JP2000053571A

JP2000053571A - 脳損傷の予防・治療剤

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Publication number: JP2000053571A
Application number: JP10224300A
Authority: JP
Inventors: Michiyasu Suzuki; 倫保鈴木; Takashi Sawai; 高志澤井
Original assignee: Mitsubishi Chemical Corp
Current assignee: Mitsubishi Chemical Corp
Priority date: 1998-08-07
Filing date: 1998-08-07
Publication date: 2000-02-22
Anticipated expiration: 2018-08-07
Also published as: JP4674339B2

Abstract

(57)【要約】【課題】脳損傷の予防・治療剤を提供する。【解決手段】 (2R,4R)-4-メチル-1-[N²((RS)-3-メチル
-1,2,3,4-テトラヒドロ-8-キノリンスルホニル)-L-アル
ギニル]-2-ピペリジンカルボン酸、その水和物、または
薬学的に許容されるそれらの塩を有効成分とする脳損傷
の予防・治療剤。【効果】本発明の脳損傷の予防・治療剤は、脳損傷部
位近傍において、多核白血球や単球系貪食細胞といった
炎症性細胞の集ぞくと、はん痕形成に関与していると考
えられるビメンチン陽性星状膠細胞の増殖を抑制する一
方、神経栄養因子を分泌すると言われるGFAP陽性星状膠
細胞には影響を与えない。このことは、本発明の脳損傷
の予防・治療剤は、脳損傷において炎症やはん痕による
二次的脳損傷を抑制し、また外傷性痙攣等の防止や、神
経再生を促進させる環境を作り出す可能性を示唆する。
従って本発明の脳損傷の予防・治療剤は、頭部外傷（脳
挫傷等）に伴う脳損傷、くも膜下出血に伴う脳損傷、脳
内出血に伴う脳損傷、開頭手術一般の術後脳損傷等の予
防および／または治療に有効であると考えられる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、特定のN²-アリールス
ルホニル-L-アルギニンアミド類、その水和物、または
薬学的に許容されるそれらの塩を有効成分とする、脳損
傷の予防・治療剤に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】頭部外
傷に対しては多くの治療が行われているが、脳挫傷に代
表される脳実質損傷に対しては、未だに病態をふまえた
有効な治療法は開発されていない。一方、脳組織損傷の
治療剤としては、従来高張輸液剤、メチルプレドニゾロ
ン、デキサメタゾン等のステロイドなどが使用されてい
る。

【０００３】しかしその作用機序は明らかではなく、腎
不全や高血糖などの副作用があり、近年その再検討が行
われ、効果については疑問視されているのが現状であ
る。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、脳損傷を
有効に予防・治療する薬剤を提供するべく検討を重ねて
きた結果、特定のN²-アリールスルホニル-L-アルギニン
アミド類、その水和物、または薬学的に許容されるそれ
らの塩が脳組織損傷における炎症性細胞の集ぞく、はん
痕形成に関与するビメンチン陽性星状膠細胞の増殖を抑
制することを初めて見出し、本発明を完成するに至っ
た。

【０００５】すなわち本発明の要旨は、下記式：

【０００６】

【化２】

【０００７】で示される(2R,4R)-4-メチル-1-[N²((RS)-
3-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-8-キノリンスルホニ
ル)-L-アルギニル]-2-ピペリジンカルボン酸、その水和
物、または薬学的に許容されるそれらの塩を有効成分と
する脳損傷の予防・治療剤に存する。

【０００８】

【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明薬剤の有効成分となる上記式の化合物は、特公昭
61-48829号、同 1-35000号公報等に記載されている通
り、公知の化合物である。従ってこの化合物は、特公昭
61-48829号、同 1-35000号公報等に記載の方法により、
容易に製造することができる。なお、上記の公告公報に
は、上記式の化合物がほ乳動物体内のトロンビンに対し
て特異性の高い阻害効果を有し、血栓症の治療および予
防、あるいは血小板凝集阻害剤として有用であることが
示唆されているが、この化合物が脳損傷の予防・治療剤
として有用であることについては、示唆ないし教示され
ていない。

