HU221092B1 - Compounds with growth hormone releasing properties - Google Patents

Compounds with growth hormone releasing properties Download PDF

Info

Publication number
HU221092B1
HU221092B1 HU9601740A HU9601740A HU221092B1 HU 221092 B1 HU221092 B1 HU 221092B1 HU 9601740 A HU9601740 A HU 9601740A HU 9601740 A HU9601740 A HU 9601740A HU 221092 B1 HU221092 B1 HU 221092B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
ala
trp
phe
2nal
imidazolyl
Prior art date
Application number
HU9601740A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9601740D0 (en
HUT74820A (en
Inventor
Birgit Sehested Hansen
Nils Langeland Johansen
Jesper Lau
Behrend Friedrich Lundt
Kjeld Madsen
Henning Thogersen
Original Assignee
Novo Nordisk As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DK143893A external-priority patent/DK143893D0/da
Application filed by Novo Nordisk As filed Critical Novo Nordisk As
Publication of HU9601740D0 publication Critical patent/HU9601740D0/hu
Publication of HUT74820A publication Critical patent/HUT74820A/hu
Publication of HU221092B1 publication Critical patent/HU221092B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/26—Psychostimulants, e.g. nicotine, cocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/1008—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

A találmány új peptidszármazékokkal, e peptidszármazékokat tartalmazókészítményekkel és azok előállítására történő alkalmazásávalkapcsolatos. ŕ

