HRP20040388A2 - Combinations for the treatment of immunoinflammatory disorders - Google Patents

Description

Područje izuma

Izum se odnosi na tretman imunoupalnih poremećaja.

Dosadašnje spoznaje

Upalni poremećaji (npr. reumatoidni artritis, psorijaza, ulcerativni kolitis, Cronova bolest, smrt stanica mozga izazvana udarom, ankilozni spondilitis, fibromialgija i autioimune bolesti kao što je astma, multila skleroza, dijabetes tipa I, sistemski eritematozni lupus, skleroderma, sistemska skleroza i Sjoerensov sindrom) su upalni poremećaji karakterizirani poremećenom regulacijom imunog sustava i neodgovarajućim aktiviranjem obrane tijela protiv čega je rezultat ozljeda zdravog tkiva.

Jedan posto ljudi širom svijeta je pogođeno reumatoidnim artririsom (RA), stalnom progresivnom bolesti koja uzrokuje ozbiljno naticanje, bol i konačno deformaciju i uništenje zglobova. Prema Fondaciji za artritis, reumatoidni artritis sada pogađa preko dva milijuna Amerikanaca od kojih su žene tri puta češće pogođene. Reumatoidni artritis je karakteriziran upalom zglobova i/ili ostalih internih organa, te prisutnošću povećanog broja limfocita i visoke razine proinflamatornih citokina.

Dijagnoza RA općenito uključuje: (i) jutarnje ukočenje zglobova koje traje barem jedan sat do poboljšanja, (ii) artritis triju ili više zglobova koji imaju meko tkivo koje istovremeno otiče ili tekućinu; (iii) artritis barem jednog ručnog zgloba; (iv) simetrični artiritis, t.j. istovremeno su obuhvaćena dva ista zgloba na objema stranama tijela; (v) reumatoidne čvorove; (vi) nenormalni reumatoidni faktor u serumu, te (vii) radiografne promjene u radiografovima koje su tipične za reumatoidni artritis posteroantero na ruci i zaglavku, koje uključuju eroziju ili nejednoliku koštanu dekalcifikaciju lokaliziranu ili najviše izraženu u susjedstvu obuhvaćenih zglobova . Pacijenti se klasificiraju kao oni koji imaju RA ako imaju barem četiri od ovih sedam kriterija i (i) do (iv) moraju biti prisutni najmanje šest tjedana. (American College od Reumatology, 1987 Criteria for the Calssification of Acute Artritis of Rheumatoid Arthritis,, based on Arnett FC et al., Artritis Rheum. 1988;31:315-324). Bol per se nije neophodna za dijagnosticiranje RA.

Tretman RA općenito uključuje antiupalne strategije usmjerene na smanjivanje kliničkih manifestacija upale zgloba uključujući zadebljenje sinovije, mekoću zgloba i ukrućenost zgloba. Lijekovi koje se koriste da djeluju na te pojave i simptome upčenito su sljedeći: (i) nesteroidni antiupalni lijekovi (NSAID, npr. detoprofen, diklorfenak, diflunisal, etodolac, fenoprofen, flurbiprofen, ibuprofen, indometacin, petoprofen, meklofenamea, mefanaminska kiselina, mekloksikam, nabumenon, naproksen natrij, oksaprozin, piroksikam, sulindak, tolmetin, celekoksib, rofekoksib, aspirin, kolin salicilat, salsalat i natrijev i magnezijev salicilat) - ti lijekovi mogu biti odgovarajući za blagi oblik RA, ali ne mijenjeju dugotrajni tijek bolesti; te (ii) steroidi (npr. kortizon, deksametazon, hidrokortizon, metilprednisolon, prednisolon, prenidizon, triamcinolon).

Tretman RA može također obuhvaćati strategije usmjerene na ograničenje dugotrajne ozljede zgloba i deformacija uzrokovanih upalom zglobova. Takvi tretmani su općenito opisani kao DMARD tj. antireumatski lijekovi koji modificiraju bolest (npr. ciklosporin, azatioprin, metotreksat, leflunomid, ciklofosfamid, hidroksi-oksiklorokin, sulfalazin, D-penicilamin, minociklin i zlato), etanercept (topljivi receptor TNF) i infliximab (kimerno monoklonalno anti-TNF antitijelo)).

Postoji potreba za razvitak novih lijekova za tretman imunoupalnih poremećaja.

Sažetak izuma

Mi smo našli da kombinacija tetrasupstituiranih pirimidopiridina kao što je dipiridamol (također poznat kao 2,6-bis(dietilamino)-4,8-dipiperidinopirimido-(5,4-d)-pirinidin; te kortikosteroidi kao što je fludrokortizon (poznat kao 9-alfa-fluor-11-beta,17-alfa,21-trihidroksi-4-pregnen-3,20-dion-acetat) ili predinsolon (također poznat kao 1-dehidrokortizol, 1-dehidroksikortizon, 1,4-pregnadien-11-beta,17-alfa,21-triol-3,20-dion, te 11-beta,17-alfa,21-trihidroksi-1,4-pregnandien-3,20-dion) dovodi do značajnog smanjivanja razine TNFα koji je induciran u mononuklearnim stanicama perifernog krvotoka (PBMC).

Prema tome, izum prikazuje metodu tretmana pacijenta koji ima ili je rizičan na razvitak imunoupalnog poremećaja. Meoda uključuje davanje (i) kortikosteroida i (ii) tetrasupstituiranog pirimidopirimidina koji ima formulu (I):

[image]

u kojoj svaki Z i svaki Z' neovisno jeste N, O, C, [image] , [image] , ili [image] ,

Kada Z ili Z' jeste O ili [image] , tada p=1, kada Z ili Z' jeste N, [image] ili [image] , tada p=2, a kada Z ili Z' jeste C, tada p=3. I formuli (I) svaki R1 jeste neovisno X, OH, N-alkil (u kojoj alkilna skupina ima 1 do 20 atoma ugljika, ili je heterocikl. Alternativno kada je p>1, dvije R1 skupine od zajedničkih Z ili Z' atoma u kombinaciji jedan s drugim mogu predstavljati -(CY2)k- u kojoj k jeste cijeli broj između 4 i 6, uključujući. Svaki X neovisno jeste Y, CY3, C(CY3)3, CY2CY3, (CY2)1-5OY, supstituiran ili nesupstituirani cikloalkan strukture CnY2n-1 pri čemu n=3-7 uključivo. Svaki Y je neovisno H, F, Cl, Br ili I. U jednoj cjelini svaki Z je isti ostatak, svaki Z' je isto ostatak, a Z i Z' jesu različiti ostaci. Oba spoja se daju u količinama koje su dozvoljene u kombinaciji s drugim spojem za tretman ili prevenciju imunoupalnih poremećaja.

U srodnom aspektu, izum prikazuje metodu za smanjivanje produkcije jednog ili više citokina u pacijenta koji ima za tim potrebu, a davanjem (i) kortikosteroida i (ii) tetrasupstituiranog pirimidopirimidina koji ima formulu (I).

U određenim tetrasupstituiranim pirimidopirimidinima R1 je supstituirani ili nesupstituirani furan, purin ili primidin, (CH2CH2OY), (CH2CH(OH)CH2OY), (HCH2CH(OH)CH2CX3), ((CH2)nOY), pri čemu n=2-5, [image] , ili [image] .