【０００９】本発明の脳損傷の予防・治療剤の有効成分
としては、遊離形態の上記化合物を用いても良いが、そ
の任意の水和物もしくは溶媒和物、あるいは上記化合物
またはその任意の水和物もしくは溶媒和物の薬学的に許
容される塩を用いることもできる。本発明においては、
特に上記化合物の一水和物を用いることが好ましい。薬
学的に許容される塩としては、例えば、ナトリウム塩、
カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、アミン塩
等の塩基付加塩、あるいは塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ
化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の鉱酸塩、あ
るいは酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸
塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、
マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホ
ン酸塩、10-カンファースルホン酸塩等の有機酸塩を挙
げることができる。

【００１０】本発明の脳損傷の予防・治療剤の投与形態
は特に制限されず、経口的、非経口的に投与することが
できる。好ましくは、非経口的に、注射あるいは点滴等
により静脈内に投与すればよい。本発明の脳損傷の予防
・治療剤は、有効成分として上記式の化合物をそのまま
使用してもよいが、好ましくは、有効成分である上記式
の化合物に対して、適宜の薬理学的および製剤学的に許
容し得る添加物を加え、当業者に周知な形態の製剤とし
て提供される。薬理学的および製剤学的に許容し得る添
加物としては、例えば、賦形剤、崩壊剤ないし崩壊補助
剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、
基剤、溶解剤ないし溶解補助剤、等張化剤、pH調節剤、
安定化剤、噴射剤、および粘着剤等を用いることができ
る。

【００１１】経口投与に適する製剤の例としては、例え
ば、錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、
またはシロップ剤等を挙げることができる。非経口的に
投与する製剤としては、例えば、注射剤、点滴剤、坐
剤、吸入剤、または貼布剤等を挙げることができる。経
口投与、あるいは経皮または経粘膜投与に適する製剤に
は、薬理学的、製剤学的に許容し得る添加物として、例
えば、ブドウ糖、乳糖、D-マンニトール、デンプン、ま
たは結晶セルロース等の賦形剤；カルボキシメチルセル
ロース、デンプン、またはカルボキシメチルセルロース
カルシウム等の崩壊剤または崩壊補助剤；ヒドロキシプ
ロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス、ポリビニルピロリドン、またはゼラチン等の結合
剤；ステアリン酸マグネシウムまたはタルク等の滑沢
剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、白糖、ポリ
エチレングリコールまたは酸化チタン等のコーティング
剤；ワセリン、流動パラフィン、ポリエチレングリコー
ル、ゼラチン、カオリン、グリセリン、精製水、または
ハードファット等の基剤を用いることができる。また、
フロン、ジエチルエーテル、または圧縮ガス等の噴射
剤；ポリアクリル酸ナトリウム、ポリビニルアルコー
ル、メチルセルロース、ポリイソブチレン、ポリブテン
等の粘着剤；木綿布またはプラスチックシート等の基布
等の製剤用添加物を用いて製剤を製造しても良い。

【００１２】注射あるいは点滴用に適する製剤には、注
射用蒸留水、生理食塩水、プロピレングリコール等の水
性あるいは用時溶解型注射剤を構成し得る溶解剤または
溶解補助剤；ブドウ糖、塩化ナトリウム、D-マンニトー
ル、グリセリン等の等張化剤；無機酸、有機酸、無機塩
基または有機塩基等のpH調節剤等の製剤用添加物を添加
しても良い。

【００１３】なお、上記（Ｉ）式で表される化合物の
内、(2R,4R)-4-メチル-1-[N²((RS)-3-メチル-1,2,3,4-
テトラヒドロ-8-キノリンスルホニル)-L-アルギニル]-2
-ピペリジンカルボン酸一水和物を有効成分とする血
栓溶解剤（注射剤）が、既に臨床上使用されているので
（一般名「アルガトロバン」；商品名「ノバスタン」、
三菱化学株式会社製造、東京田辺製薬株式会社販売、ま
たは商品名「スロンノン」、三菱化学株式会社原体製
造、第一製薬株式会社製造販売）、本発明の脳損傷の予
防・治療剤として、上記市販製剤をそのまま使用するこ
ともできる。

【００１４】本発明の脳損傷の予防・治療剤の投与量は
特に制限されず、投与形態や、患者の年齢、脳組織損傷
の程度や症状、体重等の条件に応じて適宜選択すること
ができる。例えば静脈内投与の場合には、成人１日あた
り、有効成分量として0.1〜50mg/kg、好ましくは0.4〜
3mg/kgを投与すれば良い。本発明の脳損傷の予防・治療
剤は、脳損傷部位近傍において、多核白血球や単球系貪
食細胞といった炎症性細胞の集ぞくと、はん痕形成に関
与していると考えられるビメンチン陽性星状膠細胞の増
殖を抑制する一方、神経栄養因子を分泌すると言われる
glial fibrially acidic protein（GFAP）陽性星状膠細
胞には影響を与えない。このことは、本発明の脳損傷の
予防・治療剤は、脳損傷において炎症やはん痕による二
次的脳損傷を抑制し、また外傷性痙攣等の防止や、神経
再生を促進させる環境を作り出す可能性を示唆する。従
って本発明の脳損傷の予防・治療剤は、頭部外傷（脳挫
傷等）に伴う脳損傷、くも膜下出血に伴う脳損傷、脳内
出血に伴う脳損傷、開頭手術一般の術後脳損傷等の予防
および／または治療に有効であると考えられる。

【００１５】

【発明の効果】本発明の脳損傷の予防・治療剤は、単球
／マクロファージ、多核白血球等の炎症性細胞による脳
組織損傷を抑制することから、中枢神経の外傷のみなら
ず、炎症による組織損傷、脳浮腫等に対する治療薬とし
て有用である。

【００１６】

【実施例】次に、本発明を実施例によって更に具体的に
説明するが、本発明はその要旨を越えない限り以下の実
施例に限定されるものではない。実施例１８〜９週齢の雄性SDラット（体重約200-250g。実験群と
して41匹、対照群として24匹）を用いた。

【００１７】ペントバタール 50mg/kgで腹腔内麻酔を施
行し、自発呼吸下に剃毛、消毒後に頭部の皮膚を切開し
た。無菌操作にて、ブレグマから3.5mm右外側、0.2mm後
方に直径3.0mmの小開頭を設けた。顕微鏡下に硬膜を切
開後、深さ2.5mmの切創を皮質及び皮質下に加えた。ゼ
ラチン（商品名スポンゼル、山之内製薬(株)製）で止血
操作終了後、２mm³のゼラチンを切創部位に留置し、以
下の３種類の溶液を20μｌ滴下した。３種類の溶液は、
対照群を生理食塩水（以下、「生食群」と略）とし、治
療群としてのアルガトロバン生理食塩水希釈液（以下、
「アルガトロバン群」と略）の濃度は0.1μg/ml、0.5μ
g/mlとした。その後閉頭し、自発呼吸下に管理した。術
後１、３、５、７日後にペントバルビタール 50mg/kgで
腹腔内麻酔を施行後、10％ホルマリンにて潅流固定し、
脳を摘出した。摘出した脳は10％ホルマリンで24時間固
定し、脳の損傷部位を中心に厚さ１cmで冠状に切り出
し、パラフィン包埋した。パラフィンブロックから５μ
ｍでほぼ連続に近い状態で薄切し、ヘマトキシリン−エ
オジン（H.E.）染色および免疫染色を行った。

【００１８】免疫染色は抗ラット単球／マクロファージ
マウスモノクローナル抗体（ED１，1:500，Chemicon In
ternational Inc.）、抗ウシglial fibrially acidic p
rotein（GFAP）ウサギポリクローナル抗体（Z334，1:50
0，Dako A/S ）、抗ウシビメンチンモノクローナルマウ
ス抗体（Vim 3B4，1:100，Daok A/S）を使用し、それぞ
れの二次抗体を用いた後。ストレプトアビジン−ビオチ
ン（SAB）法（ニチレイ(株)社）にて行った。

【００１９】評価は、細胞の走化性、ケモキネシスの面
から創部に留置したゼラチンと創縁における細胞の種
類、さらに細胞数の時間経過を検討した。具体的には、
それぞれの部位に100μｍ×100μｍの関心領域を20ヶ所
設定し、1)多核白血球数、2)単球／マクロファージ陽性
細胞数、3)GFAP陽性星状膠細胞数、4)ビメンチン陽性星
状膠細胞数を生食群とアルガトロバン群の0.1μg/mlと
0.5μg/mlの２種類の濃度で創傷を与えてから、１、
３、５、７日目に比較検討した。

【００２０】結果は平均値±標準偏差（SD）で示し、フ
ィッシャーの多重比較検定法を用い、危険率５％以下を
有意と判定した。結果を表１〜表３に示す。

【００２１】

【表１】表１ ──────────────────────────────────── 生理食塩水（細胞数／日）１３５７ ──────────────────────────────────── PML(G) 982.0±366.7 1247.2±400.3 ００ Mo/MΦ(G) 3.0±4.0 28.3±12.0 137.4±66.4 304.8±75.3 PML(E) 54.8±25.7 ０００ Mo/MΦ(E) 5.6±7.1 596.7±52.5 624.8±153.3 535.8±126.0 GFAP(+)ast.(E) 20.8±5.3 58.5±8.7 77.2±13.7 94.8±18.1 vim.(+)ast.(E) 2.4±2.0 50.8±20.8 192.2±31.5 144.0±33.9 ────────────────────────────────────

【００２２】

【表２】表２ ──────────────────────────────────── アルガトロバン 0.1μg/ml （細胞数／日）１３５７ ──────────────────────────────────── PML(G) 573.8±135.9** 492.0±105.5** ００ Mo/MΦ(G) 1.0±1.4 15.4±5.4 64.8±29.3* 207.2±56.0* PML(E) 32.4±8.2* ０００ Mo/MΦ(E) 1.4±1.1 316.2±104.4** 387.4±64.1** 340.6±114.4* GFAP(+)ast.(E) 18.6±7.2 57.5±9.0 74.0±18.1 89.6±17.4 vim.(+)ast.(E) 1.4±1.6 28.2±16.1* 107.0±24.9** 78.4±28.9** ────────────────────────────────────

【００２３】

【表３】表３ ──────────────────────────────────── アルガトロバン 0.5μg/ml （細胞数／日）１３５７ ──────────────────────────────────── PML(G) 481.4±59.3** 558.4±87.3** ００ Mo/MΦ(G) 1.6±1.8 16.2±6.6 66.2±30.4* 231.8±53.5* PML(E) 26.6±16.8* ０００ Mo/MΦ(E) 0.8±0.8 365.0±133.3** 327.0±75.2** 368.8±96.0* GFAP(+)ast.(E) 18.2±6.6 55.0±12.3 75.3±10.0 86.0±10.7 vim.(+)ast.(E) 1.0±0.7 20.8±10.2* 109.4±17.9** 89.6±31.1* ──────────────────────────────────── 上記表中、PML(G)、Mo/MΦ(G)、PML(E)、Mo/MΦ(E)、GF
AP(+)ast.(E)、vim.(+)ast.(E)は、それぞれゼラチン内
の多核白血球、ゼラチン内の単球／マクロファージ陽性
細胞、創縁における多核白血球、創縁における単球／マ
クロファージ陽性細胞、創縁におけるGFAP陽性星状膠細
胞、創縁におけるビメンチン陽性星状膠細胞を表し、*
はP<0.05を、また**はP<0.01を表す。

【００２４】上記の結果より、アルガトロバンは脳損傷
部位近傍において、炎症性細胞の集ぞくとビメンチン陽
性星状膠細胞の増殖といった有毒な反応を抑制する一
方、神経保護作用的な要素を含むGFAP陽性星状膠細胞に
は影響を与えないことにより、損傷脳における二次的脳
損傷を抑制し、神経再生を促進させる環境を作り出す可
能性を示唆した。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式：【化１】で示される(2R,4R)-4-メチル-1-[N²((RS)-3-メチル-1,
2,3,4-テトラヒドロ-8-キノリンスルホニル)-L-アルギ
ニル]-2-ピペリジンカルボン酸、その水和物、または薬
学的に許容されるそれらの塩を有効成分とする脳損傷の
予防・治療剤。
【請求項２】化合物が、(2R,4R)-4-メチル-1-[N²((R
S)-3-メチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-8-キノリンスルホ
ニル)-L-アルギニル]-2-ピペリジンカルボン酸一水和物
であることを特徴とする、請求項１に記載の脳損傷の予
防・治療剤。
【請求項３】脳損傷が、頭部外傷に伴う脳損傷、くも
膜下出血に伴う脳損傷、脳内出血に伴う脳損傷、開頭手
術一般の術後脳損傷から選ばれることを特徴とする、請
求項１または２に記載の脳損傷の予防・治療剤。