HU222370B1 - Permetezve szárított eritropoietin - Google Patents
Permetezve szárított eritropoietin Download PDFInfo
- Publication number
- HU222370B1 HU222370B1 HU9800996A HU9800996A HU222370B1 HU 222370 B1 HU222370 B1 HU 222370B1 HU 9800996 A HU9800996 A HU 9800996A HU 9800996 A HU9800996 A HU 9800996A HU 222370 B1 HU222370 B1 HU 222370B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- rhepo
- spray
- drying
- dried
- solution
- Prior art date
Links
- 239000007921 spray Substances 0.000 title claims description 19
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 20
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 title abstract description 17
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 title abstract description 17
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 title abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 37
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 37
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 34
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 30
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 9
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 8
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 8
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 8
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 7
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 23
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 14
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 13
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 10
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 8
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 8
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 6
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000012527 feed solution Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 3
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 101000987586 Homo sapiens Eosinophil peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 125000000837 carbohydrate group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 102000044890 human EPO Human genes 0.000 description 2
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 241000902900 cellular organisms Species 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 210000001995 reticulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000004544 sputter deposition Methods 0.000 description 1
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Vaporization, Distillation, Condensation, Sublimation, And Cold Traps (AREA)
Abstract
A találmány tárgya eljárás permetezve szárított eritropoietinelőállítására, és az eljárással előállított száraz eritropoi- etinpor.A találmány szerinti megoldás alkalmas az eddig ismerteknél stabilabberitropoietinkészítmények előállítására. ŕ
Description
A találmány tárgya eljárás permetezve szárított eritropoietin előállítására, és az eljárással előállított száraz eritropoietinpor.
A találmány szerinti megoldás alkalmas az eddig ismerteknél stabilabb eritropoietinkészítmények előállítására.
A leírás terjedelme 6 oldal
HU 222 370 B1
HU 222 370 Bl
A találmány tárgya eljárás permetezve szárított eritropoietin előállítására, és az eljárással előállított száraz eritropoietinpor.
A találmány szerinti megoldás alkalmas az eddig ismerteknél stabilabb eritropoietinkészítmények előállítására.
Az eritropoietin (EPO) olyan glikoproteinhormon, amelyet elsősorban a vese állít elő, és amely a vörösvérsejt-előállítás fő szabályozója a testben. Kereskedelmileg elérhető humán EPO-t rekombináns DNS-módszerrel állítanak elő, amely rekombináns humán EPO néven ismert (rhEPO). Az rhEPO molekulatömege SDS-PAGEmódszerrel mérve közelítőleg 36,000 dalton. A proteinváz tömege 18,398 dalton, ami arra utal, hogy a teljes molekula erősen glikozilezett. A szénhidrátoldalláncok fontosak az in vivő biológiai aktivitás szempontjából.
A gyógyászati készítmények területén dolgozó szakemberek számára nagy kihívást jelent az rhEPO-hoz hasonló proteinek natív állapotának fenntartása vizes oldatban vagy szilárd állapotban. A protein natív állapotának fennmaradása függ a protein koncentrációjától, a hőmérséklettől, az oldószer természetétől, a puffer ionerősségétől stb. Bármelyik említett paraméter változása befolyásolhatja a protein stabilitását akár oldatban, akár szilárd állapotban.
Az rhEPO kereskedelmi készítményeit jelenleg vagy híg vizes oldatok formájában, vagy liofilizált formában árusítják, amelyből híg vizes oldatot készítenek, és mindkettőt injekció formájában juttatják a testbe. Ezen készítmények rhEPO-tartalma nagyon alacsony és az rhEPO a készítmény beadása után meglehetősen hamar kiürül a szervezetből. Tekintetbe véve a jelenlegi készítmények ezen hátrányait, szükség van koncentrált rhEPO-készítményekre, vagyis olyanokra, amelyek nagy mennyiségű rhEPO-t tartalmaznak, és amelyek többféle módon bejuttatható gyógyszerformában alkalmazhatók. Ilyen készítmények előállítására permetezve szárító módszert alkalmaztunk.
Gyógyszerek permetezve szárítása a technika állásához tartozik. Például ld. Broadheat, J. és munkatársai: „The Spray Drying of Pharmaceuticals”, Drug Dev. Ind. Pharm, 18 (11-12), 1169, (1992). A kismolekulás gyógyszerek mellett számos biológiai anyagot szárítottak permetezéssel, ezek között vannak enzimek, szérumok, plazma, mikroorganizmusok és élesztők. A permetezve szárítás hasznos eljárás, mert a folyékony gyógyászati készítményt egy lépésben finom, apró szemcsés portól mentes vagy agglomerált porrá („powder”) alakítja. Az alapeljárás a következő négy lépésből áll:
i) a betáplált oldatot permetté porlasztjuk, ii) a permetet érintkezésbe hozzuk a levegővel, iii) a permetet megszárítjuk, és iv) a szárított terméket elválasztjuk a szárító levegőtől.
Annak ellenére, hogy a permetezve szárítás ismert a gyógyászati készítmények területén, terápiás proteinek esetében - mint amilyen az rhEPO - nemigen alkalmazták. Úgy tűnik, hogy ennek oka az aggodalom volt, hogy az ilyen proteinek termikusán degradálódhatnak a permetezve szárítási folyamatban alkalmazott magas hőmérsékleten. Különösen igaz ez a komplex glikoproteinek esetében, mint amilyen az rhEPO, amelyek a polipeptidváz mellett komplex, elágazó szénhidrátrészeket is tartalmaznak, amelyek szükségesek a biológiai aktivitáshoz. Az a tény, hogy a liofilizálás könnyen elérhető alternatívát kínál, még inkább elterelte a területen dolgozó szakembereket attól, hogy terápiás proteinek esetében permetezve szárítást alkalmazzanak. A permetezve szárítás azonban bizonyos előnyöket kínál a liofilizálással szemben, amennyiben gazdaságosabb, gyors, és léptéknövelése könnyen elvégezhető. Emellett a permetezve szárított porok gyakran alkalmasabbak a további feldolgozás számára, mint a liofilizált porok.
