JP2001253817A - コラーゲン合成促進剤およびその製造方法ならびにコラーゲン合成促進剤を含有する皮膚外用剤。 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 生体に対する高い安全性と十分なコラーゲン
合成促進効果とを兼ね備えたコラーゲン合成促進剤と前
記コラーゲン合成促進剤を簡便に製造する方法と前記コ
ラーゲン合成促進剤を含有する皮膚外用剤とを提供する
ことにある。 【解決手段】 マリーゴールド抽出物を有効成分として
含有する、コラーゲン合成促進剤が開示されている。本
発明のコラーゲン合成促進剤は、生体に対する高い安全
性と十分なコラーゲン合成促進効果とを兼ね備える。ま
た、本発明のコラーゲン合成促進剤を含有する皮膚外用
剤は、シワ、小ジワおよび肌のハリ、タルミを改善す
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、マリーゴールドの
抽出成分から得られるコラーゲン合成促進能を有する抽
出物を処方するコラーゲン合成促進剤およびその製造方
法に関する。詳細には、加齢および紫外線暴露によって
生じる皮膚のシワおよびタルミの抑制を促すコラーゲン
合成促進剤を、天然植物であるマリーゴールドから抽出
することにより得られるコラーゲン合成促進能を有する
抽出物を得る方法及びこれを有効成分として含有するコ
ラーゲン合成促進剤に関する。さらには植物由来のコラ
ーゲン合成促進能を有する抽出物を処方する安全性に富
んだ皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】生体は、細胞とその間隙とを埋める細胞
間マトリックスにより構成されている。その細胞間マト
リックスを構成するもののうち、線維成分の主たるもの
で生体蛋白質の総重量のおよそ１／３を占めるものがコ
ラーゲンである。コラーゲンは全身のあらゆる臓器に存
在しており、骨、鍵、皮膚、軟骨、血管壁、歯などには
特に大量に存在している。

【０００３】一方、生体における皮膚は、組織学的に表
皮、真皮および皮下組織に分けられる。特に真皮は皮膚
の支持組織として、皮膚の恒常性維持のために重要な役
割を果たしている。真皮が構成する主な細胞は線維芽細
胞である。線維芽細胞はコラーゲン等の蛋白質およびヒ
アルロン酸などのグリコサミノグリカンを産生し、これ
らの結合組織の中で構築構造を形成している。

【０００４】近年、老化に関する様々な研究が行われて
いる。特にコラーゲンは皮膚の老化抑制機能に重要な役
割を持つことが解明されている。従来よりコラーゲンが
皮膚の保湿効果に優れていることに着目し、コラーゲン
を含む化粧料が皮膚のシワおよびタルミを改善する効果
を期待され存在する。しかし、これらの化粧料はコラー
ゲンを皮膚表面に塗布するだけのものである。コラーゲ
ンは高分子構造を有するため表皮のバリアー機能に阻ま
れて吸収されない。したがって、洗い落とせばその保湿
効果もなくなり、本質的に皮膚機能を改善するものでは
なかった。

【０００５】またコラーゲンは組織の形態を正常に維持
するという働きのみならず、各種細胞の形態、代謝およ
び接着などに対しても影響を及ぼし、生体に対して機能
的にも作用する。このように生体において重要な役割を
持つコラーゲンも加齢に伴い減少することが報告されて
おり（Ｓｈｕｓｔｅｒ Ｓ， Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕ
ｒｎａｌｏｆ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ， ９３， ｐ
６２９， （１９７５））、これがシワおよびタルミの
大きな原因になっていると考えられる。

【０００６】これに対し、コラーゲンの生合成を促進す
るものとしてアスコルビン酸、レチノイン酸（Ｋｌｉｇ
ｍａｎ ＡＭ， ｅｔ ａｌ， Ｊ． Ａｍ． Ａｃａ
ｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１５， Ｐ８３６， （１９
８６））、インスリン、成長ホルモン、ＴＧＦ−β（Ｗ
ｒａｎａ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．， １５９， ｐ６９， （１９８６））、ま
た、丹参の根抽出物（特開平２−２９０８０５号）、さ
らにヤツマタモク、モロイトグサ、フクリンアミジ、カ
イメンソウ、ウラボシヤハズなどの海藻抽出液（フレグ
ランス ジャーナル，４，ｐ５２，（１９９９））にも
コラーゲン合成促進作用があることなど知られている。

