SI9300092A - Microspheres with microorganisms, such as bacteria and yeast, dried on rotated disk, and process for the preparation the same - Google Patents

Microspheres with microorganisms, such as bacteria and yeast, dried on rotated disk, and process for the preparation the same Download PDF

Info

Publication number
SI9300092A
SI9300092A SI19939300092A SI9300092A SI9300092A SI 9300092 A SI9300092 A SI 9300092A SI 19939300092 A SI19939300092 A SI 19939300092A SI 9300092 A SI9300092 A SI 9300092A SI 9300092 A SI9300092 A SI 9300092A
Authority
SI
Slovenia
Prior art keywords
microspheres
fatty acid
microorganisms
rotating disk
bacterium
Prior art date
Application number
SI19939300092A
Other languages
English (en)
Inventor
William M. Rutherford
Jack E. Allen
Herman Wade Schlameus
Donald J. Mangold
William W. Harlowe Jr.
Joseph R. Lebeda
Original Assignee
Pioneer Hi-Bred International, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pioneer Hi-Bred International, Inc. filed Critical Pioneer Hi-Bred International, Inc.
Publication of SI9300092A publication Critical patent/SI9300092A/sl

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/02—Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/04—Making microcapsules or microballoons by physical processes, e.g. drying, spraying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K40/00—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs
    • A23K40/30—Shaping or working-up of animal feeding-stuffs by encapsulating; by coating
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Processing Of Solid Wastes (AREA)
  • Seasonings (AREA)

