HUT71198A - Dried, rotary disc microspheres of microorganism - Google Patents

Dried, rotary disc microspheres of microorganism Download PDF

Info

Publication number
HUT71198A
HUT71198A HU9402420A HU9402420A HUT71198A HU T71198 A HUT71198 A HU T71198A HU 9402420 A HU9402420 A HU 9402420A HU 9402420 A HU9402420 A HU 9402420A HU T71198 A HUT71198 A HU T71198A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
microspheres
fatty acid
microorganisms
microorganism
bacteria
Prior art date
Application number
HU9402420A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9402420D0 (en
Inventor
William M Rutherford
Herman Wade Schlameus
William W Harlowe
Jack E Allen
Joseph R Lebeda
Donald I Mangold
Original Assignee
Pioneer Hi Bred Int
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pioneer Hi Bred Int filed Critical Pioneer Hi Bred Int
Publication of HU9402420D0 publication Critical patent/HU9402420D0/hu
Publication of HUT71198A publication Critical patent/HUT71198A/hu

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/02—Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/04—Making microcapsules or microballoons by physical processes, e.g. drying, spraying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K40/00—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs
    • A23K40/30—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs by encapsulating; by coating
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres

Description

Közismert, hogy bizonyos mikroorganizmusok, baktériumok potenciális előnyt jelentenek, ha állati adják őket. A baktériumok azért hasznosak például, mert a bél természetes mikroflóráját. Néhány vállalat például tápokhoz pótolják előnyös tulajdonságokkal rendelkező, közvetlenül táplálékként használható mikrobiális terméket árul. A közvetlenül a táplálékkal bejuttatott mikroorganizmusokkal azonban az a probléma, hogy nehézségek vannak a stabil termék tárolásával. Tipikus esetben a közvetlenül táplálékként használható mikrobiális terméket meglehetősen kis mennyiségben adják a táphoz, körülbelül 1%-ban. Azonban a felhasználatlanul maradt közvetlen táplálékként használható mikrobiális terméket tartalmazó táp vagy tápadalék terméket a farmerek gyakran hosszú ideig tárolják. Ez a tárolás gyakran olyan körülményeket jelent, amikor valamennyi nedvesség jelen van. Számos esetben csak ahhoz elegendő a nedvesség, hogy a baktériumok aktiválódjanak, illetve elkezdjenek növekedni, de ahhoz nem elegendő a nedvesség, hogy a növekedést biztosítsa. Ennek következtében elpusztulnak. Tehát a közvetlen táplálékként használható bakteriális termék aktvitása eltűnik. Más esetekben az antibiotikumok hozzáadása a közvetlen táplálékként használt mikrobiális termékhez vagy tápadalékhoz károsan hat a baktériumokra, főleg akkor, ha kis mennyiségű nedvesség van jelen, és így a baktériumok elpusztulnak. Tehát a közvetlen táplálékként használható mikrobiális termékek hosszú időn át való tárolása jelentős problémákat vet fel.
Más környezetben, ahol szintén használják a közvetlen táplálékként használható mikrobiális terméket, például a csirketápokban, általános gyakorlat, hogy granulálják az anyagot a granulálás előtt hozzáadott mikrobiális termékkel. A granulálás során használt gőz részben aktiválja a baktériumokat, ami annak következtében, hogy a nedvesség mennyisége nem elegendő az életbentartásukhoz, elpusztítja őket. A granulálás során alkalmazott hő is elpusztíthatja őket. Emellett ott van még a gyomor savas környezete, ami potenciálisan inaktiválja a baktériumokat, mielőtt elérnék a beleket. Tehát folyamatosan szükség van olyan közvetlen táplálásra alkalmas mikrobiális termékre, amely a mikroorganizmusokat csak a megfelelő időpontban k
szabadítj a fel a belekben, enélkül, hogy korábban felszabadulnának nedves körülmények, vagy az előnytelen pH körülmények miatt, amelyek az emésztőrendszerben uralkodnak a vékonybél előtt.
Fontos dolog megjegyezni a jelen találmány szempontj ából, hogy a szabad zsírsav nem egyenként kapszulázza be a mikroorganizmusokat, azaz nem képez mikrokapszulákat belőlük. Ehelyett a jelen találmány szerinti termék mikrogömböket hoz létre. Egy mikrogömb olyan zsírsav hordozónak felel meg, amelyben számos mikroorganizmus található meg. Ez eltér a mikrokapszulától, amikor is a mikroorganizmusok egyenként találhatók a kapszulákban. Egy mikrogömbben a zsírsav hordozó azt a funkciót tölti be, mint amit a csokoládés fánk esetében a fánktészta, míg a csokoládé felel meg a mikroorganizmusoknak, azaz a baktériumoknak vagy az élesztőknek. A jelen találmány szerinti eljárásban a mikrokapszulák nem működnek, míg a mikrogömbök igen. A mikrogömbök stabilitási előnyöket és a mikroorganizmusok sokkal hatékonyabb dozírozását biztosítják, mint a mikroorganizmusok egyedi mikrokapszulázása.
• · · ·