【０００７】しかし、アスコルビン酸はそれ自身が不安
定なため化粧料を着色してしまう。レチノイン酸は皮膚
に対して刺激性を有することが知られている。インスリ
ン、成長ホルモンおよびＴＧＦ−βは皮膚に対する安全
性が十分に証明されていない。また丹参の根抽出物では
真皮の線維芽細胞のコラーゲン合成促進に十分な効果が
得られない。各々に一長一短があり、更なる探索が行わ
れている状況にあるとともにコラーゲン合成促進が、特
定の化学構造を有する化合物によって起こっているか否
かは明らかにされていない。

【０００８】マリーゴールドは、保湿化粧料の原料（特
開昭６０−２５８１０４）としての開示があるが、この
発明の１７ページ第１表および１８ページ第２表に記載
されているテストの結果から俄かに、マリーゴールド抽
出物そのものに保湿効果があるかどうかが分からない。
また、マリーゴールドは、養毛料の原料（特開平４−１
０３５１８）および抗男性ホルモン剤（特開平０５−０
７０３６０）などとして供されているが、コラーゲン合
成促進能を有することを明らかにしていないし、またこ
れを示唆するものでもない。

【０００９】さらにマリーゴールドの有する効果として
殺菌効果、抗真菌効果および抗炎症効果（メディカルハ
ーブ、ｐ４３、１９９５年７月１日（株）日本ヴォーグ
社発行）が知られている。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記問題の
解決を課題とするものであり、その目的とするところは
生体に対する高い安全性と十分なコラーゲン合成促進効
果とを兼ね備えたコラーゲン合成促進活性成分を提供す
ることおよび該コラーゲン合成促進活性成分を簡便に製
造する方法とを提供することにある。さらに、該コラー
ゲン合成促進活性成分を含有する皮膚のシワおよびタル
ミを抑制しうる安全性に富んだ皮膚外用剤を提供するこ
とにある。

【００１１】

【課題を解決するための手段】本発明は、マリーゴール
ドを特定の手法に従って抽出した抽出物がコラーゲン合
成促進能を発揮することを見い出したことに基づくもの
であって、この有効に働く有効成分を含有するコラーゲ
ン合成促進能を有する抽出物及びこれを含んで成るコラ
ーゲン合成促進剤を提供するものである。好適な実施態
様では、前記マリーゴールド抽出物が、 （１）マリーゴールドを低級アルコール溶液に浸漬し、
第一濾液を得る工程；および （２）前記第一濾液に水を添加して第二濾液を得る工
程； を包含する方法により、調製された抽出物であるコラー
ゲン合成能を有する抽出物である。

【００１２】さらに好適な実施態様では、前記低級アル
コール溶液が、３０容積％以下の水を含有する水溶液で
あるコラーゲン合成促進能を有する抽出物である。

【００１３】さらに好適な実施態様では、前記（２）の
工程が、前記第一濾液の低級アルコール濃度が５０容積
％以下となるように水を添加する工程である、コラーゲ
ン合成促進能を有する抽出物である。

【００１４】本発明はまた、コラーゲン合成促進剤を製
造する方法であって、 （１）マリーゴールドを７０容積％以上の低級アルコー
ル溶液に浸漬し、第一濾液を得る工程； （２）前記第一濾液に水を添加して低級アルコール濃度
が５０容積％以下とし、第二濾液を得る工程；および （３）前記第二濾液を濃縮してマリーゴールド抽出物を
得、そして前記マリーゴールド抽出物を処方する工程； を包含する方法である。前記工程によって得られるマリ
ーゴールド抽出物が２８０ｎｍ〜４００ｎｍの範囲の紫
外線吸収において３４０ｎｍ付近に吸収極大をもつコラ
ーゲン合成促進能を有する抽出物である。