Description

A találmány új peptidszármazékokkal, e peptidszármazékokat tartalmazó gyógyszerkészítményekkel és azok előállítására történő alkalmazásával kapcsolatos.
A növekedési hormon egy olyan hormon, amely az összes olyan szövet növekedését stimulálja, melyek képesek a növekedésre. Ezen túlmenően, a növekedési hormonról ismert, hogy számos hatása van a metabolikus folyamatokra, így például stimulálja a proteinszintézist és a szabadzsírsav-mobilizációt, és az energiametabolizmusban áttérést idéz elő a karbohidrátmetabolizmusról a zsírsavmetabolizmusra. A növekedési hormon hiánya számos súlyos rendellenességet idézhet elő, így például a törpe növést.
A növekedési hormon a hipofízisben szabadul fel. A növekedési hormon felszabadulását számos hormon és neurotranszmitter irányítja akár közvetlen, akár közvetett úton. A növekedési hormon felszabadulását stimulálhatja a növekedésihormon-felszabadító hormon (GHRH) (growth hormoné releasing hormoné), és gátolhatja a somatostatin. A hormonok mindkét esetben a hipotalamuszban szabadulnak fel, de a hatásukat elsődlegesen olyan specifikus receptorok közvetítik, melyek a hipofízisben találhatóak meg. Ezenkívül leírtak más olyan vegyületeket is, melyek szintén stimulálják a növekedési hormon felszabadulását a hipofízisből. így például az arginin, az L-3,4-dihidroxi-fenil-alanin (LDopa), a glucagon, a vasopressin, a PACAP (hipofízisadenilil-cikláz-aktiváló peptid; pituitary adenylyl cyclase activating peptide), a muscarinreceptor-agonisták és egy szintetikus hexapeptid, a GHRP (növekedésihormon-felszabadító peptid; growth hormon releasing peptide) vagy direkt hatást fejtve ki a hipofízisre, vagy a GHRH és/vagy a somatostatin hipotalamuszból való felszabadulását befolyásolva szabadítják fel az endogén növekedési hormont.
Azoknál a rendellenességeknél vagy állapotoknál, melyek esetében kívánatos lenne a növekedési hormon magasabb szintje, a növekedési hormon fehérjetermészete csak a parenterális beadást teszi lehetségessé. Ezen túlmenően, a többi közvetlen hatású természetes kiválasztást fokozó anyagok, például a GHRH vagy a PACAP, hosszabb polipeptidek, aminek következtében orális beadásuk nem megoldható.
Rövidebb peptidek alkalmazását a növekedési hormon szintjének emlősökben való megemelésére már korábban is leírták, például az EP 18072, a WO 89/07110, a WO 89/01711, a WO 89/10933, a WO 88/9780, a WO 83/02272, a WO 92/01711 és a WO 93/04081 számú szabadalmi leírásokban.
A növekedési hormont felszabadító peptidek vagy peptidszármazékok előállítása növekedésihormon-felszabadító képességük és biológiai elérhetőségük miatt egyaránt nagy fontosságú. így a találmány tárgya olyan peptidek megadása, melyek növekedésihormonfelszabadító tulajdonságokkal, és melyek az ilyen típusú ismert peptideknél jobb tulajdonságokkal rendelkeznek.
A találmány összefoglalása
A fentieknek megfelelően a találmány a következő, I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeivel, vagy azok gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóival kapcsolatos:
(I): A-B-C-D-E(-F)p ahol p értéke 0 vagy 1;
A jelentése imidazolil-(l-6 szénatomot tartalmazójalkánsav, imidazolil-(l-6 szénatomot tartalmazó)alkénsav, amino-(l-6 szénatomot tartalmazó)alkánsav vagy amino-(l-6 szénatomot tartalmazó)alkénsav, vagy egy olyan L- vagy D-a-aminosav, mely a következő aminosavak egyike: H-His, H-Ala, H-D-Ala, H-(P-alanin), H-Aib, szarkozin vagy Gly;
B jelentése D-Trp, D-2Nal vagy D-Phe;
C jelentése Alá, Ser vagy Gly;
D jelentése Trp, Phe, P-(2-tienil)-alanin vagy N-aralkilglicin;
amikor p értéke 1, akkor E jelentése D-Phe, amikor p értéke 0, akkor E jelentése NH-CH(CH2-R3)-CO-R4 vagy -NH-CH(CH2-R3)-CH2-R4, ahol
R3 jelentése fenilcsoport és
R4 jelentése piperazinocsoport, morfolinocsoport, piperidinocsoport, -OH- csoport vagy -N(R5)R6csoport, ahol R5 és R6 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy kis szénatomszámú alkilcsoport; amikor p értéke 1, akkor F jelentése
-NH-CH(R10)-(CH2)v-R7)-, ahol v értéke nulla, vagy egy 1 és 8 közé eső egész szám, és R7 jelentése imidazolilcsoport, piperazinocsoport, morfolinocsoport, piperidinocsoport vagy -N(R8)-R9, ahol R8 és R9 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy kis szénatomszámú alkilcsoport, vagy egy aminocsoport és egy hexapiranóz vagy egy, a II általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport hexapiranozil-hexapiranóz vegyületével alkotott, az Amadori-átrendeződés termékeként kapott csoport, és R10 jelentése hidrogénatom, -COOH csoport, -CO-R11 csoport, -CH2-RH csoport vagy -CH2-OH csoport, ahol R11 jelentése piperazinocsoport, morfolinocsoport, piperidinocsoport vagy -N(R12)-R13, ahol R12 és R13 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy kis szénatomszámú alkilcsoport;
azzal a feltétellel, hogy az A és B, B és C, C és D vagy D és E, és amikor p értéke 1, E és F részletek között legalább egy amidkötés amino-metilén-csoporttal van szubsztituálva, vagy, amikor p értéke 0, E jelentése -NH-CH(CH2-R3)-CH2-R4, vagy amikor p értéke 1, R10 jelentése CH2-RH.
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületek peptidszármazékai ellenállóbbak a gasztrointesztinális vagy plazmaenzimek okozta proteolitikus degradációval szemben az egyik amidkötés (-CONH-) aminometilén (-CH2NH)-csoporttal való szubsztituálása, vagy egy N-aralkil-glicin bevezetése miatt. A találmány peptidszármazékainak a proteolitikus degradációval szemben megnövekedett ellenállása várhatóan biológiai elérhetőségük fokozódásához vezet az irodalomban korábban említett peptidekhez képest.
Az itteni szóhasználatban a „kis szénatomszámú alkilcsoport” kifejezés jelentése 1-6 szénatomot tartal2
HU 221 092 Bí mazó alkilcsoport, különösen pedig metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport, izopropilcsoport, butilcsoport, pentilcsoport vagy hexilcsoport.
A találmány részletes leírása
Az 1 általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport előnyben részesített vegyületeinél p értéke 1. Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport más előnyben részesített vegyületeinél A jelentése His, DAla vagy imidazolil-propionsav. B előnyösen D-Trp vagy D-2Nal. C előnyösen Alá. Amikor D egy N-aralkil-glicin-részletet jelöl, akkor ez előnyösen N-benzilglicin. D előnyben részesített jelentése Trp. E előnyösen D-Phe. Az F részlet jelentésében v értéke előnyösen 3 és 6 közé esik, és R7 előnyösen -NH2 csoport. R10 előnyösen -CONH2 csoport vagy -CH2OH csoport.
A találmány vegyületeire adnak példát a következő vegyületek:
H-His\|/(CH2NH)D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2
H-His-D-Trp\|/(CH2NH)-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2
H-His-D-Trp-Alav(CH2NH)-Trp-D-Phe-Lys-NH2
H-His-D-Trp-Ala-Trp\|/(CH2NH)D-Phe-Lys-NH2
H-His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phev(CH2NH)-Lys-NH2
H-D-Ala-D-2Nal-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-LysNH2
H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-D-Phev(CH2NH)LysNH2 (3-(4-imidazolil)-propionil)-D-2Nal-Ala-Trp-DPhe\|/(CH2NH)Lys-OH (3-(4-imidazolil)-propionil)-D-2Nal-Ala-Trp-DPhev(CH2NH)Lys-NH2 (3-(4-imidazolil)-akriloil)-D-2Nal-Ala-Trp-DPhev(CH2NH)Lys-NH2
H-D-Ala-D-Phe-Ala-Trp-D-Phev(CH2NH)LysNH2 (2R)-(H-D-Ala-D-Phe-Ala-Trp-NH)-3-fenil-propilamin (2S)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-PheNH)-6-amino-hexanol
H-D-Ala-D-2Nal-Alav(CH2NH)Trp-D-Phe-NH2
4-(H-D-Ala-D-2Nal-Alav(CH2NH)Trp-D-PheNH)-butil-amin (2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-NH)-3-fenil-propil-amin ((2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-NH)-3-fenil-propil-amino)-hexil-amin (2R)-(H-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-NH)-3-fenil-propil-amin (2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-NH)-3-fenil-propil-amin
H-Aib-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-DPhev(CH2NH)Lys-NH2 (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-\|/(CH2NH)DPhe-Ala-Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe\|/(CH2NH)Ala-Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-Ala\p(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-Ala-Trp\|/(CH2NH)D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-(2R)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-AlaTrp-NH)-3-fenil-propil-amino)-6-amino-hexanol
3-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Trp-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-propil-amin (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-Ala-TrpD-Phey(CH2NH)NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Trp-Alav^(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol
3-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Trp-Alai|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-propil-amin
H-D-Ala-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-D-Phex|/(CH2NH)Lys-NH2
H-Aib-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-D-Phe\|/(CH2NH2)
Rövidítések
D-2Nal: D-2-naftil-alanin
N-Bzl: N-benzil-glicin
H-Aib: H-amino-izobutirsav
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületei előállíthatok az oldat vagy szilárd fázisú peptidszintézis hagyományos módszereivel. A szilárd fázisú szintézis például végrehajtható lényegében a Stewart és Young által leírtak szerint (Szilárd fázisú peptidszintézis (Solid Phase Peptide Synthesis), 2. kiadás, Rockford, Illinois, USA, 1976). Az oldat állapotú peptidszintézis végrehajtható például lényegében a Bodansky és munkatársai által leírtak szerint (Peptidszintézis (Peptide Synthesis), 2. kiadás, New York, New York, USA, 1976).
Az amino-metilént, mint egy amidkötés szubsztituáltját kialakíthatjuk a Y. Sasaki és D. H. Coy által leírtak szerint (Peptidek (Peptides) 8(1), 1987, 119-121. oldal). A mono- vagy dihexapiranózból származtatott aminocsoportot tartalmazó peptidszármazékok Amadori-átrendeződés útján állíthatók elő, mely eljárás lényegében megegyezik az R. Albert és munkatársai által leírt módszerrel (Life Sciences 53, 1993, 517-525. oldal). A megfelelő mono- vagy dihexapiranózokra példa a glukóz, a galaktóz, a maltóz, a laktóz és a cellobióz. A szintézis során kiindulási anyagokként felhasznált származékok beszerezhetőek kereskedelmi úton, és amikor igény van rá, elláthatók alkalmas védőcsoportokkal is.
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeinek gyógyszerészeti szempontból elfogadható savaddíciós sói közé tartoznak azok, melyek a peptidek olyan szervetlen vagy szerves savakkal való reakciója során keletkeznek, mint amilyen például a sósav, a hidrogén-bromid, a kénsav, az ecetsav, a foszforsav, a tejsav, a maleinsav, a ftálsav, a citromsav, a glutársav, a glukonsav, a metánszulfonsav, a szalicilsav, a borostyánkősav, a borkősav, a toluolszulfonsav, a trifluor-ecetsav, a szulfaminsav és a fiimársav.
A találmány további tárgya olyan gyógyszerkészítmények, melyek aktív hatóanyagként az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeit vagy azok gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóit tartalmazzák, egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható hordozó vagy oldószer mellett.
A találmány vegyületeit tartalmazó gyógyszerkészítmények hagyományos módszerek felhasználásával állít3
HU 221 092 Β1 hatók elő, például a Remington’s Pharmaceutical Sciences, (1985)-ben leírtak szerint. A gyógyszerkészítmények elkészíthetők a hagyományos kiszerelésben, például kapszulák, tabletták, aeroszolok, oldatok, szuszpenziók vagy helyileg alkalmazható gyógyszerek formájában.
Az alkalmazott gyógyszerészeti hordozó vagy oldószer lehet hagyományos szilárd vagy folyékony hordozó. A szilárd hordozókra példa a laktóz, a terra alba, a szukróz, a ciklodextrin, a talkum, a zselatin, az agar, a pektin, az akácia, a magnézium-sztearát, a sztearinsav vagy a cellulóz kisebb szénatomszámú alkil-éterei. A folyékony hordozókra példa a cukorszirup, a mogyoróolaj, az olívaolaj, a foszfolipidek, a zsírsavak, a zsírsav-aminok, a poli(oxi-etilén) és a víz.
Hasonlóan, a hordozó vagy oldószer tartalmazhat valamilyen, szakemberek számára jól ismert késleltetett hatású anyagot is, mint például gliceril-monosztearátot vagy gliceril-disztearátot, önmagában, vagy viasszal elegyítve.
Amennyiben egy szilárd hordozót orális alkalmazásra használunk, akkor a gyógyszerkészítményt előállíthatjuk tabletták formájában, por vagy pellet formájában, keményzselatin kapszulába tölthetjük, de elkészíthetjük pirula vagy pasztilla alakjában is. Az alkalmazott szilárd hordozó mennyisége erősen változó, de általában 25 mg és 1 g közé esik.
Tipikus tabletta, melyet hagyományos tablettázóeljárások felhasználásával állíthatunk elő, a következő összetevőket tartalmazhatja:
Mag:
aktív hatóanyag (mint szabad vegyület vagy annak sója) 100 mg kolloidális szilikon-dioxid (Aerosil) 1,5 mg mikrokristályos cellulóz (Avecil) 70 mg módosított cellulózgumi (Ac-Di-Sol) 7,5 mg magnézium-sztearát
Bevonat:
HPMC körülbelül 9 mg *Mywacett 9-40 T körülbelül 0,9 mg *A filmbe vonathoz lágyitószcrkcnt használt acilezett monoglicerid.
Amennyiben folyékony hordozót használunk, a készítményt előállíthatjuk szirup, emulzió, lágyzselatin kapszula vagy steril, injekciózásra alkalmas folyadék, például egy vizes vagy nemvizes szuszpenzió vagy oldat formájában.
Nazális alkalmazásra a gyógyszerkészítmény tartalmazhat I általános képlettel jellemezhető vegyületet feloldva vagy szuszpendálva egy folyékony hordozóban, különösen vizes hordozóban, az aeroszolos alkalmazáshoz. A hordozó tartalmazhat olyan adalékanyagokat, mint amilyenek az oldódást segítő anyagok, például propilénglikol, felületaktív anyagok, mint amilyen például az epesavsók vagy a poli(oxi-etilén) nagyobb szénatomszámú alkoholokkal képzett éterei, az abszorbeiót növelő anyagok, mint amilyen a lecitin (foszfatidilkolin) vagy a ciklodextrin, vagy a tartósítószerek, mint amilyenek a parabének.
A találmány vegyületeit általában egységadagokra osztva használjuk fel, melyek adagonként
0,0001-100 mg mennyiségben tartalmazzák az aktív hatóanyagot, egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható hordozó mellett.
A találmány vegyületeinek napi adagja általában 1-500 mg, például körülbelül 100 mg dózisonkénti adagokban, amikor a kezelés alanyának, például egy embernek gyógyszerként adjuk azt be.
Kiderült, hogy az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületei képesek az andogén növekedési hormon in vivő felszabadítására. Ebből kifolyólag e vegyületek felhasználhatók olyan betegségek kezelésében, melyeknél magasabb plazma-növekedésihormonszint lenne kívánatos, mint például a növekedésihormon-elégtelenségben szenvedő személyek, vagy idősebb betegek vagy állatok esetében.
Ezek alapján a találmány egyik vonatkozásában olyan gyógyszerkészítményekkel kapcsolatos, melyek stimulálják a növekedési hormon hipofízisből való felszabadulását, és amelyek aktív hatóanyagként az 1 általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport egy vegyületét vagy annak egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóját tartalmazzák egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható hordozó vagy oldószer mellett.
A találmány egy további vonatkozásában az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeinek vagy azok gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóinak olyan gyógyszerkészítmények előállítására való felhasználásával kapcsolatos, mely gyógyszerkészítmények stimulálják a növekedési hormon hipofízisből való felszabadulását.
Szakemberek számára jól ismert, hogy a növekedési hormon általánosan elfogadott és lehetséges felhasználása az ember esetében nagyarányú és változatos. Feltételezhető, hogy az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületei felhasználhatók a növekedési hormon hipofízisből való felszabadulásának stimulálására, és így hasonló hatásuk és felhasználási területük lehet, mint magának a növekedési hormonnak. A növekedési hormon felhasználása a következőképpen foglalható össze: a növekedési hormon felszabadulásának stimulálása idősebb betegek esetében; a glukokortikoidok katabolikus mellékhatásainak kiküszöbölése; a csontritkulás kezelése; az immunrendszer stimulálása; sebek gyógyulásának felgyorsítása; csonttörések gyógyulásának felgyorsítása; a retardált növekedés kezelése; a retardált növekedésből fakadó veseelégtelenség vagy a nem kielégítő veseműködés kezelése; a fiziológiás alacsony termet kezelése akár a növekedési hormon hiányában szenvedő gyerekek, akár krónikus betegségekkel kapcsolatos alacsony termet esetében; az elhízás és az elhízással kapcsolatban kialakuló retardált növekedés kezelése; a Prader-Willi-szindrómával és a Turner-szindrómával kapcsolatos retardált növekedés kezelése; égési sérüléseket szenvedett személyek gyógyulásának gyorsítása és így kórházi kezelésük lerövidítése; a méhen belüli retardált növekedés kezelése; a csontozat rendellenes fejlődésének a kezelése, a hipercortisolizmus és a Cushing-szindróma kezelése; a növekedési hormon pulzáló felszabadulásának előidézése; a kimerült betegek növekedésihormon-pótlása; az excentri4