Description

MIKROSFERE MIKROORGANIZMOV, KOT SO BAKTERIJA IN KVASOVKE OSUSENE Z VRTEČIM SE DISKOM IN POSTOPEK ZA PRIDOBIVANJE
OZADJE IZUMA
Poznano je, da so določeni mikroorganizmi, kot so bakterije potencialno koristni, kadar so dodani v živalsko krmo. Bakterije so na primer koristne po tem, da oskrbujejo krmo z intestinalno mikrofloro. Nekatera podjetja ponujajo mikrobe, ki vsebujejo željeno bakterijo, za direktno uporabo v prehrani. Mikrobi za direktno uporabo v prehrani, pa le s težavo vzdržujejo stabilen produkt. Ponavadi se mikrobi za direktno uporabo v prehrani uporabljajo v zelo majhnih odmerkih (cca 17.), kot dodatek krmi. Vendar je neuporab 1 j ena krma, ki vsebuje mikrobe, ali prehrambeni dodatek, ki vsebuje mikrobe, pogosto vskladiščena pri kmetih za daljša časovna obdobja. Skladišča so pogosto vlažna. V mnogih primerih je vlage ravno dovolj, da se bakterije aktivirajo ali začno rasti, ni pa je v zadostni količini, da bi se bakterije obdržale pri življenju. Zato poginejo. Torej je aktivnost mikrobov za direktno uporabo v prehrani ustavljena. V drugih primerih, dodajanje antibiotikov v mikrobe za direktno uporabo v prehrani ali v prehrambene dodatke nasprotno interaktivno vpliva na bakterije, še posebej, če je prisotna manjša količina vlage in bakterije zopet poginejo. Torej je tu prisoten resen problem stabilnosti mikrobov za direktno uporabo v prehrani, tekom skladiščenja za daljše časovno obdobje.
V drugih okoljih, kjer se kot dodatek uporabljajo mikrobi za direktno uporabo v prehrani, npr. pri hranjenju piščancev, navadno material z dodatkom mokrobov za direktno uporabo v prehrani, kapsuliramo. Vlaga iz pare, uporabljene tekom kapsuliranja, parcialno aktivira bakterije, vendar pa jih lahko zaradi nezadostne količine vlage tudi pobije. Ravno tako jih lahko, tekom kapsuliranja, pobije tudi vročina. Obstaja pa tudi problem kislega okolja želodca, ki lahko bakteriji odvzame vso učinkovitost še preden dosežejo črevo. Torej obstaja stalna potreba po mikrobiotikih za direktno uporabo v prehrani, ki bodo organizme sprostili pravočasno v črevesu, brez poprejšnje sprostitve zaradi vlage ali neugodnih pH pogojev, ki obstajajo v prebavnem traktu pred tankim črevom.
Pomembno je, da za nemene tega izuma poudarimo, da prosta maščobna kislina ne vkapsulira in ne formira mikrokapsule mikroorganizmov individualno. Namesto tega, produkt postopka tega izuma formira mikrosfere. Mikrosfera je matrika maščobne kisline, v katero so vključene množice mikroorganizmov. To se razlikuje od mikrokapsule, v katero so vkapsulirani posamezni mikroorganizmi. V mikrosferi matrika služi za sestavljanje podobnih v razmerju med cookie dough matrix in chocolate chip cookies”, kjer chips predstavlja skupino mikroorganizmov, kot so bakterije ali kvasovke. Mikrokapsule v postopku tega izuma ne bodo delovale medtem, ko mikrosfere bodo. Mikrosfere zagotavljajo stabilnost in bolj učinkovito dozi ranj e, kot individualno mikrokapsuliranje posameznega organizma.
Primarni cilj tega izuma je zagotoviti mikrobe za direktno uporabo v prehrani, primerne za dodatke v živalsko krmo, ki vsebujejo mikroorganizme, ki se nahajajo v mokrosferah, pridobljenih s posebno rotary process tehniko, z uporabo prostih maščobnih kislin za formiranje sfer.
Nadalje je cilj tega izuma zagotoviti mikrobe za direktno uporabo v prehrani živali, s stabilnostjo v rangu od treh do šestih mesecev brez kakeršnegakoli znatnega zmanjšanja števila organizmov.
Nadalje je cilj tega izuma zagotoviti postopek rotacijskega pridobivanja mikrosfer osušenih bakterij, ki zagotavljajo matrike prostih maščobnih kislin, ki vsebujejo množice organizmov.
Nadalje je predmet tega izuma preskrbeti rotacijske diskaste mikrosfere osušenih bakterij, ki prosto plavajo in lahko oplemenitijo obroke živalske krme.
Nadalje je cilj tega izuma preskrebeti mikrosfere sledečih organizmov: Enterococcus faceium, Lactobaci11i in kvasovk.
KRATEK OPIS SLIK
Slike 1, 2 in 3 grafično prikazujejo stabilnost mikrosfer, ob uporabi stearinske kisline, kot proste maščobne kosline.
Slike 4, 5 in 6 prikazujejo v obliki blok diagrama sheme za uporabo tega izuma.
Slika 7 prikazuje v shematskem diagramu drug prehrambeni sistem za uporabo v tem izumu.
OPIS IZUMA
Na razpolago imamo drobce mikrosfer matrik maščobne kisline, ki vsebujejo organizme kot so bakterije, najbolje s stearinsko kislino vkapsulirane Enterococcus faceium. Postopek zagotavlja, na primer 1iofi1izirane (freeze dried) bakterijske kulture v mikrosferah, pridobljene z mešanjem 1iofi1izirane bakterije, z od 50 do preko 90 utežnih procentov raztopino stearinske kisline in nato obdelavo z vrtečim se diskom. Postopek je, kot je kasneje razloženo, konstruiran tako, da minimizira toplotno tveganje mikrosfer med proizvodnjo.
DETALJNI OPIS IZUMA
Ta izum se nanaša na 1iofi1izirane rotacijske diskaste mikrosfere mikroorganizmov, vključno z gljivicami kot so kvasovke in vključno z bakterijami.
