JP2000143531A - 神経再生用材料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 神経細胞の増殖および神経組織の再生に有用
な材の提供。 【解決手段】 式(I)：X-A-D-E-G-J-L-M-Pro-Q-Y（式中
XはH、CH₃-CO-又はCH₃-CO-Lys、AはSer又はThr、DはIl
e、Val又はLeu、EはLys又はArg、GはIle、Val又はLeu、
JはGly又はAla、LはIle、Val又はLeu、MはGly又はAla、
QはGly、Ala又はGly-Lys-Lys-Gly、Yは-OH又は-NH₂）の
ペプチド、式:Ala-Gly-Tyr-Lys-Pro-Asp-Glu-Gly-Lys-A
rg-Gly-Asp-Ala-Cys-Glu-Gly-Asp-Ser-Gly-Gly-Pro-Phe
-Valのペプチド、式:Cys-Leu-Asn-Gly-Gly-Val-Ala-Met
-His-Ile-Glu-Ser-Leu-Asp-Ser-Tyr-Thr-Cysのペプチ
ド、式:Ser-Ile-Lys-Val-Ala-Valのペプチド、式:Ac-Ly
s-Ser-Ile-Lys-Val-Ala-Valのペプチド、式:Asn-Pro-Gl
y-Ala-Ser-Ala-Ala-Pro-Cys-Cys-Val-Pro-Gln-Ala-Leu-
Gluのペプチド、式:Val-Gly-Val-Ala-Pro-Glyのペプチ
ド、式:Ac-Lys-Val-Gly-Val-Ala-Pro-Glyのペプチド及
び/又はその塩を基材に固定化した神経再生用材料及び
該神経再生用材料を生体吸収性のチューブに充填した神
経再生材により上記の課題が解決される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、神経再生用材料お
よびそれを用いてなる神経再生材に関する。より詳細に
は、本発明は、特定のペプチドおよび／またはその塩を
基材に固定化した神経再生用材料および該神経再生用材
料を生体吸収性のチューブに充填してなる神経再生材に
関するものであり、本発明の神経再生用材料および神経
再生材は、強い神経細胞増殖促進作用、神経軸索伸長作
用を有し、神経細胞や神経組織の損傷、欠損などによる
中枢神経や末梢神経系の疾患、脊椎疾患、頭部外傷、卒
中などの脳血管疾患のような外傷性疾患などの治療に有
効であり、良好な神経再生作用、前記疾患の回復や改善
効果を有する。

【０００２】

【従来の技術】交通事故、労働災害、その他家庭内や屋
外における各種の事故によって生じた末梢神経損傷の治
療は、外科領域、特に整形外科領域で大きな位置を占め
ており、近年、切断した神経を繋ぐ外科手術の技術は顕
微手術の導入によって著しい進歩を遂げてきた。しかし
ながら、神経の欠損部が大きい場合は他の材料を用いて
該欠損部を補わなければならず、これに対する治療は外
科医にとって大きな問題となっている。現在、臨床的に
行われている方法は、腓腹神経を用いる自家神経移植で
ある。自家神経は最も理想的な神経再生用材料である
が、患者の負担、手術の複雑化などの点で問題があり、
その採取にはおのずから制限がある。しかも、腓腹神経
の切除は実生活にそれほど大きな障害にならない場合が
多いとはいえ、腓腹神経の切除によって足首から足の甲
にかけての小指側の感覚神経が消失するため患者の生活
の質が低下し、できれば自家神経移植を避けるのが好ま
しい。このような状況下に、自家神経に代わる移植材料
の開発が切望され、種々の研究がなされている。例え
ば、神経以外の組織を用いる自家移植として自家血管移
植や自家筋膜移植などが行われているが、患者の生体組
織を使用するという点ではやはり患者の負担を解消でき
ず、しかも手術時の複雑さの点でも自家神経移植の場合
と大差がない。

【０００３】一方、生体組織の受けた創傷などを治癒促
進する作用を有するペプチドとして、例えば、配列番号
８で表されるペプチド（ＴＲＡＰ−５０８）が知られて
おり、このペプチドは動物に作製した創に対して治癒促
進効果があることが報告されている［ＳAAS Ｂull. Ｂi
ochem．Ｂiotechnol.，３，８−１２（１９９０）、
Ｊ．Ｃlin．Ｉnvest.，８９，１４６９−１４７７（１
９９２）、Ｔhromb. andＨaemost.，７０（１），１５
８−１６２（１９９３）、Ｊ．Ｓurg．Ｒes.，５３，１
１７−１２２（１９９２）］。また、配列番号９で表さ
れるペプチド（ＥＧＦ−１４−３１）は、ヒト線維芽細
胞の増殖を促進することが報告されている［Ｐroc．Ｎa
tl．Ａcad．Ｓci．ＵＳＡ.，８１，１３５１−１３５５
（１９８４）］。

【０００４】そして、配列番号１０で表されるペプチド
（Ｌａｍｉｎｉｎ誘導体ペプチド）は、細胞の接着、遊
走および血管新生を促進することが報告されている
［Ｊ．Ｂiol. Ｃhem.，２７０，２０５８３−２０５９
０（１９９５）、Ｊ．Ｂiol. Ｃhem.，２７０，１０３
６５−１０３６８（１９９５）］。さらに、配列番号１
２で表されるペプチド（ＴＧＦβ６９−８４）は、軟寒
天中のＮＲＫ−４９Ｆ細胞のコロニー形成を促進するこ
とが確認されている（特開平６−０２５２８８号公
報）。また、配列番号１３で表されるペプチド（Ｅｌａ
ｓｔｉｎ由来ペプチド）は、ヒト皮膚由来の線維芽細胞
の遊走と増殖を刺激することが報告されている［Ａnnal
es Ｃhirurgiae ｅｔ Ｇynaecologiae，８３，２９６−
３０２（１９９４）およびＣell Ｂiology Ｉnternatio
nal，１８，１１１−１１７（１９９４）］。しかしな
がら、前記した配列番号８、９、１０、１２および１３
で表されるペプチドは、細胞接着活性または細胞増殖刺
激活性を示すことは報告されているが、神経再生能につ
いての検討はなされていない。

【０００５】一方、神経再生材として、ポリグリコール
酸（ＰＧＡ）の筒状メッシュ（メッシュ状チューブ）に
コラーゲンを塗布して付着させたものが知られている
［Ｊ．Ａrtif．Ｏrgans，２７，４９０−４９４（１９
９８）］。しかしながら、この神経再生材は、充分な神
経再生効果を示さない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】したがって、本発明の
目的は、神経細胞増殖促進作用および神経軸索伸長作用
を有し、損傷、欠損などの生じた神経細胞および神経組
織を増殖、修復して神経を再生することができ、しかも
感染の恐れがなく、さらに生体に対する安全性の点にも
優れる、神経再生用材料および神経再生材を提供するこ
とである。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記の目的を達成すべく
本発明者らは鋭意研究を重ねてきた。そして、配列番号
８〜１４で表される従来既知のペプチドおよびその誘導
体を含水ゲルなどの基材に固定化し、それを神経細胞や
神経組織の損傷部に適用したところ、基材への固定化後
も前記既知のペプチド類の生理活性が失われず、良好な
神経細胞増殖促進作用および神経軸索伸長作用を示し、
神経細胞や神経組織の損傷、欠損などによる中枢神経や
末梢神経系の疾患の治療、脊椎疾患、頭部外傷、卒中な
どの脳血管疾患のような外傷性疾患などの治療に有効で
あり、しかも安全性の点でも優れていて、神経再生用材
料として有用であることを見出した。また、本発明者ら
は、配列番号８〜１４で表される従来既知のペプチドお
よびその誘導体を基材に固定化したものを生体吸収性材
料からなるチューブに充填したものは、神経組織修復の
ための外科手術などに用いる神経再生材として優れた作
用を示すことを見出した。さらに、本発明者らは、前記
の研究と並行して、神経細胞の増殖促進作用および神経
軸索伸長作用を示す新しい物質を開発すべく研究を行っ
てきた。その結果、下記の一般式（Ｉ）;

【０００８】

【化２】 Ｘ−Ａ−Ｄ−Ｅ−Ｇ−Ｊ−Ｌ−Ｍ−Pro−Ｑ−Ｙ （Ｉ） （式中、Ｘは水素、ＣＨ₃−ＣＯ−およびＣＨ₃−ＣＯ−
Ｌys−からなる群から選ばれる基、ＡはＳerおよびＴhr
から選ばれるアミノ酸残基、ＤはＩle、ＶalおよびＬeu
からなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＥはＬysおよび
Ａrgから選ばれるアミノ酸残基、ＧはＩle、Ｖalおよび
Ｌeuからなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＪはＧlyお
よびＡlaから選ばれるアミノ酸残基、ＬはＩle、Ｖalお
よびＬeuからなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＭはＧ
lyおよびＡlaから選ばれるアミノ酸残基、ＱはＧly、Ａ
laおよびＧly−Ｌys−Ｌys−Ｇlyからなる群から選ばれ
るアミノ酸残基またはペプチド残基、並びにＹは−ＯＨ
または−ＮＨ₂を示す。）で表される新規なペプチドま
たはその塩が、上記した配列番号８〜１４で表されるペ
プチド並びにそれらの誘導体よりも一層強い神経細胞増
殖促進作用と神経軸索伸長作用を有し、しかも細胞毒性
が低く安全性に優れていることを見出した。