【００１５】さらに本発明はまた、前記製造方法に従っ
て得られるマリーゴールド抽出物を処方して得られるこ
とを特徴とするコラーゲン合成促進剤である。

【００１６】さらに本発明はまた、前記コラーゲン合成
促進能を有する抽出物を含有する皮膚外用剤である。

【００１７】

【発明の実施の形態】本発明のコラーゲン合成促進剤
は、マリーゴールド抽出物を含有する。本発明のマリー
ゴールド抽出物は、キク科のマリーゴールド（別名：ト
ウキンセンカ、Ｃａｌｅｎｄｕｌａ ｏｆｆｃｉｎａｌ
ｉｓ Ｌ．）を溶媒で抽出して得られる抽出物である。

【００１８】本発明に用いられるマリーゴールドは、採
取後の生の状態の全草もしくは特定部位、採取後に乾燥
された全草もしくは特定部位、および全草もしくは特定
部位の乾燥後の粉砕物のいずれでもよい。好ましくは、
乾燥後の粉砕物を用いる。また好ましくは、マリーゴー
ルドの特定部位として花を用いる。

【００１９】マリーゴールド抽出物は、例えば、以下の
ようにして得ることができる：まず、マリーゴールドを
抽出溶媒に浸漬する。抽出溶媒の量はマリーゴールドが
浸る量であればよいが、マリーゴールドの重量に対して
５倍量から５０倍量が好ましい。使用される抽出溶媒は
特に限定されない。使用され得る抽出溶媒の例として、
メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロ
パノール、ｔ−ブタノールのような低級アルコール類、
アセトン等のケトン類、および酢酸エチルエステル等の
エステル類のような有機溶媒ならびに水が挙げられる。
これら抽出溶媒は単独または組合せて用いられる。本発
明においては、エタノールおよび／またはメタノール、
または水とエタノールおよび／またはメタノールとの混
合溶媒（以下、「低級アルコール溶液」という）が好ま
しい。

【００２０】さらに、上記マリーゴールド抽出物は以下
のようにして得ることが好ましい：まず、マリーゴール
ドを、低級アルコール溶液に浸漬する。低級アルコール
溶液の水分濃度は、好ましくは３０容積％以下である。
水分濃度が３０容積％を超えるとマリーゴールドの成分
を十分に抽出できない。

【００２１】抽出温度および抽出時間は特に限定され
ず、当業者により適切な条件に設定される。本発明にお
いては、抽出温度が好ましくは５℃〜１２０℃であり、
より好ましくは４０℃〜１２０℃である。抽出時間は、
抽出温度によって異なる。室温付近で抽出を行う場合は
１日〜１０日が好ましく、４０℃以上で抽出を行う場合
は１時間〜９６時間が好ましい。上記抽出の後、低級ア
ルコール溶液から不溶性の残渣を除去することで第一濾
液を得る。

【００２２】次いで、第一濾液に、水を添加する。水の
添加量は、好ましくは第一濾液の低級アルコール濃度が
５０容積％以下となる量である。さらに好ましくは第一
濾液の低級アルコール濃度が２０容積％以下となる量で
ある。また第一濾液を減圧濃縮によって２倍から２０倍
に濃縮した後に、水と必要に応じて低級アルコールとを
添加して上記濃度に調節してもよい。調製された第一濾
液を、好ましくは４℃〜１５℃で１２時間以上静置す
る。これにより第一濾液内に不純物の沈殿が生じる。生
じた沈殿を濾過等の操作により除去することで第二濾液
を得る。

【００２３】このように、マリーゴールド中のコラーゲ
ン合成促進効果を持つ成分は、どちらかといえば、低級
アルコール濃度の高い抽出画分に存在すると考えられ
る。上記したように、第一濾液の水分濃度を高めて、不
純物を除去する工程をとることにより、夾雑物が除かれ
るため、さらにコラーゲン合成促進効果をもつ成分の濃
度が高まる。従って、以上の工程を包含する製造方法が
良い。

【００２４】ここでさらに、第二濾液に対して、０．０
１重量％〜１０重量％の活性炭が添加されてもよい。活
性炭が添加された第二濾液は、攪拌されることによって
残存する色素などの不純物が活性炭に吸着される。マリ
ーゴールド抽出物は、第二濾液を当業者に周知の方法で
蒸発乾固することで得られる。

