JP2000505476A - 鎮痙性鏡像異性アミノ酸誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、式（Ｉ）（ここでＡｒは無置換であっても少なくとも１つのハロ基で置換されていてもよいフェニルであり；Ｑは低級アルコキシであり、及びＱ₁はメチルである）における不斉炭素に関してＲ配置にある化合物；それらを含む医薬組成物及び動物のＣＮＳ障害の治療におけるそれらの使用に関するものである。

Description

【発明の詳細な説明】 鎮痙性鏡像異性アミノ酸誘導体発明の技術分野 本発明は、癲癇及び他のＣＮＳ障害の治療において有用な新規鏡像異性化合物 及び医薬組成物に関する。発明の背景 抗痙攣薬の主な用途は、癲癇又は関連中枢神経系障害に関わる発作の制御及び 予防である。癲癇とは、脳における発作性過剰ニューロン放電によって生じる多 くの型の再発性の発作を指す；２つの主な一般化された発作は、筋クローヌス性 のひきつり、無動性発作、一時的な意識の喪失に関連するが痙攣は伴わない小発 作；及び意識の喪失を伴う連続する一連の発作及び痙攣として顕在する大発作で ある。 このような障害に対する治療の頼みの綱は、長期間の一貫した抗痙攣薬の投与 である。使用されている薬物の大部分は、おそらくは中枢神経系のニューロン、 グリア細胞又はその両者に対してそれらの作用を発揮する弱酸である。これらの 化合物のほとんどは、少なくとも１つのアミド単位、及びフェニル基もしくは環 系の一部として存在する１以上のベンゼン環の存在を特徴とする。 抗痙攣薬の開発には多くの注目が集められてきており、 今日では多くのそのような薬物が知られている。例えば、フェニトインのような ヒダントインは、一般化された発作及び全ての形態の部分的発作の制御において 有用である。トリメタジオン及びパラメタジオンのようなオキサゾリジンジオン は、非痙攣性発作の治療において用いられる。フェナセミド、フェニルアセチル 尿素が、今日用いられている最もよく知られた抗痙攣薬の１つであるが、一方で 、近年ではジアゼピン及びピペラジンの研究に多くの注目が注がれている。例え ば、Ａｌｌｇｅｉｅｒらの米国特許４，００２，７６４号及び４，１７８，３７ ８号には、癲癇及び他の神経障害治療において有用なエステル化ジアゼピン誘導 体が開示されている。Ｎａｋａｎｉｓｈｉらの米国特許３，８８７，５４３号に は、同様に抗痙攣活性及び他の抑制活性を有するチエノ［２，３−ｅ］［１，４ ］ジアゼピン化合物が記述されている。Ｈｅｃｋｅｎｄｏｒｎらの米国特許４， ２０９，５１６号は、抗痙攣活性を示し、かつ癲癇並びに緊張及び動揺状態の治 療に有用であるトリアゾール誘導体に関する。Ｆｉｓｈらの米国特許４，３７２ ，９７４号には、カルボン酸及び第一アミンが３つもしくは４つの単位で分離さ れている脂肪族アミノ酸化合物を含む医薬製剤が開示されている。これらの化合 物を酸性ｐＨ範囲で投与することは痙攣性障害の治療において有用であり、これ には抗不安及び鎮静特性もある。 Ｋｏｈｎらの米国特許５，３７８，７２９号には、癲 癇及び他のＣＮＳ障害の治療において有用な中枢神経系（ＣＮＳ）活性を有する 化合物及び医薬組成物が開示されており、これは以下の一般式を有する。 Ｒは水素、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アリール、アリ ール低級アルキル、複素環、複素環低級アルキル、低級アルキル複素環、低級シ クロアルキル、低級シクロアルキル低級アルキルであり、かつＲは無置換である か、又は少なくとも１つの電子吸引基もしくは電子供与基で置換されている。 Ｒ₁は、各々無置換であるか、もしくは電子供与基もしくは電子吸引基で置換 されている、水素又は低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アリー ル低級アルキル、アリール、複素環低級アルキル、複素環、低級シクロアルキル 、低級シクロアルキル低級アルキルであり、並びに Ｒ₂及びＲ₃は独立に水素、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、 アリール低級アルキル、アリール、複素環、複素環低級アルキル、低級アルキル 複素環、低級シクロアルキル、低級シクロアルキル低級アルキル、又はＺ−Ｙで あり、ここでＲ₂及びＲ₃は無置換であっても少なくとも１つの電子吸引基もしく は電子供与基で置 換されていてもよく； ＺはＯ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）_a、ＮＲ₄、ＰＲ₄又は化学結合であり； Ｙは水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、低級アルケニル 、低級アルキニル、ハロ、複素環又は複素環低級アルキルであり、かつＹは無置 換であっても電子供与基もしくは電子吸引基で置換されていてもよく、ただしＹ がハロである場合はＺは化学結合であり、 ＺＹが一緒になったものはＮＲ₄ＮＲ₅Ｒ₇、ＮＲ₄ＯＲ₅、ＯＮＲ₄Ｒ₇、ＯＰＲ₄ Ｒ₅、ＰＲ₄ＯＲ₅、ＳＮＲ₄Ｒ₇、ＮＲ₄ＳＲ₇、ＳＰＲ₄Ｒ₅、ＰＲ₄ＳＲ₇、ＮＲ₄Ｐ Ｒ₅Ｒ₆、ＰＲ₄ＮＲ₅Ｒ₇、 であり、 Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は独立に水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アル キル、低級アルケニル又は低級アルキニルであり、ここでＲ₄、Ｒ₅及びＲ₆は無 置換であっても電子吸引基もしくは電子供与基で置換されていてもよく、 Ｒ₇はＲ₆、ＣＯＯＲ₈又はＣＯＲ₈であり、 Ｒ₈は水素、低級アルキル、又はアリール低級アルキルであり、アリール又は アルキル基は無置換であっても電子吸引基もしくは電子供与基で置換されていて もよく、 さらに ｎは１〜４であり、並びに ａは１〜３である。 残念なことに、多くの利用可能な薬物療法薬が存在するにも関わらず、癲癇又 は関連疾患を患うかなりのパーセンテージの人々が、充分に管理されていない。 さらに、現在利用可能な薬物で総合的な発作の制御を達成することが可能である ものはなく、大部分は攪乱性の副作用を有する。繰り返し投与する際、急性投与 では明らかではない毒性が現れることがある。習慣的な投与を必要とする薬物の 多くが、最終的に、例えば肝臓の酵素の誘発あるいは反応性種を生じ得る酸化的 代謝を含むよけいな負担を肝臓にかけるため、多くの抗痙攣薬が肝毒性に関連付 けられている。 この領域において、特には長期治療（習慣的投与）のための、より良好で、か つより有効な抗痙攣薬を見出す研究が続けられている。高い薬理学的活性を有し 、副作用が最小限であり、かつ治療を受ける動物に対して比較的非毒性で安全な ものが理想的な薬物であることは明らかである。より具体的には、理想的な抗痙 攣薬は以下の４つの基準を満たすものである：（１）高い抗痙攣活性（低いＥＤ₅₀ で表される）を有し；（２）その効力に比して神経学的毒性（半毒性用量（Ｔ Ｄ₅₀）で表される）が最小限であり；（３）不所望の効果と所望の効果とを生じ るのに必要な薬物の用量間の関係を示し、かつ半毒 性用量と半有効用量との比（ＴＤ₅₀／ＥＤ₅₀）として測定される最大防御指数（ 時折、選択性又は安全性の限界として知られる）を有し；及び（４）その効力に 比して半致死用量（ＬＤ₅₀）で評価すると測定で比較的安全であり、かつ治療を 受ける動物に対して非毒性であって、例えば、高濃度であっても、特にその薬物 の長期の習慣的投与の間、治療を受ける残りの動物、その臓器、血液、その身体 的機能等に対する副作用が最小限である。したがって、例えば、これは肝毒性が 最小限であり、すなわちそれがほとんどないか、もしくは全くない。動物は、あ る程度低水準の毒性には耐性をもちうるため、短期間の、もしくは急性の抗痙攣 薬の投与においては重大ではないが、上に概説される第４の基準は、長期間にわ たって（習慣的投与）、又は高用量で投与される抗痙攣薬には極めて重要である 。これは、特に習慣的な投薬が必要とされる場合、どの抗痙攣薬を患者に投与す るのかを決定する上で最も重要な因子であり得る。したがって、高い抗痙攣活性 を有し、神経学的毒性が最小限であり、かつ最大Ｐ．Ｉ．（防御指数）を有する 抗痙攣薬が、不幸なことに、高水準の投与を繰り返した際に現れるこのような毒 性を示す可能性がある。このような場合、その薬物の急性投薬を考慮することが できるが、それが抗痙攣薬の習慣的投与を必要とする治療措置で用いられること はない。実際、抗痙攣薬が長期間の治療措置において繰り返し投薬することを必 要とする場合、医師は、それが 動物に対して比較的低い毒性を示すのであれば、第２の抗痙攣薬よりも活性が弱 い可能性がある抗痙攣薬を処方するであろう。４つの基準全てを満たす抗痙攣薬 は非常に稀である。 しかしながら、本発明者は、一般に効力があり、神経学的毒性が最小限であり 、高い防御指数を有し、かつ複数回の投薬の際に肝臓を含む身体臓器に対して比 較的非毒性である化合物の群を見出している。発明の概要 したがって、本発明は、下記式を有するＲ配置のＮ−ベンジル−２−アセトア ミドプロピオンアミド誘導体に関するものである。 （ここで、 Ａｒはアリールであり、無置換であってもハロ置換されていてもよく； Ｑは低級アルコキシであり；及び Ｑ₁はＣＨ₃である。） 本発明は、この式Ｉの化合物を医薬組成物において用いることを意図している 。さらに、有効量の本発明の化合物をそれらの薬学的に許容し得る形態で投与す るによ り、癲癇、神経性の不安、精神病、不眠、及び他の関連中枢神経障害の治療のた めの優れた措置が提供される。 これらの薬物は高い抗痙攣性活性を示し、神経学的毒性が最小であり、高いＰ ．Ｉ．を有し、かつ毒性が最小である。これらの抗痙攣薬は、患者への急性の投 薬、及び特にはそれらの習慣的な投薬を必要とする治療措置に用いられる。 以下に示されるように、本発明の化合物は肝臓に対する作用が最小であり、こ れは他の抗痙攣性化合物と対照的である。発明の詳細な説明 ここにおいて、 “アルコキシ”という語は、酸素架橋を介して主鎖に結合す るＯ−アルキル基を指し、アルキルは上に定義される通りである。アルコキシ基 は、１ないし６個の炭素原子、より好ましくは１ないし３個の炭素原子を有する 低級アルコキシ基である。最も好ましいアルコキシ基はプロポキシ、イソプロポ キシ、エトキシ及び、とりわけ、メトキシである。 “アリール”という語は、単独で、もしくは組み合わせて用いられる場合、無 置換であってもハロ置換されていてもよいフェニル基を指す。 ハロという語には、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード等が含まれる。好まし いハロはフルオロである。 式Ｉの化合物におけるＱは、１〜３個の炭素原子を有 するアルコキシであることが好ましい。最も好ましいアルコキシ基は、プロポキ シ、イソプロポキシ、エトキシ及び、とりわけ、メトキシである。 ここで定義されるように、Ａｒはフェニルであり、これは、無置換であっても 置換されていてもよい。このアリール基、すなわちフェニルは無置換であるか、 もしくは唯一のハロ基で置換されていることが最も好ましい。置換されている場 合には、そのハロ置換基がパラもしくはメタ位にあることがより好ましい。この フェニル基が無置換であることがさらに好ましい。 本発明の化合物の例には： （Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３−メトキシプロピオンアミド、 （Ｒ）−Ｎ−（３−フルオロベンジル）−２−アセトアミド−３−メトキシプ ロピオンアミド、 （Ｒ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）−２−アセトアミド−３−メトキシプ ロピオンアミド、 （Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３−エトキシプロピオンアミド が含まれる。 式Ｉにおいてアスタリスクで示されるように、本発明の化合物は少なくとも１ つの不斉炭素を含む。このアスタリスクが付いた不斉炭素の立体化学は、Ｒ配置 である。本発明者は、アスタリスクが付いた不斉炭素の位置でのＲ立体異性体が 、対応するＳ鏡像異性体又はそれらのラ セミ混合物よりも非常に有効であることを見出している。 本発明の化合物は、実質的に純粋、すなわち、実質的に不純物を含まないこと が好ましい。本発明の化台物は少なくとも７５％（ｗ／ｗ）の純度、より好まし くは約９０％（ｗ／ｗ）を上回る純度、最も好ましくは約９５％（ｗ／ｗ）を上 回る純度であることが最も好ましい。 また、本発明の化合物は、実質的に鏡像異性的に純粋、すなわち、対応するＳ 異性体を実質的に含まないことが好ましい。本発明の化合物は少なくとも９０％ （ｗ／ｗ）のＲ立体異性体を含むことが好ましく、約９５％（ｗ／ｗ）を上回る ものがＲ立体異性体であることが最も好ましい。したがって、本発明では、最大 で約１０％（ｗ／ｗ）のＳ異性体、より好ましくは約５％（ｗ／ｗ）未満のＳ異 性体を含む化合物が意図されている。 Ｒ体である本発明の化合物は、市販の出発物質を用いて当該技術分野において 認められている方法により調製される。 例示的な手順を、下記反応図式１で概略説明する。 反応図式１ Ｄセリン分子（１）を、アシル化条件下で、酸性メタノールのようなアルコー ルでエステル化して対応するエステル（２）を得る。２を、アシル化条件下で、 ベンジルアミンのようなＡｒＣＨ₂ＮＨ₂と反応させて、対応するアミド（３）を 形成する。遊離アミノ基をＱ₁Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨのアシル化誘導体、例えば、酢 酸、又は酢酸の低級アルキルエステル、又は無水酢酸でアシル化することにより 、ヒドロキシメチル誘導体、例えば、 を得る。４のエナンチオ純度を、融点、旋光度及びＲ−配置の有機酸、例えばＲ （−）−マンデル酸を添加した際の¹ＨＮＭＲなどの、当該技術分野において公 知の技術により決定した。４の結晶化をそれらの所望のエナンチオ純度が達成さ れるまで繰り返した。