Általában nem célszerű a különböző készítményformákat pusztán a hatóanyag oldatának liofilizálásával tervezni. Ennek az az oka, hogy sok polipeptid viszonylag instabil, ha kis koncentrációban liofilizáljuk őket, hozzátapadhatnak a tennék csomagolásához és elvesztik aktivitásukat. E problémák megoldása érdekében sok gyógyászati készítmény esetében szilárd hígítók, kriogén védőanyagok vagy testességfokozó anyagokra („bulking agents”) támaszkodunk annak érdekében, hogy növeljük a liofilizálási folyamatban részt vevő szilárd anyag mennyiségét. Ennek eredményeként a végső liofilizált anyag kis százalékban (tömeg%) tartalmazza az aktív hatóanyagot, amely nagy mennyiségben keveredik más szilárd anyaggal.
Ezzel szemben a találmány tárgyát olyan eljárás képezi rhEPO-por előállítására rhEPO-oldatból kiindulva, melynek eredményeként tiszta, vagy lényegében tiszta rhEPO-por képződik, vagy a por nagyobb százalékban (tömeg%) tartalmaz rhEPO-t, mint a hagyományos liofilizálással előállított termékek.
A találmány tárgya eljárás permetezve szárított, stabil rhEPO-por előállítására, és az eljárással előállított rhEPO-por.
A találmány szerinti eljárás során először vizes rhEPO-oldatot készítünk, amelynek koncentrációtartománya kb. 20 mg/ml és kb. 100 mg/ml között változik. Ezután az oldatot permetté oszlatjuk (porlasztjuk), és a permetet forró levegővel szárítjuk annak érdekében, hogy a vizet elpárologtassuk a permetből. Az eközben keletkezett szárított rhEPO-t elválasztjuk a szárító levegőtől.
A kiindulási vizes oldat az rhEPO mellett tartalmazhat kötőanyagokat, mint például mannitot, glicint és/vagy felületaktív anyagot. A találmány szerinti eljárással készült száraz rhEPO-készítmény rhEPO-koncentrációja 4% és 100% (tömeg%) között lehet, és maradék nedvességtartalma kb. 3% és kb. 5% (tömeg%) között változik. A készítmény szemcsemérete kb. 2,0 mikron és kb. 6,0 mikron közti tartományban van.
Legalább 20 mg/ml koncentrációjú, tömény rhEPOoldatot használtunk a permetezve szárításhoz. A tömény vizes oldatot finom cseppekké oszlattuk (porlasztottuk) oly módon, hogy nagynyomású levegővel egy fúvókán keresztül szivattyúztuk. A cseppecskéket ezután egy szárítókamrába juttattuk és a betáplált oldattal egyenáramban áramló forró szárító levegő segítségével a vizet elpárologtattuk. A víz elpárolgása után a szilárd rhEPO és a kötőanyagok (amennyiben jelen voltak) kiváltak a vizes
HU 222 370 Bl cseppecskékből. A száraz rhEPO-t a szárító levegőáram segítségével tisztítás céljából leválasztóciklonba juttattuk, vagyis a száraz rhEPO-t elválasztottuk a szárító levegőtől és a szárított terméket a ciklonszeparátor aljához csatlakozó gyűjtőedényben összegyűjtöttük. A szárító levegőt egy finomítómosón keresztül a légtérbe engedtük.
A leírásban használt értelemben az „rhEPO” kifejezés alatt minden olyan proteint értünk, amely az US 4 703 008 számú szabadalmi leírásban az rhEPOként leírt polipeptidváz egészét vagy részét tartalmazza, és amely rendelkezik azzal a biológiai tulajdonsággal, hogy a csontvelősejteket a retikulociták és a vörösvértestek fokozott termelésére serkenti, valamint növeli a hemoglobintermelést vagy a vasfelvételt. Elképzelhető, hogy a találmány szerinti eljárásban az EPO biológiailag aktív fragmenseit vagy vegyileg szintetizált származékait is használni lehet, feltéve, hogy ezek a fragmensek vagy származékok megtartják az rhEPO biológiai aktivitását. Az US 4 703 008 leír néhány EPO-analógot. Ezért az ilyen biológiailag aktív EPO-analógok, fragmensek és származékok a jelen találmány tárgyát képezik.
A találmány szerinti eljárással előállított koncentrált rhEPO-porokat különböző gyógyszerformákban is alkalmazni lehet az rhEPO bejuttatására. Egy ilyen gyógyszerforma a szabályozott kibocsátási sebességű rendszer, amely az rhEPO-t előre meghatározott sebességgel adja le testbe meghatározott időn keresztül. Más esetben a koncentrált rhEPO-porokat eredeti állapotba lehet hozni injekciós vízzel vagy normál vizes sóoldattal és humán gyógyászati alkalmazásra alkalmas vizes oldattá lehet alakítani. A fentebb említett szabályozott kibocsátási sebességű rendszerre úgy gondolhatunk, mint amelyben az rhEPO valamilyen polimerben, vezikulumban vagy egy miniatűr pumpában helyezkedik el esetleg az rhEPO más makromolekulás származékaival és egyéb polimer anyagokkal együtt. Ezek a rendszerek a tömény rhEPO bőr alá beültetett tárolóegységei lehetnek. Az ilyen rendszerekre - a lehetőségeket ki nem merítő példaként említhetők az rhEPO-t körülvevő hidrofób polimer mátrixok, például a nem degradálható etilén-vinilacetát-kopolimerek vagy a degradálható tejsav-glikolsav-kopolimerek. Az ilyen hidrofób polimerek ezenfelül mikrogömb alakot ölthetnek.