A jelen találmány tárgya olyan közvetlen táplálékként használható mikrobiális termékek előállítása, amelyek alkalmasak állati tápokhoz való hozzáadásra, és amelyek olyan mikroorganizmusokat tartalmaznak, amelyek egy speciális forgókorongos technikával előállított mikrogömbökben találhatók, szabad zsírsavat használva a gömbök kialakításához.
A jelen találmány tárgya továbbá olyan közvetlen táplálékként használható mikrobiális termék előállítása, amelynek a stabilitása 3-6 hónap között van, anélkül, hogy ezalatt az idő alatt a mikroorganizmusok száma jelentősen csökkenne.
A jelen találmány tárgya továbbá eljárás szárított baktériumok mikrogömbjeinek rotációs úton történő előállítására, ennek során szabad zsírsav hordozót használunk, amely a mikroorganizmusok túlnyomó többségét tartalmazza.
A jelen találmány tárgya továbbá szárított baktériumok rotációs korong mikrogömbjeinek előállítása, amelyek szabadon folynak, és könnyen feldolgozható az állati tápokkal.
A jelen találmány tárgya továbbá Enterococcus faceium, Lactobacilli és élesztő mikrogömbjeinek előállítása.
Az alábbiakban röviden ismertetük a mellékelt ábrák leírását.
Az 1., 2. és 3. ábrák grafikusan mutatják a törzsek mikrogömbjeinek stabilitását, szabad zsírsavként sztearinsavat használva.
A 4., 5. és 6. ábrákon blokkdiagram formában sematikusan mutatják a jelen találmány gyakorlatát.
A 7. ábrán sematikus diagram formájában látunk egyéb, a
-4talámányban hasznosított táp-áramoltatási rendszert.
például találmány tárgya mikroorganizmusokat, baktériumokat tartalmazó zsírsav hordozó mikrogömbök, előnyösen a sztearinsavban kapszulázott Enterococcus faceium előállítása. Az eljárás eredménye például fagyasztva szárított baktériumtenyészet mikrogömbökbeh, amit úgy állítunk elő, hogy a fagyasztva szárított baktériumokat 50-90 súlyszázalékban megolvasztott sztearinsavval keverjük össze, ^majd ezután forgókoronggal dolgozunk fel. Az eljárás, amint azt a későbbiekben részletesen kifejtjük, minimalizálja a hő okozta károsodást az előállítás során.
A találmány tárgyát fagyasztva szárított mikroorganizmusok, beleértve a gombákat, például élesztőket, valamint a baktériumokat rotációs koronggal előállított mikrogömbjei képezik. A mikroorganizmusok előnyösen baktériumok. Ennek a találmánynak olyan jelentős és fontos tulajdonságai vannak, amelyek megkülönböztetik a kapszulázott baktériumokra vonatkozó korábbi szabadalmaktól. Az első a termék természete, azaz a mikrogömbök, a második példa a szabad zsírsav. A harmadik példa a jelentős különbségre a forgókorongos módszer természete. A normális eljárásokban a szokványos porlasztva szárítási eljárást használják, nem a mikrogömbök előállítására alkalmas rotációs korong módszert. Ennek a három különböző tulajdonságnak az együttes hatása az, amely a jelen találmány szerinti közvetlen táplálékként használható) mikrobiális termékek magas stabilitását biztosítja. Ha ezeket a jellemzőket nem alkalmazzuk, akkor a példák által illusztrált előnyök esetleg nem érhetők el.
A mikrogömbök előállítására előnyösen használható hordozó a C12-C24 szabad zsírsav. Míg használhatjuk a szabad zsírsavak keverékeit is, az az előnyös, ha csak egyfajta tiszta zsírsavat használunk. Az is előnyös, ha a szabad zsírsav telített zsírsav, és a legelőnyösebb, ha ez a zsírsav a sztearinsav.
Általánosságban az az előnyös, ha a zsírsav olvadáspontja 75°C-nál alacsonyabb, előnyösen 40°C és 75°C között van. Szobahőmérsékleten természetesen szilárdnak kell lennie, ahhoz hogy hatékony hordozó legyen. Mindan olyan zsírsav, amely a megadott kémiai leírásnak megfelel, megfelel ezeknek a követelményeknek.
A mikrogömbökben használt mikroorganizmusok pontos meghatározása nem lényeges. Azonban az, hogy melyiket választjuk, függ attól, hogy milyen közvetlen táplálékként adagolható mikroorganizmust választunk. Általában a jelen találmányban való alkalmazás céljára az Enterococcus faceium az előnyös baktérium, jóllehet mások is használhatók. Tehát nyilvánvaló, hogy más baktériumok, azaz például Lactobacillus, Bacillus, stb. is használható.
Törzsek keveréke is használható, valamint egyedi törzsek is.
Élesztők és gombák is használhatók. Ahhoz, hogy a baktériumoknál fokozzuk a termék stabilitását, általában fagyasztva szárítjuk, majd így tesszük a termékbe. Ennek következtében nedvesség hozzáadásával életre kelthetők.
A mikrogömbökben, amelyeket az alábbiakban ismertetett eljárás szerint állítunk elő, a részecskék általában 50-90%-ban tartalmazzák a zsírsav komponenst, a maradék a mikroorganizmus, általában baktérium tenyészet. Az előnyös az, ha a zsírsav aránya • 9 *· · · · · — ·* *·· ·* ··· ♦··
60-75% között van. Ha túl kevés zsírsavat használunk, akkr a borítás nem elegendő a védelemhez. Másrészt pedig, ha túl sokat használunk, akkoz a borítás túl vastag lesz, és ennek eredménye az, hogy a gyomorban nem szabadulnak fel megfelelő mértékben a mikroorganizmusok.