４の生成物を、ウィリアムソン(Williamson)条件下で、塩 基（例えば、Ａｇ₂Ｏ）の存在下において、ＱＸ（ここで、Ｑは上に定義される 通りであり、ＸはＯＴｓ、ＯＭｓ、又はハロゲン化物、例えば、ＣＨ₃Ｉのよう な良好な脱離基である）と反応させてエーテルに変換して、式Ｉを有する生成物 （５）を形成する。 別の変形を反応図式２に図示する。 反応図式２ 例えば、Ｄ−セリン（１）から開始して、酢酸中で無水酢酸のような酢酸のア シル化誘導体で処理することにより対応するアミド６が得られ、次いで、これを 、Ａｎ ｄｅｒｓｏｎらによってＪＡＣＳ、１９６７、８９、５０１２−５０１７（その 内容は参照することによりここに組み込まれる）に記述された混合無水物カップ リング反応条件下においてＡｒＣＨ₂ＮＨ₂と反応させて、下記式の対応化合物 例えば７、を得る。このＲ−生成物を、ウィリアムソン条件下の塩基、例えばＡ ｇ₂Ｏ中のヨウ化メチルの存在下においてアルキル化することにより、式Ｉの生 成物（８）を得る。 代わりの経路を、反応図式で示す。 反応図式３ Ｄセリン（１）を、標準的な技術により、当該技術分野において公知のＮ−保 護基で保護する。したがって、例えば、これを塩化カルボベンゾキシ（ＣＢＺ− ｃ１、べンジルクロロホルメート）と反応させ、Ｎ−保護ＣＢＺ−Ｄ−セリン付 加物９を生成させる。この保護セリン付加物を、ウィリアムソン条件下で、塩基 （例えば、Ａｇ₂Ｏ）の存在下においてＱＸ（Ｑ及びＸは上で定義されている； 例えば、ＣＨ₃Ｉ）と反応させてエーテル１０を形成することにより、対応する エーテルに変換する。これらの条件下で、酸もエステル化される。続いて、１０ のエステル基を加水分解し、アミド結合方法論（例えば、混合無水物１，１−カ ルボニルジイミダゾール）を用いてＡｒＣＨ₂ＮＨ₂とアミド結合させて、アミド１２ を得ることができる。Ｎ−保護基を脱保護することにより遊離アミン１３が 得られ、次に、これを塩基（例えば、ピリジン）中で無水酢酸のようなアシル化 剤と反応させて、生成物（Ｒ）−８を得る。 必要であれば、上記手順のいずれかにおいて、当該技術分野において公知の標 準技術、例えば、当該技術分野において公知の、標準キラル支持体を用いるキラ ルクロマトグラフィーによって、Ｓ鏡像異性体をＲ鏡像異性体からさらに分離す ることにより、生成物の光学純度を高めることができる。 あるいは、上記手順のいずれかにおいて、ラセミＤセリンを出発物質として用 いることができる。上に概説さ れた反応図式のいずれかにおける手順に従うことによりラセミ混合物を得、これ をキラルクロマトグラフィーのような当該技術分野において公知の標準技術によ って、Ｒ異性体に分解することができる。 本発明の治療用組成物及び化合物の活性成分は、１日当たりの体重キログラム 当たり約１ｍｇないし約１００ｍｇの範囲の量で投与された場合、優れた抗痙攣 活性を示す。この投薬措置は、最適な治療応答が得られるように医師が調整する ことができる。例えば、分割した用量を１日に数回投与してもよいし、治療状況 の緊急性の指標に応じてこの用量を比例的に減少させてもよい。はっきりしてい る実際上の利点は、都合の良い方法、例えば、経口、静脈内（水溶性である場合 ）、筋肉内又は皮下経路によって活性化合物を投与することができる点である。 この活性化合物は、例えば不活性希釈剤もしくは吸収可能な可食性担体と共に 経口投与することが可能であり、又はハードもしくはソフトシェルゼラチンカプ セルに封入することができ、又は圧縮して錠剤にすることができ、又は規定食の 食物に直接含めることができる。経口治療投与については、活性化合物を賦形剤 と併せて摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁 液、シロップ、ウェハー等の形態で用いることができる。このような組成物及び 調製品は、少なくとも１％の活性化合物を含むべきである。もちろん、この組成 物及び調製品のパーセンテージは変動し、その単位重量の 約５％ないし約８０％であることが好都合である。このような治療上有用な組成 物における活性化合物の量とは、適切な投与量が得られるような量である。本発 明による好ましい組成物又は調製品は、経口剤形が約５ないし１０００ｍｇの活 性化合物を含むように調製される。 また、錠剤、トローチ、ピル、カプセル等は以下のものを含んでいてもよい： 結合剤、例えば、トラガカントゴム、アカシア、コーンスターチもしくはゼラチ ン；賦形剤、例えば、リン酸二カルシウム；崩壊剤、例えば、コーンスターチ、 ジャガイモデンプン、アルギン酸等；潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウ ム；及び甘味料、例えば、ショ糖、乳糖もしくはサッカリンを添加することが可 能であり、又は着香料、例えば、ペパーミント、冬緑油、もしくはチェリー着香 料を加えてもよい。剤形がカプセルである場合、上述の型の物質に加えて、液状 担体を含めることができる。様々な他の物質が、コーティング剤として、又はそ の剤形の物理的形態を別の形で改変するために存在していてもよい。例えば、錠 剤、ピル、又はカプセルをセラック、糖又はその両者でコートすることができる 。シロップ又はエリキシルは、活性化合物、甘味料としてのショ糖、保存剤とし てのメチル及びプロピルパラベン、染料並びにチェリーもしくはオレンジフレー バーのような着香料を含むことができる。もちろん、いかなる剤形の調製におい て用いられるいかなる物質であっても、薬学的に純粋であり、かつ用いら れる量において非毒性でなければならない。加えて、活性化合物は徐放性調製品 及び製剤に含めることができる。例えば、活性成分がイオン交換樹脂に結合して おり、この樹脂は自身の放出特性を変えうるように任意に拡散障壁コーティング でコートされているような徐放性剤形が意図されている。 また、活性成分は、非経口的に、又は腹腔内に投与することができる。分散液 は、グリセロール、液状ポリエチレングリコール、及びそれらの混合物中又は油 中に調製することも可能である。通常の貯蔵及び使用条件下において、これらの 調製品は微生物の成長を阻止するために保存剤を含む。 注射可能な用途に適する医薬形態には、無菌の水溶液（水溶性である場合）も しくは分散液及び無菌の注射可能な溶液もしくは分散液を即時調製するための無 菌粉末が含まれる。全ての場合において、その形態は無菌でなければならず、シ リンジ操作が容易な程度まで流動性でなければならない。また、製造及び貯蔵条 件下において安定でなければならず、かつ細菌及び真菌のような微生物の汚染作 用に抗して保存されていなければならない。その担体としては、例えば水、エタ ノール、ポリオール（例えば、グリセロール、ポリプロピレングリコール、及び 液状ポリエチレングリコール等）、それらの適切な混合物、及び植物油を含んで いる溶媒又は分散媒体を用いることができる。適正な流動性は、例えば、レシチ ン のようなコーティングの使用により、分散液の場合に必要とされる粒子サイズの 維持により、及び界面活性剤の使用により、維持することができる。様々な抗菌 剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン 酸、チメロサール等により、微生物の作用を阻止することができる。多くの場合 、等張剤、例えば、糖や塩化ナトリウムを含めることが好ましい。注射可能な組 成物の吸収を遅らせて長引かせることは、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノ ステアリン酸アルミニウムやゼラチンをその組成物に用いることにより達成でき る。 無菌の注射可能な溶液は、好ましくは、必要に応じて上に列挙される他の様々 な成分を含む適切な溶媒に必要量の活性化合物を含めた後、無菌濾過により調製 する。一般に、分散液は、塩基性分散媒体及び上に列挙されたもののなかの必要 とされる他の成分を含む無菌のビヒクルに、様々な無菌化活性成分を含めること により、調製する。無菌の注射用溶液を調製するための無菌粉末の場合、その好 ましい調製方法は、真空乾燥及び凍結乾燥技術であり、これらは活性成分にあら ゆる追加の所望成分がプラスされた粉末を、予め無菌濾過されたそれらの溶液か ら生成する。 ここでは、 “薬学的に許容し得る担体”とは、あらゆる、そして全ての溶媒 、分散媒体、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延化剤等が 含まれる。 このような媒体及び薬剤の薬学的活性物質への使用は、当該技術分野において公 知である。通常の媒体及び薬剤が活性成分に適合しない場合を除いては、治療用 組成物におけるそれらの使用が意図されている。また、補助的な活性成分をこの 組成物に含めることも可能である。 非経口組成物を、投与及び投与量の均一性を容易にする剤形に製剤化すること が、特に有利である。ここで用いられる場合の剤形とは、治療しようとする哺乳 動物被検体に対する単位投与量として適する、物理的に個別の単位を指し：各単 位は、所望の治療効果を生じるように算出された所定量の活性物質を、必要な薬 学的担体と共に含む。本発明の新規剤形の詳細は、（ａ）活性物質独自の特徴及 び達成しようとする特定の治療効果、並びに（ｂ）ここに詳細に開示されるよう に肉体の健康が損なわれているような疾患状態にある生きた被検体の疾患を治療 するための活性物質、そのような活性物質を調製する技術分野に固有の制限によ り、かつそれに応じて直接、指定される。 主要活性成分は、有効量での好適かつ有効な投与のため、薬学的に許容し得る 適切な担体と共に前述した剤形に調製される。剤形は、例えば、主要活性成分を 約５ないし約１０００ｍｇの範囲の量で含むことができる。割合で表すと、活性 成分は、一般に、単体１ｍｌ中に約１ないし約７５０ｍｇ存在する。補助活性成 分を含む組成物の場合、その投与量は、その各成分の通常の用量及び 投与方式を考慮して決定される。 そうではないとの指示がない限り、パーセンテージは重量基準である。 ここでは、低級アルキルという語は、１〜６個の炭素原子を含むアルキル基を 指し、これらは直鎖であっても分岐鎖であってもよい。 本発明をより理解するため、以下の説明及び例が参照される。 一般的な方法 融点は、トーマス・フーバー（Thomas Hoover）融点装置を用いて決定され、 補正はされていない。赤外スペクトル（ＩＲ）は、パーキン−エルマー（Perkin -Elmer）１３３０、２８３及びマットソン・ジェネシス（Mattson Genesis）分 光計で測定し、ポリスチレンの１６０１ｃｍ^-1の結合に対して校正した。吸光値 は、波数（ｃｍ^-1）で表す。プロトン（¹ＨＮＭＲ）及び炭素（¹³ＣＮＭＲ）核 磁気共鳴スペクトルは、ニコレット（Nicolet）ＮＴ−３００及びジェネラル・ エレクトリック（General Electric）ＱＥ−３００ＮＭＲ装置で測定した。化学 シフト（δ）は、Ｍｅ₄Ｓｉに対し百万分率（ｐｐｍ）で表したものであり、結 合定数（Ｊ値）はヘルツで表したものである。化学的イオン化質量スペクトルの 測定は、全て、フィネガン（Finnegan）ＭＡＴ ＴＳＱ−７０装置で行った。微 量分析は、アトランティック・マイクロラボ社 （Atlantic Microlab Inc.）（ノークロス、ジョージア）によって行われた。薄 層クロマトグラフィーは、予めコートされたシリカゲルＧＨＬＦ顕微鏡スライド （２． ５Ｘ１０ｃｍ；アナルテック（Analteck）Ｎｏ．２１５２１）で行われ た。 実施例１ （Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３− メトキシプロピオンアミド 塩酸（８．００ｇ、２１９．４ｍｍｏｌ）をメタノール（２５０ｍｌ）に加え た後、Ｄ−セリン（２０．００ｇ、１９０．３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応 溶液を還流温度で加熱し（１８時間）、ベンジルアミン（８１．６ｍｌ、７６１ ｍｍｏｌ）を添加した後、さらに１８時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、不 溶性の塩を濾過し、過剰のベンジルアミンを高真空下（クーゲルローア；Kugelr ohr）で除去した。その残留物を水（１００ｍｌ）に溶解し、生成物をＣＨＣｌ₃ （８Ｘ２００ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ₂ＳＯ₄）、溶 媒を減圧下で除去した。その残留物をＥｔ₂０（１５０ｍｌ）と共に砕き、濾過 して１０．０ｇ（２７％）の生成物Ｒ−濃縮Ｎ−ベンジル−２−アミノヒドロア クリルアミドを白色固体として得た：ｍｐ７４−７８℃；［α］_D ²³（ｃ＝１、 ＭｅＯＨ）＝−１．６゜、Ｒｆ０．３０（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）；¹ＨＮ ＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δ１．８７（ｂｒｓ、ＮＨ₂）、３．２３（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＣＨ）、３ ．３９−３．５５（ｍ、ＣＨ₂ＯＨ）、４．２８（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＮＨＣ Ｈ₂）、４．７６（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＣＨ₂ＯＨ）、７．１８−７．３２（ｍ 、５ＰｈＨ）、８．３４（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＮＨ）、¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ −ｄ₆）４１．８（ＮＨＣＨ₂）、５６．９（ＣＨ）、６４．３（ＣＨ₂ＯＨ）、 １２６．６（Ｃ₄’）、１２７．０（２Ｃ₂’又は２Ｃ₃’)、１２８．１（２Ｃ₂ ’又は２Ｃ₃’)、１３９．５（Ｃ₁’）、１７３．３（Ｃ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ、 ＭＳ（＋Ｃ１）（相対強度）、１９５（Ｍ⁺＋1、５３）、１１７（１００）、Ｍ ｒ（＋Ｃ１）１９５．１１３ ５６（Ｍ⁺＋１）（Ｃ₁₀Ｈ₁₅Ｎ₂Ｏ₂についての算 出値、１９５．１１３３５）。 Ｒ濃縮Ｎ−ベンジル−２−アミノヒドロアクリルアミド（１０．