【００２５】本発明のコラーゲン合成促進剤は、マリー
ゴールド抽出物をそのままコラーゲン合成促進剤として
もよい。または適当な溶媒、例えば低級アルコール溶液
によって適当な濃度に調製することにより、本発明が対
象とするコラーゲン合成促進剤としてもよい。また、本
発明のコラーゲン合成促進能を有するマリーゴールド抽
出物は２８０ｎｍ〜４００ｎｍの範囲の紫外線吸収にお
いて３４０ｎｍ付近に極大吸収をもつことを特徴とす
る。

【００２６】本発明の皮膚外用剤は、上記コラーゲン合
成促進剤と化粧料、医薬部外品または医薬品に一般に用
いられる適切な原料を配合することにより得られる。本
発明の皮膚外用剤は、特に化粧料の形態として好ましく
用いられる。本発明の皮膚外用剤は、上記コラーゲン合
成促進剤を含有することによって、皮膚のシワやタルミ
を改善し、加齢および紫外線暴露等による皮膚の老化を
防止する。上記コラーゲン合成促進剤を配合する量は皮
膚外用剤全量に対して０．０１％〜３０％が好適であ
る。上記適切な材料としては、界面活性剤、油脂類、多
価アルコール、低級アルコール、増粘剤、紫外線吸収剤
・散乱剤、防腐剤、酸化防止剤、キレート剤、ｐＨ調整
剤、香料、色素、水等が挙げられる。以下に具体例を挙
げるが、本発明の皮膚外用剤に配合可能な成分はこれら
に限定されるものではない。

【００２７】界面活性剤としてはポリオキシエチレン
（以下、ＰＯＥ−と略す）オクチルドデシルアルコー
ル、ＰＯＥ−２−デシルテトラデシルアルコール等のＰ
ＯＥ−分岐アルキルエーテル、ＰＯＥ−オレイルアルコ
ールエーテル、ＰＯＥ−セチルアルコールエーテル等の
ＰＯＥ−アルキルエーテル、ソルビタンモノオレエー
ト、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンモノ
ラウレート等のソルビタンエステル、ＰＯＥ−ソルビタ
ンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンモノイソステア
レート、ＰＯＥ−ソルビタンモノラウレート等のＰＯＥ
−ソルビタンエステル、グリセリルモノオレエート、グ
リセリルモノステアレート、グリセリルモノミリステー
ト等のグリセリン脂肪酸エステル、ＰＯＥ−グリセリル
モノオレエート、ＰＯＥ−グリセリルモノステアレー
ト、ＰＯＥ−グリセリルモノミリステート等のＰＯＥ−
グリセリン脂肪酸エステル、ＰＯＥ−ジヒドロコレステ
ロールエステル、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化
ヒマシ油イソステアレート等のＰＯＥ−硬化ヒマシ油脂
肪酸エステル、ＰＯＥ−オクチルフェノールエーテル等
のＰＯＥ−アルキルアリールエーテル、グリセロールモ
ノイソステアレート、グリセロールモノミリステート等
のグリセロールエステル、ＰＯＥ−グリセロールモノイ
ソステアレート、ＰＯＥ−グリセロールモノミリステー
ト等のＰＯＥ−グリセロールエーテル、ジグリセリルモ
ノステアレート、デカグリセリルデカステアレート、デ
カグリセリルデカイソステアレート、ジグリセリルジイ
ソステアレート等のポリグリセリン脂肪酸エステル等の
非イオン界面活性剤、ミリスチン酸、ステアリン酸、パ
ルミチン酸、ベヘニン酸、イソステアリン酸、オレイン
酸等の高級脂肪酸のカリウム、ナトリウム、ジエタノー
ルアミン、トリエタノールアミン、アミノ酸等の塩、エ
ーテルカルボン酸の上記アルカリ塩、Ｎ−アシルアミノ
酸の塩、Ｎ−アシルサルコン酸塩、高級アルキルスルホ
ン酸塩等の陰イオン界面活性剤、アルキルアミン塩、ポ
リアミン、アミノアルコール脂坊酸有機シリコーン油
脂、アルキル４級アンモニウム塩等の陽イオン界面活性
剤あるいはレシチン、ベタイン誘導体等の両性界面活性
剤が挙げられる。