Bolj željeni organizmi so bakterije. Obstajajo trije značilni in pomembni vidiki tega izuma, ki ga ločujejo od drugih prejšnjih patentov za vkapsu1iranj e bakterij. Kot prvo je to narava produkta, to je mikrosfere, kot drugo je to prosta maščobna kislina. Tretja značilnost je narava postopka z vrtečim se diskom. Običajni postopki uporabljajo konvencionalno spray drying tehniko in ne postopek z vrtečim se diskom za pridobivanje mikosfer. Kombinacija vplivov teh treh pomembnih značilnosti pa omogoča pridobivanje visoko stabilnih mikribov za direktno uporabo v prehrani, tega izuma. Ce teh značilnosti ne uporabimo ne dosežemo prednosti ilustriranih v primerih.
Zeljena matrika za formiranje mikrosfer je Ci2 do proste maščobne kisline. Uporabimo lahko mešanice prostih maščobnih kislin, bolj željena pa je uporaba ene, čiste proste maščobne kisline. Prav tako je željeno, da je prosta maščobna kislina nasičena, najbolje je, da je je to stearinska kislina.
Na splošno je pomembno, da ima maščobna kislina tališče pod 75°C, bolje med 40°C in 75°C. Pri sobni temperaturi pa mora seveda biti v trdnem stanju, da je učinkovita matrika. Vse proste maščobne kisline, ki spadajo v območje kemijskega opisa podanega dosedaj, bodo izpolnjujevale te pogoje.
Natančnost mikroorganizma za uporabo v mikrosferah ni pomembna. Natančnost izbranega mikroorganizma pa je odvisna od načina formiranja mikrobov za direktno uporabo v prehrani. Na splošno je za uporabo v tem izumu željena uporaba bakterije Enterococcus faceium, čeprav lahko uporabimo tudi druge. Torej je razumljivo, da lahko uporabimo tudi druge bakterije kot npr. Lactobacillus,
Bači 1lus, itd. Lahko uporabimo mešanico različnih rodov, kot tudi posamezne rodove. Lahko uporabimo tudi kvasovke in plesen. Da povečamo stabilnost produkta za bakterije so lete ponavadi 1iofi1izirane in nato nameščene v produkt. Tako jih lahko oživimo z dodajanjem vlage.
V mokrosferah, narejenih v skladu s tem postopkom, delci običajno vsebujejo od cca. 507. do preko 907. komponent maščobne kisline, uravnotežene z mi kroorganizrni, ponavadi bakterijskimi kulturami. Bolj željen obseg je od cca 607. do cca. 757. maščobne kisline. Ce uporabimo premalo maščobne kisline bo prevleka neprimerna za zaščito. Po drugi strani pa bo ob uporabi preveč maščobne kisline, prevleka predebela in rezultat bo v nepravočasnem sproščanju v črevu.
Postopek mikrosfer, kot je uporabljen v tem izumu je (rotary disc postopek) postopek z vrtečim se diskom. Na splošno je v rotary disc tehnologiji blato iz mikroorganizmov, pogosto iz bakterij in komponent maščobnih kislin, temeljito premešano z mešanico, katero dodajamo v enotnih odmerkih na središče vrtečega se diska iz nerjavečega jekla. Zaradi centrifugalne sile je izvržen navzven in nato zbran v hladilno komoro, kjer vzdržujemo pogoje okolja ali malo nižje in nato odmerjen v pravilne odmerke za pakiranje.
Medtem, ko je obdelava z brtečim se diskom znana, ni poznana za uporabo z mikroorganizmi za pripravo mikrosfer.
Na splošno rečeno, za opis vkapsulacije s pomočjo vrtečega se diska, glej dokument pri Johnsonu, et al. of the Southwest Research Institute of San Antonio, v Journal of Gas Chromatography, Oktober, 1965, strani 345-347. Poleg tega je procesor z vrtečim se diskom primeren za uporabo v tem izumu detaljno opisan v United States Letters Patent, Sparks, 4,675,140, izdano 23.Junija 1987 pod naslovom Method For Coating Particles pr Liquid Droplets (Postopek za oplaščevanje trdnih delcev ali tekočinskih kapljic op. prev.), v izumu, ki je z navedbo vključen v ta izum.
Pomembno je poudariti, da pridobivanje mikrosfer po postopku z vrtečim se diskom omogoča bistveno drugačne produkte, kot jih omogoča običajni tower spray drying. V običajnem tower spray dryingpostopku obstaja tendenca drobcev, da se strnejo v skupine, kar je za oplaščevanje zelo slabo in tudi za stabilnost produkta za bistvene poškodbe, morda od nekaj dni do nekaj tednov. Kadar uporabljamo rotacijski postopek za pridobivanje mikrosfer, še posebej z agensi maščobnih kislin tega izuma, je stabilnost mikroorganizmov, še posebej bakterij, celo kadar jih podvržemo nekaj vlage in antibiotikom, od treh do šestih mesecev.
Kadar uporabimo matrike mikrosfer materiala prostih maščobnih kislin iz tega izuma, v odmerkih kot so izraženi zgoraj, uporabimo ponavadi rotacijski disk premera 101,6 mm, ki se vrti s hitrostjo 2000 obratov/min do 4000 obratov/min, bolje od 2500 obratov/min do 3200 obratov/min, odmerki katere dodajamo, pa so od 50g do 200g na minuto. 2eljeni pogoji, ki so trenutno poznani so uporaba stearinske kisline, uporaba Enterococcus faceium, 101,6 mi 1imeterski rotacijski disk, 3000 obratov/min in odmerek dodajanjar100g na minuto blata, ki vsebuje bakterija/stearinsko kislino in sicer 357. bakterije in 657. stearinske kisline. Ko je to storjeno dobimo produkt dimenzije 75pm do 300pm, željena dimenzija produkta pa je manj kot 250pm.
Slike 1, 2 in 3 bodo opisane v povezavi s primeri 1-4.
Slike 4-6 prikazujejo, v shematski obliki, željene aspekte postopka tega izuma. Bolj natančno, osnovni postopek je enak tistemu, ki je opisan v patentni prijavi za pridobivanje mikrosfer. Vendar je mnogo bolj željena opcija ločeno dodajanje kulture in stopljene proste maščobne kisline, kar ima za posledico, da je kultura, izpostavljena vročini zelo krateke časovne periode.
Slika 7 prikazuje drug način tehnike oddvojenega toka dodajanja, ki je uporaben za ta izum.
