HUT75538A - Oligopeptides derived from c-reactive protein fragments - Google Patents
Oligopeptides derived from c-reactive protein fragments Download PDFInfo
- Publication number
- HUT75538A HUT75538A HU9600934A HU9600934A HUT75538A HU T75538 A HUT75538 A HU T75538A HU 9600934 A HU9600934 A HU 9600934A HU 9600934 A HU9600934 A HU 9600934A HU T75538 A HUT75538 A HU T75538A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- mmol
- lys
- pro
- arg
- amino acid
- Prior art date
Links
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 title claims description 19
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 title claims description 19
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 title description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 title description 4
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 title description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 94
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 28
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical group NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Chemical group CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical group CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 11
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Chemical group OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 10
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical group C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical group OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical group CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical group CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical group CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QYPPJABKJHAVHS-UHFFFAOYSA-P agmatinium(2+) Chemical group NC(=[NH2+])NCCCC[NH3+] QYPPJABKJHAVHS-UHFFFAOYSA-P 0.000 claims description 8
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 8
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Chemical group CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000004474 valine Chemical group 0.000 claims description 8
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 7
- 239000004471 Glycine Chemical group 0.000 claims description 7
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical group NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 7
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Chemical group NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical group C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 5
- 239000004472 Lysine Chemical group 0.000 claims description 5
- 108010077895 Sarcosine Chemical group 0.000 claims description 5
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 5
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Chemical group OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 claims description 5
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 claims description 4
- OCUSNPIJIZCRSZ-ZTZWCFDHSA-N (2s)-2-amino-3-methylbutanoic acid;(2s)-2-amino-4-methylpentanoic acid;(2s,3s)-2-amino-3-methylpentanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O.CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O OCUSNPIJIZCRSZ-ZTZWCFDHSA-N 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims 6
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 claims 5
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 claims 4
- 229960004295 valine Drugs 0.000 claims 3
- PPKOLDBWGDTKKT-QMMMGPOBSA-N (2s)-2,6-diamino-2-ethylhexanoic acid Chemical compound CC[C@@](N)(C(O)=O)CCCCN PPKOLDBWGDTKKT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims 2
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 claims 2
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 claims 2
- BJTZATWAPRKXBV-MRVPVSSYSA-N (2r)-2-acetyl-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound CC(=O)[C@@](N)(C(O)=O)CCCCN BJTZATWAPRKXBV-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims 1
- 239000002327 cardiovascular agent Substances 0.000 claims 1
- 229940125692 cardiovascular agent Drugs 0.000 claims 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 claims 1
- IMCGHZIGRANKHV-AJNGGQMLSA-N tert-butyl (3s,5s)-2-oxo-5-[(2s,4s)-5-oxo-4-propan-2-yloxolan-2-yl]-3-propan-2-ylpyrrolidine-1-carboxylate Chemical compound O1C(=O)[C@H](C(C)C)C[C@H]1[C@H]1N(C(=O)OC(C)(C)C)C(=O)[C@H](C(C)C)C1 IMCGHZIGRANKHV-AJNGGQMLSA-N 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 79
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 60
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 59
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 32
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 30
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 28
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 23
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 21
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 16
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 16
- VVQIIIAZJXTLRE-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-amino-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCCC[C@H](N)C(O)=O VVQIIIAZJXTLRE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 15
- CJUMAFVKTCBCJK-UHFFFAOYSA-N N-benzyloxycarbonylglycine Chemical compound OC(=O)CNC(=O)OCC1=CC=CC=C1 CJUMAFVKTCBCJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 14
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- -1 η-pentyl Chemical group 0.000 description 12
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 11
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 10
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N triethylsilane Chemical compound CC[SiH](CC)CC AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 9
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 7
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 6
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 6
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 5
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 5
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 5
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical class O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000002143 fast-atom bombardment mass spectrum Methods 0.000 description 4
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 4
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 4
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- JXGVXCZADZNAMJ-NSHDSACASA-N (2s)-1-phenylmethoxycarbonylpyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 JXGVXCZADZNAMJ-NSHDSACASA-N 0.000 description 3
- DYSBKEOCHROEGX-HNNXBMFYSA-N (2s)-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-2-(phenylmethoxycarbonylamino)hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 DYSBKEOCHROEGX-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100029251 Phagocytosis-stimulating peptide Human genes 0.000 description 3
- 108010084754 Tuftsin Proteins 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 3
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 3
- IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N tuftsin Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N 0.000 description 3
- 229940035670 tuftsin Drugs 0.000 description 3
- 208000003663 ventricular fibrillation Diseases 0.000 description 3
- 206010047302 ventricular tachycardia Diseases 0.000 description 3
- SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 1,1-Dichloroethane Chemical compound CC(Cl)Cl SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1H-imidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PTAYFGHRDOMJGC-UHFFFAOYSA-N 4-aminobutyl(diaminomethylidene)azanium;hydrogen sulfate Chemical compound OS(O)(=O)=O.NCCCCN=C(N)N PTAYFGHRDOMJGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N Dimethoxyethane Chemical compound COCCOC XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AMIMRNSIRUDHCM-UHFFFAOYSA-N Isopropylaldehyde Chemical compound CC(C)C=O AMIMRNSIRUDHCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N N-benzyloxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N Pro-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 238000002086 displacement chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KJWAGCTWJDRZLH-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)-6-[(2,2,2-trifluoroacetyl)amino]hexanoic acid Chemical compound FC(F)(F)C(=O)NCCCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 KJWAGCTWJDRZLH-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- OJTJKAUNOLVMDX-LBPRGKRZSA-N (2s)-6-amino-2-(phenylmethoxycarbonylamino)hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 OJTJKAUNOLVMDX-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXBGSDVWAMZHDD-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1h-imidazole Chemical compound CC1=NC=CN1 LXBGSDVWAMZHDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JTNCEQNHURODLX-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanimidamide Chemical compound NC(=N)CC1=CC=CC=C1 JTNCEQNHURODLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005917 3-methylpentyl group Chemical group 0.000 description 1
- QYPPJABKJHAVHS-UHFFFAOYSA-N Agmatine Natural products NCCCCNC(N)=N QYPPJABKJHAVHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O Chemical compound CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N 0.000 description 1
- CEBPXAZRFUJGRP-UHFFFAOYSA-N CN(C)[P+](N(C)C)(N(C)C)O[S+]1C(C=CC=C2)=C2N=C1 Chemical compound CN(C)[P+](N(C)C)(N(C)C)O[S+]1C(C=CC=C2)=C2N=C1 CEBPXAZRFUJGRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011086 Coronary artery occlusion Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- OKJIRPAQVSHGFK-UHFFFAOYSA-N N-acetylglycine Chemical compound CC(=O)NCC(O)=O OKJIRPAQVSHGFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004063 butyryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000003293 cardioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000005792 cardiovascular activity Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- SXPWTBGAZSPLHA-UHFFFAOYSA-M cetalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SXPWTBGAZSPLHA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000228 cetalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 230000003749 cleanliness Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 150000002222 fluorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003104 hexanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- XLSZMDLNRCVEIJ-UHFFFAOYSA-N methylimidazole Natural products CC1=CNC=N1 XLSZMDLNRCVEIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-4-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1.CN(C)C1=CC=NC=C1 PEECTLLHENGOKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003516 pericardium Anatomy 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- VGGUKFAVHPGNBF-UHFFFAOYSA-N s-ethyl 2,2,2-trifluoroethanethioate Chemical compound CCSC(=O)C(F)(F)F VGGUKFAVHPGNBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000006104 solid solution Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- RFUWRXIYTQGFGA-QRPNPIFTSA-N tert-butyl (2s)-2-amino-4-methylpentanoate;hydron;chloride Chemical compound Cl.CC(C)C[C@H](N)C(=O)OC(C)(C)C RFUWRXIYTQGFGA-QRPNPIFTSA-N 0.000 description 1
- XJJBXZIKXFOMLP-ZETCQYMHSA-N tert-butyl (2s)-pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)[C@@H]1CCCN1 XJJBXZIKXFOMLP-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- IUUYANMOEMBTBV-FJXQXJEOSA-N tert-butyl (2s)-pyrrolidine-2-carboxylate;hydron;chloride Chemical compound Cl.CC(C)(C)OC(=O)[C@@H]1CCCN1 IUUYANMOEMBTBV-FJXQXJEOSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- SIOVKLKJSOKLIF-HJWRWDBZSA-N trimethylsilyl (1z)-n-trimethylsilylethanimidate Chemical compound C[Si](C)(C)OC(/C)=N\[Si](C)(C)C SIOVKLKJSOKLIF-HJWRWDBZSA-N 0.000 description 1
- 125000003774 valeryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4737—C-reactive protein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Immunology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
A találmány olyan oligopeptid-származékokra vonatkozik, amelyek immunomoduláns ágensekként alkalmazhatók kardiovaszkuláris és gyulladásos megbetegedések kezelése területén. A találmány szerinti (I) általános képletű
Aj - A2 - Α3 - A4 oligopeptid-származékok képletében
Aj treonin, leucin, izoleucin, valin, szarkozin, alanin, glicin és (2-6 szénatomot tartalmazó)acil-glicOinek közül megválasztott aminosav-maradék, vagy nincs jelen;
A2 leucin, izoleucin, valin, lizin, prolin és legalább egy 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoporttal adott esetben Να-szubsztituált omitin közül megválasztott aminosav-maradék, vagy nincs jelen;
Α3 jelentése prolin, leucin, izoleucin és valin közül megválasztott aminosavmaradék;
Α4 jelentése agmatin, és a C-terminális helyzetben adott esetben amidált arginin, leucin és glutamin közül megválasztott aminosav-maradék vagy nincs jelen;
azzal a megkötéssel, hogy Aj, Α2 és Α4 közül csak az egyik lehet távol; továbbá ezekre a vegyületekre az is jellemző, hogy az említett aminosav-maradékok és agmatin-maradék oldalláncai adott esetben szubsztituálva lehetnek egy vagy több, 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoport közül megválasztott csoporttal, és az aminosav-maradékok mindegyike Ca-helyzetben D- vagy L-konfigurációjú, vagy pedig a lehetséges diasztereoizomerek vagy enantiomerek valamelyikének formájában van.
83491-4023 MR/JG
Képviselő:
DANUBIA Szabadalmi és Védjegy Iroda Kft. Budapest
- 9 3 4 / 9 6 KÖZZÉTÉTELI FÉLD
C-REAKTÍV FEHÉRJE-FRAGMENSEKBŐL LESZÁRMAZTATHATÓ OLIGOPEPTIDEK
A találmány C-reaktív fehéije (a továbbiakban angolszász rövidítéssel: CRP) fragmentjeiből származó oligopeptidekre, valamint ezek immunomoduláns ágensekként való alkalmazására vonatkozik a kardiovaszkuláris és gyulladásos megbetegedések kezelése területén.
A CRP olyan fehérje, amely általában a vérben igen alacsony koncentrációban van jelen, mely koncentráció akár legfeljebb 2000-szeresére növekszik gyulladásos folyamatokat követően [Morley, J. J. és Kushner, I.: Am. N.Y. Acad. Sci., 389, 406-418 (1989)]. Robey, F.A. és munkatársai a J. Bioi. Chem., 262 (15), 7053-7057 (1987) szakirodalmi helyen három olyan CRP tetrapeptid-szekvenciát ismertetnek, amelyek igen hasonlóak a tuftsin szekvenciájához. A kémiai úton szintetizált tetrapeptidek serkentik a fagocita-leukocitákat és a szuperoxid termelését, továbbá a mononukleáris sejteket arra késztetik, hogy interleukin 1 anyagot termeljenek. Ezek a hatások hasonlóak a tuftsin hatásához. Ugyanakkor a tuftsinhoz hasonlóan a három CRP-tetrapeptid gyorsan metabolizálódik és inaktiválódik proteázok által in vivő.
Meglepő módon felismertük, hogy az említett CRP tetrapeptid-fragmensek kémiailag módosított analógjai immunomoduláns hatásúak és így hasznosíthatók kardiovaszkuláris és gyulladásos megbetegedések, például a szeptikus sokk terápiájában.