００ ｇ、51. ５ｍｍｏｌ）の撹拌塩化メチレン懸濁液（１００ｍｌ）に無水酢酸（5.８ｍｌ、 ６１．８ｍｍｌ）を添加し、その反応懸濁液を室温で撹拌した（１時間）。溶媒 を減圧下で除去して白色固体を得た。この生成物をＥｔ２０（２５０ｍｌ）と共 に摩砕して７．６０ｇ（６２％）の濃縮Ｒ−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミドヒ ドロアクリルアミドを白色固体として得た。この反応生成物をＥｔＯＨを用いて 再結晶し（２Ｘ）、３．５０ｇ（２９％）のＲ−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミ ドヒドロアクリルアミドを得た。ｍｐ１４８−１４ ９℃；［α］_D ²³（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋２２．４゜；Ｒｆ０．４０（１０％ ＭｅＯＨ −ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２９５、３０９０、２９６４、１ ６４２、１５３３、１３７６、１２８１、１０５１、７０５ｃｍ：¹ＨＮＭＲ（ ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１．８６（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．５７（ｄｄ、Ｊ＝５． ７、５．７Ｈｚ、ＣＨ₂ＯＨ）、４．２５−４．３１（ｍ、ＣＨ）、４．２７（ ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＮＨＣＨ₂）、４．９２（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＣＨ₂ＯＨ ）、７．１８−７．３２（ｍ、５ＰｈＨ）、７．９４（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、Ｎ Ｈ）、８．３８（ｔ、Ｊ＝５.７Ｈｚ、ＮＨ）。上で調製されたＲ−Ｎ−ベンジ ル−２−アセトアミドヒドロアクリルアミドのＣＤＣｌ₃溶液に過剰のＲ−（− ）マンデル酸を添加することにより、アセチルメチルプロトンに対する唯一の信 号が生じた；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）２２．７（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、４２． ０（ＣＨ₂ＮＨ）、５５．６（ＣＨ）、６１．８（ＣＨ₂ＯＨ）、１２６．７（Ｃ₄ ’）、１２７．０（２Ｃ₂'又は２Ｃ₃'）１２８．２（２Ｃ₂'又は２Ｃ₃'）、１ ３９．４（Ｃ₁'）、１６９．５（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）、１７０． ３（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ；ＭＳ（＋Ｃ１）相対強度）２３ ７（Ｍ⁺＋1、１００）、２１９（８）；Ｍｒ（＋Ｃ１）２３７．１２３８８［Ｍ⁺ ＋１］（Ｃ₁₂Ｈ₁₇Ｎ₂Ｏ₃についての算出値２３７．１２３９２）；分析値（Ｃ_{1 2} Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₃）、Ｃ、Ｈ、Ｎ。 （Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミドヒドロアクリルアミド（２．３６ｇ 、１０ｍｍｏｌ）の撹拌アセトニトリル溶液（３００ｍｌ）に、Ａｇ₂Ｏ（１１ ．５９ｇ、５０ｍｍｏｌ）及びヨウ化メチル（６．２ｍｌ、 １００ｍｍｏｌ） を室温で連続的に添加した。この反応混合物を室温で４日問撹拌した。不溶性の 塩を濾過し、溶媒を真空中で除去して白色固体を得た。その残留物をＥｔ₂Ｏ（ １００ｍｌ）を用いて濾過し、上記同定の２．２０ｇ（８８％）の生成物を得た 。 ｍｐ１４３−１４４℃；［α］_D ²³（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋１６．４゜；Ｒ ｆ０．４７（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２８９、３０８ ６、２９２３、２８７６、２８１９、１６３６、１５４７、１１３８、６９５ｃ ｍ^-1；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ２．０４（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．３８ （ｓ、ＯＣＨ₃）、３．４３（ｄｄ，Ｊ＝７．８、９．０Ｈｚ、ＣＨＨ’ＯＣＨ₃ ）、３．８２（ｄｄ、Ｊ＝４．２、９．ＯＨｚ、ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、４．４８ （ｄ、Ｊ＝６．ＯＨｚ、ＮＨＣＨ₂）、４．５１−４．５７（ｍ．ＣＨ）、６． ４４（ｂｒｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＮＨ）、６．７５（ｂｒｓ、ＮＨ）、７．２５ −７．３７（ｍ、５ＰｈＨ）。（Ｒ）−１８のＣＤＣｌ₃溶液に過剰の（Ｒ）− （−）−マンデル酸を添加することにより、アセチルメチル及びエーテルメチル プロトンに対する唯一の信号が生じた；¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣ１₃）２３．２（Ｃ （Ｏ）ＣＨ₃）、４３． ５（ＣＨ₂ＮＨ）、５２．４（ＣＨ）、５９．１（ＯＣＨ₃）、７１．７（ＣＨ₂ ＯＣＨ₃）、１２７．４（Ｃ₄'）、１２７．５（２Ｃ₂'又は２Ｃ₃'）、１２８． ７（２Ｃ₂'又は２Ｃ₃'）、１３７．９（Ｃ₁'）、１６9．９（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又は Ｃ（Ｏ）ＮＨ）、１７０．３（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ；ＭＳ （＋Ｃｌ）（相対強度）２５１（Ｍ⁺＋１、１００）、２１９（６）；Ｍｒ（＋ Ｃｌ）２５１．１３９ ７６［Ｍ⁺＋１］（Ｃ₁₃Ｈ₁₉Ｎ₂Ｏ₃についての算出値 ２５１．１３９ ５７）；分析値（Ｃ₁₃Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₃）Ｃ、Ｈ、Ｎ、 実施例２ （Ｒ）−Ｎ−べンジル−２−アセトアミド−３− メトキシプロピオンアミドの別の合成。 （ａ）（Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミドヒドロアクリルアミドの改善 された合成 Ｄ−セリン（５．２６ｇ、５０ｍｍｏｌ）の撹拌ＡｃＯＨ（２０ｍｌ）懸濁液 にＡｃ₂Ｏ（４．７ｍｌ、５０ｍｍｏｌ）を添加した後、その反応懸濁液を室温 で撹拌した（２４時間）。ＡｃＯＨを真空中で除去して油状残留物を得た後、そ の残留物にＴＨＦ（１５０ｍｌ）を添加した。このＴＨＦ懸濁液を、Ｎ₂の下で −７８℃に冷却し、４−メチルモルホリン（１１．０ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を 添加した。２分間撹拌した後、イソブチルクロロホルメート（１３．０ｍｌ、１ ００ｍｍｏｌ）を添加した。 これにより、白色固体の沈殿が生じた。この反応をさらに２分間進行させた後、 −７８℃でベンジルアミン（１０．４ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を添加した。この 反応混合物を室温で撹拌し（３０分）、４−メチルモルホリン塩酸塩を濾過した 。有機層を真空中で濃縮した。その生成物をＳｉＯ₂ゲルを用いたフラッシュカ ラムクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）により精製して、白色 固体として３．８９ｇ（３３％）を得た。ｍｐ１４７−１４８℃、[α］_D ²³（Ｃ ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋２１．７゜；¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１．８６（ｓ 、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．５７（ｄｄ、Ｊ＝５．１、５．１Ｈｚ、ＣＨ₂Ｏ） ４ ．２７−４．３１（ｍ、ＣＨ₂ＮＨ、ＣＨ）、４．９０（ｔ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、 ＯＨ）、７．２０−７．３１（ｍ、５ＰｈＨ）、７．９３、（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈ ｚ、ＮＨ）、８．３７（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、ＮＨ）。（ａ）の生成物のＣＤＣ １３溶液に過剰の（Ｒ）−（−）−マンデル酸を添加することにより、アセチル メチルプロトンに対する唯一の信号が生じた。 （ｂ）（Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３−メトキシプロピオンアミ ド ＣＨ₃ＣＮの撹拌溶液（３００ｍｌ）中の（ａ）で調製した化合物（１．４２ ｇ、６ｍｍｏｌ）に、Ａｇ₂Ｏ（６．９５ｇ、３０ｍｍｏｌ）及びヨウ化メチル （３．７ｍｌ６０ｍｍｏｌ）を連続的に添加し、室温で４日間撹拌した。不溶性 の塩を濾過し、溶媒を真空中で除去して白色 固体を得た。この白色固体をＥｔ２Ｏ（１００ｍｌ）と共に摩砕して、上記同定 の１．３０ｇ（８７％）の化合物を得た：ｍｐ１４３，-１４４℃、[α］_D ²³（ ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋１６．０゜；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ２．０４（ｓ、 Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．３８（ｓ、ＯＣＨ₃）、３．４４（ｄｄ、Ｊ＝７．５、９ ．０Ｈｚ、ＣＨＨ¹ＯＣＨ₃）、３．８１（ｄｄ、Ｊ＝４．２、９．０Ｈｚ、ＣＨ Ｈ’ＯＣＨ₃）、４．４８（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＮＨＣＨ₂）、４．５２−４． ５８（ｍ、ＣＨ）、６．４６（ｂｒｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＮＨ）、６．７８（ｂ ｒ、ｓ、ＮＨ）、７．２５−７．３７（ｍ、５ＰｈＨ）。上記同定の化合物のＣ ＤＣｌ₃溶液に過剰の（Ｒ）−（−）−マンデル酸を添加することにより、アセ チル及びエーテルメチルプロトンに対する唯一の信号が生じた。 実施例３ Ｒ−Ｎ−（３−フルオロベンジル）−２− アセトアミド−３−メトキシプロピオンアミド （ａ）Ｒ−Ｎ−（３−フルオロベンジル）−２−アセトアミド−ヒドロアクリ ルアミド 以下の量のＤ−セリン（５．２６ｇ、５０ｍｍｏｌ）、Ａｃ₂Ｏ（５．７ｍｌ ，６０ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（１１．０ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）、 イソブチルクロロホルメート（１３．０ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を用いて実施例 ２（ａ）の手順に従い、かつベンジルアミ ンの代わりに３−フルオロベンジルアミン（１１．８ｍ１、１００ｍｍｏｌ）を 用い、精製して、４．２０ｇ（３３％）の上記化合物を白色固体として得た：ｍ ｐ １３７−１３８℃；［α］_D ²³（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋２０．８゜；Ｒ_f０ ．３２（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２８２、３１０１、 ２９４４、１６３６、１５４２、１２５２、１０５０、７７９、６９０ｃｍ^-1；¹ ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆） δ１．８７（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．５６− ３．６３（ｍ、ＣＨ₂ＯＨ）、４．２９（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、ＣＨ₂ＮＨ）、４ ．２５−４．３０（ｍ、ＣＨ）、４．９５（ｔ．Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＣＨ₂ＯＨ） 、７．００−７．０９（ｍ、３ＡｒＨ）、７．２９−７．３０（ｍ、１ＡｒＨ） 、７．９７（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、ＮＨ）、８．４４（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、Ｎ Ｈ）。この生成物のＣＤＣｌ₃溶液に過剰の（Ｒ）−（−）−マンデル酸を添加 することにより、アセチルメチルプロトンに対する唯一の信号が生じた；¹³ＣＮ ＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆） ２２．７（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、４１．６（ＣＨ₂Ｎ）、 ５３．４（ＣＨ）、６１．７（ＣＨ₂ＯＨ）、１１３．３（ｄ，Ｊ_cF＝２０．０ Ｈｚ、（２Ｃ₂'又は２Ｃ₃')、１１３．６（ｄ、Ｊ_cF＝２０．７Ｈｚ、（２Ｃ₂' 又は２Ｃ₃'）、１２２．９（Ｃ₆')、１３０．１（ｄ、Ｊ_cF＝８．２Ｈｚ、Ｃ₅' ）、１４２．６（ｄ、Ｊ_cF＝７．０Ｈｚ，Ｃ₁'）、１６２．３（ｄ、Ｊ_cF＝２４ １．４Ｈｚ、Ｃ₃'）、１６９．