A jelen találmányban alkalmazott mikrogömb eljárás a rotációs korong eljárás. A rotációs lemez technológiában a mikroorganizmusokat, gyakran a baktériumokat, valamint a zsírsav komponenseket alaposan összekeverjük, majd a keveréket egyenletes sebességgel egy forgó rozsdamentes korong közepére juttatjuk. A centrifugális erő következtében kifele szóródnak a részecskék. Ezután egy hűtőkamrában összegyűjtjük, amit szobahőmérsékleten, vagy annál kicsit alacsonyabb hőmérsékleten tartunk, méret szerint osztályozzuk, majd előkészítjük a csomagoláshoz.
Jóllehet a rotációs korong eljárás ismert, azonban még nem használták mikrogömbök előállítására. Az anyagok rotációs korong módszerrel való kapszulázásának módszerét Johnson és munkatársai írták le [Johnson et al., Southwest Research Institute of San Antonio, Journal of Gas Chromatography, 345-347 (1965 október)]. Emellett a jelen találmány szerinti eljárásban jól alkalmazható rotációs korong berendezést részletesen ismertetnek az alábbi piblikációban: United States Letters Patent, Sparks, 4,675,140 (1987 június 23); címe: Method Fór Coating Particles or Liquid Droplets. A fenti publikációt a továbbiakban referenciának tekintjük.
Fontos megjegyezni, hogy a rotációs korong alapú mikrgömb készítési eljárás teljesen más terméket eredményez mint a szokványos porlasztótornyos szárítás. A szokványos »«» · • · · · · ·«· ···* • ·· ·· ······ • · · · » • ·· • · • · · _ ry _ ·· »· porlasztótornyos szárításban a részecskéknek megvan a hajlamuk arra hogy aggregálódjanak, mivel nem egyenletes a borításuk, és ennek következtében a termék stabilitása napok, hetek alatt változik. A rotációs mikrogömb eljárásban, főleg a jelen találmányban alkalmazott zsírsavak esetében a keletkező mikroorganizmusok, főleg a baktériumok három-hat hónapig stabilak maradnak, még akkor is, ha valamennyi nedvesség vagy antibiotikum éri őket.
Ha a jelen találmány szerinti szabad zsírsav hordozót alkalmazzuk az alábbiakban ismertetett határokon belül, akkor egy, tipikusan 10 cm-es forgó korongot alkalmazó eljárás 20004000 per perc fordulatszámmal, előnyösen 2500-3200 per perc fordulatszámmal hajtható végre, a betáplálás sebessége 50-200 gramm per perc. A jelenleg ismert előnyös paraméterek a következők: sztearinsav és Enterococcus faceium használata, tíz centiméteres forgó korong, fordulatszáma 3000 per perc, a betáplálás sebessége 100 gramm per perc, 35% baktériumot és 65% sztearinsavat tartalmazó keverékből. Ilyen feltételek mellett 75-300 mikron átmérőjű részecskékből álló terméket kapunk, előnyösen a méret 250 mikronnál alacsonyabb.
Az 1., 2. és 3. ábrákat az 1-4. példákkal kapcsolatban ismertetjük.
A 4-6. ábra sematikus formában a jelen találmány szerinti eljárás előnyös oldalait ismerteti. Részletesen, az alapeljárás hasonlít ahhoz, amit az alap bejelentésben a mikrogömbök leírására ismertettünk. Azonban egy nagyon előnyös változat az, amikor a tenyészetet és az olvasztott zsírsavat külön tápláljuk a korongra, aminek következtében a tenyészet csak nagyon rövid • · · · ideig van hőhatásnak kitéve.
A 7. ábránegy másik, külön tápáramos technikát ismertetünk, amely a jelen találmányban jól használható.
A rendszer további módosítása az, amikor egy nedvességelnyelő oszlopot alkalmazunk a megolvasztott szabad zsírsavnál, és egy nedvesség-elnyelőt a baktérium tenyészet kamrájában. Ezek a módosítások fokozzák az eljárásból kinyerhető életképes mikroorganizmusok mennyiségét, és ezzel feltehetőleg csökkentik a költségeket. A 4. ábrán látható az alapeljárás. , Sztearinsavat teszünk a 10. számú sztearinsav olvasztó edénybe, olyan mennyiségben, amely a néhány órán át való működéshez elegendő. Azután megolvasztjuk. A megolvasztott anyagot azután egy kisebb, 12. számmal jelölt keverőedénybe szivattyúzzuk, amelyben a 10. számú sztearinsavat összekeverjük a tömény tenyészettel, amint azt a 14. és 16. számú tenyészetet tartalmazó edényekkel illusztrálunk. A 12. számú, tenyészetet tartalmazó edény annyit tartalmaz a keverékből, amennyi körülbelül 20 perces működéshez elegendő, ezáltal csökkentjük azt az időt, ameddig a baktériumokat magasabb (60°C) hőmérsékleten tartjuk, amely a hordozóanyag olvadt állapotban való tartásához szükséges. Egy második, 16. számú keverőedényt is működtetünk az előzővel párhuzamosan, azzal a céllal, hogy ha a 14. edény tartalma kezd elfogyni, akkor egy második sarzsot kezdhessünk el keverni a 16. számú edényben. A 14. és 16. számú edény is tartalmaz keverőt (az ábrán nem mutatjuk), hogy a tenyészeteket egyenletesen elkeverve tartsuk. Ilyen típusú keverő rendszer alkalmazásával folytonos áramot lehet biztosítani a 18. számú korongra. Mind a 14. mind a
16. számú edény egy állandó hőmérsékletű olaj fürdőben van, ezzel biztosítjuk, hogy a hordozóanyag olvadt állapotban maradjon a termelés során.
A keveréket a 20. számmal jelölt szivattyúval a 22. számmal jelölt vezetéken át juttatjuk a 24. számmal jelölt gyűjtőkamrába. A 24. számú gyűjtőkamra 26. számú alsó része szöget zár be, ezáltal a mikrogömbök az oldalán legördülnek a 28. számú vezetékbe, ahonnan levegőáram juttatja el őket a 30. számú ciklon gyűjtőbe. A mikrogömböket a 30. számú ciklon gyűjtő fogja meg, majd a 32. számú osztályozó szitára kerülnek, amellyel a túl nagy és túl kis méretű részecskéket eltávolítjuk, bele a 12. számú olvasztó edényben hogy újból belekerüljenek a folyamatba.
