JP2000507228A

JP2000507228A - マイクロパーティクル、その製造方法ならびに超音波診断への応用

Info

Publication number: JP2000507228A
Application number: JP9532269A
Authority: JP
Inventors: レスリング，ゲオルク; アルベイラ，セラル; タック，ヨハネス
Original assignee: シェリングアクチェンゲゼルシャフト
Priority date: 1996-03-14
Filing date: 1997-03-11
Publication date: 2000-06-13
Also published as: CA2248739A1; US20010038823A1; AU2154297A; NO984184D0; NO984184L; EP0889738A1; WO1997033624A1; DE19611769A1

Abstract

(57)【要約】本発明は疎水性多糖類を基本とした生物分解性、合成重合体より成る気体を含有するミクロ−ならびにナノパーティクル、当該パーティクルを含む超音波診断薬ないし当該パーティクルおよび当該診断薬の製造方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】マイクロパーティクル、その製造方法ならびに超音波診断への応用本発明は、本請求項記載の疎水性多糖類を基本とする、生物により分解可能な合成重合体より成る気体含有のマイクロ−ならびにナノパーティクルと、当該パーティクル含有物質の超音波診断への応用ならびに当該パーティクルおよび物質の製造方法に関する。超音波診断は、合併症がないことや操作が簡単なことから医療分野にて広く用いられている。超音波は媒体の境界面の音響密度の違いを反映する。その時に発生する反響信号は電気的に増幅することで、検知することができる。超音波を利用した血管や内部器官の描写では、通常は血液流を描きだすことはできない。液体、特に血液の場合には、周囲との間に密度と圧縮率に違いがある時に超音波コントラストだけ得ることができる。医療分野では超音波診断用造影剤として気体を含有し、もしくは気体を産生する物質を利用することが多い。気体は周囲の血液との間のインピーダンス差が液体や固形物に比べて極めて大きいことから特に好適である［ＬｅｖｉｎｅＲ．Ａ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．３（１９８８）２８あるいはＭａｃｈｉＩ．Ｊ．，ＣＵｌｌ（1 ９８３）３］。微細な気泡を含む液体を注射して、心臓エコーにコントラストをている［ＲｏｅｌａｎｄｔＪ．，ＵｌｔｒａｓｏｕｎｄＭｅｄ．Ｂｉｏｌ．８（１９８２）４７１−４９２］。この気泡は生理学的に利用可能な液体中に、液を強く振ったりその他の方法で振動し、あるいは二酸化炭素を加える様な方法で発生させることができる。しかし、この方法では泡の数や大きさを調節することはできず、再現性も乏しい。また、一般的にはこの泡は不安定で、生じている期間も短い。その平均直径は多くの場合赤血球よりも大きく、その結果左心室、肝臓、腎臓あるいは脾臓の様なコントラストを得るために必要な肺毛細血管の通過は不可能である。さらに、この泡によって得られる超音波エコーは、泡の発生、会合、そして消失という複数の、そして相互に分離できないプロセスが一緒になったものであるため、その定量化には適していない。例えばこの超音波造影剤を利用して心筋像の変化を測定して、遷移時間を知ることはできない。このため、安定性の高い分散体である造影剤が必要に成っている。ヨーロッパ特許第０１３１５４０号では気泡を糖により安定化させることが記載されている。これによって造影作用の再現性と均一性が改善されたが、この気泡も肺を通過することはできなかった。ヨーロッパ特許第０１２２６２４号ならびに同０１２３２３５号には、糖、糖アルコール、ならびに塩に界面活性剤を加えることで気泡安定化作用が改善されることが記載されている。