６（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又は Ｃ（Ｏ）ＮＨ）、１７０．５（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ；ＭＳ （＋Ｃｌ）（相対強度）２５５（Ｍ⁺＋１、１００）；Ｍ_r（＋Ｃｌ） ２５５． １１３５４［Ｍ⁺＋１］（Ｃ₁₂Ｈ₁₆ＦＮ₂Ｏ₃についての算出値２５５．１１４ ５０）；分析値（Ｃ₁₂Ｈ₁₅ＦＮ₂Ｏ₃）C、Ｈ、Ｎ。 （ｂ）（Ｒ）−（Ｎ−３−フルオロベンジル）−２−アセトアミド−３−メト キシプロピオンアミド 撹拌ＣＨ₃ＣＮ溶液中の（ａ）の生成物（２．５４ｇ、１０ｍｍｏｌ）に、Ａ ｇ₂Ｏ（１１．５９ｇ、５０ｍｍｏｌ）及びＭｅＩ（６．２ｍｌ、１００ｍｍｏ ｌ）を室温で添加した。この反応混合物を室温で２日間撹拌した。不溶性の塩を 濾過し、溶媒を真空中で除去して白色固体を得、これをＥｔ₂Ｏ（１００ｍｌ） と共に摩砕して上記同定の化合物の粗生成物を得た。この生成物をＳｉＯ₂ゲル を用いたフラッシュクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）によっ てさらに精製して、２．００ｇ（７５％）の上記同定の化合物を得た：ｍｐ１５ ０−１５１℃；［α］_D ²³（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋１６．５℃；Ｒ_f０．５０（ １０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２８７、３０７２、２９２８ 、２８８３、１６３４、１５４８、１２５６、１１４２、７８５ｃｍ^-1；¹ＨＮ ＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ２．０５（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．４０（ｓ、ＯＣＨ₃ ）、３．４４−３．４７（ｍ、ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、３．８１−３．８５（ｍ、 ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、４．４１−４．５０（ｍ、ＮＨＣＨ₂）、４．５３−４．５ ９（ｍ、ＣＨ）、６．４２（ｂｒｓ、ＮＨ）、 ６．８１（ｂｒｓ、ＮＨ）、６ ．９３−７．０５（ｍ、３ＰｈＨ）、７．２６−７．３１（ｍ、１ＰｈＨ）。上 記同定の化合物のＣＤＣｌ₃溶液に過剰の（Ｒ）−（−）−マンデル酸を添加す ることにより、アセチルメチルプロトン及びエーテルメチルプロトンに対する唯 一の信号が生じた；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆） ２２．８（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、４２．７（ＣＨ₂Ｎ）、５２．６（ＣＨ）、５８ ．９（ＯＣＨ₃）、７２．０（ＣＨ₂ＯＣＨ₃）、１１４．０（ｄ、Ｊ_CF＝２１． ５Ｈｚ、Ｃ_2'及びＣ_4'）、１２２．７（Ｃ_6'）、１２９．９（ｄ、Ｊ_CF＝７．７ Ｈｚ、Ｃ_5'）、１４０．６（ｄ、Ｊ_CF＝６．８Ｈｚ、Ｃ_1'）、１６２．９（ｄ、 Ｊ_CF＝２４４．４Ｈｚ、Ｃ_3'）、１７０．２（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ ）、１７０．５（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ；ＭＳ（＋Ｃｌ）（ 相対強度）２６９（Ｍ⁺＋１、１００）；Ｍｒ（＋Ｃｌ）２６９．１２９ ３１ ［Ｍ⁺＋１］（Ｃ₁₃Ｈ₁₈ＦＮ₂Ｏ₃についての算出値 ２６９．１３０１５）；分 析値（Ｃ₁₃Ｈ₁₇ＦＮ₂Ｏ₃）Ｃ、Ｈ、Ｎ。 実施例４ （Ｒ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）−２− アセトアミド−３−メトキシプロパンアミド （ａ）（Ｒ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）−２− アセトアミド−ヒドロアクリルアミド 以下の量のＤ−セリン（５．２６ｇ、５０ｍｍｏｌ）、Ａｃ₂Ｏ（５．７ｍｌ 、６０ｍｍｏｌ）、４−メチルモルホリン（１１．０ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）及 びイソブチルクロロホルメート（１３．０ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を用いて実施 例２（ａ）の手順に従い、かつベンジルアミンの代わりに４−フルオロベンジル アミン（１１．８ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を用い、精製して、上記同定の化合物 を白色固体として調製した（４．０８ｇ、３２％）：ｍｐ１６９−１７０℃；［ α］_D ²³（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋１７．６°；Ｒ_f０．３１（１０％ＭｅＯＨ− ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２８９、３１０１、３０７１、２９３６、１６ ３２、１５６５、１５４３、１５０８、１２１４、１０５３、８１４ｃｍ^-1；¹ ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１．８６（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．５６（６、 Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＣＨ₂ＯＨ）、４．２５（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、ＣＨ₂ＮＨ）、 ４．２５−４．２９（ｍ、ＣＨ）、４．９１（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＣＨ₂ＯＨ ）、７．０８−７．１４（ｍ、２Ｃ_2'Ｈ）、７．２５−７．２９（ｍ、２Ｃ_3'Ｈ ）、７．９３（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、ＮＨ）、８．３９（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、 ＮＨ）。上記同定の化合物のＣＤＣｌ₃溶液に過剰の（Ｒ）−（−）−マンデル 酸を添加することにより、アセチルメチルプロトンに対する唯一の信号が生じた ；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）２２．７（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、４１．３（ＣＨ₂ Ｎ）、５５．３（ＣＨ）、６１．７（ＣＨ₂ＯＨ）、１１４．８（ｄ、Ｊ_CF＝２ １．８Ｈｚ、２Ｃ_3'）、１２８．９（ｄ、Ｊ_CF＝８．０Ｈｚ、２Ｃ_2'）、１３５ ．６（Ｃ_1'）、１６１．１（ｄ、Ｊ_CF＝２４０．１Ｈｚ、Ｃ_4'）、１６９．４（ Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）、１７０．３（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）Ｎ Ｈ）ｐｐｍ；ＭＳ（＋Ｃｌ）（相対強度）２５５（Ｍ⁺＋１、１００）；Ｍ_r（＋ Ｃｌ）２５５．１１３ ６０［Ｍ⁺＋１］（Ｃ₁₂Ｈ₁₆ＦＮ₂Ｏ₃についての算出値 ２５５.１１４ ５０）；分析値（Ｃ₁₂Ｈ₁₅ＦＮ₂Ｏ₃・０．２Ｈ₂Ｏ）Ｃ、Ｈ、 Ｎ。 （ｂ）（Ｒ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）−２−アセトアミド−３−メト キシプロパンアミド 実施例３（ｂ）の手順に従い、撹拌ＣＨ₃ＣＮ溶液（３００ｍｌ）中の実施例 ４（ａ）の生成物（２．５４ｇ、１０ｍｍｏｌ）にＡｇ₂Ｏ（１１．５９ｇ、５ ０ｍｍｏｌ）及びＭｅＩ（６．２ｍｌ、１００ｍｍｏｌ）を連続的に添加した後 、７日間撹拌した。不溶性の塩を濾過し、溶媒を真空中で除去して白色固体を得 た。この白色固体をＥｔ₂Ｏ（１００ｍｌ）と共に摩砕して粗生成物を得た。こ の粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃ ）によってさらに精製して２．００ｇ（７５％）の上記生成物を得た；ｍｐ： １４４−１４５℃；［α］_D ²³（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝＋１２．０°、；Ｒ_f０． ５２（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２８１、３１０２、３ ０７２、２９５ ９、１６３２、１５４７、１５１３、１２２３、１１００ｃｍ^-1；¹ＨＮＭＲ（ ＣＤＣｌ₃）δ２．０４（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．３８（ｓ、ＯＣＨ₃）、３ ．３９−３．４６（ｍ、ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、３．８０−３．８４（ｍ、ＣＨＨ ’ＯＣＨ₃）、４．４４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＣＨ₂ＮＨ）、４．４８− ４．５６（ｍ、ＣＨ）、６．４２（ｂｒ ｓ、ＮＨ） ６．７６（ｂｒ ｓ、Ｎ Ｈ）、６．９９−７．０５（ｍ、２ＰｈＨ）、７．２１−７．３１（ｍ、２Ｐｈ Ｈ）。上記同定の生成物のＣＤＣｌ₃溶液に過剰の（Ｒ）−（−）−マンデル酸 を添加することにより、アセチルメチルプロトン及びエーテルメチルプロトンに 対する唯一の信号が生じた；¹¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）２２．９（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃ ）、４２．６（ＣＨ₂Ｎ）、５２．５（ＣＨ）、５８．９（ＯＣＨ₃）、７２． ０（ＣＨ₂ＯＣＨ₃）、１１５．３（ｄ、Ｊ_CF＝２２．０Ｈｚ、２Ｃ_3'）、１２９ ．０（ｄ、Ｊ_CF＝６．９Ｈｚ、２Ｃ₂’）、１３３．７（Ｃ_1'）、１６１．９（ ｄ、Ｊ_CF＝２４５．３Ｈｚ、Ｃ_4'）、１７０．１（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ） ＮＨ）、１７０．４（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ；ＭＳ（＋Ｃｌ ）（相対強度）２６９（Ｍ⁺＋１、１００）；Ｍ_r（＋Ｃｌ）２６９．１２９ ６ ６［Ｍ⁺＋１］（Ｃ₁₃Ｈ₁₈ＦＮ₂Ｏ₃についての算出値 ２６９．１３０ １５） ；分析値（Ｃ₁₃Ｈ₁₇ＦＮ₂Ｏ₃）Ｃ、Ｈ、Ｎ。 実施例５ Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３− メトキシプロピオンアミド （ａ）Ｃｂｚ−（Ｄ）セリン（９） Ｄ−セリン（５ｇ）を水（８５ｍｌ）に溶解した。これにＭｇＯ（６ｇ）及び エチルエーテル（４０ｍｌ）を添加した。この混合物を氷浴中で０℃に冷却した 。この氷冷混合物に、ベンジルクロロホルメート（９５％、１１ｍｌ）を滴下し て徐々に添加した。添加が完了すると同時に、この混合物を０℃で撹拌し（２時 間）、次いで自然に室温になるまで放置した。さらに３０分間撹拌を続けた。こ の混合物を濾過し、濾液をエチルエーテル（２Ｘ２５ｍｌ）で洗浄した。水層を 分離し、氷浴で０℃に冷却した。この氷冷水層のｐＨを、５ＮのＨＣｌを用いて 、注意深く３．０に調整した。この酸性溶液を冷蔵庫内に一晩貯蔵した。白色の 結晶性固体生成物を濾過して単離し、真空中で乾燥させた。濾液を酢酸エチル（ ２Ｘ５０ｍｌ）で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を乾燥させ（Ｎａ₂ＳＯ₄ ）、濾過し、真空中で蒸発させて追加量の白色結晶性生成物を得た。得られた総 生成物は７．５１ｇ（６８％）であった：ｍｐ１１８−１２０℃。 （ｂ）メチル−２−（カルボベンジルオキシアミノ）−３−メトキシプロピオ ネート（１０） アセトニトリル（１５０ｍｌ）中の９（１．７２ｇ、７．２１ｍｍｏｌ）の溶 液にヨウ化メチル（１０．２３ ｇ、７２．１ｍｍｏｌ、４．５ｍｌ）及び酸化銀（Ｉ）（８．４ｇ、３６ｍｍｏ ｌ）を添加し、その混合物を暗所において室温で２４時間撹拌した。不溶性の塩 及び過剰の酸化銀を濾過により除去し、濾液を真空中で蒸発させて油状残留物を 得た。これをフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル及び５％ＭｅＯ Ｈ−ＣＨＣｌ₃）にかけ、純粋な１０を淡黄色油として得た（１．８１ｇ、９４ ％）：Ｒ_f（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）０．７５。 （ｃ）２−（カルボベンジルオキシアミノ）−３−メトキシプロピオン酸（１ １ ） 化合物１０（０．５８ｇ）を８０％メタノール水溶液（３．０ｍｌ）に溶解し た。この溶液に無水Ｋ₂ＣＯ₃（０．５ｇ）を添加し、その反応混合物を室温で撹 拌した（８時間）。メタノールを真空中で蒸発させ、その残留物を水（５０ｍｌ ）に懸濁させた。この水性懸濁液をエチルエーテル（２Ｘ２５ｍｌ）で洗浄した 後、５ＮのＨＣｌを用いてｐＨ３．０に酸性化した。この酸性化水相を酢酸エチ ル（３Ｘ２５ｍｌ）で抽出した。これらの酢酸エチル抽出物を合わせ、乾燥させ （Ｎａ₂ＳＯ₄）、濾過し、真空中で蒸発させて、純粋な１１を透明な粘性油とし て得た（０.５２ｇ、９５％）：Ｒ_f０．３０（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 （ｄ）Ｎ−ベンジル−２−（カルボベンジルオキシアミノ）−３−メトキシプ ロピンアミド（１２） 乾燥テトラヒドロフラン（１０ｍｌ）中の１１（０．５２ｇ、２．