U drugim korisnim tetrasupstituiranim pirimidopirimidinima svaki Z' jeste N i svaka povezana R1 skupina jeste -CH2CH2OH.

Tetrasupstituirani pirimidopirimidin i kortikosteroid mogu biti prisutni u farmaceutskom pripravku koji sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač, razrjeđivač ili ekscipijens i dani su pri dozama i učestalosti dovoljnoj da smanje razinu TNFα����, �da se dobije terapijska korist kod pacijenta. Tetrasupstituirani pirimidopirimidin i kortikosteroid se mogu davati unutar 14 dana jedan od drugog (primjerice u razmaku od 10 dana, pet dana, dvadeset četiri sata ili jedan sat ili čak istovremeno). Davanje svakog spoja može biti npr. 1 do 5 puta dnevno ili tako da se ublaže simptomi.

Prema ovom, ovaj izum također prikazuje farmaceutske pripravke, farmaceutski pakete i dijagnostičke pakete koji sadrže jedan ili više tetrasupstituiranih pirimidopirimidina i jedan ili više kortikosteroida. Metode i pripravci (farmaceutski pripravci i farmaceutski paketi) iz izuma mogu biti u kombinaciji više tetrasupstituiranih pirimidopirimidina i kortikosteroida. Specifično, jedan, dva, tri ili više tetrasupstituiranih pirimidopirimidina se mogu kombinirati s jednim, dva, tri ili više kortikosteroida. U preferiranim cjelinama tetrasupstituirani pirimidopirimidin, kortikosteroid ili oba su odobrena od United Stated Food and Drug Administration (USFDA) za davanje ljudima.

Primjeri tetrasupstituiranih pirimidopirimidina koji su korisni u metodama i pripravcima iz izuma uključuju, primjerice 2,6-disupstiotuirani 4,8-dipiperidino-pirimido(5,4-d)pirinidine. Posebno korisni tetrasupstituirani pirimidopirimidini jesu dipiridamol (također poznat kao 2,6-bis(dietilamino)-4,8-dipiperidinopirimi-do(5,4-d)pirinidin), mopidamol, dipiridamol monoacetat, NU3026 (2,6-di-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi-4,8-di-piperidinopirimidopirimidin, NU3059 (2,6-bis-(2,3-dimetiloksipropoksi-4,8-di-piperidinopirimidopirimidin, NU3060 (2,6-bis-[N,N-di(2-metoksi)etil]-4,6-di-piperidinopirimidopirimidin), te NU3076 (2,6-bis(dietilamino)-4,8-di-4-metoksibenzilaminopirimidopirinidin).

Izum ovdje opisuje primjere koji koriste fludrokortizon kao kortikosteroid (poznat kao 9-alfa-fluor-11-beta,17-alfa,21-trihidroksi-4-pregn-3,20-dion-acetat) i predinsolon (također poznat kao 1-dehidrokortizol, 1-dehidroksikortizon, 1,4-pregnadien-11-beta,17-alfa,21-triol-3,20-dion, te 11-beta,17-alfa,21-trihidroksi-1,4-pregnandien-3,20-dion), međutim stručnjak će prepoznati da se u metodama i pripravcima iz ovog izuma također mogu koristiti strukturni i funkcionalni analozi tih kortikosteroida u kombinaciji s tetrasuptituiranim pirimidopiridinima. Ostali korisni kortikosteroidi se mogu prepoznati na osnovu strukturnih karakteristika i očitom mehanizmu djelovanja u obitelji kortikosteroida.

Tetrasuspstituirani pirimidopirimidini i kortikosteroid se mogu davati u istim ili različitim farmaceutskim formulacijama. Farmaceutski pripravci ili komponente farmaceutskog paketa se mogu davati oralno, rektalno, intravenozno, intramuskularno, subkutalno, inhalacijsko, topičko ili transdermalno, vaginalno i okularno davanje.

Doziranje tetrasuspstituiranog pirimidopirimidina i kortikosteroida se može odrediti pojedinačno, međutim, tetrasuspstituirani pirimidopirimidin se tipično daje čovjeku od oko 0.5 do oko 800 mg/danu, 18-600 mg/danu ili 50-400 mg/danu ili 0.5-10 mg/danu. Preferirane su niske doze kortikosteroida (npr. 10 mg/danu ili manje prednisolona ili njegovog ekvivalenta). Ukupna dnevna doza tetrasuspstituiranog pirimidopirimidina i kortikosteroida se može davati u jednoj, dvije tri četiri i više doza. Ne postoji potreba da se tetrasuspstituirani pirimidopirimidin i kortikosteroid daju u istom broju dnevnih doza. Nadalje, ne postoji potreba da se tetrasuspstituirani pirimidopirimidin i/ili kortikosteroid daju svaki dan ili istim putem davanja. Primjerice, postoji potreba da se tetrasuspstituirani pirimidopirimidin može davati intravenoznom injekcijom svakog drugog dana a kortikosteroid se može davati topički dva puta dnevno. Prema tome, kada se daju u različitim pripravcima, farmaceutske formulacije, paketi i dijagnostički paketi se pripravljaju u obliku doze pogodne za postizanje željenog tretmana.

Bolesti ili poremećaji koji se tretiraju korištenjem metoda i pripravaka iz izuma su imunoupalni poremećaji uključujući primjerice: reumatoidni artirits, psorijaza, ulcerativni kolitis, Cronova bolest, smrt stanica mozga izazvana udarom, ankilozni spondilitis, fibromialgija i autioimune bolesti kao što je astma, multipla skleroza, dijabetes tipa I, sistemski eritematozni lupus, skleroderma, sistemska skleroza i Sjoerensov sindrom.

Izum također prikazuje metode identifikacije spojeva korisnih za tretman pacijenta koji ima imunoupalni poremećaj. Metoda uključuje sljedeće korake: dovođenje u doticaj imunih stanica in vitro s (i) imunomodulirajućim spojem odabranim iz skupine tetrasupstituiranih pirimidopirimidina koji imaju formulu (I) ili kortikosteroidom, te (ii) sa spojem kandidatom, te određivanje je li je imuni odgovor relativno modificiran na (a) imune stanice koje su došle u doticaj s imunomodulirajućim spojem ali nisu došle u dotican s spojem kandidatom, te (b) imune stanice koje su došle u doticaj sa spojem kandidatom ali ne s imunomodulirajućim spojem. Spoj kandidat koji povećava imuni odgovor prema kontroli, a kad se spoji s imunomodulirajućim spojem ili kortikosteroidom, može biti koristan za tretman pacijenta koji ima upalni poremećaj.

Spojevi korisni u izumu uključuju one ovdje opisane u bilo kojem farmaceutski pirhvatljivom obliku, uključujući izomere kao što su dijastereomeri i enantiomeri, soli, sovalti i njihovi polimorfi, kao i racemične smjese ovdje opisanih spojeva.