Az 5. ábrán a 4. ábrán ismertetett alapeljárás módosítása látható, amely szerint az olaj fürdőben levő 14. és 16. számú tenyészetet tartó edényeket egy 34. számmal jelölt folytonos tenyészet tápláló berendezés helyettesíti, úgy elhelyezve, hogy a tenyészetet a megolvasztott hordozóanyag áramába a 36. számú vonalon át juttatjuk el, valamint a 38. számú tenyészet tápláló vonalon keresztül, közvetlenül a 18. számmal jelzett korong elé.
Ilymódon a tenyészetnek a megolvasztott hordozóval való érintkezési idejét másodpercekre korlátozzuk, a konstans hőmérsékletű fürdőnél előforduló percek helyett, a 14.
és 16.
edényben. Ez a módosítás korlátozza a baktérium hőkárosodását.
A 6. ábrán a rendszer egy további módosítása sej tek látható, amennyiben egy
40. számmal jelzett nedvesség-elnyelő oszlopot iktatunk be a
10. számú sztearinsav olvasztó edény és aközé a pont közé, ahol a tenyészetet vezetjük be a 34. számú folyamatos szilárd tenyészet betápláló berendezés közé. A 42.
számú ···· nedvesség-elnyelőt is beiktatjuk, hogy száraz levegőt biztosítsunk a tenyészethez illetve a 24. számú gyujtőkamrához. Ezek a módosítások, amint azt a 6. ábrán láthatjuk, eltávolítják a fölöslegben levő nedvességet, mielőtt mikrogömböket előállítjuk. A 6. ábrán látható eljárás is, csakúgy mint az 5. ábrán látható eljárás, kihasználja azt az előny, amit a szabad zsírsav előre történő megolvasztása, és a tenyészetnek közvetlenül a rotációs korongra vitel előtti összekombinálása jelent, mindezt azért, hogy csökkentsük a magas ,hőmérsékleten való tartózkodás idejét. A 4., 5. és 6. ábrán látható eljárásoknak mindegyiknek megvan a maga előnye, és az 5. valamint a 6. ábrán bemutatott eljárások alkalmazása különösen előnyös hőre érzékeny anyagok esetében.
A 7. ábrán egy másik, a mikrogömbök előállításában sikeresen alkalmazott módszer látható, amellyel el lehet kerülni a baktériumok hővel való károsodását. A szilárd anyagot a 42. számú belső csövön tápláljuk be, a folyékony zsírsavat pedig a 44. számú külső csövön keresztül. A 46. számmal jelzett űrt hagyjuk a két tápáram között, hogy ezzel megakadályozzuk a két tápáram érintkezését, egészen addig, ameddig a 18. számú korong felszínét elérik. Ahogy a 18. számú korong forog, a szilárd anyag kiáramlik, és érintkezésbe kerül a zsírsav borítóanyaggal, ezéltal borítást kap, miközben a 18. számú forgó korong széle felé vándorol.
Ez a rendszer különösen arra alkalmas, hogy hőre érzékeny anyagokból készítsünk vele mikrogömböket megolvasztott hordozóban, mivel az olvadt hordozóval való érintkezés ideje nagyon rövid.
• · · ·
-11• · ·
Az alábbi példákat azért adjuk meg, hogy tovább illusztráljuk a jelen találmány szerinti eljárást, anélkül, hogy oltalmi körét korlátoznánk.
1. Példa
Az
1. példa megfelel az 1. ábrának. Ezen az
Enterococcus faceium két különböző törzsével készült termék stabilitása látható
4°C-on és
27°C-on. Amint az az 1. ábrán látható, az
Enterococcus faceium törzsekkel készült mikrogömbök stabilitását mutatja, amelyeket a rotációs korong eljárással készítünk, sztearinsavval, 35 súlyszázalék tenyészetből. A módszert a 4.
ábrán mutatjuk be.
A körülmények azok, amelyeket az előzőkben ismertettünk, azaz
35/65 arányú baktérium-sztearinsav arány
60°C-on, 10 cm-es forgó korong használata 3000 per perc forfulatszámmal, a táplálási sebesség 100 gramm per perc. A tenyészetet a hordozóval beborítjuk mikrogömbök képződése közben, majd hővel lezárt, párának ellenálló tasakokba tesszük, és roncsolásos mintavétellel hetenként meghatározzuk a CFU értéket.
Látható, hogy a találmány szerinti termék nagyon jól tartja a telepképző egység (CFU) számát egészen 70 napos tárolási időig.
2. Példa
A 2. példát a 2. ábrával kapcsolatban értelmezzük. Az ábrán az egyes kapszulázott törzsek stabilitása látható, ha a tipikus betáplálás! arányban keverjük össze, három csirke antibiotikum jelenlétében. Az összetétel az alábbi:
54% finomszemcsés kukorica őrlemény szój aliszt
26%
2% halliszt
1,5% dikalcium-főszfát
1% kréta
5,5% szőj aolaj
2% nedvességtartalom
Három antibiotikumot adunk hozzá az alábbi súlyarányban: Deccox 6% (454 ppm), Salinomycin (50 ppm) és monenzin-nátriumsó (120 ppm).
A tenyészetet olyan arányban adjuk a keverékhez, hogy körülbelül 1x10 CFU/gramm táp legyen a koncentrációja. A tápot hővel lezárt tasakokba csomagoljuk, majd szobahőmérsékleten inkubáljuk. Hetente mintát veszünk a CFU meghatározáshoz. A 2. ábrán látható grafikon igazolja a kiváló stabilitást.
3. Példa
A 3. példát a 3. ábrával kapcsolatban értelmezzük. Ez a kapszulázott Enterococcus faceium keverék stabilitását mutatja a tápban, különböző antibiotikumok jelenlétében. Az összetétel az alábbi:
60% finomszemcsés kukorica őrlemény
38% szőj aliszt