０４ｍｍｏ ｌ）の溶液を、ドライアイス−アセトン浴中、Ｎ₂雰囲気下で−７８℃に冷却し た。これに、乾燥シリンジにより４−メチルモルホリン（０．３４ｍｌ、３．０ ６ｍｍｏｌ）を添加した。５分間撹拌した後、乾燥シリンジを用いてイソブチル クロロホルメート（０．４ｍｌ、３．０６ｍｍｏｌ）を添加し、次いでその混合 物を５分間撹拌した。続いて、ベンジルアミン（０．３２ｍｌ、３．０６ｍｍｏ ｌ）を添加した。−７８℃で５分間撹拌した後、反応物を室温に暖め、室温で撹 拌を続けた（３０分）。この反応物から、濾過により４−メチルモルホリンの塩 酸塩を除去した。透明な濾液を真空中で蒸発させ、その残留物をエチルエーテル （５．０ｍｌ）と共に摩砕した。少量のエーテルで洗浄して風乾した後、得られ た白色の結晶性生成物を濾過により単離した（０.５５ｇ、７８％）：ｍｐ １ １２−１１４℃、Ｒ_f ０．６（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 （ｅ）Ｎ−ベンジル−２−アミノ−３−メトキシプロピンアミド（１３） メタノール（２．０ｍｌ）中の１２（１２２．８ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の 溶液に１０％Ｐｄ−Ｃ（１１ｍｇ）を添加し、この混合物を室温で、Ｈ₂ガス存 在下、７５分間撹拌した。この反応混合物にセライトを添加し、触媒を濾過によ り除去した。透明な濾液を真空中で蒸発させて、純粋な１３を透明な粘性油とし て得た（７２ｍｇ、 ９７％）：Ｒ_f０．３０（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 （ｆ）Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３−メトキシプロピオンアミド 乾燥ＴＨＦ（２．０ｍｌ）中の１３（０．２０ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）の溶液 にピリジン（０．０８６ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を添加し、次いで無水酢酸（０ ．２ｇ、１．９６ｍｍｏｌ）を滴下して添加する。この反応物を室温で１８時間 撹拌する。溶媒を真空中で蒸発させ、その残留物をフラッシュカラムクロマトグ ラフィーにより精製して、上記化合物をＲ異性体として得た。 比較例１ Ｎ−アセチル−Ｄ，L−アラニン−Ｎ’− ベンジルアミドの調製 無水酢酸（２．２０ｇ、０．０２２モル）をＤ，L−アラニン−Ｎ−ベンジル アミド（３．８０ｇ、０．０２１モル）の塩化メチレン溶液（３０ｍｌ）に徐々 に添加し、室温で撹拌した（３時間）。次いで、この混合物をＨ₂Ｏ（１５ｍｌ ）で連続的に洗浄し、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）させて真空中で濃縮した。その残留物 をＣＨ₂Ｃｌ₂から再結晶した。 収量：２．５０ｇ（５４％）。ｍｐ１３９°−１４１℃。 ¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１．２２（ｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）、１ ．８４（ｓ、３Ｈ）、４．０４ −４．５０（ｍ、３Ｈ）、７．２６（ｓ、５Ｈ）、８．１１（ｂｒｄ、Ｊ＝７． ３Ｈｚ、１Ｈ）、８．４２（ｂｒ ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ）。 ¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：１８．２、２２．４、４１．９、４８．２、 １２６．５、１２６．９、１２８．１ １３９．４、１６８．９、１７２．４ｐ ｐｍ。 ＩＲ（ＣＨＣｌ₃）３４４０、３３００、３００５、１６６０、１５１５ｃｍ^{- 1} 。 質量スペクトル（ＣＩモード）、ｍ／ｅ：２２１（Ｐ＋Ｉ）；分子量２２０． １２０８（Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₂についての算出値 ２２０．１２１２）。 比較例２及び３ Ｎ−アセチル−Ｄ及びＬ−アミノ酸−Ｎ− ベンジルアミドの調製 一般的な手順：Ｄ又はＬアミノ酸アミド（１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（ １５ｍｌ）に溶解した後、無水酢酸（１．２３ｇ、１．４０ｍｌ、１２ｍｍｏｌ ）を滴下により添加した。この溶液を室温で撹拌（１８時間）した後、濃縮して 乾燥させた。その残留物をクロロホルム／ヘキサンから結晶化する。 比較例２ Ｎ−アセチル−D−アラニン−Ｎ’−ベンジルアミド 収量：１．３６ｇ（５６％）。ｍｐ１３９°−１４１ ℃。［α］_D ²³＝＋３６．２（ｃ２．５、ＭｅＯＨ）。 ¹ＨＮＭＲ（８０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１．２５（ｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ 、３Ｈ）、１．８６（ｓ、３Ｈ）、４．０４−４．５０（ｍ、１Ｈ）、４．３０ （ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．２６（ｓ、５Ｈ）、８．０９（ｄ、Ｊ＝７ ．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．４０（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ）。 ¹³ＣＮＭＲ（８０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）：１８．３、２２．５、４２．０ 、４８．４、１２６．６、１２７．０（２Ｃ）、１２８．２（２Ｃ）、１３９． ４、１６９．２、１７２．５ｐｐｍ。 ＩＲ（ＫＢｒ）：３２９０、１６３５（ｂｒ）、１５４０、１４５５、７００ 、６９５ｃｍ^-1。 質量スペクトル、ｍ／ｅ（相対強度）：２２１（３０）、１１４（２０）、１ ０６（４０）、９１（８０）、８７（１００）、７７（５）、７２（２０）、６ ５（５）。 Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₂について算出された元素分析 ６５．４２％Ｃ；７．３４％Ｈ ；１２．７２％Ｎ。実測値 ６５．３１％Ｃ；７．２８％Ｈ；１２．６３％Ｎ。 比較例３ Ｎ−アセチル−L−アラニン−Ｎ’−ベンジルアミド 収量：１．１１ｇ（４６％）。ｍｐ １３９°−１４２℃。［α］_D ²³＝−３ ５．３（ｃ２．５、ＭｅＯＨ）。 ¹ＨＮＭＲ（８０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１．２ ３（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）、１．８６（ｓ、３Ｈ）、４．２６−４．３５ （ｍ，１Ｈ）、４．２９（ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．２２−７．３３（ ｓ、５Ｈ）、８．１０（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．４２（ｔ、Ｊ＝５． ８Ｈｚ、１Ｈ）。 ¹³ＣＮＭＲ（８０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）：１８．３、２２．６、４２．０ 、４８．４、１２６．７、１２７．０（２Ｃ）、１２８．３（２Ｃ） １３９． ５、１６９．２、１７２．６ｐｐｍ。 ＩＲ（ＫＢｒ）：３２９０、１６３５（ｂｒ）、１５４５、１４５０、７００ 、６９５ｃｍ^-1。 質量スペクトル、ｍ／ｅ（相対強度）：２２１（４０）、１１４（４０）、１ ０６（８０）、１０６（８０）、９１（７５）、８７（１００）、７７（５）、 ７２（１５）、６５（５）。 Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₂について算出された元素分析 ６５．４２％ Ｃ；７．３４％ Ｈ；１２．７２％ Ｎ。実測値 ６５．５８％Ｃ；７．３２％Ｈ；１２．４３ ％Ｎ。 比較例４ Ｄ，Ｌ−２−アセトアミド−Ｎ−ベンジル−２− メトキシアセトアミドの調製 メチル−２−アセトアミド−２−メトキシアセテート（８．７３ｇ、５４ｍｍ ｏｌ）のメタノール溶液（１８０ｍｌ）にベンジルアミン（８．６８ｇ、８．８ ０ｍｌ、 ８１ｍｍｏｌ）を迅速に添加した後、その混合物を５０℃で撹拌した（３日）。 この撹拌期間中にベージュ色の沈殿が生じる。溶媒を真空中で除去し、生じた沈 殿をテトラヒドロフラン（２Ｘ）から再結晶して、７．６７ｇ（３２％）の所望 の生成物を結晶状態で得た：Ｒ_f０．３５（９５：５ クロロホルム／メタノー ル）。 ｍｐ１４５−１４６℃。 ¹ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）：δ２．０６（ｓ、ＣＨ₃ＣＯ）、３ ．３７（２、ＣＨ₃Ｏ）、４．４０−４．３５（ｍ、ＣＨ₂）、５．５２（ｄ、Ｊ ＝８．７Ｈｚ、ＣＨ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、ＮＨ）、７．２０−７ ．４０（ｍ、Ｐｈ、ＮＨ）。 ¹³ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）：２３．０３（ＣＨ₃ＣＯ）、４３． ５１（ＣＨ₂）、５５．８４（ＣＨ₃Ｏ）、７８．９４（ＣＨ）、１２７．６２（ Ｃ_4'）、１２７．７０（２Ｃ_2' 又は２Ｃ_3'）、１２８．７０（２Ｃ_2' 又は２ Ｃ_3'）、１３７．４５（Ｃ_1'）、１６６．９１（ＣＯＣＨ₃）、１７１．５７（ ＣＯＮＨ）ｐｐｍ。 ＩＲ（ＫＢｒ）：１２６０、１８２５（ｂｒ）、１５５０、１５０５、１４３ ５、１３９０、１３７０、１２３０、１１２０、１０５０ ９３５、８９０、６ ９０ｃｍ^-1。 質量スペクトル、ｍ／ｅ（相対強度）：２３７（１）、２０５（２）、１７７ （２）、１６３（４）、１４６ （１）、１３４（１）、１２１（２）、１０６（２６）、１０２（９８）、９１ （９５）、７７（１３）、６１（１００）。Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₃について算出された 元素分析 ６１．００％Ｃ；６．８３％Ｈ；１１．８６％Ｎ。実測値 ６０．９ １％Ｃ；６．８５％Ｈ；１1．６６％Ｎ。 比較例５−７ 無置換及び置換α−アセトアミド−Ｎ−ベンジル −２−フランアセトアミドの合成 一般的な手順。４−メチルモルホリン（１当量）を乾燥テトラヒドロフラン（ ７５ｍｌ／１０ｍｍｏｌ）中のα−アセトアミド−２−フラン酢酸（１当量）の 溶液に、Ｎ₂下、−１０ないし−１５℃で添加した。撹拌（２分）した後、イソ ブチルクロロホルメート（１当量）を添加した。これにより、白色固体の沈殿が 生じた。この反応をさらに２分間進行させた後、置換ベンジルアミン（１当量） のテトラヒドロフラン溶液（１０ｍｌ／１０ｍｍｏｌ）を、５分間にわたって、 −１０ないし−１５℃で添加した。この反応混合物を室温で５分間撹拌した後、 ４−メチルモルホリン塩酸塩を濾過した。有機層を真空中で濃縮し、その残留物 を酢酸エチルと共に摩砕して、残った白色固体を濾過した。酢酸エチル層を濃縮 することにより追加量の白色固体が生じた。合わせた固体物質の再結晶又はフラ ッシュクロマトグラフィーのいずれかにより、所望の生成物を精製した。比較例５ （Ｄ，Ｌ）−α−アセトアミド−Ｎ−ベンジル− ２−フランアセトアミド ベンジルアミン（０．２７ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）及びラセミα−アセトアミ ド−２−フラン酢酸（０．４７ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を用いて、所望の化合物 を得た。その生成物を酢酸エチルから再結晶して、白色固体を得た。 収量：０．４６ｇ（６５％）、Ｒ_f０．３０（９８：２クロロホルム／メタノ ール）。ｍｐ１７７°−１７８℃。 ¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１．９０（ｓ、ＣＨ₃）、４．３１（ｄ、Ｊ＝ ６．０Ｈｚ、ＣＨ₂）、５．５８（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、ＣＨ）、６．２７−６ ．３３（ｍ、Ｃ₃Ｈ）、６．４０−６．４４（ｍ、Ｃ₄Ｈ）、７．２０−７．３６ （ｍ、５ＰｈＨ）、７．６０−７．６４（ｍ、Ｃ₅Ｈ）、８．５７（ｄ、Ｊ＝８ ．１Ｈｚ、ＮＨ）、８．７３（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、ＮＨ）。 比較例６ （Ｄ）−（−）α−アセトアミド−Ｎ−ベンジル−２− フランアセトアミド Ｄ−α−アセトアミド−２−フラン酢酸（２．４５ｇ、１３．３８ｍｍｏｌ） 及びベンジルアミン（１．４３ｇ、１３．３８ｍｍｏｌ）で開始して、所望の生 成物を得た。 この生成物を酢酸エチルからさらに再結晶して、表題の化合物を得た。 収量：２．３０ｇ、ｍｐ１９６°−１９７℃。［α］²⁶Ｄ［ｃ＝１、ＭｅＯＨ ］＝７８.３°。この生成物のＣＤＣｌ₃溶液にＲ（−）−マンデル酸を添加する ことにより、アセトアミドメチルプロトンに対する唯一の信号が生じた。質量ス ペクトル、ｍ／ｅ（相対強度）２７２（Ｍ＋、２）、１８４（２）、１６５（２ ）、１４０（８）、１３９（８８）、１３８（３４）、９７（４６）、９６（１ ００）、９１（６３）。 元素分析：算出値 ６６．１６％Ｃ；５．９２％Ｈ；１０．２９％Ｎ。実測値 ６６．０９％Ｃ；６．０１％Ｈ；１０．３８％Ｎ。 比較例７ （Ｌ）−（＋）−α−アセトアミド−Ｎ−ベンジル− ２−フランアセトアミド Ｌ−α−アセトアミド−２−フラン酢酸（２．８３ｇ、１５．４６ｍｍｏｌ） 及びベンジルアミン（１．６５ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）を用いて、３．８０ｇの 濃縮された所望の生成物を得た。