HU193217B

HU193217B - Process for producing active agents for immunemodulator compositions

Info

Publication number: HU193217B
Application number: HU843107A
Authority: HU
Inventors: Yves-Marie Page; Christine Vanderhoven
Original assignee: Lipha
Priority date: 1983-08-17
Filing date: 1984-08-16
Publication date: 1987-08-28
Also published as: DK160807C; CS592184A2; EP0139551A3; PT79090B; ES8602415A1; FR2550707A1; IL72589A0; ES535213A0; DK393884D0; CS270410B2; IL72589A; NZ209171A; EP0139551A2; ZA846151B; DK160807B; PT79090A; JPS6069022A; MA20203A1; HUT35013A; SU1487815A3

Description

A találmány tárgya eljárás biológiai eredetű immünmoduláló gyógyszerkészítmények előállítására.

Számos preparátum ismeretes, melyek az immunválaszt lizált /feloldott/ mikróbatestek frakcióival vagy kivonataival modulálják. Közülük megemlítjük például a 2,374,042; 2,396,018 és 2,426,470 számú francia szabadalmi leírásban ismertetett készítményeket.

E Iizátumokat vagy kivonatokat általában fizikai, kémiai vagy ritkábban enzimatikus eljárásokkal állítják elő. Jóllehet kimutatható, hogy állatnál e preparátumok nagy része bizonyos immünmoduláló hatást fejt ki, terápiás hatékonyságuk embernél még vizsgálatra szorul /Immúnopharmacologie clinique. Réalités et Perspectives G. RENOUX. Pharmacologie et thérapeutique. R.P. 1982, 32, 41-42/.

Ezért fontos volt olyan gyógyszerek után kutatni, amelyek úgy az emberi, mint az állatgyógyászatban minden esetben segítséget nyújtanak, amikor az immúnvédekezés helyreállítására vagy megerősítésére van szükség.

Üj preparálás! eljárást dolgoztunk ki bakteriofágok alkalmazásával. Minthogy baktériumok líziséhcz in vitro kiváló eszközként használhatók a bakteriofágok, immünmoduláló preparátumok előállításához sikeresen alkalmazhattuk őket különböző nemzetségű és fajtájú baktériumokkal. A bakteriofágokkal létrehozott baktérium-lízis technikájának nincsenék korlátái a baktériumok nemzetségét vagy fajtáját illetően. Az eljárás lehetővé tette immúnrendszermoduláló tulajdonságokkal rendelkező gyógyszerek nyerését, melyeket baktériumsejtekből vagy ezen baktériumsejtek keverékéből állítottunk elő. E gyógyszerek interferonindukáló képességgel rendelkeznek.

Ezen immúnválasz-moduláló gyógyszerek, melyeknek hatóanyagát baktériofágok által lizált baktériumok íizátum-termékei vagy ezek frakciója képezi, a találmány szerint hatóanyagként homológ bakteriofágok által lizált, legalább két baktérium lízis-termékeit tartalmazzák.

A baktériumok közül az Escherichiát, a Streptococcust, a Klebsiellát és a Staphylococcust alkalmaztuk. A Klebsiella és Escherichra nemzetségű baktériumok alkalmazásával nyert preparátum különösen érdekesnek bizonyult.

Girard, J.P. (Kantoni egyetem kórház, Genf, Svájc) összehasonlító vizsgálatokat végzett az Immun B.C.G. Pasteur F, (Dictionaire Vidal, p. 605) a Solaskil (lévamisole hidroklorid, Dictionaire Vidal, p.l 145) és a találmányunk szerinti eljárással előállított (3. példa szerinti) hatóanyaggal, SLO₄-gyel. Azt találták, hogy a találmányunk szerinti SLO₄hatóanyag immunválaszt moduláló hatása a legkedvezőbb. Stefanos, S. és mtsai [J. of Immunopharmacology, 7 (1), 43-52 (1985)] az SLO₄ és más interferonképző anyagok adagolása után a szérumban lévő interferonszintet vizsgálták. A legmagasabb interferonszin2 tét már 1,5 mg SLO₄ ip. adagolása után elérték.