【０００９】そして、前記した新規なペプチドおよび／
またはその塩を基材に固定化したものは、末梢神経障
害、末梢ニューロパシーおよび局在ニューロパシーなど
の末梢神経系の疾患、アルツハイマー症、パーキンソン
症、ハンチントン症、筋萎縮性側索硬化症、シャイ−ド
レーガー（Ｓｈｙ−Ｄｒａｇｅｒ）症候群などの中枢神
経疾患を包含する神経疾患用の神経再生用材料として有
効であること、また脊椎疾患、頭部外傷や卒中などの脳
血管疾患のような外傷性疾患に対しても有効であるこ
と、さらに該新規なペプチドおよび／またはその塩を基
材に固定化したものを生体吸収性のチューブに充填する
と神経組織修復用の外科手術などに有効に用い得る神経
再生材が得られることを見出し、それらの種々の知見に
基づいて本発明を完成した。

【００１０】したがって、本発明は、下記の一般式
（Ｉ）；

【００１１】

【化３】 Ｘ−Ａ−Ｄ−Ｅ−Ｇ−Ｊ−Ｌ−Ｍ−Pro−Ｑ−Ｙ （Ｉ） （式中、Ｘは水素、ＣＨ₃−ＣＯ−およびＣＨ₃−ＣＯ−
Ｌys−からなる群から選ばれる基、ＡはＳerおよびＴhr
から選ばれるアミノ酸残基、ＤはＩle、ＶalおよびＬeu
からなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＥはＬysおよび
Ａrgから選ばれるアミノ酸残基、ＧはＩle、Ｖalおよび
Ｌeuからなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＪはＧlyお
よびＡlaから選ばれるアミノ酸残基、ＬはＩle、Ｖalお
よびＬeuからなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＭはＧ
lyおよびＡlaから選ばれるアミノ酸残基、ＱはＧly、Ａ
laおよびＧly−Ｌys−Ｌys−Ｇlyからなる群から選ばれ
るアミノ酸残基またはペプチド残基、並びにＹは−ＯＨ
または−ＮＨ₂を示す。）で表されるペプチド、配列番
号８で表されるペプチド、配列番号９で表されるペプチ
ド、配列番号１０で表されるペプチド、配列番号１１で
表されるペプチド、配列番号１２で表されるペプチド、
配列番号１３で表されるペプチド、配列番号１４で表さ
れるペプチドおよびそれらの塩から選ばれる少なくとも
１種を基材に固定化してあることを特徴とする神経再生
用材料である。

【００１２】そして、本発明は、配列番号１で表される
ペプチド、配列番号２で表されるペプチド、配列番号３
で表されるペプチド、配列番号４で表されるペプチド、
配列番号５で表されるペプチド、配列番号６で表される
ペプチド、配列番号７で表されるペプチド、配列番号８
で表されるペプチド、配列番号９で表されるペプチド、
配列番号１０で表されるペプチド、配列番号１１で表さ
れるペプチド、配列番号１２で表されるペプチド、配列
番号１３で表されるペプチド、配列番号１４で表される
ペプチドおよびそれらの塩の少なくとも１種を基材に固
定化してなる上記の神経再生用材料をその好ましい態様
として包含する。特に、本発明は、配列番号１で表され
るペプチド、配列番号２で表されるペプチド、配列番号
３で表されるペプチド、配列番号４で表されるペプチ
ド、配列番号５で表されるペプチド、配列番号６で表さ
れるペプチド、配列番号７で表されるペプチドおよびそ
れらの塩の少なくとも１種を基材に固定化してなる上記
の神経再生用材料をより好ましい態様として包含する。
そして、本発明の神経再生用材料では、上記したペプチ
ドを固定化する基材として、多糖類のゲルが好ましく用
いられ、その際の多糖類のゲルとしてはアルギン酸ゲル
がより好ましく用いられ、アルギン酸共有結合架橋ゲル
がさらに好ましく用いられる。

【００１３】さらに、本発明は、上記した本発明の神経
再生用材料を、生体吸収性の材料からなるチューブに充
填してなることを特徴とする神経再生材を包含する。

【００１４】

【発明の実施の形態】以下に本発明について詳細に説明
する。まず、本発明の神経再生用材料について説明す
る。本発明の神経再生用材料では、上記の一般式（Ｉ）
で表されるペプチド、配列番号８で表されるペプチド、
配列番号９で表されるペプチド、配列番号１０で表され
るペプチド、配列番号１１で表されるペプチド、配列番
号１２で表されるペプチド、配列番号１３で表されるペ
プチド、配列番号１４で表されるペプチドおよびそれら
の塩の少なくとも１種が基材に固定化されている。ここ
で、本発明でいう「神経再生用材料」とは、上記した特
定のペプチドおよび／またはその塩を基材に固定化した
状態で、神経細胞または神経組織の損傷、欠損などを含
む、中枢神経および／または末梢神経系の疾患、脊椎疾
患、頭部外傷、卒中などの脳血管疾患のような外傷性疾
患に対して用いる、治癒、接着、補強および／または再
生用の材料の総称である。

【００１５】本発明の神経再生用材料に用いる上記した
ペプチド類のうちで、前記の一般式（Ｉ）で表されるペ
プチドは、上記したように、本発明者らが初めて見出し
た新規なペプチドであって、該一般式（Ｉ）において、
Ｘは水素、ＣＨ₃−ＣＯ−およびＣＨ₃−ＣＯ−Ｌys−か
ら選ばれる基であり、ＡはＳerおよびＴhrから選ばれる
アミノ酸残基であり、ＤはＩle、ＶalおよびＬeuから選
ばれるアミノ酸残基であり、ＥはＬysおよびＡrgから選
ばれるアミノ酸残基であり、ＧはＩle、ＶalおよびＬeu
から選ばれるアミノ酸残基であり、ＪはＧlyおよびＡla
から選ばれるアミノ酸残基であり、ＬはＩle、Ｖalおよ
びＬeuから選ばれるアミノ酸残基であり、ＭはＧlyおよ
びＡlaから選ばれるアミノ酸残基であり、ＱはＧly、Ａ
laおよびＧly−Ｌys−Ｌys−Ｇlyから選ばれるアミノ酸
残基またはペプチド残基であり、そしてＹは−ＯＨおよ
び−ＮＨ₂から選ばれる基であることが必要である。
Ｘ、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍ、ＱおよびＹが前記し
た以外の基である場合は、神経細胞増殖促進作用、神経
軸索伸長作用などの生理活性が弱く、本発明の目的が達
成されない。

【００１６】上記の一般式（Ｉ）において、Ｘが水素ま
たはＣＨ₃−ＣＯ−であり且つＱがＧlyまたはＡlaの場
合は、左末端にＳer、アセチル化Ｓer、Ｔhrまたはアセ
チル化Ｔhrが結合し且つ右末端にＧly、アミド化Ｇly、
Ａlaまたはアミド化Ａlaが結合し、それらの間に上記し
たＤ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍのアミノ酸およびProが順次
結合してなる、合計９個のアミノ酸よりなる直鎖状のペ
プチドである。また、上記の一般式（Ｉ）において、Ｘ
がＣＨ₃−ＣＯ−Ｌys−であり且つＱがＧlyまたはＡla
の場合は、左末端にアセチル化Ｌｙｓが結合し且つ右末
端にＧly、アミド化Ｇly、Ａlaまたはアミド化Ａlaが結
合し、それらの間に上記したＡ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、
Ｍのアミノ酸およびProが順次結合してなる、合計１０
個のアミノ酸よりなる直鎖状ペプチドである。そして、
上記の一般式（Ｉ）において、Ｘが水素またはＣＨ₃−
ＣＯ−であり且つＱがＧly−Ｌys−Ｌys−Ｇlyの場合
は、左末端にＳer、アセチル化Ｓer、Ｔhrまたはアセチ
ル化Ｔhrが結合し且つ右末端にＧlyまたはアミド化Ｇly
が結合し、それらの間に上記したＤ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、
Ｍのアミノ酸、Pro、Ｇly、ＬysおよびＬysが順次結合
してなる、合計１２個のアミノ酸よりなる直鎖状のペプ
チドである。また、上記の一般式（Ｉ）において、Ｘが
ＣＨ₃−ＣＯ−Ｌys−であり且つＱがＧly−Ｌys−Ｌys
−Ｇlyの場合は、左末端に左末端にアセチル化Ｌｙｓが
結合し且つ右末端にＧlyまたはアミド化Ｇlyが結合し、
それらの間に上記したＡ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍのア
ミノ酸、Pro、Ｇly、ＬysおよびＬysが順次結合してな
る、合計１３個のアミノ酸よりなる直鎖状のペプチドで
ある。