この超音波造影剤を利用すると、肺毛細血管走行性が改善され、血管腔や肝臓や脾臓といったその他の器官を造影することができるようなった。しかし、この造影効果についても、気泡が組織細胞に取り込まれないことから、血管腔に限定されたものであった。体内で長期間変性しない超音波造影剤についての報告は無い。そうでない造影剤を静脈投与しても、造影剤が選択的に集積し、十分なシグナル強度で器官を造影したり、あるいは定量化できる様にはならない。空気をパーティクル内に入れる様にして気泡をカプセル化し、超音波造影剤として応用することが、ヨーロッパ特許第０２２４９３４号に記載されている。この例で用いられた壁剤は蛋白質、特に変性させることで細胞毒性が現れるアレルギー性が知られているヒト由来の血清アルブミンであった。ヨーロッパ特許申請第ＥＰ０３９８９３５号には、生物分解性の合成材料に基づいた超音波診断薬用気体含有マイクロパーティクルが記載されている。本材は生体内で十分な存在時間を有しており、静脈注射によって網状内皮細胞系の細胞内に集積し、その結果肝臓や脾臓にも集積することが示されている。ヨーロッパ特許出願第ＥＰ０４５４０４４では、疎水性多糖類に基づく超音波造影剤が記載されている。この造影剤の場合には、特に高分子の混合型多電解質錯体を除いて使用する。この種の錯体は、溶液中では、結合状態でない場合に比べてより高い浸透圧を示し、さらにそのため錯体を加えると、化合物がない場合に比べ生体内への応用性が悪くなることが示されている。本発明の課題は上記技術上の欠点を克服した超音波用造影剤、即ち・周辺組織と明確なコントラストを付け、・静脈注射により、大きく気体を失うことなく定量的に心臓左部に集積できうる大きさと安定性を有し、・場合によっては血液循環系を長時間循環し、・アレルギー反応を起こさず高い実用性を有し、・水もしくは血液中で相互に凝集せず、・素早く、簡便に製造できる、造影剤を完成させることである。上記課題は本発明により解決された。疎水性多糖類から成るマイクロパーティクルと気体は超音波診断用サンプルの製造に特に適していることが判明した。本発明は、疎水性多糖類を基本とする生物分解性の合成ポリマーから成り（以下パーティクルもしくはマイクロパーティクルと記載する）、生体内で容易にかつ毒性を有する分解物を生じないという特性を持つ反響性ポリマーナノ−もしくはマイクロパーティクルを包含する。さらに、その親油性より多様な範囲でエステル化あるいはエーテル化が容易に行え、それによって血流中に長時間存在しているが一ヶ所に滞留しないように調整できる。本発明のマイクロパーティクルの強度は製造工程で調整することが可能であり、音場で振動モードが刺激され、それによって非線形型の造影モードに応用可能なパーティクルも製造できる。本発明のマイクロパーティクルは疎水性の多糖類から形成される。例としては、ヒアルロン酸、デキストラン、プランズ、アミロペクチン、アミロース、マンナンならびに／あるいはキトサンの誘導体であり、その官能基がプロピル−、イソプロピル−、ブチル−、イソブチル−、ペンチル−、イソペンチル−、ヘキシル−、オクチル−、デシル−、ドデシル−、パルミトイル−、ステアノリイル− 、ラウリル−および／あるいはベンジル基によって全て、あるいは一部が疎水化したもの、即ちエステル化もしくはエーテル化されたものがある。エステル化の程度もしくはエーテル化の程度（以下一般的に置換度と記載する）は、工程の前段階で決められ、多糖体の全ての官能基（例えばカルボキシル− あるいはヒドロキシル基）がエステル化（エーテル化）した場合、エステル化１００％（エーテル化）と表す。本発明によれば置換度は３０−１００％が好ましい。置換度に従いパーティクルは親水性を調整され、血液中での滞留時間を調整する。一般には：パーティクルの親水度が大きいほど血液中での滞留時間は長くなる。また親油性が高いパーティクルは肝臓の様な組織に多く集積し、一方親油性が低いものは血管腔に多く集積する。本発明によれば分子量が１０−２５０ｋダルトンのポリマーがより好ましい。