A találmány szerinti eljárással stabil rhEPO-port nyerhetünk. Itt a „stabil” kifejezés alatt azt értjük, hogy az rhEPO időben megtartja biológiai aktivitását és szerkezete natív állapotban marad, vagyis nem oxidálódik és más módon sem degradálódik más vegyületté. A stabilitást RIA, Westem-blot, valamint in vivő és in vitro bioassay-módszerekkel lehet igazolni.
A találmány tárgyát a következő példákon mutatjuk be. A találmány igényelt oltalmi körét azonban a példák nem korlátozzák, hanem a csatolt igénypontok határozzák meg.
1. példa
Az rhEPO permetezve szárítási eljárása
Ebben a példában olyan permetezve szárítási eljárást írunk le, amellyel az amorf rhEPO-t kizárólag szilárd formában kapjuk vagy inért, gyógyászatilag elfogadott kötőanyagokkal kombinálva. Az így formulázott amorf, tömbszerű rhEPO 5 °C-os hőmérsékleten (hűtőszekrényben) tárolva legalább 6 hónapig stabil. A terápiás proteinek permetezve szárítását leíró mai irodalom korlátozott, és nem elemzi a terápiás proteinek stabilitását száraz állapotban és nagyobb töménységben, például 25% (tömeg%) fölött. Ld. például Mumenthaler és munkatársai: Pharm. Rés., 11, 12-20, (1994). Ezenfelül a mai irodalom nem nyújt kellő bizonyítékot ezen proteinek stabilitására nézve szilárd állapotban. Valójában bizonyos irodalmak nem kielégítő stabilitásra utalnak, amelyek az alkalmazott kötőanyagok vagy feldolgozási körülmények nem kielégítő voltával magyarázhatók. Bizonyos szervetlen sókról, aminosavakról, felületaktív anyagokról ismert, hogy oldatban stabilizálják a proteineket. Ha azonban a kiindulási rhEPO-oldatban citrátsók vannak, a permetezve szárított rhEPO nem lesz stabilis. Ezért permetezve szárítás előtt az rhEPO-oldatot injekcióhoz használt vízbe dializáltuk. Annak érdekében, hogy a permetezve szárítás során keletkezett termék kellő hatásfokkal képződjön, a dialízist addig folytattuk, amíg az rhEPO töménysége el nem érte a 20-100 mg/ml értéket. Ezek a koncentrált rhEPO-oldatok injekcióhoz használt vízben kielégítő stabilitást mutattak 5 °C-os tárolás során legalább 6 hónapig. A száraz proteinek előállítására használt másik módszer, a fagyasztva szárítás az rhEPO esetében nem volt megfelelő annak gyenge stabilitása miatt, függetlenül a citrátsók jelenlététől (ld. a 2. példát).
A szilárd rhEPO és a kötőanyagokkal együtt előállított rhEPO-por előállításának folyamata a következő lépésekből áll:
A) Az rhEPO-oldat dialízise és töményítése és
B) a dializált rhEPO-oldat permetezve szárítása.
A) Dialízis és töményítés
A 20 mM citrátpufferben kapott rhEPO-oldatot dializáltuk annak érdekében, hogy minden citrátot eltávolítsunk és injekciós vízzel helyettesítsünk. A dialízist a következőképpen hajtottuk végre:
A citrátpufferben (amelynek koncentrációja hozzávetőleg 2,0 mg/ml) levő rhEPO-oldatot (200 ml) 10,000 molekulatömegnél levágó dialízismembránnal ellátott AmiconR dializátorba helyeztük. A dialíziscellát injekciós vizet tartalmazó rozsdamentes acéltartállyal kapcsoltuk össze, amely tartály nitrogénpalackkal állt összeköttetésben. A dialízist 30-40 psi nyomáson folytattuk addig, amíg legalább 2000 ml dializátumot nem gyűjtöttünk. Az így kapott citrátmentes vizes rhEPO-oldatot ezután addig töményítettük, amíg rhEPO-tartalma el nem érte a 20-100 mg/ml értéket. Az így kapott betöményített vizes oldatot 5 °C-on tároltuk a permetezve szárításig. A töményített rhEPO-oldatokat 5 °C-on vizsgáltuk az rhEPO stabilitása szempontjából is.
B) Permetezve szárítás
A permetezve szárítási eljárás a következő lépésekből áll:
1. A betáplált oldatot porlasztjuk,
2. érintkezésbe hozzuk a permetező levegővel,
3. elpárologtatjuk az oldószert,
HU 222 370 Β1
4. megtisztítjuk a szárított szilárd anyagot a szárító gázoktól. Az eljárásban laboratóriumi léptékű permetezve szárítót (BuchiR, Model 190) használtunk.
1. Porlasztás
A vizes rhEPO-oldatot szobahőmérsékleten, perisztal- 5 tikus pumpa segítségével tápláltuk a porlasztófuvókába (belső átmérő 0,5 mm). A betáplált folyadékot nagynyomású levegővel apró cseppecskékké porlasztottuk. Ilyen porlasztást el lehet érni forgó korong segítségével is.
2. Érintkezés a permetező levegővel, párologtatás
Amint a cseppecskék bejutottak a párologtatókamrába (belső átmérő 105 mm, hossz 450 mm), az egyenáramban áramló forró szárító levegő elpárologtatta a vizet. A szárító levegő hőmérséklete 64-80 °C között változott. Ahogy a víz elpárolgott, a szilárd anyag 15 gömbök vagy félgömbök formájában kivált a vizes oldatból. A szárítást ellenáramban is el lehet végezni, ahol a szárító levegő és a betáplált oldat ellentétes irányban áramlanak.