2% kréta
kb . 14% nedvességtartalom
A tenyészetet körülbelül 10® CFU/gramm táp mennyiségben
adjuk a keverékhez , majd összekeverjük. 4,5 kg-os alikvot
részeket tárolunk lezárt zacskókban 20°C-on, majd hetente mintát
veszünk belőle 16 héten át. Az antibiotikumokat az alábbi
mennyiségben tettük a keverékbe:
-13- • · · · · · · • · · · · • · · · · • · · · • · · · · · · • · · · · • · · • · · * • · • · · · · ·
Bacitracin-metilén-diszalicilát 50 g/tonna
Carbadox 50 g/tonna
Klórtetraciklin 200 g/tonna
Lasalocid 30 g/tonna
Linkomicin 100 g/tonna
Neomicin 140 g/tonna
Oxitetraciklin 150 g/tonna
Szulfametazin 100 g/tonna
Tilozin 100 g/tonna
Virginiamicin 20 g/tonna
ASP250 100 g/tonna
Az 1. táblázatban a telepképző egységek (CFU) számának 1 nagyságrenddel való csökkenéséhez mért minimális időket tüntetjük fel.
1. Táblázat
A CFU szám egy nagyságrendéi való csökkenéséhez mért idő napokban , 20°C-on, 14% nedvességtartalmú tápban
Antibiotikum
Kontroll Bacitracin
Carbadox Klórtetraciklin Lasalocid
Linkomicin
Neomicin
Tárolási idő (nap
103
Oxitetraciklin 59
Szulfametazin 62
Tilozin 52
Virginiamicin 112
ASP250 67
Furadox 53
4. Példa
A 4. példában a termék stabilitását azután határozzuk meg, hogy csirketápként való felhasználás céljából granuláltuk. A mikrokapszulázási körülmények ugyanazok, mint amiket az előzőkben ismertettünk. Az ebben a vizsgálatban alkalmazott körülmények az alábbiak:
Nyers fehérje, nem kevesebb mint 18,0%
Nyers zsír, nem kevesebb mint 5,0%
Nyers rost, nem több mint 6,0%
Az antibiotikumot (CTC 50 g/tonna) tartalmazó illetve nem tartalmazó granulátumokat az alábbi adalékanyagokkal készítjük, az alábbiakban jelzett körülmények között.
Kukorica, SBM, savó, szójaolaj, dikalcium-foszfát, kréta, nyomelem premix, vitamin premix, szelén, rézszulfát. A tenyészetet körülbelül 5x10 CFU/gramm táp mennyiségben adagoljuk (100-150 g/tonna).
A kondicionálás hőmérséklete 70°C, és a festéken kívüli granulátumok 78°C-nál vannak.
A granulátumokat lazáratlan zacskókban tároljuk, majd hetente mintát veszünk a CFU meghatározáshoz.
-15A granulált termék stabilitását egyik esetben sem érintik károsan a granulálás körülményei. Pontosabban, a granulált termék stabilitása azonos volt a nem granulált termékével.
5. Példa
Az 5. példa azt az esetet mutatja be, amikor az eljárást az
1. példában leírtak alapján hajtjuk végre, azzal a különbséggel, hogy az Enterococcus faceium törzs helyett a mikrogömbökben a sztearinsav élesztőt borít be. A 2. táblázatban, láthatók az eredmények.
Az eljárásban keletkező mikrogömbök élesztőt tartalmaznak, és az élősejt szám megfelel a táblázatban bemutatottnak. A terméket szobahőmérsékleten 84 napig tároltuk. A tárolási periódus végén megvizsgáljuk az élő élesztősejtek számát. A 84. napon a mikrogömbökben az életképes élesztősejtek száma 1,3x109 CFU per gramm. A kicsit magasabb kinyerés a mikrogömbök mintavételénél és vizsgálatánál tapasztalt normális variáció következménye. Egy élesztőt tartalmazó mikrogömb mintát (0,841 g) 2270 g tipikus csirketáppal keverünk össze, majd szobahőmérsékleten tároljuk. A csirketáp 17% nedvességet tartalmazott, és a 2. példában leírtak alapján állítottuk elő.
o
A mikrogömbök kezdeti 5,3x10 CFU per gramm száma alapján a hígítás alapján számított érték 1,96x10 CFU per gramm. 84 napos tárolás után a tápban ismét megvizsgáltuk az életképes élesztősejtek számát. A 84. napon az életképes élesztősejtek száma 7x10^ CFU per gramm táp.
6. Példa ·
• · · · • « • 4 · · · ·
-15- .............
Az 1. példában ismertetett mikrogömb eljárást az alábbi módosítással hajtjuk végre:
1) A Lactobacillus nemből és a L. plantarum vagy L. caseii törzset használjuk.
2) A baktériumtenyészeteket 2-40% között alkalmazzuk, alőnyösen körülbelül 30%-ban.
3) A baktériumtenyészetet közvetlenül azelőtt juttatjuk a megolvasztott sztearinsavba, mielőtt érintkezésbe lép a forgó koronggal, amint az a 4. ábrán látható.
4) A tárolás és a feldolgozás során meg kell védenünk a baktériumtenyészetet a magas, azaz mondjuk 40%-nál magasabb nedvességtartalomtól, az 5. ábrán látható módosítások alkalmazásával.
5) Vigyázni kell arra, hogy a levegő hőmérséklete 26-27°Cnál alacsonyabb maradjon, és a mikrogömbök kinyerésének területén a nedvességtartalom körülbelül 60% vagy kevesebb legyen. A további kísérleteket, azaz például azokat, amelyeket a 2. példában soroltunk fel, a Lactobacillus nem és a L. plantarum, L. acidophilus vagy a L. caseii fajok mikrogömbökbe való zárásával végezhetjük. Az ilyen eljárástól elvárható, hogy a mikrogömbökbe zárt mikroorganizmus kiváló túlélést mutat, az életképesség a telepképző egységek (CFU) száma alapján maximum egy nagyságrendet csökken a tárolás ideje alatt, ami egészen 70 napig terjedhet. Az is várható, hogy a mikrogömbökbe zárt mikrorganizmusok, ha egy tipikus csirketáppal keverjük össze, megtartják a kiváló túlélőképességüket, a CFU szám alapján mért életképesség-csökkenés maximum egy nagyságrend, egészen 45 napi tárolásig.

