HU217326B - Mutáns humán interleukin-4 proteinek, azokat tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás a proteinek előállítására - Google Patents

Mutáns humán interleukin-4 proteinek, azokat tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás a proteinek előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU217326B
HU217326B HU9401369A HU9401369A HU217326B HU 217326 B HU217326 B HU 217326B HU 9401369 A HU9401369 A HU 9401369A HU 9401369 A HU9401369 A HU 9401369A HU 217326 B HU217326 B HU 217326B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
human interleukin
replaced
amino acid
mutant human
region
Prior art date
Application number
HU9401369A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9401369D0 (en
HUT66826A (en
Inventor
Walter Sebald
Original Assignee
Bayer Ag.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=6444719&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU217326(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bayer Ag. filed Critical Bayer Ag.
Publication of HU9401369D0 publication Critical patent/HU9401369D0/hu
Publication of HUT66826A publication Critical patent/HUT66826A/hu
Publication of HU217326B publication Critical patent/HU217326B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/5406—IL-4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

A találmány szerinti gyógyászati készítmények műtáns hűmáninterleűkin–4 prőteineket tartalmaznak, amelyek antagőnisták vagyrészleges agőnisták. A találmány tárgyköréhez tartőznak még műtánshűmán interleűkin– 4 prőteinek, valamint az azők előállításáraszőlgáló eljárás. A találmány szerinti eljárás sőrán úgy járnak el,hőgy hűmán interleűkin–4 kódőlórégiójának érett tartőmányát hőrdőzó DNS-szakaszt tartalmazó cDNS-t célzőtt őligőnűkleőtid-műtagenezisnekalávetve a kívánt pőzíció(k)ban egy, a lehetséges természetesaminősavak közül egy kiválasztőtt, másik aminősavat iktatnak be, a hűmán interleűkin–4 kódőlórégiójának érett tartőmányát hőrdőzóDNS- szakaszt expressziós vektőrba viszik be, a kapőtt hibrid vektőrt E. cőli, élesztő- vagy egyébeűkariótasejtbe jűttatják be, és a műtáns hűmán interleűkin–4 prőteineket expresszálják, és adőttesetben izőlálják. ŕ