így a találmány az (I) általános képletű
83491-4023 MR/JG
-2AÍ-A2-A3-A4 (I) oligopeptidekre vonatkozik. Az (I) általános képletben
A} treonin, leucin, izoleucin, valin, szarkozin, alanin, glicin és (2-6 szénatomot tartalmazó)acil-glicinek közül megválasztott aminosav-maradék, vagy nincs jelen;
A2 leucin, izoleucin, valin, lizin, prolin és legalább egy 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoporttal adott esetben Να-szubsztituált omitin közül megválasztott aminosav-maradék, vagy nincs jelen;
A3 jelentése prolin, leucin, izoleucin és valin közül megválasztott aminosavmaradék;
A4 jelentése agmatin, és a C-terminális helyzetben adott esetben amidált arginin, leucin és glutamin közül megválasztott aminosav-maradék vagy nincs jelen;
azzal a megkötéssel, hogy Aj, A2 és A4 közül csak az egyik lehet távol; továbbá ezekre a vegyületekre az is jellemző, hogy az említett aminosav-maradékok és agmatin-maradék oldalláncai adott esetben szubsztituálva lehetnek egy vagy több, 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- és 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoport közül megválasztott csoporttal, és az aminosav-maradékok mindegyike Ca-helyzetben D- vagy L-konfigurációjú, vagy pedig a lehetséges diasztereoizomerek vagy enantiomerek valamelyikének formájában van.
A találmány oltalmi köre kiterjed továbbá az (I) általános képletű oligopeptidek gyógyászatilag elfogadható savakkal vagy bázisokkal alkotott sóira is.
A találmány szerinti vegyületek előnyös csoportját alkotják azok, amelyek (I) általános képletében Aj jelentése glicin, treonin, leucin, izoleucin, valin, szarkozin, alanin és egy (2-6 szénatomot tartalmazó)acil-glicin közül megválasztott aminosav-maradék vagy nincs jelen; A2 jelentése az Na-helyzetben 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoporttal szubsztituált lizinből leszármaztatható aminosav-maradék; A3 jelentése prolin;
-3Α4 jelentése a C-terminális helyzetben adott esetben aminált glutamin, leucin vagy arginin, vagy egy agmatin-maradék, vagy nincs jelen; továbbá ezekre a vegyületekre az is jellemző, hogy az említett aminosav-maradékok és agmatinmaradék oldalláncai adott esetben szubsztituálva vannak egy vagy több, 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoporttal, és az említett aminosav-maradékok mindegyike a Ca-helyzetben Dvagy L-formájú, vagy pedig a lehetséges diasztereoizomerek vagy enantiomerek valamelyikének formájában van. Ezekhez a vegyületekhez tartoznak gyógyászatilag elfogadható savakkal vagy bázisokkal képzett sók is.
1-6 szénatomot tartalmazó alkilcsoport alatt például metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, szek-butil-, terc-butil-, η-pentil-, 3-metil-pentil- vagy n-hexilcsoportot, illetve a megfelelő pozicióizomereket értjük. A 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoportokra példaképpen megemlíthetjük a formil-, acetil-, propionil-, butiril-, pentanoil- vagy hexanoilcsoportot és a megfelelő pozicióizomereket.
A találmány továbbá az (I) általános képletű oligopeptidek és gyógyászatilag elfogadható sóik immunomoduláns ágensekként kardiovaszkuláris és gyulladásos megbetegedések, például a szeptikus sokk kezelésére való alkalmazására vonatkozik.
Az (I) általános képletű vegyületek előállíthatok a peptid-szintézis végrehajtására jól ismert módszerekkel, beleértve mind a szilárd fázisban, mind az oldatban végrehajtott módszereket. Példaképpen utalhatunk a Merrifield, R. B. által a Biochemistry, 3, 1385 (1964) szakirodalmi helyen ismertetett módszerekre. Ha csak másképpen nem jelezzük, az aminosav-maradékok a Ca-helyzetben L-konfigurációjúak.
Előnyösen a szintézist oldatban hajtjuk végre egy megfelelően megválasztott aminosavból kiindulva és az oligopeptidet felépítve a kívánt aminosavak lépésenként való hozzáadása útján. Mindazonáltal hasznosíthatunk előre előállított di- vagy tripeptid-egységeket is. Bár az oligopeptid szintézisét bármely aminosavból kiindulva végrehajthatjuk, és ez a szintézis végbemehet mind N-ter-
-4minális, mind C-terminális irányban, előnyösen N-terminális irányban hajtjuk végre. Az aminosavakat vagy - amennyiben célszerű - az előzetesen előállított divagy tripeptideket önmagukban vagy a karboxilcsoporton észterezéssel védett megfelelő származékok formájában, például terc-butil-észterek (tBu) és/vagy az aminocsoporton amidálással képzett származékok formájában, például benzil-oxi-karbonil-származékok (Z) formájában hasznosíthatjuk, és egyes esetekben az oldallánci csoportokat megfelelő védőcsoportokkal láthatjuk el, így például
2,2,5,7,8-pentametil-kromán-6-szulfonilcsoporttal (Pmc), terc-butoxi-karbonilcsoporttal (Boc) vagy trifluor-acetátcsoporttal (TFA). Ezeknek a védőcsoportoknak a bevitelét a peptidkémlában járatos szakember számára jól ismert módszerekkel hajthatjuk végre.
Mindazonáltal megjegyezzük, hogy a fentiekben említett védett származékok kereskedelmi forgalomban kapható termékek. Az α-aminorész védőcsoportját előnyösen eltávolíthatjuk a következő aminosavval való kondenzálást megelőzően például egy közepesen erős savval (így például trifluor-ecetsawal) végrehajtott acidolízis vagy hidrogéngázzal vagy más hidrogén-forrással, így például hangyasavval vagy ennek valamelyik sójával, trietil-szilánnal, vagy hidrazinnal egy bázisban végrehajtott hidrogenolízis útján, a módszert a védőcsoportjától megfosztani kívánt aminosav jellegétől és más tényezőktől függően megválasztva, egy alkalmas palládiumkatalizátor jelenlétében. Ezután végrehajtjuk a következő aminosav-maradékkal a kondenzálást, olyan maradékot használva, amely a reakcióban részt nem vevő részein megfelelően védve van.
A kondenzálást végrehajthatjuk az e célra jól ismert módszerek bármelyikével. így például hasznosíthatunk reakcióképes észtereket, például szukcinimideket (Su) vagy fluoridokat (F), vagy pedig használhatunk kondenzálószereket, például benztriazol-1 -il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfónium-hexafluor-foszfátot (BOP), bróm-trisz-pirrolidium-foszfónium-hexafluor-foszfátot (PyBroP) vagy diciklohexil-karbodiimidet (DCC), adott esetben egy katalizátor, például 1-hidroxi-benztriazol (HOBT), 4-dimetil-amino-piridin (DMAP), trietil-amin (TEA),
-5N-metil-morfolin vagy N-metil-imidazol jelenlétében.
Ami az aminosavak Να-alkil-származékait illeti, ezek előállíthatok egy alkalmas aldehiddel alacsony hőmérsékleten egy ciano-bór-hidrid mint szelektív redukálószer jelenlétében végrehajtott kezelés útján egy poláris oldószerben, előnyösen metanolban.
Ha a C-terminális helyzetében amid formában lévő (I) általános képletű oligopeptidet kívánunk előállítani, akkor kiindulási anyagként ilyen molekularészt tartalmazó, kereskedelmi forgalomban kapható aminosavakat hasznosítunk, vagy pedig egy C-terminális aminosavat amidálhatunk például egy HOBTammóniumsóval vagy - ha A4 jelentése egy agmatin-maradék - magával az agmatinnal.
Az Ai és/vagy A2 helyén acilezett aminosav-maradékokat hordozó (I) általános képletű vegyületek előállíthatok egy alkalmas acil-anhidriddel alacsony hőmérsékleten végzett kezelés útján egy katalizátor, például DMAP jelenlétében. Alternatív módon kereskedelmi forgalomban kapható Na-acil-aminosav-maradékokat hasznosíthatunk.
A találmány szerinti termékeket tisztíthatjuk például egy alkalmas oldószerből végzett átkristályosítás vagy egy jól ismert kromatográfiás módszer, így például fordított fázisú kromatografálás vagy ioncserés kromatografálás útján.
Oszlop: Hőmérséklet: Átfolyási sebesség: Detektor:
A következőkben néhány találmány szerinti oligopeptid előállítását mutatjuk be.
Az aminosav-származékok, a védett fragmensek és a módosított találmány szerinti oligopeptidek HPLC-elemzését a következő kísérleti körülmények között hajtjuk végre:
Lichrosorb RP-18;
°C (ha csak másképpen nem jelezzük)
1,5 ml/perc
Jasco 875-UV (230 nm)
| A eluálószer: | 90 % víz, 10 % acetonitril és 0,1 % trifluor-ecetsav (TFA) keveréke |
| B eluálószer: | 0,1 % TFA-t tartalmazó acetonitril |
| C eluálószer: | 0,1 % TFA-t tartalmazó víz |
| Gradiensek: | (I) : 0 %-tól 40 %-ig B A-ban (20 perc), 80 % B-ig A- ban (10 perc) (II) : 0 %-tól 50 %-ig A C-ben (20 perc), 100 % A-ig (3 perc) 40 % B-ig A-ban (20 perc). |
Ha csak másképpen nem említjük, mindegyik szintézislépést szobahőmérsékleten hajtjuk végre.
Az aminosavak milyenségét és arányát Beckman SYSTEM GOLD típusú aminosav-elemzőberendezéssel határozzuk meg 110 °C hőmérsékleten 22 órán át 6 M sósavoldattal végzett hidrolizálást követően.
A következőkben megadjuk a példákban használt rövidítések jelentését. BDHA-Ca benzil-dimetil-hexadecil-ammónium-klorid
| Boc | terc-butoxi-karbonilcsoport |
| (Boc)20 | di-terc-butil-dikarbonát |
| BOP | benztriazol-1 -il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfónium-hexafluor- -fosztát |
| BSA | N,O-bisz(trimetil-szilil)-acetamid |
| DCC | diciklohexil-karbodiimid |
| DMAP | 4-(dimetil-amino)-piridin |
| DMF | dimetil-formamid |
| F | fluorid |
| HOBT | 1 -hidroxi-benztriazol |
| Pmc | 2,2,5,7,8-pentametil-kromán-6-szulfonilcsoport |
| PyBrop | bróm-trisz-pirrolidinium-foszfónium-hexafluor-foszfát |
| tBu | terc-butilcsoport |
| TBAF | tetrabutil-ammónium-fluorid |
-Ί -
| TEA | trietil-amin |
| TFA | trifluor-ecetsav |
| Su | szukcinimid |
| Z | benzil-oxi-karbonilcsoport |
1. példa
H-Sar-Lys-Pro-Arg-OH’2AcOH
A] 6,9 g (12 mmól) Z-Arg(Pmc)-OH 60 ml diklór-etánnal készült szuszpenziójához 50 °C-on 60 perc leforgása alatt hozzáadunk 8,64 ml (36 mmól) N,N-dimetil-formamid-di-terc-butil-acetált, majd az adagolás befejezése után a reakcióelegyet 50 °C-on 40 percen át keveijük és ezután 20 ml 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk hozzá. A diklór-etánt vákuum alatt elpárologtatjuk, majd a vizes fázist 10 ml etil-acetáttal hígítjuk. A szerves fázist ezután elválasztjuk, először 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd semlegességig telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk. A szerves fázist ezután szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A kapott nyers terméket szilikagélen kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, eluálószerként etil-acetát és nhexán 6:4 térfogatarányú elegyét használva. Ekkor 3,4 g mennyiségben ZArg(Pmc)-OtBu-t kapunk, amely 99 %-os tisztaságú, továbbá HPLC vizsgálati jellemzője a következő: (I) gradienssel retenciós idő 32 perc.
B] 3,385 g (5,36 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyület 80 ml metanollal készült oldatához hozzáadjuk 1,416 g (21,44 mmól) ammónium-formiát 3 ml vízzel készült oldatát és közel 1 g palládiumszivacsot. Az így kapott reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten 2 órán át lassan keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük és az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. így 2,88 g mennyiségben H-Arg(Pmc)-OtBu-HCOOH-t kapunk. Tisztasága 99,3 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 23,40 perc retenciós idő.