Ｒ（−）−マンデル酸を用いた¹ＨＮＭＲ分析 は、これが表題の化合物中で８０％を上回って濃縮されていることを示した。無 水エタノールから再結晶することにより、純粋なＬ−鏡像異性体を得た。 収量：１．６０ｇ。ｍｐ１９６−１９７℃。［α］²⁶ Ｄ［ｃ＝１、ＭｅＯＨ］＝＋７９．０°。 質量スペクトル、ｍ／ｅ（相対強度）２７３（Ｍ⁺＋１、３）２２９（２）、 ２１４（２）、１８４（１）、１６５（７）、１５７（４）、１４０（３３）、 １３９（１００）、１３８（９５）、９７（９８）、９６（１００）、９１（９ ８）。 元素分析：算出値 ６６．１６％Ｃ；５．９２％Ｈ；１０．２９％Ｎ。実測値 ６５．８９％Ｃ；５．８６％Ｈ；１０．４２％Ｎ。 比較例８ Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド ヒドロアクリルアミドの合成 メチル−α−アセトアミド−Ｎ−ベンジルマロナメート（１４．４ｇ、５４． ５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液（４００ｍｌ）に、乾燥ＬｉＣｌ（４．６２ｇ、 １０９ｍｍｏｌ）、ＮａＢＨ₄（４．１３ｇ、１０９ｍｍｏｌ）及びＥｔＯＨ（ ２００ｍｌ）を連続的に添加した。この反応混合物を室温で撹拌した（５時間） 。この懸濁液を真空中で濃縮した。その生成物をＣＨＣｌ₃（１０００ｍｌ）及 びＨ₂Ｏ（２５０ｍｌ）を用いて連続的に抽出（１２時間）した後、有機層を集 めて乾燥させ（Ｎａ₂ＳＯ₄）、真空中で除去して粗白色固体を得た。この粗生成 物をＥｔ₂Ｏ（５００ｍｌ）と共に摩砕して、１１．４５ｇ（８９％）の上記化 合物を得た：ｍｐ２０１−２０３℃；Ｒ_f ０．４０（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２８７、３０８ ５、２９６９、２８５９、１６４８、１５５２、１４５６、１０５５、６９７ｃ ｍ^-1；¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１．８８（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．５ ９（ｄｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、５．７Ｈｚ、ＣＨ₂Ｏ）、４．１９−４．３５（ｍ 、ＣＨ₂ＮＨ、ＣＨ）、４．９２（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＯＨ）、７．１０−７ ．４０（ｍ、５ＰｈＨ）、７．９４（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＮＨ）、８．３８（ ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、ＮＨ）；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）２２．２（Ｃ（Ｏ ）ＣＨ₃）、４１．６（ＣＨ₂Ｎ）、５４．９（ＣＨ）、６１．３（ＣＨ₂ＯＨ） 、１２６．２（Ｃ_4'）、１２６．５（２Ｃ_2'又は２Ｃ_3'）、１２７．７（２Ｃ_2' 又は２Ｃ_3'）、１３８．９（Ｃ₁’）、１６９．１（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ） ＮＨ）、１６９．９（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ；ＭＳ（＋Ｃｌ ）（相対強度）２３７（Ｍ⁺＋１、１００）、２１９（９）；Ｍ_r（＋Ｃｌ）２３ ７．１２３ ８８［Ｍ⁺＋１］（Ｃ₁₂Ｈ₁₇Ｎ₂Ｏ₃についての算出値２３７．１２３ ９２） ；分析値（Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₃）Ｃ、Ｈ、Ｎ。 比較例９ Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３− メトキシプロピオンアミド （ラセミ混合物）の合成 比較例８の生成物（２．３６ｇ、１０ｍｍｏｌ）のＣＨ₃ＣＮ溶液（５００ｍ ｌ）にＡｇ₂Ｏ（１１．５９ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）及びＣＨ₃Ｉ（６．２３ｍｌ 、１００ｍｍｏｌ）を室温で連続的に添加した後、この反応混合物を室温で撹拌 した（４日）。不溶性の塩を濾過し、溶媒を真空中で除去して白色固体を得た。 その残留物をＥｔ₂Ｏ（５０ｍｌ）と共に摩砕して、２．１０ｇ（８４％）の上 記同定の化合物を得た：ｍｐ１２１−１２２℃；Ｒ_f ０．４７（１０％ＭｅＯ Ｈ−ＣＨＣｌ₃）；ＩＲ（ＫＢｒ）３２９０、３０８７、２９２４、２８７８、 ２８２０、１６３７、１５４８、１１３９、６９５ｃｍ^-1；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣ ｌ₃）６２．０４（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．３８（ｓ、ＯＣＨ₃）、３．４３ （ｄｄ、Ｊ＝７．８、９．０Ｈｚ，ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、３．８２（ｄｄ、Ｊ＝ ４．２、９．０Ｈｚ、ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、４．４８（ｄ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、Ｎ ＨＣＨ₂）、４．５１−４．５７（ｍ、ＣＨ）、６．４３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５． ４Ｈｚ、ＮＨ）、６．７４（ｂｒ ｓ、ＮＨ）、７．２５−７．３７（ｍ、５Ｐ ｈＨ）；¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）２３．２（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、４３．５（ＣＨ₂ Ｎ）、５２．４（ＣＨ）、５９．１（ＯＣＨ₃）、７１．７（ＣＨ₂ＯＣＨ₃）、 １２７．４（Ｃ_4'及び２Ｃ_2'または２Ｃ_3'）、１２８．７（２Ｃ_2'又は２Ｃ_3'） 、１３７．８（Ｃ_1'）、１７０．０（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）、１７ ０．３（Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又はＣ（Ｏ）ＮＨ）ｐｐｍ；ＭＳ（＋ Ｃｌ）（相対強度）２５１（Ｍ⁺＋１、１００）、２１９（１００）；Ｍ_r（＋Ｃ ｌ）２５１．１３９ ３９［Ｍ⁺＋１］（Ｃ₁₃Ｈ₁₉Ｎ₂Ｏ₃についての算出値 ２ ５１．１３９ ５７）；分析値（Ｃ₁₃Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₃）Ｃ、Ｈ、Ｎ。 比較例１０ （Ｓ）−Ｎ−ベンジル ２−アセトアミド ヒドロアクリルアミド Ｌ−セリン（２．６３ｇ、２５ｍｍｏｌ）の撹拌Ａｃ₂Ｏ（２０ｍｌ）懸濁液 にＡｃ２Ｏ（２．５ｍｌ、２６．３ｍｍｏｌ）を添加した後、その反応懸濁液を 室温で撹拌した（２４時間）。ＡｃＯＨを真空中で除去して油状残留物を得た後 、その残留物にＴＨＦ（１５０ｍｌ）を添加した。このＴＨＦ懸濁液を、Ｎ₂下 、−７８℃に冷却し、４−メチルモルホリン（５．５ｍｌ、５０ｍｍｏｌ）を添 加した。撹拌（２分）後、イソブチルクロロホルメート（６．５ｍｌ、５０ｍｍ ｏｌ）を添加した。これにより、白色固体の沈殿が生じた。この反応をさらに２ 分間進行させた後、ベンジルアミン（５．５ｍｌ、５０ｍｍｏｌ）を−７８℃で 添加した。この反応混合物を室温で撹拌（３０分）した後、４−メチルモルホリ ン塩酸塩を濾過した。有機層を真空中で濃縮した。その生成物をＳｉＯ₂ゲル（ １０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３）を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーに よって精製し、２．２０ｇ（３７％）の上記化合物を白色固体として得た： ｍｐ１４６−１４７℃；［α］_D ²³（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）＝−２１．５°；¹ＨＮ ＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１．８６（ｓ、Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃）、３．５７（ｄｄ、Ｊ ＝５．１Ｈｚ、５．１Ｈｚ、ＣＨ₂Ｏ）、４．２５−４．３２（ｍ、ＣＨ₂ＮＨ、 ＣＨ）、４．９１（ｔ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、ＯＨ）、７．２０−７．３３（ｍ、５ ＰｈＨ）、７．９３（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、ＮＨ）、８．３７（ｔ、Ｊ＝５．７ Ｈｚ、ＮＨ）。上記同定化合物のＣＤＣｌ₃溶液に過剰の（Ｒ）−（−）マンデ ル酸を添加することにより、アセチルメチルプロトンに対して唯一の信号が生じ た。 比較例１１ （Ｓ）−Ｎ−ベンジル ２−アセトアミド −３−メトキシプロピオンアミド 比較例１０において製造した化合物（１．１８ｇ、５ｍｍｏｌ）の撹拌ＣＨ₃ ＣＮ溶液（３００ｍｌ）に、Ａｇ₂Ｏ（５．８０ｇ、２５ｍｍｏｌ）及びＭｅＩ （３．１ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を室温で連続的に添加した。この反応混合物を室 温で撹拌した（４日）。不溶性の塩を濾過し、溶媒を真空中で除去して白色固体 を得た。この白色固体をＥｔ₂Ｏ（１００ｍｌ）と共に摩砕して、１．００ｇ（ ８０％）の上記同定の化合物を得た：ｍｐ１４３−１４４℃、［α］²³Ｄ（ｃ＝ １、ＭｅＯＨ）＝−１６．４°；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ２．０３（ｓ、Ｃ（ Ｏ）ＣＨ₃）、３．３８（ｓ、ＯＣＨ₃）、３．４３ （ｄｄ、Ｊ＝７．５、９．０Ｈｚ、ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、３．８１（ｄｄ、Ｊ＝ ４．２、９．０Ｈｚ、ＣＨＨ’ＯＣＨ₃）、４．４７（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、Ｎ ＨＣＨ₂）、４．５２−４．５９（ｍ、ＣＨ）、６．４８（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６． ０Ｈｚ、ＮＨ）、６．８１（ｂｒ ｓ、ＮＨ）、７．２５−７．３７（ｍ、５Ｐ ｈ）。上記同定の化合物のＣＤＣｌ３溶液に過剰の（Ｒ）−（−）−マンデル酸 を添加することにより、アセチルメチル及びエーテルメチルプロトンに対する唯 一の信号が生じた。 比較例１２ （Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド ヒドロアクリルアミド この化合物を、実施例１及び２に記述した手順に従って調製した。 比較例１３ Ｎ−アセチル−Ｄ，Ｌ−フェニルグリシン− Ｎ−ベンジルアミド この化合物を、米国特許５，３７８，７２９号に記述される手順に従って調製 した。この特許の内容は、参照することにより組み込まれている。Ｄ，Ｌ−フェ ニルグリシンアミド（１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１５ｍｌ）に溶解した 後、無水酢酸（１．２３ｇ、１．４０ｍｌ、１２ｍｍｏｌ）を滴下して添加した 。この溶液を 室温で撹拌（４−６時間）した後、濃縮して乾燥させた。その残留物をクロロホ ルム／ヘキサンから再結晶した。 収量：２．０５ｇ（６６％）、ｍｐ２０２°−２０３℃。 ¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１．９１（ｓ、３Ｈ）、４．２７（ｄ、Ｊ＝ ５．６Ｈｚ、２Ｈ）、５．５０（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１（ｓ、 ５Ｈ）、７．３６（ｓ、５Ｈ）、８．３８−８．８６（ｍ、２Ｈ）。¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：２２．３、４２．０、５６．３、１２６．６ （２Ｃ）、１２７．０、１２７．１（２Ｃ）、１２７．４（２Ｃ）、１２８．１ （２Ｃ）、１３８．９、１３９．０、１６８．９、１６９．９ｐｐｍ。 ＩＲ（ＫＢｒ）：３０２０、 １６３５、１５８０、１５４０、１４５０、１ ２６５、７４５、６９０ｃｍ^-1。 質量スペクトル、ｍ／ｅ（相対強度）：２８３（２０）、２６４（２１）、１ ４９（１００）、１３１（２０）、１１８（３４）、１０６（９２）、９１（７ ０）、７９（５６）、７７（５４）、６５（４５）、５１（３７）。 Ｃ₁₇Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₂について算出した元素分析 ７２．３１％Ｃ；６．４４％Ｈ； ９．９２％Ｎ。実測値 ７２．４９％Ｃ；６．４７％Ｈ；９．８９％Ｎ。 本発明の化合物は、それらを必要とする動物、例えば、ヒトのような哺乳動物 における癲癇、神経性の不安、精神病、不眠症等のような中枢神経障害の治療に 有用であ る。これらは優れた抗痙攣活性を示し、したがって、短期間の治療のためにもち ろん投与することができる。さらに、本発明の化合物は、長期間の治療のための 薬物措置において有用であるという、更なる利点を有する。本発明の化合物は、 以下の薬理学の項において示されるように、治療を受ける動物に対して実質的に 非毒性であり、仮にあったとしても毒性は最小である。 薬理学 雄白色種カースワース・ファームス（Carthworth Farms）Ｎｏ．１マウス（ｉ ｐ経路）及び雄白色種スプラーグ・ドーリー（Sprague Dawley）ラット［口（ｐ ｏ）経路］の両者において、抗痙攣活性について化合物のスクリーニングをした 。