3. Tisztítás
A megszárított port tisztítás céljából a szárító légáram ciklonszeparátorba juttatja. A ciklonszeparátorban a szárított szilárd anyagot elválasztottuk a szárító levegőtől. A szárított terméket gyűjtőedényben gyűjtöttük össze, amelyet a ciklonszeparátor aljához csatlakoz- 25 tattunk. A szárító levegőt (a szárított termék nélkül) finomítómosón keresztül a légtérbe engedtük.
C) Kémiai jellemzés
A permetezve szárított rhEPO ismert mennyiségét injekciós vízben oldottuk fel. A vizes oldatot ezután a következő módon analizáltuk:
1. Radioimmun-vizsgálati eljárás (R1A)
A használt módszer megegyezett azzal, amit Egrié és munkatársai leírnak [J. Immunoi Meth, 99, 235-241, (1987)]. A módszer abból áll, hogy az rhEPO-t poliklo- 35 nális nyúlantitestekkel komplexáljuk (az antitestet rhEPO-val szemben fejlesztettük ki). Ezt úgy értük el, hogy az rhEPO-t poliklonális nyúlantitesttel egy éjszakán keresztül inkubáltuk hűtőszekrény-hőmérsékleten.
Az inkubálást még egy napon át folytattuk azonos körülmények között, miután 125I-EPO-t adtunk hozzá. Az antigén-antitest komplexet kecskéből származó, nyúl elleni antitesttel, normál nyúlszérummal és polietilénglikollal kicsapattuk. A kicsapott komplexet mostuk és gamma-számlálóval megmértük a kötött 125I-EPO mennyiségét. Ezt az eljárást ismert töménységű standard rhEPOoldatokkal és vizsgálatiminta-oldatokkal megismételtük. A vizsgálatiminta-oldatok rhEPO töménységét úgy 10 számítottuk ki, hogy összehasonlítottuk a gamma-számlálóról leolvasott adatokat a standard rhEPO-oldatra kapott eredményekkel.
2. Westem-blot
A használt módszer megegyezett azzal, amit Egrié és munkatársai leírnak [Immunobioi, 172, 213-224, (1986)]. Denaturált rhEPO 0,5 pg aliquot részét felvittük standard (12,5%-os) nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid-gélre (SDS-PAGE). Elvégeztük az elektroforézist, majd a gélt egy TRIS, glicin- és metanoltartalmú 20 átvivőpuffer segítségével biotoltuk egy nitro-cellulózmembránra. Ezt a nitro-cellulóz-membránt TRIS-szel pufferolt sóoldatban 5%-os nem zsíros tejjel blokkoltuk. Az rhEPO-tartalmú blokkolt nitro-cellulóz-foltot egérből származó monoklonális antihumán antitesttel, majd kecskéből származó poliklonális, egér elleni antitesttel konjugáltuk. Ezt a komplexet ezután alkalikus foszfatázkonjugátum-szubsztrát kit segítségével megfestettük. Minden biot tartalmazott standard rhEPO-t, ismert mennyiségű rhEPO-aggregátumot tartalmazó 30 rhEPO-t és vizsgálati mintá(ka)t. Az rhEPO-standard és az aggregátumstandard intenzitását összehasonlítottuk a vizsgálati mintáéval.
3. Egéren végzett biológiai vizsgálati eljárás
Ismert mennyiségű permetezve szárított rhEPO-t injektálható vízben felvettünk. Ennek az oldatnak a biológiai aktivitását oly módon mértük, hogy az rhEPO-oldat injektálása után vizsgáltuk a vas beépülését „exnypoxic” egérben. A módszer megegyezett Cotes és munkatársai által leírtakkal [Natúré, 191, 1065-1067, (1961)].
1. táblázat
Készítmény-előállítási példák
| Szám | Összetevők | Készítményszám (mennyiségek mg-ban) | ||||
| I. | II. | III. | IV. | V. | ||
| · | rhEPO | 0,0813 | 0,162 | 1,5 | 25 | 25 |
| 2. | glicin | 1,00 | 2,00 | 0 | 37,5 | 37,495 |
| 3. | mannit | 1,00 | 2,00 | 0 | 37,5 | 37,495 |
| 4. | TweenR8 | 0,01 | 0 | 0 | 0 | 0,01 |
| 5. | inj. víz* | 100 | 100 | 100 | 2000 | 2000 |
Megjegyzések: ‘injektálható víz (q.s.)
AII. készítmény permetezve szárítását két különböző bemeneti hőmérsékleten, 64 és 80 °C-on is elvégeztük.
Öt különböző oldatot készítettünk úgy, hogy olyan kötőanyagokat, mint mannit, glicin és/vagy Tween®80 60 oldottunk fel egyidejűleg rhEPO tömény vizes oldatában enyhe keverés mellett. A III. készítmény esetében nem adtunk semmilyen kötőanyagot az oldathoz. Ezen oldatok összetételét a fenti, 1. táblázatban adjuk
HU 222 370 Bl meg. Ezeket az oldatokat az alábbiakban felsorolt permetezve szárítási körülmények között szárítottuk: Oldat-betáplálási sebesség: 1 ml/min
A levegővel való porlasztás sebessége: 600-700 normál 1/hr
Szárító levegő sebessége: 32 000-45 0001/hr
Betáplálási hőmérséklet: 64-80 °C
Kimeneti hőmérséklet: 46-65 °C
A permetezve szárítás után az I. és II. készítmény végső szilárd rhEPO-tartalma kb. 4% (tömeg%) volt, a IR készítmény esetében 100% (tömeg), a IV. és V. készítmény esetében pedig az rhEPO-tartalom 25% (tömeg) volt. A maradék nedvességtartalom Karl-Fischermódszerrel [USP XXIII-NF XVII, 1840-1843 oldal, la. módszer (1995)] meghatározva 3,0% és 5,0% (tömeg%) között változott. A részecskeméret 4,1 ± 1,89 mikron volt a permetezve szárított III. készítmény esetében.