HU 221 092 Β1 kus osteochondrodystrophia, a Noonan-szindróma, a skizofrénia, a depresszió, az Alzheimer-kór kezelése; a késleltetett sebgyógyulás; a pszichológiai depriváció kezelése; a tüdőrendellenességek és a légzési függőség (ventilátor dependency) kezelése; nagyobb sebészeti beavatkozások után a fehérjekatabolikus válaszreakciók csökkentése; krónikus betegségek, mint amilyen például a rák vagy az AIDS, után kialakuló cachexia és a fehérjevesztés csökkentése; a hiperinsulinemia kezelése; a peteérés előidézésének kisegítő kezelése; a thymusfejlődés stimulálása és a thymusfunkció korral járó hanyatlásának megelőzése; az immunhiányos betegek kezelése; az izmok erejének növelése; a mozgékonyság fokozása; a bőr vastagságának megőrzése; a metabolikus homeosztázis javítása; a vese homeosztázisának javítása az idős és gyenge betegek esetében; a csontképző sejtek stimulálása; a csontok megújítása és a porcok növesztése; az immunrendszer stimulálása házi állatok esetében; a korral járó rendellenességek kezelése háziállatok esetében; a növekedés fokozása a haszonállatok esetében, valamint a birkagyapjú növekedésének serkentése.
A fenti esetekben az adagolás függ az alkalmazott I általános képlettel jellemezhető vegyülettől, a beadás módjától és a kívánt kezelési eljárástól. Az átlagos napi dózisszint azonban körülbelül 0,0001 mg/testtömeg-kg és 100 mg/testtömeg-kg emberek és állatok esetében, az endogén növekedési hormon hatékony felszabadításához. Orális vagy nazális alkalmazáshoz az adagok általában körülbelül 0,0001 mg-100 mg, előnyösen körülbelül 0,001 mg-50 mg mennyiségben tartalmazzák az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport egy vegyületét, egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható hordozó- vagy oldószer mellett.
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületei beadhatók gyógyszerészeti szempontból elfogadható savaddíciós sók formájában, vagy amikor alkalmas, alkálifémsók vagy alkálifoldfémsók, esetleg kis szénatomszámú alkil-ammónium-sók formájában. Az ilyen sók feltehetőleg körülbelül ugyanolyan fokú aktivitást mutatnak, mint a szabad bázis formájában lévő vegyületek.
Bizonyos esetekben a találmány gyógyszerkészítményei az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületén kívül tartalmazhatnak egy vagy több, különböző hatású vegyületet, például egy antibiotikumot vagy más gyógyszerészeti szempontból aktív anyagot. Ez lehet egy másik kiválasztást fokozó anyag, mint amilyen például a GHRP (1 vagy 6) vagy a GHRH, vagy valami más ezekhez hasonló anyag, növekedési hormon vagy valamilyen ahhoz hasonló anyag, vagy egy szomatomedin, mint amilyen például az IGF-1 vagy az IFG-2.
Az alkalmazás módja bármilyen lehet, ami hatékonyan juttatja az aktív hatóanyagot a megfelelő, illetve a kívánt területre; így lehet orális, nazális vagy parenterális, előnyösen azonban orális.
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületei gyógyszerészeti felhasználásukon kívül hasznosak lehetnek a növekedésihormon-felszabadulás kutatásának in vitro eszközeiként.
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületei ezenkívül hasznos in vivő eszközök lehetnek a hipofízis növekedésihormon-felszabadító képességének megbecslésében. Például az e vegyületek embernek való beadása előtt és után vett szérumminták megvizsgálhatok a növekedésihormon-tartalmuk szempontjából. Az egyes szérumminták növekedésihormontartalmának összehasonlítása közvetlenül meghatározhatja a kezelt személyek hipofízisének növekedésihormon-felszabadító képességét.
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületei alkalmazhatók kereskedelmi szempontból fontos állatok esetében is, növekedésük sebességének és mértékének fokozására, valamint a tejtermelés fokozására.
Gyógyszerésze// eljárások
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeinek a növekedési hormon felszabadítására való képességét és hatékonyságát in vitro megbecsülhetjük elsődleges patkány-somatotrophokban.
Az elsődleges patkány-somatotrophokat lényegében a korábban leírtak szerint preparálhatjuk (Chen és munkatársai, Endocrinology 1991, 129, 3337-3342 és Chen és munkatársai, Endocrinology 1989, 124, 2791-2798). Röviden, a patkányokat dekapitálással megöljük. A hipofízist gyorsan kivesszük. A hipofíziseket 0,2%-os kollagenázzal és Hanks egyensúlyi sóoldatban lévő 0,2%-os hialurinidázzal emésztjük. A sejteket olyan Dulbecco-féle módosított Eagle-féle táptalajban (Dulbecco’s Modified Eagle’s médium) szuszpendáljuk újra, mely 0,37% nátrium-hidrokarbonátot, 10% lószérumot, 2,5% magzati borjúszérumot, 1% nem illékony aminosavat, 1% glutamint és 1% penicillint/streptomicint tartalmaz, és a koncentrációt 1,5 χ 105 sejt/ml-re állítjuk be. 24 üregű tányérok minden egyes üregébe ennek a szuszpenziónak egy-egy ml mennyiségét tesszük, és a növekedésihormon-felszabadítási kísérletek megkezdése előtt 2-3 napig állni hagyjuk.
Az első kísérleti napon a sejteket a fenti, 25 mM HEPES-t tartalmazó táptalajjal (pH = 7,4) kétszer mossuk. A növekedésihormon-felszabadulást 25 mM HEPES-t és a tesztvegyületet tartalmazó táptalaj hozzáadásával indítjuk meg. A mintákat 37 °C hőmérsékleten 15 percen keresztül inkubáljuk. Az inkubálás után a táptalajban lévő felszabadult növekedési hormon mennyiségét standard RIA-eljárással mérjük.
Az I általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeinek a növekedési hormon felszabadítására való in vivő hatását pentobarbitallal elaltatott nőstény patkányok esetében a korábban leírtak szerint (Bercu és munkatársai, Endocrinology 1991, 129, 2592-2598) becsülhetjük. Röviden leírva, felnőtt hím Sprague-Dawley-patkányokat altatunk el 50 mg/testtömeg-kg pentobarbitallal. Miután a patkányokat teljesen elaltattuk, tracheális kanült és katétert helyezünk a nyaki verőérbe és a nyaki vénába. 15 perces felépülési idő elteltével a nulla időpillanatban vérmintát veszünk. A hipofízis kiválasztását serkentő anyagokat iv. alkalmazzuk, és arteriális vérmintákat jégre helyezünk 15 percre, majd 2 percen keresztül 12 000 g-vel centri5
HU 221 092 Β1 fugálunk. A szérumot dekantáljuk, és a növekedési hormon mennyiségét standard RIA-eljárás felhasználásával meghatározzuk.
A találmányt az alábbi példák tovább illusztrálják, anélkül, hogy az igénypontok által megjelölt érvényességi területét korlátoznák.
A leírásban a következő rövidítéseket használjuk :
Nem természetes aminosavmaradékok rövidítései:
N-Bzl-Gly: a ábra
2Nal: b ábra
Aib: c ábra
Peptidkötés-szubsztituensekre használt rövidítések: ψ(ΟΗ2ΝΗ): d ábra V(CH2NH2): e ábra Védőcsoportokra használt rövidítések:
Boc-: f ábra Fmoc-: g ábra Cl-Z-: h ábra Bőm-: i ábra Adoc-: j ábra Fór-: k ábra.
1. példa
H-His-D-Trp\|/(CH2NH)Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2
A H-Ala-Trp-D-Phe-Lys-gyanta peptid műgyantát az Fmoc-stratégia szerint állítjuk elő egy Applied Biosystems 431A peptidszintetizálón 0,25 mmol léptékben, a gyártó által biztosított FastMoc-UV-protokollokat felhasználva, melyek HBTU (2-(lH-benzotriazol-l-il)1,1,3,3-tetrametil-urónium-hexafluor-foszfát) által közvetített, NMP-ben (N-metil-pirrolidon) történő párosodásokat használnak, és az Fmoc-védőcsoport deprotektálását UV-megfigyelésnek vetve alá. Az alkalmazott kiindulási műgyanta 470 mg mennyiségben a 4-(2’,4’-dimetoxi-fenil-Fmoc-amino-metil)-fenoxi műgyanta (Novabiochem AG Switzerland, katalógusszám: 01 64 0013), mely 0,53 mmol/g mennyiségben szubsztituált. Az alkalmazott protektált aminosavszármazékok a következők: Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-D-Phe-OH, Fmoc-Trp-OH és Fmoc-Ala-OH.
A -CH2NH- peptidkötés-izosztérát a Sasaki Y. és Coy, D. H. által leírtak szerint (Peptides 8(1) 119-121, 1987) vezetjük be.
Az Fmoc-D-Trp-aldehidet a megfelelő N,O-dimetil-hidroxamát 399 mg mennyiségéből állítjuk elő a Fehrentz, J. A. és Castro, B. által leírtak szerint (Synthesis 676-678, 1983). A nyers aldehidet 8 ml DMF-ben (dimetil-formamid) lévő 1%-os ecetsavban oldjuk, és két részre osztjuk. Az első részletet 8 ml DMF-ben lévő 1%-os ecetsavoldatban lévő 400 mg (körülbelül 0,2 mmol) H-Ala-Trp-D-Phe-Lys(Boc)-gyanta állandó keverés alatt tartott szuszpenziójához adjuk szobahőmérsékleten. Ezután a rendszerhez 60 perc alatt hozzáadunk 1 ml DMF-ben föloldott 40 mg NaCNBH3-at (85% tisztaságú), és a keverést további 60 percen keresztül folytatjuk. Ezután a műgyantát elválasztjuk és DMF-ben lévő 1%-os ecetsavval mossuk egy szűrőtölcséren. A műgyantát újraszuszpendáljuk 5 ml, DMFben lévő 1%-os ecetsavban, és hozzáadjuk a FmocAla-aldehid második részletét. A rendszerhez szobahőmérsékleten, 60 perc alatt ismét hozzáadunk 1 ml DMF-ben föloldott 40 mg NaCNBH3-at (85% tisztaságú), és a reakcióelegyet 18 órán keresztül keverjük.
Ezután a reduktív alkilezési reakciólépés után a peptid műgyantát elválasztjuk és DMF-ben lévő 1%-os ecetsavval mossuk egy szűrőtölcséren, és a láncmeghosszabbítást a peptidszintetizáló fent leírtak szerinti felhasználásával tesszük teljessé, protektált FmocHis(Trt)-OH aminosavszármazékot alkalmazva.