電気的（最大電気ショック又はＭＥＳ）試験を用いて、活性を立証した。ＭＥ Ｓ試験においては、角膜電極を配置して電流を流す前に、それらの動物の眼内に 、麻酔薬（０．９％塩化ナトリウム中の０．５％ヘミ硫酸ブタカイン）を含む電 解質溶液１滴を適用した。６０サイクルの交流電流を、両種に対して、マウスに は５０ｍＡ、ラットには１５０ｍＡで、０．２秒間印加した。防御の終点は、誘 発された発作の後肢強直性伸筋成分の消滅として定義した。マウスにおいては、 ロートロッド（rotorod）試験を用いて、強制性自発運動活性（forced spontane ous motor activity）に対する化合物の効果を決定した。３回の連続試行におい て、６ｒｐ ｍで回転する１インチ径いぼ状ロッド上で動物が１分間平衡を保つことができな いことは、運動性の障害を示した。通常、これらの条件下で、マウスはその平衡 をほぼ恒久的に維持する。ラットにおいては、運動性の障害は、運動失調、異常 歩行及び姿勢、及び／又はプレイシング応答及び筋緊張の喪失の顕著な証拠を観 察することにより評価する。マウスの同定スクリーニング研究においては、全て の化合物を３種類の用量水準（３０、１００、３００ｍｇ／ｋｇ）及び２種類の 期間（０．５時間、４時間）で投与した。典型的には、ＭＥＳ発作試験において 、１匹の動物を３０ｍｇ／ｋｇ及び３００ｍｇ／ｋｇで試験し、３匹の動物を１ ００ｍｇ／ｋｇで試験した。ロートロッド毒性試験においては、４匹の動物を３ ０ｍｇ／ｋｇ及び３００ｍｇ／ｋｇで試験し、８匹の動物を１００ｍｇ／ｋｇで 試験した。活性が３０ｍｇ／ｋｇで見出された場合には、ＥＤ₅₀値を見出すため により低い投与量を用いた。 半有効用量（ＥＤ₅₀）及び半毒性用量（ＴＤ₅₀）の定量的決定は、予め算出さ れたピーク効果の時点で行った。少なくとも８匹の動物の群を、異なる用量の試 験化合物を用いて、１００及び０％の防御並びに最小運動性障害の間に少なくと も２点が決定されるまで試験した。各試験における動物の５０％と９５％信頼区 間で規定の終点をもたらすのに必要な候補物質の用量を算出した。 それらの効力及び毒性及びＰＩ値に関して、構造類似性を有するがＲ²の置換 基が異なる化合物と本発明の化合物とを比較した。これらの化合物についてのプ ロトコルは上述の通りである。 それらの結果を表Ｉに示す。 上記データによって明確に示されるように、本発明のＲ鏡像異性体は、非常に 強力な抗痙攣活性を有する。また、本発明者は、予期せぬことに、このＲ立体異 性体が対応するＳ立体異性体及びラセミ混合物よりも強力であることも見出して いる。 この表中のデータは、比較例の効力が本発明のものよりも非常に低いことを示 す。表中の２−フリル誘導体のみが匹敵する効力を示す。 加えて、本発明の化合物は、それらの効力を考慮すると、神経学的毒性が比較 的低い。実際、これらのデータによって明確に示されるように、神経学的毒性は 、化合物が腹腔内投与されたマウスよりも化合物が経口投与されたラットにおい て有意に低い。実際、ラットにおいて、本発明の化合物の神経学的毒性は非常に 低い。 本発明の化合物のＰＩ値は、化合物が腹腔内投与されたマウスモデル及び、特 には、化合物が経口投与されたラットモデルにおいて非常に高い。試験した化合 物のうち、Ｒ²がＣＨ₂ＯＨである化合物を除いて、本発明の化合物のＰＩ値は一 般に比較例よりも高い。しかしながら、この後者の化合物の効力は本発明の化合 物よりも有意に 低い。 これらの表中のデータを正しく見透すことが重要である。データを見ると、本 発明の化合物は優れた薬物プロファイルを示すことが極めて明白である。他方、 これらのデータに基づくと、フリル誘導体を除いて、他の比較化合物は本発明の 化合物に対して有意に劣る薬物である。これらの比較例の化合物の神経学的毒性 が低く、かつＰＩ値が満足のいくものである場合もあるが、そのデータをそれだ けで判断することはできない。薬物は、例えその神経学的毒性が低いとしても、 薬効は低くないことが好ましい。結局のところ、有効な結果を得るのに可能な限 り少ない薬物を投与することが目的である；特定の有効な結果を達成するために 投与される薬物を多くすると、その薬物が患者の他の身体系に対する他の効果を 備えている危険性が高まり、その効果のうちの幾つかは有害なものである。した がって、フリル誘導体を除いて、表中のデータに基づくと、他の比較例は本発明 の化合物よりも薬物プロファイルが大きく劣る。 したがって、期間を延長して動物に投与する場合の薬物の毒性に関し、考慮し なければならないさらに別の因子が存在する。例え薬物が優れた抗痙攣活性及び 優れたＰＩ比を有するとしても、その薬物が習慣的投薬の際に患者に対して毒性 である場合には有用ではない。抗痙攣薬に関連する医薬業界において、動物に対 する薬物の毒性を測定するのに用いられるスタンダードの１つは、肝 臓毒性である。肝臓毒性が比較的低い、もしくは実質的に最小である薬物を見出 すことが目的となる。 上記データに基づくと、フリル誘導体及び本発明の化合物の両者が優れた薬物 プロファイルを有する；両者は急性投与に用いることが可能である。しかしなが ら、以下に示されるように、このフリル化合物が非常に活性であるとしても、フ リル化合物は動物に対して毒性が強く、それが本発明の化合物よりも習慣的投与 に対する望ましさを大きく低下させる。他方で、以下に示されるように、本発明 の化合物はフリル化合物よりも毒性が非常に低く、実際、あったとしても、動物 に対する毒性はごく僅かである。したがって、本発明の化合物は、治療を受ける 動物に長期間投与するのに有用である。 以下の実験では、本発明の代表的な化合物の肝臓に対する効果が測定されてい る。用いられる薬物は実施例１の化合物、すなわち、Ｒ−Ｎ−ベンジル−２−ア セトアミド−３−メトキシプロピオンアミドであり、以下これをＢＡＭＰと呼ぶ 。 Ｉ．短期間の肝臓の研究 プロトコルは以下の通りである： ８匹のラットの４つの群の各々を、ビヒクル（群１及び２）、又は３．９ｍｇ ／ｋｇの実施例１の化合物（群３）又は１００ｍｇ／ｋｇの実施例１の化合物（ 群４）を毎日、４日間投与することにより処置した。第５日に、群２、３及び４ の動物には３．９ｍｇ／ｋｇの化合物１ （以下“ＢＡＭＰ”）を投与し、群１の動物には別の用量のビヒクルを投与した 。 薬物が有効であったことを確認するため、以下に説明されるように、全ての群 を、ピーク効果時点（ＴＰＥ）で、ＭＥＳ誘発強直性伸筋に対する薬物の効力に ついて試験した。 ＭＥＳ試験に続いて、群４の動物に、ＥＤ₅₀と１００ｍｇ／ｋｇとの差に等し い用量である９６．１ｍｇ／ｋｇ用量の実施例１の化合物を投与した。第６日に 、全ての群に対し、標準用量１００ｍｇ／ｋｇ（腹腔内投与）のヘキソバルビタ ールに対する睡眠時間応答（立直り反射の喪失から再獲得までの時間）の試験を 実施した。このヘキソバルビタールの睡眠時間は、肝薬物代謝の評価をもたらす 。この試験を実施した後、全ての動物群に第１日に施したものと同じ処置を施し た。第７日は、群２に１００ｍｇ／ｋｇのＢＡＭＰを投与したことを除いて、同 様の投薬割り当てを施した。第８日及び第９日に、４つの群の各々からの４匹の ラットを安楽死させた。血液を冷却した管に集め、凝血させた後、遠心してＲＢ Ｃ（赤血球）を分離した。血清は、潜在的な肝臓の損傷を示す血清アラニンアミ ノトランスフェラーゼ（ｓＡＬＴ）活性を測定するまで、−７０℃で凍結した。 肝臓を氷冷生理食塩水を用いてその場で灌流し、ブロットして乾燥させ、秤量し 、０．２５Ｍショ糖中でホモジナイズし、遠心して小胞体（すなわち、マクロソ ーム）及びサイト ゾルを分離した。 これらの細胞下画分の両者のタンパク質濃度を、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１ ９３ ，２６５−２７５，（１９５１）においてＬｏｗｒｙらが記述するＬｏｗｒ ｙ法により決定し、ミクロソームタンパク質の収量を算出した。これらの２種類 の亜細胞画分のタンパク質濃度により、全ての酵素濃度及び活性を算出するため の基礎が得られる。 薬物治療によって様々に変化することが知られる薬物代謝酵素の広範囲にわた る変化を求めた。Ａｒｃｈ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ，１４３，３１８ −３２９（１９７１）（その内容は参照することにより組み込まれる）に記述さ れる手順に従い、ミクロソーム及びサイトゾル第Ｉ相（それぞれ、チトクロムＰ ４５０触媒酸化及びキノンオキシドレダクターゼ活性）並びにミクロソーム（グ ルクロン酸抱合）及びサイトゾル（グルタチオン及び硫酸塩の結合）第１１相結 合反応を評価した。ＢＡＭＰは、肝臓壊死を引き起こすという証拠を示さなかっ た。集合的には、一連の肝臓酵素の研究から得られる結果は、深刻な薬物−薬物 相互作用及び肝臓毒性に対するこの薬物の責任が比較的軽いことを示す。 ４８時間の研究により、この化合物が最小の肝臓毒性を示したため、より長期 間の研究を３０日にわたって行った。 その方法論は以下の通りである： ＩＩ．Ｃｒｌ：ＣＤ（ＢＲチャールズ・リバー（Charles River）ラットの５ つの群の各々に、以下の投薬スケジュールに従って、ＢＡＭＰ又は対照物質（蒸 留水中の０.５％メチルセルロース［４００ｃｐｓ］水溶液）を与えた： 群１−ビヒクル対照（雄１０匹、雌１０匹）、０ｍｇ／ｋｇ／日 群２−低（雄１０匹、雌１０匹）、１０ｍｇ／ｋｇ／日 群３−中低（雄１０匹、雌１０匹）、３０ｍｇ／ｋｇ／日 群４−中高（雄１０匹、雌１０匹）、１００ｍｇ／ｋｇ／日 群５−高（雄１０匹、雌１０匹）、３００ｍｇ／ｋｇ／日 投与は、経口強制給餌により、１日１回、少なくとも連続して３０日間行い、 その後全ての動物を病理学的評価のために犠牲にした。 全ての動物を、投薬を開始する前に１回、及びその後毎週秤量した。臨床化学 及び血液学のための絶食（一晩）血液試料を終了時に集めた。血液試料は、二酸 化炭素（酸素と混合）を麻酔薬として用いて、眼窩静脈叢から集めた。 全ての動物を、適切な時期に、バルビツール酸麻酔の下で失血させることによ り犠牲にし、全てを剖検に処し た。 臨床的な観察を剖検時に再検討し、グロスで観察された全ての異常を、コンピ ュータ化されたデータ収集システムに直接入力した。各動物からの副腎、脳幹を 含む脳、心臓、腎臓、肝臓、卵巣、下垂体、精巣上体を含む精巣、及び副甲状腺 を含む甲状腺を秤量した。下垂体及び副甲状腺を含む甲状腺は固定後に秤量し、 他の臓器は剖検時に秤量した。肝臓の重量の変化を表３に示す。 このプロトコルによって必要とされるため、群１（対照）及び群５（高）の全 ての動物の肝臓に対してのみ組織学的評価を行った。組織学的所見の全てをコン ピュータ化されたデータ獲得システムに直接入力した。病変を相対的な重篤性又 は関与の程度について等級分けした（１＝最小、２＝僅か、３＝中程度、４＝中 程度に重篤、５＝重篤）。一般に、最小は、あらゆる所定の組織形態学的変化の 最も少ない、一貫して認識し得る程度を表し、これに対して重篤は、合理的な可 能性のある最も極端な程度を表し、他の３つの等級はこれらの２つの極限の間を 連続的に占める。これらの等級は、形態にのみ基づく主観的な比較による評価で あり、それら自身が機能的障害のいかなる程度をも意味することを意図するもの ではない。結果 グロス所見−幾つかのグロスの異常が報告された。全ては、この系統及び年齢 のラットの正常な集団において しばしば見られるものであった；処置の効果を示唆するものは存在しなかった。 これらのデータを表２に示す。 組織病理−全ては、この系統及び年齢のラットの正常な集団において頻繁に見 られる種類のものであった。処置の効果を示唆する低下パターンを示すものはな かった。 結論 経口強制給餌によって少なくとも３０日間ＢＡＭＰを投与されたラットの肝臓 は、用いられた最高用量水準（３００ｍｇ／ｋｇ／日）でも副作用の組織学的証 拠を示さなかった。 これらの結果を、最大効力及び最大ＰＩ値を示す表Ｉの比較例、すなわち、比 較例１（以下、化合物Ａと呼ぶ）、比較例６（以下、化合物Ｂと呼ぶ）及び比較 例１３（以下、化合物Ｃと呼ぶ）の化合物と比較した。 比較例１４ 化合物Ｃ、すなわち、Ｎ−アセチル−Ｄ，Ｌ−フェニルグリシンＮ−ベンジル アミドを、抗痙攣活性（最大電気ショック）に基づく５日の習慣的処置に用いた 。８匹の動物の３つの群を、各々以下のように処置した。１群にはＭＥＳ ＥＤ₅₀ の試験化合物を５日間投与し；第２の群には必要量のビヒクル（０．０４ｍｌ ／１０ｇ体重）を４日間、及び単回用量（ＭＥＳ ＥＤ₅₀）の試験化合物を第５ 日に投与し；第３の群には必要量のビヒクルを毎日、５日間投与した。第５日に 、候補物質のピーク効果の時点で、全ての群にＭＥＳ試験を行い、防御された動 物の数を記録した。防御されなかった動物の発作成分を１０秒近くまで計測し、 伸筋／屈筋（Ｅ／Ｆ）比、Ｓ．Ｅ．及びｐ値を決定した。最大発作が弱まると伸 筋持続が減少し、屈筋持続が増加するため、Ｅ／Ｆ比により発 作の重篤性の尺度が得られる。 ５日の耐性研究に処したラットは、全て、それらの生活ケージに２４時間維持 した後、ヘキソバルビタール睡眠時間試験に処した（第６日）。３つの群の各々 における各ラットに１００ｍｇ／ｋｇのヘキソバルビタールを投与し（ｉ．ｐ． ）、睡眠時間を分程度まで測定した。各群についての平均睡眠時間及びＳ．Ｅ． を算出した。処置群の平均睡眠時間が処置対照群よりも有意に少ない場合、代謝 耐性を示唆するものと見なした。 ヘキソバルビタール睡眠時間試験に処した動物の３つの群のうちの２つ（習慣 的に処置した群及びビヒクル対照群）には、それぞれの本来の治療措置を２日間 （第６日及び第７日）継続し、２４時間後（第８日）に肝臓ミクロソーム研究に 処した。これらのラットを断頭し、０．９％塩化ナトリウム溶液で肝臓を灌流し た。肝臓を取り出し、秤量し、０．２５Ｍショ糖中でホモジナイズした。ミクロ ソームを調製し、それらの薬物代謝能力（ミクロソームタンパク質の収量；チト クロムＰ−４５０濃度；ｐ−ニトロアニソール−Ｏ−デメチラーゼ及びＮＡＤＰ Ｈチトクロムｃレダクターゼ活性；ノルベンズフェタミンＭＩ複合体形成；並び にグルクロニルトランスフェラーゼ、エリスロマイシンデメチラーゼ、及びエチ ルモルフィンデメチラーゼ活性）を測定した（Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉ ｏｐｈｙｓ．