本発明による所望の分子量とエステル度を有する利用可能なヒアルロン酸エステルを以下の文献記載の方法で作成し、分析できる： −Ｊｅａｎｌｏｚら．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１８６，（１９５０）４９５−５１１ −Ｊｅａｎｌｏｚら．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９４（１９５２）１４１−１５０ −Ｊｅａｎｌｏｚら．，Ｈｅｌ．Ｃｈｉｍｉ．Ａｃｔ．３５（１９５２）２６２ −２７１ −Ｊａｇｅｒら．，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ．（２９７９）１０６５−１０６７ −米国特許第４，８５１，５２１号 −Ｋａｗａｇｕｃｈｉら．，Ｃａｒｂｏｈｙｄ．Ｐｏｌｙｍ．１８（１９９２）１３９−１４１ −Ｐｒｅｓｔｗｉｃｈら。、ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．５（１９９４）３３９−３４７ −Ｐｒｅｓｔｗｉｃｈら。、ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．５（１９９４）３７０−３７２ −Ｐｒｅｓｔｗｉｃｈら。、ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ．２（１９９１）２３２−２４１ −Ｃｈａｂｒｅｃｅｋら．，Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｙｍｐ．４８（１９９３）２０−２２ −Ｋｏｂａｊａｓｈｉら．，Ｂｉｏｒｈｅｏｌｏｇｙ３１（１９９４）２３５− ２４４本発明による利用可能な、疎水性デキストラン、プルラン、アミロペクチン、アミロース、マンナン、キトサン、あるいはキチンは次の文献公知の方法を用いて作成し、分析できる。 −Ｓｚｕｋｉ．Ｍら。、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２３（２２３−２２９）１９７７ −ＨａｍｍｅｒｌｉｎｇＵ．ら．，ＢｉｏｃｈｉｍｉｃａｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａＡｃｔａ８７５９（１９８６）２６５−２７０ −Ｋｏｂｏｊａｓｈｉ．Ｋ．ら．，Ｍａｋｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ１９（１９８６）５２９−５３５ −ＲｉｎｇｓｄｏｒｆＨ．ら．，Ａｎｇｅｗ．Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１６６／１６７（１９８９）７１−８０ −ＳｕｎａｍａｔｏＪ．ら．，ＣＲＣＣｒｉｔｉｃａｌＲｅｖｉｅｗｓｉｎＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｄｒｕｇＣａｒｒｉｅｒＳｙｓｔｅｍｓ２（１９８６）１１７−１３６ −ＲｉｎｇｓｄｏｒｆＨ．ら．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．ｅｄ．Ｅｎｇｌ．２７（１９８８）１１３ −ＴｏｓｈｉｒｈｉｒｏＳ．ら．，Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９２（１９９１）２４４７−２４６１パーティクルに含まれる気体は空気、窒素や希ガスの様な一般的な気体の他に過フルオロ化合物も利用できる。さらに本発明の別の観点は、当該発明の疎水性多糖類マイクロパーティクルの製造方法である。マイクロパーティクルの製造は、それぞれのポリマーならびに場合によって表面活性剤を有機溶媒もしくは溶媒混合液中に溶解して行う。この液に過フルオロ化合物もしくは水を分散させる。分散が水、必要な場合には表面活性剤を含む水に分散させ、攪拌器を用いて分散させる。溶媒は通気（例えば窒素）によって、場合によっては真空装置を用いて取り除く。