A pepiidet elhasítjuk a peptid műgyanta 240 mg mennyiségétől 240 percen keresztül tartó, szobahőmérsékleten való, és 3 ml TFA (trifluor-ecetsav, trifluoroacetic acid), 225 mg fenol, 75 μΐ etánditiol, 150 μΐ tioanizol és 150 μΐ desztillált víz elegyével történő keveréssel. A hasítóelegyet szűrjük, és a szűrletet egy olajjá koncentráljuk nitrogénáram felhasználásával. A nyerspeptidet lecsapatjuk ebből az olajból 45 ml dietil-éter felhasználásával, és 3 x45 ml dietil-éterrel mossuk.
A nyerspeptidet szemipreparatív HPLC-vel tisztítjuk egy 25 mm x 250 mm nagyságú, 7 μ C-18 szilikagéllel ellátott oszlopon. Az oszlopot olyan 21%-os, 0,05 M (NH4)2SO4-oldatban lévő CH3CN-vel ekvilibráljuk, melynek a pH-értékét 4 M kénsavval 2,5re állítjuk be. Száradás után a nyerspeptidet föloldjuk 5 ml desztillált vízben lévő 70% CH3CN/0,l% TFA-oldatban, és desztillált vízzel 50 ml térfogatúra hígítjuk. Ennek az oldatnak 20 ml mennyiségét 90 ml térfogatúra hígítjuk, és az így keletkező elegyet az oszlopra juttatjuk, amit azután 21%-31%-os, 0,05 M (NH4)2SO4ben lévő CH3CN-gradienssel eluálunk (pH = 2,5) 10 ml/perc sebességgel 47 percen keresztül, 40 °C hőmérsékleten. A peptidet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és háromszoros térfogatú desztillált vízzel hígítjuk, és átengedjük egy Sep-Pak Cl8 patronon (Waters part. szám: 51910), melyet előzőleg 0,1%-os TFA felhasználásával ekvilibrálunk. Az oszlopot ezután 0,1% TFA-t tartalmazó 70%-os CH3CN-oldattal eluáljuk, és a tisztított peptidet liofilezéssel izoláljuk, az eluátum vízzel való hígítása után. A hozam ekkor 6,55 mg.
A kapott végtermék tulajdonságait aminosavanalízissel (peptidtartalom és aminosav-összetétel), analitikus RP-HPLC-vel (késleltetési idő) és PDMS-sel (plazmadeszorpciós tömegspektrometria, plasma desorption mass spectrometry) (molekulasúly) állapítjuk meg. Az aminosavanalízis és a PDMS eredménye megegyezik a várt szerkezet jellemzőivel az eljárás hibahatárán belül (PDMS: ±0,9 amu, aminosavanalízis: ±10%).
Az RPHPLC-analízist 214 nm-en való UV-detektálással végezzük egy Vydac 218TP54 4,6 mm x 250 mm 5 μ C-18 szilikagél oszlopon (The Separations Group, Hesperia, USA), amit 1 ml/perc sebességgel eluálunk 42 °C hőmérsékleten. Az eluálást két különböző feltételrendszerben végezzük:
A1: Az oszlop ekvilibrálását 5%-os CH3CN-nel végezzük egy olyan pufferben, mely 0,1 M (NH4)2SO4-et tartalmaz, és amely pH-értékét tömény kénsavval 2,5-re állítjuk be, és az eluálást 5%-60% CH3CN-gradienssel végezzük ugyanebben a pufferben 50 percen keresztül.
HU 221 092 B l
Bl: Az oszlop ekvilibrálását 5%-os CH3CN/0,l% TFA/desztillált víz elegyével végezzük és az eluálást 5% CH3CN/0,l% TFA/desztillált víz-60% CH3CN/0,l% TFA/desztillált víz gradienssel végezzük 50 percen keresztül.
Az Al, illetve a Bl feltételek mellett végzett eluálással a késleltetési időre 22,01 perc, illetve 23,08 perc adódik.
2. példa
H-His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phev(CH2NH)Lys-NH2
A H-Lys(2-Cl-Z)-gyantát 660 mg 0,72 mmol/g mennyiségben szubsztituált 4-metil BHA műgyantából (Bissendorf Biochemicals, Hannover, Germany, katalógusszám: RMIS50) és Boc-Lys(Cl-Z)-OH-ból állítjuk elő a Boc-stratégia szerint egy Applied Biosystems 430A peptidszintetizálón 0,5 mmol léptékben, a gyártó által biztosított egyszeri párosodási protokollok felhasználásával, melyek egyszeri párosodásokat alkalmaznak előzetesen kialakult, DMF-ben lévő szimmetrikus anhidridekkel. A protokollokat úgy módosítjuk, hogy 60 perces párosodási időt kapjunk.
A -CH2NH peptidkötés-izosztérát az 1. példában leírtakhoz hasonló eljárással vezetjük be. Ehhez 616 mg megfelelő Ν,Ο-dimetil-hidroxamátból előzetesen képződött 675 mg H-Lys(Cl-Z)-gyantát és Boc-D-Phealdehidet használunk.
Ezután a reduktív alkilezési reakciólépés után a pepiid műgyantát elválasztjuk és DMF-ben lévő 1%-os ecetsavval mossuk egy szűrőtölcséren, és a láncmeghosszabbítást a peptidszintetizáló fent leírtak szerinti felhasználásával tesszük teljessé, protektált Boc-Trp(For)-OH, BocAla-OH, Boc-D-Trp(For)-OH és Boc-His(Bom)-OH aminosavszármazékokat alkalmazva.
A pepiidet elhasítjuk a peptid műgyanta 391 mg mennyiségétől 75 percen keresztül tartó és 5 ml HF és 500 μΐ m-krezol elegyével történő keveréssel. A HF-et 0 °C hőmérsékleten elpárologtatjuk nitrogénáramban. A pepiidet lecsapatjuk az így visszamaradó olajból a műgyantával együtt 45 ml dietil-éter felhasználásával, 2x50 ml dietil-éterrel mossuk és 2 x 2 ml TFA-val kivonjuk a gyantából, majd az összeöntött TFA-extraktumokból 50 ml dietil-éter felhasználásával kicsapatjuk, és 2 x 50 ml dietil-éterrel mossuk.
Szárítás után a triptofánokon lévő formilcsoportokat a peptid 4 ml etanol-amint tartalmazó 64 ml 6 M guanidinium-hidrokloridban való oldással és 0 °C hőmérsékleten való, 5 percen keresztül tartó keveréssel lehasítjuk. Ezután a reakcióelegyet 4 ml ecetsav hozzáadásával semlegesítjük, majd 140 ml desztillált vízzel hígítjuk.
A nyerspeptidet szemipreparatív HPLC-vel tisztítjuk, a reakcióelegynek az oszlopra való direkt injekciózásával, az 1. példában leírtakhoz hasonló eljárást alkalmazva. A hozam 20,6 mg.
A végtermék tulajdonságait az 1. példában leírtak szerint állapítjuk meg.
Az Al, illetve a Bl feltételek mellett végzett RP-HPLC-analízissel a késleltetési időre 21,28 perc, illetve 23,17 perc adódik.
3-5. példa
Pclda száma Peptid A következő számú példa eljárásához hasonlóan állítható elő RP-HPLC késleltetési idő
Al feltételrendszer (1. példa) Bl feltételrendszer (1. példa)
3. H-Hist|/(CH2NH)-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2 2. 20,42 22,9
4. H-His-D-Trp-Ala-Trpv(CH2NH)D-Phe-Lys-NH2 1. 18,97 21,3
5. H-His-D-Trp-Alaty(CH2NH)-Trp-D-Phe-Lys-NH2 2. 18,87 21,08
6. példa (2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp- NH)-3-fenil-propilamin
A megfelelő Ν,Ο-dimetil-hidroxamát 385 mg mennyiségéből Fmoc-D-Phe-aldehidet állítunk elő a Fehrentz, J. A. és Castro, B. által leírtak szerint (Synthesis 676-678, 1983). A nyers aldehidet 20 ml, DMFben lévő 1%-os ecetsavban oldjuk és az így keletkező elegyet két részre osztjuk.
580 mg 4-(2’,4’-dimetoxi-fenil-Fmoc-amino-metil)-fenoxi műgyantát (Novabiochem AG Switzerland, katalógusszám: 01-64-0013), mely 0,43 mmol/g mennyiségben szubsztituált, 20%-os, DMF-ben lévő piperidinnel deprotektálunk 20 percig, majd DMF-fel és 1%-os, DMF-ben lévő ecetsavval mossuk.
Az Fmoc-D-Phe-aldehid első részletét és 58 mg, 1 ml DMF-ben fololdott NaCNBH3-at (85% tisztaságú) hozzáadunk a deprotektált műgyantához, és az így keletkező szuszpenziót szobahőmérsékleten 75 percen keresztül keverjük. Ezután a műgyantát izoláljuk egy szűrőtölcséren, és DMF-ben lévő 1%-os ecetsavval mossuk. Az Fmoc-D-Phe-aldehid második részletét és 58 mg, 1 ml DMF-ben föloldott NaCNBH3-at (85% tisztaságú) hozzáadunk a műgyantához, és az így keletkező elegyet szobahőmérsékleten 18 órán keresztül keverjük. Ezután a műgyantát izoláljuk egy szűrőtölcséren, és DMF-ben lévő 1%-os ecetsavval, MDF-fel, DCM/metanol 6:4 arányú elegyével és DCM-mel (diklór-metán, dicloromethane) mossuk.
HU 221 092 Β1
Ezt a műgyantát használva a láncmeghosszabbítást a peptidszintetizáló 1. példában leírtak szerinti felhasználásával tesszük teljessé, protektált Fmoc-Trp-OH, Fmoc-Ala-OH, Fmoc-D-2Nal-OH és Fmoc-D-Ala-OH aminosavszármazékokat alkalmazva. 5
A pepiidet elhasítjuk az így keletkező peptid műgyanta 600 mg mennyiségétől. Az így keletkező nyerspeptidet 50 ml desztillált vízben oldjuk, és az így keletkező elegy 25 ml mennyiségét szemipreparatív HPLCvel tisztítjuk, és tulajdonságait az 1. példában leírtak szerint állapítjuk meg. A hozam 20,6 mg.
Az Al, illetve a B1 feltételek mellett végzett RP-HPLC-analízissel a késleltetési időre 27,98 perc, illetve 29,45 perc adódik.
7-12. példa
Példa száma Peptid A következő számú példa eljárásához hasonlóan állítható elő RP-HPLC késleltetési idő
Al feltételrendszer (1. példa) B1 feltételrendszer (1. példa)
7. H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-D-Phe\|/(CH2NH)Lys-NH2 1. 26,00 27,02
8. H-D-Ala-D-Phe-Ala-Trp-D-Phet|/(CH2NH)Lys-NH2 1. 22,02 23,30
9. 3-(4-imidazolil)-propionil-D-2Nal-Ala-Trp-D- Phetp(CH2NH)Lys-NH2 1. 26,33 27,70
10. 3-(4-imidazolil)-akriloil-D-2Nal-Ala-Trp-D- Phe\|/(CH2NH)Lys-NH2 1. 26,93 28,15
11. (2S)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-D-Phe-NH)-6-amino- hexil-amin 6. 25,33 26,08
12. H-D-Ala-D-2Nal-Ala-vp(CH2NH)Trp-D-Phe-Lys-NH2 1. 23,62 25,07
13. példa (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Trp- 30
Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol
A (3-(l-Adoc-4-imidazolil)-propionil)-D-TrpAla\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-Lys(Boc)-Sasrin peptid műgyantát (Az „Adoc” az 1-adamantil-oxi-karbonil-csoport rövidítése) az 1. példában leírtakhoz hasonló eljá- 35 rás szerint állítjuk elő 1 mmol léptékben azzal a különbséggel, hogy most 1020 mg, 0,87 mmol/g mennyiségben szubsztituálható sasrin műgyantát (2-metoxi-4-alkoxi-benzil-alkohol műgyanta) (Bachem, Bubendorf, Switzerland, katalógusszám: D-1295) használunk fel 40 hozzá, és hogy az első aminosavrészletnek a műgyantához való kapcsolásához felhasznált protokoll a gyártó által biztosított, 4-dimetil-amino-piridinnel katalizált párosodása az előzetesen kialakuló szimmetrikus anhidridnek, majd ezt követően a műgyantán lévő reziduális 45 -OH csoportok benzoesavanhidriddel való fedése.
A protektált (2S)-((3-(l-Aodc-4-imidazolil)-propionil)-D-Trp-Alav(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-6-(Bocamino)-hexanolt elhasítjuk a (3-(l-Aodc-4-imidazolil)propionil)-D-Trp-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-Lys(Boc)- 50 Sasrin műgyanta 1800 mg mennyiségétől a műgyanta 24 órán keresztül tartó, szobahőmérsékleten való és 10,8 ml THF (tetrahidrofurán), 1,8 ml etanol, 211 mg lítium-bromid és 92 mg NaBH4 elegyével történő keveréssel. Ezután cseppenként hozzáadunk 2 ml desztillált 55 vizet és 2 ml ecetsavat. A műgyanta szemcséket szűréssel eltávolítjuk, és 25 ml etanollal mossuk. A szűrletet vákuumban koncentráljuk, és a visszamaradó olajat 50 ml desztillált vízzel hígítjuk és liofilezzük. Az így keletkező port TFA-hasításnak vetjük alá az 1. példá- 60 bán leírtak szerint. Az így keletkező nyerspeptid 1/5 részét az 1. példában leírtak szerint tisztítjuk. A hozam 28,54 mg.
A végtermék tulajdonságait az 1. példában leírtak szerint állapítjuk meg.
Az Al feltétel mellett a késleltetési időre 20,4 perc adódik.
14. példa
3-((3-(4-Imidazolil)-propionil)-D-TrpAlat|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-propil-amin
A (3-(l-Adoc-4-imidazolil)-propionil)-D-TrpAla\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-Sasrin peptid műgyantát az
1. példában leírtakhoz hasonló eljárás szerint állítjuk elő 1 mmol léptékben azzal a különbséggel, hogy most 1000 mg, 0,87 mmol/g mennyiségben szubsztituálható sasrin műgyantát (2-metoxi-4-alkoxi-benzil-alkohol műgyanta) (Bachem, Bubendorf, Switzerland, katalógusszám: D-1295) használunk fel hozzá, és hogy az első aminosavrészletnek a műgyantához való kapcsolásához felhasznált protokoll a gyártó által biztosított, 4dimetil-amino-piridinnel katalizált párosodása az előzetesen kialakuló szimmetrikus anhidridnek, majd ezt követően a műgyantán lévő reziduális -OH csoportok benzoesavanhidriddel való fedése.
A 3-((3-( 1-Aodc-4-imidazolil)-propionil)-D-TrpAla\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-propil-amin-peptidet elhasítjuk a (3-(l-Aodc-4-imidazolil)-propionil)-D-TrpAku|/(CH2NH)Trp-D-Phe-Sasrin 1000 mg mennyiségétől 20 órán keresztül tartó, szobahőmérsékleten való és 10 ml 1,3-diamino-propánnal történő keveréssel. A fáradt műgyantát kiszűrjük, és 5 ml DMF-fel extraháljuk.
HU 221 092 Β1
Az összeöntött szűrletet és extraktumot lassan 240 ml 1 M sósavhoz adjuk, állandó keverés közben. Ezután a reakcióelegyet desztillált vízzel 500 ml térfogatúra hígítjuk és szűrjük.
A nyerspeptidet szemipreparatív HPLC-vel tisztit- 5 juk 9 menetben, a szűrlet 9x1/9 részének az oszlopra való direkt injekciózásával, az 1. példában leírtakhoz hasonló eljárást alkalmazva. A hozam 73,53 mg.
A végtermék tulajdonságait az 1. példában leírtak szerint állapítjuk meg.
Az Al, illetve a B1 feltételek mellett a késleltetési időre 21,5 perc, illetve 22,7 perc adódik.
15-18. példa
Példa száma Peptid A következő számú példa eljárásához hasonlóan állítható elő RP-HPLC késleltetési idő
Al feltételrendszer (1. példa) B1 feltételrendszer (1. példa)
15. (2R)-(H-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-NH)-3-fenil-pro- pil-amin 6. 29,6 31,2
16. (2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-NH)-3-fe- nil-propil-amin 6. 29,4 31,1
17. H-D-Ala-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-D- Phev|/(CH2NII)l,ys-NH2 2. 30,4 31,7
18. (2R)-(H-Aib-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-NH)-3-fenil- propil-amin 6. 28,1 29,2
A találmány megfelelő vegyületeinek szerkezetét az alábbi ábrák mutatják:
3-((3-(4-Imidazolil)-propionil)-D-Trp-Ala-\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-propil-amin: 1. ábra (2S)-((2R)-((3-(4-Imidazolil)-propionil)-D-Phe-AlaTrp-NH)-3-fenil-propil-amino)-6-amino-hexanol: m ábra
H-Aib-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-D-Phe-tj/(CH2NH2): n ábra
19. példa
Összeállítunk egy patkány-hipofízissejteket felhasználó in vitro vizsgálatot a különböző GH-kiválasztást serkentő anyagok hatásának a tanulmányozására. Az összekevert hipofízissejt-tenyészetet elválasztjuk a hím patkányok elülső hipofízisétől, és 3 napig tenyésztjük.
A patkány-hipofízissejtek izolálására a Sartor, O. és munkatársai által leírt (Endocrinology 116, 1985, 952-957 oldal) eljárás egy módosított változatát használjuk. 250 g tömegű Sprague-Dawley hím patkányokat előbb dekapitálunk, majd kivesszük a hipofíziseket. A neurointermediális lebenyeket eltávolítjuk, és a maradék anyagot Gey-féle táptalajba tesszük, melyet kiegészítünk 0,25% glukózzal, 2xnem esszenciális aminosavval és 1% BSA-val (izolációs puffer). A mirigyeket kis darabokra vágjuk, és egy olyan lombikba tesszük, mely 3 ml izolációs puffért + 11,5 mg tripszint és 1000 pg DNase-t tartalmaz, és a rendszert 37 °C hőmérsékleten, 95% oxigéngáz alatt, 70/perc fordulatszám mellett 35 percen keresztül inkubáljuk. A fragmenteket szedimentációval háromszor mossuk az izolációs pufferben, majd egy Pasteur-pipettát használva különálló sejtekké választjuk. A sejteket eloszlatás után leszűrjük egy nejlonszűrőn (160 pm), hogy eltávolítsuk a digerálatlan szövetet. A sejteket háromszor mossuk a tripszin inhibitorral (0,75 mg/ml) kiegészített izolációs pufferrel, és újraszuszpendáljuk a tenyészet táptalajában (25 mM HEPES-sel, 4 mm glutaminnal, 0,75% nátrium-bikarbonáttal, 2,5% FCS-sel, 3% lószérummal, 10% patkányszérummal, 1 nM T3-mal és 40 pg/1 dexametazonnal kiegészített DMEM), 2xl05 sejt/ml koncentrációban. A sejteket mikrotiter tányérokra tesszük 200 pl/üreg mennyiségben, és 3 napon keresztül tenyésztjük 37 °C hőmérsékleten, 8% CO2 alatt.
A tenyésztési időszakot követően a sejteket kétszer mossuk stimulációs pufferben (1% BSA-val, 0,25% Dglukózzal és 25 mM HEPES-sel kiegészített HBSS), és egy órán keresztül preinkubáljuk. Ezután a puffért eltávolítjuk, és új stimulációs puffért (mely tartalmazza a találmány egyik vegyületét) adunk a rendszerhez, és a tányérokat 15 percen keresztül inkubáljuk 37 °C hőmérsékleten, 5% szén-dioxid alatt. A puffért összegyűjtjük, és megvizsgáljuk a patkány-növekedésihormon (rGH, rat growth hormone)-tartalom szempontjából egy szcintcillációs proximitási vizsgálattal (SPA, scintillation proximity assay) az alábbiak szerint (SPA, lényegében az US 4568649 számú szabadalomban, a Hart és Greenwalt által (Mól. Immunoi. 16, 1979, 265-269. oldal), vagy az Udenfriend és munkatársai által (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 1985, 8672-8676 oldal) leírtak szerint).
Az rGH-vizsgálatot olyan OptiPlates (96 üregű tányérok) felhasználásával végezzük, melyek alkalmasak egy Packards-TopCount (β-szcintcillációs számláló)berendezésben való közvetlen számlálásra.
A vizsgálati protokoll:
pl puffer pl minta (inkubált stimulációs puffer) pl 125I-rGH pl nyúl anti-rGH
HU 221 092 Β1 μΐ SPA-reagens (fluomikroszférákhoz kötött antinyúl antitest)
A tányérokat lezárjuk és egy tányérrázóra helyezzük 30 percre, majd 10 órán keresztül inkubáljuk, 10-15 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, majd számláljuk.
Az SPA-vizsgálatban az anti-GH-nyúl antitesthez (elsődleges antitest) kötött rGH-t egy fluomikroszférákhoz kötött másodlagos antitesttel reagáltatjuk (az SPA II. típus RAI Amershamból szerezhető be). Azok a radiológiailag megjelölt rGH-k, melyek az elsődleges antitesthez kötöttek, a fluomikroszférákhoz fognak kapcsolódni, melyek ennek hatására fényt fognak kibocsátani. Egy β-szcintcillációs számlálóban történő mérés lehetővé teszi a radiológiailag megjelölt rGH mennyiségének kiszámítását. A fluomikroszférákhoz kapcsolódó radiológiailag megjelölt rGH mennyisége csökkenni fog a minta rGH-tartalmának növekedésével.
Vegyület ECS0 (nM) F Lmax. (a GHRP-6%-a)
H-His-D-Trp-Ala-Trp-D- 2,0 100
Phe-Lys-NH2
H-D-Ala-D-2Nal-Ala- 1,8 85
Trp-D-Phe-Lys-NH2
H-His-D-Trp-Ala-Trp-D- 0,5 100
PheV(CH2NH)-Lys-NH2
H-D-Ala-D-2Nal-Gly- 0,8 75
Trp-D-Phe-Lys-NH2
(2S)-((3-(4-imidazolil)- propionil)-D-Phe-Ala- Trp-D-Phe\|/(CH2NH)-6- amino-hexanol 5 80
SZABADALMI IGÉNYPONTOK