"Heterocikički spoj" označuje bilo koju cikličku molekulu u kojoj je jedan ili više atoma prstena nisu ugljik. Heterociklički spojevi preferirano imaju jedan ili dva prstena u strukturi. Preferirani heteroatomi su N, O i S. Svaka prstenasta struktura heterocikličkog spoja sastoji se od 3-10 atoma, preferirano od 4-8 atoma, a najpreferiranije od 5-7 atoma. Nije neophodno da svaka struktura prstena sadrži heteroatom s tim da je heteroatom prisutan najmanje u jednom prstenu. Preferirani heterocikli su primjerice: beta-laktami, furani, tetrahidrofurani, piroli, pirolidini, tiofeni, tetrahidrotioofeni, oksazoli, imidazolidin, indol, gvanin i fenotiazin.

"Tretman" označuje davanje ili prepisivanje farmaceutskog pripravka za tretman ili prevenciju upalne bolesti.

"Pacijent" označuje bilo koju životinju (npr. čovjeka).

Termin "imunoupalni poremećaj" sadrži razna stanja uključujući autoimune bolesti. Imunoupalni poremećaji razaraju zdrava tkiva upalnim procesom. Primjeri imunoupalnih poremećaja uključuju: reumatoidni artirits, psorijaza, ulcerativni kolitis, Cronova bolest, smrt stanica mozga izazvana udarom, ankilozni spondilitis, fibromialgija i autioimune bolesti kao što je astma, multila skleroza, dijabetes tipa I, sistemski eritematozni lupus, skleroderma, sistemska skleroza i Sjoerensov sindrom.

"Kortikosteroid" označuje prirodni ili sintetski steroidni hormon koji se može izvesti od kolesterola i karakteriziran je hidriranom ciklopentanperhidro-fenantrenskim sustavom prstena. Prirodni kortikosteroidi se općenito dobivaju iz adrenalnog korteksa. Sintetski kortikosteroidi se mogu halogenirati. Funkcionalne skupine potrebne za aktivnost uključuju dvostruku vezu δ4 i C3 keton, te C20 keton. Kortikosteroidi mogu imati glukorotikoidnu i/ili mineralkortikoidnu aktivnost.

Primjeri kortikosteroida obuhvaćaju: algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilpredniso-lon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukor-tolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandro-stendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halo-predon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksi-deksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, te vortmanin. Poželjno je da kortikosteroid jeste fludrokortizon ili prednisolon.

"Učinkovita količina" označuje količinu spoja u kombinaciji iz izuma potrebnu za tretman ili prevenciju imunoupalne bolesti. Učinkovita količina aktivnog spoja(eva) korištenog u ovom izumu za trerapijski tretman stanja uzrokovanih ili doprinosom upalnoj bolesti, a koja se mijenja ovisno o načinu davanja, starosti, težini i općem zdravlju pacijenta. Liječnik ili veterinar če konačno odabrati odgovarajuću količinu u razini doziranja. Takva količina se navodi kao učinkovita količina.

Termin "količina koja smanjuje citokin" označuje količinu kombinacije koja će uzrokovati smanjivanje in vivo prisutnosti ili razine proinflamatornog citokina, a kada je dan pacijentu za profilaksu ili terapijski tretman imunoupalnog poremećaja produkcije citokina.

Ostale karakteristike i prednosti izuma će biti očite iz sljedećeg detaljnog opisa u uz zahtjeva.

Detaljni opis

Mi smo našli da kombinacija tetrasupstituiranih pirimidopirimidina s kortikostroidom ima značajni učinak smanjivanja TNFα na stimulirane bijele krvne stanice. Posebno se učinkovite kombinacije dipiridamola s fludrokortizonom i dipiridamola s prednisolonom. Stoga, kombinacija tetrasupstituiranig pirimidopirimidina s kortikostroidom lijeka je korisna za tretman imunoupalnih poremećaja.

Dipiridamol

Dipiridamol (2,6-bis(dietilamino)-4,8-dipiperidinopirimido(5,4-d)pirinidin) je tetrasupstituirani pirimidopirimidin koji se koristi kao inhibitor trombocita, npr. za sprječavanje tvorbe ugrušaka krvi nakon operacije srčanog zaliska i za smanjivanje smrtnosti povezane s poremećajem zgrušavanja uključujući infarkt miokrda i cereblalni infarkt. Tipično antikoagulacijska terapija (profilaksa i tretman) se postiže davanjem piridamola pri oko 75-200 mg b.i.d, t.i.d, ili q.i.d samog ili u kombinaciji s aspirinom.

Tetrasupstituirani pirimidopirimidini

Tetrasupstituirani pirimidopirimidini su strukturni analozi koji mogu zamijeniti dipiridamol u metodama i pripravcima iz ovog izuma. Tetrasupstituirani pirimidopirimidini imaju opću strukturu:

[image]

u kojoj svaki Z i svaki Z' neovisno jeste N, O, C, [image] , [image] , ili [image] ,

Kada Z ili Z' jeste O ili [image] , tada p=1, kada Z ili Z' jeste N, [image] ili [image] , tada p=2, a kada Z ili Z' jeste C, tada p=3.

Svaki R1 jeste neovisno X, OH, N-alkil, razgranata ili nerazgranata alkilna skupina ima 1 do 20 atoma ugljika, ili je heterocikl. Alternativno kada je p>1, dvije R1 skupine od zajedničkih Z ili Z' atoma u kombinaciji jedan s drugim mogu predstavljati -(CY2)k- u kojoj k jeste cijeli broj između 4 i 6, uključujući. Svaki X neovisno jeste Y, CY3, C(CY3)3, CY2CY3, (CY2)1-5OY, supstituiran ili nesupstituirani cikloalkan strukture CnY2n-1 pri čemu n=3-7 uključivo. Svaki Y je neovisno H, F, Cl, Br ili I.

U posebna korisnom tetrasupstituiranim pirimidopirimidinima R1 je supstituirani ili nesupstituirani furan, purin ili primidin, (CH2CH2OY), (CH2CH(OH)CH2OY), (HCH2CH(OH)CH2CX3), ((CH2)nOY), pri čemu n=2-5, [image] , ili [image] .

U drugim korisnim tetrasupstituiranim pirimidopirimidinima svaki Z jeste N i kombinacija dvije povezane R1 skupine jeste -(CH2)5- a svaki Z' jeste N a svaka povezana R1 skupina jeste -CH2CH2OH.

Primjeri tetrasupstituiranih pirimidopirimidina koji su 2,6-disupstiotuirani 4,8-dipiperidinopirimido(5,4-d)pirinidini koji primjerice uključuju mopidamol, dipiridamol dipiridamol monoacetat, NU3026 (2,6-di-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi-4,8-di-piperidinopirimidopirimidin, NU3059 (2,6-bis-(2,3-dimetil-oksipropoksi-4,8-di-piperidinopirimidopirimidin, NU3060 (2,6-bis-[N,N-di(2-metoksi)etil]-4,6-di-piperi-dinopirimidopirimidin), te NU3076 (2,6-bis(dietil-amino)-4,8-di-4-metoksibenzil-amino-pirimidopirinidin) (vidi primjerice Curtin et al. Br. J. Cancer 80:1738-176, 1999).