この時少なくとも水もしくは溶液状の過フルオロ−化合物を含むパーティクルが形成される。続いてこのパーティクルを含む懸濁液に医薬品として利用できる骨格保護剤を混合し凍結乾燥すると、パーティクル内に存在する液体がさらに消散し、凍結乾燥体を換気した後、所望の気体（通常は空気）に置き換える。乾燥後も場合によっては少量の液体が蒸気としてパーティクル内に残ることがある（水もしくは過フルオロ化合物）。過フルオロ化された液体化合物としては、過フルオロペンタン、過フルオロヘキサン、過フルオロ−１，３−ジメチルシクロヘキサン、過フルオロシクロヘキサン、過フルオロデカリンならびに／あるいは過フルオロエーテルが利用できる。有機溶媒もしくは溶媒混合物としては、ジクロロメタン、アセトン、酢酸エチル、酢酸メチル、トリアセチン、トリエチルクエン酸、乳酸エチル、乳酸メチル、乳酸プロピル、酢酸イソプロピル、プロピル蟻酸、ブチル蟻酸ならびに／あるいはジメチルスルフォオキシドが好適である。表面活性剤としては、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒｅ^R、Ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅ^R、ポリエチレングリコールアルキルエーテル、ポリソルビン酸塩、サッカロースエステル（Ｓｉｓｔｅｒｎａ^R；オランダ）、サッカロースエステル（ＲｙｏｔｏＳＵｇａｒｅｓｔｅｒ^R、東京）ならびにゼラチン、ポリビニルアルコール、ポリビニルプロリドン、脂肪アルコールポリグリコシド、Ｃｈａｐｓ（Ｓｅｒｖａ）、Ｃｈａｐ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）、Ｃｈａｐｓｏ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）、デシル−β−Ｄ−グリコピラノシド、デシル−β −Ｄ−マルトピラノシド、ナトリウムオレイン酸塩、ポリエチレングリコールもしくはこれらの混合物が好適に利用できる。本発明のパーティクルにおいて実際に使用できる注射可能なものは、凍結乾燥体を医薬品として許容さえる懸濁溶媒中に再懸濁して製造する。好適な懸濁溶媒は例えば水、ならびに生理学的電解質の様な無機塩−もしくはＴｙｒｏｄｅの様な緩衝液、グルコースやラクトースの様な単−あるいは２糖類、マンニットの様な糖アルコールを１種類以上含む水溶液であり、場合によってはポリソルビット、多糖類、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒｅ^R、もしくはＰｏｌｏｘａｍｉｎｅ^R、ならびにポリビニルピロリドンの様な表面活性剤や、モノ−あるいはジエステルおよび／あるいはグリセリンの様な生理学的に利用可能な多価アルコールを含むことがある。好適な懸濁溶媒は注射目的に適した水である。使用の安全性を高めるために、注射の直前に懸濁液を濾過することができる。本発明の物質はミリリッター懸濁溶媒当たり１０⁶−１０¹⁰パーティクルを含む。注射量は使用目的によって異なる；血管の超音波検査では１から５００μｇ、好ましくは１０から１００μｇパーティクル／ｋｇ体重であり、カラードップラーソノグラフィーによる肝臓および脾臓の検査では、５０から１０００，このましくは２００から６００μｇ／ｋｇ体重である。本発明のマイクロパーティクルとそれを用いた超音波造影剤には次の様な利点がある：・生体内で素早く分解し、・分解産物に毒性がなく、・血液循環系に十分な長さ循環するが、その滞留時下は置換度で調整でき、・あらゆるモードの超音波診断に利用可能であり、特に非線形効果モードで利用可能であり、・簡単に粒径分布が調整でき、・製造が容易であり、・極めて安定であるため、肺を通過することができ、それによって左心臓部の造影もでき、そして・網状内皮細胞系に取り込まれるため肝臓や脾臓の造影にも利用できる。さらにパーティクルは極めて高い逆分散定数を有している。