Nadaljna modifikacija v sistem vključuje dodajanje oglja, ki absorbira vlago za stopljeno prosto maščobno kislino in dehidratorja za komore bakterijskih kultur. Te modifikacije bodo povečale oživitev mikrosfernih organizmov iz postopka, ob možnosti znižanja produkcijskih stroškov.
Slika 4 prikazuje osnovni proces. Stearinsko kislino damo v kotliček 10 za topljenje stearinske kisline v odmerkih zadostnih za delovanje več ur. Material se v kotličku topi. Stopljeni material je prečrpan v manjšo mešalno posodo 12, kjer je stearinska kislina 10 zmešana z koncentratom kulture, kot ke prikazano v kotličkih kultur 14 in 16. Kotliček 12 drži le toliko mešanice, da lahko postopek traja približno 20 minut in omejuje izpostavijanje bakterije višjim temperaturam (60°C) zahtevanim, da ostane matrika stopljena. Druga mešalna posoda 16 deluje simultano tako, da ko vsebina kotlička 14 začne upadati, lahko začnemo z mešanjem v kotličku 16. Oba kotlička 14 in 16 vsebujeta mešanico (neopisano), da se kultura razporedi enakomerno. S sistemom takega postopnega mešanja, lahko kontinuirano dodajamo material na disk 18. Oba mešalna kotlička 14 in 16 se nahajata v oljni kopeli s konstantno temperaturo, da zagotovimo, da matrični materijal ostane stopljen tekom slike 4 zamenjana z postopka.
Mešanico nato prečrpamo s črpalko 20 in linijo 22 v zbiralno komoro 24. Nižja sekcija26 zbiralne komore 24 je nagnjena tako, da se mikrosfere skotalijo navzdol v zbirni kanal 28 kjer jih s pomočjo zraka pošljemo v ciklonski zbiralnik 30. Mikrosfere so ujete v ciklonskem zbiralniku 30 in prenesene na velikostno sito 32, kjer prevelike in premajhne delce odstranimo in jih pošljemo v reciklažo v topiIno posodo 12.
Slika 5 prikazuje modifikacijo osnovnega procesa s kjer sta kotlička 14 in 16 v oljni kopeli, dodajalnikom kulture 34, ki je pozicioniran tako, da kulturo dodajamo v tok stopljenega materiala matrik preko linije 36, kot tudi preko linije za dodaj anje kultur 38, gre direk tno navzgor iz diska 18. Tako je izpostavljanje kulture stopljeni matrici omejeno na nekaj sekund, kar je bolje kot nekaj sekund v kopeli s konstantno temperaturo, v topilnih kotličkih 14 in 16. Tako omejimo škodo, ki jo povzroča bakterijskim celicam vročina.
Slika 6 prikazuje nadaljno modifikacijo sistema, kjer oglje 40, ki absorbira vlago dodajamo med posodo za mešanje stearinske kisline 10 in točko kjer dodajamo kulturo, s pomočjo dodajalnika kulture 34. Prav tako dodajamo dehidrator 42, da zagotovimo suh zrak v lijaku ali zbiralniku kultur 24. Te modifikacije, kot je prikazano na sliki 6, odstranijo presežek vlage preden so mikrosfere obdelane. Poleg tega pa ima postopek s slike 6, ki je podoben postopku s slike 5, prednost zaradi predmešanja proste maščobne kisline in združevanjem le-te z kulturo, tik pred dovajanjem na vrteči se disk 18 zato, da minimiziramo izpostavljanje vročini. Vsi izmed postopkov na slikah 4, 5 in 6 imajo še razločne prednosti in uporaba postopkov v slikah 5 in 6, je še posebej primerna za na vročino občutljive materiale.
Slika 7 prikazuje drug način uspešnega formiranja mikrosfer, ki se izogiba toplotnim poškodbam bakterije.
Trdne delce dodajamo skozi notranjo cev 42, tekoči material maščobne kisline pa skozi zunanjo cev 44. Vmesni prostor 46, ki se nahaja med obema dodajnima linijama, da prepreči stik obeh dodajnih linij, do stika s površino diska 18. Med rotacijo diska 18, so trdni delci izvrženi navzven in pridejo v stik z materialom maščobne kisline za oplaščevanje, da postanejo oplaščeni medtem, ko potujejo proti zunanjemu robu vrtečega se diska 18.
Ta metoda je še posebej uporabna za izdelavo mikrosfer iz na vročino občutljivega meteriala v stopljenemu materialu za oplaščenje, ker je kontaktni čas z stopljenim materialom za oplaščenje zelo kratek.
Za nadaljno ilustracijo postopka tega izuma so na voljo sledeči primeri, ki pa ne predstav1 j aj o nobene omejitve.
Primer 1
Primer 1 je v korelaciji s sliko 1. Ta slika prikazuje stabilnost produkta dveh različnih rodov Enterococcus faceium s temperaturo 4°C in 27°C. Kot je prikazano na sliki 1, prikazuje stabilnost mikrosfer iz rodov Enterococcus faceium ob tem, da je postopek izvajan na vrtečem se disku ob uporabi stearinske kisline v odmerku 357. teže kulture. Postopek je prikazan na sliki 4. Pogoji so bili enaki preje opisanim, to je blato s 35/65 bakterija/stearinska kislina, pri temperaturi 60°C in ob uporabi diska s premerom 101,6 mm vrtečega se z 3000 obr/min in dodajnim odmerkom 100 g na minuto. Kultura je bila oplaščena z matrico, da so se formirali mikrosfere, položena v, s pregrado vroče zatesnjene, parne vrečke, škodljivi vplivi pa so bili tedensko opazovani in beleženi za določitev CFU. Razvidno je, da je produkt tega izuma zelo dobro ohranjal vrednosti enote (CFU) za formiranje kolonij organizma, do časa skladiščenja 70 dni.
Primer 2
Primer 2 si moramo razlagati v povezavi s sliko 2. Slika prikazuje stabilnost posameznih vkapsuliranih vrst, pomešanih v običajnem razmerju za hranjenje, v prisotnosti treh perutninskih antibiotikov. Odmerek je bil sestavljen iz sledečih sestavin:
547.
267.
27.
i , 57. 17.
5,57. 127.
fino zdrobljene žitarice sojina grobo mleta moka ribja grobo mleta moka dikalcijev fosfat apnenec soj ino olje vsebnost vlage