Terapija

Kombinacijsjka terapija se prema izumu može izvesti sama ili skupa s drugom terapijom i može se izvoditi doma, u ambulanti liječnika, u klinici te u bolnici. Tretman općenito počinje u bolnici tako da liječnik može iz blizine motriti terapijski učinak i po potrebi izvesti prilagodbe. Trajanje kombinacijske terapije ovisi o vrsti tretiranog imunoupanog poremećaja, starosti i stanju pacijenta, stupnju i tipu bolesti pacijenta te kako pacijent reagira na tretman. Uz to, osoba kod koje postoji veći rizik od razvitka imunoupalnog poremećaja (npr. osoba koja ima genetsku predispoziciju na upalni poremećaj) može primiti profilaktički tretman za inhibiciju ili odgodu upalnog odgovora.

Doziranje, učestalost i način davanja svake komponente kombinacije se može neovisno kontrolirati. Primjerice, jedan spoj može biti dan oralno tri puta dnevno, dok se drugi spoj može davati intramuskularno jedanput dnevno. Kombinacijska terapija se može davati u ciklusima davanja i nedavanja koji uključuju periode odmora tako da se pacijentovo tijelo može oporaviti od još neviđenih nuspojava. Spojevi se također može formulirati zajedno tako da se spojevi isporuče jednim davanjem.

Formulacija farmaceutskih pripravaka

Davanje svakog spoja kombinacije se može izvesti bilo kojim pogodnim načinom koja ima rezultat da koncentracija spoja koji je kombiniran s drugom komponentom ima antiupalni učinak nakon dostizanja ciljanog mjesta. Spoj može sadržavati bilo koju pogodnu količinu bilo kojeg pogodnog nosača koji je općenito je prisutan u količini od 1-95% po masi ukupne mase pripravka. Pripravak može biti u obliku doze koja je pogodna za oralno, parenteralno (npr. intravenzono, intramuskuparno, subkutalno), rektalno, transdermalno, nazalno, vaginalno, inhalacijsko ili okularno davanje. Stoga pripravak može biti u obliku npr. tableta, kapsula, pilula, prašaka, granula, suspenzija, emulzija, otopina, gelova uključujući hidrogelove, pasta, masti, krema, flastera, obloga, pogodnom za naprave za isporuku, supozitorija, klistira, implanta, sprejeva ili aerosola. Farmaceutski pripravci se mogu formulirati prema uobičajenoj farmaceutskoj praksi (vidi npr. Remington: Scince and Practice in Pharmacy, (19th izd.) izd. A. R. Gennaro, 1995, Mack Publishing Company, Easton, P. A. i Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, izd. J. Swarbrick i J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekket, New York.

Farmaceutski pripravci prema izumu se mogu formulirati da oslobađaju spoj odmah nakon davanja ili u bilo kojem prethodno određenom periodu vremena nakon davanja. Druga vrsta pripravaka je općenito poznate kao formulacije s kontroliranim oslobađanjem, a koje uključuju (i) formulacije koje daju dovoljno konstantnu koncentraciju lijeka u tijelu u produljenom periodu vremena; (ii) formulacije koje nakon prethodno određenog vremena odgađanja daju dovoljno konstantnu koncentraciju lijeka u tijelu u produljenom periodu vremena; (iii) formulacije koje zadržavaju djelovanje lijeka u prethodno određenom periodu vremena a održavanjem relativno konstantne razine lijeka u tijelu uz istovremeno minimiziranje neželjenih nuzefekata povezanih s fluktuacijom razine aktivne tvari u plazmi (kinetički profil pile); (iv) formulacije koja lokaliziraju djelovanje lijeka npr. smještanjem pripravka s kontroliranim oslobađanjem u susjedstvo ili u oboljelo tkivo ili organ; te (v) formulacije koje ciljaju djelovanje lijeka upotrebom nosača ili kemijskih derivata da se isporuči lijek u određeni tip ciljanih stanica.

Davanje spojeva u formulaciji s kontroliranim oslobađanjem je posebno preferirano u slučajevima kada spoj sam ili u kombinaciji ima (i) uski terapijski indeks (npr. razlika između koncentracije u plazmi koja vodi štetnim nuzefektima ili toksičnoj reakciji i koncentracija u plazmi koja ima terapijski učinak je mala; općenito je terapijski indeks, TI, definiran kao omjer medijalne letalne doze (LD50) i medijalne efektivne doze (ED50); (ii) uski "prozor" apsorpcije u gastro-intestilnalnom traktu; ili (iii) kratko biološko poluvrijeme, tako da je potrebno učestalo doziranje tijekom dana da se održi terapijska razina u plazmi.

Mogu se koristiti mnoge strategije da se dobije kontrolirano oslobađanje u kojem brzina oslobađanja nadvlada brzinu metabolizma terapijskog spoja. Primjerice, kontrolirano oslobađanje se može dobiti odgovarajućim odabirom parametara formulacije i sastojaka, uključujući npr. upotrebu odgovarajućih pripravaka s kontroliranim oslobađanjem i upotrebu presvlačenja. Primjeri uključuju jednostruke ili višestruke jedinične pripravke tableta ili kapsula, uljaste otopine, suspenzije, emulzije, mikrokapsule, mikrosfere, nanočestice, flastere i liposome.

Čvrsti oblici doze za oralnu upotrebu

Formulacije za oralnu upotrebu uključuju tablete koje sadrže aktivni sastojak(ke) u smjesi s netoksičinim farmaceutski privatljivim ekscipijensima. Ti ekscipijensi mogu biti primjerice inertni razrjeđivači ili punila (npr. saharoza, sorbitol, šećer, manitol, mikrokristalna celuloza, škrobovi uključujući škrob krumpira, kalcijev karbonat, natrijev klorid, laktoza, kalcijev fosfat, kalcijev sulfat ili natrijev fosfat); granulirajuća i dezintegrirajuća sredstva (npr. derivati celuloze uključujući mikrokristalnu celulozu, škrobovi uključujući škrob krumpira, natrijevu kroskaramelozu, alginate ili algininsku kiselinu) veziva (npr. saharoza, glukoza, sorbitol, algininska kiselina, natrijev alginat, želatina, škrob, preželatinizirani škrob, mikrokristalna celuloza, magnezijev aluminijev silikat, natrijeva karboksimetilceluloza, hidroksipropil-metilceluloza, etilceluloza, polivinilpirolidon ili polietilen-glikol), te klizna sredstva, i antiadhezivna sredstva (npr. magnezijev stearat, cinkov stearat, stearinska kiselina, silikati, hidrirana biljna ulja ili talk). Ostali farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi mogu biti bojila, sredstva za poboljšanje okusa, omekšivači, ovlaživači, puferi i slično.

Tablete mogu biti nepresvučene ili mogu biti presvučene poznatim tehnikama što može odgoditi raspadanje i apsorpciju u gastointestinalni trakt i stoga dovesti do odgođenog djelovanje u duljem periodu vremena. Presvlačenje se može prilagoditi za oslobađanje aktivnog lijeka na prethodno određen način (npr. da se postigne formulacije s kontroliranim oslobađanjem) ili se može prilagoditi da se aktivna tvar ne oslobađa do prolaska u stomak (enteričko presvlačenje). Presvlaka može biti od šećera ili film (npr. zasnovan na hidroksipropil-metilcelulozi, metilcelulozi, metil-hidroksimetilcelulozi, hidroksi-propil-celulozi, karboksimetil-celulozi, akrilatnim kopolimerima, polietilengliko-lima i/ili polivinilpirolidonu) ili enteričko presvlačenje (zasnovano npr. na kopolimeru metakrilne kiseline, celuloza-acetat ftalatu, hidroksimetilceluloza-ftalatu, hidroksipropil-metilceluloza-acetat-sukcinatu, polivinil-acetat ftalatu, šelaku i/ili etil-celulozi). Nadalje, mogu se koristiti materijali za odgađanje kao što je npr. glicerio-monostearat ili gliceril-distearat.