C] A B] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldjuk DMF és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 30 ml-ben. Külön 1,403 g (5,63 mmól) Z-Pro-OH-t feloldunk DMF és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyé-8ből 20 ml-ben, majd a kapott oldathoz hozzáadunk 2,49 g (5,63 mmól) BOP-t, 0,76 g (5,63 mmól) HOBT-t és 1,56 ml (11,26 mmól) TEA-t. A kétféle oldatot ezután összekeverjük, majd a kapott reakcióelegyet egy órán át keverjük. Ezt követően az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, majd a maradékot etil-acetáttal felvesszük. Az így kapott oldatot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist ezután szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott maradékot dietil-éterben eldörzsöljük, amikor 3,71 g mennyiségben Z-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk. Tisztasága
99,6 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 29,49 perc retenciós idő.
D] A C] lépés szerint előállított vegyületből 3,709 g (5,08 mmól) 50 ml metanollal készült oldatához nitrogéngáz-atmoszférában hozzáadunk 350 mg szénhordozós palládiumkatalizátort, majd igen lassan 4 ml (24 mmól) trietil-szilánt. Mintegy két óra elteltével a reakcióelegyet szűrjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. így 3,01 g mennyiségben H-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk. Tisztasága 99,56 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 24,25 perc retenciós idő.
E] A D] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből 2,375 g-ot (4 mmól) feloldunk DMF és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 20 ml-ben. Ugyanebből az elegyből 20 ml-ben feloldunk 1,826 g (4,8 mmól) Z-Lys(Boc)OH-t, majd a kapott oldathoz hozzáadunk 2,12 g (4,8 mmól) BOP-t, 0,648 g (4,8 mmól) HOBT-t és 1,33 ml (9,6 mmól) TEA-t. A kétféle oldatot ezután összekeverjük, majd az így kapott reakcióelegyet 1 órán át keverjük, ezután pedig a C] lépésben ismertetett módon kezeljük. A kapott maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük, amikor 3,64 g mennyiségben Z-Lys-(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk.
F] A fenti E] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből 3,64 g (3,8 mmól) 70 ml metanollal készült oldatához hozzáadjuk 1,321 g (20 mmól) ammónium-formiát 3 ml vízzel készült oldatát és közel 1 g frissen készült palládiumszivacsot. Ezután a B] lépésben ismertetett módon járunk el, amikor 3,27 g mennyiségben H-Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk.
-9G] DMF és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 4 ml-ben feloldunk 0,196 g (0,88 mmól) Z-Sar-OH-t, majd a kapott oldathoz egymás után hozzáadunk 0,39 g (0,88 mmól) BOP-t, 0,119 g (0,88 mmól) HOBT-t, 0,24 ml (1,76 mmól) TEA-t és 0,694 g (0,8 mmól), a fenti F] lépésben ismertetett módon előállított vegyület DMF és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 4 ml-rel készült oldatát. Az így kapott reakcióelegyet egy órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot felvesszük etil-acetáttal, majd a kapott oldatot egymás után 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, 2,5 %-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és végül semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist ezután szárítjuk, majd vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot dietil-éterben eldörzsöljük, amikor 0,746 g mennyiségben Z-Sar-Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk.
H] A fenti G] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből 0,746 g-ot (0,726 mmól) feloldunk 10 ml 95 %-os vizes TFA-oldatban, majd 75 perc elteltével a reakcióelegyet vízzel hígítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot vízzel felvesszük, majd dietil-éterrel mossuk és fagyasztva szárítjuk. Az így kapott terméket fordított fázisú kiszorításos kromatografálás útján tisztítjuk. A terméket feloldjuk 3 ml 0,1 térfogat%-os vizes TFA-oldatban, majd 0,5 ml/perc átfolyási sebességgel átbocsátjuk olyan VYDAC Cl8 oszlopon (25 mm . 10 mm méretű), amelyet előzetesen 0,1 térfogat% TFA-t tartalmazó vízzel ekvilibráltunk. Az oszlopot ezután BDHA-C1 50 mmólos vizes oldatával (amely 0,1 térfogat% TFA-t tartalmaz) eluáljuk 0,5 ml/perc átfolyási sebességgel. Közel egy órán át tartó eluálást követően 0,5 ml-es frakciókat szedünk egészen addig, míg a kiszorító anyag eluálódik. A frakciókat ezután HPLC-elemzésnek vetjük alá, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. így 0,2 g mennyiségben Z-Sar-Lys-Pro-Arg-OH-t kapunk. Tisztasága több mint 95 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 11,04 perc retenciós idő.
I] A fenti H] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből 0,2 g-ot (0,28 mmól) feloldunk 5 ml 85 %-os hangyasavban, majd a kapott oldathoz friss
palládiumszivacsot adunk. A reakcióelegyet ezután 100 percen át enyhe keverésnek vetjük alá, majd a katalizátort kiszűijük, a szűrletet vízzel hígítjuk és fagyasztva szárítjuk. A kapott terméket ioncserés kromatografálásnak vetjük alá tisztítás céljából S-Sepharose F/F oszlopon (16 mm . 200 mm méretű), 300 percen át 3 ml/perc átfolyási sebesség mellett gradiens-eluálást végezve 0,015 mól és 0,15 mól közötti koncentrációjú, 5 pH-értékű ammónium-acetát-oldatokkal. A szedett frakciókat HPLC-elemzésnek vetjük alá, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és többször fagyasztva szárítjuk. így 0,1 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek tisztasága 99 %-nál nagyobb, továbbá HPLC jellemzője (II) gradienssel 7,30 perc retenciós idő.
FAB-tömegspektrum: m/z 471 amu [M+H]+.
H-NMR (200 MHz, DMSO): d (1H; NH-Lys) 8,06; d (1H; NH-Arg) 7,17; m (1H; Ca-Pro) 4,63; m (1H; Ca-Lys) 4,32-4,24; q (1H; Ca-Arg) 3,79; m (1H; CőPro) 3,70; s (2H; Ca-Sar) 3,05; t (3H; Ca-Arg) 3,03; t (2H; Ce-Lys) 2,75; s (3H; CH3-Sar) 2,24; m (4H; CB-Py-Pro) 1,99-1,85; s (6H; CH3COO-) 1,81; m (10H; CB-Py-Arg; CB-Py+Ő-Lys) 1,72-1,29.
2. példa
H-(D)Ala-Lys-Pro-Arg-OH-2AcOH
0,122 g (0,55 mmól) Z-(D)Ala-OH-ból és 0,434 g (0,5 mmól), az 1. példa F] lépésében ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, továbbá lényegében az 1. példa G-I] lépéseiben ismertetett módon eljárva 0,089 g mennyiségben a cím szerinti vegyület állítható elő. Tisztasága több, mint 99 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 9,59 perc retenciós idő.
FAB-tömegspektrum: m/z-471 amu [M+H]+.
1 H-NMR (200 M Hz; DMSO): d (1H; NH-Lys) 8,12; d (1H; NH-Arg) 7,17; m (1H; C a-Pro) 4,60; m (1H; Ca-Lys) 4,31 - 4,25; q (1H; Ca-Arg) 3,78; m (2H; C5-Pro) 3,70; q (1H; Ca-Ala) 3,31; t (2H; Cő-Arg) 3,03; t (2H; Cs-Lys) 2,74; m (14H; CB+y-Arg; CB-Py-Pro; CB-Py+Ö-Lys) 2,09 - 1,28; s (6H; CH3COO-) 1,80; d (3H; CH3-Ala) 1,12.
- 11 3. példa
Ac-Gly-Lys-Pro-Arg-OH’2AcOH
0,09 g (0,77 mmól) Ac-Gly-OH-ból és 0,607 g (0,7 mmól), az 1. példa F] lépésében ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, továbbá az 1. példa G] és H] lépésben ismertetett módon eljárva 0,116 g mennyiségben a cím szerinti vegyület állítható elő. Tisztasága több, mint 99 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 13,06 perc retenciós idő.
FAB-tömegspektrum: m/z-499 amu [M+HJ+.
1 H-NMR (200 M Hz; DMSO): d (1H; NH-Lys) 8,15; t (1H; NH-Gly) 8,11; d (1H ; NH-Arg) 1,47; m (1H; Ca-Pro) 4,59 - 4,48; m (1H; Ca-Lys) 4,33 - 4,25; m (5H; Ca-Arg; Ca-Arg; Ca-Gly; CÖ-Pro) 3,84 - 3,59; t (2H; Cö-Arg) 3,01; t (2H; Cc-Lys) 2,70; m (14H; CB+y-Arg; CB+y-Pro; Ca+y+Ö-Lys) 2,03 - 1,28; s (3H; CH3COO-) 1,85; s (3H; CH3-CO-NH) 1,72.
4. példa
H-Gly-(Et)Lys-Pro-Arg-OH*2AcOH
A] 0,96 g (1,1 mmól), az 1. példa F] lépésében ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk 8 ml metanolban, majd a kapott oldathoz 0,071 g (1,12 mmól) nátrium-ciano-bór-hidridet adunk. Az így kapott reakcióelegyet lehűtjük -15 °C-ra, majd hozzáadunk 0,062 ml (1,12 mmól) acetaldehidet. 60 perc elteltével a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, majd a maradékot vízzel felvesszük. A vizes oldathoz pH-értékének 3-ra való beállításához szükséges mennyiségű sósavat adunk, majd a kivált csapadékot kiszűrjük, ezt követően pedig 3 pHértékű sósavoldattal mossuk. Ekkor 0,825 g mennyiségben fehér színű csapadékot kapunk, amely 70 %-ban H-(Et)Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-ból és 26 % dialkilezett melléktermékből áll.
B] DMF és metilén-klorid 4:6 térfogatarányú elegyéből 3 ml-ben feloldunk 0,994 g (4,75 mmól) Z-Gly-OH-t, majd a kapott oldathoz egymás után hozzáadunk 2,21 g (4,75 mmól) PyBrop-t, 2,4 ml ()14,25 mmól) diizopropil-etil-amint és az előbb említett oldószerelegyból 6 ml-ben feloldva a fenti A] lépésben is- 12-
mertetett módon előállított csapadékot. Az így kapott reakcióelegyet ezután 80 percen át keveijük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot felvesszük etil-acetáttal, majd a kapott oldatot 5 %-os vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, 2,5 %-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és végül semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist ezután megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. így 0,95 g mennyiségben olyan keveréket kapunk, amely 60 % mennyiségben Z-Gly-(Et)Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t tartalmaz.
C] A fenti B] lépésben ismertetett módon előállított vegyületekből 0,75 g-ot kiindulási anyagként használva és az 1. példa H] lépésében ismertetett módon eljárva 0,125 g mennyiségben Z-Gly-(Et)Lys-Pro-Arg-OH állítható elő. Tisztasága 94 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 12 perc retenciós idő.
D] A fenti C] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet ioncserés kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, CM-Sephadex C-25 oszlopon (16 mm . 200 mm méretű) 3 ml/perc átfolyási sebesség mellett gradiens-eluálást végezve 270 percen át 0,02 M és 0,2 M közötti koncentrációjú, 6 pH-értékű ammónium-acetát-oldatokkal. A kapott frakciókat HPLC-elemzésnek vetjük alá, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és többször fagyasztva szárítjuk. így 0,1 g mennyiségben Z-Gly-(Et)Lys-Pro-Arg-OH-2AcOH-t (ITF 1931 kódszámú vegyület) kapunk. Tisztasága 97,5 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 12 perc retenciós idő.
FAB-tömegspektrum: m/z-619 amu [M+H]+.
iH-NMR (200 MHz; DMSO): t (1H; NH-Gly) 7,46; m (5H; CH-aril) 7,37; d (1H; NH-Lys) 7,24; m (1H; Ca-Lys) 5,19; s (2H; Ca-Arg) 5,05; m (1H; Ca-Pro) 4,23; m (2H; Ca-Gly) 3,92; m (1H; Ca-Arg) 3,81; m (2H; Cö-Pro) 3,58; m (2H; CH2-E0 3,46; m (2H; CŐ-Arg) 2,99; m (2H; Cs-Lys) 2,65; m (4H; CB- és CyPro) 2,03 - 1,76; m (19H, CB- és Cy-Lys és -Arg, és C6-Lys) 1,69 - 1,19; s (6H, CH3COO-) 1,66; t (3H, CH3-Et) 1,04.
E] A fenti D] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet az 1. példa I] lépésében ismertetett módon kezeljük, amikor 0,089 g mennyiségben a cím
- 13szerínti vegyületet kapjuk. Tisztasága több, mint 99 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 7,39 perc retenciós idő.