【００１７】本発明の神経再生用材料は、上記した一般
式（Ｉ）で表されるペプチド、配列番号８で表されるペ
プチド、配列番号９で表されるペプチド、配列番号１０
で表されるペプチド、配列番号１１で表されるペプチ
ド、配列番号１２で表されるペプチド、配列番号１３で
表されるペプチド、配列番号１４で表されるペプチドお
よびそれらの塩の少なくとも１種を基材に固定化したも
のであればいずれでもよく、そのうちでも一般式（Ｉ）
で表されるペプチドを基材に固定化したものであること
が好ましい。

【００１８】限定されるものではないが、本発明の神経
再生用材料において基材に固定化して用いるペプチドの
具体例としては、下記の（１）〜（１４）のペプチドを
挙げることができる（但し以下の式中、「Ａｃ」はアセ
チル基を意味する）。 （１）配列番号１で表されるペプチド（Ａｃ−Ｌys−Ｓ
er−Ｉle−Ａrg−Ｖal−Ａla−Ｖal−Ａla−Ｐro−Ｇl
y）。 （２）配列番号２で表されるペプチド（Ｓer−Ｉle−Ａ
rg−Ｉle−Ａla−Ｉle−Ａla−Ｐro−Ｇly）。 （３）配列番号３で表されるペプチド（Ａｃ−Ｓer−Ｖ
al−Ａrg−Ｖal−Ａla−Ｖal−Ａla−Ｐro−Ｇly）。 （４）配列番号４で表されるペプチド（Ｔhr−Ｉle−Ｌ
ys−Ｖal−Ａla−Ｖal−Ａla−Ｐro−Ｇly）。 （５）配列番号５で表されるペプチド（Ａｃ−Ｌys−Ｓ
er−Ｉle−Ａrg−Ｉle−Ａla−Ｉle−Ａla−Ｐro−Ｇl
y）。 （６）配列番号６で表されるペプチド（Ｓer−Ｉle−Ａ
rg−Ｖal−Ａla−Ｖal−Ａla−Ｐro−Ｇly−Ｌys−Ｌys
−Ｇly）。 （７）配列番号７で表されるペプチド（Ａｃ−Ｌys−Ｓ
er−Ｉle−Ａrg−Ｖal−Ｇly−Ｖal−Ｇly−Ｐro−Ｇl
y）。

【００１９】（８）配列番号８で表されるペプチド（Ａ
la−Ｇly−Ｔyr−Ｌys−Ｐro−Ａsp−Ｇlu−Ｇly−Ｌys
−Ａrg−Ｇly−Ａsp−Ａla−Ｃys−Ｇlu−Ｇly−Ａsp−
Ｓer−Ｇly−Ｇly−Ｐro−Ｐhe−Ｖal）。 （９）配列番号９で表されるペプチド（Ｃys−Ｌeu−Ａ
sn−Ｇly−Ｇly−Ｖal−Ａla−Ｍet−Ｈis−Ｉle−Ｇlu
−Ｓer−Ｌeu−Ａsp−Ｓer−Ｔyr−Ｔhr−Ｃys）。 （１０）配列番号１０で表されるペプチド（Ｓer−Ｉle
−Ｌys−Ｖal−Ａla−Ｖal）。 （１１）配列番号１１で表されるペプチド（Ａｃ−Ｌys
−Ｓer−Ｉle−Ｌys−Ｖal−Ａla−Ｖal）。 （１２）配列番号１２で表されるペプチド（Ａsn−Ｐro
−Ｇly−Ａla−Ｓer−Ａla−Ａla−Ｐro−Ｃys−Ｃys−
Ｖal−Ｐro−Ｇln−Ａla−Ｌeu−Ｇlu）。 （１３）配列番号１３で表されるペプチド（Ｖal−Ｇly
−Ｖal−Ａla−Ｐro−Ｇly）。 （１４）配列番号１４で表されるペプチド（Ａｃ−Ｌys
−Ｖal−Ｇly−Ｖal−Ａla−Ｐro−Ｇly）。

【００２０】上記した（１）〜（１４）のペプチドのう
ちで、上記（１）〜（７）のペプチド（配列番号１〜配
列番号７のペプチド）は、強い神経細胞増殖促進作用お
よび神経軸索伸長作用を有し、神経の再生などに極めて
有効に作用するので、本発明の神経再生用材料において
特に好ましく用いられる。

【００２１】本発明の神経再生用材料では上記したペプ
チドの生理学的に許容される塩を用いてもよく、例え
ば、上記したペプチドと、塩酸、硫酸、リン酸などの無
機酸との塩；乳酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、シ
ュウ酸、リンゴ酸、クエン酸、オレイン酸、パルミチン
酸などの有機酸との塩；ナトリウム、カリウムなどのア
ルカリ金属、カルシウムなどのアルカリ土類金属、アル
ミニウムなどの金属の水酸化物または炭酸塩との塩；ト
リエチルアミン、ベンジルアミン、ジエタノールアミ
ン、ｔ−ブチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、アル
ギニンなどの有機塩基との塩などを挙げることができ
る。それらの塩は、上記したペプチドに対して通常の塩
形成反応を利用することにより得ることができる。

【００２２】本発明の神経再生用材料では、ペプチドを
固定化するための基材として、生体吸収性を有する基材
であればいずれも使用でき、具体例としては、アルギン
酸、架橋アルギン酸、キチン、キトサン、ヒアルロン
酸、架橋ヒアルロン酸、セルロース、デンプン、架橋デ
ンプンおよびこれらの誘導体などの多糖類；ゼラチン、
架橋ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、フィブリン、ア
ルブミンなどの蛋白質；ポリアスパラギン酸、ポリグル
タミン酸、ポリリジンなどのポリペプチド；ポリグリコ
ール酸、ポリ乳酸、ポリグリコール酸／ポリ乳酸共重合
体などを挙げることができる。これらのうちでも、基材
としては、前記した多糖類またはそれを架橋してなるゲ
ルが好ましく用いられる。そして多糖類のゲルのうちで
も、アルギン酸のゲル（架橋アルギン酸）がより好まし
く用いられ、アルギン酸を共有結合により架橋したアル
ギン酸共有結合架橋ゲルが特に好ましく用いられる。

【００２３】本発明において、神経再生用材料の基材と
して好ましく用いられるアルギン酸共有結合架橋ゲルの
製法は特に制限されないが、一般にはアルギン酸の水溶
性塩を架橋剤を用いて架橋することにより製造できる。
アルギン酸共有結合架橋ゲルの原料であるアルギン酸の
水溶性塩は市販品として入手可能である。アルギン酸の
水溶性塩としては、得られるゲルの強度の点から、アル
ギン酸ナトリウム塩の形態で濃度１重量％の水溶液にし
たときに、該水溶液の２０℃での粘度が１００センチポ
イズ（ｃｐ）以上であるものが好ましく用いられ、３０
０ｃｐ以上であるものがより好ましく用いられる。しか
しながら、アルギン酸の水溶性塩の水溶液の粘度が高す
ぎるものでは、水への溶解に時間を要し、アルギン酸共
有結合架橋ゲルの製造時の操作性が悪くなるので、アル
ギン酸ナトリウム塩の形態で濃度１重量％の水溶液とし
たときに該水溶液の２０℃での粘度が１２００ｃｐ以下
のものを使用することが好ましい。１重量％水溶液の２
０℃での粘度が前記した１００〜１２００ｃｐの範囲に
なるようなアルギン酸の水溶性塩を形成するアルギン酸
は、一般に約１０万〜１０００万程度の分子量を有して
いる場合が多い。

【００２４】アルギン酸共有結合架橋ゲルの製造に用い
られる架橋剤としては、ジアミン類の塩が好ましく用い
られ、具体例としては、ジアミノエタン、ジアミノプロ
パン、ジアミノブタン、ジアミノペンタン、ジアミノヘ
キサン、ジアミノヘプタン、ジアミノオクタン、ジアミ
ノノナン、ジアミノデカン、ジアミノドデカン、ジアミ
ノオクタデカンなどのジアミノアルカン類の塩、Ｎ−
（リジル）−ジアミノエタン、Ｎ，Ｎ’−ジ（リジル）
−ジアミノエタン、Ｎ−（リジル）−ジアミノヘキサ
ン、Ｎ，Ｎ’−ジ（リジル）−ジアミノヘキサンなどの
モノまたはジ（リジル）ジアミノアルカン類の塩などを
挙げることができる。そのうちでも、ジアミノエタンの
２Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩、ジアミノヘキサン
の２Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩、Ｎ，Ｎ’−ジ
（リジル）−ジアミノエタンの４Ｎ−ヒドロキシコハク
酸イミド塩、Ｎ−（リジル）−ジアミノヘキサンの３Ｎ
−ヒドロキシコハク酸イミド塩などが好ましく用いられ
る。

