイペット（株）製、商品名ス
ウィングハイマリン）の添加量を変えることにより、海
水同等，２倍，３倍及び４倍濃度になるように調整し
た。
【００１６】培養の後、菌の生育の有無を光学顕微鏡
（５００倍）を用いた直接計数法により確認し、インド
フェノール青吸光光度法にて培養液のアンモニア濃度を
測定した。この結果、表３に示すようにＭＡ−６株は海
水の３倍までの塩濃度の培地で生育することと、これに
伴う培地中のアンモニアの減少が認められた。これによ
り、ＭＡ−６株は、海水レベル以上の塩濃度に耐性を有
し、高濃度の基質存在下で生育できて、アンモニアを酸
化できる菌であることが確認できた。
（５００倍）を用いた直接計数法により確認し、インド
フェノール青吸光光度法にて培養液のアンモニア濃度を
測定した。この結果、表３に示すようにＭＡ−６株は海
水の３倍までの塩濃度の培地で生育することと、これに
伴う培地中のアンモニアの減少が認められた。これによ
り、ＭＡ−６株は、海水レベル以上の塩濃度に耐性を有
し、高濃度の基質存在下で生育できて、アンモニアを酸
化できる菌であることが確認できた。
【００１７】
【表３】 ＋：生育有り、またはアンモニアの減少有り −：生育なし、またはアンモニアの減少なし
【００１８】
【発明の効果】本発明の耐塩性アンモニア酸化菌は、海
水の３倍の塩濃度及び高濃度基質の存在下でも生育可能
な株であるため、高塩濃度排水の生物硝化に利用すると
多大な効果を発揮することができる。
水の３倍の塩濃度及び高濃度基質の存在下でも生育可能
な株であるため、高塩濃度排水の生物硝化に利用すると
多大な効果を発揮することができる。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成８年４月１９日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は上記課題を解決
する手段として、海水またはそれ以上の塩濃度に耐性を
有し、かつ高濃度の基質存在下でも生育可能なニトロソ
モナス属に属する海洋性の耐塩性アンモニア酸化細菌
ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６ を提供する。
する手段として、海水またはそれ以上の塩濃度に耐性を
有し、かつ高濃度の基質存在下でも生育可能なニトロソ
モナス属に属する海洋性の耐塩性アンモニア酸化細菌
ＦＥＲＭ ＢＰ−４９６６ を提供する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００６】なお、本発明にいう海水またはそれ以上の
塩濃度とは、各種の塩分の総量が海水の塩分濃度または
それ以上であることを意味し、具体的にはいわゆる標準
海水（海水１ｋｇ中に３５．０ｇの塩類を含むもの）で
ある。
塩濃度とは、各種の塩分の総量が海水の塩分濃度または
それ以上であることを意味し、具体的にはいわゆる標準
海水（海水１ｋｇ中に３５．０ｇの塩類を含むもの）で
ある。
Claims (1)
- 【請求項１】 海水またはそれ以上の塩濃度に耐性を有
し、かつ高濃度の基質存在下でも生育可能なニトロモナ
ス属に属する海洋性の耐塩性アンモニア酸化細菌 ＦＥ
ＲＭ ＢＰ−４９６６。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP00999696A JP3553252B2 (ja) | 1996-01-24 | 1996-01-24 | 耐塩性アンモニア酸化細菌 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP00999696A JP3553252B2 (ja) | 1996-01-24 | 1996-01-24 | 耐塩性アンモニア酸化細菌 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09201187A true JPH09201187A (ja) | 1997-08-05 |
| JP3553252B2 JP3553252B2 (ja) | 2004-08-11 |
Family
ID=11735471
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP00999696A Expired - Fee Related JP3553252B2 (ja) | 1996-01-24 | 1996-01-24 | 耐塩性アンモニア酸化細菌 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3553252B2 (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008017757A (ja) * | 2006-07-12 | 2008-01-31 | Toa Denki Kogyosha:Kk | サリニヴィブリオ属の新種微生物 |
| KR101143391B1 (ko) * | 2009-07-08 | 2012-05-24 | 서울대학교산학협력단 | 암모늄이온 화합물의 부분질산화용 활성슬러지 제조방법 및 상기 활성슬러지를 이용한 암모니아 또는 암모늄이온 화합물 함유 폐수처리법 |
| CN102502955A (zh) * | 2011-12-26 | 2012-06-20 | 唐山海港开发区污水处理有限公司 | 适用于高盐污水的活性污泥培养方法 |
| CN102849857A (zh) * | 2012-04-10 | 2013-01-02 | 南京大学 | 一种高盐度、高浓度氨氮废水的处理方法 |
| KR102051259B1 (ko) * | 2019-05-21 | 2019-12-04 | 주식회사 블루뱅크 | 내염성 호기성 그래뉼 슬러지 기반 친환경 탈질조 |
| WO2023248512A1 (ja) * | 2022-06-21 | 2023-12-28 | 鹿島建設株式会社 | 混合微生物及び廃水処理方法 |
-
1996
- 1996-01-24 JP JP00999696A patent/JP3553252B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008017757A (ja) * | 2006-07-12 | 2008-01-31 | Toa Denki Kogyosha:Kk | サリニヴィブリオ属の新種微生物 |
| KR101143391B1 (ko) * | 2009-07-08 | 2012-05-24 | 서울대학교산학협력단 | 암모늄이온 화합물의 부분질산화용 활성슬러지 제조방법 및 상기 활성슬러지를 이용한 암모니아 또는 암모늄이온 화합물 함유 폐수처리법 |
| CN102502955A (zh) * | 2011-12-26 | 2012-06-20 | 唐山海港开发区污水处理有限公司 | 适用于高盐污水的活性污泥培养方法 |
| CN102849857A (zh) * | 2012-04-10 | 2013-01-02 | 南京大学 | 一种高盐度、高浓度氨氮废水的处理方法 |
| KR102051259B1 (ko) * | 2019-05-21 | 2019-12-04 | 주식회사 블루뱅크 | 내염성 호기성 그래뉼 슬러지 기반 친환경 탈질조 |
| WO2023248512A1 (ja) * | 2022-06-21 | 2023-12-28 | 鹿島建設株式会社 | 混合微生物及び廃水処理方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3553252B2 (ja) | 2004-08-11 |
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| Date | Code | Title | Description |
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