Az előzetes kísérletekben, ahol citrátpuffer-tartalmú rhEPO-oldatot használtunk, nem kaptunk stabil permetezve szárított rhEPO-oldatot mannittal, glicinnel és/vagy TweenR80-nal. Ezért a permetezve szárítás szempontjából az rhEPO-oldat dialízise a citrátsók eltávolítása érdekében elengedhetetlen. Annak érdekében, hogy jó kihozatalt kapjunk a permetezve szárítás folyamán, a betáplálási oldat szárazanyag-tartalmának legalább 2%-nak kell lennie. Ezért a dializált rhEPO-oldatot legalább 20-100 mg/ml-re töményítettük.
Az I. és II. készítmény stabilitási adatait összehasonlítva a IV. és V. készítményekével eldöntöttük, hogy stabil permetezve szárított rhEPO előállításához nincs szükség TweenR80-ra. A tiszta rhEPO 6 hónapos stabilitási adatai arra utalnak, hogy talán mannitra és/vagy glicinre sincs szükség stabil permetezve szárított rhEPO előállításához. Ezért ha használjuk őket, a mannit és a glicin pusztán teijedelmesítőszerként (izotóniás/izoozmotikus beállító segédanyagként) szolgál, amelyet az rhEPO-tartalom megváltoztatására lehet használni a végső, permetezve szárított rhEPO-készítményben.
A találmány szerinti permetezve szárított rhEPOkészítménynek előnyei vannak a liofilizált rhEPO-val szemben. Összehasonlításként az I., II. és III. készítményt liofileztük is (ld. a 2. példát). A 2 hónapig 5 °Con tárolt liofilizált minták RIA-adatai azonban a címkén feltüntetett értéknek csak mintegy 73-78%-át mutatták. A RIA-módszerrel meghatározott ilyen alacsony EPO-potenciaértékek rövid tárolási idő után instabilitásra utalnak. A 6 hónapos liofilizált minták több mint 2% EPO-aggregátumot mutattak SDS-PAGE-módszerrel, feloldás után. Ez a rekonstituált oldat instabilitását jelzi. így tehát a permetezve szárított készítmények stabilabbnak bizonyultak, mint az azonos összetételű fagyasztva szárított készítmények.
Az alábbiakban bemutatjuk a fentebb említett, permetezve szárított III. és IV. készítmények stabilitási táblázatát. Mindkét esetben a mintákat 5 °C-on tároltuk és a Westem-blot-analízis megerősítette, hogy az EPO-aggregátum tartalma minden esetben 2%-nál kisebb volt.
2. táblázat
AIV. készítményre vonatkozó stabilitási adatok
| Idő | Várt konc. (U/ml) | RIA (U/ml) | RIA (%LC) |
| ° | 31,500 | 35049 | 111 |
| 1 | 30,843 | 34188 | 111 |
| 2 | 30,121 | 29646 | 98 |
| 6 | 29,250 | 28521 | 97,5 |
3. táblázat
AIII. készítményre vonatkozó stabilitási adatok
| Idő | Várt konc. (U/ml) | RIA (U/ml) | RIA (%LC) |
| 1 0 | 142,169 | 120339 | 84 |
| I 1 | 123,614 | 96295 | 78 |
| 2 | 120,482 | 106523 | 88 |
| 3 | 125,542 | 109520 | 87 |
| 1 * | 118,554 | 115441 | 97 |
2. példa
Liofolizálási eljárás EPO-ra
Ebben a példában liofilizálási eljárást írunk le szárított rhEPO előállítására, tiszta formában vagy gyógyászatilag elfogadott kötőanyagokkal kombinálva. A liofilizált rhEPO stabilitását meghatároztuk és az eredményeket alább közöljük. Az ebben a példában használt összes rhEPO-készítményt előállítottuk permetezve szárítással is, mint azt fentebb leírtuk. A RLA- és a Westem-bloteljárásokat lényegében ugyanúgy végeztük el, mint azt fentebb leírtuk a permetezve szárított rhEPO esetében.
A tipikus liofilizálási eljárást rhEPO-oldatok fagyasztva szárítására azzal kezdjük, hogy az oldatot -40 °C-on megfagyasztjuk és kb. három óráig ezen a hőmérsékleten tartjuk annak biztosítására, hogy az oldat teljesen megfagyjon. Miután az oldat megfagyott, a kondenzátor hőmérsékletét -50 °C-ra csökkentettük. Az elsődleges szárítást úgy hajtottuk végre, hogy először kb. 200 millitorra csökkentettük a nyomást a szárítókamrában, és hagytuk, hogy a rendszer három óráig stabilizálódjon. A hőmérsékletet ezután kb. 0,1 °C/min sebességgel -30 °C-ra növeltük. A szárítást (a jeget vízgőzzé szublimálva) kb. 60 órán át folytattuk. A másodlagos szárítást úgy végeztük el, hogy a termék hőmérsékletét kb. 15 °C-ra növeltük kb. 0,5 °C/min sebességgel. A szárítókamra nyomását tovább csökkentettük kb. 200 millitorról kb. 100 millitorra. A másodlagos szárítást kb. 16 óráig folytattuk a teljes szárítás biztosítása érdekében. A másodlagos szárítást követően a fiolákat lefedtük és légmentesen lezártuk. A lezárt fiolákat kb. 5 °C-on tároltuk, amíg elő nem vettük őket az alábbiakban leírandó stabilitásvizsgálat céljából. A stabilitásvizsgálat céljából a fiola tartalmát vízben felvettük, majd RIA- és Westem-blot-módszerrel vizsgáltuk. A stabilitásvizsgálat eredményeit úgy állítottuk össze, hogy meg5
HU 222 370 Bl adtuk a maradék rhEPO-mennyiséget. A kisebb rhEPOtartalom gyenge stabilitásra utal. A Westem-blot-vizsgálat arra ad választ, hogy az rhEPO natív alakban, vagy denaturált, aggregált formában van-e jelen. Azokról az rhEPO mintákról, amelyek 2%-nál több aggregá- 5 tumot tartalmaznak, szemben a standard 2%-os aggregátum tartalmával, meghatározás szerint azt mondjuk, hogy gyenge stabilitásuk van. A különféle liofilizált rhEPO-készítmények stabilitásvizsgálatának eredményeit a 4. táblázatban mutatjuk be.