A kapott gyógyszerkészítmény antibiotikus anyaggal, mint tetraciklinekkel; vírusellenes anyaggal, mint a vírus-nukleinsav szintézisét gátló szintetikus nukleozidokkal; gombaellenes anyagokkal, mint buklozamiddal; vagy parazitaellenes anyaggal, mint klorokinnal kombinálható.

Egy másik kiviteli alaknál a találmány szerint előállított gyógyszerkészítmény más gyógyszerészeti termékekkel és készítményekkel társítható, így daganatgátló szerrel (citosztatikummal), immunszuppresszív anyaggal (antilimfocita immünoglobulinokkal), osztódásgátló szerrel, mint folsavszármazékokkal vagy gyulladásgátló anyaggal, mint indometacinnal.

A találmány szerint előállított gyógyszerkészítmény különböző formákban készíthető el bőrön keresztüli, perlinguális, helyi, enterális, parenterális vagy belégzés útján történő alkalmazás céljából. Az adott esettől függően a gyógyszerkészítményhez alkalmas hordozóanyag adható, így a készítményt vizes vagy alkoholos oldat, olajos szuszpenzió formájában, liofilizált formában, aeroszol vagy kenőcs alakjában állíthatjuk elő.

A szükséges adag széles határok között változhat, függően a gyógyszer összetételétől, az előírt javallattól, az alkalmazás formájától és a kezelendő egyén korától. A szükséges dózisok megállapítását az orvos vagy állatorvos megítélésére bízzuk, amint ez szokásos az immúnválasz-modulálási kezeléseknél.

Például a napi adag a légutak idült vagy recidiváló /visszaeső/ fertőzéseinek kezelésénél, a műtét utáni fertőzéses szövődmények, vagy húgyúti fertőzések megelőzésénél az 1-50 ml dózistartományban lehet, függően az immünmoduláló anyag koncentrációjától.

A találmány szerinti gyógyszerkészítmény rendkívül jól tűrhető, mérgezőképessége kisfokú, amint az az LD₅₀ érték mutatja, mely orális úton el sem érhető, tekintettel a használt állatok /egér, patkány/ gyomrának kapacitására. ,

A találmány szerint előállított gyógyszerkészítmények különösen javallhatók a nem megfelelő immunválasz kezelésére, baktériumos, vírusos, gombás vagy parazitás fertőzések kezelésére vagy megelőzésére, valamint a reumatológiában és sebek hegesedésénél vagy védelménél.

A találmány tárgya eljárás baktériumlízis típusú gyógyszerkészítmény előállítására, mely eljárás legalább két nélkülözhetetlen fázis egymásutánkövetkezésén alapul, nevezetesen egy bakteriofágos lízisen, majd a nem lizált baktériumok és a baktériumtörmelékek ismert módszerekkel, mint szűréssel, centrifugálással és hasonlókkal való eltávolításán.

A baktériumból kiinduló eljárás alapját az képezi, hogy alkalmas tápközeget baktériuminokulummal oltunk be, majd a növekedési fázis folyamán a baktériumokat megfertőzzük

-2193217 homológ fágjaik bevitele útján; előzetesen kalibrált sejtszámláló segítségével követjük a lízis lefolyását a tápközeg 1 ml-ére eső, előre meghatározott sejtszám eléréséig, azután eltávolítjuk a nem lizált baktériumokat és a baktériumtörmeléket, majd összegyűjtjük az immúnmodulátor preparátumot képező lizátum-szűrletet.

A találmány szerinti eljárást a fentiekben említett nemzetséghez tartozó baktériumok egymásutáni alkalmazása útján hajtjuk végre.