Description

A találmány olyan gyógyászati készítményekre vonatkozik, amelyek mutáns humán interleukin-4 proteineket tartalmaznak, amelyek antagonisták vagy részleges agonisták. A találmány tárgya továbbá mutáns humán interleukin-4 proteinek, valamint eljárás azok előállítására.
Napjainkban a lakosság széles rétegei szenvednek az allergia különböző válfajaitól. A növekvő légszennyezés és a környezetben diffúz módon jelen lévő, allergiát kiváltó anyagok növekvő száma alapján az várható, hogy a megbetegedések száma - különösen gyermekek esetén - a jövőben tovább növekszik. Ezért sürgető szükségszerűséggel merül fel olyan gyógyszerek kifejlesztésének igénye, amelyekkel az allergiás folyamatok lefolyásába be lehet avatkozni.
A humán interleukin-4 (hIL-4) a számos citokin egyike, amelyek nyirok- és csontvelősejtek osztódását, érését, túlélését és differenciálódását kiváltják és koordinálják [Arai, K. I., Lee F., Miyajima, A., Miyatake, S., Arai, N. és Yokota, T.: Annu. Rév. Biochem., 59, 783-836 (1990); Finkelman, F. D., Holmes, J., Katona,
I. M., Urban, J. F., Beckmann, Μ. P., Park, L. S., Sohooley, K. A., Coffman, R. L., Mosmann, T. R. és Paul, W. E.: Annu. Rév. Immunoi. 8, 303-333 (1990); Yokota, T., Arai, N., De Vries, J., Spits, H., Banchereau,
J. , Zlotnik, A., Rennick, D., Howard, M., Takebe, Y., Miyatake, S., Lee, F. és Arai, K. I.: Immunoi. Rév., 102, 137-187 (1988)]. A hIL-4 különösen az IgE által kiváltott immunreakcióban részes, és közvetlenül gyorsítja a timociták és az aktivált T-sejtek osztódását. Sikerült egy nagy affinitású, 140000 molekulatömegű IL-4receptorprotein azonosítása, amely cDNS-szekvenciája szerint 800 aminosavcsoportból áll [Idzerda, R. L., March, C. J., Mosley, B., Lyman, S. D., Vanden Bős, T., Gimpel, S. D., Din, W. S., Grabstein, K. H., Widmer, M. B„ Park, L. S., Cosman, D. és Beckmann, Μ. P.: J. Exp. Med., 171, 861-873 (1990)]. Ez a proteinreceptorok utóbbi időben ismertetett csoportjához tartozik, amelyet hematopoietinreceptor-szupercsalád elnevezéssel jelölnek [Cosman, D., Lyman, S. D., Idzerda, R. L., Beckmann, Μ. P., Park, L. S., Goodwin, R. G. és March, C. J.: Trends Biochem. Sci., 15, 265-270 (1990)].
Az érett IL-4 aminosavszekvenciája a klónozott cDNS [Yokota, T., Otsuka, T., Mosmann, T., Banchereau, J., DeFrance, T., Blanchard, D. De Vries, J. E., Lee, F. és Arai, K. I.: Proc. Natl. Acad. Sci, USA, 83, 5894-5898 (1986)] alapján tekintve 129 csoportból áll. A cDNS-t E. coli [Van Kimmenade, A., Bond, M. W., Schumacher, J. H., Laquoi, C. és Kastelein, R. A.: Eur. J. Biochem., 173,109-114 (1988); Jayaram, B., Bevos, R., Guisez, Y. és Fiers, W.: Gene, 79, 345-354 (1989)] és élesztő [Solari, R., Quint, D., Obray, H., McNamee, A., Bolton, E., Hissey, P., Champion, B., Zanders, E., Chaplin, A., Coomber, B., Watson, M., Roberts, B. és Weir, M.: Biochem. I, 262, 897-908 (1989)] sejtjeiben fejezték ki. Ezekből a forrásokból nagy biológiai aktivitású rekombináns IL-4-et kaphatunk.
Az IL-4 allergiás folyamatokban betöltött szerepe alapján remélhetjük, hogy olyan anyagok, amelyek az IL-4 által közvetített folyamatokat inhibitálják vagy a hIL-4-gyel konkurálnak, megszakítják a betegséget kiváltó reakciók láncolatát.
A fentiek alapján a találmány feladata terápiás szer rendelkezésre bocsátása, amelynek aktív alkotói a hIL-4 antagonisták vagy részleges agonisták.
A legutóbbi időben ismertté vált olyan monoklonális antitest, amely hIL-4-gyel szemben antagonista tulajdonságokat mutat [Coffman, R. L., De Vries, J. E. (Schering Biotech. Corp., USA), EP 327283 Al], Ez az antitest Fab-fragmentumot tartalmaz, és az antitestet ember-ember hibridóma-sejtvonal termeli. (Nem) glikozilált hIL-4-gyel szemben immunizált patkány lépsejtjeiből származó hibridóma-sejtvonal is termeli a hIL-4 monoklonális antitest génjét [Abrams, J. S., Chretien, I., Lee, F. D., Pearce, Μ. K. (Schering Biotech. Corp., USA) EP 314402 A2],
A fenti feladatot a találmány értelmében azáltal oldjuk meg, hogy terápiás készítményeket biztosítunk, amelyek mutáns hIL-4 proteineket tartalmaznak, amelyek antagonisták vagy részleges agonisták. A találmány szerinti terápiái készítményeknek az az előnye, hogy a génsebészet útján célzottan előállíthatok olyan proteinek, amelyek a vad típusú hIL-4-gyel való hasonlóságuk alapján a hIL-4-receptorokhoz való kötődés során azzal konkurálnak.
A találmány további feladata mutáns hIL-4 proteinek, valamint azok előállítására szolgáló eljárás kidolgozása.
A hIL-4 rekombináns proteinként (rhIL-4) géntechnológiai úton, így E. coli sejtjeiben előállítható. Az ennek során képződött protein szolubilizálható, természetes alakban visszaállítható és izolálható. Az rhIL-4 ekkor nagy fajlagos biológiai aktivitást mutat, amely meghatározható többek között aktivált T-sejtek DNS-szintézisének/osztódásának vagy aktivált B-sejtek CD23-kifejezésének mérése útján [B. Kruse és munkatársai: FEBS Lett., 286, 58-60 (1991); Kikutani, H. és munkatársai: Cell, 47, 657-665 (1986)].
A találmány értelmében olyan eljárást fejlesztettünk ki, amellyel a vad típusú hIL-4 olyan mutáns proteinjei állíthatók elő, amelyek hIL-4 antagonisták vagy részleges hIL-4 agonisták tulajdonságait mutatják. Különösen a hIL-4 antagonisták kínálnak lehetőséget a hIL-4 hatásának sajátos gátlására. A találmány szerinti eljárás során
- humán interleukin-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszt tartalmazó cDNS-t célzott oligonukleotid-mutagenezisnek alávetve a kívánt pozíció(k)ban egy, a lehetséges természetes aminosavak közül egy kiválasztott, másik aminosavat iktatunk be,
- a humán interleukin-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszt expressziós vektorba visszük be,
- a kapott hibrid-vektort E. coli, élesztő- vagy egyéb eukariótasejtbe juttatjuk be, és
- a mutáns humán interleukin-4 proteineket expresszáljuk és adott esetben izoláljuk.
A hIL-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszt tartalmazó vagy a hIL-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó cDNS a szakiro2
HU 217 326 Β dalom és az abban található hivatkozásokban leírtak szerint állítható elő [Yokota, T., Otsuka, T., Mosmann, T., Banchereau, J., DeFrance, T., Blanchard, D. De Vries, J. E., Lee, F. és Arai, K. I.: Proc. Natl. Acad. Sci, USA, 83, 5894-5898 (1986)]. A jelen összefüggésben a „hIL-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó cDNS” kifejezésen olyan cDNS-eket is értünk, amelyek a megnevezett irodalmi forrásban konkrétan megadott cDNS-ek lényegében azonos bázisszámú mutánsai, feltéve, hogy az ilyen hIL-4 mutánsok szintén antagonisták vagy részleges antagonisták.
A hIL-4 kódolórégiójának tartományát hordozó DNS-szakasz számozását tekintve a leírásban szakirodalomban ismertetett eljárást követünk [Garr, C. és munkatársai: Biochemistry, 30,1515-1523 (1991)].
A hIL-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó cDNS-t előállíthatunk úgy, hogy géntechnológiai úton előállított cDNS-ből (így a British BioTechnology Ltd., Oxford, Anglia termékéből) kivágunk egy EcoRV/BamHI-ffagmentumot. A DNS-ffagmentumot szintetikus oligonukleotidok, így IL-4 első négy aminosavkodonját és ezenkívül a startmetionin kodonját tartalmazó 5’-CATGCACAAGTGCGAT és 5’ATCGCACTTGTG oligonukleotidok hozzáadása mellett expressziós vektorba visszük be, így az RTS pRC 109 expressziós vektor Ncol- és BamHI-vágási helyei közé [Weigel, U., Meyer, M. és Sebald, W.: Eur. J. Biochem., 180, 295-300 (1989)].
Az adott helyre irányuló mutagenezist lefolytathatjuk a szakirodalomban ismertetett módon [Kramer és munkatársai: Nucleic Acids Research, 12, 9441-9455 (1984); Cell, 38, 879-887 (1984); Boehringer-Mannheim-prospektus, Biochemicals fór Molecular Biology (1987) 35 és Weigel, U., Meyer, M. és Sebald, W.: Eur. J. Biochem., 180, 295-300 (1989)]. A mutagenezishez alkalmazott oligonukleotid a megváltoztatandó bázis(ok)hoz képest az(ok) előtt és után további 6-10 bázist tartalmazhat.
A szakember számára a hIL-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakasz vektorból történő kivágása, expressziós vektorrá történő átalakítása, E. coli sejtekbe történő bejuttatása, valamint a mutáns hIL-4 protein expresszálása és adott esetben annak elválasztása ismert [McCarthy és munkatársai: Gene, 41, 201-206 (1986); Kató és munkatársai: Biochem. Biophys. Rés. Commun, 130, 692-699 (1985)], lehetségesek továbbá a fenti eljárások módosított változatai is [Weigel, U., Meyer, M. és Sebald, W.: Eur. J. Biochem., 180, 295-300 (1989)].
A találmány szerinti eljárás sajátos változatában a célzott oligonukleotid-mutagenezis lefolytatása előtt iniciátor metionint kódoló DNS-szakaszt építünk be a hIL-4 érett tartományát kódoló DNS-szakaszt tartalmazó cDNS-be.
A találmány szerinti eljárás egy további sajátos változatában a mutáns hIL-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszt NcoI/BamHI-fragmentumként vágjuk ki a mutáns cDNS-ből.
Az expresszáláshoz előnyösen hőmérséklet útján szabályzott expressziós vektort, így [upstream (a leolvasás irányában előbbre álló) λ-promotertől és polilinkertől mentes] pILA502-t és/vagy gazdaszervezetként járatos E. coli törzset, így JM103 (recA ) típusú törzset használunk. További alkalmas expresszálási eljárások a Pharmacia cégtől („Prokarióta génfüziós vektorok” néven) beszerezhetők. A JM103 típusú E. coli törzs szintén beszerezhető a Pharmacia cégtől.
Egy további kiviteli alaknak megfelelően a találmány vad típusú mutáns hIL-4, amelyben a 124-es pozícióban Tyr Asp-ra van kicserélve.
A következőkben a találmányt példákkal szemléltetjük.
1. példa
Kramer és munkatársai előzőekben idézett módszerével irányított oligonukleotid-mutagenezist folytattunk le hIL-4 kódolórégiójának érett tartományát és egy iniciátor metionint kódoló cDNS-sel. A (380 típusú, Applied Biosystems gyártmányú) DNS-szintetizáló berendezéssel előállított szintetikus oligonukleotid a kicserélendő nukleotidot megelőzően és azt követően 6-6 bázist tartalmazott. A kicserélendő hely a C-terminális (110-estől a 129-esig terjedő pozíciók közötti) valószínűleg Cí-helikális tartományban volt. A művelet során Tyr helyett Gly épült be. A kapott mutációt egyszálú bakteriofág-DNS szekvenciaanalízise útján igazoltuk. A mutáns cDNS-t NcoI/BamHI-ffagmentumként a kétszálú vírus-DNS-ből vágtuk ki, és hőmérséklet útján szabályzott olyan expressziós vektorral kombináltuk, amely pILA502-nek felelt meg azzal az eltéréssel, hogy az upstream λ-promoter és a polilinker hiányzott. Gazdaszervezetként a JM103 típusú E. coli törzs recA-származékát használtuk. A mutáció igazolására az integrált ML-4-cDNS-t megszekvenáltuk. Ezt követően a törzset a mutáns expresszálására használtuk.
Expresszió és tisztítás után megmutatkozott, hogy a (Y124G) mutáns változatlan affinitással kötődik a hIL-4 receptorhoz. Aktivált perifériális T-sejteken a kiváltott legnagyobb mértékű osztódás azonban a vad típusú hIL-4 által elérhető osztódásnak csak 10-20%át éri el. Ez azt mutatja, hogy az Y124G mutáns részleges antagonistaként hat.
2. példa
Az 1. példában ismertetett módon jártunk el azzal az eltéréssel, hogy a 124-es pozícióban Tyr helyett Asp-t fejeztünk ki. A tisztított Y124D mutáns még 1 pmol/l koncentráció esetén sem mutat aktivitást aktivált perifériális T-sejtekkel szemben. A vad típusú hIL-4 aktivitását azonban 600 pmol gátlási állandóval jellemezhető módon gátolja. Ez jelzi, hogy az Y124D mutáns antagonista tulajdonságokat mutat. A CD23 indukálása terén az Y124D mutáns csekély mértékű maradék aktivitást gyakorol aktivált B-sejtekre. A legnagyobb elérhető indukció azonban csak 5%-át teszi ki a vad típusú hIL-4 által elérhető indukciónak. A vad típusú hIL-4 aktivitását ebben a rendszerben az Y124D mutáns Kj=800 pmol értékű gátlási állandóval gátolja. Az Y124D mutáns a B-sejt-rendszerben nagyon gyenge agonista tulajdonságokat is mutat.
HU 217 326 Β
3. példa
Az 1. példában ismertetett módon jártunk el azzal az eltéréssel, hogy a 121-es pozícióban Arg helyett Asp-t fejeztünk ki. Az elválasztott mutáns változatlan kötődést mutatott a hIL-4 receptorhoz. Aktivált perifériális T-sejteken a kiváltott legnagyobb mértékű osztódás azonban a vad típusú hIL-4 által elérhető osztódásnak csak 30%-át éri el. Ez azt mutatja, hogy az R 121 D mutáns részleges agonista tulajdonságokat mutat.
4. példa
Az 1. példában ismertetett módon jártunk el azzal az eltéréssel, hogy a 125-ös pozícióban Ser helyett Asp-t fejeztünk ki. Az elválasztott S 125 D mutáns változatlan affinitással kötődött a hIL-4 receptorhoz. Aktivált perifériális T-sejteken a kiváltott legnagyobb mértékű osztódás azonban a vad típusú hIL-4 által elérhető osztódásnak csak 35%-át éri el.

Claims (12)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Gyógyászati készítmények, amelyek mutáns humán interleukin-4 proteineket tartalmaznak, amelyek antagonisták vagy részleges agonisták, azzal jellemezve, hogy a 121-es, 124-es vagy 125-ös pozíciók legalább egyikében az, ott a vad típusban természetesen előforduló, aminosav(ak) egy lehetséges másik természetes aminosav(ak)ra ki van(nak) cserélve.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti gyógyászati készítmények, azzal jellemezve, hogy mutáns humán interleukin-4 proteinek 124-es pozíciójában az ott természetesen előforduló tirozin ki van cserélve egy másik lehetséges természetes aminosavra.
  3. 3. A 2. igénypont szerinti gyógyászati készítmények, azzal jellemezve, hogy a 124-es pozícióban a tirozin aszparaginsavra vagy glicinre van kicserélve.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti gyógyászati készítmények, azzal jellemezve, hogy mutáns humán interleukin-4 proteinek 121-es pozíciójában az, ott természetesen előforduló, arginin ki van cserélve egy másik lehetséges természetes aminosavra.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti gyógyászati készítmények, azzal jellemezve, hogy a 121-es pozícióban az arginin aszparaginsavra vagy glicinre van kicserélve.
  6. 6. Mutáns humán interleukin-4 proteinek, amelyek antagonisták vagy részleges agonisták, azzal jellemezve, hogy a 121-es vagy 125-ös pozíciók legalább egyikében és adott esetben a 124-es pozícióban, az ott természetesen előforduló aminosav(ak) egy lehetséges másik természetes aminosav(ak)ra ki van(nak) cserélve.
  7. 7. Mutáns humán interleukin-4 proteinek, azzal jellemezve, hogy a 124-es pozícióban az ott természetesen előforduló tirozin egy másik lehetséges természetes, aszparaginsavtól eltérő aminosavra van kicserélve.
  8. 8. A 7. igénypont szerinti mutáns humán interleukin-4 protein, azzal jellemezve, hogy a tirozin glicinre van kicserélve.
  9. 9. Eljárás a 6-8. igénypontok bármelyike szerinti mutáns humán interleukin-4 protein előállítására, azzal jellemezve, hogy
    - humán interleukin-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszt tartalmazó cDNS-t célzott oligonukleotid-mutagenezisnek alávetve a kívánt pozíció(k)ban egy, a lehetséges természetes aminosavak közül egy kiválasztott, másik aminosavat iktatunk be,
    - a humán interleukin-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszt expressziós vektorba visszük be,
    - a kapott hibrid-vektort E. coli, élesztő- vagy egyéb eukariótasejtbe juttatjuk be, és
    - a mutáns humán interleukin-4 proteineket expresszáljuk, és adott esetben izoláljuk.
  10. 10. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy humán interleukin-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszba a célzott oligonukleotid-mutagenezist megelőzően iniciátor metionint kódoló DNS-szakaszt iktatunk be.
  11. 11. A 9. vagy 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a mutáns humán interleukin-4 kódolórégiójának érett tartományát hordozó DNS-szakaszt NcoI/BamHI-fragmentumként vágjuk ki a vektorból.
  12. 12. A 9-11. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hőmérséklet útján szabályzott expressziós vektort, így (upstream λ-promotertől és polilinkertől mentes) pILA 502-t és/vagy gazdaszervezetként JM103 (recA~) típusú módosított E. coli törzset használunk.
HU9401369A 1991-11-13 1992-11-13 Mutáns humán interleukin-4 proteinek, azokat tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás a proteinek előállítására HU217326B (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4137333A DE4137333A1 (de) 1991-11-13 1991-11-13 Therapeutische mittel, die antagonisten oder partielle agonisten des humanen interleukin 4 sind oder diese enthalten, hil-4-mutantenproteine sowie vefahren zu deren herstellung

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9401369D0 HU9401369D0 (en) 1994-08-29
HUT66826A HUT66826A (en) 1995-01-30
HU217326B true HU217326B (hu) 1999-12-28

Family

ID=6444719

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9401369A HU217326B (hu) 1991-11-13 1992-11-13 Mutáns humán interleukin-4 proteinek, azokat tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás a proteinek előállítására

Country Status (16)

Country Link
US (1) US5723118A (hu)
EP (1) EP0613499B2 (hu)
JP (2) JP3470970B2 (hu)
KR (1) KR100276410B1 (hu)
AT (1) ATE163196T1 (hu)
AU (1) AU671960B2 (hu)
CA (1) CA2123315C (hu)
CZ (1) CZ283467B6 (hu)
DE (2) DE4137333A1 (hu)
DK (1) DK0613499T4 (hu)
ES (1) ES2112340T5 (hu)
GR (1) GR3026600T3 (hu)
HU (1) HU217326B (hu)
NO (1) NO312707B1 (hu)
SK (1) SK280114B6 (hu)
WO (1) WO1993010235A1 (hu)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4423131A1 (de) * 1994-07-01 1996-01-04 Bayer Ag Neue hIL-4-Mutantenproteine als Antagonisten oder partielle Agonisten des humanen Interleukin 4
MX9700764A (es) * 1994-07-29 1997-05-31 Smithkline Beecham Plc Compuestos novedosos.
GB9415379D0 (en) * 1994-07-29 1994-09-21 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
US5986059A (en) * 1996-06-14 1999-11-16 Bayer Corporation T-cell selective interleukin-4 agonists
US6335426B1 (en) 1996-06-14 2002-01-01 Bayer Corporation T-cell selective interleukin-4 agonists
RU2235728C2 (ru) * 1996-06-14 2004-09-10 Байер Корпорэйшн Мутеин человеческого il-4, полинуклеотидная молекула, вектор, линия sf9, трансформированная вектором, способ выбора мутеина, фармацевтическая композиция для активирования т-клеток, способ лечения пациента, страдающего заболеванием, поддающимся лечению il-4
MY124565A (en) * 1996-07-19 2006-06-30 Bayer Corp High-affinity interleukin-4-muteins
US6180108B1 (en) * 1998-12-10 2001-01-30 Bayer Corporation Vectors having terminal repeat sequence of Epstein-Barr virus
DE10022258A1 (de) 2000-05-08 2001-11-15 Bayer Ag Reinigung von Proteineinschlusskörpern durch Querstrom-Mikrofiltration
DK2990420T3 (en) 2000-05-26 2017-04-03 Immunex Corp USE OF INTERLEUKIN-4 RECEPTOR ANTIBODIES AND COMPOSITIONS THEREOF
GB0105360D0 (en) * 2001-03-03 2001-04-18 Glaxo Group Ltd Chimaeric immunogens
EP1314739A1 (en) * 2001-11-22 2003-05-28 Bayer Ag Process for renaturation of recombinant, disulfide containing proteins at high protein concentrations in the presence of amines
EP1382614A1 (en) * 2002-07-15 2004-01-21 Bayer HealthCare AG Process for the purification of interleukin-4 and its muteins
US7635754B2 (en) * 2004-09-22 2009-12-22 Aerovance, Inc. Interleukin-9 and interleukin-4 chimeric antagonist muteins and methods of using same
US20070009479A1 (en) * 2005-06-17 2007-01-11 Aerovance, Inc. Methods for treating dermatitis using mutant human IL-4 compositions
CN101529253A (zh) * 2006-06-21 2009-09-09 阿珀吉尼科斯有限公司 Il-4和/或il-10细胞因子在人癌症中的差异表达
AU2007271349A1 (en) * 2006-07-06 2008-01-10 Apogenix Gmbh Human IL-4 muteins in combination with chemotherapeutics or pro-apoptotic agents in cancer therapy
EP2596802A1 (en) 2011-11-23 2013-05-29 PLS-Design GmbH Pharmaceutical composition for treatment of allergic reactions
EP2674168A1 (en) 2012-06-14 2013-12-18 PLS-Design GmbH Modulation of effector T cell responses by local depletion of complement component C3

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5041381A (en) * 1986-07-03 1991-08-20 Schering Corporation Monoclonal antibodies against human interleukin-4 and hybridomas producing the same
US5017691A (en) * 1986-07-03 1991-05-21 Schering Corporation Mammalian interleukin-4
JPH03500050A (ja) * 1988-02-02 1991-01-10 シェリング・バイオテック・コーポレーション 免疫グロブリンｅの応答を減少させる方法
US5188827A (en) * 1989-12-18 1993-02-23 Schering Corporation Use of interleukin-4- for lowering blood-cholesterol levels

Also Published As

Publication number Publication date
JP3470970B2 (ja) 2003-11-25
DE59209196D1 (de) 1998-03-19
ATE163196T1 (de) 1998-02-15
KR100276410B1 (ko) 2000-12-15
NO941681L (no) 1994-05-06
WO1993010235A1 (de) 1993-05-27
DK0613499T4 (da) 2005-04-18
JPH07501522A (ja) 1995-02-16
GR3026600T3 (en) 1998-07-31
CZ283467B6 (cs) 1998-04-15
ES2112340T5 (es) 2005-10-16
DE4137333A1 (de) 1993-05-19
US5723118A (en) 1998-03-03
EP0613499B1 (de) 1998-02-11
AU2928292A (en) 1993-06-15
CA2123315C (en) 2003-06-17
SK55494A3 (en) 1994-12-07
CZ118594A3 (en) 1994-12-15
DK0613499T3 (da) 1998-09-23
NO941681D0 (no) 1994-05-06
CA2123315A1 (en) 1993-05-27
HU9401369D0 (en) 1994-08-29
EP0613499A1 (de) 1994-09-07
AU671960B2 (en) 1996-09-19
HUT66826A (en) 1995-01-30
ES2112340T3 (es) 1998-04-01
JP2003174894A (ja) 2003-06-24
NO312707B1 (no) 2002-06-24
SK280114B6 (sk) 1999-08-06
EP0613499B2 (de) 2005-03-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU217326B (hu) Mutáns humán interleukin-4 proteinek, azokat tartalmazó gyógyászati készítmények, valamint eljárás a proteinek előállítására
Kishimoto et al. Molecular regulation of B lymphocyte response
JP4423313B2 (ja) ナチュラルキラー刺激因子
AU638430B2 (en) Natural killer stimulatory factor
WO1994004680A9 (en) Human interleukin-13
WO1994004680A1 (en) Human interleukin-13
CZ25697A3 (en) Novel compounds
US7122633B2 (en) Natural killer stimulatory factor
US7026445B2 (en) Human SDF-5 protein and compositions
Takahashi et al. Structural comparison of murine T-cell (B151K12)-derived T-cell-replacing factor (IL-5) with rIL-5: dimer formation is essential for the expression of biological activity
Lillquist et al. Structure-activity studies of human IL-1 beta with mature and truncated proteins expressed in Escherichia coli.
Mahanty et al. The biology of interleukin-5 and its receptor
US6537781B1 (en) Methods and compositions concerning canine interleukin 5
JP3652365B6 (ja) ナチュラルキラー刺激因子
CA2348431A1 (en) Interleukin-1 homolog zil1a4
Allison The interleukin‐1 family of molecules
IE990006A1 (en) Cytotoxic Lymphocyte Maturation Factor

Legal Events

Date Code Title Description
GB9A Succession in title

Owner name: BAYER SCHERING PHARMA AG, DE

Free format text: FORMER OWNER(S): BAYER AG., DE