【００２８】油脂類としては、ヒマシ油、オリーブ油、
カカオ油、椿油、ヤシ油、木ロウ、ホホバ油、グレープ
シード油、アボガド油等の植物油脂類、ミンク油、卵黄
油等の動物油脂類、ミツロウ、鯨ロウ、ラノリン、カル
ナウバロウ、キャンデリラロウ等のロウ類、流動パラフ
ィン、スクワレン、マイクロクリスタリンワックス、セ
レシンワックス、パラフィンワックス、ワセリン等の炭
化水素類、ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、
オレイン酸、イソステアリン酸、ベヘニン酸等の天然及
び合成脂肪酸類、セタノール、ステアリルアルコール、
ヘキシルデカノール、オクチルデカノール、ラウリルア
ルコール等の天然及び高級アルコール類、ミリスチン酸
イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン
酸オクチルドデシル、オレイン酸オクチルドデシル、コ
レステロールオレート等のエステル類が挙げられる。

【００２９】多価アルコールとしてはエチレングリコー
ル、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、
１，３−ブチレングリコール、１，４−ブチレングリコ
ール、ジプロピレングリコール、グリセリン、ジグリセ
リン、トリグリセリン、テトラグリセリン等のポリグリ
セリン、グルコース、マルトース、マルチトース、ショ
糖、フルクトース、キシリトース、ソルビトール、マル
トトリオース、スレイトール、エリスリトール等。増粘
剤としては、アルギン酸ナトリウム、キサンタンガム、
硅酸アルミニウム、マルメロ種子抽出物、トラガントガ
ム、デンプン、コラーゲン、ヒアルロン酸ナトリウム等
の天然高分子物質、メチルセルロース、ヒドロキシエチ
ルセルロース、カルボキシメチルセルロース、可溶性デ
ンプン、カチオン化セルロース等の半合成高分子物質、
カルボキシビニルポリマー、ポリビニルアルコール等の
合成高分子物質が挙げられる。

【００３０】紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香
酸、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、ブチルメトキ
シベンゾイルメタン、グリセリル−モノ−２−エチルヘ
キサノイル−ジ−パラメトキシベンゾフェノン、ジガロ
イルトリオレエート、２−２’−ジヒドロキシ−４−メ
トキシベンゾフェノン、エチル−４−ビスヒドロキシプ
ロピルアミノベンゾエート、２−エチルヘキシル−２−
シアノ−３，３’−ジフェニルアクリレート、パラメト
キシケイ皮酸エチルヘキシル、サリチル酸−２−エチル
ヘキシル、グリセリルパラアミノベンゾエート、サリチ
ル酸ホモメチル、オルトアミノ安息香酸メチル、２−ヒ
ドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、アミル−パラ
−ジメチルアミノベンゾエート、２−フェニルベンゾイ
ミダゾール−５−スルフォン酸、２−ヒドロキシ−４−
メトキシベンゾフェノン−５−スルフォン酸等が挙げら
れる。防腐剤としては、安息香酸塩、サリチル酸塩、ソ
ルビン酸塩、デヒドロ酢酸塩、パラオキシ安息香酸エス
テル、２，４，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジ
フェニルエーテル、３，４，４’−トリクロロカルバニ
リド、塩化ベンザルコニウム、ヒノキチオール、レゾル
シン、エタノール等が挙げられる。

【００３１】酸化防止剤としては、トコフェロール、ア
スコルビン酸、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチル
ヒドロキシトルエン、ノルジヒドログアヤレチン酸、没
食子酸プロピル等。キレート剤としては、エデト酸ナト
リウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。これらの
添加成分の中には、本発明の必須成分の安定性またば経
皮吸収性を高めることにより、本発明の化粧料の有効性
をより向上させる働きをもつものもある。また、その剤
型も任意であり、さらに可溶系、乳化系、粉末分散系等
いずれでもよく、用途も化粧水乳液、クリーム、パック
等の基礎化粧料はもちろんファンデーション等のメーキ
ャッブ化粧料などに幅広く利用できる。