Čvrsto pripravci tablete mogu uključivati presvlaku podešenu da zaštiti pripravak od neželjenih kemijskih promjena (npr. kemijsko raspadanje prije oslobađanju aktivne tvari lijeka. Presvlaka se može primijeniti na čvrsti oblik doze na sličan način kao što je opisano u Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, supra.

Dva spoja se mogu miješati zajedno u tableti ili mogu biti razdijeljeni. U jednom primjeru prvi spoj je sadržan unutar tablete, a drugi izvan, tako da se znatni dio drugog spoja oslobađa prije oslobađanja prvog spoja.

Formulacije za oralnu upotrebu mogu biti u obliku tableta za žvakanje ili tvrdih želatinskih kapsula, pri čemu je aktivna tvar miješana s inertnim čvrstim razrjeđivačem (npr. škrobom krumpira, laktozom, mikrokristalnom celulozom, kalcijevim karbonatom, kalcijevim fosfatom ili kaolinom) ili u obliku mekih želatinskih kapsula, pri čemu je aktivna tvar miješana s vodenim ili uljni medijem, primjerice uljem kikirikija, tekućim parafinom ili maslinovim uljem. Prašci i granulati se mogu pripraviti upotrebom gore spomenutih sastojaka kao kod tablete i kapsula, a na uobičajeni način upotrebom npr. miksera, fluidizatora ili opreme za sprej-sušenje.

Oblici oralne doze s kontroliranim oslobađanjem

Pripravci s kontroliranim oslobađanjem za oralnu upotrebu mogu npr. biti konstruirani da oslobode aktivni lijek kontroliranim oslobađanjem i/ili difuzijom aktivne tvari lijeka.

Kontrolirano oslobađanje ili difuzija se može postići odgovarajućim presvlačenjem tableta, kapsula, peleta ili granulata formulacije spojeva, ili ugradnjom spoja u odgovarajuću matricu. Presvlačanje za kontrolirano oslobađanje može obuhvaćati jedan ili više gore spomenutih tvari za presvlačenje i/ili npr. šelak, pčelinji vosak, glikovaks, ricinusov vosak, sterailni alkohol, gliceril-nonostearat, gliceril-distearat, glicerol-palmitostearat, etil-celuloza, aktilna smola, di-polioctenu kiselinu, celuloza-acetat-butrilat, polivinil-klorid, polivinil-acetat, vinil-pirolidon, polietilen, polimetakrilat, metilmetakrilat, 2-hidroksimetakrilat, metakrilat-hidrogel, 1,3-butilen-glikol, etilen-glikol-metakrilat i/ili polietilenglikoli. U metričnim formulacijama za kontrolirano oslobađanje materijal materice može također obuhvaćati npr. hidriranu metilcelulozu, karnauba vosak i stearilni alkohol, karopol 93, silikon, gliceril-tristearat, metil-akrilat metil-metakrilat, polivinil-klorid, polietilen i/ili halogenirani fluorougljik.

Pripravak s kontroliranim oslobađanjem sadrži jedan ili više spojeva iz prijavljenih kombinacija se također može biti u obliku plutajuće tableta ili kapsula (tj. tablete ili kapsule koje nakon oralnog davanja plutaju na površini sadržaja želuca u nekom periodu vremena). Formulacija spoja(eva) u plutajućim tabletama se može izvesti granuliranjem smjese lijeka s ekscipijensom i 20-75% w/w hidrokoloidom kao što je hidroksietil-celuloza, hidroksipropil-celuloza ili hidrosipropilmetil-celuloza. Dobiveni granulati se zatim mogu komprimirati u tablete. Dolaskom u dodir s želučanom tekućinom tableta tvori za vodu nepropusnu gel barijeru oko površine. Ta gel barijera održava gustoću manjom od jedan i stoga dozvoljava tableti da ostane plutati u želučanoj tekućini.

Tekućine za oralno davanje

Prašci, disperzivni prašci ili granule pogodne za pripravke vodene suspenzije nakon dodatka vode su pogodni oblici doze za oralno davanje. U formulaciji za suspenziju aktivni sastojak je u smjesi sa sredstvom za dispergiranje i ovlaživačem, sredstvom za suspenziju i s jednim ili više prezervativa. Pogodna sredstva za disperziju su primjerice prirodni fosfatidi (npr. lecitin ili produkti kondenzacije etilen-oksida s masnim kiselinama, dugolančani alifatski alkoholi ili esterski derivati masnih kiselina) i heksitol ili anhidrid heksitola (npr. polioksietilen-stearat, polioksietilen-sorbitan-monooleat, i slično). Pogodna sredstva za suspenziju su primjerice natrijeva karboksimetilceluloza, metilceluloza, natrijev alginat i slično.

Parenteralni pripravci

Farmaceutski pripravak se može također davati parenteralno injekcijomm infuzijom ili implantacijom (intravenozno, intramuskularno, subkutalno ili slično) u oblicima doze, formulacijama ili putem pogodne naprave za isporuku ili implantima koji sadrže uobičajene netoksične farmaceutski prihvatljive nosače i adjuvanse. Formulacija i priprava takvih pripravaka je dobro poznata stručnjaku za farmaceutske formulacije. Formulacije se mogu naći u Remington: The Science and Practice od Pharmacy, supra.

Pripravci za parenteralnu upotrebu mogu biti u jediničnom obliku doze (npr. ampule s jednom dozom) ili bočice koje sadrže nekoliko doza u koje može biti dodan pogodan prezervativ (vidi niže). Pripravak može biti u obliku otopine, suspenzije, emulzije, infuzijske naprave i naprave za isporuku za implantaciju ili može biti prisutan kao suhi prašak kojem će se dodati voda ili drugi pogodni vehikul prije upotrebe. Osim aktivnog lijeka (lijekova), pripravci mogu sadržavati pogodne parenteralno prihvatljive nosače i/ili ekscipijense. Aktivni lijek (lijekovi) može biti ugrađen u mikrosfere, mikrokapsule, nanočestice, liposome ili slično, a za kontrolirano oslobađanje. Nadalje, pripravak može sadržavati sredstva za suspenziju, solubilizatore, stabilizatore, sredstva za podešavanje pH i/ili dispergivna sredstva.

Kao što je gore pokazano, farmaceutski pripravci prema izumu mogu biti u obliku koji je pogodan za sterilnu injekciju. Da se pripravi takav pripravak pogodni aktivni lijek(ovi) je otopljen ili suspendiran u parenteralno prihvatljivom tekućem vezikulu. Među prihvatljivim vezikulina i otapalima koji se mogu koristiti je voda, voda podešena na pogodni pH dodatkom odgovarajuće količine klorovodične kiseline, natrijevog hidroksida ili pogodnog pufera, 1,3-butandiola, Rigerove otopine i izotonične otopine natrijeva klorida. Vodena formulacija može također sadržavati jedan ili više prezervativa (npr. metil, etil ili n-propil p-hidroksibenzoat). U slučajevima u kojima je jedan od spojeva samo slabo topljiv u vodi, može se dodati sredstvo za povećanje topljivosti ili solubilizator, ili otapalo može sadržavati 10-60% w/w propilen-glikola ili slično.