Claims (15)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1.1 általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport egy vegyülete (I): A-B-C-D-E(-F)p azzal jellemezve, hogy p értéke 0 vagy 1;
    A jelentése imidazolil-(l-6 szénatomot tartalmazójalkánsav, imidazolil-(l-6 szénatomot tartalmazójalkénsav, amino-(l-6 szénatomot tartalmazójalkánsav vagy amino-(l-6 szénatomot tartalmazójalkénsav, vagy egy olyan L- vagy D-a-aminosav, mely a következő aminosavak egyike: H-His, H-Ala, H-D-Ala, Η-(βalanin), H-amino-izobutilsav, szarkozin vagy Gly;
    B jelentése D-Trp, D-2Nal vagy D-Phe;
    C jelentése Alá, Ser vagy Gly;
    D jelentése Trp, Phe, p-(2-tienil)-alanin vagy N-aralkilglicin;
    amikor p értéke 1, akkor E jelentése D-Phe, amikor p értéke 0, akkor E jelentése NH-CH(CH2-R3)-CO-R4 vagy -NH-CH(CH2-R3)-CH2-R4, ahol
    R3 jelentése fenilcsoport és
    R4 jelentése piperazinocsoport, morfolinocsoport, piperidinocsoport, -OH- csoport vagy
    -N(R5)R6- csoport, ahol R5 és R6 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy kis szénatomszámú alkilcsoport;
    amikor p értéke 1, akkor F jelentése -NH-CH(R1O)-(CH2)V-R7)-, ahol v értéke nulla, vagy egy 1 és 8 közé eső egész szám, és
    R7 jelentése imidazolilcsoport, piperazinocsoport, morfolinocsoport, piperidinocsoport vagy -N(R8)-R9, ahol R8 és R9 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy kis szénatomszámú alkilcsoport, vagy egy aminocsoport és egy hexapiranóz vagy egy, a II általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport hexapiranozil-hexapiranóz vegyületével alkotott, az Amadori-újrarendeződés termékeként kapott csoport, és
    R10 jelentése hidrogénatom, -COOH csoport,
    -CO-R11 csoport, -CH2-RH csoport vagy
    -CH2-OH csoport, ahol R jelentése piperazinocsoport, morfolinocsoport, piperidinocsoport vagy -N(R12)-R13, ahol R12 és R13 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy kis szénatomszámú alkilcsoport;
    azzal a feltétellel, hogy az A és B, B és C, C és D vagy D és E, és amikor p értéke 1, E és F részletek között legalább egy amidkötés amino-metilén-csoporttal van szubsztituálva, vagy, amikor p értéke 0, E jelentése -NH-CH(CH2-R3)-CH2-R4, vagy amikor p értéke 1, R10 jelentése CH2-RH.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy p értéke 1, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy A jelentése His, D-Ala vagy imidazolil-propionsav, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy B jelentése D-Trp vagy D-2Nal, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy C jelentése Alá, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  6. 6. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy D jelentése N-benzil-glicin vagy Trp, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  7. 7. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy E jelentése D-Phe, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  8. 8. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy v értéke 6 és R7 jelentése -NH2, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  9. 9. Az 1. igénypont szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy R10 jelentése -CONH2 vagy -CH2-OH, és a többi szubsztituens jelentése a fenti.
  10. 10. Az előző igénypontok bármelyike szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy az az alábbi vegyületcsoportba tartozik:
    H-Hist|/(CH2NH)D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2
    H-His-D-Trpv(CH2NH)-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2
    H-His-D-Trp-Alav(CH2NH)-Trp-D-Phe-Lys-NH2
    H-His-D-Trp-Ala-Trp\|/(CH2NH)-D-Phe-Lys-NH2
    HU 221 092 Β1
    H-His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe\f/(CH2NH)-Lys-NH2
    H-D-Ala-D-2Nal-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-LysNH2
    H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-D-Phe\|/(CH2NH)-LysNH2 (3-(4-imidazolil)-propionil)-D-2Nal-Ala-Trp-DPhev(CH2NH)Lys-OH (3-(4-imidazolil)-propionil)-D-2Nal-Ala-Trp-DPhe\|/(CH2NH)Lys-NH2 (3-(4-imidazolil)-akriloil)-D-2Nal-Ala-Trp-DPhev(CH2NH)Lys-NH2
    H-D-Ala-D-Phe-Ala-Trp-D-Phe\|/(CH2NH)LysNH2 (2R)-(H-D-Ala-D-Phe-Ala-Trp-NH)-3-fenil-propilamin (2S)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-PheNH)-6-amino-hexanol
    H-D-Ala-D-2Nal-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH2
    4-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-PheNH)-butil-amin (2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-NH)-3-fenil-propil-amin ((2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-Trp-NH)-3-fenil-propil-amino)-hexil-amin (2R)-(H-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-NH)-3-fenil-propil-amin (2R)-(H-D-Ala-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-NH)-3-fenil-propil-amin
    H-Aib-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-D-Phe\|/(CH2NH)Lys-NH2 (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)t|/(CH2NH)DPhe-Ala-Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe\|/(CH2NH)Ala-Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-AlaTrp\|/(CH2NH)D-Phe-NH)-6-amino-hexanol (2S)-(2R)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-AlaTrp-NH)-3-fenil-propil-amino)-6-amino-hexanol
    3-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Trp-Alav|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-propil-amin (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Phe-Ala-TrpD-Phet(/(CH2NH)NH)-6-amino-hexanol (2S)-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Trp-Ala\|/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-6-amino-hexanol
    3-((3-(4-imidazolil)-propionil)-D-Trp-Ala\)/(CH2NH)Trp-D-Phe-NH)-propil-amin
    H-D-Ala-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-D-Phe\|/(CH2NH)Lys-NH2
    H-Aib-D-2Nal-Ala-N-Bzl-Gly-D-Phe\|/(CH2NH2)
  11. 11. Gyógyszerkészítmények, azzal jellemezve, hogy aktív hatóanyagként az (I) általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeit vagy azok gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóit tartalmazzák, egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható hordozó vagy oldószer mellett.
  12. 12. A 11. igénypont szerinti, egységadagok formájában levő gyógyszerkészítmények, azzal jellemezve, hogy az (I) általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport vegyületeit vagy azok gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóit körülbelül 10-200 mg mennyiségben tartalmazzák.
  13. 13. Gyógyszerkészítmények, azzal jellemezve, hogy stimulálják a növekedési hormon hipofízisből való felszabadulását, és aktív hatóanyagként az (I) általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport egy vegyületét, vagy annak egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóját tartalmazzák egy gyógyszerészeti szempontból elfogadható hordozó vagy oldószer mellett.
  14. 14. (I) általános képlettel jellemezhető vegyületcsoport - ahol a szubsztituensek jelentése az előző igénypontokban meghatározott - vegyületeinek vagy azok gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóinak alkalmazása olyan gyógyszerkészítmények előállítására, melyek stimulálják a növekedési hormon hipofízisből való felszabadulását.
  15. 15. A 14. igénypont szerinti alkalmazás, melynek során olyan gyógyszerkészítményt állítunk elő, amely az (I) általános képlettel jellemezhető vegyületnek vagy gyógyszerészeti szempontból elfogadható sójának 0,0001 és 100 mg/testtömeg kg-nyi hatékony napi mennyiségét tartalmazza.
HU9601740A 1993-12-23 1994-12-22 Compounds with growth hormone releasing properties HU221092B1 (en)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK143893A DK143893D0 (hu) 1993-12-23 1993-12-23
DK7594 1994-01-17
DK78194 1994-06-30
DK116594 1994-10-07
PCT/DK1994/000486 WO1995017422A1 (en) 1993-12-23 1994-12-22 Compounds with growth hormone releasing properties