【００３２】

【実施例】以下に本発明の実施例を示す。本発明は、こ
れら実施例に何ら限定されるものではない。

【００３３】＜実施例１＞マリーゴールド（生活の木よ
り購入）５０ｇを９９．５容積％エタノール溶液（水分
濃度０．５容積％）１Ｌに浸漬し、４０℃で４８時間抽
出を行った。抽出済のマリーゴールドを除去し、８００
ｍＬの抽出液を得た。この抽出液を４℃で１５時間静置
した。抽出液内に沈殿した不純物を濾過し、第一濾液７
９０ｍＬを得た。得られた第一濾液を６０℃にて減圧濃
縮し、５０ｍＬとした後、エタノールおよびイオン交換
水にてエタノール濃度が２０容積％となるように調製し
２５０ｍＬとした。この溶液を４℃で１５時間静置した
後、沈殿した不純物を濾過し、第二濾液２４５ｍＬを得
た。得られた第二濾液をエタノールおよびイオン交換水
にてエタノール濃度が５０容積％となるように調製した
後、活性炭を０．１重量％となるように添加し１時間攪
拌した。次いで活性炭を濾過し、溶媒を窒素気流下で蒸
発乾固し、マリーゴールド抽出物（乾燥重量：１．２
ｇ）を得た。このものは２８０ｎｍ〜４００ｎｍの範囲
の紫外線領域において３４０ｎｍに極大吸収を示した。

【００３４】得られたコラーゲン合成能を有する抽出物
を４０ｍｇ／ｍＬとなるようにエタノールおよびイオン
交換水で調製した。このものを以下のコラーゲン合成促
進試験に供した。

【００３５】ヒト皮膚正常細胞由来ＮＢ１ＲＧＢ細胞株
をウシ胎児血清（１０容積％：ＧＩＢＣＯ ＢＲＬ社）
を含むイーグルＭＥＭ培地で懸濁し、細胞数が２．０×
１０^４個／ｗｅｌｌ（平底９６ウエルプレート：ＣＯＲ
ＮＩＮＧ社）となるように播種し、ＣＯ_２インキュベー
ター（３７℃、５％ＣＯ_２）で２４時間培養した。次い
で、この培地を除去した後、上記より得たコラーゲン合
成促進剤を１００μｇ／ｍＬの割合で含有するイーグル
ＭＥＭ培地（０．５容積％のウシ胎児血清を含有）を、
添加して、さらに５日間培養を行った。培養終了後、上
澄を採取して試料溶液とした。また、プレート内に残っ
た細胞をＰＢＳ（−）で洗浄した後に、ニュートラルレ
ッド法で細胞数を測定した。

【００３６】コラーゲンは、まず細胞内でプロコラーゲ
ンとして合成される。合成されたプロコラーゲンは細胞
外に分泌され、プロコラーゲンＮ−プロテアーゼおよび
プロコラーゲンＣ−プロテアーゼによってプロセシング
を受けコラーゲン分子となる。この時に生成するＣ−末
端のキャップであるプロコラーゲンＩ型Ｃ末端ペプチド
（ＰＩＰ）をＥＬＩＳＡ（酵素免疫測定法）によって定
量することにより、細胞のコラーゲン産生能を評価する
ことができる。

【００３７】試料溶液中に含まれるＰＩＰの含有量をＥ
ＬＩＳＡを用いて算出した。結果を表１に示す。

【００３８】＜実施例２＞実施例１のコラーゲン合成促
進剤を１００μｇ／ｍＬの割合で含有するイーグルＭＥ
Ｍ培地の代わりに、２００μｇ／ｍＬの割合で含有する
イーグルＭＥＭ培地（０．５容積％のウシ胎児血清を含
有）を用いたこと以外は、実施例１と同様にして試料溶
液中に含まれるＰＩＰの含有量を測定した。結果を表１
に示す。

【００３９】＜比較例１＞実施例１のコラーゲン合成促
進剤を１００μｇ／ｍＬの割合で含有するイーグルＭＥ
Ｍ培地の代わりに、コラーゲン合成促進剤を含有しない
イーグルＭＥＭ培地（０．５容積％のウシ胎児血清を含
有）を用いたこと以外は、実施例１と同様にして試料溶
液中に含まれるＰＩＰの含有量を測定した。結果を表１
に示す。