Parenteralni pripravci s kontroliranim oslobađanjem

Parenteralni pripravci s kontroliranim oslobađanjem mogu biti u obliku vodenih suspenzija, mikrosfera, mikrokapsula, magnetskih mikrosfera, uljnih otopina, uljnih suspenzija ili emulzija. Alternativno, aktivni lijekovi mogu biti ugrađeni u biokompatibilne nosače, liposome, nanočestice, implante ili infuzijske naprave.

Materijali za pripravu mikrosfera i/ili mikrokapsula su npr. biorazgradljivi ili bioerozivni polimeri kao što je poligalaktin, poli-(izobutilcijanoakrilat), poli-(2-hidroksietil-1-glutaminat) te poli(mliječna kiselina). Biokompatibilni nosači koji se mogu koristiti pri formulacije parenteralne formulacije s kontroliranim oslobađanjem su ugljikovodici (npr. dekstrani), proteini (npr. albumin), lipoproteini ili antitijela. Materijali za implante mogu biti nebiorazgradljivi (polimetil-siloksan) ili biorazgradljivi (npr. poli(kaprolakton), poli(mliječna kiselina), poli(glikolna kiselina) ili poli(ortoesteri)).

Rektalni pripravci

Za rektalnu primjenu pogodni oblici doze pripravaka uključuju supozitorije (tipa emulzije ili suspenzije), rektalne želatinske kapsule (otopine ili suspenzije). U tipičnoj formulaciji supozitorija, aktivni lijek(ovi) je spojen s pogodnom farmaceutsko prihvatljivom bazom za supozitorij kao što je kakao-maslac, esterificirane masne kiseline, glicerinirana želatina i različite u vodi topljive ili dispergivne baze kao što su polietilen-glikoli te esteri polioksietile-sorbitana i masne kiseline. Ugraditi se mogu različiti aditivi, pojačivači ili površinski aktivne tvari.

Pripravci za inhalaciju

Za davanje inhalacijom tipično oblici doze obuhvaćaju nazalne sprejeve i aerosole. U tipičnoj nazalnoj formulaciji aktivna tvar(i) je otopljena ili dispergirana i pogodnom vezikulu. Farmaceutski prihvatljivi vezikuli i ekscipijensti (kao i ostali farmaceutski prihvatljivi materijali prisutni u pripravku kao što je razrjeđivač, pojačivač, sredstva za poboljšanje okusa i prezervativi) su odbrani prema uobičajenoj farmaceutskoj praksi na način koji stručnjak podrazumijeva pri formulaciji farmaceutskih tvari.

Perkutanlni i topički pripravci

Farmaceutski pripravci mogu također biti dani topički na kožu za perkutalnu apsorpciju u dozi oblika za formulaciju koja sadrži konvnencionalne netoksične farmacetuski prihvatljive nosače i ekscipijense uključujući mikrosfere i liposome. Formulacije uključuju kreme, masti, losione, linimente, gelove, hidrogelove, otopine, suspenzije, stikove, sprejeve, paste, flastere i ostale vrste transdermanlih sustava za isporuku. Farmaceutski prihvatljivi nosači ili ekscipijensi mogu uključivati emulgatore, antioksidanse, pufere, prezervative, ovlaživače, pojačivače prodiranja, sredstva za tvorbu kelata, sredstva za tvorbu ćgela, baze za masti, mirise i sredstva za zaštitu kože.

Primjeri emulgatora su prirodne gume (npr. guma akacija ili guma tragakant) i prirodni fosfatidi (npr. lecitin iz soje i derivati sorbitan-monooleata). Primjeri antioksidansa su butilirani hidroksianisol (BHA), askorbinska kiselina i njeni derivati, tokoferol i njegovi derivati, butilirani hidroksianisol i cistein. Primjeri prezervativa su parabeni kao što je metil ili propil p-hidroksibenzoat i benzalkonijev klorid. Primjeri ovlaživača su glicerin, propilen-glikol, sorbitol i urea. Primjeri pojačivača prodiranja su propilen-glikol, DMSO, trietanolamin, N,N-dimetilacetamid, N,N-dimetilformamid, 2-pirolidon i njegovi derivati, tetrahidro-furfurilni alkohol i AZONETM. Primjeri sredstva za tvorbu kelata su natrijeva EDTA, limunska kiselina i fosforna kiselina. Primjeri sredstava za tvorbu gela su CARBOPOLTM, derivati celuloze, bentonit, alginati, želatina i polivinilpirolidon. Primjeri baze za masti su pčelinji vosak, parafin, cetil-palmitat, biljna ulja, esteri sorbitana ili masnih kiselina (Span), polietilen-glikol i produkti kondenzacije između estera sorbitana i masnih kiselina i etilen-oksida (npr. polioksietilensorbitan-monooleat (TWEENTM)).

Gore opisani farmaceutski pripravci za topičko davanje na kožu se mogu također koristiti topičkim načinom na dijelove tijela bliske onima koje treba tretirati. Pripravci mogu bit podešeni za izravnu primjenu ili za uvođenje u otvor(e) tijela (npr. rektalno, uretalno, vaginalno ili oralno). Pripravci se mogu primijeniti pomoću posebnih naprava za isporuku lijeka kao što su flasteri, umeci, spužve, vrpce i ostali pogodni oblici pogodnog fleksibnilnog materijala.

Perkutanlni i topički pripravci s kontroliranim oslobađanjem

Postoji nekoliko načina da se dobije kontrola brzine oslobađanja i transdermalnog prolaza lijeka uključujući: membranom održavane sustave, adhezivne sustave kontrolirane difuzijom, matrične dispergirane sustave i sustave mikrospremnika. Perkutalni i/ili topički pripravak s kontroliranim oslobađanjem se može dobiti upotrebom pogodne mješavine gore navedenih metoda.

U membranom održavanom sustavu aktivni lijek je prisutan u spremniku koji je potpuno kapsuliran u prostoru koji je dobiven od laminata nepropusnog za lijek kao što je metalni plastični laminat, a polimerna membrana za kontrolu brzine kao što je mikroporozna ili neporozna polimerna membrana (npr. kopolimer etilena i vinil-acetata). Aktivni spoj je samo oslobađa preko polimerne membrane koja kontrolira brzinu oslobađanja. U spremniku lijeka aktivna tvar može biti dispergirana u čvrstoj polimernoj matrici ili suspendirana u viskoznom tekućem mediju kao što je silikonska tekućina. Na vanjskoj površini polimerne membrane nanosi se tanki sloj adhezivnog polimera da se postigne intimni kontakt transdermalnog sustava s površinom kože. Adhezivni polimer je preferirano hipolargijski polimer koji je kompatibilan s aktivnim lijekom.