Tri antibiotike smo dodali v sledečih masnih odmerkih:
- Deccox 67. (454 ppm)
- Salinomycin (50ppm)
- Natrijev monensin (120 ppm)
V to mešanico smo dodali kulturo v takem odmerku, da smo dobili približno 1x10^ CFU/gm krme. Krmo smo spakirali v vroče zatesnjene vrečke in inkubirali pri sobni temperaturi. Vzorce smo jemali tedensko za določitev CFU. Braf na sliki 2 nam prikazuje odlično stabilnost.
Primer 3
Primer 3 si moramo razlagati v povezavi s sliko 3, ki prikazuje stabilnost vkapsulirane mešanice Enterococcus faceium v krmi v prisotnosti različnih antibiotikov. Odmerek, se sestoji iz 607. fino zdrobljene koruze, 387. sojine grobo mlete moke in 27. apnenca z vsebnostjo vlage cca. 417. . Kulturo smo dodajali do stopnje približno 10·*· CFU/gm in jo mešali. Kvote 4,54 kg smo vskladiščili v neprodušne vreče pri 20°C, vzor.ce pa smo tedensko jemali 16
tednov. Antibiotike pa smo vključili v sledečih odmerkih:
Bacitracin methylene disalicylate 50 gm/tono
Carbadox 50 gm/tono
Chlorotetracycline 200 gm/tono
Lasa1ocid 30 gm/tono
Lincomycin 100 gm/tono
Neomycin 140 gm/tono
Oxytetracycline 150 gm/tono
Su1famethaz ine 100 gm/tono
Ty1osin 100 gm/tono
Virginiamycin 20 gm/tono
ASP250 100 gm/tono
Tabela 1 je seznam minimalnih časov v katerih se izgubi ena enota za formiranje kolonij (CFL)).
Tabele_JL
Cas v dnevih za izgubo ene enote CFU pri 20°C in 147. vlagi tople živalske krme.
Antibiotik Cas.,skladiščenia (dnevi)
Control 103
Bac i trač in 88
Carbadox 54
Chlortetracycline 60
Lasa 1oc id 57
Lincomyc in 75
Neomyc in 53
Oxytetracycline 59
Sulfamethazine 62
Ty1osin 52
Virginiamycin 112
ASP250 67
Furadox 53
Primer 4
V primeru 4 smo določili stabilnost produkta za uporabo v piščančji krmi po vkapsu1iranju. Mikrovkapsu1acijski pogoji so bili kot je opisano zgoraj. Pogoji uporabljeni v tej študiji, so bili sledeči:
Surovi protein, ne manj kot 18,07.
Surova maščoba, ne manj kot 5,07.
Surova vlakna, ne manj kot 6,07.
Pilule z in brez antibiotikov (CTC 50 mg/tono) smo izdelali s sledečimi sestavinami in pri sledečih pogojih.
2itarice, SBM, sirotka, sojino olje, dikalcijev fosfat, apnenec, kamniti mineral premix, vitamin premix, selenij, bakrov sulfat. Kulturo smo dodali pri približno 5x10® CFU/gm krme (100-150 gm/tono).
KIimatizacijska temperatura je bila 70°C in neobarvane kapsule so imele 78°C.
Kapsule smo vskladiščili v neneprodušne vreče in tedensko jemali vzorce za določitev CFU.
V vseh primerih vkapsulirani produkti niso bili poškodovani zaradi pogojev vkapsu1iranj a (pe1etizacij e). Pri določenih, je peletiziran produkt kazal eneko stabilnost kot ne peletiziran produkt.
Primer 5
Primer 5 prikazuje potek postopka kot je opisano v primeru 1, s to razliko, da je vrsta Enterococcus faceium odstranjena in mikrosfere vsebujejo stearinsko kislino, kot prosto maščobno kislino za oplaščenje kvasovk. Tabela 2 prikazuje rezultate.
Mikrosfere pridobljene s iz postopka in prikazane v Tabeli 2 vsebujejo kvasovke s številom za življenje sposobnih celic, kot je prikazano v tabeli. Vskladiščene so bile 84 dni pri sobni temperaturi. Na koncu periode skladiščenja, smo te, za življenje sposobne celice, preizkusili. Na 84. dan je bilo število takih celic v mikrosferah 1,3x10’ CFU na gram. Malo povečanje je posledica normalne variacije pri zbiranju in analiziranju mikrosfer. Vzorec mikrosfer, ki vsebujejo kvasovke (0,841 g) smo zmešali z 2270 g običajnega perutninskega odmerka in vskladiščili pri temperaturi okolice. Perutninski odmerek je vseboval 177. vlage in je bil pripravljen kot je opisano zgoraj v primmeru 2.
Glede na začetno število mikrosfer s 5x10® CFU na gram, nam je izračunana razredčitev dala število 1,96x10= CFU na gram. Po 84 dneh vskladiščenja smo krmo analizirali na za življenje sposobne celice kvasovke. Na 84. dan je bilo število za življenje sposobnih celic kvasovk 7xl0A CFU na gram krme.
Primer 6
Postopek za pridobivanje mikrosfer, prikazan v primeru 1, bomo izvajali ob sledečih modifikacijah:
1. Rodovi Genus Lactobaci1lus in vrst L, plantarum ali C .C35Qii.;
2. Bakterijske kulture so pripravljene v odmerku med 2 in 407., bolje c c a . 307 .
3. Bakterijska kultura je dodana v stopljeno stearinsko kislino, tik pred dotikom z vrtečim se diskom, kot je skicirano na sliki 4.
4. Potrebno je paziti, da zaščitimo bakterijsko kulturo pred visoko vlago, na primer višjo od 407, med vsk1adiščenjem in obdelavo, z uporabo modifikacije, prikazane na sliki 5.
5. Potrebno je paziti, da temperaturo zraka vzdržujemo na približno 26,6°C ali manj in vlago v področju zbiranja mikrosfer na približno 607 ali manj. Nadaljne eksperimente, kot tiste prikazane v primeru 2, lahko izvajamo z mikrosferiranjem genus Lactobaci1lus in vrst L. plantarum,
L. acidophilus ali L. caseii. Pri teh postopkih, lahko pričakujemo, da bodo mikrosferirani mikroorganizmi zelo dobro vzdrževali ostanek izgube zmožnosti za preživetje, manj kot ene vrednosti enote (CFU) za formiranje kolonij organizma, do časa skladiščenja do 70 dni. Prav tako lahko pričakujemo, da bodo mikrosferirani organizmi, kadar bodo pomešani z običajnim perutninskim odmerkom, ohranili zelo dobro zamožnost za preživetje, ob izgubi te zmožnosti, manj kot ene enote CFU na čas skladiščenja do 45 dni.