【００２５】上記の架橋剤によるアルギン酸の架橋反応
は、水溶性カルボジイミドなどの脱水縮合剤を用いて行
うことができる。架橋率（架橋剤のアルギン酸に対する
反応率）は、用いる架橋剤のアルギン酸に対するモル比
で制御することができ、該モル比を低くすると、柔軟で
含水率の高いゲルが得られ、モル比を高くすると、強固
で含水率の低いゲルが得られる。架橋率は所望により適
宜選択されるが、架橋率が低すぎると、ゲルの強度が低
くなり、架橋率が高すぎると、架橋剤が未反応のままゲ
ル中に残る可能性があることから、架橋率としては、ア
ルギン酸が有するカルボキシル基の内１〜５０モル％の
カルボキシル基が架橋剤と反応していることが好まし
く、１０〜４０モル％のカルボキシル基が架橋剤と反応
していることがより好ましい。このようにして得られる
アルギン酸共有結合架橋ゲルは、それ自体で実用的な強
度と安定性を示すが、必要に応じて、共有結合架橋と共
にイオン結合架橋、疎水結合架橋などの他の架橋が施さ
れていてもよい。

【００２６】アルギン酸共有結合架橋ゲルは含水率が高
く、しかも多糖類であることから免疫原性が低く、生体
との親和性および安全性に優れる。しかも、アルギン酸
共有結合架橋ゲルの製造に用いられる上記した架橋剤の
原料は一般に生体に投与可能な化合物であることから、
架橋剤の原料が生体内に残存した場合でも吸収と排泄が
容易に行われて安全性が高い。

【００２７】本発明において、神経再生用材料の基材と
してアルギン酸共有結合架橋ゲルなどの多糖類のゲルを
用いる場合は、多糖類のゲルは、水で膨潤した状態（含
水ゲル）であっても、水で膨潤する前の乾燥した状態
（含水性ゲル）であっても、または水で完全には膨潤し
ていないが水を多少含んだ状態であってもよい。

【００２８】本発明の神経再生用材料では、必要に応じ
て、含水率のコントロール、粘着性の付与などの目的
で、ナトリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウ
ムイオンなどの金属イオン類、エチレングリコール、プ
ロピレングリコール、グリセリン、ポリエチレングリコ
ールなどの多価アルコール類、ポリビニルアルコール、
ポリアクリル酸などの高分子化合物などの薬理学的に許
容される添加剤を基材に含有または付着させておくこと
ができる。さらに、本発明の神経再生用材料では、必要
に応じて、消毒剤、抗生剤、抗菌剤、アクトシン、ＰＧ
Ｅ₁などの血行改善剤、ＴＧＦβ、ＰＤＧＦ、ＦＧＦな
どの増殖因子、ウリナスタチン、ＴＩＭＰなどの酵素阻
害剤、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤、フィブリ
ン、コラーゲンなどの構造蛋白質などの薬剤や生理活性
物質などを基材に含有または付着させておいてもよい。

【００２９】ペプチドを固定化するための基材の形態は
特に制限されず、例えば、スポンジ状、フィルム状、シ
ート状、マット状、不織布状、織布状、編布状、網状、
繊維状、ペレット状、小塊状、大塊状、粉末状、粒子
状、管状、線状などの任意の形態にしておくことができ
る。

【００３０】上記したペプチドおよび／またはその塩を
基材に固定化する方法は特に制限されず、ペプチドおよ
び／またはその塩の生理活性が失われず、しかもペプチ
ドおよび／またはその塩が基材から離れずに固定化され
得る方法であればいずれの方法で固定化してもよい。基
材の種類やペプチドの種類などに応じて好ましい固定化
方法は異なり得るが、例えばＮ−ヒドロキシコハク酸イ
ミドを用いる活性エステル法、水溶性カルボジイミドを
用いる直接縮合法などが好ましく採用される。また、基
材へのペプチドおよび／またはその塩の固定化量は、神
経再生用材料の用途、基材の種類、基材の形状や構造、
神経再生用材料が用いられる患部の状態などに応じて、
種々調節することができる。

【００３１】上記したペプチドおよび／またはその塩を
基材に固定化してなる本発明の神経再生用材料を、生体
吸収性の材料からなるチューブに充填した神経再生材
は、神経組織の再生などを行うための外科手術などにお
いて良好な操作性で便利に使用することができる。本発
明の神経再生材を形成するためのチューブとしては、生
体吸収性であって且つ生理学的に許容され得る材料から
形成されたチューブであればいずれも使用できる。該チ
ューブの形成に用い得る材料の具体例としては、アルギ
ン酸、キチン、キトサン、ヒアルロン酸、架橋ヒアルロ
ン酸、セルロース、デンプン、架橋デンプンおよびこれ
らの誘導体などの多糖類；ゼラチン、架橋ゼラチン、コ
ラーゲン、カゼイン、フィブリン、アルブミンなどの蛋
白質；ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、ポリリ
ジンなどのポリペプチド；ポリグリコール酸、ポリ乳
酸、ポリグリコール酸／ポリ乳酸共重合体、グリコール
酸／カーボネート共重合体、ポリジオキサノン、シアノ
アクリレート系重合体などの合成高分子材料；水酸アパ
タイト、リン酸三カルシウム、炭酸カルシウムなどの無
機材料などを挙げることができる。そのうちでも、ポリ
グリコール酸、ポリ乳酸、ポリグリコール酸／ポリ乳酸
共重合体などの合成高分子材料からなるチューブが、安
定性、柔軟性、透明性、耐熱性、耐湿熱性、強度などの
点で優れていることから、好ましく用いられる。

【００３２】神経再生用材料を充填するチューブは両方
の端部が開口していることが好ましい。また、チューブ
の形態は特に制限されず、例えば、生体吸収性で且つ生
理的に許容し得る上記した物質からなる不織布、織布、
編布、フェルト、網体、フィルム、シート、マット、ス
ポンジなどを用いて管状に形成したもの、生体吸収性で
且つ生理的に許容し得る上記した物質を中空紡糸または
管状押出成形などによって直接管状に形成したものなど
を挙げることができる。チューブの内径、厚さ、長さな
どは特に制限されず、神経再生用材料を充填してなるチ
ューブからなる神経再生材の用途、神経再生用材料が用
いられる患部の状態、外科手術の方法などに応じて種々
調節することができる。チューブの内径としては、通常
０．５〜２０ｍｍの範囲内であり、外科手術などにおけ
る使用のしやすさなどの点から、１〜１０ｍｍの範囲内
であるのが好ましく、２〜５ｍｍの範囲内であるのがよ
り好ましい。チューブの厚さとしては、０．１〜１ｍｍ
の範囲内であるのが好ましく、０．１〜０．５ｍｍの範
囲内であるのがより好ましい。

【００３３】本発明の神経再生用材料で用いる上記の一
般式（Ｉ）で表されるペプチド、特に配列番号１〜配列
番号７で表されるペプチド、および配列番号８〜１４で
表されるペプチドの製造法は特に制限されず、ペプチド
を合成する従来既知の方法と同様にして製造することが
でき、例えば固相合成法、液相合成法などによって合成
することができ、そのうちでも固相合成法が操作が簡便
であるなどの点から好ましく用いられる。何ら限定され
るものではないが、ペプチドの固相合成法に関しては、
例えば、日本生化学学会編「続生化学実験講座２ タン
パク質の化学（下）」 第６４１〜６９４頁（昭和６２
年５月２０日；株式会社東京化学同人発行）などに記載
されている。

【００３４】例えば、固相合成法によって本発明で用い
るペプチドを製造する場合は、反応溶媒に不溶性なスチ
レン−ジビニルベンゼン共重合体などの樹脂に目的とす
るペプチドのカルボキシル末端に対応するアミノ酸をそ
れが有するα−カルボキシル基を介して結合させ、次い
で該アミノ酸に目的とするペプチドのアミノ末端の方向
に向かって、対応するアミノ酸またはペプチド断片を該
アミノ酸またはペプチド断片が有するα−カルボキシル
基以外のα−アミノ基などの官能基を保護したうえで縮
合させて結合させる操作と、該結合したアミノ酸または
ペプチド断片におけるα−アミノ酸などのペプチド結合
を形成するアミノ基が有する保護基を除去する操作とを
順次繰り返すことによってペプチド鎖を伸長させ、目的
とするペプチドに対応するペプチド鎖を形成し、次いで
該ペプチド鎖を樹脂から脱離させ、かつ保護されている
官能基から保護基を除去して目的とするペプチドを得、
それを精製する方法などを採用できる。その際に、樹脂
からのペプチド鎖の脱離および保護基の除去は、トリフ
ルオロ酢酸を用いて同時に行うのが副反応を抑制できる
点から好ましい。また、得られたペプチドの精製は、例
えば、逆相液体クロマトグラフィーによって好ましく行
われる。