Claims (18)

1.
Mikroorganizmusok szárított, rotációs korongos mikrogömbjei, azzal jellemezve, hogyaz említett mikroorganizmusok egy zsírsav hordozóban vannak.
2. Az 1. igénypont szerinti mikrogömbök, azzal j ellemezve, hogy c12-<--24 zsírsavat használunk.
3. A 2. igénypont szerinti mikrogömbök, azzal j ellemezve, hogy zsírsavként sztearinsavat használunk.
hogy
4. Az 1. igénypont szerinti mikrogömbök, azzal a mikroorganizmusok baktériumok, és az említett
50-90%-ban tartalmaznak zsírsavat, a többi jellemezve, mikrogömbök pedig baktériumtenyészet.
5. Az 1. igénypont szerinti mikrogömbök, azzal jellemezve, hogy a baktérium Enterococcus faceium.
6. Az
1. igénypont szerinti baktériumkat tartalmazó mikrogömbök, azzal jellemezve, hogy a baktérium
Enterococcus faceium.
7. Az
1. igénypont szerinti baktériumkat tartalmazó mikrogömbök, azzal jellemezve, hogy a baktérium Lactobacillus.
8. Az 1. igénypont szerinti mikrogömbök, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmus élesztő.
9. Eljárás mikroorganizmusok zsírsav hordozóval készített különálló egyedi mikrogömbjeinek előállítására, azzal jellemezve, hogy az eljárás az alábbi lépésekből áll:
előállítjuk a mikroorganizmus tenyészetet, az említett szárított tenyészetet 50-90 súlyszázaléknyi megolvasztott zsírsavval keverjük össze, majd ···· • «·
-18• »· ·· ·· •« ····· rotációs korongon dolgozzuk fel a zsírsav és szárított mikroorganizmus keverékét, hogy így zsírsavval borított mikroorganizmusok szabadon folyó mikrogömbjeit kapjuk.
10. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a forgó korong 2000-4000 per perc fordulatszámon működik.
11. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a forgó korong 2500-3200 per perc fordulatszámon működik.
12. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az anyagnak a rotációs korongra való rátáplálási sebessége
50-200 gramm per perc között van.
13.
A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szabad zsírsav Ci2-C24 zsírsav14 .
A 13. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy szabad zsírsav sztearinsav.
15.
A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy baktérium Enterococcus faceium.
16. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy zsírsavat az első tápáramban, a baktériumokat a második tápáramban juttatjuk a forgó korongra.
17. A
16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az első és második tápáramot egészén addig egymástól elkülönítve tartjuk, ameddig el nem érik a korongot.
18. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy előtt annyi ideig lépnek érintkezésbe egymással, amennyi idő alatt a mikroorganizmus megtartja az életképességét.
19. A 18. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az első és a második tápáram egy percnél rövidebb ideig ··· érintkezik, mielőtt elérik a korongot.
20. Eljárás mikroorganizmusok zsírsav hordozóval készített különálló egyedi mikrogömbjeinek előállítására, azzal jellemezve, hogy az eljárás az alábbi lépésekből áll:
előállítjuk az első tápáramot, amely megolvasztott Ci2-C24 zsírsavból áll, előállítjuk a második tápáramot, amely mikroorganizmus tenyészetből áll, az említett mikroorganizmus tápáramot és „ az említett olvasztott zsírsav tápáramot egymástól elkülönítve juttatjuk egy rotációs korong berendezésre, oly módon, hogy 50-90 súlyszázalékot tartalmaz az említett megolvasztott zsírsavból, és az említett keveréket rotciós korong berendezésen dolgozzuk fel, oly módon, hogy a mikroorganizmusból szabadon folyó zsírsav hordozós mikrogömböket kapunk.
HU9402420A 1992-02-26 1993-02-02 Dried, rotary disc microspheres of microorganism HUT71198A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/842,226 US5292657A (en) 1990-12-31 1992-02-26 Process for preparing rotary disc fatty acid microspheres of microorganisms