4. táblázat
Stabilitás a címkén szereplő EPO-mennyiség százalékában, fagyasztva szárított készítményben, 5 °C-on
| Készítmény | RIA | Westem-blot | ||||
| Kezdeti | 1 hónap | 2 hónap | Kezdeti | 1 hónap | 2 hónap | 6 hónap |
| I. | 93,2 | 71,5 | 75,0 | EPO jelenléte megerősítve | Több, mint | |
| II. | 82,0 | 76,5 | 72,9 | Kevesebb, mint 2% | 2% | |
| 1 III. | 79,6 | 69,7 | 78,1 | aggregátum | aggregátum |
A 4. táblázatban bemutatott adatok azt bizonyítják, hogy a liofilizált rhEPO nem marad olyan stabil, mint a permetezve szárított rhEPO. Ezért az rhEPO permetezve szárítása stabilabb készítményt eredményez, mint a liofilizálás. A találmány szerinti eljárással tehát stabil permetezve szárított rhEPO-t lehet előállítani anélkül, hogy kötőanyagokat vagy stabilizátorokat, például ciklodextrineket, glicint, mannitot vagy Tween®80-at adnánk hozzá. A kötőanyagmentes rhEPO-készítmény bizonyos gyógyszerformáknál kívánatos, például a pulmonáris úton célba juttatott készítmények esetében, amely általában megköveteli, hogy a gyógyszerhatóanyag, amennyire lehet, mentes legyen a kötőanyagoktól.
A találmányt bizonyos kedvező megvalósításokon és példákon keresztül mutattuk be. Mivel a szakember kötelező tudásának részeként számos nyilvánvaló variáció elképzelhető, ezért az igényelt oltalmi kör nem korlátozható a példákra, annak határait a következő szabadalmi igénypontok szabják meg.
Claims (14)
1. Eljárás permetezve szárított rhEPO előállítására, azzal jellemezve, hogy
i) olyan vizes rhEPO-oldatot állítunk elő, amelynek koncentrációtartománya mintegy 20 mg/ml és mintegy 100 mg/ml közé esik, ii) az oldatot permetté porlasztjuk, iii) a permetet forró szárító levegővel szárítjuk, és így a vizet elpárologtatjuk a permetből, és iv) a szárított rhEPO-port elválasztjuk a szárító levegőtől.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az rhEPO vizes oldata sóktól és egyéb adalék anyagoktól mentes.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vizes oldatot dializáljuk, és így az ii) lépés előtt eltávolítjuk az oldatból a sókat.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az oldatot nyomás alatt fúvókába juttatva porlasztjuk.
5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a permet és a szárító levegő egyenáramban (azonos irányban) megy át a szárítón.
6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szárított rhEPO-port ciklonszeparátorban választjuk el.
7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szárítást mintegy 60 °C és mintegy 85 °C közti hőmérséklet-tartományban végezzük.
8. Száraz rhEPO-készítmény, amely 1. igénypont szerinti eljárással lett előállítva.
9. A 8. igénypont szerinti rhEPO-készítmény, melynek EPO-tartalma 100 tömeg%.
10. A 8. igénypont szerinti rhEPO-készítmény, melynek összetétele a következő: 25 tömeg% rhEPO, 37,5 tömeg% mannit és 37,5 tömeg% glicin.
11. A 10. igénypont szerinti rhEPO-készítmény, amely felületaktív anyagot is tartalmaz.
12. A 8. igénypont szerinti rhEPO-készítmény, melynek rhEPO-tartalma mintegy 4,0% és mintegy 100% (tömeg%) közötti, és amelynek maradék nedvességtartalma mintegy 3,0% és mintegy 5,0% (tömeg%) között változik.
13. A 12. igénypont szerinti készítmény, amely mintegy 2,0 mikron és mintegy 6,0 mikron közötti szemcseméretű részecskéket tartalmaz.