Egy alkalmas tápközeget először beoltunk Valamely Escherichia, Streptococcus, Klebsiella vagy Staphylococcus nemzetség inokulumával, a növekedési fázis folyamán a baktériumokat megfertőzzük homológ bakteriofágjaik bejuttatása útján, a lízist ismét egy meghatározott stádium eléréséig követjük, majd a tápközeget másodszor is beoltjuk valamely Escherichia, Streptococcus, Klebsiella vagy Staphylococcus nemzetséghez tartozó baktérium inokulumával, a második baktériumfajta növekedési fázisa folyamán e baktériumokat megfertőzzük homológ fágjaik bevitele útján, e második nemzetséghez tartozó baktériumok lízisét meghatározott stádiumig követjük, végül az ilyen típusú szeparálásokra alkalmas ismert eljárások segítségével eltávolítjuk a nem lizált baktériumokat és a baktériumtörmelékeket, és kinyerjük a két baktériumból származó lizátum szurletét. Ezen eljárás szerint például Klebsiella és Escherichia nemzetséghez tartozó baktériumok egymásutáni alkalmazásával állíthatunk elő gyógyszerkészítményt.

Az alábbi példák ismertetik a találmányt, anélkül, hogy annak hatókörét korlátoznák. Az l.,2. és 4. példák a lízises eljárás kivitelezhetőségét támasztják alá különböző mikroorganizmusokkal.

1. példa

Escherichia nemzetséghez tartozó baktériumból származó preparátum.

A használt baktérium nemzetsége Escherichia, fajtája coli, savótípusa 0119: B 14, lajstromozta a párizsi Pasteur-intézet a 62.23 nyilvántartási szám alatt.

A coli fág a C, morfológiai csoportba tartozik /az I.A.M.S. International Committee fór Taxonomy of Vírus, Taxonomie des Bactériophages albizottságának nomenklatúrája/, izometriás /gömbszimmetrikus/ feje, nagyon rövid, nehezen kimutatható tarka és nem kimutatható gallérja és véglemeze van. Géles közegben a lízis-plakkok átmérője 1 — 1,5 mm, formájuk kerek, körvonalaik szabályosak, középpontjuk hálós és konfluens r* kiónjaik vannak.

A tápközeg 1 literének összetétele: marhahúskivonat 2,5 g pepton 4,1 g

NaCL _t _ 7,0 g

Kétszer desztillált víz 1 literig.

A tápközeget beoltjuk exponenciális növekedési fázisban levő baktériumok inokulumával és a tenyészet kezdeti sűrűsége 10⁶ baktérium per ml. Az inkubálást 37°C-on mérsékelt rázás közben hajtjuk végre.

Az exponenciális növekedés fázisának közepén, azaz körülbelül a beoltás után 60 perc múlva a baktériumokat megfertőzzük homológ fágjaikkal. A fertőzés gyakorisága 0,02.

A lízis kifejlődését előzetesen kalibrált sejtszámláló segítségével követjük. Amikor már kevesebb van 1000 baktérium per ml-nél, sterilező szűrést végzünk mintegy 0,22pm pórusméretű membránszürő segítségével. A lizátum szűrlete képezi magát az immúnmódulátor preparátumot.

2. példa

Streptococcus nemzetséghez tartozó baktériumból származó preparátum.

Streptococcus nemzetséghez, faecalis fajtához, zimogén változathoz tartozó baktériumot használunk, melyet a párizsi Pasteur-intézet lajstromozott az 53.152 nyilvántartási szám alatt.

A fág.az A, morfológiai csoportba tartozik /az I.A.M.S. International Committee fór Taxonomy of Vírus, Taxonomie des Bactériophages albizottságának nevezéktana/, feje izometriás, farka hosszú, gallérja látható és a véglemez komplex. Géles közegben a lízisplakkok kerekek, 0,8 mm-nél kisebbek, körvonalaik szabályosak és középpontjuk világos. Vagy egyáltalában nincs r* kiónjuk, vagy csak egy van.

Literenként a tápközeg összetétele:

marhahúskivonat 0,3 g triptikáz 1,0 g glükóz 1,0 g

NaCl 0,5 g

Kétszer . desztillált víz 1 literig.

A tápközeget stacioner növekedési fázisban levő baktériumok inokulumával oltjuk be és a kezdeti sűrűség 10⁷ baktérium per ml. 37°C-ra, sötétbe helyezzük, mérsékelt rázást alkalmazva.