逆分散定数−造影効果を表す指標と見なすことができる−はキュベット内の造影剤の”後方散乱” を測定するという実験によって決めることができる（”音波造影剤の音響パラメータ測定の標準化”第一回ヨーロッパ超音波造影シンポジウム（”Ｓｔａｎｄａｒｉｓａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆａｃｏｕｓｔｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｕｌｔｒａｓｏｕｎｄｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔｓ”ＦｉｒｓｔＥｕｒｏｐｅａｎＳｙｍｐｏｓｉｕｍｏｎＵｌｔｒａｓｏｕｎｄＣｏｎｔｒａｓｔＩｍａｇｉｎｇ）１月２５−２６，１９９６、ロッテルダムを参照）。粒子数測定はコールターカウンター法によった。以下実施例により本発明を詳細に説明するが、もとよりこれに限定されるものではない。実施例１全てのカルボキシル基がエステル化された３．０ｇのヒアルロン酸ベンジルエステル（ＭＷ＝１６０ｋダルトン）を４０ｍｌの塩化メチレン液に溶解する。過フルオロペンタン１０ｍｌをＵｌｔｒａｕｒｒａｘ［１分当たり１００００回転（ＵＰＭ）］を用いて２分間ポリマー溶媒中に分散させる。得られた（Ｏ／Ｏ）−エマルジョンを４００ｍｌの２％ｉｇｅｎポリビニルアルコール液（ＰＶＡ−液）に加え、０℃に置いて、攪拌装置（ＤｉｓｐｅｒｍａｔＦＴ、ＶＭＡ−ＧｅｔｚｍａｎｎＧｍｂＨ）を用いて３０分間１００００ＵＰＭで分散させる。（Ｏ／Ｏ／Ｗ））エマルジョンを３首フラスコに攪拌し（３００ＵＰＭ）ながらいれ、３時間２０℃でＮ２を通気し、真空下において溶媒を飛ばす。さらに懸濁液を適当な強さで限外濾過して、残った溶媒液はそのままにして、懸濁液量を最小量にし（５０ｍｌ）、この懸濁液に医薬品として許容される骨格保護剤を加えて凍結乾燥する。凍結乾燥体が再懸濁された水にはマイクロパーティクル（直径０．１−８μｍ）が含まれており、試験管内での後方散乱定数は発信周波数５ＭＨｚではα_s＝２．５×１０^-1（ｄＢ／ｃｍ）であり、粒子濃度はｃ＝４．０×１０⁶粒子／ｍｌであった。実施例２実施例１の過フルオロペンタンを過フルオロヘキサンに変えて実施例１と同様に作業した。水に再懸濁した凍結乾燥体には超音波活性型の直径０．１から８μ ｍのマイクロパーティクルが含まれている。実施例３ポリマーとしてエステル化度７５％のヒアルロン酸ベンジルエステルを利用し、溶媒として４０ｍｌ塩化メチレン／酢酸エチルエステル（容積比率２：１）を用いて実施例（１）と同様に作業する。水に持ち込んだ凍結乾燥体には超音波活性型の直径０．１から８μｍのマイクロパーティクルが含まれている。実施例４ポリマーであるヒアルロン酸ベンジルエステルを４０ｍｌ塩化メチレン／ジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）（容積比率２：１）に溶解する。０．９％ＮａＣｌ液に再懸濁したパーティクルは試験管内では後方散乱定数は発信周波数５ＭＨｚでα_s＝２．３×１０^-1（ｄＢ／ｃｍ）であり、粒子濃度はｃ＝３．６×１０⁶粒子／ｍ１あり、粒子直径は０．５から８μｍである。実施例５重合体としてヒアルロン酸ペンチルエステル（エステル化度１００％、ＭＷ＝２５０ｋダルトン）を４０ｍｌの塩化メチレン／乳酸エチル（容積比２：１）に溶解したものを用い、実施例１同様に作業する。５．５％ｉｇｅｎマンニトール液に凍結乾燥体を加えたものは、直径０．１−６μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルを含む。実施例６重合体としてヒアルロン酸パルミトールエステル（エステル化度５０％、ＭＷ＝１５０ｋダルトン）を用い、実施例１同様に作業する。水に凍結乾燥体を再懸濁したものは、直径０．３−８μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルを含む。実施例７重合体としてヒアルロン酸ペンチルエステルの変わりにヒアウロン酸ドデシルエステル（エステル化度７５％、ＭＷ＝５０ｋダルトン）を用い、実施例１同様に作業する。