U adhezivnom sustavu s kontroliranom difuzijom spremnik aktivnog lijeka je načinjen izravnom disperzijom aktivnog lijeka u adhezivni polimer te nanošenjem adheziva koji sadrži aktivni lijek na ravnu površinu metalno plastične ploče koja je uglavnom nepropusna na lijek, a da se dobije sloj lijeka u spremniku. Matrični dispregirani sustav je karakteriziran spremnikom za aktivni lijek koji nastaje homogeno dispergiranom aktivnom tvari u hidrofilnoj ili lipofilnoj polimernoj matrici te oblikovanjem polimera koji sadrži lijek na disk koji ima dobro definiranu veličinu površine i debljinu. Adhezivni polimer se nanosi na obod da se dobije traka adheziva oko diska.

U sustavu mikrospremnika je spremnik aktivne tvari nastao prvo suspendiranjem čvrstog lijeka u vodenoj otopini u vodi topljivog polimera, te disperzijom suspenzije lijeka u lipofilnom polimeru da se dobije više mikroskopskih sfera za spremnik lijeka.

Doziranja

Doziranje svakog spoja iz prijavljene kombinacije ovisi o nekoliko faktora, uključujući sljedeće: o metodi davanja, vrsti tretirane bolesti, ozbiljnosti bolesti, da li se radi o tretiranju ili prevenciji bolesti, starosti, težini i zdravlju tretirane osobe. Uz to, farmakogenomna (efekt genotipa na farmakokinetiku, farmakodinamiku ili učinkovitost terapijskog profila) informacija o određenom pacijentu može utjecati na korištenu dozu.

Kao što je gore opisano, spoj se može davati oralno u obliku tableta, kapsula, eliksira ili sirupa ili rektalno u obliku supozitorija. Parenteralno davanje spoja je pogodno izvesti primjerice u fiziološkoj otopini ili sa spojem ugrađenim u liposome. U slučajevima kad sam spoj nije dovoljno topljiv, može se koristiti solubilizator kao što je etanol. Dolje je za ilustraciju opisano doziranje dipiridamola i fludrokortizona.

Putevi davanja

Za oralno, intramuskularno, subkutalno, topičko, inhalacijsko, rektalno, vaginalno ili oftalmološko davanje tetradupstituiranog pirimidopirimidina, doza je normalno oko 0.5-800 mg/danu, preferirano oko 18-600 mg/danu, preferiranije oko 5-400 mg/danu. Davanje može biti jedan do četiri puta dnevno od jednog dana do godinu dana, ili čak cijeli život pacijenta. Kronično dugotrajno davanje će biti indicirano u mnogim slučajevima. Doze do 1600 mg/danu mogu biti neophodne. Za intravenozna davanje tetrasupstituiranog pirimidopirimidina doza je normalno oko 0.1-200 mg/danu, preferirano oko 0.5-150 mg/danu, preferiranije oko 1-100 mg/danu. Davanje može biti jedan do četiri puta dnevno. Sistemsko doziranje će dovesti do ustaljene koncentracije u plazmi preferirano od 0.1-7.0 μM, preferiranije od 0.5-5.0 μM, te najpreferiranje 1.0-2.0 μM.

Doza kortikosteroida za upotrebu u kombinaciji s tetradupstituiranim pirimidopirimidinom je normalno oko 0.1-1500 mg/danu, preferirano oko 0.5-30 mg/danu, preferiranije oko 0.5-10 mg/danu. Davanje može biti jednom do četiri puta dnevno od jednog dana do godinu dana, ili čak cijeli život pacijenta. Kronično dugotrajno davanje će biti indicirano u mnogim slučajevima. Doze do 3000 mg/danu mogu biti neophodne.

Sljedeći primjeri su za ilustraciju izuma. Nije namjera da ograniče izum na bilo koji način.

Primjer 1

Priprava kombinacije para spojeva miješanjem serijski razrjeđenih matrica

Osnovne otopine amoksapina 16 mg/mL dipiridamola i 1.6 mg/mL fluorkortizon-acetata (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, kataloški brojevi D9766 i F6127) su pripravljene u dimetilsulfoksidu (DMSO). Na ploču od polipropilena s 384 jažica za dipiridamol je dodano po 25 μL koncentrirane osnovne otopine kolonama 3, 9 i 15 (redovi C do N) kojima je prethodno dodano 75 μL bezvodnog DMSO. Koristeći TomTec Quadra Plus napravu za rukovanje tekućinom, dipiridamolna osnovna otopina je serijski razrjeđivana dvostruko četiri puta u susjedne kolone (4-7, 10-13, 16-19). Šesta kolona (8, 14 i 20) nije primila nikakav spoj i služila je kao kontrola s vezikulom. Na ploču od polipropilena s 384 jažica za fluorkortizon je dodano po 25 μL koncentrirane osnovne otopine u odgovarajuće jažice (red C, kolone 3-8, red C kolone 9-14, red C, kolone 15-20, red I, kolone 3-8, red I kolone 9-14, red I kolone 15-20). Ploči je prethodno dodano 75 μL bezvodnog DMSO. Koristeći TomTec Quadra Plus napravu za rukovanje tekućinom, 25 μL je serijski razrijeđeno dvostruko četiri puta u susjedne redove (redovi D-G i J-M). Šesti red (H i N) nije primionikakav spoj i služila je kao kontrola s vezikulom. Ploče se zatvorene i čuvane na -20 °C do upotrebe.

Konačna dipiridamol/fludrokortizon kombinacijska ploča je generirana prijenosom 1 μL iz svake jažice s amoksapinske i prednisolonske ploče na ploču koja sadrži po 100 μL medija (RPMI; Gibco BRL, #11875-085), 10% serum goveđeg fetusa (Gibco BRL, #25140-097), 2% Penicilin/Streptomicin (Gibco BRL, #15140-122)), a upotrebom TomTec Quadra Plus napravu za rukovanje tekućinom. Ta ploča za razrjeđivanje je zatim miješana i 10 μL alikvota je prenešeno na konačnu ploču za testiranje, kojoj je prethodno dodan 40 μL/jažici PRMI medija koji sadrži odgovarajući stimulant za aktiviranje TNFα izlučivanja (vidi niže).

Primjer 2

Test aktivnosti kombinacije dipiridamola i fludrukortizona u smanjivanju TNFα

Razrijeđena matrica spoja je testirana upotrebom TNFα ELISA metode. Ukratko, po 100 μL suspenzije razrijeđenih mononuklearnih stanica humane periferne krvi sadržanih u polistirenskoj ploči s 384 jažica (NagleNuc) su stimulirane da izlučuju TNFα djelovanjem forbol-12-miristat-13-acetata (Sigma) konačne koncentracije 10 ng/mL i 750 ng/�μL ionimicina (Sigma). Različite koncentracije svakog testiranog spoja su dodane u vrijeme stimulacije. Nakon 16-18 sati inkubacije pri 37 °C u vlažnom inkubatoru, ploča je centrifugirana i supernatant je prenešen u bijelu polistirensku ploču s 384 jažica (NagleNunc, Maxisorb) presvučenih s anti-TNF antirijelima (PharMingen, #18631D). Nakon dva sata inkubacije ploča je isprana (Tecan Power Washer 384) fiziološkom otopinom s fosfatnim puferom (PBS) koja sadrži 0.1% Tween 20 (polioksietilen-sorbitan-monolauerat) i inkubirano je još jedan sat s drugim anti-TNF antitijelom koji je bio obilježen biotinom (PharMingen, 18642D) i peroksidazom iz hrena (HRP) povezane na strepavidin (PharMingen, #13047E). Nako što je ploča isprana a 0.1% Twenn 20/PBS, HRP supstrat (koji sadrži luminol, vodikov peroksid i pojačivač kao što je para-jodfenol) je dodan u svaku jažicu i jakost svjetla je mjerena upotrebom LJL Analyse luminometer. Kontrolne jažice su sadržavale ciklosporin A (Sigma) konačne koncetracije 1 μg/mL.