Az exponenciális növekedés kezdetén, azaz körülbelül 40 perccel a beoltás után a baktériumokat megfertőzzük homológ fágjaikkal. A fertőzés gyakorisága 0,1.

A lízis kialakulását sejtszámláló segítségével követjük. Amikor ml-enként 10-nél kevesebb baktérium marad, a tenyészetet fertőzésmentesen 5000xg gyorsulással lecentrifugáljuk a lizogén /profágot tartalmazó/ baktériumok és a nem lizált baktériumtestek eltávolítása céljából. A felülúszó tartalmazza az immúnmoduláló preparátumot,

3. példa

Klebsiella és Escherichia nemzetségbe tartozó baktériumok egymásutáni alkalmazásával előállított preparátum (SLOJ

A Klebsiella nemzetségbe tartozó, penumoniae fajtájú baktériumot a párizsi Pasteur-intézet lajstromozta 58.5 nyilvántartási szám alatt.

-3193217

Az Escherichia nemzetségbe tartozó baktérium jellemzői azonosak az 1. példában leírtakkal.

A tág, mely a Klebsiella homológja, a C, morfológiai csoportba tartozik /az I.A.M.S. International Committee fór Taxonomy of Vírus, Taxonomie des Bactériophages” albizottságának nomenklatúrája/, ikozaéderes feje,rövid. nehezen látható farka van, a gallér és a véglemez nem mutatható ki. Géles közegben a lizis-plakkok mérete 0,5—3 mm, igen szabálytalan alakúak, körvonalaik elmosódottak és középpontjuk világos. Az r⁺ kiónok ritkák.

A coli fág jellemzőit az I. példában leírtuk.

Literenként a tápközeg összetétele:

marhahúskivonat 3 g pepton 5 g

NaCl 7g

Kétszer desztillált víz 1 literig.

A tápközeget beoltjuk a stacioner növekedési fázisban levő Klebsiella penumoniae inokulumával. A kezdeti sűrűség 10⁷ baktérium per ml. A tenyészetet 37°C-ra helyezzük és mérsékelt rázást alkalmazunk.

A látencia fázis végén, azaz körülbelül 60 perccel a beoltás után a baktériumokat megfertőzzük homológ fágjaikkal; a fertőzés gyakorisága 0,03.

A lízis kialakulását sejtszámláló segítségével követjük. Amikor ml-enként 10 baktériumnál kevesebb marad, a tápközeget ismét beoltjuk stacioner növekedési fázisban levő Escherichia inokulumával. Ezen újabb tenyészet kezdeti sűrűsége 5.10⁷ Escherichia per ml.

A látencia fázis végén, azaz az alkalmazott kísérleti körülmények között a második beoltás után 20 perc múlva a baktériumokat megfertőzzük a coli fágokkal. A fertőzés gyakorisága 0,1.

A lízis előrehaladását sejtszámláló segítségével követjük. Amikor ml-enként 10³ Eschericbiánál kevesebb marad, a tenyésztést leállítjuk 0,22pm pórusméretü sterilező membránszűrőn való átbocsátással. A két baktériumból származó lizátum-szurlet tartalmazza az immúnmoduláló preparátumot.

4. példa

Staphytococcus nemzetségbe tartozó baktériumból származó preparátum

A Staphytococcus nemzetségi], aureus faj tájú, 1 savótípusú baktériumot a párizsi Pasteurintézet lajstromozta 65.6 hivatkozási szám alatt.

A Staphylococcus homológ tágja az A, morfológiai csoportba tartozik /az O.A.M.S. International Committee fór Taxonomy of Vírus, Taxonomie des Bactériophages” albizottságának nomenklatúrája/, oktaéderes feje, gallérral elfedett farka és komplex véglemeze vari. Géles közegben a lízis - plakkok átmérője 4

1-2 mm, kerekek és szabályosak, középpontjuk világos és nincs i* kiónjuk.