【００４０】

【表１】

【００４１】表１に示されるように、本発明のコラーゲ
ン合成促進剤を含有する系（実施例１および２）では、
含有しない系（比較例１）と比較して、試料溶液中のＰ
ＩＰ含有量が増加していることがわかる。また、使用さ
れるコラーゲン合成促進剤の濃度が高いほど、ＰＩＰが
産生される量も増大する傾向にあることがわかる。ま
た、細胞数の測定結果から実施例１、実施例２および比
較例１での細胞数に差はなかった。このことから本発明
の一例であるコラーゲン合成促進剤が安全であることが
分かった。＜実施例３＞実施例１で得られたマリーゴー
ルド抽出物を蒸留水で４００μｇ／ｍＬとなるように調
製し、２８０ｎｍ〜４００ｎｍの範囲の紫外線吸収を測
定した。結果を図１に示す。図１より３４０ｎｍ付近に
吸収極大をもつ特徴があることが分かった。

【００４２】＜実施例４＞実施例１で得たコラーゲン合
成促進剤を用いて、以下の処方により化粧水、乳液およ
びクリームを調製した。

【００４３】 １）化粧水 重量％ 濃グリセリン ４．０ ソルビット液（７０重量％水溶液） ４．０ クエン酸ナトリウム ０．３ ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ０．５ エタノール １５．０ 香料 ０．０５ 実施例１のコラーゲン合成促進剤 ０．２ クエン酸（ｐＨ調整剤） 適量 精製水 残部 全成分を室温で攪拌、混合して均一な溶液とした。ｐＨ
５．５に調整して、化粧水を得た。

【００４４】 ２）乳液 重量％ （成分Ａ） 精製水 残部 ショ糖脂肪酸エステル １．０ 濃グリセリン ６．０ 防腐剤（パラオキシ安息香酸エステル 適量 カルボキシビニルポリマー ０．０６ 水酸化カリウム ０．０２８ （成分Ｂ） オリーブ油 ４．０ ホホバ油 ４．０ 乳酸ミリスチル ２．０ 自己乳化型モノステアリン酸グリセリン １．５ 親油型モノステアリン酸グリセリン １．５ （成分Ｃ） 実施例１のコラーゲン合成促進剤 ０．２ 香料 ０．２ 成分Ａを加熱溶解し、８０℃に保持した。他方８０℃に
加熱溶解した成分Ｂと成分Ａとを混合し、十分に攪拌し
た。次いで、５０℃に冷却し、成分Ｃを添加して乳液を
得た。

【００４５】 ３）クリーム 重量％ ステアリン酸 ２．０ ステアリルアルコール ７．０ 水添ラノリン ２．０ スクワラン ５．０ ２−オクチルドデシルアルコール ６．０ ポリオキシエチレン（２５モル） セチルアルコールエーテル ３．０ グリセリンモノステアリン酸エステル ２．０ プロピレングリコール ５．０ 実施例１のコラーゲン合成促進剤 ０．２ 亜硫酸水素ナトリウム ０．０３ エチルパラベン ０．３ 香料 適量 精製水 残部 精製水にプロピレングリコールを添加し、加熱して７０
℃に保った（水相）。他の成分を混合し加熱融解して、
７０℃に保った（油相）。水相と油相とを混合し、予備
乳化の後、ホモミキサーで均一に乳化してクリームを得
た。

【００４６】＜実施例５＞実施例４の化粧水のコラーゲ
ン合成促進剤の代わりに精製水を用いたこと以外は、実
施例３と同様にして化粧水を得た。

【００４７】＜試験例１＞２０歳から６０歳の女性６０
人を対象にして、実施例４の化粧水と実施例５の化粧水
とを１日１回、連続２ヶ月の間、顔面塗布を行った。試
験終了後のシワ、小ジワに対する改善効果について試験
開始前と比較した。

【００４８】（Ａ）シワ、小ジワに対する効果 皮膚の状態を目視にて観察し、以下の評価基準に基づい
て評価した。 （評価基準） ＋＋：きれいに消えた。 ＋ ：少し目立たなくなった。 ± ：変化なし。 − ：増えた。 評価の結果を、表２に示す。なお、今回の試験におい
て、皮膚に異常をきたした被験者はいなかった。