14. A 8. igénypont szerinti száraz rhEPO-por, amely lényegében csak rhEPO-t tartalmaz.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US35794794A | 1994-12-16 | 1994-12-16 | |
| PCT/US1995/016416 WO1996018647A1 (en) | 1994-12-16 | 1995-12-15 | Spray dried erythropoietin |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT77811A HUT77811A (hu) | 1998-08-28 |
| HU222370B1 true HU222370B1 (hu) | 2003-06-28 |
Family
ID=23407689
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9800996A HU222370B1 (hu) | 1994-12-16 | 1995-12-15 | Permetezve szárított eritropoietin |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6001800A (hu) |
| EP (1) | EP0805822B2 (hu) |
| JP (1) | JP4039686B2 (hu) |
| CN (1) | CN1117762C (hu) |
| AT (1) | ATE265468T1 (hu) |
| AU (1) | AU697287B2 (hu) |
| CA (1) | CA2207615C (hu) |
| DE (1) | DE69532970T3 (hu) |
| DK (1) | DK0805822T4 (hu) |
| ES (1) | ES2219672T5 (hu) |
| FI (1) | FI119723B (hu) |
| HU (1) | HU222370B1 (hu) |
| IL (1) | IL116085A (hu) |
| NO (1) | NO319895B1 (hu) |
| NZ (1) | NZ298981A (hu) |
| PT (1) | PT805822E (hu) |
| TW (1) | TW425287B (hu) |
| WO (1) | WO1996018647A1 (hu) |
| ZA (1) | ZA9510708B (hu) |
Families Citing this family (47)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19539574A1 (de) * | 1995-10-25 | 1997-04-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Zubereitungen und Verfahren zur Stabilisierung biologischer Materialien mittels Trocknungsverfahren ohne Einfrieren |
| US6081536A (en) * | 1997-06-20 | 2000-06-27 | Tantivy Communications, Inc. | Dynamic bandwidth allocation to transmit a wireless protocol across a code division multiple access (CDMA) radio link |
| US6542481B2 (en) | 1998-06-01 | 2003-04-01 | Tantivy Communications, Inc. | Dynamic bandwidth allocation for multiple access communication using session queues |
| US6151332A (en) | 1997-06-20 | 2000-11-21 | Tantivy Communications, Inc. | Protocol conversion and bandwidth reduction technique providing multiple nB+D ISDN basic rate interface links over a wireless code division multiple access communication system |
| EP0913177A1 (de) * | 1997-11-03 | 1999-05-06 | Roche Diagnostics GmbH | Verfahren zur Herstellung trockener, amorpher Produkte enthaltend biologisch aktive Materialien mittels Konvektionstrocknung, insbesondere Sprühtrocknung |
| US8175120B2 (en) | 2000-02-07 | 2012-05-08 | Ipr Licensing, Inc. | Minimal maintenance link to support synchronization |
| US7936728B2 (en) | 1997-12-17 | 2011-05-03 | Tantivy Communications, Inc. | System and method for maintaining timing of synchronization messages over a reverse link of a CDMA wireless communication system |
| US6222832B1 (en) | 1998-06-01 | 2001-04-24 | Tantivy Communications, Inc. | Fast Acquisition of traffic channels for a highly variable data rate reverse link of a CDMA wireless communication system |
| US7394791B2 (en) | 1997-12-17 | 2008-07-01 | Interdigital Technology Corporation | Multi-detection of heartbeat to reduce error probability |
| US9525923B2 (en) | 1997-12-17 | 2016-12-20 | Intel Corporation | Multi-detection of heartbeat to reduce error probability |
| US7496072B2 (en) | 1997-12-17 | 2009-02-24 | Interdigital Technology Corporation | System and method for controlling signal strength over a reverse link of a CDMA wireless communication system |
| US7773566B2 (en) | 1998-06-01 | 2010-08-10 | Tantivy Communications, Inc. | System and method for maintaining timing of synchronization messages over a reverse link of a CDMA wireless communication system |
| US8134980B2 (en) | 1998-06-01 | 2012-03-13 | Ipr Licensing, Inc. | Transmittal of heartbeat signal at a lower level than heartbeat request |
| US6526034B1 (en) | 1999-09-21 | 2003-02-25 | Tantivy Communications, Inc. | Dual mode subscriber unit for short range, high rate and long range, lower rate data communications |
| US8155096B1 (en) | 2000-12-01 | 2012-04-10 | Ipr Licensing Inc. | Antenna control system and method |
| US6954448B2 (en) | 2001-02-01 | 2005-10-11 | Ipr Licensing, Inc. | Alternate channel for carrying selected message types |
| US7551663B1 (en) | 2001-02-01 | 2009-06-23 | Ipr Licensing, Inc. | Use of correlation combination to achieve channel detection |
| WO2002064085A2 (en) * | 2001-02-02 | 2002-08-22 | Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. | Treatment of neurological dysfunction comprising fructopyranose sulfamates and erythropoietin |
| SG185139A1 (en) | 2001-06-13 | 2012-11-29 | Ipr Licensing Inc | Transmittal of heartbeat signal at a lower level than heartbeat request |
| US7611700B2 (en) | 2002-09-09 | 2009-11-03 | Hanall Pharmaceuticals, Co., Ltd. | Protease resistant modified interferon alpha polypeptides |
| EP1578394A4 (en) * | 2002-12-31 | 2011-02-23 | Nektar Therapeutics | ANTIBODY PARTICLES AND COMPOSITIONS |
| TW200526253A (en) | 2003-11-14 | 2005-08-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Cross-linked polysaccharide microparticles and process for producing the same |
| EP2399893B1 (en) | 2004-12-22 | 2018-08-15 | Ambrx, Inc. | Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acids and polypeptides |
| CA2594557C (en) | 2004-12-22 | 2016-04-26 | Ambrx, Inc. | Modified human growth hormone |
| CN101454461A (zh) | 2005-11-16 | 2009-06-10 | Ambrx公司 | 包括非天然氨基酸的方法和组合物 |
| CN106008699A (zh) | 2006-09-08 | 2016-10-12 | Ambrx公司 | 经修饰的人类血浆多肽或Fc骨架和其用途 |
| WO2008065372A2 (en) | 2006-11-28 | 2008-06-05 | Nautilus Biotech, S.A. | Modified erythropoietin polypeptides and uses thereof for treatment |
| KR101476472B1 (ko) | 2007-03-30 | 2015-01-05 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 변형된 ｆｇｆ-21 폴리펩티드 및 그 용도 |