A baktériumokat szilárd táptalajra ülepítjük, melynek összetételejiterenként:

„Difco proteose peptone No. 3. 10,0 g glukóz 1,2 g oldható keményítő 6,0 g

NaCl 3,0 g

NaH,PO₄ 2,0 g „Bacto” zselatin 13,0 g „Bacto”-agar 6,0 g

Tisztított víz I literig.

óra múlva a vastag baktérium-pázsitot képező sejteket sterilen összegyűjtjük, megszámoljuk és a következő összetételű tápközegben újraszuszpéndáljuk:

marhahúskivonat 2,5 g kétszer desztillált víz 1 literig.

A sűrűség 5.10⁶ baktérium per ml.

Egyidejűleg a homológ tagokat hozzáadjuk a tápközeghez. A fertőzés gyakorisába 0,01.

A lízis kialakulását sejtszámláló segítségével követjük. Amikor ml-enkérrt 10² baktériumnál kevesebb marad, körülbelül 0,22pm pórusméretű membránon átszűrjük a tenyészetet A lizátum-szűrlet képezi az immúnmoduláló preparátumot.

Farmakológiai vizsgálat

A találmány szerinti preparátumok állatra kifejtett aktivitását az 1. példában leírt eljárással kapott Escherichia coli lizátum-szurlet alkalmazásával igazoljuk. A szűrletet liofilizáljuk, majd steril desztillált vízben újraoldjuk. Ezen új oldat koncentráció-faktorát a liofilizálás előtti preparátumra vonatkoztatva fejez-, zük ki.

Heveny baktériumos fertőzés elleni védőhatás

Az immúnrendszer teljes stimulálását jelző próbát eltérő fertőző baktériumokkal hajtjuk végre. Ennek célja annak az igazolása, hogy a preparátum aktivitását nem egy esetleges vakcináló képesség vagy közvetlen bakteriofág jelenség okozza, hanem az immúnvédekezés stimulálása.

Két baktériumot vizsgálunk, az intracellulárisan kifejlődő Klebsiella penumoniaet és az extracelluláris fejlődésű Staphylococcus aureust.

A fertőző baktériumokat átlagosan 18 g testsúlyú Swiss-egerek 10-es csoportjainak adjuk be intraperitoneálisan, 0,5 ml térfogatban a nulladik napon /N_o/

Az immúnmoduláló preparátumot a fertőzést megelőző napon /N_,/ fecskendezzük be, tehát preventív hatást vizsgálunk. A preparátumot intraperitoneáiisan vagy intravénásán alkalmazzuk, hogy elkerüljük az esetleges po-4193217 zitív eredményt, melyet az injekció helyén a preparátumnak a fertőző baktériumokkal való közvetlen interferenciája okozhat.

A fertőző törzs virulenciájának — amely kísérletről kísérletre széles határok között válI, táblázat tozhat — megismerése céljából minden kísérletnél meghatározzuk az LD₅₀ értéket.

Az I. táblázatban a preparátum heveny baktériumos fertőzéssel szembeni védőhatását mutatjuk be.

KEZELÉS TÚLÉLŐK (%·)

Fertőző bakté- riumok	1¼	Alkalmazás út j a	Térfo- Koncent-	kezelt (n=10)	kontroll (n=10)	P
gat	ráció dózis- faktora
Klebsiella	10'-*	ip·	1,0	ml	1 x	0	10	NS
	10'³	ip·	1,0	ml	1 x	70	30	0,050
	10^	ip·	1,0	ml	1 x	100	20	0,001
	10'¹	iv.	0,5	ml	1 x	20	10	NS
	10’³	iv.	0,5	ml	1 x	80	20	0,025
	10'^M	iv.	0,5	ml	1 x	100	20	0,001
Staphylo-	10'^s	ip·	1,0	ml	1 x	10	10	NS
coccus	w³	ip·	1,0	ml	1 x	80	10	0,001
aureus	¹θ3	iv.	0,5	ml	1 x	10	20	NS
	10	iv.	0,5	ml	1 x	100	30	0,001