【００３５】本発明の神経再生用材料および神経再生材
で用いる上記の一般式（Ｉ）で表されるペプチド、配列
番号８〜１４で表されるペプチドおよびそれらの塩は、
強い細胞増殖促進作用、神経軸索伸長作用を有し且つ低
毒性であることが、生理活性試験および毒性試験によっ
て確認されている。

【００３６】

【実施例】以下に実施例などによって本発明について具
体的に説明するが、本発明はそれにより何ら限定される
ものではない。

【００３７】《製造例１》 ［配列番号１で表されるペプチド（Ａｃ−Ｌys−Ｓer−
Ｉle−Ａrg−Ｖal−Ａla−Ｖal−Ａla−Ｐro−Ｇly）の
製造］ （１） ４−ヒドロキシメチル−フェノキシ−メチル基
を０．８９ミリモル／ｇ（樹脂）の割合で有するスチレ
ン／ジビニルベンゼン共重合体（９９／１モル比）から
なる粒状樹脂（米国アプライド・バイオシステムズ社製
「ＨＭＰレジン」）０．２５ミリモルを用い、目的とす
るペプチドのカルボキシル末端からアミノ末端に向かっ
て順次対応するアミノ酸を結合させて、配列番号１で表
されるペプチドを合成した。その際に、上記合成反応
（結合反応）では、原料アミノ酸として、米国アプライ
ド・バイオシステムズ社製のＮα−（フルオレニルメト
キシカルボニル）−Ｌ−アラニン（Ｆｍｏｃアラニ
ン）、Ｎα−９−（フルオレニルメトキシカルボニル）
−グリシン（Ｆｍｏｃグリシン）、Ｎα−（フルオレニ
ルメトキシカルボニル）−Ｎｇ−メトキシ−２，３，６
−トリメチルベンゼンスルホニル−Ｌ−アルギニン（Ｆ
ｍｏｃアルギニン）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカ
ルボニル）−Ｌ−プロリン（Ｆｍｏｃプロリン）、Ｎα
−（フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｌ−バリン
（Ｆｍｏｃバリン）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカ
ルボニル）−イソロイシン（Ｆｍｏｃイソロイシン）、
Ｎα−（フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｎε−
（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン（Ｆｍｏｃリ
ジン）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカルボニル）−
Ｏ−（ｔ−ブチル）−Ｌ−セリン（Ｆｍｏｃセリン）
を、それぞれ１ミリモル用いた。

【００３８】（２） 上記（１）で得られたペプチド−
樹脂に、ＤＭＦ中で無水酢酸０．９６Ｍを、トリエチル
アミン３２．６ｍＭ 下で３時間反応させ、アセチル化
を行った。 （３） 上記（２）で得られたペプチド−樹脂に、５％
の水、５％のチオアニソール、７．５％のフェノール、
２．５％のエタンジチオールを含むトリフルオロ酢酸１
０ｍｌを添加して６時間処理して、ペプチドの保護基の
脱離と、固相（樹脂）からのペプチド脱離を行った。そ
れによって生成した溶液をジエチルエーテルに加えてペ
プチドを沈殿させ、生成した沈殿をジエチルエーテルで
数回洗浄して、粗生成物（粗製ペプチド）を得た。 （４） 上記（３）で得られた粗生成物を、分取用高速
液体クロマトグラフィー（カラム：デルタパックＣ１８
４７×３００ｍｍ プレップパック１０００加圧モジ
ュール付）（ミリポア・ウォーターズ社製）で精製し、
それにより得られた精製ペプチドを、分析用高速液体ク
ロマトグラフィー（島津製作所製「ＬＣ６Ａ」、カラ
ム：東ソー株式会社製「ＴＳＫｇｅｌ ＯＤＳ−８０Ｔ
Ｍ ＣＴＲ、移動相：トリフルオロ酢酸を０．０５容量
％含有するアセトニトリルと水の混合溶媒）に付し、ア
セトニトリル濃度を３０分間で５容量％から５０容量％
に徐々に変化させたところ、１４．４分の位置に単一の
ピークが示された。ＦＡＢ法マススペクトルにより求め
た精製ペプチドの分子量は１０３９であり（分子量の理
論値＝１０３９．１８）、配列番号１で表されるペプチ
ドであることが確認された。

【００３９】《製造例２〜７》 ［配列番号２〜配列番号７で表されるペプチドの製造］
製造例１と同様にして合成反応（結合反応）を行って、
配列番号２で表されるペプチド、配列番号３で表される
ペプチド、配列番号４で表されるペプチド、配列番号５
で表されるペプチド、配列番号６で表されるペプチドお
よび配列番号７で表されるペプチドをそれぞれ合成し
た。それにより得られた配列番号３、５および７のペプ
チドについて、実施例１と同様にしてアセチル化および
保護基の脱離と固相（樹脂）からの脱離を行って粗生成
物（粗製ペプチド）を得て、それを精製した。また、配
列番号２、４および６のペプチドは、アセチル化を行わ
ず、保護基の脱離と固相（樹脂）からの脱離を行って粗
生成物（粗製ペプチド）を得て、それを精製した。それ
ぞれの精製ペプチドについて、製造例１と同様の分析用
高速液体クロマトグラフィーを行ったときの溶出時間、
およびＦＡＢ法マススペクトル測定により求めた分子量
は、下記の表１に示すとおりであった。なお、その際
に、製造例２〜３（配列番号２〜配列番号３で表される
ペプチドの合成）および製造例５〜７（配列番号５〜配
列番号７で表されるペプチドの合成）では、原料アミノ
酸として、製造例１で使用した原料アミノ酸のうちから
各々のペプチドの合成に必要なアミノ酸を選んで用い
た。また、製造例４（配列番号４で表されるペプチドの
合成）では、製造例１で使用した原料アミノ酸のうちか
ら必要なアミノ酸を選んで用いると共に、米国アプライ
ド・バイオシステムズ社製のＮα−（フルオレニルメト
キシカルボニル）−Ｏ−（ｔ−ブチル）−Ｌ−トレオニ
ン(Ｆｍｏｃトレオニン)を更に使用した。

【００４０】《製造例８〜１４》 ［配列番号８〜配列番号１４で表されるペプチドの製
造］製造例１と同様にして合成反応（結合反応）を行っ
て、配列番号８で表されるペプチド、配列番号９で表さ
れるペプチド、配列番号１０で表されるペプチド、配列
番号１１で表されるペプチド、配列番号１２で表される
ペプチド、配列番号１３で表されるペプチドおよび配列
番号１４で表されるペプチドをそれぞれ合成した。それ
により得られた配列番号１１および１４のペプチドにつ
いて、製造例１と同様にしてアセチル化および保護基の
脱離と固相からの脱離を行って粗生成物（粗製ペプチ
ド）を得て、それを精製した。また、配列番号８、９、
１０、１２および１３のペプチドは、アセチル化を行わ
ず、保護基の脱離と固相（樹脂）からの脱離を行って粗
生成物（粗製ペプチド）を得て、それを精製した。それ
ぞれの精製ペプチドについて、製造例１と同様の分析用
高速液体クロマトグラフィーを行ったときの溶出時間、
およびＦＡＢ法マススペクトル測定により求めた分子量
は、下記の表１に示すとおりであった。なお、その際
に、製造例１０〜１１（配列番号１０〜配列番号１１で
表されるペプチドの合成）および製造例１３〜１４（配
列番号１３〜配列番号１４で表されるペプチドの合成）
では、原料アミノ酸として、製造例１で使用した原料ア
ミノ酸のうちから各々のペプチドの合成に必要なアミノ
酸を選んで用いた。

【００４１】また、上記において、製造例８（配列番号
８で表されるペプチドの合成）では、製造例１で使用し
た原料アミノ酸のうちから必要なアミノ酸を選んで用い
ると共に、米国アプライド・バイオシステムズ社製のＮ
α−（フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｏ−（ｔ−
ブチル）−Ｌ−チロシン（Ｆｍｏｃチロシン）、Ｎα−
（フルオレニルメトキシカルボニル）−β−（ｔ−ブチ
ルオキシ）−Ｌ−アスパラギン酸（Ｆｍｏｃアスパラギ
ン酸）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカルボニル）−
γ−（ｔ−ブチルオキシ）−Ｌ−グルタミン酸（Ｆｍｏ
ｃグルタミン酸）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカル
ボニル）−Ｓ−トリチル−Ｌ−システイン（Ｆｍｏｃシ
ステイン）、およびＮα−（フルオレニルメトキシカル
ボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（Ｆｍｏｃフェニルア
ラニン）を更に使用した。

【００４２】また、上記において、製造例９（配列番号
９で表されるペプチドの合成）では、製造例１で使用し
た原料アミノ酸のうちから必要なアミノ酸を選んで用い
ると共に、米国アプライド・バイオシステムズ社製のＮ
α−（フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｓ−トリチ
ル−Ｌ−システイン（Ｆｍｏｃシステイン）、Ｎα−
（フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン
（Ｆｍｏｃロイシン）、Ｎα−（フルオレニルメトキシ
カルボニル）−Ｌ−アスパラギン（Ｆｍｏｃアスパラギ
ン）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｌ
−メチオニン（Ｆｍｏｃメチオニン）、Ｎα−（フルオ
レニルメトキシカルボニル）−Ｎ^1M−トリチル−Ｌ−ヒ
スチジン（Ｆｍｏｃヒスチジン）、Ｎα−（フルオレニ
ルメトキシカルボニル）−γ−（ｔ−ブチルオキシ）−
Ｌ−グルタミン酸（Ｆｍｏｃグルタミン酸）、Ｎα−
（フルオレニルメトキシカルボニル）−β−（ｔ−ブチ
ルオキシ）−Ｌ−アスパラギン酸（Ｆｍｏｃアスパラギ
ン酸）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカルボニル）−
Ｏ−（ｔ−ブチル）−Ｌ−チロシン（Ｆｍｏｃチロシ
ン）、およびＮα−（フルオレニルメトキシカルボニ
ル）−Ｏ−（ｔ−ブチル）−Ｌ−トレオニン（Ｆｍｏｃ
トレオニン）を更に使用した。

【００４３】また、上記において、製造例１２（配列番
号１２で表されるペプチドの合成）では、製造例１で使
用した原料アミノ酸のうちから必要なアミノ酸を選んで
用いると共に、米国アプライド・バイオシステムズ社製
のＮα−（フルオレニルメトキシカルボニル）−Ｌ−ア
スパラギン（Ｆｍｏｃアスパラギン）、Ｎα−（フルオ
レニルメトキシカルボニル）−Ｓ−トリチル−Ｌ−シス
テイン（Ｆｍｏｃシステイン）、Ｎα−（フルオレニル
メトキシカルボニル）−Ｌ−グルタミン（Ｆｍｏｃグル
タミン）、Ｎα−（フルオレニルメトキシカルボニル）
−Ｌ−ロイシン（Ｆｍｏｃロイシン）、およびＮα−
（フルオレニルメトキシカルボニル）−γ−（ｔ−ブチ
ルオキシ）−Ｌ−グルタミン酸（Ｆｍｏｃグルタミン
酸）を更に使用した。

【００４４】

【表１】

【００４５】《製造例１５》 ［アルギン酸共有結合架橋ゲルの製造］ （１） ２．３ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＮ−ヒドロキシコ
ハク酸イミド（株式会社ペプチド研究所製）を酢酸エチ
ル１５０ｍｌに溶解し、この溶液に、０．６ｇ（１０ｍ
ｍｏｌ）のエチレンジアミン（和光純薬株式会社製）を
酢酸エチル１０ｍｌに溶解した溶液を撹拌しながら室温
下に滴下し、滴下終了後さらに１時間撹拌を続けた。析
出した結晶を濾取し、減圧下に乾燥してエチレンジアミ
ン２Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩２．９ｇ（収率１
００％）を得た。 （２） アルギン酸ナトリウム（和光純薬株式会社製）
の１重量％水溶液（粘度５００〜６００ｃｐ）の５００
ｍｌ(カルボキシル基；２７５ｍｍｏｌ)に、上記（１）
で得られたエチレンジアミン２Ｎ−ヒドロキシコハク酸
イミド塩２．４２ｇ（８．５ｍｍｏｌ）と、１−エチル
−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
塩酸塩(株式会社ペプチド研究所製)１７.６ｇ(９２ｍｍ
ｏｌ）を添加して溶解し、それにより得られた溶液をテ
フロン被覆アルミ製トレイ（１５ｃｍ×２５ｃｍ）に流
延し、室温下に静置して、約５１時間後に含水ゲルを得
た。 （３） 上記（２）で得られた含水ゲルを、カルシウム
イオンとナトリウムイオンの濃度が細胞間質液における
のと同じ濃度（カルシウムイオン５ｍｅｑ、ナトリウム
イオン１４３ｍｅｑ）になるように、塩化カルシウムと
塩化ナトリウムを溶解した水溶液で十分に洗浄した後、
純水で十分に洗浄し、次いで凍結乾燥してスポンジ状の
アルギン酸共有結合架橋ゲル約５ｇを得た。

【００４６】《実施例１》 ［神経再生用材料の製造（アルギン酸共有結合架橋ゲル
への配列番号１で表されるペプチドの固定化）]上記の
製造例１５で得られたアルギン酸共有結合架橋ゲルの
０．１ｇをジメチルホルムアミドで洗浄してゲル中の水
分をジメチルホルムアミドで置換した後、Ｎ−ヒドロキ
シコハク酸イミド１．２ｍｇと１−エチル−３−（３−
ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩１．９
ｍｇを加えて、一晩振盪した。次いで、メタノールとジ
メチルホルムアミドで数回洗浄した後、上記の製造例１
で得られた配列番号１で表されるペプチド１０μｍｏｌ
とジイソプロピルエチルアミン１．７μｌを加えて、さ
らに一晩振盪してアルギン酸共有結合架橋ゲルにペプチ
ドを結合させた。これを、メタノールとエタノールで数
回洗浄した後、真空乾燥して、γ線滅菌（２５ｋＧｙ）
を施して、アルギン酸共有結合架橋ゲルに配列番号１で
表されるペプチドが固定化された神経再生用材料を製造
した。

【００４７】《実施例２〜１４》 ［神経再生用材料の製造（アルギン酸共有結合架橋ゲル
への配列番号２〜１４で表されるペプチドの固定化）]
配列番号１で表されるペプチドの代わりに、配列番号２
〜１４で表されるペプチドのそれぞれを用いた以外は実
施例１と同様にして、アルギン酸共有結合架橋ゲルに配
列番号２〜１４のそれぞれが固定化された神経再生用材
料を製造した。

【００４８】《比較例１》［神経再生用材料）] ペプチドの固定化されていないスポンジ状のコラーゲン
ゲル（Ｍatrigel Ｒ：Ｃollaborative Ｂiomedical Ｐr
oducts社製）をこの比較例１の神経再生用材料とした。

【００４９】《実施例１５》 ［神経再生材の製造(生体吸収性チューブへの神経再生
用材料の充填物の製造)]上記の実施例１で得られた神経
再生用材料（ペプチド固定化アルギン酸共有結合架橋ゲ
ル）の０．１ｇおよび蒸留水４ｍｌを試験管に入れ、３
７℃の恒温水槽中で１２時間振盪してゲル化させた。得
られたゲルを注射器に吸い取り、十分な長さのポリグリ
コール酸チューブ（内径約４ｍｍ、厚さ約０．３ｍｍ）
中に注射器で充填し、凍結乾燥して神経再生材（神経再
生用材料充填チューブ）を製造した。なお、前記の全て
の操作は滅菌条件下で行った。

【００５０】《実施例１６〜２８および比較例２》 ［神経再生材の製造(生体吸収性チューブへの神経再生
用材料の充填物の製造)]実施例１で得られた神経再生用
材料の代わりに、実施例２〜１４および比較例１で得ら
れた神経再生用材料のそれぞれを用いた以外は実施例１
５と同様にして神経再生材（神経再生用材料充填チュー
ブ）を製造した。

【００５１】《試験例１》 （１）神経再生材の移植手術（末梢神経再生実験）： （ｉ） 外科手術前に手術室内で、上記の実施例１５〜
２８および比較例２で得られた神経再生材（神経再生用
材料充填チューブ）の両端の余分な管を除去し、必要な
長さに調整した。 （ii） 各試験区ごとに５匹の猫を準備し（１〜１５試
験区）、各々の猫にケタラール２ｍｌを筋肉注射し、全
身麻酔を施した後、メスで座骨部を切開して座骨神経の
軸索を露出させ、定規で正確に測定して４５ｍｍの座骨
神経を切除した。 （iii） 前記（２）において座骨神経を切除した部分
に、上記（１）で準備した神経再生材を長さ５０ｍｍで
挿入し、その両端を１０−０ナイロン糸を用いて座骨神
経に縫合固定した。次いで、筋肉を数箇所および表皮を
数箇所縫合し、神経再生材の埋植および創の閉鎖を行っ
た。

【００５２】（２）末梢神経再生の評価：上記（１）の
手術後１３週目で、筋電図計（Ｎicolet Ｂiomedical
Ｉnstruments社製「Ｔhe Ｎicolet Ｖiking」）を使用
して、体性感覚誘発電位（ＳＥＰ）および誘発筋電図
（ＥＭＧ）を記録した。その際に、ＳＥＰは神経再生部
位よりも末梢の腓骨神経に電気刺激を加えて、それによ
り生じた誘発電位を大脳皮質で記録した。また、ＥＭＧ
は大脳皮質運動野に磁気刺激を加えて、神経再生部位よ
りも末梢の下腿の筋肉の筋電図を記録した。さらに、２
０週目に光学顕微鏡および電子顕微鏡を用いて組織の形
態学的評価を行った。

【００５３】（３）末梢神経再生の評価結果： （ｉ） 実施例１５〜２８で得られた本発明の神経再生
材（配列番号１〜１４で表されるペプチドを固定化した
アルギン酸共有結合架橋ゲルをチューブに充填したも
の）を埋植した試験区１〜１４の場合には、手術後１３
週目にすでにＳＥＰおよびＥＭＧが記録され、神経の再
生が行われていた。そのうちでも、実施例１５〜２１の
神経再生材（配列番号１〜７で表されるペプチドを固定
化したアルギン酸共有結合架橋ゲルをチューブに充填し
たもの）を埋植した試験区１〜７では、ＳＥＰおよびＥ
ＭＧ共に、その潜時は短く且つ電位が高くて、神経の再
生が良好であった。特に、実施例１５、１９および２１
の神経再生材（配列番号１で表されるペプチド、配列番
号５で表されるペプチドおよび配列番号７で表されるペ
プチドを固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲルをチュ
ーブに充填したもの）を埋植した試験区１、５および７
では、ＳＥＰおよびＥＭＧ共に、その潜時は一層短く且
つ電位が一層高かった。 （ii） 一方、比較例２で得られた神経再生材（コラー
ゲンゲルをチューブに充填したもの）を埋植した試験区
１５では、手術後１３週目にＳＥＰおよびＥＭＧが記録
されず、神経の再生が円滑に行われていなかった。

【００５４】（iii） ２０週目の標本では、実施例１
５〜２８で得られた本発明の神経再生材（配列番号１〜
１４で表されるペプチドを固定化したアルギン酸共有結
合架橋ゲルをチューブに充填したもの）を埋植した試験
区１〜１４の場合には、神経再生材を埋植した部分で有
髄軸索が数多く観察された。そのうちでも、実施例１５
〜２１の神経再生材（配列番号１〜７で表されるペプチ
ドを固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲルをチューブ
に充填したもの）を埋植した試験区１〜７では、より多
くの有髄軸索が観察され、特に実施例１５、１９および
２１の神経再生材（配列番号１で表されるペプチド、配
列番号５で表されるペプチドおよび配列番号７で表され
るペプチドを固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲルを
チューブに充填したもの）を埋植した試験区１、５およ
び７ではより一層多くの有髄軸索が観察された。 （iv） 一方、２０週目の標本において、比較例２で得
られた神経再生材（コラーゲンゲルをチューブに充填し
たもの）を埋植した試験区１５では、神経再生材を埋植
した部分で有髄軸索がほとんど観察されなかった。

【００５５】（ｖ） さらに、実施例１５〜２８で得ら
れた本発明の神経再生材（配列番号１〜１４で表される
ペプチドを固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲルをチ
ューブに充填したもの）を埋植した試験区１〜１４の場
合には、神経再生材の埋植部位よりも遠位部でもシュワ
ン細胞を伴う細い有髄軸索、無髄軸索が観察され、種々
の段階の再生軸索が混在していた。そのうちでも、実施
例１５〜２１の神経再生材（配列番号１〜７で表される
ペプチドを固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲルをチ
ューブに充填してもの）を埋植した試験区１〜７では、
より太い有髄軸索が数多く観察され、特に実施例１５、
１９および２１の神経再生材（配列番号１で表されるペ
プチド、配列番号５で表されるペプチドおよび配列番号
７で表されるペプチドを固定化したアルギン酸共有結合
架橋ゲルをチューブに充填したもの）を埋植した試験区
１、５および７では、一層より太く、より数多くの有髄
軸索が観察された。

【００５６】（vi） 上記の結果から、配列番号１〜１
４で表されるペプチドの各々を基材に固定化した実施例
１〜１４の神経再生用材料並びにそれを生体吸収性のチ
ューブに充填した実施例１５〜２８の神経再生材は、軸
索伸長作用を有すること、そのうちでも配列番号１〜７
で表されるペプチドの各々を基材に固定化した実施例１
〜７の神経再生用材料並びにそれを生体吸収性のチュー
ブに充填した実施例１５〜２１の神経再生材は軸索伸長
作用に優れること、特に配列番号１で表されるペプチ
ド、配列番号５で表されるペプチドおよび配列番号７で
表されるペプチドの各々を基材に固定化した実施例１、
５および７の神経再生用材料並びにそれを生体吸収性の
チューブに充填した実施例１５、１９および２１の神経
再生材は軸索伸長作用に一層優れること、それに対して
比較例１の神経再生用材料（コラーゲンゲル）およびそ
れを生体吸収性のチューブに充填した比較例２の神経再
生材は軸索伸長作用に劣っていることがわかる。

【００５７】《試験例２》 （１）神経再生用材料の移植手術（中枢神経再生実
験）： （ｉ） 上記の実施例１〜１４で得られた神経再生用材
料（配列番号１〜１４で表されるペプチドのそれぞれを
固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲル）および比較例
１の神経再生用材料（ペプチドの固定化されていないス
ポンジ状コラーゲンゲル）ごとに１０匹ずつの生後１０
日の幼若ラットを準備した（試験区１６〜３０）。 （ii） エーテル麻酔下に、顕微鏡下で胸椎のラミネク
トミーを行い、鋭利なメスを用いて、第８〜１０胸椎レ
ベルで脊髄に２ｍｍのギャップを作成し、実施例１〜１
４および比較例１で得られた神経再生用材料のそれぞれ
を充填（埋植）した後、骨を元に戻し、筋肉を数箇所お
よび皮膚を数箇所縫合して手術を終了した。

【００５８】（２）中枢神経再生の評価：上記（１）の
手術後９週目で、筋電図計（Ｎicolet Ｂiomedical Ｉn
struments社製「Ｔhe Ｎicolet Ｖiking」）を使用し
て、体性運動誘発電位（ＭＥＰ）および体性感覚誘発電
位（ＳＥＰ）を記録した。その際に、ＭＥＰは大脳皮質
運動野に電気刺激を加えて、それにより生じた誘発電位
を末梢の腓腹筋で記録した。また、ＳＥＰは下肢に電気
刺激を加えて、それにより生じた誘発電位をpostcrucia
te sensory cortex で記録した。さらに、１２週目に光
学顕微鏡および電子顕微鏡を用いて組織の形態学的評価
を行った。

【００５９】（３）中枢神経再生の評価結果： （ｉ） 実施例１〜１４で得られた本発明の神経再生用
材料（配列番号１〜１４で表されるペプチドのそれぞれ
を固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲル）を用いた試
験区１６〜２９では、いずれも、手術後９週目にすでに
ＭＥＰおよびＳＥＰが記録され、神経の再生されている
と評価された。そのうちでも、実施例１〜７の神経再生
用材料（配列番号１〜７で表されるペプチドのそれぞれ
を固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲル）を用いた試
験では、ＭＥＰおよびＳＥＰ共に、その潜時は短く且つ
電位が高くて、より正常に近い評価が得られた。特に、
実施例１、５および７の神経再生用材料材（配列番号
１、配列番号５および配列番号７で表されるペプチドの
それぞれを固定化したアルギン酸共有結合架橋ゲル）を
用いた試験では、ＭＥＰおよびＳＥＰ共に、その潜時は
一層短く且つ電位が一層高かった。 （ii） 一方、比較例１の神経再生用材料（ペプチドを
固定化してないスポンジ状コラーゲンゲル）を用いた試
験区３０では、手術後９週目にＭＥＰおよびＳＥＰが記
録されず、神経の再生が円滑に行われていなかった。

【００６０】（iii） １２週目の標本では、実施例１
〜１４で得られた本発明の神経再生用材料（配列番号１
〜１４で表されるペプチドのそれぞれを固定化したアル
ギン酸共有結合架橋ゲル）を用いた試験区１６〜２９で
は、神経再生用材料を埋植した部分で有髄軸索および無
髄軸索が数多く観察された。軸索はシュワン様細胞と１
対１の関係を持ち、厚いミエリン髄鞘を持っていた。そ
のうちでも、実施例１〜７の神経再生用材料を用いた試
験区１６〜２２では、より多くの有髄軸索および無髄軸
索が観察され、特に実施例１、５および７の神経再生用
材料を用いた試験区１６、２０および２２ではより一層
多くの有髄軸索および無髄軸索が観察された。 （iv） 一方、１２週目の標本において、比較例１の神
経再生用材料（ペプチドを固定化してないスポンジ状の
コラーゲンゲル）を用いた試験区３０では、神経再生用
材料を埋植した部分で有髄軸索および無髄軸索が共に観
察されず、軸索の伸長を妨げる多数の線維状の瘢痕組織
が観察された。