| MX2009011870A (es) | 2007-05-02 | 2009-11-12 | Ambrx Inc | Polipeptidos de interferon beta modificados y usos de los mismos. |
| CA2711984A1 (en) | 2008-01-15 | 2009-07-23 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Powdered protein compositions and methods of making same |
| JP5680534B2 (ja) | 2008-07-23 | 2015-03-04 | イーライ リリー アンド カンパニー | 修飾されているウシｇ−ｃｓｆポリペプチドおよびそれらの使用 |
| PT104350A (pt) * | 2009-01-23 | 2010-07-23 | Hovione Farmaci Ncia S A | Processo de isolamento de tigeciclina |
| EP2805965A1 (en) | 2009-12-21 | 2014-11-26 | Ambrx, Inc. | Modified porcine somatotropin polypeptides and their uses |
| JP2013515080A (ja) | 2009-12-21 | 2013-05-02 | アンブルックス，インコーポレイテッド | 修飾されているウシのソマトトロピンポリペプチドおよびそれらの使用 |
| TWI480288B (zh) | 2010-09-23 | 2015-04-11 | Lilly Co Eli | 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物 |
| ES2645769T3 (es) | 2011-01-05 | 2017-12-07 | Hospira, Inc. | Secado por pulverización de la vancomicina |
| WO2013126552A1 (en) | 2012-02-21 | 2013-08-29 | Auburn University | Buprenorphine nanoparticle composition and methods thereof |
| CN104043104B (zh) | 2013-03-15 | 2018-07-10 | 浙江创新生物有限公司 | 含盐酸万古霉素的喷雾干粉及其工业化制备方法 |
| AU2015335603B2 (en) | 2014-10-24 | 2020-04-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Modified FGF-21 polypeptides and uses thereof |
| CN104984323B (zh) * | 2015-06-12 | 2018-05-01 | 北京四环生物制药有限公司 | 注射用重组人促红素冻干粉针剂 |
| CN105311624A (zh) * | 2015-11-23 | 2016-02-10 | 哈药集团生物工程有限公司 | 一种含有重组人促红素的药物组合物 |
| SI3849614T1 (sl) | 2018-09-11 | 2024-04-30 | Ambrx, Inc. | Polipeptidni konjugati interlevkina-2 in njihove uporabe |
| CN113366015A (zh) | 2018-10-19 | 2021-09-07 | Ambrx公司 | 白细胞介素-10多肽缀合物、其二聚体及其用途 |
| KR20210136014A (ko) | 2019-02-12 | 2021-11-16 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 항체-tlr 작용제 콘쥬게이트를 함유하는 조성물, 방법 및 이의 용도 |
| IL296099A (en) | 2020-03-11 | 2022-11-01 | Ambrx Inc | Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of using them |
| US20230302150A1 (en) | 2020-08-20 | 2023-09-28 | Ambrx, Inc. | Antibody-tlr agonist conjugates, methods and uses thereof |
| EP4313163A1 (en) | 2021-04-03 | 2024-02-07 | Ambrx, Inc. | Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57149228A (en) * | 1981-03-11 | 1982-09-14 | Ajinomoto Co Inc | Novel erythropoietin and its preparation |
| JPS6197229A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-15 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 安定なエリトロポエチン製剤 |
| DE3729863A1 (de) * | 1987-09-05 | 1989-03-16 | Boehringer Mannheim Gmbh | Stabilisierte erythropoietin-lyophilisate |
| GB9001987D0 (en) * | 1990-01-29 | 1990-03-28 | Janssen Pharmaceutica Nv | Improved cyclodextrin based erythropietin formulation |
| US5354934A (en) * | 1993-02-04 | 1994-10-11 | Amgen Inc. | Pulmonary administration of erythropoietin |
-
1995
- 1995-11-21 IL IL11608595A patent/IL116085A/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-12-15 CA CA2207615A patent/CA2207615C/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-15 HU HU9800996A patent/HU222370B1/hu active IP Right Grant
- 1995-12-15 ES ES95943452T patent/ES2219672T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-15 EP EP95943452A patent/EP0805822B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-15 JP JP51929496A patent/JP4039686B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-15 NZ NZ298981A patent/NZ298981A/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-12-15 ZA ZA9510708A patent/ZA9510708B/xx unknown
- 1995-12-15 AT AT95943452T patent/ATE265468T1/de active
- 1995-12-15 PT PT95943452T patent/PT805822E/pt unknown
- 1995-12-15 CN CN95197638.9A patent/CN1117762C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-15 DE DE69532970T patent/DE69532970T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-15 WO PCT/US1995/016416 patent/WO1996018647A1/en active IP Right Grant
- 1995-12-15 AU AU44713/96A patent/AU697287B2/en not_active Expired
- 1995-12-15 DK DK95943452.3T patent/DK0805822T4/da active
-
1996
- 1996-06-06 TW TW085106816A patent/TW425287B/zh not_active IP Right Cessation
- 1996-12-15 US US08/894,023 patent/US6001800A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-06-13 NO NO19972725A patent/NO319895B1/no not_active IP Right Cessation
- 1997-06-16 FI FI972557A patent/FI119723B/fi not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-10-12 US US09/415,726 patent/US6235710B1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU222370B1 (hu) | Permetezve szárított eritropoietin | |
| US5589167A (en) | Excipient stabilization of polypeptides treated with organic solvents | |
| US5919443A (en) | Stable lyophilized pharmaceutical preparations of G-CSF | |
| US7235253B2 (en) | Powder containing physiologically active peptide | |
| US5096885A (en) | Human growth hormone formulation | |
| US7262168B2 (en) | Compositions providing for increased IGF-I solubility | |
| KR100705997B1 (ko) | 안정화된 hgf 동결건조제제 및 그 제조방법 | |
| NO316661B1 (no) | Fremgangsmate for forstovning av en insulindose og et insulinprodukt | |
| CA2234724A1 (en) | Stable pharmaceutical forms of administration containing parathyroid hormone | |
| CN101578106A (zh) | Hgf制剂 | |
| MXPA97004504A (en) | Aspected eritropoyetin | |
| EP1028748B1 (en) | Compositions providing for increased igf-i solubility | |
| CA2154164C (en) | Excipient stabilization of polypeptides treated with organic solvents | |
| KR20020063882A (ko) | 신규한 에리트로포이에틴 자극 단백질에 대한 생분해성미세입자 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HFG4 | Patent granted, date of granting |
Effective date: 20030407 |