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9402420D0 HU9402420D0 (en) 1994-10-28
HUT71198A true HUT71198A (en) 1995-11-28

Family

ID=25286817

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9402420A HUT71198A (en) 1992-02-26 1993-02-02 Dried, rotary disc microspheres of microorganism

Country Status (15)

Country Link
US (1) US5292657A (hu)
EP (1) EP0628072B1 (hu)
JP (1) JP2683956B2 (hu)
AT (1) ATE171468T1 (hu)
BG (1) BG98996A (hu)
BR (1) BR9305977A (hu)
CA (1) CA2130918C (hu)
CZ (1) CZ282093B6 (hu)
DE (1) DE69321219T2 (hu)
HU (1) HUT71198A (hu)
MX (1) MX9300671A (hu)
RU (1) RU2096453C1 (hu)
SI (1) SI9300092A (hu)
SK (1) SK101294A3 (hu)
WO (1) WO1993017094A1 (hu)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9107305D0 (en) * 1991-04-08 1991-05-22 Unilever Plc Probiotic
EP0631616A4 (en) * 1992-03-17 1995-04-19 Pioneer Hi Bred Int FATTY ACID-BASED MICROSPHERES, CONTAINING ANTEROCOCKS AND DRIVES TO PROMOTE GROWTH AND IMPROVE THE QUANTITY OF CARCASS.
WO1997045530A1 (fr) * 1996-05-27 1997-12-04 UZILOVA, Irina Semenovna, Heiress of UZILOV Utilisation de souches de streptococcus faecium et composition a base de ces souches
HN2003000009A (es) * 2002-01-08 2004-01-29 Basf Ag Encapsulamiento por recubrimiento con una mezcla de lipidos y compuestos hidrofobicos de alto punto de fusion.
EP1405665A1 (en) * 2002-10-01 2004-04-07 Alarvita Biolife Corporation Particle embedded with chemical substances and method of producing a particle
EP1592760A4 (en) * 2003-01-31 2009-08-12 Smithkline Beecham Corp AS FIXED DISPERSIONS, COMPOSITIONS
PL1691787T3 (pl) * 2003-12-04 2008-11-28 Pfizer Prod Inc Sposób wytwarzania farmaceutycznych systemów wielocząstkowych
CA2547597A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Multiparticulate compositions with improved stability
CA2549225A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Spray-congeal process using an extruder for preparing multiparticulate crystalline drug compositions containing preferably a poloxamer and a glyceride
US6984403B2 (en) * 2003-12-04 2006-01-10 Pfizer Inc. Azithromycin dosage forms with reduced side effects
CN1889931A (zh) * 2003-12-04 2007-01-03 辉瑞产品公司 利用挤压器制备优选含泊洛沙姆和甘油酯的多重粒子阿奇霉素组合物的喷雾－冻凝方法
AU2004294818A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Azithromycin multiparticulate dosage forms by liquid-based processes
WO2005053652A1 (en) 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Multiparticulate crystalline drug compositions containing a poloxamer and a glyceride
WO2005053639A2 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Controlled release multiparticulates formed with dissolution enhancers
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
US20050158294A1 (en) 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
FR2863828B1 (fr) * 2003-12-23 2007-02-02 Gervais Danone Sa Produit alimentaire liquide comprenant des granules de bacteries lactiques
US20050266027A1 (en) 2004-05-25 2005-12-01 Watson James B Live organism product
KR101196136B1 (ko) * 2004-08-27 2012-10-30 에이디엠 얼라이언스 뉴트리션, 인코포레이티드 고지방 동물 사료 펠릿 및 그 제조 방법
CA2882512C (en) * 2004-09-01 2016-06-07 Victor Nsereko Ferulate esterase producing strain lactobacillus brevis lb1154 and methods of using same as a silage inoculant
AU2006253006B8 (en) 2005-05-31 2011-09-15 Alimentary Health Ltd Feline probiotic Lactobacilli
JP4938006B2 (ja) 2005-05-31 2012-05-23 ザ・アイムス・カンパニー ネコ科動物プロバイオティク・ビフィドバクテリア
US7758778B2 (en) * 2005-09-07 2010-07-20 Southwest Research Institute Methods for preparing biodegradable microparticle formulations containing pharmaceutically active agents
US9693967B2 (en) * 2005-09-07 2017-07-04 Southwest Research Institute Biodegradable microparticle pharmaceutical formulations exhibiting improved released rates
US7261529B2 (en) * 2005-09-07 2007-08-28 Southwest Research Institute Apparatus for preparing biodegradable microparticle formulations containing pharmaceutically active agents
FR2909685B1 (fr) * 2006-12-08 2012-12-21 Lallemand Sas Levures seches actives enrobees et aliments les renfermant
US20090028991A1 (en) * 2006-12-11 2009-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN1284 and its use to improve aerobic stability of silage
US20080138463A1 (en) * 2006-12-11 2008-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN5689 and its use to improve aerobic stability of silage
US20080138462A1 (en) * 2006-12-11 2008-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN5665 and its use to improve aerobic stability of silage
US20090028992A1 (en) * 2006-12-11 2009-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN1286 and its use to improve aerobic stability of silage
US20080138461A1 (en) * 2006-12-11 2008-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN1297 and its use to improve aerobic stability of silage
PL2124966T3 (pl) 2007-02-01 2016-01-29 Iams Europe B V Sposób zmniejszania reakcji zapalnej i stresu u ssaków za pomocą antymetabolitów glukozy, awokado lub ekstraktów awokado
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
US9232813B2 (en) 2008-07-07 2016-01-12 The Iams Company Probiotic supplement, process for making, and packaging
US8241717B1 (en) 2008-08-20 2012-08-14 SepticNet Inc. Carbon-based biofilm carrier
EP2381799B1 (en) * 2009-01-27 2018-08-08 Probiotical S.p.a. Chocolate flavoured probiotic supplement
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
US8359820B2 (en) 2010-01-13 2013-01-29 Dohrmann Daniel R Ultra-low flow agricultural pump with unobstructed flow path and electronic flow control, tank refill indication, and detection of loss of flow
US9822334B2 (en) 2014-03-07 2017-11-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Rapid acting lactobacillus strains and their use to improve aerobic stability of silage
US10883079B2 (en) 2015-04-07 2021-01-05 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of Agriculture And Agri-Food Method for preparing microencapsulated heat-sensitive bioactive material