FAB-tömegspektrum: m/z-485 amu [M+HJ+.
H-NMR (200 MHz; DMSO): d (1H; Na-Arg) 7,12; m (0,8H; Ca-Pro) 5,24; m (0,2H; Ca-Pro) 4,43; m (1H; Ca-Lys) 4,28 - 4,16; m (1H; Ca-Arg) 3,81; m (1H; Cő-Pro e CH2-N) 3,70 - 3,16; s (2H; Ca-Gly) 3,41; t (2H; Cő-Arg) 3,03; t (2H; Ca-Lys) 2,75; m (4H; CB+y-Pro) 2,12 - 1,75; s (6H; CH3COO-) 1,79; m (10H; CB+ -Arg; CB+y+ő-Lys) 1,70 - 1,14; t (2,4H; C*H3-CH2) 0,98; t (0,6H; C*H3CH2) 0,89.
5. példa
Ac-Lys-Pro-Arg-OH-TFA
A] 0,3 g (0,34 mmól), az 1. példa F] lépésében ismertetett módon előállított vegyület 1 ml metilén-kloriddal készült oldatát -20 °C-ra lehűtjük, majd hozzáadunk 0,048 g (0,38 mmól) DMAP-t és 0,035 ml (0,38 mmól) ecetsavanhidridet. 30 perce elteltével a reakcióelegyet 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, ezután a szerves fázist megszárítjuk és vákuumban bepároljuk. így 0,28 g mennyiségben Ac-Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk.
B] 0,28 g (0,324 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet az 1. példa H] lépésében ismertetett módon kezelünk, amikor 0,085 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága több, mint 99 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 13,64 perc retenciós idő.
FAB-tömegspektrum: m/z-442 amu [M+H]+.
1 H-NMR (200 MHz; DMSO): d (0,15H; NH-Lys) 8,45; d (0,85H; NH-Lys) 8,21; d (IH; NH-Arg) 8,09; m (1H; Ca-Pro) 4,55 - 4,45; m (1H; Ca-Lys) 4,43 4,33; m (1H; Ca-Arg) 4,21 - 4,11; m (2H; Cö-Pro) 3,77 - 3,47; q (2H; CÖ-Arg) 3,13; m (2H; Ce-Lys) 2,78; m (14H; CB-ty-Arg; CB+y-Pro ; CB+y+ö-Lys ) 2,18 1,28; s (6H; C*H3C00- és C*H3-CO-NH) 1,84.
- 146. példa
H-GIy-(D)Lys-Pro-Arg-OH-2AcOH
A] 0,544 g (1,43 mmól) Z-(D)-Lys(Boc)-OH-ból és 0,772 g (1,3 mmól), az
1. példa D] lépésében ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, illetve az 1. példa G] lépésében ismertetett módon eljárva 1,2 g mennyiségben Z-(D)Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk.
B] 1,2 g (1,29 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk 30 ml metanolban, majd a kapott oldathoz hozzáadjuk 0,325 g (5,16 mmól) ammónium-formiát 0,3 ml vízzel készült oldatát és közel 0,2 g frissen készített palládiumszivacsot. Két óra elteltével a katalizátort kiszűrjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot felvesszük 50 ml etil-acetáttal, majd az oldatot először 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ezután semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist megszárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk, amikor 1,119 g mennyiségben H-(D)Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu · HCOOH-t kapunk.
C] 0,229 g (1,43 mmól) Z-Gly-OH-ból és 1,119 g (1,29 mmól), a fenti B] lépésében ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, illetve az 1. példa G-I] lépéseiben ismertetett módon eljárva 0,23 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága nagyobb, mint 99 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 9,53 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z-457 amu [M+H)+.
H-NMR (200 M Hz; DMSO): d (1H; NH-Lys) 8,12; d (0,6H; 25 NH-Arg) 7,37; d (0,4H; NH-Arg) 7,27; m (0,6H; Ca-Pro) 4,80; m (0,4H; Ca-Pro) 4,61; m (1H; Ca-Lys) 4,34 - 4,15; q (0,6H; Ca-Arg) 3,95; t (0,4H; Ca-Arg) 3,81; m (2H; CŐPro) 3,58 - 3,35; s (0,4H; Ca-Gly) 3,26; s (0,6H; Ca-Gly) 3,11; t (2H; C5-Arg) 3,05; m (2H; Ce-Lys) 2,71; m (14H; Cp-Hy-Arg; Όβ+γ-ΡΓο; C3+y+6-Lys) 2,11 1,13; s (6H; CH3COO-) 1,79.
- 15 7, példa
H-Gly-Lys-Pro-Arg-NH2 · AcOH
A] 2,87 g (5 mmól) Z-Arg(Pmc)-OH-t feloldunk 15 ml DMF-ben, majd a kapott oldathoz hozzáadunk 0,837 g (5,5 mmól) HOBT-ammóniumsót. A reakcióelegyet ezután 0 °C-ra lehűtjük, majd hozzáadunk 1,135 g (5,5 mmól) DCC-t. Ezt követően a reakcióelegyet szobahőmérsékletre felmelegítjük, majd 300 percen át keverjük. A képződött diciklohexil-karbamid kiszűrése után az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, majd a maradékot felvesszük 25 ml etil-acetáttal. A kapott oldatot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist ezután megszárítjuk, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot dietil-éter és n-hexán elegyéből kristályosítjuk. így 2,8 g mennyiségben Z-Arg(Pmc)-HM2-t kapunk, olyan HPLC-gradienssel, amely 20 percen át tartó eluálás 20-60 térfogat% B-t tartalmazó A oldószerrel. Ekkor a retenciós idő 15,7 perc, a tisztaság 98 %.
B] 1,045 g (1,82 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyület 50 ml metanollal készült oldatához nitrogéngáz-atmoszférában hozzáadunk 150 mg szénhordozós palládiumkatalizátort, majd ezt követően igen lassan 2 ml (12 mmól) trietil-szilánt. 120 perc elteltével a reakcióelegyet szüljük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. Ekkor 0,8 g mennyiségben H-Arg(Pmc)-NH2-t kapunk, amelynek HPLC jellemzője az előző bekezdésben ismertetett gradienssel 8,6 perces retenciós idő, illetve tisztasága 98,5 %.
C] 0,499 g (2 mmól) Z-Pro-OH-ból és 0,8 g (1,82 mmól), a fenti B] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, illetve az 1. példa G] lépésében ismertetett módon eljárva 1,2 g mennyiségben Z-Pro-Arg(Pmc)-NH2-t kapunk. Ezt a vegyületet feloldjuk 25 ml metanolban, majd a kapott oldathoz először 100 mg 10 tömeg% szénhordozós palládiumkatalizátort, ezután igen lassan 1,52 ml (9,1 mmól) trietil-szilánt adunk. 130 perc elteltével a reakcióelegyet szüljük, majd a szűrletet vákuumban elpárologtatjuk. Ekkor 0,955 g mennyiségben H-Pro-Arg-NH2-t kapunk.
D] 0,725 g (1,96 mmól) Z-Lys(Boc)-OH-ból és 0,955 g (1,78 mmól), a fenti C] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, illetve a fenti C] lépésben ismertetett módon eljárva 1,19 g mennyiségben H-Lys(Boc)Pro-Arg(Pmc)-NH2-t kapunk.
E] 0,385 g (1,71 mmól) Z-Gly-OH-ból és 1,19 g (1,55 mmól), a fenti D] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, illetve az 1. példa GI] lépéseiben ismertetett módon eljárva olyan nyers terméket kapunk, amelyet azután 16 mm . 200 mm méretű CM-52 cellulóz-oszlopon ioncserés kromatografálásnak vetünk alá, 2 ml/perc átfolyási sebességgel gradiens-eluálást végezve 240 percen át 0,025 mól és 0,30 mól közötti koncentrációjú, 7 pH-értékű ammónium-acetát-oldatokkal. A szedett frakciókat HPLC-elemzésnek vetjük alá, majd a tiszta frakciókat összegyűjtjük és többször fagyasztva szárítjuk. így 0,283 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága 993 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 4,70 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z-456 amu (M+H).
1H-NMR (200 M Hz; DMSO): d (0,2H; Να-Arg) 8,89; m (1,8H; Να-Lys és Na-Arg) 8,16 - 8,03; s (0,2H; NH2-Arg) 7,77; s (0,8H; NH2-Arg) 7,76; s (0,8H; NH2-Arg) 7,07; s (0,2H; NH2-Arg) 7,00; m (1H; Ca-Pro) 4,61 - 4,50; m (1H; Ca-Lys) 4,47 - 4,34; m (1H; Ca-Arg) 4,26 - 4,15; m (2H; C5-Pro) 3,77 - 3,54; s 2H; Ca-Gly) 3,13; m (2H; CŐ-Arg) 3,06; t (2H; Ce-Lys) 2,67; m (14H; Cp+yArg; CP+y-Pro; Cp-+y+6-Lys) 2,12 - 1,26; s (9H; CH3COO-) 1,77.
8. példa
H-GIy-Lys-Pro-Agm*3AcOH
A] 0,84 g (3 mmól) Z-Lys-OH 3 ml 1 M nátrium-hidrogén-karbonát-oldatból és 3 ml dioxánból álló eleggyel készült oldatához hozzáadunk 0,57 ml (4,5 mmól) etil trifluor-tioacetátot, majd az így kapott reakcióelegyet 40 °C-on 7 órán át keverjük. Ezután az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, majd a maradékot felvesszük 40 ml 5 %-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal. A vizes fázist ezután etil-acetáttal mossuk, majd pH-értékét 2-re beállítjuk és etil-acetáttal ext-
- 17rahálást végzünk. Az extraktumot szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. így 1 g mennyiségben olaj formájában Z-Lys(TFA)-OH-t kapunk, amelynek tisztasága 96 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 19,7 perc retenciós idő.
B] Dimetil-formamid és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 9 miben feloldunk 0,283 g (1,634 mmól) H-Pro-OtBu«HCl-t. Ugyanilyen elegyből 9 ml-ben feloldunk 0,565 g (1,5 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet, majd a kapott oldathoz 0,66 g (1,5 mmól) BOP-t, 0,202 g (1,5 mmól) HOBT-t és 0,63 ml (4,5 mmól) TEA-t adunk. A kétféle oldatot ezután összeöntjük, majd a kapott reakcióelegyet 30 percen át keverjük. Ezt követően az 1. példa G] lépésében ismertetett módon járunk el, amikor 0,725 g mennyiségben olaj formájában Z-Lys(TFA)-Pro-OtBu-t kapunk. Tisztasága 95,5 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 26,12 perc retenciós idő.
C] 80,26 g (4,1 mmól) ammónium-formiát 0,1 ml vízzel készült oldatához hozzáadjuk 0,725 g (1,36 mmól), a fenti B] lépésben ismertetett módon előállított vegyület 20 ml metanollal készült oldatát, majd ezután közel 0,2 g frissen készített palládiumszivacsot. 2 óra elteltével a katalizátort kiszűrjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot felvesszük 40 ml etil-acetáttal, majd először 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ezután semlegességig vízzel mosást végzünk. A szerves fázist megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. így 0,5 g mennyiségben H-Lys(TFA)-Pro-OtBu*HCOOH-t kapunk, Tisztasága 95%, HPLC jellemzője (I) gradienssel 16,24 perc retenciós idő.
D] A fenti C] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldjuk dimetil-formamid és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 10 ml-ben. Ugyanilyen összetételű oldószerelegyből 10 ml-ben feloldunk 0,291 g (1,4 mmól) Z-Gly-OH-t, majd a kapott oldathoz 0,615 g (1,4 mmól) BOP-t, 0,188 g (1,4 mmól) HOBT-t és 0,39 ml (2,8 mmól) TEA-t adunk. A kétféle oldatot egyesítjük, majd a kapott reakcióelegyet 60 percen át keverjük, ezt követően pedig az 1. példa G] lépésében ismertetett módon járunk el. Az így kapott szerves fázist megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A kapott olajos maradékot
- 18szilikagél-oszlopon kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, eluálószerként etil-acetát és n-hexán 9:1 térfogatarányú elegyét használva. így 0,588 g mennyiségben Z-Gly-Lys(TFA)-Pro-OtBu-t kapunk. Tisztasága 99,3 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 24,51 perc retenciós idő.