１４３：３１８−３２９，１９７１）。 ラットにおける慢性研究は、化合物Ｃの４８ｍｇ／ｋｇの５日用量が抗痙攣活 性又はヘキソバルビタール睡眠時間のいずれにも影響を与えないことを示す。対 照的に、化合物Ｃの習慣的投与は、ｐ−ニトロアニソール−Ｏ−デメチラーゼ、 エチルモルフィンデメチラーゼ、及びＮＡＤＰＨチトクロムｃレダクターゼ活性 の有意の増加によって示されるように、肝臓ミクロソーム酵素系を少し誘発する 。表４を参照。 表４ 抗痙攣薬スクリーニング計画の試験結果第ＶＩＩ相評価、ラット、ｐ．ｏ． ＣＭＰＤ Ｃ これらの所見は、化合物Ｃが肝臓に対する副作用を有することを示唆している 。 これらのデータによって示されるように、化合物Ｃは、長期、すなわち７日用 量では、肝臓酵素の誘発において相対的に望ましいとはいえないプロファイルを 有する。４８ｍｇ／ｋｇ／日（これは、ＭＥＳ痙攣の防止におけるその有効単回 用量である）ｐ．ｏ．Ｘ７日で、これらのデータは、肝臓酵素の誘発における肝 臓の関与が観察されたことを明確に示している。ＭＥＳ−ＥＤ₅₀用量を、７日間 ではなく３０日間継続した場合には、より完全な変化が生じると考えられる可能 性が高く、それが３０日投薬スケジュールにおける安全率が僅かに１であり得る ことを示唆することに注意すべきである。 比較例１５ 化合物Ａ、すなわち、Ｎ−アセチル−Ｄ，Ｌ−アラニン−Ｎ¹−ベンジルアミ ドを、比較例１４に説明される手順に従い、その肝臓毒性について試験した。 その結果は以下の通りである： ラットにおける５日間の慢性研究は、４８ｍｇ／ｋｇの５日用量がこの期間内 で化合物Ａの抗痙攣効果（ＭＥＳ試験）に対する耐性を誘発しないことを示す。 この解釈は、ＭＥＳ試験による化合物Ａの同様の有効性、ヘキソバルビタール睡 眠時間の増加、及び変わらない肝臓ミクロソーム酵素活性によって支持される。 ５日間処置の 動物におけるヘキソバルビタール睡眠時間の増加の観点からは、ｐ−ニトロアニ ソール−Ｏ−デメチラーゼ活性に対する化合物Ａのイン・ビトロ効果を決定する ことが重要であるものと考えられた。化合物Ａの低い阻害効力（Ｉ₅₀＝５０００ μＭ）は、睡眠試験においてこの化合物自身がヘキソバルビタール代謝を妨害す ることはほとんどないことを示唆する。これは、ヘキソバルビタール睡眠時間の 増強が中枢性のものであって末梢性のものではないことを示し得る。 ラットにおける５日間の耐性研究（ＭＥＳ及びヘキソバルビタール睡眠時間試 験）及び７日間の肝臓ミクロソーム酵素研究は、耐性は化合物ＡのＭＥＳ ＥＤ₅₀ （４８ｍｇ／ｋｇ）の５日用量では誘発されず（単回投薬急性対照群において は４／８が防御され、習慣的処置群においては３／８が防御される）；５日間の 習慣的処置は、単回急性投薬によって誘発されるものよりも、ヘキソバルビター ル睡眠時間を増加させた（溶媒対照、急性対照、及び５日間処置において、それ ぞれ、３１．７±１．７、３４．３±１．１、及び４４．４±１．９分）ことを 示す。溶媒対照及び７日間処置のそれぞれにおいて、体重（１４８．８±５．９ ｖｓ１４０．０±４．６ｇ）、肝重量（７．７１±０．２２ｖｓ７．２２±０． ４５ｇ）、総ミクロソームタンパク質（３２．３±０．５６±０．０４ｎｍｏｌ ／ｍｇ）、ｐ−ニトロアニソール−Ｏ−デメチラーゼ活性（０．５０±０．０４ ｖｓ０．６２±０． ０７ｎｍｏｌ／ｍｇ／分、ＮＡＤＰＨチトクロムｃレダクターゼ活性（９５．３ ±１１．０ｖｓ１０５．０±４．１ｎｍｏｌ／ｍｇ／分）に有意の変化はなかっ た。この候補物質（化合物Ａ）には、イン・ビトロｐ−ニトロアニソール脱メチ ル化に対する阻害効力はほとんどなかった（Ｉ₅₀：ｃ．５０００μＭ）。 しかしながら、あったとしても僅かではあるが、７日間の研究で肝臓酵素の誘 発が見出され、この化合物を上に説明されるような３０日の投薬範囲の毒物学研 究に進めた。 より具体的には、６８匹の雄及び６８匹の雌ラット（４週齢）から選択された ５０匹の雄及び５０匹の雌Ｃｒ１：ＣｏＢｓ^RＣＤ（ＳＤ）を研究１における試 験動物として用いた。これらのラットを、高所の金網製ケージに、自由に摂取可 能な餌（プリナ・サーティファイド・ローデント・チャウ（(Purina Certified Rodent Chow^R)５００２）及び水道水（自動給水システムによる）と共に個別に 収容した。用いられた飼料の各バッチは、製造者が、特定の重金属、アフラトキ シン、塩素化炭化水素、有機リン酸塩、及び特定の栄養素の濃度について分析し た。水道水は、混入する特定の微生物、殺虫剤、重金属、アルカリ度及びハロゲ ンについて、事後的に日課として分析した。この研究を妨害するほどの水準で動 物飼料及び水中に存在するものはなかった。 隔離及び研究期間中、室温及び相対湿度を１日２回記 録し、これらは、それぞれ、６４ないし７７°Ｆ及び１２ないし５１％の範囲で あった。１２時間の明及び１２時間の暗の人工光サイクルを維持した。 研究で用いるため、コンピュータによる体重無作為化法を用いてラットを選択 し、以下の群に割り当てた： 無作為化に続いて、独自の永久識別番号を記入した耳標を用いてラットを識別 した。これらのラットを、まず極端な体重（平均体重からの標準偏差が±２）を 有するものを排除することにより、無作為に処置群に割り当てた。開始時の体重 は、雄については１８８．９ないし２１５．４グラム、雌については１４１．８ ないし１５８． ８グラムの範囲であった。化合物の調製及び投与 所望量のカルボキシメチルセルロースを適切な（ミリグラム）秤で秤量し、全 値の２／３の蒸留水を収容する予め目盛り付けされたビーカーに移し、溶液が形 成されるまでマグネチックスターラで撹拌した。次に、蒸留水を最終容量まで添 加し、撹拌して０．５％ｗ／ｖ溶液を得た。 まず、化合物Ａを破砕して粉末にした。各々の用量水準に望ましい量を適切な （ミリグラム）秤で秤量し、予め目盛り付けされたビーカーに移した。少量（０ ．５ないし４ｍｌ）の０．５％カルボキシメチルセルロースを化合物Ａに添加し 、混合してペーストを形成した。カルボキシメチルセルロース（０．５％）を最 終容量まで添加し、テクマ^(R)ティスマイザ^(R)（Tekmar^(R)Tissumizer^(R)）で２ ないし３分間混合した後、マグネチックスターラで２ないし３分間混合した。化 合物Ａの新鮮な懸濁液は毎日調製し、０．５％カルボキシメチルセルロースの新 鮮な溶液は毎週調製して、冷蔵貯蔵した。 各ラットに、体重ｋｇ当たり１０ミリリットルの投与量因子で、強制給餌によ り、午前９時から正午までの間に毎日、化合物Ａを投与した。各ラットに対する 投薬容量を、最も新しく記録された個々の体重からコンピュータにより、毎週計 算し調整した。 化合物Ａは経口投与した。 カルボキシメチルセルロース（１グラム）、蒸留水（１０ミリリットル）、及 び化合物Ａ（１グラム）の保存試料を開始時に採取し、室温で貯蔵した。 全てのラットを、死亡率及び瀕死率について１日２回観察した。投薬前、及び 投薬の１及び４時間後に臨床的な観察を行った。全ての徴候を観察されたままに 記録した。個々の体重を、処置の開始時、毎週、及び終了時に記録し、これに対 して餌の消費は毎週記録した。犠牲及びグロス病理 処置の３０又は３１日後、生存するラットを秤量し、麻酔をかけ、ペントバル ビタールナトリウム麻酔の下で放血した。ラットの各々に対して、適切に訓練さ れた職員により、専門委員会によって認可された病理学者が認める手順を用いて 完全な剖検を行った。剖検には以下のものの検査が含まれた： 外表面 全ての開口部 頭蓋腔 死体 脳及び脊髄の外表面（固定前） 鼻腔及び副鼻腔 胸腔、腹腔、及び骨盤腔並びにそれらの臓器 頚部組織及び器官 全ての所見を記録した。グロス病理 個々のグロス病理所見は以下の通りである： 化合物に関連すると考えられる腎臓に対する効果が観察された。群５の３匹の 雄及び２匹の雌、群３及び４の各々１匹の雄、及び群１の１匹の雌に、骨盤の拡 大が認められた。偶発的に出現するもので化合物に関連するものではないと認め られたその他のものとしては、肺、肝臓、甲状腺、胃、及び盲腸粘膜上の黒色領 域、顆粒状脾臓、肝臓上の隆起領域、流体拡充子宮、頭蓋腔内の流体、並びに小 さく柔らかい精巣が観察された。臓器重量及び臓器重量／体重比 様々な臓器、例えば、脳幹を含む脳、心臓、脾臓、腎臓、肝臓、性器を秤量し 、対照と比較した。表５に示されるように、肝臓重量のみが対照値と有意に異な っていた。 このように、平均肝臓重量は群４（３００ｍｇ／ｋｇ／日Ｘ３０日）の雄及び 群５（１０００ｍｇ／ｋｇ／日Ｘ３０日）の雌において増加した。これは、肝臓 重量／体重比の増加によって示された。肝臓重量／体重比は群３（１００ｍｇ／ ｋｇ／日Ｘ３０日）の雄でも認められた。群５の雄の平均腎臓重量の小さな増加 が、注目に値すべき唯一の変化であった。 したがって、１００ｍｇ／ｋｇの一日用量を潜在的な肝毒性用量の閾値用量と して用いて、抗痙攣用量に対する肝臓安全率２．１が得られる。 比較例１６ 化合物Ｃ、すなわち、Ｄ−（−）−α−アセトアミド−Ｎ−ベンジル−２−フ ランアセチルアミドを、上述の手順を用いて、肝臓毒性について評価した。より 具体的には、この薬物の様々な投与量、例えば２５ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋ ｇ、５００ｍｇ／ｋｇを、経口強制給餌により設定された期間ラットに投与した 。これらのラットは、別々に収容した。これらのラットを、死亡率及び瀕死率に ついて周期的に観察した。この研究の終了時に、生存するラットに麻酔をかけ、 麻酔状態で失血させた。適切に訓練された職員により、専門委員会によって認可 された病理学者が認める手順を用いて完全な剖検を行い、その結果を記録した。 比較例６のＤ−フリル誘導体をラットに投与した場合、 １３週間処置したラットにおいて、１００及び２５ｍｇ／ｋｇで肝細胞の壊死が 明白であった。 これらの試験した化合物、ＢＡＭＰ、化合物Ａ、Ｂ及びＣに関連するデータを 表６にまとめる。 表６のデータによって明確に示されるように、ＢＡＭＰのＭＥＳ試験における ＥＤ₅₀値は化合物Ａ及びＣよりも有意に小さく（有意に有効であり）、化合物Ｂ と同程度のものである。さらに、ＢＡＭＰのＰＩ比は化合物Ａ及びＣより有意に 大きい。 しかしながら、より重要なことには、ＢＡＭＰは高用量（３００ｍｇ／ｋｇ／ 日で３０日間）でも組織病理学的徴候を示さず、低用量でも偏りをほとんど示さ ない。これは、化合物Ａ、Ｃ、及び、特にＢの肝臓病理とは全く対照的である。 比較例は、全て、ＢＡＭＰよりも有意に高い肝毒性を示した。これは、表の最後 の欄に示されるＭＥＳの安全率一日用量に認められる。この表において、肝毒性 の最初の徴候が認められる連続日数間与えられる一日用量が示されている。経口 抗痙攣薬ＭＥＳ単回用量に対して表されるその比率は、薬物の習慣的投与の際に 肝臓の問題が発生し始める安全指数である。表に示されるように、３０日の投薬 の後に肝臓の拡張の徴候を示す用量の経口抗痙攣薬の用量に対する安全率は、化 合物Ａでは２．１であるがＢＡＭＰでは２５．６である。例えば肝細胞の壊死を 含む肝毒性の組織学的徴候については、安全率は化合物Ｂで１２．７であった。 対照的に、ＢＡＭＰの３０日の習慣的投薬では、その抗痙攣用量の７６．９倍で 有害な組織学的効果は生じなかった。 したがって、長期間動物に投与された場合の本発明の化合物の毒性は、重要な パラメータである。抗痙攣薬が 活性効力を有する場合であっても、それが動物に対する毒性を示す場合、習慣的 投薬において用いるための候補になるとは考えられない。したがって、抗痙攣薬 の選択において、上に概説される３つの基準（高い効力、低い神経学的毒性、高 いＰ．Ｉ．）を満足させるだけではなく、第４の基準、低い毒性も重要である。 本発明の化合物はこれらの基準を満たしている。 したがって、データによって明確に示されるように、本発明の化合物は習慣的 投与において用いられる薬物に必要な低い肝毒性を有し、そのため、極めて安全 である。本発明の化合物は、肝臓に対する効果が全くないか、もしくは最小限に 留まる。 したがって、本発明の化合物は優れた薬物プロファイルを示す。これらは、前 に概説される４つの特徴、高い効力、その効力に比して低い神経学的毒性、高い 防御指数及び最小限の肝毒性の全てを満たす。本発明の化合物は肝臓に対して実 質的に非毒性である。本発明のこれらの化合物は、これまでに実現されていない 利点を示す。したがって、これらは、長期化された期間にわたるそれらの投与（ 習慣的投与）を必要とする治療措置において用いることができる。 上述の好ましい実施態様及び実施例は本発明の範囲及び精神を説明するために 提示されたものである。ここで説明される実施態様及び実施例は、当該技術分野 における熟練者に対して他の実施態様及び実施例を明らかなも のとする。これらの他の実施態様及び実施例は、本発明が意図するものの範囲内 にある。したがって、本発明は添付の請求の範囲によってのみ限定されるべきで ある。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．下記式を有するＲ配置の化合物。 （ここで、 Ａｒはフェニルであって、無置換であっても少なくとも１つのハロ基で置換 されていてもよく； Ｑは低級アルコキシであり；及び Ｑ₁はメチルである。） ２．実質的にエナンチオピュアである請求項１に記載の化合物。 ３．Ｑが１〜３個の炭素原子を有する低級アルコキシである、請求項１に記載の 化合物。 ４．Ｑがメトキシである請求項３に記載の化合物。 ５．Ａｒが無置換のフェニルである請求項１に記載の化合物。 ６．ハロがフルオロである請求項１に記載の化合物。 ７．Ｑが１〜３個の炭素原子を有するアルコキシであり、かつ、Ａｒが無置換の フェニルである請求項１に記載の化合物。 ８.（Ｒ）−Ｎ−ベンジル−２−アセトアミド−３−メトキシプロピオンアミド である請求項１に記載の化合物。 ９．実質的にエナンチオピュアである請求項８に記載の化合物。 １０．抗痙攣有効量の請求項１〜９のいずれか一に記載の化合物とそれらの薬学 的担体とを含む治療用組成物。 １１．動物における中枢神経系障害を治療する方法であって、それを必要とする 前記動物に抗痙攣有効量の請求項１〜９のいずれか一に記載の化合物を投与する ことを包含する方法。 １２．前記動物が哺乳動物である請求項１１に記載の方法。 １３．前記哺乳動物がヒトである請求項１２に記載の方法。