Claims (18)

1. S pomočjo vrtečega mikroorganizmov in matricah maščobnih se diska, posušene mikrosfere nevedeni mikroorganizmi, ki bivajo v kislin.
2. Mikrosfere iz zahtevka 1 značilne po tem, da je maščobna kislina, maščobna kislina C±= do C=a.
3. Mikrosfere iz zahtevka 2, značilne po tem, da je maščobna kislina, stearinska kislina.
4. Mikrosfere iz zahtevka 1, značilne po tem, da so organizmi bakterije in, da omenjene mikrosfere vsebujejo od cca. 507. do 907. maščobne kisline, uravnotežene z bakterijsko kulturo.
5. Mikrosfere iz zahtevka 4, značilne po tem, da so sfere dimenzij od 75 pm do 300 pm.
6. Mikrosfere bakterije iz 1. zahtevka, značilne po tem, da je bakterija Enterococcus faceium
Mikrosfere bakterije iz 1. zahtevka, je bakterija Lactobaci1lus.
značilne po da
8. Mikrosfere bakterije iz 1. zahtevka, značilne po tem, da je bakterija kvasovka.
9. Postopek za pripravo ločenih, posameznih mikrosfer, mikrosfer matric maščobne kisline, omenjena obdelava, ki vsebuje:
pridobivanje kultur mi kroorganizmov, mešanje navedenih osušenih kultur z od 507. do cca. 907. teže stopljene maščobne kisline in postopek z vrtečim se diskom za pridobivanje mikrosfer z mešanjem maščobne kisline z organizmi osušenimi v procesorju z vrtečim se diskom, da zagotovimo matrice maščobne kisline, oplaščenih prosto plavajočih mikrosfer mikroorganizmov.
10.Postopek iz 9. vrti z od 2000 zahtevka, značilen do 4000 obratov na po tem, minuto.
da se disk
11.Postopek iz 9. vrti z od 2500 zahtevka, značilen do 3200 obratov na po tem, minuto.
da se disk
12.Postopek iz 9. zahtevka, značilen po tem, dodajanja materiala na vrteči se diskasti 50g na minuto do 200 g na minuto.
da je odmerek vkapsulator od
13.Postopek maščobna iz 9. zahtevka, značilen po tem, da je kislina, maščobna kislina Ci2 do prosta
14.Postopek kisiina, iz 9. zahtevka, značilen po tem, stearinska kislina.
da je mačobna
15.Postopek po 9.
zahtevku, značilen po tem, da je bek terij a
Enterococcus faceium.
16. Postopek iz 9. zahtevka, značilen po tem, da nadalje vsebuj e:
prisotnost maščobne kisline v prvem odmerku dodanemu na vrteči se disk, prisotnost bakterije v drugem odmerku dodanemu na vrteči se disk.
17. Postopek iz Ιό. zahtevka, značilen po tem, da sta prvi in drugi odmerek fizično ločena, dokler ne prideta v stik z vrtečim se diskom.
18. Postopek iz Ιό. zahtevka, značilen po tem, da prvi in drugi odmerek, prideta v medsebojni stik, zaradi ohranitve za življenje sposobnih mikroorganizmov, preden prideta v stik z vrtečim se diskom.
19. Postopek iz 18. zahtevka, značilen po tem, da prvi in drugi odmerek prideta v medsebojni stik manj kot eno minuto preden prideta v stik z vrtečim se diskom.
SI19939300092A 1992-02-26 1993-02-24 Microspheres with microorganisms, such as bacteria and yeast, dried on rotated disk, and process for the preparation the same SI9300092A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/842,226 US5292657A (en) 1990-12-31 1992-02-26 Process for preparing rotary disc fatty acid microspheres of microorganisms