E] A fenti D] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldjuk 15 ml, előzetesen 0 °C-ra lehűtött 37 %-os sósavoldatban, majd az így kapott oldatot 8 percen át ezen a hőmérsékleten tartjuk és ezt követően 15 ml vízzel hígítjuk. Ezután vákuumban bepárolást végzünk, majd a maradékot vízzel felvesszük, dietil-éterrel mossuk és fagyasztva szárítjuk. így 0,531 g mennyiségben Z-GlyLys(TFA)-Pro-OH-t kapunk, tisztasága 95 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 17,69 perc retenciós idő.
F] 0,53 g (1 mmól), a fenti lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk 5 ml etil-acetátban, majd a kapott oldathoz 0,138 g (1,2 mmól) N-hidroxi-szukcinimidet adunk. Az így kapott reakcióelegyet -20 °C-ra lehűtjük, majd hozzáadunk 0,248 g (1,2 mmól) DCC-t. A reakcióelegyet ezt követően szobahőmérsékleten 90 percen át állni hagyjuk, majd a kivált csapadékot kiszűrjük és az oldószert elpárologtatjuk. Ekkor 0,625 g mennyiségben Z-Gly-Lys(TFA)-Pro-OSu-t kapunk. 0,115 g (1,09 mmól) nátrium-hidrogén-karbonátot feloldunk 22 ml vízben, majd a kapott oldathoz egymás után hozzáadunk 0,498 g (2,18 mmól) agmatin-szulfátot és 0,087 ml (1,09 mmól) N-metil-imidazolt. Az így kapott oldatot ezután hozzáadjuk 0,57 g (0,91 mmól) Z-Gly-Lys(TFA)-Pro-OSu-hoz, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. Ezt követően a reakcióelegy pH-értékét 3-ra beállítjuk, majd etil-acetáttal mosást végzünk. Végül a vizes fázist fagyasztva szárítjuk, amikor 0,58 g menynyiségben Z-Gly-Lys(TFA)-Pro-Agm-t kapunk.
G] A fenti F] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldjuk 35 ml vízben, majd a kapott oldathoz a pH értékének 12,7-re való beállításához szükséges mennyiségben 1 M nátrium-hidroxid-oldatot adunk. 30 perc elteltével a pH értékét 7-re beállítjuk 1 M sósavoldattal, majd a vizes fázist fagyasztva
• ·
- 19szárítjuk. A kapott maradékot felvesszük abszolút etanollal, majd a kivált sókat kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A kapott terméket végül fordított fázisú kiszorításos kromatografálásnak vetjük alá tisztítása céljából az 1. példa
H] lépésében ismertetett módon. így 0,251 g mennyiségben Z-Gly-Lys-ProAgm-t kapunk, amelynek tisztasága 97,5 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 10,77 perc retenciós idő.
H] A fenti G] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet lényegében az 1. példa I] lépésében ismertetett módon kezeljük, amikor 0,229 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága 98,5 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 10,93 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/2-413 amu (M+H)+.
H-NMR (200 MHz; DMSO): t (0,2H; Na-Agm) 8,54; d (1H; Na-Lys) 8,10; t (0,8H; Na-Agm) 7,96; q (0,8H; Ca-Pro) 4,55; q (0,2H; Ca-Pro) 4,41; m (1H; Ca-Lys) 4,28 - 4,22; m (2H; Cő-Pro) 3,75 - 3,34; m (6H; Ca-Gly; Ca+5-Agm)
3,21 - 2,93; t (2H; Ce-Lys) 2,67; m (14H; Cp+y-Agm); Cy-Pro; Cp-Hy+S-Lys)
2,11 - 1,25 s (9H; CH3COO-) 1,76.
9. példa
H-Gly-Lys-Pro-OHAcOH
A] 1,487 g (3,8 mmól) Z-Lys(Boc)-OH dimetil-formamid és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 15 ml-rel készült oldatához egymás után hozzáadunk 1,72 g (3,8 mmól) BOP-t, 0,52 g (3,8 mmól) HOBT-t, 1,08 ml (7,8 mmól) TEA-t és 0,623 g (3 mmól) H-Pro-OtBu dimetil-formamid és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 15 ml-rel készült oldatát. Az így kapott oldatot 1 órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot etil-acetáttal felvesszük, majd a kapott oldatot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, 2,5 %-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és végül semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist ezután megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük, amikor 1,6 g mennyiségben Z-Lys(Boc)-Pro-OtBu-t kapunk.
-20Β] 1,59 g (2,9 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyület 20 ml metanollal készült oldatához hozzáadjuk 0,731 g (11,6 mmól) ammónium-formiát 0,6 ml vízzel készült oldatát és mintegy 0,5 g frissen készített palládiumszivacsot. 2 óra elteltével a katalizátort kiszűrjük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot 50 ml etil-acetáttal felvesszük, majd a kapott oldatot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és ezután semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. így 1,119 g mennyiségben H-Lys-Boc-Pro-OtBu· HCOOH-t kapunk.
C] 0,762 g (3,64 mmól) Z-Gly-OH dimetil-formamid és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 15 ml-rel készült oldatához egymás után hozzáadunk
1,61 g (3,64 mmól) BOP-t, 0,491 g (3,64 mmól) HOBT-t, 1,05 ml (7,28 mmól) TEA-t és 1,119 g (2,8 mmól) H-Lys(Boc)-Pro-OtBu dimetil-formamid- és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 11 ml-rel készült oldatát. Az így kapott reakcióelegyet az A] lépésben ismertetett módon kezeljük. így 1,16 g mennyiségben Z-Gly-Lys(Boc)-Pro-OtBu-t kapunk.
D] 0,746 g (0,726 mmól), a fenti C] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk 20 ml 95 %-os vizes trifluor-ecetsav-oldatban, majd egy óra elteltével az oldatot vízzel hígítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot vízzel felvesszük, majd a vizes oldatot dietil-éterrel mossuk és fagyasztva szárítjuk. Az így kapott terméket kiszorításos fordított fázisú kromatografálással tisztítjuk. A terméket feloldjuk 3 ml 0,1 térfogat%-os vizes trifluor-ecetsav-oldatban, majd a kapott oldatot felvisszük 250 mm . 10 mm méretű VYDAC Cl8 oszlopra, amelyet előzetesen 0,5 ml/perc átfolyási sebességgel 0,1 térfogat%-os vizes trifluor-ecetsav-oldattal ekvilibráltunk. Az oszlopot ezután 0,5 ml/perc átfolyási sebességgel eluáljuk, 0,1 térfogat% trifluor-ecetsavat tartalmazó 50 mM vizes BDHA-Cl-oldattal. Az eluálás mintegy egy órájának eltelte után 0,5 ml térfogatú frakciókat gyűjtünk, addig, míg a kiszorításhoz használt folyadék eluálódik. A frakciókat HPLC alkalmazásával elemezzük, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk. így 0,325 g mennyiségben Z-Gly-Lys-
-21 -Pro-OH-t kapunk, amelynek HPLC alkalmazásával mért tisztasága 95 %-nál nagyobb, továbbá HPLC jellemzője (I) gradienssel 11,48 perc retenciós idő.
E] 0,325 g (0,59 mmól), a fenti D] lépésben ismertetett módon előállított vegyület 5 ml 85 %-os hangyasavval készült oldatához hozzáadunk frissen készített palládiumszivacsot, majd az így kapott reakcióelegyet enyhe keverésben tartjuk egy órán át. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a hangyasavat vízzel hígítjuk és fagyasztva szárítjuk. A terméket 15 mm . 200 mm méretű S-Sepharose F/F oszlopon ioncserés kromatografálásnak vetjük alá, 3 ml/perc átfolyási sebességgel gradiens-eluálást végezve 5 órán át 0,015 mól és 0,15 mól közötti koncentrációjú, 5 pH-értékű ammónium-acetát-oldatokkal. A szedett frakciókat HPLC alkalmazásával elemezzük, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és többször fagyasztva szárítjuk. így 0,165 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek tisztasága 99 %-nál, HPLC jellemzője (II) gradienssel 3,97 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z-301 amu [M+H]+.
1 H-NMR (200 MHz; DMSO): d (1H; Na-Lys) 8,17; m (1H; Ca-Pro) 4,60; m (1H; Ca-Lys) 4,14; m (2H; Cö-Pro) 3,61; s ( 2H; Ca-Gly ) 3,12; t (2H; Ce-Lys) 2,73; m (10H; Cp+y+ő-Lys; Cp+y-Pro) 2,62 - 1,40; s (3H; CH3COO-) 1,88.
10. példa
H-(Et)-Lys-Pro-Arg-OH.2AcOH
a] 0,4 g, a 4. példa A] lépésében ismertetett módon előállított vegyületet 31 cm.2,5 cm méretű Lobar LiChroprep Si 60 oszlopon szilikagél-kromatografálásnak vetjük alá, az oszlopot előzetesen kloroform és metanol 9:1 térfogatarányú elegyével ekvilibrálásnak alávetve. Az oszlopot ezután ugyanezzel az oldószereleggyel 8 ml/per átfolyási sebesség mellett eluáljuk, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. így 0,28 g mennyiségben H-(Et)Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk, amelynek tisztasága 99 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője (I) gradienssel 28,5 perc retenciós idő.
-22Β]0 ,28 g (0,33 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk 6 ml 95 %-os vizes trifluor-ecetsav-oldatban, majd 70 perc elteltével a reakcióelegyet vízzel hígítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot vízzel felvesszük, majd az oldatot dietil-éterrel mossuk és fagyasztva szárítjuk. A kapott terméket 16 mm . 200 ml méretű CM-Sephadex C-25 oszlopon ioncserés kromatografálásnak vetjük alá, 3 ml/perc átfolyási sebesség mellett gradiens-eluálást végezve 270 percen át 0,02 M és 0,2 M közötti koncentrációjú, 6 pHértékű ammónium-acetát-oldatokkal. A szedett frakciókat HPLC alkalmazásával elemzésnek vetjük alá, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és többször fagyasztva szárítjuk. így 0,14 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek tisztasága 99 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője 60 °C oszlophőmérséklet mellett (II) gradienssel 7,15 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z-428 amu (M+H)+.
lH-NMR (200 MHz; DMSO): d (1H; NH-Arg) 7,15; m (1H; Ca-Pro) 4,30; q (1H; Ca-Arg) 3,79; m (2H; Ca-Pro) 3,64; m (1H; Ca-Lys) 3,41; m (2H; Cő-Arg) 3,02; m (2H; Cs-Lys) 2,75; q (2H; CH2-Et) 2,44; m (14H; Cp- és Cy-Pro, Lys és -Arg, Cö-Lys) 2,11 - 1,21; s (6H; CH3COO-) 1,80; t (3H; CH3-Et) 0,97.
11. példa (Et)2Lys-Pro-Arg-OH-2AcOH
a] 0,425 g, a 4. példa A] lépésében ismertetett módon előállított vegyület 7 ml metanollal készült oldatához hozzáadunk 0,063 g (1 mmól) nátrium-ciano-bór-hidridet, majd az így kapott reakcióelegyet -15 °C-ra lehűtjük és ezután 0,155 ml (2,5 mmól) acetaldehidet adunk hozzá. 90 perc elteltével a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, majd a maradékot vízzel feliszapoljuk. Az így kapott szuszpenzió pH-értékét sósavval 3-ra beállítjuk, majd a kapott csapadékot kiszűrjük és 3 pH-értékű sósavval mossuk. így 0,4 g mennyiségben (Et)2Lys(Boc)-Pro-Arg(Pmc)-OtBu-t kapunk, amelynek tisztasága 98 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője (I) gradienssel 30,3 perc retenciós idő.
B] 0,4 g (0,455 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított ve-23 gyületet a 10. példa B] lépésében ismertetett módon kezelünk, amikor 0,14 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek tisztasága 99 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője 60 °C oszlophőmérséklet mellett (II) gradienssel 11,08 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/2- 456 amu (M+H)+.
1 H-NMR (200 MHz, DMSO): d (1H; NH-Arg) 7,08; m (1H; Ca-Pro) 4,21; m (3H; Ca-Arg és C8-Pro) 3,98 - 3,65; m (1H; Ca-Lys) 3,54; m (2H; Cő-Arg) 3,03; m (2H; Ce-Lys) 2,75; (2H; CH2-Et) 2,38; m (2H; CH2-Et) 2,36; m (4H; Cp- és Cy-Pro) 2,18 - 1,81; s (6H; CH3COO-) 1,76; m (10H; Cp- és Cy-Lys és Arg és CŐ-Lys) 1,74 - 1,33; t (6H; CH3-Et) 0,96.