NS = nem szignifikáns

Makrofágok fagocitáló aktivitásának stimulálása

A Haipern-próbában /Stiffel C., J. Phys. 58, 911-949 /1958// egereknek intravénásán kolloid szénrészecskéket fecskendezünk be, melyeket a máj és a lép retikuloendoteliális sejtjei nagy mértékben fagocitálriak. Eltűnésük sebessége jellemző a fagocitáló aktivitásra. Az utóbbit úgy állapítjuk meg, hogy az idő függvényében fotometriásan meghatározzuk a vérben szabadon maradt részecskéket. Referenciaanyagként enterobaktériumból kivont és a makrofágokat hatásosan aktiváló lipopoli szacharid /LPS/ endotoxint alkalmazzuk

A próbát a következőképpen hajtjuk végre:

— 0,6 ml Escherichia coli szűrletet vagy 0,625 pg/ ml töménységű LPS-oldatot átlagosan 24 g testsúlyú nőstény Swiss-egerek ötös csoportjainak adjuk be intraperitoneális úton.

— 24 óra múlva 4% zselatinnal készült, 32 mg/ml töménységű kolloid szén-szuszpenzióból 0,12 ml-t fecskendezünk be intravénásán az egerekbe.

— 12 percen át minden második percben vért veszünk a szemüreg mögül. E vérmintát azonnal felhígítjuk 4 ml 1%-os Na₂CO₃-oldattal. Az oldatot azután fotometráljuk.

— A 620 nm-nél mért extinkciót leolvassuk.

— A vérben levő kolloid szén koncentrációját a kísérlet t időpontjában egy előzetesen felvett standard görbe alapján határozzuk meg. A fagocitaindexet /F.I., fagocitózis mértékét kifejező szám/ a következő képlet alapján számítjuk ki:

_{F T} = Í2S£&_L_l2S£l_

T₂ - T, ahol c_? és c, a vérben lévő kolloid szén koncentrációja az első| illetve utolsó vérvételkor, és T₂ és T, a mintavételek időpontja.

A II. táblázatban feltüntetett eredmények ₃₅ azt mutatják, hogy az egér peritoneális makrofágjainak aktivitása a preparátum intraperitoneális alkalmazása után stimulálódik.

II. táblázat

Kezelés Injekció Ip.

térfogata

Preparátum /E. coli bakteriofá^os lizátu- 0,6 ml 0,028 ± 0,003 mának szurlete/ ⁴⁵ Be nem oltott tápfolyadék /negatív 0,6 ml 0,012 ± 0,001 kontroll/

LPS /pozitív referencia/__0,6 ml 0,025 ± 0,002

Szérum-interferont/IFN/ indukáló aktivitás

Az interferon 10000-20000 dalton molekulasúlyú glükoproteid. Számos immúnmoduláló ₅₅ hatása van, így például stimulálja az NK/„Natural Killer”/ sejtek aktivitását. Az IFN részvételét a vírus elleni védekezésben már igazolták.

θθ Miután a preparátumot 8 db 25 g-os nőstény Swiss-egérnek beadtuk, nem-heparinozott csőbe minden egértől 0,3 ml vért veszünk. A szérum-IFN-t szokásosan úgy határozzuk meg_?hogy megmérjük a vizsgálandó szérum jelenlétében 24 órán át tenyésztett egér L-sejteket ⁶⁵ megfertőző VSV vírus /Vesicular Stomatitis

-5193217

Vírus/ sejtkárosító hatását /Havell E.A., Vil£ek J., Antimicrob. Agents Chemotherapy 2,

476-484 /1972//. Az indukált IFN védőhatását összehasonlítjuk a National Institute of Health /Bethesda, Amerikai Egyesült Államok/ nem- lázat szerint.

III. táblázat zetközi egér IFN referenciaanyagáéval.

A preparátum egérnél a szérum-IFN-t int raperitoneális, intravénás vagy orális alkal mazása után 2 óra múlva indukálja, a III. táb

Alkalmazás útja	Termék	Térfo- gat	Koncentráció- faktor	N.E. IFN/ml
Ip.	preparátum	1 ,5 ml	80	1058
	placébo	1 ,5 ml	80	0
ív.	preparátum	0,7 ml	80	950
	placébo	0,7 ml	80	0
P.o.	preparátum	1 ,0 ml	1000	1200
	placébo	1 ,0 ml	1000	0
N.E. = nemzetközi egység

Emberen az aktivitást egy a 3. példa szerint előállított preparátummal teszteljük, melyet először az önkéntes vállalkozónak, majd a betegnek adunk be.