０．９％ｉｇｅｎＮａＣｌ−液に凍結乾燥体を再懸濁したものは、直径０．３−７μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルをが含む。実施例８３．０ｇのパルミトイルデキサタン（置換度３５％、ＭＷ＝１０−１２ｋダルトン）を４０ｍｌの塩化メチレン／酢酸イソプロピル（容積比２：１）溶解する。過フルオロペンタン１０ｍｌをＵｌｔｒａｕｒｒａｘ［１分当たり１００００回転（ＵＰＭ）］を用いて２分間ポリマー溶媒中に分散させる。得られた（Ｏ／Ｏ）−エマルジョンを４００ｍｌの２％ＰＶＡ−液に加え、０℃に置いて、攪拌装置（ＤｉｓｐｅｒｍａｔＦＴ、ＶＭＡ−ＧｅｔｚｍａｎｎＧｍｂＨ）を用いて３０分間１０００ＵＰＭで分散させる。（Ｏ／Ｏ／Ｗ））エマルジョンを３首フラスコに攪拌し（３００ＵＰＭ）ながらいれ、３時間２０℃でＮ２を通気し、真空下において溶媒を飛ばす。さらに懸濁液を適当な強さで限外濾過して、残った溶媒液はそのままにして、懸濁液量を最小量にし（５０ｍｌ）、この懸濁液に医薬品として許容される骨格保護剤を加えて凍結乾燥する。凍結乾燥体が再懸濁された水には直径が０．１から８μｍのマイクロパーティクルが含まれており、試験管内での後方散乱定数は発信周波数５ＭＨｚでα_s＝２．０×１０^-1（ｄＢ／ｃｍ）であり、粒子濃度はｃ＝４．０×１０⁶粒子／ｍｌであった。実施例９重合体として３．０ｇの酒石酸モノ−Ｎ，Ｎ−ビス（オクタデシル）アミンデキストラン（置換度２０％；ＭＷ＝８ｋダルトン）を、溶媒として４０ｍｌ塩化メチレンを用いて実施例（８）と同様に作業した。水に凍結乾燥体を再懸濁したものには、直径０．１から６μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルが含まれている。実施例１０重合体として３．０ｇのパルミトイルプルラン（置換度３０％；ＭＷ＝５１ｋダルトン）を用いて実施例（８）と同様に作業した。０．９％ｉｇｅｎＮａＣｌ液に凍結乾燥体を再懸濁したものには、直径０．１ら８μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルが含まれている。実施例１１重合体として３．０ｇのパルミトイルアミロペクチン（置換度３０％；ＭＷ＝１１２ｋダルトン）を用い、溶媒液として４０ｍｌの塩化メチレンを用いて実施例（８）と同様に作業した。５．５％ｉｇｅｎマンニトール液に凍結乾燥体を再懸濁したものには、直径０．３から７μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルが含まれている。実施例１２重合体として３．０ｇのパルミトイルアミロース（置換度３０％；ＭＷ＝１００ｋダルトン）を用い、溶媒液として４０ｍｌの塩化メチレン／プロピル蟻酸塩（容積比２：１）を用いて実施例（１１）と同様に作業した。水に凍結乾燥体を再懸濁したものには、直径０．１から７μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルが含まれている。実施例１３重合体として３．０ｇの置換度３５％のパルミトイルマンナンを用いて実施例（１１）と同様に作業した。水に凍結乾燥体を再懸濁したものには、直径０．１から７μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルが含まれている。実施例１４重合体として３．０ｇの置換度３５％のパルミトイルキトサンを用いて実施例（１１）と同様に作業した。０．９％ｉｇｅｎＮａＣｌ液に凍結乾燥体を再懸濁したものには、直径０．１から７μｍの超音波活性型のマイクロパーティクルが含まれている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者タック，ヨハネスドイツ連邦共和国，デー―14197 ベルリン，サルスアンデルベク 42

Claims