【００４９】

【表２】

【００５０】＜試験例２＞２０歳から６０歳の女性６０
人を対象にして、実施例４の化粧水と実施例５の化粧水
とを１日１回、連続２ヶ月の間、顔面塗布を行った。試
験終了後の肌のハリ、タルミに対する改善効果について
試験開始前と比較した。

【００５１】（Ｂ）肌のハリ、タルミに対する効果 皮膚の状態を目視にて観察し、以下の評価基準に基づい
て評価した。 （評価基準） ＋＋：非常に改善された。 ＋ ：改善された。 ± ：変化なし。 − ：ハリがなくなったり、タルミが増えた。 評価の結果を、表３に示す。なお、今回の試験におい
て、皮膚に異常をきたした被験者はいなかった。

【００５２】

【表３】

【００５３】試験例１および試験例２の結果、コラーゲ
ン合成促進剤を含有する化粧水はシワ、小ジワおよび肌
のハリ、タルミを改善する効果を有することがわかる。
以上のことから本発明のコラーゲン合成促進剤は優れた
コラーゲン合成促進作用を示すことが明らかである。ま
た、本発明のコラーゲン合成促進剤を含有する化粧料
は、シワ、小ジワおよび肌のハリ、タルミを改善するこ
とが明らかである。

【００５４】

【発明の効果】本発明によれば、コラーゲンの合成を効
率的に促進することができる。本発明のコラーゲン合成
促進剤は、皮膚に異常をきたすことなく、生体内におい
て極めて安全にコラーゲンの産生を増強させることがで
きる。本発明のコラーゲン合成促進剤を含有させること
により、シワ、小ジワおよび肌のハリ、タルミを改善す
る皮膚外用剤を製造することが可能となり、加齢および
紫外線暴露による皮膚の老化防止に顕著な効果を有する
皮膚外用剤を提供できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１は、本発明のコラーゲン合成促進剤の紫
外線領域における吸光度を表わすグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 17/16 Ａ６１Ｐ 17/16 Ｆターム(参考） 4C083 AA111 AA112 AA122 AB032 AB052 AB352 AC022 AC072 AC092 AC102 AC122 AC132 AC172 AC302 AC352 AC422 AC432 AC482 AD092 AD222 AD512 BB51 CC03 CC04 CC05 CC07 CC11 CC12 DD23 DD31 EE12 4C088 AB26 AC03 BA09 BA10 BA37 BA40 CA06 CA11 MA07 MA63 NA14 ZA89 ZB22

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 マリーゴールド抽出物を有効成分として
   含有するコラーゲン合成促進剤。
2. 【請求項２】 請求項１記載のマリーゴールド抽出物
   が、 （１）マリーゴールドを低級アルコール溶液に浸漬し、
   第一濾液を得る工程；および （２）該第一濾液に水を添加して第二濾液を得る工程； を包含する方法により、調製された抽出物である請求項
   １に記載のコラーゲン合成促進剤。
3. 【請求項３】 請求項２（１）記載の低級アルコール溶
   液が、３０容積％以下の水を含有する水溶液である請求
   項２に記載のコラーゲン合成促進剤。
4. 【請求項４】 請求項２（２）記載の工程が、第一濾液
   の低級アルコール濃度が５０容積％以下となるように水
   を添加する工程である請求項２に記載のコラーゲン合成
   促進剤。
5. 【請求項５】 コラーゲン合成促進剤を製造する方法で
   あって、 （１）マリーゴールドを７０容積％以上の低級アルコー
   ル溶液に浸漬し、第一濾液を得る工程； （２）該第一濾液に水を添加して低級アルコール濃度が
   ５０容積％以下とし、第二濾液を得る工程；および （３）該第二濾液を濃縮して得られるマリーゴールド抽
   出物であって３４０ｎｍ付近に極大吸収を持つものを
   得、そして該マリーゴールド抽出物を処方する工程を包
   含する方法。
6. 【請求項６】請求項５に記載の製造方法に従って得られ
   るマリーゴールド抽出物を処方して得られることを特徴
   とするコラーゲン合成促進剤。
7. 【請求項７】 請求項１に記載のコラーゲン合成促進剤
   を含有する皮膚外用剤。