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SI9300092A true SI9300092A (en) 1993-09-30

Family

ID=25286817

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SI19939300092A SI9300092A (en) 1992-02-26 1993-02-24 Microspheres with microorganisms, such as bacteria and yeast, dried on rotated disk, and process for the preparation the same

Country Status (15)

Country Link
US (1) US5292657A (sl)
EP (1) EP0628072B1 (sl)
JP (1) JP2683956B2 (sl)
AT (1) ATE171468T1 (sl)
BG (1) BG98996A (sl)
BR (1) BR9305977A (sl)
CA (1) CA2130918C (sl)
CZ (1) CZ282093B6 (sl)
DE (1) DE69321219T2 (sl)
HU (1) HUT71198A (sl)
MX (1) MX9300671A (sl)
RU (1) RU2096453C1 (sl)
SI (1) SI9300092A (sl)
SK (1) SK101294A3 (sl)
WO (1) WO1993017094A1 (sl)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9107305D0 (en) * 1991-04-08 1991-05-22 Unilever Plc Probiotic
EP0631616A4 (en) * 1992-03-17 1995-04-19 Pioneer Hi Bred Int FATTY ACID-BASED MICROSPHERES, CONTAINING ANTEROCOCKS AND DRIVES TO PROMOTE GROWTH AND IMPROVE THE QUANTITY OF CARCASS.
WO1997045530A1 (fr) * 1996-05-27 1997-12-04 UZILOVA, Irina Semenovna, Heiress of UZILOV Utilisation de souches de streptococcus faecium et composition a base de ces souches
HN2003000009A (es) * 2002-01-08 2004-01-29 Basf Ag Encapsulamiento por recubrimiento con una mezcla de lipidos y compuestos hidrofobicos de alto punto de fusion.
EP1405665A1 (en) * 2002-10-01 2004-04-07 Alarvita Biolife Corporation Particle embedded with chemical substances and method of producing a particle
EP1592760A4 (en) * 2003-01-31 2009-08-12 Smithkline Beecham Corp AS FIXED DISPERSIONS, COMPOSITIONS
PL1691787T3 (pl) * 2003-12-04 2008-11-28 Pfizer Prod Inc Sposób wytwarzania farmaceutycznych systemów wielocząstkowych
CA2547597A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Multiparticulate compositions with improved stability
CA2549225A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Spray-congeal process using an extruder for preparing multiparticulate crystalline drug compositions containing preferably a poloxamer and a glyceride
US6984403B2 (en) * 2003-12-04 2006-01-10 Pfizer Inc. Azithromycin dosage forms with reduced side effects
CN1889931A (zh) * 2003-12-04 2007-01-03 辉瑞产品公司 利用挤压器制备优选含泊洛沙姆和甘油酯的多重粒子阿奇霉素组合物的喷雾－冻凝方法
AU2004294818A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Azithromycin multiparticulate dosage forms by liquid-based processes
WO2005053652A1 (en) 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Multiparticulate crystalline drug compositions containing a poloxamer and a glyceride
WO2005053639A2 (en) * 2003-12-04 2005-06-16 Pfizer Products Inc. Controlled release multiparticulates formed with dissolution enhancers
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
US20050158294A1 (en) 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
FR2863828B1 (fr) * 2003-12-23 2007-02-02 Gervais Danone Sa Produit alimentaire liquide comprenant des granules de bacteries lactiques
US20050266027A1 (en) 2004-05-25 2005-12-01 Watson James B Live organism product
KR101196136B1 (ko) * 2004-08-27 2012-10-30 에이디엠 얼라이언스 뉴트리션, 인코포레이티드 고지방 동물 사료 펠릿 및 그 제조 방법
CA2882512C (en) * 2004-09-01 2016-06-07 Victor Nsereko Ferulate esterase producing strain lactobacillus brevis lb1154 and methods of using same as a silage inoculant
AU2006253006B8 (en) 2005-05-31 2011-09-15 Alimentary Health Ltd Feline probiotic Lactobacilli
JP4938006B2 (ja) 2005-05-31 2012-05-23 ザ・アイムス・カンパニー ネコ科動物プロバイオティク・ビフィドバクテリア
US7758778B2 (en) * 2005-09-07 2010-07-20 Southwest Research Institute Methods for preparing biodegradable microparticle formulations containing pharmaceutically active agents
US9693967B2 (en) * 2005-09-07 2017-07-04 Southwest Research Institute Biodegradable microparticle pharmaceutical formulations exhibiting improved released rates
US7261529B2 (en) * 2005-09-07 2007-08-28 Southwest Research Institute Apparatus for preparing biodegradable microparticle formulations containing pharmaceutically active agents
FR2909685B1 (fr) * 2006-12-08 2012-12-21 Lallemand Sas Levures seches actives enrobees et aliments les renfermant
US20090028991A1 (en) * 2006-12-11 2009-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN1284 and its use to improve aerobic stability of silage
US20080138463A1 (en) * 2006-12-11 2008-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN5689 and its use to improve aerobic stability of silage
US20080138462A1 (en) * 2006-12-11 2008-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN5665 and its use to improve aerobic stability of silage
US20090028992A1 (en) * 2006-12-11 2009-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN1286 and its use to improve aerobic stability of silage
US20080138461A1 (en) * 2006-12-11 2008-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Lactobacillus buchneri strain LN1297 and its use to improve aerobic stability of silage
PL2124966T3 (pl) 2007-02-01 2016-01-29 Iams Europe B V Sposób zmniejszania reakcji zapalnej i stresu u ssaków za pomocą antymetabolitów glukozy, awokado lub ekstraktów awokado
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
US9232813B2 (en) 2008-07-07 2016-01-12 The Iams Company Probiotic supplement, process for making, and packaging
US8241717B1 (en) 2008-08-20 2012-08-14 SepticNet Inc. Carbon-based biofilm carrier
EP2381799B1 (en) * 2009-01-27 2018-08-08 Probiotical S.p.a. Chocolate flavoured probiotic supplement
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
US8359820B2 (en) 2010-01-13 2013-01-29 Dohrmann Daniel R Ultra-low flow agricultural pump with unobstructed flow path and electronic flow control, tank refill indication, and detection of loss of flow
US9822334B2 (en) 2014-03-07 2017-11-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Rapid acting lactobacillus strains and their use to improve aerobic stability of silage
US10883079B2 (en) 2015-04-07 2021-01-05 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of Agriculture And Agri-Food Method for preparing microencapsulated heat-sensitive bioactive material