【特許請求の範囲】１．疎水性多糖類と体温にてガス形成する成分よりなる超音波診断薬の製造のためのマイクロパーティクル。２．疎水性多糖類がヒアルロン酸、デキストラン、プルラン、アミロペクチン、アミロース、マンナンならびに／もしくはキトサンの誘導体であり、官能基がプロピル−、イソプロピル−、イソブチル−，ペンチル−、イソペンチル−、ヘキシル−、オクチル−、デシル−、ドデシル−、パルミトイル−、ステアリノイル−、ラウリル−、および／もしくはベンジル基により全てもしくは一部がエステル化あるいはエーテル過されることを特徴とする請求項１のマイクロパーティクル。３．多糖類の官能基の３０から１００％がエステル化もしくはエーテル化されていることを特徴とする請求項１もしくは２のマイクロパーティクル。４．疎水性多糖類の分子量が１０−２５０キロダルトンであるいことを特徴とする請求項１から３のマイクロパーティクル。５．パーティクルの平均直径が５００ｎｍから１０μｍの間であることを特徴とする請求項１から４のマイクロパーティクル。６．体温で気体を形成する成分として、空気、窒素、ならびに希ガスであること特徴とする請求項１から５のマイクロパーティクル。７．気体形成成分が過フルオロ化合物である請求項１から６のマイクロパーティクル。８．過フルオロ化合物が過フルオロペンタン、過フルオロヘキサン、過フルオロ−１，３−ジメチルシクロヘキサン、過フルオロシクロヘキサン、過フルオロデカリン、ならびに／もしくは過フルオロエーテルであることを特徴とする請求項７のマイクロパーティクル。９．疎水性多糖類としてヒアルロン酸ベンジルエステル、ヒアルロン酸ペンチルエステル、ヒアルロン酸パルミトイルエステル、ヒアルロン酸ドデシルエステル、パルミトイルデキスタン、酒石酸モノ−Ｎ，Ｎ−ビス（オクタデシル）アミンデキストラン、パルミトイルプルラン、パルミトイルアミロペクチン、パルミトイルアミロース、パルミトイルマンナン、あるいはパルミトイルキトサンを用いることを特徴とする請求項１から８のマイクロパーティクル。１０．請求項１から９のマイクロパーティクルが、生理学的に利用可能な液性懸濁溶媒に場合によっては医薬技術分野に一般的に用いられる添加物と共に含まれている超音波造影剤。１１．生理学的に利用可能な懸濁溶媒が、ポリソルビン酸、多糖、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒｅ^R、Ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅ^R、ならびにポリビニルピロリドン、サッカロースモノ−あるいはジエステルおよび／あるいは生理学的に利用可能あ多価アルコールのグループより選択される表面活性剤を含むこともある水、１種類以上の塩の水溶液、単糖あるいは２糖類の水溶液である請求項１０の超音波造影剤。１２．次のものより成るマイクロパーティクルと気体を含む超音波造影剤の製造用キットａ）無菌条件下に内容物を取り出すことが可能な栓を持ち、水性懸濁溶媒で満たされた第一の容器、ｂ）無菌条件下に懸濁溶媒を加えることが可能な栓を持ち、請求項１から９のいずれかのマイクロパーティクルと、該マイクロパーティクルに含まれているものと同一の気体もしくは混合物で満たされ、その用量が第一の容器の懸濁溶媒を完全にこの容器に入れることができるだけの大きさを持っている第二の容器。１３．マイクロパーティクルを請求項１から９のマイクロパーティクルを生理学的に利用可能な担体液を加え、均一な懸濁液になるまで振とうすることを特徴とする、超音波造影剤用のマイクロパーティクルと気体を含有する造影剤の製造方法。１４．重合体、ならびに場合によっては表面活性剤を有機溶媒もしくは溶媒混合液中に溶解し、当該溶液中に過フルオロ化合物もしくは水を分散させ、さらに該分散体を必要な場合には表面活性剤が含まれることもある水に加え、さらに分散し、該溶媒あるいは溶媒混合液を通気あるいは場合によっては真空下に置いて取り除き、さらに残った懸濁液に医薬品として利用可能な骨格保護剤を混合し凍結乾燥することを特徴とする請求項１から９のマイクロパーティクル製造方法。