A 15 önkéntes páciensen végzett kettős vakpróba alapján kimutatható, hogy a preparátum orális alkalmazása a kezelés után 10 nap múlva a sejtközvetítette immunválasz jelentős növekedéséhez vezet.

Egy 25 páciensen végzett második vizsgálat kimutatja, hogy a preparátum különböző dózisainak egyszeri orális alkalmazása 24 óra múlva MIF — LIF típusú szérum-limfokin indukciót eredményez. E-z az indukció dózisfüggöTöbb kísérletben ki tudtuk mutatni a léptenyészetben tenyésztett és citoferezis útján nyert emberi monociták és limfociták IFN-termelésének stímulálását.

A preparátummal indukált IFN anti-IFNa, β vagy γ antiszérumok alkalmazásával jellemezhető. Képződése függ a használt dózistól.

Példaként az alábbiakban megemlítünk néhány klinikai munkát.

A légutak idült vagy recidiváló fertőzéseinek megelőzése és kezelése

A hörgők és a tüdőszövet idült vagy recidiváló baktériumos fertőzésében szenvedő 25-25 beteg egyik csoportját 3 hónapon át havonként 20 napig orálisan kezeljük a fenti preparátum 15 ml-ével, a másik csoportot pedig klasszikus antibiotikumokkal kezeljük. A heveny fertőző szakaszok számának csökkenése a vizsgálat 6 hónapos időtartama alatt sokkal jelentősebb volt a preparátummal, mint a klasszikusan antibiotikumokkal kezelt csoportnál.

Húgyúti fertőzések megelőzése és kezelése

Négy szerző klinikai terv szerint vizsgálta a fenti készítményt, idült vagy recidiváló húgyúti fertőzéstől szenvedő betegeken. 3 hónapon ²⁵ át havonként 20 napig a preparátum napi 15 ml- ét alkalmazták orálisan, ami jelentősen csökkentette a fertőző szakaszok gyakoriságát és tartamát, valamint a fertőzésgátlók fogyasztását a 6 hónapos megfigyelési periódus alatt, összevetve a kezelést megelőző 6 hónappal.

Minden próbában a preparátum tűrését úgy az orvos, mint a páciens /önkéntes vagy beteg/ kiválónak találta.

Claims

1. Eljárás immúnválasz-moduláló gyógyszerkészítmény hatóanyagának előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelő tápközeget

40 először valamely Escherichia, Streptococcus, Klebsiella vagy Staphylococcus nemzetséghez tartozó baktériumokkal oltunk be, növekedési fázisuk folyamán a baktériumokat homológ fágjaik bevitele útján megfertőzzük,az oldódás

45 kialakulását meghatározott stádium eléréséig követjük, majd a tápközeget más Escherichia, Streptococcus, Klebsiella vagy Staphylococcus nemzetséghez tartozó baktériumokkal másod_5θ szór is beoltjuk, a második nemzetséghez tartozó baktériumok növekedési fázisa folyamán a baktériumokat homológ fágjaik bevitele útján megfertőzzük, a baktériumok oldódását bizonyos meghatározott stádium eléréséig követjük, végül a nem oldódó baktériumokat elkülönítjük és a két baktérium oldódásával kapott szürletet összegyűjtjük.

Műtét utáni fertőzések megelőzése

20 ml preparátum orális alkalmazása jelentős mértékben csökkenti a műtét utáni fertőzé- ⁶⁰ses szövődményeket 106 betegnél, összehasonlítva a klasszikusan kezelt többi 72 beteggel.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás immúnválasz-moduláló gyógyszerkészítmény hatóanyagának előállítására, azzal jellemezve, hogy homológ bakteriofágokkal Klebsiella és .Escherichia nemzetséghez tartozó baktériumokat oldunk.