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1260899A (en) * 1914-12-10 1918-03-26 Arlington Chemical Company Process for compounding germs with an enveloping protective medium.
US2369218A (en) * 1941-01-02 1945-02-13 George F Dick Preparations of scarlet fever toxin for administration by mouth
US3856699A (en) * 1969-08-08 1974-12-24 Fuji Photo Film Co Ltd Process for producing capsules having walls of a waxy material
US3959493A (en) * 1971-03-17 1976-05-25 Rumen Chemie, Ag Rumen bypass products comprising biologically active substances protected with aliphatic fatty acids
GB2016043A (en) * 1978-03-08 1979-09-19 Danochemo As Bacteria-containing product for use in animal feeds, and its production
CH637297A5 (fr) * 1978-12-05 1983-07-29 Nestle Sa Microbille comprenant un microorganisme et son procede de fabrication.
US4352883A (en) * 1979-03-28 1982-10-05 Damon Corporation Encapsulation of biological material
US4386895A (en) * 1981-11-13 1983-06-07 Damon Corporation Apparatus for producing capsules
US4675140A (en) * 1984-05-18 1987-06-23 Washington University Technology Associates Method for coating particles or liquid droplets
US4713245A (en) * 1984-06-04 1987-12-15 Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated Granule containing physiologically-active substance, method for preparing same and use thereof
JPS615022A (ja) * 1984-06-19 1986-01-10 Advance Res & Dev Co Ltd 腸内細菌叢改善剤
US4692284A (en) * 1986-04-30 1987-09-08 Damon Biotech, Inc. Method and apparatus for forming droplets and microcapsules
FR2603458B1 (fr) * 1986-09-04 1990-11-02 Rhone Poulenc Sante Nouvelles compositions pour l'enrobage des additifs alimentaires destines aux ruminants et additifs alimentaires ainsi enrobes
JP2547995B2 (ja) * 1987-01-26 1996-10-30 昭和電工株式会社 反すう動物用粒剤及びその製造法
RU2096452C1 (ru) * 1990-12-31 1997-11-20 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Способ приготовления микрокапсул из бактерий в жирной кислоте и микрокапсула, содержащая лиофилизированную бактериальную культуру
WO1993006208A1 (en) * 1991-09-20 1993-04-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Fatty acid microencapsulated enterococcus for use with poultry
EP0631616A4 (en) * 1992-03-17 1995-04-19 Pioneer Hi Bred Int FATTY ACID-BASED MICROSPHERES, CONTAINING ANTEROCOCKS AND DRIVES TO PROMOTE GROWTH AND IMPROVE THE QUANTITY OF CARCASS.

Also Published As

Publication number Publication date
CZ204994A3 (en) 1994-12-15
HU9402420D0 (en) 1994-10-28
EP0628072B1 (en) 1998-09-23
BR9305977A (pt) 1997-11-18
BG98996A (bg) 1995-07-28
DE69321219D1 (de) 1998-10-29
DE69321219T2 (de) 1999-04-15
RU2096453C1 (ru) 1997-11-20
CA2130918A1 (en) 1993-09-02
MX9300671A (es) 1993-09-01
US5292657A (en) 1994-03-08
SI9300092A (en) 1993-09-30
EP0628072A1 (en) 1994-12-14
EP0628072A4 (en) 1995-12-20
CZ282093B6 (cs) 1997-05-14
JPH07503375A (ja) 1995-04-13
RU94042902A (ru) 1996-12-20
SK101294A3 (en) 1995-04-12
WO1993017094A1 (en) 1993-09-02
ATE171468T1 (de) 1998-10-15
CA2130918C (en) 1993-09-02
JP2683956B2 (ja) 1997-12-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUT71198A (en) Dried, rotary disc microspheres of microorganism
US4888171A (en) Granular product of dried microorganism cells and manufacturing method therefor
EP2117354B1 (en) A dry food product containing live probiotic
US5310555A (en) Oral nutritional and dietary composition
CN101289648B (zh) 一种屎肠球菌微胶囊制剂及其制备方法
CN1413125A (zh) 敏感物质胶囊化封装
CN109170235A (zh) 益生菌微胶囊及其制备方法与应用
CA2324364A1 (en) Starch capsules containing microorganisms and/or polypeptides or proteins and a process for producing them
EP0565522B1 (en) Dried, rotary disc fatty acid microencapsulated bacteria
Xie et al. Whey protein hydrolysates as prebiotic and protective agent regulate growth and survival of Lactobacillus rhamnosus CICC22152 during spray/freeze‐drying, storage and gastrointestinal digestion
JPH06511148A (ja) 家禽用脂肪酸マイクロカプセル化腸球菌
CN106858040A (zh) 高含量还原型谷胱甘肽酿酒酵母培养物及其生产方法
JPH09110705A (ja) 耐酸性に優れた腸内有用細菌含有顆粒の製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
DFD9 Temporary protection cancelled due to non-payment of fee