【００６１】（ｖ） 上記の結果から、配列番号１〜１
４で表されるペプチドのそれぞれを基材に固定化した実
施例１〜１４の神経再生用材料は、軸索伸長作用を有す
ること、そのうちでも配列番号１〜７で表されるペプチ
ドのそれぞれを基材に固定化した実施例１〜７の神経再
生用材料は軸索伸長作用に優れること、特に配列番号１
で表されるペプチド、配列番号５で表されるペプチドお
よび配列番号７で表されるペプチドのそれぞれを基材に
固定化した実施例１、５および７の神経再生用材料は軸
索伸長作用に一層優れること、それに対して比較例１の
神経再生用材料は軸索伸長作用に劣っていることがわか
る。

【００６２】

【発明の効果】上記の一般式（Ｉ）で表されるペプチ
ド、配列番号８〜１４で表されるペプチドおよび／また
はそれらの塩を基材に固定化してなる本発明の神経再生
用材料、並びに前記の神経再生用材料を生体吸収性チュ
ーブに充填してなる本発明の神経再生材は、神経細胞増
殖促進作用および神経軸索伸長作用を示し、安全性、生
体適合性などの点でも優れているため、神経細胞や神経
組織の損傷、欠損などによる中枢神経や末梢神経系の疾
患の治療、脊椎疾患、頭部外傷、卒中などの脳血管疾患
のような外傷性疾患などの治療に有効に用いることがで
きる。そのうちでも、一般式（Ｉ）で表されるペプチ
ド、特に配列番号１〜７で表されるペプチドおよび／ま
たはそれらの塩を基材に固定化してなる本発明の神経再
生用材料は、特に強い神経細胞増殖促進作用および神経
軸索伸長作用を有し、且つ安全性、生体適合性の点でも
優れているので、上記した種々の神経系疾患の治療に用
いる神経再生用材料として特に有用である。

【００６３】［配列表フリーテキスト］ 配列番号１ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号２ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号３ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号４ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号５ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号６ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号７ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号８ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号９ ：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号１０：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号１１：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号１２：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号１３：神経組織を再生する合成ペプチド。 配列番号１４：神経組織を再生する合成ペプチド。

【００６４】

【配列表】 ＳＥＱＵＥＮＣＥ ＬＩＳＴＩＮＧ 〈110〉 Kuraray Co., Ltd. 〈120〉 Artificial Nerve Guide． 〈130〉 PA0640 〈160〉 14 〈210〉 1 〈211〉 10 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈220〉 〈221〉 ACETYLATION 〈222〉 1 〈400〉 1 Lys Ser Ile Arg Val Ala Val Ala Pro Gly 5 10 〈210〉 2 〈211〉 9 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 2 Ser Ile Arg Ile Ala Ile Ala Pro Gly 5 〈210〉 3 〈211〉 9 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈220〉 〈221〉 ACETYLATION 〈222〉 1 〈400〉 3 Ser Val Arg Val Ala Val Ala Pro Gly 5 〈210〉 4 〈211〉 9 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 4 Thr Ile Lys Val Ala Val Ala Pro Gly 5 〈210〉 5 〈211〉 10 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈220〉 〈221〉 ACETYLATION 〈222〉 1 〈400〉 5 Lys Ser Ile Arg Ile Ala Ile Ala Pro Gly 5 10 〈210〉 6 〈211〉 12 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 6 Ser Ile Arg Val Ala Val Ala Pro Gly Lys Lys Gly 5 10 〈210〉 7 〈211〉 10 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈220〉 〈221〉 ACETYLATION 〈222〉 1 〈400〉 7 Lys Ser Ile Arg Val Gly Val Gly Pro Gly 5 10 〈210〉 8 〈211〉 23 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 8 Ala Gly Tyr Lys Pro Asp Glu Gly Lys Arg Gly Asp Ala Cys Glu Gly 5 10 15 Asp Ser Gly Gly Pro Phe Val 20 〈210〉 9 〈211〉 18 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 9 Cys Leu Asn Gly Gly Val Ala Met His Ile Glu Ser Leu Asp Ser Tyr 5 10 15 Thr Cys 〈210〉 10 〈211〉 6 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 10 Ser Ile Lys Val Ala Val 5 〈210〉 11 〈211〉 7 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈220〉 〈221〉 ACETYLATION 〈222〉 1 〈400〉 11 Lys Ser Ile Lys Val Ala Val 5 〈210〉 12 〈211〉 16 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 12 Asn Pro Gly Ala Ser Ala Ala Pro Cys Cys Val Pro Gln Ala Leu Glu 5 10 15 〈210〉 13 〈211〉 6 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈400〉 13 Val Gly Val Ala Pro Gly 5 〈210〉 14 〈211〉 7 〈212〉 PRT 〈213〉 Artificial Sequence 〈220〉 〈223〉 Synthesized peptide to regenerate nerve tissues. 〈220〉 〈221〉 ACETYLATION 〈222〉 1 〈400〉 14 Lys Val Gly Val Ala Pro Gly 5

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/00 ６４３ Ａ６１Ｋ 31/00 ６４３Ｃ (71)出願人 598156376 谷原 正夫 奈良県生駒市高山町8916−５ 奈良先端科 学技術大学院大学物質創成科学研究科内 (72)発明者 西村 善彦 京都府京都市左京区聖護院川原町54 京都 大学大学院医学研究科内 (72)発明者 鈴木 義久 京都府京都市左京区聖護院川原町54 京都 大学大学院医学研究科内 (72)発明者 谷原 正夫 奈良県生駒市高山町8916−５ 奈良先端科 学技術大学院大学物質創成科学研究科内 (72)発明者 橋本 正 岡山県倉敷市酒津1621番地 株式会社クラ レ内

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記の一般式（Ｉ）； 【化１】 Ｘ−Ａ−Ｄ−Ｅ−Ｇ−Ｊ−Ｌ−Ｍ−Pro−Ｑ−Ｙ （Ｉ） （式中、Ｘは水素、ＣＨ₃−ＣＯ−およびＣＨ₃−ＣＯ−
   Ｌys−からなる群から選ばれる基、ＡはＳerおよびＴhr
   から選ばれるアミノ酸残基、ＤはＩle、ＶalおよびＬeu
   からなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＥはＬysおよび
   Ａrgから選ばれるアミノ酸残基、ＧはＩle、Ｖalおよび
   Ｌeuからなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＪはＧlyお
   よびＡlaから選ばれるアミノ酸残基、ＬはＩle、Ｖalお
   よびＬeuからなる群から選ばれるアミノ酸残基、ＭはＧ
   lyおよびＡlaから選ばれるアミノ酸残基、ＱはＧly、Ａ
   laおよびＧly−Ｌys−Ｌys−Ｇlyからなる群から選ばれ
   るアミノ酸残基またはペプチド残基、並びにＹは−ＯＨ
   または−ＮＨ₂を示す。）で表されるペプチド、配列番
   号８で表されるペプチド、配列番号９で表されるペプチ
   ド、配列番号１０で表されるペプチド、配列番号１１で
   表されるペプチド、配列番号１２で表されるペプチド、
   配列番号１３で表されるペプチド、配列番号１４で表さ
   れるペプチドおよびそれらの塩から選ばれる少なくとも
   １種を基材に固定化してなることを特徴とする神経再生
   用材料。
2. 【請求項２】 配列番号１で表されるペプチド、配列番
   号２で表されるペプチド、配列番号３で表されるペプチ
   ド、配列番号４で表されるペプチド、配列番号５で表さ
   れるペプチド、配列番号６で表されるペプチド、配列番
   号７で表されるペプチド、配列番号８で表されるペプチ
   ド、配列番号９で表されるペプチド、配列番号１０で表
   されるペプチド、配列番号１１で表されるペプチド、配
   列番号１２で表されるペプチド、配列番号１３で表され
   るペプチド、配列番号１４で表されるペプチドおよびそ
   れらの塩から選ばれる少なくとも１種を基材に固定化し
   てなる請求項１に記載の神経再生用材料。
3. 【請求項３】 基材が多糖類のゲルからなるものである
   請求項１または２に記載の神経再生用材料。
4. 【請求項４】 多糖類のゲルがアルギン酸ゲルである請
   求項３に記載の神経再生用材料。
5. 【請求項５】 アルギン酸ゲルがアルギン酸共有結合架
   橋ゲルである請求項４に記載の神経再生用材料。
6. 【請求項６】 請求項１〜５のいずれか１項に記載の神
   経再生用材料を、生体吸収性の材料からなるチューブに
   充填してなることを特徴とする神経再生材。