12. példa
H-Gly-(Et)Lys-Pro-Leu-OH’AcOH
A] 5,33 g (10 mmól), a 9. példa A] lépésében ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk 130 ml abszolút etanolban szénhordozós palládiumkatalizátor jelenlétében, majd a kapott oldathoz 30 perc leforgása alatt cseppenként hozzáadjuk 0,745 ml (12 mmól) acetaldehid 20 ml abszolút etanollal készült oldatát. Ezután 60 perc leforgása alatt beadagolunk 9,56 ml (60 mmól) trietil-szilánt, majd 75 perc elteltével a katalizátort kiszűrjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. Az olajos maradékot feloldjuk 50 ml vízmentes dietil-éterben, majd a kapott oldathoz hozzáadunk 3 ml, hidrogén-kloriddal telített etil-acetátot. A képződött csapadékot kiszűijük és vákuumban szárítjuk. így 4,25 g mennyiségben H-(Et)Lys(Boc)-Pro-OtBu hidrogén-kloridot kapunk, amelynek tisztasága 98 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője (I) gradienssel 19,83 perc retenciós idő.
B] 3,78 g (18 mmól) Z-Gly-OH-t feloldunk 12 ml dimetil-formamid és 67 ml metilén-klorid elegyében, majd a kapott oldathoz -15 °C-on hozzáadunk 1,86 g (9,03 mmól) DCC-t. 15 perc elteltével a reakcióelegyet szűrjük, majd a szűrlethez hozzáadjuk 2,8 g (6,02 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyület 40 ml metilén-kloriddal készült oldatát. 0,66 ml (6,02 mmól) N-24-metil-morfolin adagolását követően a reakcióelegyet 35 °C-on tartjuk 60 percen át, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot etil-acetáttal felveszszük. Az így kapott oldatot 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd 2,5 %-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal mossuk, szárítjuk és vákuumban bepároljuk. így 3,7 g mennyiségben Z-Gly(Et)Lys(Boc)-Pro-OtBu-t kapunk, amelynek tisztasága 94 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 28,60 perc retenciós idő.
C] 3,7 g (6 mmól), a fenti B] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk 15 ml 95 %-os vizes trifluor-ecetsav-oldatban, majd 15 perc elteltével a reakcióelegyet lassan dietil-éterbe öntjük. A kivált csapadékot kiszűrjük, majd vákuumban megszárítjuk. így 2,9 g mennyiségben Z-Gly-(Et)Lys-Pro-OH-t kapunk. Tisztasága 94 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 14,93 perc retenciós idő.
D] 1 g (1,73 mmól), a fenti C] lépésben ismertetett módon előállított vegyűletet feloldunk 6,92 ml, víz és dioxán 1:1 térfogatarányú elegyével készült 0,1 M nátrium-hidroxid-oldatban, majd az így kapott oldatot 0 °C-ra lehűtjük és ezután hozzáadunk 0,415 g (1,903 mmól) (Boc)2O-t. Az így kapott reakcióelegyet 45 percen át 12 pH-értéken tartjuk szobahőmérsékleten, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk és a maradékot vízzel felvesszük. A kapott vizes oldatot dietil-éterrel mossuk, majd pH-értékét 3-ra beállítjuk és ezután 30 ml etil-acetáttal extrahálást végzünk. Az extraktumot megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. így 0,96 g mennyiségben Z-Gly-(Et)Lys(Boc)-Pro-OH-t kapunk, amelynek tisztasága 92 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 23,04 perc retenciós idő.
E] 0,281 g (0,5 mmól), a fenti D] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet feloldunk dimetil-formamid és metilén-klorid 1:1 térfogatarányú elegyéből 4 ml-ben, majd a kapott oldathoz 0,221 g (0,5 mmól) BOP-t, 0,067 g (0,5 mmól) HOBT-t, 0,219 ml (1,57 mmól) TEA-t és 0,117 g (0,525 mmól) H-Leu-OtBu-hidrogén-klorídot adunk. Ezután az 1. példa C] lépésében ismertetett módon járunk el, amikor 0,365 g mennyiségben Z-Gly-(Et)Lys(Boc)-Pro-Leu-25-OtBu-t kapunk, amelynek tisztasága 99 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője (I) gradienssel 29,86 perc retenciós idő
F] 0,365 g (0,5 mmól), a fenti E) lépésben ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva, illetve az 1. példa H-I] lépéseiben ismertetett módon eljárva 0,155 g mennyiségben a cím szerinti vegyület állítható elő, amelynek tisztasága %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 6,3 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z-442 amu [M+H ) +.
H-NMR (200 MHz; DMSO): d (1H; NH-Leu) 6,93; m (1H; Ca-Lys ) 5, 23 ; m (1H; Ca-Pro) 4,15; m (1H; Ca-Leu ) 3,84; m (6H; Ca-Gly, CŐ-Pro és CH2-Et) 3,72 - 3,03; m (2H; Cs-Lys) 2,75; m (4H; CP- és Cy-Pro) 2,17 - 1,77; s (3H; CH3COO-) 1,85; m (9H; Cp- és Cy-Lys és -Leu, CŐ-Lys) 1,68 - 1,05; t (3H; CH3-EO 0,96; d (3H; CH3-Leu) 0,88; d (3H; CH3-Leu) 0,86.
13. példa
H-Gly-(Et)Lys-Pro-Agm-3AcOH
A] 0,425 g (0,75 mmól), a 12. példa D] lépésében ismertetett módon előállított vegyületből, 0,103 g (0,9 mmól) N-hidroxi-szukcinimidből és 0,186 g (0,9 mmól) DCC-ből kiindulva, lényegében a 8. példa F] lépésében ismertetett módon eljárva, illetve egymás után 0,095 g (0,9 mmól) nátrium-karbonátot, 0,411 g (1,8 mmól) agmatin-szulfátot és 0,72 ml (0,9 mmól) N-metil-imidazolt adagolva 0,5 g mennyiségben Z-Gly(Et)Lys(Boc)-Pro-Agm-t kapunk, amelynek tisztasága 85 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 20,6 perc retenciós idő.
B] 0,5 g (0,74 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva és az 1. példa H-I] lépéseiben ismertetett módon eljárva 0,169 g mennyiségben a cím szerinti vegyület állítható elő, amelynek tisztasága %-nál nagyobb, HPLC jellemzője 60 °C oszlophőmérsékletnél (II) gradienssel 13,87 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z- 441 amu (M+H)+.
H-NMR (200 MHz; DMSO): t (1H; NH-Agm) 7,98; m (1H; Ca-Lys) 5,26; m (1H; Ca-Pro) 4,15; m (10H; Ca-Gly, Ca-Agm, C5-Pro, Cő-Agm és CH2-Et)
-263,65 - 2,91; m (2H; Cs-Lys) 2,66; m (14H; C3- és Cy-Lys, -Pro és -Agm és CőLys) 2,18 - 1,16; s (9H; CH3COO-) 1,76; t (3H; CH3-Et).
14. példa
H-Gly-(Et)Lys-Pro-OH’2AcOH
0,2 g (0,347 mmól), a 12. példa C] lépésében ismertetett módon előállított vegyületből kiindulva és az 1. példa I] lépésében ismertetett módon eljárva 0,085 g mennyiségben a cím szerinti vegyület állítható elő, amelynek tisztasága 99 %nál nagyobb, HPLC jellemzője 60 °C oszlophőmérsékletnél (II) gradienssel 9,32 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z- 329 amu (M+H)+.
1 H-NMR (200 MHz; DMSO): m (1H; Ca-Lys) 5,16; m (1H; Ca-Pro ) 4,05; m (6H; Ca-Gly és CÓ-Pro és CH2-Et) 3,87 - 2,92; m (2H; Cs-Lys) 2,67; m (4H; Οβ- és Cy-Pro) 2,10 - 1,65; s (6H; CH3COO-) 1,78; m (6H; Cp+y+Ő-Lys) 1,59 1,24; t (1,3H; CH3-Et) 1,06; t (1,7H; CH3-Et) 1,02.
15. példa
H-Leu-(Et)Lys-Pro-Arg-OH*2AcOH
A] Nitrogéngáz-atmoszférában 0,732 g (1,5 mmól), a 12. példa A] lépésében ismertetett módon előállított vegyület 8 ml acetonitrillel készült oldatához hozzáadunk 0,733 ml (3 mmól) BSA-t, 1,6 g (6 mmól) Z-Leu-F-t [előállítható Carpino, L. A., Mansour, E.M.E. és Sadat-Aalaee, D. által a J. Org. Chem., 1991, 56, 2611-2614 (1991) szakirodalmi helyen ismertetett módszerrel] és 0,094 g (0,3 mmól) TBAF 2 ml acetonitrillel készült oldatát. Az így kapott reakcióelegyet 240 percen át szobahőmérsékleten keveijük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot etil-acetáttal felvesszük, majd az oldatot 5 %-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ezután semlegességig 2,5 %-os káliumhidrogén-szulfát-oldattal mossuk. A szerves fázist ezután megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagél-kromatografálásnak vetjük alá 44 cm . 3,7 cm méretű Lobar LiChroprep Si 60 oszlopon (40-63 mm), amelyet előzetesen hexán és etil-acetát 7:3 térfogatarányú elegyével ekvilibráltunk. Az ősz-27-
lopot ezután ugyanezzel az oldószereleggyel 16 ml/perc átfolyási sebesség mellett eluáljuk, majd a tiszta terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. így 0,5 g mennyiségben Z-Leu(Et)Lys(Boc)-Pro-OtBu-t kapunk, amelynek tisztasága 94 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 31,5 perc retenciós idő.
B] 0,5 g (0,74 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet a 12. példa C-D] lépéseiben ismertetett módon kezelünk, amikor 0,43 g mennyiségben Z-Leu-(Et)Lys(Boc)-Pro-OH-t kapunk, amelynek tisztasága 98 %nál nagyobb, HPLC jellemzője (I) gradienssel 31,5 perc retenciós idő.
C] 0,43 g (0,695 mmól), a fenti B] lépésben ismertetett módon előállított vegyület 9 ml 1,2-dimetoxi-etánnal készült oldatához hozzáadunk 0,128 g (1,112 mmól) N-hidroxi-szukcinimidet, majd az ekkor kapott elegyet -20 °C-ra lehűtjük és ezután hozzáadunk 0,215 g (1,042 mmól) DCC-t. 15 perc elteltével a reakcióelegyet szűrjük, majd a kapott szűrlethez hozzáadjuk H-Arg-OH 21 ml, dimetil-formamid és víz 2:1 térfogatarányú elegyével készült 0,15 M kálium-klorid-oldattal készült oldatát. Az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 110 percen át keverjük, majd az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. A maradékot abszolút etanollal többször felvesszük, majd végül kiszűrjük. így 0,455 g mennyiségben Z-Leu-(Et)Lys(Boc)-Pro-Arg-OH-t kapunk, amelynek tisztasága 84 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 24,38 perc retenciós idő.
D] A fenti C] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet az 1. példa H] lépésében ismertetett módon kezeljük, amikor Z-Leu(Et)Lys-Pro-Arg-OH-trifluor-acetátot (ITF 1929 kódjelű) kapunk. Tisztasága 98 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 17,63 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z- 676 amu [M+H)+.
1 H-NMR (200 MHz; DMSO): t (1H; ΝΗε-Arg) 7,77; d (1H; NH-Leu) 7,68; m (5H; CH-aril) 7,37; d (1H; NHa-Arg) 7,34; m (1H; Cct-Lys) 5,15; s (2H; CH2-Z) 5,03; m (1H; Ca-Leu) 4,42; m (1H; Ca-Pro) 4,26; m (1H; Ca-Arg) 3,99; m (4H; CŐ-Pro és CH2-Et) 3,68 - 3,18; m (2H; CŐ-Arg) 3,11; m (2H; CHe-Lys) 2,74; m
(17Η; Cp és Cy-Leu, -Lys, -Pro és -Arg, és Cö-Lys) 2,18 - 1,19; t (3H; CH3~Et) 1,12; d(6H; CH3-Leu) 0,89.
E] 0,341 g (0,44 mmól), a fenti D] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet az 1. példa I] lépésében ismertetett módon kezelünk, amikor 0,06 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek tisztasága 94 %, HPLC jellemzője (II) gradienssel 29,13 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z- 541 amu [M+H)+.