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1260899A (en) * 1914-12-10 1918-03-26 Arlington Chemical Company Process for compounding germs with an enveloping protective medium.
US2369218A (en) * 1941-01-02 1945-02-13 George F Dick Preparations of scarlet fever toxin for administration by mouth
US3856699A (en) * 1969-08-08 1974-12-24 Fuji Photo Film Co Ltd Process for producing capsules having walls of a waxy material
US3959493A (en) * 1971-03-17 1976-05-25 Rumen Chemie, Ag Rumen bypass products comprising biologically active substances protected with aliphatic fatty acids
GB2016043A (en) * 1978-03-08 1979-09-19 Danochemo As Bacteria-containing product for use in animal feeds, and its production
CH637297A5 (fr) * 1978-12-05 1983-07-29 Nestle Sa Microbille comprenant un microorganisme et son procede de fabrication.
US4352883A (en) * 1979-03-28 1982-10-05 Damon Corporation Encapsulation of biological material
US4386895A (en) * 1981-11-13 1983-06-07 Damon Corporation Apparatus for producing capsules
US4675140A (en) * 1984-05-18 1987-06-23 Washington University Technology Associates Method for coating particles or liquid droplets
US4713245A (en) * 1984-06-04 1987-12-15 Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated Granule containing physiologically-active substance, method for preparing same and use thereof
JPS615022A (ja) * 1984-06-19 1986-01-10 Advance Res & Dev Co Ltd 腸内細菌叢改善剤
US4692284A (en) * 1986-04-30 1987-09-08 Damon Biotech, Inc. Method and apparatus for forming droplets and microcapsules
FR2603458B1 (fr) * 1986-09-04 1990-11-02 Rhone Poulenc Sante Nouvelles compositions pour l'enrobage des additifs alimentaires destines aux ruminants et additifs alimentaires ainsi enrobes
JP2547995B2 (ja) * 1987-01-26 1996-10-30 昭和電工株式会社 反すう動物用粒剤及びその製造法
RU2096452C1 (ru) * 1990-12-31 1997-11-20 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Способ приготовления микрокапсул из бактерий в жирной кислоте и микрокапсула, содержащая лиофилизированную бактериальную культуру
WO1993006208A1 (en) * 1991-09-20 1993-04-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Fatty acid microencapsulated enterococcus for use with poultry
EP0631616A4 (en) * 1992-03-17 1995-04-19 Pioneer Hi Bred Int FATTY ACID-BASED MICROSPHERES, CONTAINING ANTEROCOCKS AND DRIVES TO PROMOTE GROWTH AND IMPROVE THE QUANTITY OF CARCASS.

Also Published As

Publication number Publication date
CZ204994A3 (en) 1994-12-15
HUT71198A (en) 1995-11-28
HU9402420D0 (en) 1994-10-28
EP0628072B1 (en) 1998-09-23
BR9305977A (pt) 1997-11-18
BG98996A (bg) 1995-07-28
DE69321219D1 (de) 1998-10-29
DE69321219T2 (de) 1999-04-15
RU2096453C1 (ru) 1997-11-20
CA2130918A1 (en) 1993-09-02
MX9300671A (es) 1993-09-01
US5292657A (en) 1994-03-08
EP0628072A1 (en) 1994-12-14
EP0628072A4 (en) 1995-12-20
CZ282093B6 (cs) 1997-05-14
JPH07503375A (ja) 1995-04-13
RU94042902A (ru) 1996-12-20
SK101294A3 (en) 1995-04-12
WO1993017094A1 (en) 1993-09-02
ATE171468T1 (de) 1998-10-15
CA2130918C (en) 1993-09-02
JP2683956B2 (ja) 1997-12-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SI9300092A (en) Microspheres with microorganisms, such as bacteria and yeast, dried on rotated disk, and process for the preparation the same
US4888171A (en) Granular product of dried microorganism cells and manufacturing method therefor
EP2117354B1 (en) A dry food product containing live probiotic
US5310555A (en) Oral nutritional and dietary composition
CA2099617C (en) Dried, rotary disc fatty acid microencapsulated bacteria
RU2093571C1 (ru) Способ стимулирования роста домашней птицы и препарат на основе пробиотика
RU2109052C1 (ru) Способ и состав микробиала прямого кормления для улучшения роста животных