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9601740D0 HU9601740D0 (en) 1996-08-28
HUT74820A HUT74820A (en) 1997-02-28
HU221092B1 true HU221092B1 (en) 2002-08-28

Family

ID=27439242

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9601740A HU221092B1 (en) 1993-12-23 1994-12-22 Compounds with growth hormone releasing properties

Country Status (18)

Country Link
US (1) US5854211A (hu)
EP (1) EP0736038B1 (hu)
JP (1) JP3759748B2 (hu)
CN (1) CN1052730C (hu)
AT (1) ATE202785T1 (hu)
AU (1) AU683121B2 (hu)
CA (1) CA2179598A1 (hu)
CZ (1) CZ291382B6 (hu)
DE (1) DE69427650T2 (hu)
FI (1) FI962591A0 (hu)
HU (1) HU221092B1 (hu)
IL (1) IL112111A (hu)
NO (1) NO315611B1 (hu)
PL (1) PL181286B1 (hu)
RU (1) RU2167881C2 (hu)
TW (1) TW438810B (hu)
UA (1) UA45962C2 (hu)
WO (1) WO1995017422A1 (hu)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU684878B2 (en) * 1993-11-24 1998-01-08 Merck & Co., Inc. Compounds and the use thereof to promote the release of growth hormone(s)
JP3798024B2 (ja) 1995-12-13 2006-07-19 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 成長ホルモン分泌促進物質レセプターアッセイ
US6531314B1 (en) 1996-12-10 2003-03-11 Merck & Co., Inc. Growth hormone secretagogue receptor family
GB2308362A (en) * 1995-12-19 1997-06-25 Lilly Industries Ltd Pharmaceutical indole derivatives
US6121416A (en) 1997-04-04 2000-09-19 Genentech, Inc. Insulin-like growth factor agonist molecules
US6420518B1 (en) 1997-04-04 2002-07-16 Genetech, Inc. Insulin-like growth factor agonist molecules
AU7906998A (en) 1997-06-20 1999-01-04 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
ATE281467T1 (de) 1998-01-16 2004-11-15 Novo Nordisk As Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften
US6682908B1 (en) 1998-07-10 2004-01-27 Merck & Co., Inc. Mouse growth hormone secretagogue receptor
EP1097170A1 (en) 1998-07-13 2001-05-09 Merck & Co., Inc. Growth hormone secretagogue related receptors and nucleic acids
US6645726B1 (en) 1998-08-10 2003-11-11 Merck & Co., Inc. Canine growth hormone secretagogue receptor
DK1141014T3 (da) 1999-01-06 2005-04-11 Genentech Inc Insulinlignende vækstfaktor (IGF) i mutantvariant
KR100699404B1 (ko) 1999-02-18 2007-03-23 가켄 세야쿠 가부시키가이샤 성장 호르몬 분비촉진제로서의 신규 아미드 유도체
US6551998B1 (en) * 1999-06-22 2003-04-22 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Antimicrobial agents
US6551996B1 (en) * 1999-07-26 2003-04-22 Baylor College Of Medicine Super-active porcine growth hormone releasing hormone analog
DE60124080T2 (de) * 2000-03-23 2007-03-01 Elan Pharmaceuticals, Inc., San Francisco Verbindungen und verfahren zur behandlung der alzheimerschen krankheit
AU2001263215A1 (en) 2000-05-16 2001-11-26 Genentech Inc. Method for treating cartilage disorders
EP1159964B1 (en) 2000-05-31 2009-10-28 Pfizer Products Inc. Use of growth hormone secretagogues for stimulating gastrointestinal motility
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
ATE536186T1 (de) 2003-09-12 2011-12-15 Tercica Inc Verfahren zur behandlung von igf-1 (insulin-like growth factor 1)-mangel
WO2005027913A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and a growth hormone secretagogue
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
AU2008241532A1 (en) 2007-02-09 2008-10-30 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic ghrelin receptor modulators and methods of using the same
EP2155769B1 (en) 2007-05-04 2012-06-27 Katholieke Universiteit Leuven KU Leuven Research & Development Tissue degeneration protection
WO2013190520A2 (en) 2012-06-22 2013-12-27 The General Hospital Corporation Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions
US9119832B2 (en) 2014-02-05 2015-09-01 The Regents Of The University Of California Methods of treating mild brain injury
SG11201609050UA (en) 2014-05-30 2016-12-29 Pfizer Carbonitrile derivatives as selective androgen receptor modulators
WO2016129645A1 (ja) 2015-02-10 2016-08-18 富士フイルム株式会社 光学部材、光学素子、液晶表示装置および近接眼光学部材
US20170121385A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. Methods of treating neurodegenerative conditions
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4803261A (en) * 1986-06-27 1989-02-07 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Method for synthesizing a peptide containing a non-peptide
US5480869A (en) * 1990-01-09 1996-01-02 The Regents Of The University Of California Anti-inflammatory peptide analogs and treatment to inhibit vascular leakage in injured tissues
US5486505A (en) * 1990-07-24 1996-01-23 Polygen Holding Corporation Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity
IL98910A0 (en) * 1990-07-24 1992-07-15 Polygen Holding Corp Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity and pharmaceutical compositions containing them
US5663146A (en) * 1991-08-22 1997-09-02 Administrators Of The Tulane Educational Fund Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity
US5470753A (en) * 1992-09-03 1995-11-28 Selectide Corporation Peptide sequencing using mass spectrometry
SE9300012D0 (sv) * 1993-01-05 1993-01-05 Astra Ab New peptides
US5559209A (en) * 1993-02-18 1996-09-24 The General Hospital Corporation Regulator regions of G proteins
US5767085A (en) * 1993-12-23 1998-06-16 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties

Also Published As

Publication number Publication date
PL181286B1 (pl) 2001-07-31
AU683121B2 (en) 1997-10-30
HU9601740D0 (en) 1996-08-28
HUT74820A (en) 1997-02-28
CN1052730C (zh) 2000-05-24
IL112111A (en) 2000-07-16
UA45962C2 (uk) 2002-05-15
DE69427650T2 (de) 2001-11-22
RU2167881C2 (ru) 2001-05-27
TW438810B (en) 2001-06-07
FI962591A (fi) 1996-06-20
CZ291382B6 (cs) 2003-02-12
NO962664L (no) 1996-08-23
CA2179598A1 (en) 1995-06-29
AU1310695A (en) 1995-07-10
DE69427650D1 (de) 2001-08-09
JP3759748B2 (ja) 2006-03-29
PL315114A1 (en) 1996-10-14
CN1138334A (zh) 1996-12-18
JPH09506873A (ja) 1997-07-08
FI962591A0 (fi) 1996-06-20
WO1995017422A1 (en) 1995-06-29
EP0736038B1 (en) 2001-07-04
NO962664D0 (no) 1996-06-21
IL112111A0 (en) 1995-03-15
CZ183396A3 (en) 1997-02-12
EP0736038A1 (en) 1996-10-09
US5854211A (en) 1998-12-29
NO315611B1 (no) 2003-09-29
ATE202785T1 (de) 2001-07-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU221092B1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
EP0736039B1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
AU711104B2 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
JPH06503090A (ja) ノナペプチドのボンベシン拮抗薬
US5990084A (en) Compounds with growth hormone releasing properties
EP0910579A1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
EP0541654A1 (en) Bombesin antagonists
JP4173541B6 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee