HU203771B

HU203771B - Process for producing renine-inhibiting dipeptide-carbamoyl-derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components

Info

Publication number: HU203771B
Application number: HU895948A
Authority: HU
Inventors: Wolfgang Rueger; Hansjoerg Urbach; Dieter Ruppert; Bernward Schoelkens
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1988-11-19
Filing date: 1989-11-17
Publication date: 1991-09-30
Also published as: DK579089D0; PT92330A; JPH02180898A; ZA898784B; DE3839126A1; DK579089A; IL92348A0; NO894569D0; HU895948D0; AU4479889A; FI895462A0; EP0370382A2; HUT53122A; NO894569L; KR900007868A; EP0370382A3; AU616071B2

Description

A találmány tárgya eljárás reningátló, új dipeptid-karbamoil-származékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. A172 346, 172 347,189 203,229 667,230 266,255 082,273 893 és 274 259 számú európai szabadalmi leírások dipeptidszármazékokat és ezek reningátló hatását ismertetik.

Olyan új dipeptid-karbamoil-származékokat találtunk, amelyek in vitro és in vivő körülmények között hatékonyan gátolják a renin-enzimet

A találmány tárgya tehát eljárás (I) általános képletű dipeptid-karbamoil-származékok és fiziológiailag alkalmazható sói előállítására, a képletben R¹ jelentése (Π) általános képletű csoport, ahol R* jelentése 1-7 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben karboxilcsoporttal vagy aminocsoporttal szubsztituálva lehet,

A jelentése N-terminálisan R*-csoporton keresztül és

C-terminálisan B csoporton keresztül kapcsolódó fenil-alanin, β-2-tienil-alanin vagy O-metil-tirozin,

B jelentése N-terminálisan A csoporthoz és C-terminálisan -NH-CH-(R²)-csoporthoz kapcsolódó hisztidin, norvalin vagy aszparagin,

R² jelentése cikloalkilrészében 6-7 szénatomos és alkilrészében 1-4 szénatomos cikloalkil-alkil-csoport,

R³ jelentése hidrogénatom,

R⁴ jelentése (ΙΠ) általános képletű-csoport, ahol X jelentése közvetlen kötés, p és q értéke együtt 1,2,3 vagy 4,

R³ jelentése piridilcsoport, ahol az 1 jelű szénatom S-konfiguráciőban és a 2 jelű szénatom R- vagy S-konfigurációban áll.

A 0 255 082 számú európai iratban reningátló hatású di- és tripeptideket ismertetnek. A vegyületek megjelölésére alkalmazott általános képlet értelmezése igen nagy számú vegyületet ölel fel, ezzel szemben a leírásban konkrétan csak 31 pepiidet említenek meg, a többire csak általános ismertetést adnak. A jelen bejelentésben igényelt vegyületek mutatnak némi átfedést a fenti iratban megadott általános képlet értelmezésével, de eltérnek az ott konkrétan megemlített peptidektől. Az igényelt vegyületek előnye, hogy értékes farmakológiái tulajdonságokkal rendelkeznek (lásd a leírásban megadott IDjo-értékeket).

A 0 255 082 számú európai iratban megadott általános kitanítás szakember számára nem volt elegendő az igényelt, értékes farmakológiai hatással rendelkező vegyületek kidolgozásához.

Az alkilcsoport lehet egyenes vagy elágazó szénláncú.

Az (I) általános képletben előforduló A és B jelentésébe eső aminosavak amidkötéssel kapcsolódnak egymáshoz, ahol az aminosavak térállása L-konfigurációjú.

Az (I) általános képletű vegyületek sóin fiziológiailag alkalmazható vagy nemtoxikus sókat értjük.

Ezek közé tartoznak például a savas csoportot, például karboxilcsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek alkálifémekkel vagy alkáliföldfémekkel, így nátriummal, káliummal, magnéziummal vagy kal2 ciummal, valamint fiziológiailag alkalmazható szerves aminokkal, például trietil-aminnal vagy tri(2-hidroxietil)-aminnal képzett sói.

A bázikus-csoportot, például aminocsoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek savaddíciós sót képezhetnek szervetlen savakkal, például sósawal, kénsavval vagy foszforsavval, valamint szerves karbonsavakkal vagy szulfonsavakkal, például ecetsavval, citromsavval, benzoesavval, maleinsavval, fumársavval, borkősavval és p-toluol-szulfonsavval.

Előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag alkalmazható sói, amelyek képletében R¹ jelentése (Π) általános képletű csoport,

R* jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, 1-6 szénatomos karboxi-alkil-csoport vagy 1-6 szénatomos amino-alkil-csoport,

A jelentése N-terminálisan R¹-csoporthoz és C-terminálisan B csoporthoz kapcsolódó, így fenil-alanin, β-2- tíenil-alanín vagy O-metil-tirozin,

B jelentése N-terminálisan A csoporthoz és C-terminálisan -NH-CH(R²)-csoporthoz kapcsolódó hisztidin, aszparagin vagy norvalin,

R² jelentése ciklohexil-metil-csoport,

R³ jelentése hidrogénatom,

R⁴ jelentése (ΙΠ) általános képletű csoport, ahol X jelentése közvetlen kötés, p értéke 0, q értéke 1,2,3 vagy 4,

R³ jelentése 2-piridil-csoport

Az (I) általános képletű dipeptid-karbamoil-származékok és fiziológiailag alkalmazható sói a találmány értelmében előállíthatok, ha egy az A és/vagy B aminosavakon kívánt esetben védett (IV) általános képletű vegyületet, a képletben A, B, R², R³ és R⁴ jelentése a fenti,

R⁷ jelentése könnyen lehasítható védőcsoport, például metoxi-metil-csoport, metiltio-metil-csoport, benzil-oxi-metil-csoport, tetrahidro-piranil-csoport, terc-butil-csoport, allilcsoport, benzilcsoport, szubsztituált benzilcsoport, benzhidrilcsoport, tritilcsoport, trimetil-szilil-csoport, terc-butil-dimetilszilil-csoport, acetilcsoport, pivaloilcsoport, benzoilcsoport, metil-oxi-karbonil-csoport, etil-oxikarbonil-csoport vagy benzil-oxi-karbonil-csoport, (V) általános képletű izocianáttal reagáltatunk, a képletben

R* jelentése a fenti, megfelelő szerves oldószerben, például benzolban, toluolban, klór-benzolban, alifás szénhidrogénben, alifás klórozott szénhidrogénben, dietil-éterben, tetrahidrofuránban, dioxánban, acetonban, acetonitrüben, dimetil-formamidban, dimetil-szulfoxidban vagy oldószer távollétében adott esetben Lewis-sav vagy Lewisbázis jelenlétében, például tercier-amin, előnyösen trietil-amin, l,4-diaza-biciklo[2.2.2]oktán, ciklohexü-dimetü-amin, benzil-dimetü-amin, 4-metil-morfolin, tetrametil-guanidin vagy 4-dimetil-amino-piridin jelenlétében -80 ’C és az oldószer forráspontja közötti, előnyösen -30 és +80 ’C közötti hőmérsékleten, és az R⁷védőcsoportot kívánt esetben eltávolítjuk, vagy

HU 203 771 Β

b) egy fenti (IV) általános képletű vegyületet egymás után (VI) általános képletű szénsavszánnazékkal, a képletben

R⁸ és R⁹ jelentése egymástól függetlenül halogénatom, 1-7 szénatomos alkoxicsoport, 6-12 szénatomos aril-oxi-csoport, 1-7 szénatomos alkil-tiocsoport, 6-12 szénatomos aril-tio- csoport vagy Hét- vagy Het-O-csoport, ahol

Hét jelentése mono- vagy biciklusos, heterociklusos csoport, vagy

R⁸ és R⁹ a karbonilcsoporttal együtt (a) vagy (b) általános képletű mono- vagy biciklusos, heterociklusos gyűrűt képez, előnyösen foszgénnel, Ι,Γ-karbonil-diimldazollal,

Ι,Γ-karbonil- di(l,2,4)-triazollal, di(N-szukcinimidil)-karbonáttal, di(l-benzotriazolil)-karbonáttal, NJQ’-karbonil-bisz(2-metil-imidazol)-lal vagy 4,6-difenil-tieno[3,4-d]-l,3-dioxol-2-on-5,5-dioxiddal (SteglichReagens), majd (VII) általános képletű aminnal reagáltatunk, a képletben

R* jelentése a fenti, inért szerves oldószer, előnyösen toluol, metilénklorid, kloroform, tetrahidrofurán, dimetH-formamid vagy acetonitril jelenlétében, adott esetben segédbázis, például kálium-karbonát, nátrium-karbonát, trietilamin, piridin, l,5-diaza-biciklo[5.4.0]undec-5-én vagy l,5-diaza-biciklo[4.3.0]non-5-én, előnyösen piridin jelenlétében -80 ’C és az oldószer forráspontja közötti, előnyösen -80 és +50 ’C közötti hőmérsékleten és az R⁷ védőcsoportot, valamint az A.és B aminosavak ideiglenes védelmére kívánt esetben bevitt védőcsoportokat lehasítjuk, és kívánt esetben a kapott vegyületet fiziológiailag alkalmazható sóvá alakítjuk.

Az (I) általános képletű vegyületek fiziológiailag alkalmazható sói előállításához az (a) vagy (b) eljárással kapott vegyületet oldószerben, például alkoholban, előnyösen etanolban oldjuk. Az oldathoz a bázikus, illetve savas csoportokra számolva mólekvivalens mennyiségű savat, illetve bázist adunk 30 percen keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldószert forgó vákuum bepárlóban eltávolítjuk.

A (IV) általános képletű vegyületek előállíthatók, ha (VIII) általános képletű vegyületről, a képletben R², R³, R\ A és B jelentése a fenti,

R¹⁰ jelentése könnyen lehasítható aminovédőcsoport, előnyösen terc-butil-oxi-karbonil-csoport vagy benzil-oxi-karbonil-csoport, a védőcsoportot a szokásos módon, például savas vagy lúgos hidrolízissel vagy hidrogenolízissel eltávolítjuk és a hidroxilcsoportot adott esetben előzetesen vagy utólagosan R⁷-csoporttal védjük, amelyhez a hidroxilcsoportot megfelelő reagenssel, például metoximetil-kloriddal, metil-tio-metil-kloriddal, benzil-oximetil-kloriddal, dihidropiránnal, izobuténnel, allil-bromlddal, benzil-bromiddal, difenil-diazometánnal, tritilkloriddal, trimetil-szilil-kloriddal, terc-butil-dimetilszilil-klorlddal, ecetsavanhidriddel, pivaloil- kloriddal, benzoil-kloriddal, klór-hangyasav-metil-észtenel, klórhangyasav-etil-észterrel vagy klór-hangyasav-benzilészterrel reagáltatjuk.

Az (V), (VI) és (VII) általános képletű vegyületek az Irodalomból ismertek és a kereskedelmi forgalomban kaphatók. A (VHI) általános képletű vegyületeket a 255 082 számú európai szabadalmi leírás ismerteti.

A 255 082 számú európai szabadalmi leírásból ismert továbbá egy eljárás az (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelynek során végállású karboxilcsoportot tartalmazó fragmenst vagy ennek reakcióképes származékát szabad amlnocsoportot tartalmazó megfelelő fragmenssel kapcsolják, adott esetben a további funkciós csoportok ideiglenes védelmére bevezetett védőcsoportokat eltávolítják és a kapott vegyületet kívánt esetben fiziológiailag alkalmazható sóvá alakítják.

A találmány szerinti eljárás azonban több szempontból előnyösen különbözik a szokásos eljárástól:

A) Az ismert eljárásnál a találmány szerintivel ellentétben az R'-csoport bevitelére két további reakciólépés szükséges, amelynek során az A-OH-általános képletű amlnosav, illetve az A-B-OH-általános képletű dipeptid C-terminális végét ideiglenes védőcsoporttalvédi, majd ezt lehasitja, A találmány szerinti eljárásnál az R'-csoportot a dipeptid védőcsoport nélküli N-terminális végéhez kapcsoljuk az utolsó lépésben valamely izocianát vagy amin segítségével, amelyek számos változatban nagy mennyiségben és könnyen hozzáférhetőek.

B) A további amlnocsoportot tartalmazó R'-csopertot a találmány szerinti eljárás során R’-NHí-általáhÓs képletű amin [(VH) általános képlet] formájában védőcsoport nélkül közvetlenül visszük be (lásd a 13. példát) az ismert eljárással ellentétben, ahol a további amlnocsoportot először védőcsoporttal védik, majd az utóbbit eltávolítják.

C) A találmány szerinti eljárás lehetővé teszi a mellékreakciók veszélyének csökkentését, mivel az utolsó lépésben nincs szükség kapcsolási segédanyag alkalmazására és a C-terminális karboxilcsoport aktiválására.

Az új (I) általános képletű dipeptid-karbamoil-származékok erős enzimgátló hatással rendelkeznek, elsősorban a természetes renin- enzimet gátolják.

A renin az aszpartil-proteázok osztályába tartozó proteolitikus enzim, amely különböző ingerek (nagy térfogatú ürítés, nátriumhiány, β-receptor stimuláció) hatására a vese juxtaglomeruláris sejtjeiből á vérkeringésbe kerül. Ott a májból kivált angiotenziogénről lehasítja az angiotenzin I dekapeptideL Ezt az „angiotensin converting enzyme” (ACE) angiotenzin Π enzimmé alakítja. Az angiotenzin Π fontos szereppel bír a vérnyomás szabályozásában, amivel a véredények összehúzásával közvetlenül növeli a vérnyomást. Emellett stimulálja az aldoszteronnak a mellékvesékből történő kiválasztását és így növeli a nátriumkiválasztás gátlásával az extracelluláris folyadék térfogatát, amely a maga részéről szintén a vérnyomás növekedését fokozza. A renin enzimatikus aktivitásának gátlói csökkentik az angiotenzin I képzését, amelynek következménye az angiotenzin Π termelés csökkenése. A reningátlók vér3

HU 203 771 Β nyomáscsökkentő hatásának közvetlen oka tehát a fenti aktív peptid hormon koncentrációjának csökkentése.

A reningátlók hatékonyságát in vitro vizsgálattal ellenőrizhetjük. Ennek során az angiotenzin I képződésének csökkenését különböző rendszerekben (humán plazma, tisztított humán renin) mérjük.

A vizsgálat alapelve, hogy például a humán plazmát, amely mind renint mind angiotenzinogént tartalmaz, 37 ’C hőmérsékleten a vizsgálandó vegyülettel inkubáljuk. Ennek során az angiotenzinogénből a renin hatására angiotenzin 1 válik ki, amely a szokásos radioimmuno assay vizsgálattal mérhető. A reningátlók ezt az angiotenzin felszabadulást gátolják.

A plazma előállításához önkéntes jelentkezőktől vért veszünk (mintegy 0,5 liter fejenként, Bluko-Entnahmegerát dér Fa. ASID Bonz und Sons, Unterschleissheim, NSZK) és jéghűtés közben részben légtelenített üvegekben felfogjuk. A véralvadás meggátlásához 10 mmól/1 végkoncentrációban EDTA-t adagolunk, majd a mintát 3500 fordulat/perc mellett 0-4 ’C közötti hőmérsékleten 15 percen keresztül centrifugáljuk (HS 4 rotor, Sorvall), amelyet kívánt esetben megismételünk, majd a plazmát pipettával óvatosan eltávolítjuk és megfelelő adagokban -30 ’C hőmérsékleten fagyasztjuk. A vizsgálatokhoz csak a megfelelő renin-aktivitást mutató plazmát alkalmazzuk. Az alacsony renin-aktivitást mutató plazmát megfelelő kezeléssel (-4 ’C hőmérsékleten tárolva 3 napon keresztül) aktiváljuk, amelynek során a proreninből renin képződik.

A vizsgálatok megvalósításához az angiotenzin I mennyiségét Renin-Maia készlettel (Serono Diagnostics S. A., Coinsins, Svájc) határozzuk meg. A plazma inkubálását az ott megadott útmutató szerint végezzük. Az inkubáláshoz alkalmazott oldatok:

1000 μΐ plazma (0-4 ’C hőmérsékleten felolvasztva)

100 μΐ foszfátpuffer (pH-7,4) (adalékanyag lfr⁴ mól/1 ramiprilát) pl PMSF-oldat pl 0,1 tömeg%-os Genapol PFIC μΐ dimetil-szulfoxid, illetve tesztkészítmény.

A tesztkészítményt ΙΟ² mól/1 koncentrációban 100 tömeg%-os dimetil-szulfoxidban oldjuk és dimetil-szulfoxiddal a kívánt koncentrációra hígítjuk. Az inkubáláshoz alkalmazott oldat legfeljebb 1 tömeg% dimetil-szulfoxidot tartalmazhat

Az oldatokat jégen hűtve összekeverjük és egy órán keresztül vízfürdőben 37 ’C hőmérsékleten inkubáljuk. Egy további vizsgálati elegyből, amely inhibitort nem tartalmaz, inkubálás nélkül összesen hat mintát (egyenként 100 μΐ) veszünk a kiinduló angiotenzin I tartalom meghatározására.

A vizsgálati készítmények koncentrációját úgy választjuk meg, hogy mintegy 10-90%-os enzimgátlásnak feleljen meg (legalább öt különböző koncentráció). Az inkubálás végén minden elegyből háromszor 100 μΐ mintát veszünk egy előre lehűtött Eppendorf-edényben, majd száraz jégen fagyasztjuk és mintegy -25 ’C hőmérsékleten tároljuk az angiotenzin I mennyiségének meghatározásáig (három mérésből számolunk átlagértéket).

Az angiotenzin I radioimmuno assay vizsgálatához pontosan betartjuk a Renin-Maia készlet előírásait. A koncentrációgőrbét 0,2-25,0 ng/ml angiotenzin I koncentrációnál vesszük fel. Az alap angiotenzin I tartalmat minden mérési eredményből levonjuk. A plazma renin-aktivitást (PRA) az angiotenzin I-re vonatkoztatott ng/ml’óra mértékegységben adjuk meg. A vizsgált hatóanyag jelenlétében mért PRA-értéket inhibitor nélküli minta eredményére, mint 100%-ra vonatkoztatjuk és ez alapján százalékos maradék aktivitást adunk meg. A maradék aktivitást a vizsgált hatóanyag koncentrációjával szemben ábrázolva meghatározzuk az ICjo értéket

Az új (I) általános képletű vegyületek in vitro körülmények között az alábbi IC» értékeket mutatják:

Hatóanyag példa száma	ICjo(pmóVl)
1.	2,0
' 2.	0,62
3.	0,9
4.	0,38
5.	1,0
6.	0,4
7.	0,26
8.	>10
9.	65
10.	>1
11.	0,9
12.	55
13.	0,34
14.	8
29.	0,65

A reningátlók sószegény állatokban csökkentik a vérnyomást. Mivel az emberi renint megkülönböztetik a más fajoktól származó renintől, az in vivő vizsgálatokhoz főemlősök, például Rhesus-majom alkalmaz-hatók. A főemlős renin és a humán renin szekvenciájában messzemenően homológ. Furoszemid i. v. injekció formában történő beadásával endogén renin kiválasztást váltunk ki. A vizsgált hatóanyagot folyamatos infúzió formájában adagoljuk és a vérnyomásra és a szívfrekvenciára gyakorolt hatását mérjük. Az új (I) általános képletű hatóanyagok mintegy 0,1-5 mg/kg i. v. dózisban hatékonyak gasztroszkópon keresztül intraduodenálisan adagolva a dózishatár mintegy 1- 50 mg/kg. Az új (I) általános képletű vegyületek tehát felhasználhatók a magas vérnyomás csökkentésére és szívelégtelenség kezelésére.

A találmány szerint előállított (I) általános képletű vegyületet elsősorban gyógyszerkészítmény formájában alkalmazzuk főemlősöknél, elsősorban embereknél.

A gyógyszerkészítmények a hatékony mennyiségű (I) általános képletű vegyület mellett szervetlen vagy szerves gyógyászatilag alkalmazható hordozóanyagot tartalmazhatnak. Az adagolás alkalmazható intranazálisan, intravénásán, szubkután vagy orálisan. A ható-41

HU 203 771 Β anyag mennyisége a kezelt fajtól, a testtömegtől, a kortól és az adagolás módjától függ.

A gyógyszerkészítményeket a találmány értelmében a szokásos oldási, keverési, granuláló és drazsírozó eljárásokkal állíthatjuk elő.

Orális adagoláshoz a hatóanyagot szokásos adalékanyagokkal, így hordozóanyagokkal, stabilizátorokkal, vagy inért hígítóanyagokkal keverjük, és a szokásos módon alkalmas formára alakítjuk, így tablettává, drazsévá, kapszulává, vizes, alkoholos vagy olajos szuszpenzióvá vagy vizes, alkoholos vagy olajos oldattá. Inért hordozóanyagként alkalmazható gumiarábikum, magnézium-oxid, magnézium-karbonát, kálium-foszfát, tejcukor, glükóz, magnézium-sztearil-fumarát vagy keményítő, előnyösen kukoricakeményitő. A készítmény lehet száraz vagy nedves granulátum is. Olajos hordozóanyagként vagy oldószerként például növényi vagy állati olajokat, így napraforgóolajat vagy csukamájolajat használunk.

Szubkután vagy intrvénás adagoláshoz a hatóanyagot vagy azok fiziológiailag alkalmazható sóit kívánt esetben alkalmas anyagokkal, így oldásközvetítőkkel, emulgeátorokkal vagy további segédanyagokkal oldattá, szuszpenzióvá vagy emulzióvá alakítjuk. Oldószerként alkalmazhatunk vizet, fiziológiás konyhasó oldatot, alkoholt, például etanolt, propándiolt vagy glicerint, valamint cukoroldatot, így glükóz- vagy mannitoldatot, vagy ezek keverékét.

A példákban a következő rövidítéseket alkalmazzuk:

AcOH ecetsav

Boc terc-butoxi-kaibonil-csoport

DCI Desorption Chemical Ionisation (kémiai ionizálás deszorpciója)

DNP 2,4-dinitro-fenil-csoport

El Electron Impact (elektronbecsapódás)

EtOH etanol

FAB Fást atom bombardment (gyors atombombázás)

M molekulacsúcs

MeOH metanol

MPLC közepes nyomású oszlopkromatográfia

MS tömegspektrum

Thi β-2-tienil-alanin

THF tetrahidrofurán.

Az aminosavak megjelölésére a peptidkémiában szokásos hárombetűs kódot [Eur. J. Biochem. 138, 937, (1984)] alkalmazzuk. Ellenkező értelmű megjelölés hiányában a megadott aminosav L-konfigurációjú.

A találmány szerinti eljárást közelebbről az alábbi példákkal világítjuk meg anélkül, hogy az oltalmi kör a példákra korlátozódna. A példákban az Rf-érték meghatározása során adszorbensként Kieselgel 60 réteget alkalmaztunk.

1. példa

I-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(etil-amino-karbonil-Phe-His)-amino] -3S-hexanol la)H-His(DNP)-OH

0,42 g (1 mmól) Boc-His(DNP)-OH 5 ml dimetoxi-etánban felvett oldatához 0-5 *C hőmérsékleten 4 ml sósavval telített dimetoxi- etánt csepegtetünk és 1 órán keresztül 0-5 *C hőmérsékleten, majd 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk és a maradékot toluolban felveszszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük, így 0,5 g cím szerinti vegyületet kapunk hidroklorid formájában.

Rf (metilén-klorid/MeOH/AcOH/víz 70:30:1:1)—0,16 lb) Boc-Phe-His(DNP)-OH

0,5 g (1 mmól) H-His(DNP)-OH-hidroklorid 12,5 ml 0,25 n nátrium-hidrogén-karbonát-oldatban felvett elegyéhez szobahőmérsékleten 0,362 g (1 mmól) Boc-Phehidroxi-szukcinimid-észter 5 ml etanolban és 5 ml THFben felvett oldatát adagoljuk. A reakcióelegyet 3 napon keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd 0,83 g citromsavval elegyítjük, amelynek hatására a cím szerinti vegyület olajos formában kiválik A terméket metilénkloriddal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes nátriumszulfáton szárítjuk, bepároljuk és a maradékot kevés etilacetáttal elegyítjük Diizopropil hozzáadásával kicsapjuk majd szűrjük a cím szerinti vegyületet Kitermelés 0,47 g (83%).

Rf (metilén-klorid/MeOH 7:3)-0,43,

MS (FAB): 569 (M+l).

lc) 2S-Amino-]-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol

214 mg (0,513 mól) 3-Box-4S-ciklohexil-metil-2,2- ΐ

-dimetil-5-[3-(2-piridil)-propil]-oxazolidin 10 ml dimetoxi-metánban felvett elegyéhez jeges hűtés közben 5 ml sósavval telített dimetoxi- etánt csepegtetünk és az elegyet egy órán keresztül 0 *C hőmérsékleten, majd 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután vákuumban bepároljuk, a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felveszszük. így 179 mg cím szerinti vegyületet kapunk dihidroklorid formájában.

ld) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[Boc-Plte-His(DNP)]-amino}-3S-hexanol

1,5 g (3,18 mmól) 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidroklorid [le) példa] és 1,8 g (3,18 mmól) Boc-Phe-His(DNP)-OH (lb) példa] ml abszolút dimetil-formamidban felvett oldatához 0,59 g (6,36 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-hidrátot adunk, jégfürdőn mintegy 4 ‘C hőmérsékletre hűtjük, majd ezen a hőmérsékleten egymás után 2,44 ml (19,1 mmól) N-etil-morfolint és 0,65 g (3,18 mól) diciklohexil-karbodiimidet adunk. A reakcióelegyet egy órán keresztül jeges fürdőn, majd 7 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. Ezután újabb 0,9 g (1,59 mmól) Boc-Phe-His(DNP)-OH-t, 0,28 g (3,18 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-hidrátot és 0,32 g (1,58 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá és további 10 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A csapadékot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot etil-acetátban oldjuk, telített nátrium-hidrogén- karbonát-oldattal, vízzel és

HU 203 771 Β telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (3,8 g) közepes nyomású oszlopkromatográfiával (Kieselgel-en metilén-klorid/metanol 98:2, 95:5, 9:1 eleggyel) tisztítjuk. így 1,8 g (68%) cím szerinti vegyületet kapunk,

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,46,

MS (FAB): 827 (M+l).

le) l-CikIohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[H-Phe-ffis(DNP)]-amino}-3S-hexanol mg l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-[Boc-Phe-His(DNP)]-amino}-3S-hexanolt 0-5 ’C hőmérsékleten 2 ml jéghideg trifluor- ecetsavval elegyítünk, és két órán keresztül ezen a hőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot toluolban felvesszük, ismét bepároljuk és toluolban ismét felvesszük. Kitermelés 83 mg cím szerinti vegyület bisz(trifluor-acetát) formájában.

lf) 1 -Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[etil-amino-karbonil-Phe-His(DNP)]-amino}-3S-hexanol mg (0,087 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[H-Phe-His(DNP)]-amino}-3S-hexanolt [le) példa] 2 ml abszolút dimetil-formamidban oldunk, majd az oldathoz 0,0365 ml (0,26 mmól) trietil-amint és 0,01 ml (0,124 mmól) etil-izocianátot adunk, a reakcióelegyet egy éjszakán keresztül állni hagyjuk, majd azonos mennyiségű további 0,01 ml (0,124 mmól) etil-izocianáttal elegyítjük, egy nap elteltével újabb 0,05 ml (0,62 mmól) etil-izocianátot adunk hozzá és 9 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután jeges vízre öntjük, etil-acetáttal extraháljuk és az egyesített extraktumot telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel és telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (84 mg) MPLC segítségével Kieselgel-en metilén-klorid/MeOH 98:2,95:5 és 9:1 eleggyel tisztítjuk.

Kitermelés: 48,6 mg (70%) cím szerinti vegyület.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,29,

MS (FAB): 798 (M+l).

lg) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(etil-amino· •karbonil-Phe-His)- amino]-3S-hexanol

48,6 mg (0,061 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[etil-amino-karbonil-Phe-His(DNP)]-amino}-3S-hexanolt 5 ml acetonitrilben 0,1 ml (1 mmól) tiofenollal elegyítünk és 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután vákuumban bepároljuk és a nyersterméket MPLC segítségével Kieselgelen metilén-klorid/MeOH 98:2, 95:5 és 9:1 eleggyel tisztítjuk. így 12,3 mg cím szerinti vegyületet kapunk.

MS (FAB): 632 (M+l).

2. példa

-Cikloh£xil-6-(2-piridil)-2S-[N-(izopropil-aminokarbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

2a) Boc-Phe-Nva-OMe

15,0 g (0,056 mól) Boc-Phe-OH és 9,4 g (0,056 mól) Nva-OMe-hidroklorid 250 ml abszolút metilén-klorid6 bán felvett oldatához jeges hűtés közben először 38,6 ml (0,28 mól) abszolút trietil-amint, majd 36,4 ml propánfoszfonsavanhkbidet (50 tömeg%-os, metilén-kloridban) csepegtetünk. Areakcióelegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk A hidrolízishez jeges vízre öntjük, 2 órán keresztül intenzíven keverjük, a szerves fázist elválasztjuk és 10 tömeg%-os citromsavoldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Kitermelés 20,8 g (98%) cím szerinti vegyület

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,64,

MS (El): 378 (M).

2b) Boc-Phe-Nva-OH

20,1 g (0,053 mól) Boc-Phe-Nva-OMe [2a) példa] 30 ml vízben és 30 ml dioxánban felvett szuszpenziójához szobahőmérsékleten 2,5 g (0,106 mól) lítium-hidroxidot adunk és három órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet 10 tömeg%-os nátrium-hidrogén-szulfát-oldattal megsavanyítjuk, a terméket szűrjük és diizopropil-éterrel eldőrzsöljük.

Kitermelés: 19,1 g (98%)

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,18.

MS (FAB): 365 (M+l).

2c) 1 -Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(Boc-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

1,7 g (3,36 mmól) 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidrokloridból [le) példa] és 1,22 g (3,36 mmól) Boc-Phe-Nva-OH-ból [2b) példa] az ld) példával analóg módon 0,8 g cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,53,

MS (FAB): 623 (M+l).

2d) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(H-Phe-Nva)-amino] -3S-hexanol mg l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(Boc-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanolból [2c) példa] az la) példával analóg módon 92 mg cím szerinti vegyületet kapunk dihidroklorid formájában.

2e) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(izopropil-amino-karbonil- Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol 92 mg (0,155 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(H-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol [2d) példa] 5 ml abszolút dimetil-formamidban felvett oldatát szobahőmérsékleten egymás után 0,104 ml (0,73 mmól) trietil-aminnal és 0,019 ml (0,17 mmól) izopropil-izocianáttal elegyítjük. A reakcióelegyet egy hétvégén keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk, vákuumban bepároljuk, a maradékot etil-acetátban felvesszük, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel és telített nátrium-kloridoldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (98 mg) MPLC segítségével Kieselgel-en metilén-klorid/metanol 95:5 eleggyel tisztítjuk. így 13,3 mg cím szerinti vegyületet kapunk

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,39,

MS (FAB): 608 (M+l).

HU 203 771 Β

3. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(2,2-dimetil-propil•amino-karbonil-Phe-Nva)-amina]-3S-hexanol

126 mg (0,32 mmól) di(benzotriazolil)karbonát 10 ml abszolút metilén-kloridban és 0,026 ml (0,32 mmól) piridinben felvett elegyéhez -75 és -70 *C közötti hőmérsékleten 84 mg (0,16 mmól) l-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(H-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol [2d) példa, a hidroklorid-sóból nátrium-hidrpgén-karbonáttal felszabadítva] 10 ml abszolút metilén-kloridban felvett oldatát csepegtetjük és az oldatot 1 órán keresztül ezen a hőmérsékleten keveijük. Ezután hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, 3 órán keresztül keveijük és ismét -75 *C hőmérsékletre hűtjük. Hozzáadunk 0,0955 ml (0,8 mmól) 22-dimetil-l-propil-amint, 2 órán keresztül ezen a hőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot etil-acetátban felvesszük, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel és telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (144 mg) MPLC-vel Kieselgel-en metilén-klorid/MeOH 100:0, 98:2 és 95:5 eleggyel tisztítjuk

Kitermelés: 39 mg (39%) cím szerinti vegyület

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,32,

MS (FAB)-636 (M+l).

A megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazva az 13. példában leírt módon állíthatók elő a következő 4-14. példa szerinti vegyületek:

4. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(etil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino] -3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,42

MS (FAB )-594 (M+l).

5. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-His)-amino]-3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-025

MS (FAB)-660 (M+l).

6. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-052

MS (FAB)-622 (M+l).

7. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Thi-Nva)-amino]-3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,39

MS (FAB)-628 (M+l).

8. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[terc-butil-amino-karbonil-Tyr(OMe)-Nva]-amino}-3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,38

MS (FAB)-652 (M+l).

9. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3R-hexanol Rf (toluol/EtOH 9:1)-0,33 MS (FAB)-622 (M+l).

10. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-HisfaminoJ-SR-hexanol Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,32 MS (FAB)-660 (M+l).

11. példa

-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(etil-amino-karbonil-Phe-His)-amino] -3R-hexanol MS (FAB)-632 (M+l).

12. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(izopropil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3R-hexanol Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,46 MS (FAB)-608 (M+l).

13. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(2-amino-2-metil-propil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 7:3)-0,09 MS (FAB)-637 (M+l).

14. példa

-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-( terc-butil-amino-karbonil-Phe-Asn)-amino]-3S-hexanol Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,24 MS (FAB)-637 (M+l).

15. példa

-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-( etil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

15a) N-(Etil-amino-karbonil)-Phe-OH

3,37 g (10 mmól) Phe-p-toluol-szulfonátot 10 ml abszolút tetrahidrofuránban oldva szobahőmérsékleten

2,4 ml (12 mmól) frissen desztillált hexametíl-diszilazánnal elegyítünk és 2 órán keresztül keverjük. A szuszpenzióhoz 0,97 ml (12 mmól) etil-izocianátot adunk és egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk A csapadékot leszűrjük, a szűrletet jeges fürdőn lehűtjük, ismét szűrjük, bepároljuk és a maradékot vízzel eldörzsöljük A csapadékot szűrjük és foszfor-pentoxidon szárítjuk. Kitermelés 1,7 g (72%).

Rf (metilén-klorid/MeOH/víz/etil-acetát 70:30:1:1)-0,68

MS (DCI)-237 (M+l).

15b)N-(Etil-karbonil-amino)-Phe-Nva-OMe 12 g (5,08 mól) 15a) példa szerinti N-(etil-amino-karbonil)-Phe-OH és 0,85 g (5,08 mól) L-Nva-OMe-hidroklorid 30 ml abszolút metilén-kloridban felvett elegyéhez jeges hűtés közben egymás után 351 ml (25,4 mmól) abszolút trietil-amint, majd 3,30 ml propán-foszforsavan7

HU 203 771 Β hidridet (50 tömeg%-os, metilén-kloridban) adunk, az elegyet 6 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. A hidrolízishez az elegyet jeges vízre öntjük, a szerves fázist elválasztjuk, háromszor 100 ml 10 tömeg%-os citromsavoldattal, telített nátrium-hidrogén-kaibonát-oldattal és vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot kevés hideg diizopropil-éteiben eldörzsöljük, szűrjük és vákuumban szárítjuk.

Kitermelés; 1,5 g (84%)

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,49.

15c)N-(Etil-amino-karbonil)-Phe-Nva-OH

1.5 g (4,29 mmól) 15b) példa szerinti N-(etil-amino-karbonil)-Phe-Nva-OMe 8 ml vízben és 8 ml dioxánban felvett elegyéhez szobahőmérsékleten 0,2 g lítiumhidroxidot adunk és 2 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet 10 tömeg%-os nátrium- hidrogén-szulfáttal megsavanyítjuk, a csapadékot szűrjük, diizopropiléterrel eldörzsöljük és szárítjuk.

Kitermelés: 1,3 g

Rf (toluol/etanol 8:2)-0,02

MS (DCI)-336 (M+l).

15d) 2S-Amino-1 -ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidroklorid

214 mg (0,513 mmól) 3-Boc-4S-ciklohexil-metil-2,2-dimetil-5-[3-(2-piridil)-propiI]-oxazolidm 10 ml dimetoxi-metánban felvett elegyéhez jeges fürdőn 5 ml sósavval telített dimetoxi-metánt csepegtetünk és 1 órán keresztül 0 ’C hőmérsékleten, majd 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, toluolban felvesszük, bepároljuk, toluolban ismét felvesszük és bepároljuk.

Kitermelés: 179 mg.

15e) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(etil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

160.5 mg (0,513 mmól) 15d) példa szerinti 2S-amino-1 -ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidro-kloridot és 172 mg (0,513 mmól) 15c) példa szerinti N-(etil-amino-karbonil)-Phe-Nva-OH-t 2 ml abszolút dimetilformamidban oldunk, szobahőmérsékleten hozzáadunk 273mg (1,03 mmól) 1-hidroxi-benzo-triazolt és 0 ‘C hőmérsékletre hűtjük. Ezen a hőmérsékleten először 0,65 ml (5,13 mmól) N-etil-morfolinnal, majd 106 mg (0,513 mmól) diciklohexil-karbodiimiddel elegyítjük, és 5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután további 100 mg (0,298 mmól) N-(etiI-ammo-karbonil)-Phe-Nva-OH-t adunk hozzá és egy éjszakán keresztül állni hagyjuk. A diciklohexil-kaibamidot kiszűrjük, a szűrletet vízre öntjük és etil-acetáttal többször extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített nátrium-hidrogén-kaibonát-oldattal, vízzel és nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk és a nyersterméket (335 mg) MPLC-vel Kieselgel-en metilén-klorid/metanol 100:0, 98:2, 95:5 és 9:1 eleggyel tisztítjuk, így 98 mg (32%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,41

MS (FAB)-594 (M+l).

16. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-His)-amino]-3S-hexanol

16a)N-(terc-Butil-amino-karbonil)-Phe-OH

A 15a) példával analóg módon 3,37 L-fenil-alanin-p-toluol-szulfonátból és terc-butil-izocianátból 1,6 g (60%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH/víz/etil-acetát 70:30:1:1)-0,76

MS (DCI)-265 (M+l).

16b) 2S-{N-[Boc-His(DNP)]-amino}-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S- hexanol

1,9 g Boc-His(DNP)-OH, 0,36 ml piridin és 0,62 ml N-etil-piperidin 50 ml metilén-kloridban felvett elegyéhez -5 ‘C hőmérsékleten 0,55 ml pivaloil-kloridot csepegtetünk. Az elegyet 10 percen kersztül -5 ’C hőmérsékleten, majd 10 percen keresztül +10 ’C hőmérsékleten keverjük. Ezután ismét -5 ’C hőmérsékletre hűtjük és hozzáadunk 1,3 g 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanolt [15d) példa, dihidrokloridból nátrium-karbonáttal felszabadítva] 20 ml metilén-kloridos oldat formájában. Az elegyet 1 órán keresztül ezen a hőmérsékleten tartjuk, majd 16 órán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután 50 ml telített nátrium-karbonát-oldattal elegyítjük és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat vízmentes nátriumszufláton szárítjuk, bepároljuk és Kieselgel-en etil-acetát/MeOH 10:1 eleggyel kromatográfiásan tisztítjuk.

Rf (etil-acetát/MeOH 10:1)-0,25

MS (FAB)-680 (M+l).

16c)2S-[N-His(DNP)-amino]-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidroklorid

170 mg 16b) példa szerinti 2S-(N-[Boc-His(DNP)]-amino}-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol 100 ml dimetoxi-etánban felvett elegyéhez 0-5 ’C hőmérsékleten 26 ml sósavval telített dimetoxi-etánt csepegtetünk, 1 órán keresztül jeges fürdőn, majd 4 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután bepároljuk, toluollal elegyítjük, bepároljuk, toluollal ismét elegyítjük és bepároljuk.

Kitermelés: 167 mg cím szerinti vegyület.

löd) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[terc-butil-amino-karbonil-Phe-His(DNP)]-amino}-3S-hexanol

167 mg (0,256 mmól) 16c) példa szerinti 2S-[N-His(DNP)-amino]-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol -dihidrokloridból és 68 mg (0,256 mmól) 16a) példa szerinti N-terc-butil-amino-karbonil-Phe-OH-ből a 15e) példával analóg módon kapjuk a cím szerinti vegyületet.

Kitermelés: 83,7 mg (40%)

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,44

MS (FAB)-826 (M+l).

16e) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-His)-amino]-3S-hexanol mg (0,1 mmól) 16d) példa szerinti 1-ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-(N-[terc-butil-amino-karbonil-Phe-81

HU 203 771 Β

His(DNP)]-amino)-3S-hexanol 5 ml acetonitrilben felvett oldatát 0,1 ml (1 mmól) tiofenollal elegyítjük és 6 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután vákuumon bepároljuk és a maradékot MPLC-vel Kieselgel-en metilén-klorid/MeOH 100:0, 98:2, 95:5 és 5 9:1 eleggyel tisztítjuk.

Kitermelés: 51 mg (77%) cím szerinti vegyület.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,26 MS (FAB)-660 (M+l).

17. példa l-CHdohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-aminokarbonil-Phe-Nva)-amino]-3S~hexanol

17a) N-terc-Butil-amino-karbonil-Phe-Nva-OMe

264 mg (1 mmól) N-terc-butil-amino-karbonil-Phe- 15

OH-ból [16a) példa] és 167 mg (1 mmól) Nva-OMehidrokloridból a 15b) példában leírt módon 0,35 g (93%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,69

MS (DCD-378 (M+l). 20

17b) N-terc-Butil-amino-karbonil-Phe-Nva-OH 100 mg (0,265 mmól) 17a) példa szerinti N-terc-butilamino-kaibonil-Phe-Nva-OMe-ből a 15c) példával analóg módon 90 mg (93%) cím szerinti vegyületet kapunk. 25

MS (DCI)-364 (M+l).

17c) l-Ciklohexil-6-(2-piridil-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

166 mg (0529 mmól) I5d) példa szerinti 2S-amino-l- 30 ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanol-dihidrokloridból és 192 mg (0529 mmól) 15e) példa szerinti N-terc-butilamino-kaibonil-Phe-Nva-OH-ból a 15e) példa szerinti eljárással 121 mg (37%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-052 35

MS (FAB)-622 (M+l).

18. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Thi- Nva)~amino]-3S-hexanol 40

18a) N-terc-Butil-amino-karbonil-Thi-OH 15 g (4,82 mmól) L-tienil-alanin-p-tolul-szulfonátból és 0,68 ml (5,78 mmól) terc-butil-izocianátból a 15a) példában leüt módon 0,7 g cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH/AcOH/víz 70:30:1:1)-0,9 45 MS (FAB)-271 (M+l).

18b) N-terc-Butil-amino-karbonil-The-Nva-OMe 0,7 g (2,6 mmól) 18a) példa szerinti N-terc-butilamino-karbonil-Thi-OH-ból és 0,44 g (2,6 mmól) 50 Nva-OMe-hidrokloridból a 15b) példa szerinti eljárással 0,8 g (80%) cím szerinti vegyületet kapunk.

MS (FAB )-384 (M+l).

18c) N-terc-Butil-amino-karbonil-Thi-Nva-OH 55 0,8 g (2,1 mmól) 18b) példa szerinti N-terc-butilamino-karbonil-Thi-Nva-OMe-ből a 15c) példában leírt módon 053 g (69%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,08

MS (FAB)-369 (M+l). 60

18d)l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Thi-Nva)-amino]-3S-hexanol mg (0,25 mmól) 18c) példa szerinti N-terc-butilamino-kafbonil-Thi-Nva-OH-ból és 87 mg (0,25 mmól) 15d) példa szerinti 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)3S-hexanol-dihidrokloridból a 15e) példában leírt módon 59,6 mg (38%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,39

MS (FAB)-628 (M+l).

19. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridU)-2S-(N-[terc-butil-amino•karbonil-Tyr(OMe)-Nva]-amino}-3S-hexanol

19a)N-terc-Butil-amino-karbonil-Tyr(OMe)-OH

3,0 g (8,16 mmól) L-(0-metil-tirozin)-p-toluol-szulfonátból és 1,15 ml (9,79 mmól) terc-butil-izocianátból a 15a) példában lein módon 1,7 g (70%) cím szerinti vegyületet kapunk.

MS (FAB )-295 (M+l).

19b) N-terc-Butil-amino-karbonil-Tyr(OMe)•Nva-OMe

0,7 g (2,38 mmól) N-tere-butil-amino-karbonilTyr(OMe)-OH-ból és 0,4 g (2,38 mmól) Nva-OMehidrokloridból a 15b) példában leírt módon 0,8 g (82%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,66

MS (FAB)-408 (M+l).

19c) N-terc-Butil-amino-karbon.il-Tyr( OMe)- s

-Nva-OH

0,8 g (1,96 mmól) 19b) példa N-terc-butil-amino-karbonil-iyr(Ome)-Nva-OMe-ből a 15c) példában leírt módon 0,7 g (91%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,13

MS (FAB)-394 (M+l).

19d) l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-{N-[terc-butil-amino-karbonil-Tyr(OMe)-Nva]-amino}-3S-hexanol

110 mg (0,28 mmól) 19c) példa szerinti N-terc-butilamino-karbonil-Tyr(OMe)-Nva-OH-ból és 98 mg (0,28 mmól) 15d) példa szerinti 2S-amino-l-ciklohexil-6-(2-piridil)-3S-hexanolból a 15e) példában leírt módon 35,2 mg (19%) cím szerinti vegyületet kapunk.

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,38

MS (FAB)-652 (M+l).

A megfelelő kiindulási anyagokat felhasználva a 15-19. példában leírt módon állíthatók elő a 20-29. példa szerinti vegyűletek:

20. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3R-hexanol

Rf (toluol/etanol 9:1)-0,32

MS (FAB)-622 (M+l).

21. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-His)-amino]-3R-hexanol

HU 203 771 Β

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,32

MS (FAB)-660 (M+l).

22. példa

-Ciklohexil-6-(2 -piridil)-2S-[N-(etil-amino·

-karbonil-Phe-ffis)-amino]-3R-hexanol

MS (FAB)-632 (M+l).

23. példa

-Ciklohexil-6-(2 -piridil)-2S-[N-( izopropil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3R-hexanol

Rf (metilén-klorid/metanol 9:1)-0,46

MS (FAB)-608 (M+l).

24. példa l-CUdohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(2-amino-2-metil-propil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 7:3)-0,09

MS (FAB)-637 (M+l).

25. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(terc-butil-amino-karbonil-Phe-Asn)-amino]-3 S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MethOH 9:1)-0,24

MS (FAB)-637 (M+l).

26. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(etil-amino-karbonil-Phe-His)-amino]-3 S-hexanol

MS (FAB)-632 (M+l).

27. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(izopropil-amino-karbonil-Phe -Nva)-amino] -3 S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,39

MS (FAB)-608 (M+l).

28. példa l-Ciklohexil-6-(2-piridil)-2S-[N-(2,2-dimetil-propil-amino-karbonil-Phe-Nva)-amino]-3 S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,51

MS (FAB)-636 (M+l).

29. példa

I -Ciklohexil-6-(2 -piridil)-2S-{N-[( 1 -karboxi-1 -metil-etil-amino-karbonil)-Phe-Nva]-amino}-3S-hexanol

Rf (metilén-klorid/MeOH 9:1)-0,10

MS (FAB)-652 (M+l).

Claims

1. Eljárás (I) általános képletű dipeptid-karbamoilszármazékok és fiziológiailag alkalmazható sói előállítására, a képletben

R¹ jelentése (Π) általános képletű csoport, ahol R* jelentése 1-7 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben karboxilcsoporttal vagy aminocsoporttal szubsztituálva lehet,

A jelentése N-terminálisan R'-csoporton keresztül és C-terminálisan B-csoporton keresztül kapcsolódó fenil-alanin, β-2-tienil-alanin vagy O-metil-tirozin,

R³ jelentése hidrogénatom,

R⁴ jelentése (ΠΙ) általános képletű csoport, ahol X jelentése közvetlen kötés, p és q értéke együtt 1,2,3 vagy 4,

R⁵ jelentése piridilcsoport, ahol az 1 jelű szénatom S-konűgurácíóban és a 2 jelű szénatom R- vagy S-konfigurációban áll, azzal jellemezve, hogy

a) egy, az A és/vagy B aminosavakon kívánt esetben védett (IV) általános képletű vegyületet, a képletben

A, B, R², R³ és R⁴ jelentése a tárgyi körben megadott,

R⁷ jelentése könnyen lehasítható védőcsoport, egy (V) általános képletű izocianáttal reagáltatunk, a képletben

R¹ jelentése a tárgyi körben megadott, megfelelő szerves oldószerben vagy oldószer távollétében adott esetben Lewis-sav vagy Lewis-bázis jelenlétében -80 ’C és az oldószer forráspontja közötti hőmérsékleten és az R⁷ védőcsoportot eltávolítjuk, vagy

b) egy, az A és/vagy B aminosavakon kívánt esetben védett (TV) általános képletű vegyületet, a képletben

A, B, R², R³ és R⁴ jelentése a tárgyi körben megadott,

R⁷ jelentése könnyen lehasítható védőcsoport, egymás után egy (VI) általános képletű vegyűlettel, a képletben

R⁸ és R⁹ jelentése egymástól függetlenül halogénatom, 1-7 szénatomos alkoxicsoport, 6-12 szénatomos aril-oxi-csoport, 1-7 szénatomos alkil-tiocsoport, 6-12 szénatomos aril-tio-csoport vagy Hét- vagy Het-O-csoport, ahol

Hét jelentése mono- vagy biciklusos, heterociklusos csoport vagy

R⁸ és R⁹ a karbonilcsoporttal együtt (a) vagy (b) általános képletű mono- vagy biciklusos, heterociklusos gyűrűt képez, előnyösen foszgénnel, Ι,Γ-karbonil-diimidazollal,

1,1 ’-karbonil-di( 1,2,4-triazollal), di(N-szukcinimidil)-karbonáttal, di(l-benzotriazolil)-karbonáttal, Ν,Ν’-karbonil-bisz(2-metil-imidazol)-lal vagy 4,6-difenil-tieno[3,4-d]-l,3-dioxol-2-on-5,5-dioxiddal, majd egy (VH) általános képletű aminnal reagáltatunk, a képletben

R* jelentése a tárgyi körben megadott, inért szerves oldószer jelenlétében, adott esetben egy további bázis jelenlétében -80 ’C és az oldószer forráspontja közötti hőmérsékleten és az R⁷ védőcsoportot, valamint az A és B aminosav védelmére kívánt esetben ideiglenesen bevitt védőcsoportot lehasítjuk, és kívánt esetben a kapott vegyületet fiziológiailag alkalmazható sóvá alakítjuk.

-101

HU 203 771 Β

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan © általános képletű dipeptid-kaibamoil-száimazékok és fiziológiailag alkalmazható sói előállítására, amelyek képletében R¹ jelentése (II) általános képletű csoport,

R* jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, 1-6 szénatomos karboxi-alkil-csoport, vagy 1-6 szénatomos amino-alkil-csoport,

A jelentése N-terminálisan R*-csoporthoz és C-terminálisan B csoporthoz kapcsolódó fenil-alanin, β-2tienil- alanin vagy O-metil-tirozin,

B jelentése N-terminálisan A csoporthoz és C-terminálisan -NH-CHfR^-csoporthoz kapcsolódó hisztidin, aszparagin vagy norvalin,

R² jelentése ciklohexil-metil-csoport,

R³ jelentése hidrogénatom,

R⁴ jelentése (ΙΠ) általános képletű csoport, ahol

X jelentése közvetlen kötés, p értéke 0, q értéke 1,2, 3 vagy 4,

R⁵ jelentése 2-piridil-csoport, azzal jellemezve, hogy a megfelelőien szubsztituált kiindulási vegyületeket alkalmazzuk.

3. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely 1. igénypont szerint előállított © általános képletű dipeptid-karbamoil-száimazékot vagy annak fiziológiailag alkalmazható sóját, a képletben R‘, A, B, R², R³, R⁴ jelentése az 1. igénypontban megadott, gyógyszerészeti célra alkalmas hordozóanyaggal és adott esetben egyéb segédanyaggal keverünk össze és a keveréket gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.