H-NMR (200 MHz; DMSO): d (1H; NH-Arg) 7,10; m (1H; Ca-Lys ) 5, 20; m (1H; Ca-Pro ) 4,19; m (1H; Ca-Arg ) 3,81; m (5H; Ca-Lys, CH2-Et és CÖ-Pro) 3, 66 - 3,10; m (2H; Cö-Arg) 3,03; m (2H; Ce-Lys) 2,74; m (17H; Cp és Cy-Leu, -Lys, -Pro és -Arg, és Cö-Lys) 2,10 - 1,18; s (6H; CH3COO-) 1,17; t (3H; CH3Et) 1,03; d (3H; CH3-Leu) 0,89; d (3H; CH3-Leu) 0,87.
16. példa
H-Gly-(izoBu)Lys-Arg-OH-AcOH
A] 2,38 g (5,95 mmól), a fenti 9. példa B] lépésében ismertetett módon előállított vegyület 34 ml metanollal készült oldatához hozzáadunk 20,4 ml ecetsavat, majd az így kapott reakcióelegyet -20 °C-ra lehűtjük, és 1,36 ml (14,87 mmól) izobutiraldehid cseppenkénti adagolását követően hozzáadunk 0,748 g (11,9 mmól) nátrium-ciano-bór-hidridet. Az így kapott reakcióelegyet ezután szobahőmérséklet 100 percen át keveijük, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot felvesszük etil-acetáttal, majd egymás után 5 %-os nátrium-karbonát-oldattal, 2,5 pH-értékű sósavoldattal és végül semlegességig vízzel mossuk. A szerves fázist megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. így
2,65 g mennyiségben H-(izoBu)Lys(Boc)-Pro-OtBu-t kapunk, amelynek tisztasága 97 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 22,85 perc retenciós idő.
B] 2,2 g (4,8 mmól), a fenti A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből és 4,2 g (20 mmól) Z-Gly-F-ból kiindulva, illetve a 15. példa A-D] lépéseiben ismertetett módon eljárva 0,2 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága 98 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője (II) gradienssel 12,58
-29·· · ·· • · ·· · · · • · · · • · · · perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z- 513 amu [M+H]+.
ÍH-NMR (200 MHz; DMSO): d (1H; NH-Arg) 7,09; m (1H; Ca-Lys) 5,25; m (0,3H; Ca-Pro) 4,43; m (0,7H; Ca-Pro) 4,16; m (3H; Ca-Arg és Có-Pro) 3,83 3,56; m (2H; CaGly) 3,38; m (4H; CH2-iBu és Cő-Arg) 3,09 - 2,93; m (2H; CsLys) 2,15; m (15H; Οβ- és Cy-Lys, -Pro és -Arg, Có-Lys és CH-iBu) 2,13 - 1,16; s (6H; CH3COO-) 1,79; d (2,1H; CH3-iBu) 0,81; d (3H; CH3-iBu) 0,76; d (0,9H; CH3-iBu) 0,69.
17. példa
H-Gly-(izoBu)Lys-Pro-OH-AcOH
0,455 g (1 mmól), a 16. példa A] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből és 0,84 g (4 mmól) Z-Gly-fluoridból kiindulva, illetve a 15. példa A] lépésében, majd a 10. példa B] lépésében ismertetett módon eljárva 0,172 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága 98 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője 60 °C oszlophőmérsékletnél (II) gradienssel 23,48 perc retenciós idő.
FAB-MS: m/z- 357 amu [M+H)+.
ÍH-NMR (200 MHz; DMSO): m (1H; Ca-Lys) 5,13; m (0,3H; Ca-Pro) 4,30; m (0,7H; Ca-Pro) 4,00; m (4H; Ca-Gly és C5-Pro) 3,68 - 3,31; m (2H; CH2-iBu) 3,03; m (2H; C -Lys) 2,81 - 2,61; m (11H; Οβ és Cy-Lys és -Pro, CÖ-Lys és CHiBu) 2,05 - 1,24; s (3H; CH3COO-) 1,86; d (2,1H; CH3-iBu) 0,82; d (3H; CH3iBu) 0,77; d (0,9H; CH3-iBu) 0,69.
18. példa
H-Gly-(Bzl)Lys-Pro-OH-2AcOH
1,36 g (3 mmól), a 9. példa B] lépésében ismertetett módon előállított vegyületből és 0,546 ml (5,4 mmól) benzaldehidből kiindulva, illetve a 16. példa A-B] lépéseiben ismertetett módon eljárva 0,395 g mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága 98 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője (II) gradienssel 27,85 perc retenciós idő.
-30FAB-MS: m/z- 546 amu (M+H]+.
iH-NMR (200 MHz; DMSO): m (6H; CH-aril és NH-Arg) 7,39 - 6,97; m (0,7H; Ca-Lys) 5,42; m (0,3H; Ca-Lys) 4,93; m (2H; Ca-Pro és Ca-Arg) 4,65 - 4,42; m (4H; Ca-Gly és Cő-Pro) 4,00 - 3,43; m (2H; CH2-aril) 3,30; m (2H; Cő-Arg) 3,03; m (2H; Cs-Lys) 2,75; m (14H; Cp- és Cy-Lys, -Pro és -Arg, és CŐ-Lys) 2,29 -1,14; s (6H; CH3COO-) 1,79.
19. példa
H-Gly-Pro-Pro-Arg-OH-’AcOH
A] Az 1. példa C-D] lépésében ismertetett módon 0,315 g (1,5 mmól) HPro-OtBu-hidrogén-kloridból és 0,397 g (1,59 mmól) Z-Pro-OH-ból 0,4 g menynyiségben H-Pro-Pro-OtBu állítható elő. Tisztasága 93 %, HPLC jellemzője (I) gradienssel 11,38 perc retenciós idő.
B] 0,333 g (1,59 mmól) Z-Gly-OH-ból és 0,4 g (1,5 mmól), a fenti A ] lépésben ismertetett módon előállított vegyületből az 1. példa G-H] lépéseiben ismertetett módon 0,6 g mennyiségben Z-Gly-Pro-Pro-OH állítható elő. Tisztasága 98 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője (I) gradienssel 14,81 perc retenciós idő.
C] A fenti B] lépésben ismertetett módon előállított vegyületet lényegében a 15. példa C-D] lépéseiben ismertetett módon kezelünk, amikor 0,045 g menynyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk. Tisztasága 98 %-nál nagyobb, HPLC jellemzője 60 °C oszlophőmérsékletnél (II) gradienssel 12,06 perc retenciós idő. FAB-MS: m/z- 426 amu [M+H)+.
1 H-NMR (200 MHz; DMSO): d (1H; NH-Arg) 7,34; m (0,2H; Ca-Pro) 4,73; m (0,8H; Ca-Pro) 4,61; m (0,2H; Ca-Pro) 4,39; m (0,8H; Ca-Pro) 4,33; m (7H; Ca-Arg és -Gly, és 2CŐ-Pro) 3,83 - 3,26; m (2H; Cő-Arg) 3,00; m (12H; Cp- és Cy-Pro és -Arg) 2,22 - 1,26; s (3H; CH3COO-) 1,83.
A találmány szerinti vegyületek immunoreguláns, kardiovaszkuláris és gyulladásgátló hatásúak. Közelebbről szeptikus sokk ellen terápiás ágensekként hasznosíthatók. Ezt a hatást a következő farmakológiai kísérletben határozhatjuk meg.
-31 20-22 g tömegű BALB/c nőstény egereknek intraperitoniálisan beadunk 0,5 ml fiziológiás sóoldatban egerenként 1 mg mennyiségben LPS-t (a Sigma cég által szállított, 0127:B8 szerotípusú lipopoliszacharid). Ezt követően a kísérleti állatokat 10-10 egyedből álló csoportokba osztjuk, majd mindegyiknek intraperitoneálisan egerenként 62,5 pg mennyiségben beadjuk valamelyik találmány szerinti vegyületet az LPS beadása után 20 perccel és 120 perccel. Az egyik kísérleti csoportot csak LPS-sel kezeljük, és ezt a csoportot tekintjük kontrollcsoportnak. Az állatokat legalább négy napon át figyeljük meg.
A kapott eredményeket a következő táblázatban adjuk meg.
Táblázat
| A kísérleti példa sorszáma | %-os túlélés |
| kontroll | 3,5 |
| 2 | 23 |
| 4 | 40 |
| 5 | 23 |
| 14 | 38 |
| 19 | 23 |
A találmány szerinti vegyületek kardiovaszkuláris hatását olyan kísérletben vizsgáljuk, amelynél elaltatott patkányoknál a baloldali koronáris ütőér elzárása útján kiváltott ischémiát követően meghatározzuk a kardioprotektiv aktivitást, lényegében a Clark, C. és munkatársai által a Joum. Exp. Methods., 3, 357 (1980) szakirodalmi helyen ismertetett módszerrel. Ismeretes ugyanis, hogy a koszorúéri artéria elzárása számos olyan következménnyel jár, amelynek következtében az ECG jellemzői megváltoznak, így például hipoxia vagy arritmia lép fel, sőt egyes esetekben a kísérleti állatok elpusztulnak.
Ebben a kísérletben 12-12 egyedből álló csoportokba osztott hím Charles River patkányokat elaltatunk 65 mg/kg dózisban intraperitoneálisan beadott
-32nembutal-lal, majd az állatokat elektrokardiográfhoz kötjük az elektrokardiogram folyamatos követése céljából. Ezt követően az állatok mellkasát felnyitjuk és a perikardium behasítása után a baloldali koszorúéri artériát sebvarró fonallal veszszük körül kezdetéhez közel. 10 perc elteltével - feltéve, hogy nem figyelhető meg az elektrokardiogramban változás - az állatoknak intravénásán beadjuk előre meghatározott dózisban a fiziológiás sóoldatban oldott vagy szuszpendált találmány szerinti kísérleti vegyületeket. Az állatok egyik csoportjának (a kontrollcsoportnak) intravénásán fiziológiás sóoldatot adunk be. 5 perc elteltével a baloldali koszorúéri artériát ligáljuk, az elvarrást 30 percen át fenntartva.
Reprezentatív kísérletekben a ventrikuláris tachikardia (VT), a ventrikuláris fibrilláció (VF) és a mortalitás vonatkozásában jelentős csökkenés figyelhető meg már 0,4 pg/kg dózisokban. Közelebbről megállapítottuk, hogy a 4. példa szerinti vegyület 3 pg/kg dózisban beadva a mortalitást csökkenti az első 18 percben a ligálást követően körülbelül 80 %-kal a kontrollcsoporthoz képest, míg a VT és VF mintegy 50 %-kal csökkennek.
A találmány szerinti vegyületek felhasználhatók továbbá immunomoduláns ágensekként kardiovaszkuláris és gyulladásos tünetek kezelésére, megfelelő gyógyászati készítmények formájában. Az ilyen gyógyászati készítményekre példaképpen megemlíthetjük a tablettákat, cukorbevonatos tablettákat, filmbevonatos tablettákat, szirupokat és a fiolás készítményeket, az utóbbiak egyaránt alkalmazhatók orális, illetve intramuszkuláris vagy endovénás beadás céljára. Az ilyen készítmények a hatóanyagon kívül adott esetben szokásos hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokat tartalmazhatnak.
A hatóanyag dózisa számos tényezőtől, különösen a konkrét esetben alkalmazott vegyület jellegétől függően változhat, illetve beadható naponta egy vagy több alkalommal a terápiás igényektől függően.
-33• ·· • · • ···
Szabadalmi igénypontok:
Claims (10)
1. (I) általános képletű
Aj - A2 - A3 - A4 (I) oligopeptid-származékok, valamint gyógyászatilag elfogadható savakkal vagy bázisokkal alkotott sóik - a képletben
Ai treonin, leucin, izoleucin, valin, szarkozin, alanin, glicin és (2-6 szénatomot tartalmazó)acil-glicinek közül megválasztott aminosav-maradék, vagy nincs jelen;
A2 leucin, izoleucin, valin, lizin, prolin és legalább egy 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoporttal adott esetben Να-szubsztituált omitin közül megválasztott aminosav-maradék, vagy nincs jelen;
A3 jelentése prolin, leucin, izoleucin és valin közül megválasztott aminosavmaradék;
A4 jelentése agmatin, és a C-terminális helyzetben adott esetben amidált arginin, leucin és glutamin közül megválasztott aminosav-maradék vagy nincs jelen;
azzal a megkötéssel, hogy Aj, A2 és A4 közül csak az egyik lehet távol; továbbá ezekre a vegyületekre az is jellemző, hogy az említett aminosav-maradékok és agmatin-maradék oldalláncai adott esetben szubsztituálva lehetnek egy vagy több, 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- és 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoport közül megválasztott csoporttal, és az aminosav-maradékok mindegyike Ca-helyzetben D- vagy L-konfigurációjú, vagy pedig a lehetséges diasztereoizomerek vagy enantiomerek valamelyikének formájában van.
2. Az 1. igénypont szerinti oligopeptid-származékok, azzal jellemezve, hogy (I) általános képletükben Aj jelentése glicin, treonin, leucin, izoleucin, ·· ·· ·· • · · • ··· « • · · ·
-34valin, szarkozin, alanin és egy (2-6 szénatomot tartalmazó)acil-glicin közül megválasztott aminosav-maradék vagy nincs jelen; A2 jelentése az Na-helyzetben 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoporttal szubsztituált lizinből leszármaztatható aminosav-maradék; A3 jelentése prolin; A4 jelentése a C-terminális helyzetben adott esetben aminált glutamin, leucin vagy arginin vagy egy agmatin-maradék, vagy nincs jelen; továbbá ezekre a vegyületekre az is jellemző, hogy az említett aminosav-maradékok és agmatinmaradék oldalláncai adott esetben szubsztituálva vannak egy vagy több, 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-, benzil- vagy 2-6 szénatomot tartalmazó acilcsoporttal, és az említett aminosav-maradékok mindegyike a Ca-helyzetben D- vagy L-formájú, vagy pedig a lehetséges diasztereoizomerek vagy enantiomerek valamelyikének formájában van.
3. Az 1. igénypont szerinti oligopeptid-származékok, azzal jellemezve, hogy Aj jelentése glicin, A2 jelentése Να-etil-lizin, A3 jelentése prolin és A4 jelentése arginin.
4. Az 1. igénypont szerinti oligopeptid-származékok, azzal jellemezve, hogy Ai nincs jelen, A2 jelentése Να-acetil-lizin, A3 jelentése prolin és A4 jelentése arginin.
5. Az 1. igénypont szerinti oligopeptid-származékok, azzal jellemezve, hogy Ai jelentése glicin, A2 jelentése Να-etil-lizin, A3 jelentése prolin és A4 nincs jelen.
6. Az 1-5. igénypont szerinti vegyületek alkalmazása terápiás ágensek előállításában.
7. A 6. igénypont szerinti alkalmazás kardiovaszkuláris ágensek előállításában.
8. A 6. igénypont szerinti alkalmazás gyulladásgátló hatású ágensek előállításában.
9. A 6. igénypont szerinti alkalmazás szeptikus sokk kezelésére alkalmas ·· ·
-35ϊ ► ágensek előállításában.
10. Gyógyászati készítmény, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként vala mely 1. igénypont szerinti (I) általános képletű oligopeptid-származékot tártál máz a gyógyszergyártásban szokásosan használt hordozó- és/vagy segédanya gokkal együtt.
A bejelentő helyett a meghatalmazott:
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ITMI932154A IT1271486B (it) | 1993-10-12 | 1993-10-12 | Oligopeptidi immunomodulatori derivati di frammenti della proteina c- reattiva |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9600934D0 HU9600934D0 (en) | 1996-08-28 |
| HUT75538A true HUT75538A (en) | 1997-05-28 |
Family
ID=11367010
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9600934A HUT75538A (en) | 1993-10-12 | 1994-05-16 | Oligopeptides derived from c-reactive protein fragments |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6057295A (hu) |
| EP (1) | EP0723552B1 (hu) |
| JP (1) | JP3221881B2 (hu) |
| KR (1) | KR100363408B1 (hu) |
| CN (1) | CN1041524C (hu) |
| AT (1) | ATE226591T1 (hu) |
| AU (1) | AU684511B2 (hu) |
| CA (1) | CA2173939C (hu) |
| DE (1) | DE69431603T2 (hu) |
| DK (1) | DK0723552T3 (hu) |
| ES (1) | ES2185652T3 (hu) |
| FI (1) | FI961584A0 (hu) |
| HU (1) | HUT75538A (hu) |
| IL (1) | IL109761A0 (hu) |
| IT (1) | IT1271486B (hu) |
| NO (1) | NO961423L (hu) |
| PT (1) | PT723552E (hu) |
| WO (1) | WO1995010531A1 (hu) |
| ZA (1) | ZA943610B (hu) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6342481B1 (en) * | 1993-10-12 | 2002-01-29 | Italfarmaco S.P.A. | Oligopeptides derived from C-reactive protein fragments |
| EP1408031A1 (en) * | 2002-10-09 | 2004-04-14 | 3 D Gene Pharma | Pyrolidine derivatives useful in treatment of hepatitis C virus infection |
| US8680263B2 (en) | 2008-09-19 | 2014-03-25 | Nektar Therapeutics | Carbohydrate-based drug delivery polymers and conjugates thereof |
| CA2787376A1 (en) | 2010-01-19 | 2011-07-28 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered opsonin for pathogen detection and treatment |
| SG10201608671SA (en) | 2011-07-18 | 2016-12-29 | Harvard College | Engineered Microbe-Targeting Molecules and Uses Thereof |
| US10551379B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-04 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for improving detection and/or capture of a target entity |
| AU2014268603B2 (en) | 2013-05-21 | 2018-03-22 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered heme-binding compositions and uses thereof |
| EP3546474B1 (en) | 2013-12-18 | 2021-07-07 | President and Fellows of Harvard College | Crp capture/detection of gram positive bacteria |
| US10435457B2 (en) | 2015-08-06 | 2019-10-08 | President And Fellows Of Harvard College | Microbe-binding molecules and uses thereof |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2945239A1 (de) * | 1979-11-09 | 1981-05-21 | Troponwerke GmbH & Co KG, 5000 Köln | Oligopeptide, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung in arzneimitteln |
| US4353823A (en) * | 1981-09-01 | 1982-10-12 | Chipens Gunar I | Synthetic analog of tuftisin |
| GB8525615D0 (en) * | 1985-10-17 | 1985-11-20 | Hoffmann La Roche | Polypeptides |
| DE3783280T2 (de) * | 1986-07-16 | 1993-05-06 | Eniricerche Spa | Teilweise retro-invertierte analoge des tuftsin, methode zu ihrer herstellung und pharmazeutische zusammensetzungen, die sie enthalten. |
| IT1254883B (it) * | 1992-04-16 | 1995-10-11 | Italfarmaco Spa | Tetrapeptidi parzialmente modificati e retroinvertiti, analoghi di frammenti della proteina c-reattiva. |
-
1993
- 1993-10-12 IT ITMI932154A patent/IT1271486B/it active IP Right Grant
-
1994
- 1994-05-16 CN CN94193726A patent/CN1041524C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-05-16 KR KR1019960701879A patent/KR100363408B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-05-16 JP JP50541495A patent/JP3221881B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1994-05-16 EP EP94916966A patent/EP0723552B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-16 ES ES94916966T patent/ES2185652T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-05-16 CA CA002173939A patent/CA2173939C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-05-16 AT AT94916966T patent/ATE226591T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-05-16 WO PCT/EP1994/001574 patent/WO1995010531A1/en active IP Right Grant
- 1994-05-16 HU HU9600934A patent/HUT75538A/hu unknown
- 1994-05-16 AU AU68441/94A patent/AU684511B2/en not_active Ceased
- 1994-05-16 US US08/624,405 patent/US6057295A/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-05-16 DE DE69431603T patent/DE69431603T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-05-16 DK DK94916966T patent/DK0723552T3/da active
- 1994-05-16 PT PT94916966T patent/PT723552E/pt unknown
- 1994-05-24 IL IL10976194A patent/IL109761A0/xx unknown
- 1994-05-24 ZA ZA943610A patent/ZA943610B/xx unknown
-
1996
- 1996-04-11 NO NO961423A patent/NO961423L/no unknown
- 1996-04-11 FI FI961584A patent/FI961584A0/fi not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3221881B2 (ja) | 2001-10-22 |
| CN1041524C (zh) | 1999-01-06 |
| ES2185652T3 (es) | 2003-05-01 |
| IT1271486B (it) | 1997-05-28 |
| FI961584A (fi) | 1996-04-11 |
| CN1133048A (zh) | 1996-10-09 |
| DE69431603D1 (de) | 2002-11-28 |
| DE69431603T2 (de) | 2003-03-13 |
| CA2173939A1 (en) | 1995-04-20 |
| CA2173939C (en) | 2002-08-27 |
| NO961423L (no) | 1996-06-10 |
| AU6844194A (en) | 1995-05-04 |
| DK0723552T3 (da) | 2003-02-24 |
| EP0723552B1 (en) | 2002-10-23 |
| KR100363408B1 (ko) | 2003-02-11 |
| ATE226591T1 (de) | 2002-11-15 |
| ITMI932154A1 (it) | 1995-04-12 |
| NO961423D0 (no) | 1996-04-11 |
| AU684511B2 (en) | 1997-12-18 |
| IL109761A0 (en) | 1994-08-26 |
| ITMI932154A0 (it) | 1993-10-12 |
| HU9600934D0 (en) | 1996-08-28 |
| US6057295A (en) | 2000-05-02 |
| EP0723552A1 (en) | 1996-07-31 |
| PT723552E (pt) | 2003-02-28 |
| JPH09503200A (ja) | 1997-03-31 |
| FI961584A0 (fi) | 1996-04-11 |
| WO1995010531A1 (en) | 1995-04-20 |
| ZA943610B (en) | 1995-01-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PT93245B (pt) | Processo para a preparacao de novos derivados de glicina e de composicoes farmaceuticas que os contem | |
| US4619916A (en) | Tripeptide compounds containing pyroglutamic acid and tryptophan, process for their production and therapeutic applications | |
| JPS59112953A (ja) | ペプチド化合物 | |
| EP0564588B1 (en) | Hexapeptide anaphylatoxin-receptor ligands | |
| US4438029A (en) | Synthetic peptides | |
| CH637111A5 (fr) | Composes polypeptidiques a activite thymique ou antagoniste et leurs procedes de synthese. | |
| HUT75538A (en) | Oligopeptides derived from c-reactive protein fragments | |
| AU620406B2 (en) | Novel peptides suppressing the function of the immune system, pharmaceutical compositions containing them and process for preparing same | |
| EP0333071A2 (en) | Polypeptides, methods for their preparation, pharmaceutical compositions comprising them and use | |
| US4110322A (en) | Peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing same | |
| JPS61197595A (ja) | 胃液分泌を阻害するトリペプチド及びテトラペプチドのエステル，並びに当該成分を活性成分として含む薬剤組成物の製造方法 | |
| HU185229B (en) | Process for preparing pharmaceutically active peptides and acetates thereof | |
| US4713367A (en) | Retro-inverso analogs of the bradykinin potentiating peptide BPP5a | |
| HU201964B (en) | Process for producing peptides inhibiting maturation of t-lymphocytes and activity of macrophages, as well as pharmaceutical compositions comprising same | |
| JPH0631314B2 (ja) | 新規なゴナドリベリン誘導体 | |
| Thierry et al. | Synthesis and activity of NAcSerAspLysPro analogs on cellular interactions between T-cell and erythrocytes in rosette formation | |
| US6342481B1 (en) | Oligopeptides derived from C-reactive protein fragments | |
| JPH0796557B2 (ja) | 新規ペプチド、その製法およびそれを含有する医薬組成物 | |
| WO1997049724A1 (fr) | Depsipeptides cycliques et medicaments contenant ces composes comme ingredient actif | |
| US5663148A (en) | Anaphylatoxin receptor ligands containing lipophilic residues | |
| EP0217804B1 (en) | Analogs of substances p | |
| EP0850950A1 (en) | Peptide derivatives | |
| AU1807597A (en) | Peptide inhibitors of hematopoietic cell proliferation | |
| CA1284550C (en) | Retro-inverso analogs of the bradykinin potentiating peptide bpp*in5a*xx | |
| US4247543A (en) | Organic compounds |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFC4 | Cancellation of temporary protection due to refusal |