Dipiridamol i fludrokortizon su skupa mogli smanjiti izlučivanje TNFα u krvi inducirano forbol-12-miristat-13-acetatom i jodomicinom. Kao što je prikazano na Tablicama 1 i 2, dipiridamol može pojačati odgovor doze fludrokortizon 60 puta. Pri koncentraciji od 97 nM, sam fludrokortizon može inhibirati izlučivanje THFα za 39%. Dodatak 124 nM dipiridamola u koncentraciji od samo 15 nM fludrokortizona, dobivena je inhibicija izlučivanja TNFα za 39% (TAblica 1). Učinkovitost je održavana dok je smanjivanje ukupnog lijeka preko 80% od 97 nM do 163 nM. U prisutnosti 2 μM dipiridamola, postignuta je 50% inhibicija TNFα sa samo nM fludrokortizona. Ta razina inhibicije nije moguća s samim fludrokortizonom pri koncetracijama za koje se očekuje da uzrokuju ozbiljne mineralnokrtokoidno inducirane nuzefekte. Povećanje aktivnosti fludrokortizona pomoću dipiridamolom je opisana pri sekundarnom probiranju (Tablica 2). Ponovo, doza od 495 nM dipiridamola povećala je mogućnost fludrokortizona preko 135 puta. Specifično, 97 nM fludrokortizon sam je potreban da se postigne 52% redukcija izlučivanja TNFα. Slično smanjivanje (9%) je mjereno za kombinaciju od 7 nM fludrokortizon i 495 nM dipiridamola. Nadalje, dodatkom 248 nM dipiridamola uzrokovalo je supramaskmalni učinak na inhibiciju izlučivanje TNFα pri koncentraciji fludrokortizona toliko niskoj kao što je 59 nM.

[image]

[image]

Primjer 3

Priprava kombinacije para spojeva miješanjem serijski razrjeđenih matrica

Matrica dipiridamola i prednisolona je pripravljena prema metodi iz Primjera 1. Početne otopina dipiridamola je bila 16 mg/mL a prednisolona 1.6 mg/mL.

Primjer 4

Test aktivnosti kombinacije dipiridamola i prednisolona u smanjivanju TNFα

Razrijeđena matrica spoja iz Primjera 3 je testirana upotrebom TNFα ELISA metode iz Primjera 2. Rezultati su prikazani u Tablici 3. Zajedno, dipiridamol i prednisolon su mogli smanjiti izlučivanje TNFa u krvi stimulirano forbol-12-miristat-13-acetatom i ionomicinom do veće mjere nego spojevi sami. Specifično, dipiridamol uvelike povećava mogućnost prednisolona. Prednisolon sam pri koncentraciji od 250 nM može smanjiti izlučivanje TNFα za 38%. Ista razina smanjivanja (41%) se može dobiti samo s 1 nM prednisolonom u kombinaciji s 2 μM dipiridamolom. Po predstvlja pomak u sposobnosti prednisolona preko 250 puta. Nadalje, dodatak 2 μM u 250 nM prednisoloin uzrokuje supramaksimalni učinak (57%) u usporedbi sa samim prednisolonom (38%). Kombinacija smanjuje doze prednisolona i dipiridamola i stoga uzrokuje smanjivanje TNFα do razine koje se prije nije mogla dobiti bez velikog rizika od glukokortikoidom induciranih nuzefekata.

[image]

Ostale cjeline

Različite modifikacije i varijacije opisanih metoda i sustava iz izuma će biti očite stručnjacima, a bez skretanja od obujma i duha izuma. Mada je izum opisan u vezi sa specifičnim preferiranim cjelinama, treba razumjeti da izum, a kako je prijavljen, ne treba biti previše ograničen na tako specifične cjeline. Doista, različite modifikacije opisanih načina za izvođenje izuma su očite stručnjacima za molekularnu biologiju i slična polja i namjera je da budu unutar obujma izuma.

Sve gore spomenute publikacije i patentni u citirani u ovoj specifikaciji su ovdje ugrađeni citatom i svaka pojedina publikacija ili patentna aplikacija su specifično i pojedinačno ugrađeni citatom.

Claims (36)

1. Metoda tretmana pacijenta koji ima imunoupalni poremećaj ili pacijenta koji je rizičan za razvitak upalnog poremećaja, naznačeno time da rečena metoda sadrži davanje rečenom pacijentu: (a) kortikosteroid, te (b) spoj koji ima formulu: [image] u kojoj svaki Z i svaki Z' neovisno jeste N, O, C, [image] , [image] , ili [image] , pri čemu jada Z ili Z' jeste O ili [image] , tada p=1, kada Z ili Z' jeste N, [image] ili [image] , tada p=2, kada Z ili Z' jeste C, tada p=3; svaki R1 jeste neovisno X, OH, N-alkil, razgranata ili nerazgranata alkilna skupina koja ima 1 do 20 atoma ugljika, ili je heterocikl, ili kada je p>1, dvije R1 skupine od zajedničkih Z ili Z' atoma u kombinaciji jedan s drugim mogu predstavljaju -(CY2)k- pri čemu k jeste cijeli broj između 4 i 6, uključujući; svaki X neovisno jeste Y, CY3, C(CY3)3, CY2CY3, (CY2)1-5OY, CnY2n-1, pri čemu n=3-7 uključivo, te svaki Y je neovisno H, F, Cl, Br ili I, pri čemu su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid dani istovremeno ili unutar 14 dana, a u količini i za trajanje dovoljno za tretman rečenog pacijenta.

2. Metoda iz patentnog zahtjeva 1, naznačeno time da rečeni spoj jeste 2,6-disupstituirani 4,8-dibenzilaminopirinido[5,4-d]pirimidin.

3. Metoda iz patentnog zahtjeva 1, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol, mopidamol, dipiridamol monoacetat, NU3026 (2,6-di-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi-4,8-di-piperidinopirimidopirimidin), NU3059 (2,6-bis-(2,3-dimetiloksipropoksi)-4,8-di-piperidinopirimidopirimidin), NU3060 (2,6-bis-[N,N-di(2-metoksi)etil]-4,6-di-piperidinopirimidopirimidin), ili NU3076 (2,6-bis(dietilamino)-4,8-di-4-metoksibenzilaminopirimidopirinidin).

4. Metoda iz patentnog zahtjeva 3, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol.

5. Metoda iz patentnog zahtjeva 1, naznačeno time da rečeni kortikosteroid jeste: algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, te vortmanin. algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, ili vortmanin.

6. Metoda iz patentnog zahtjeva 5, naznačeno time da rečeni kortikosteroid jeste prednisolon.

7. Metoda iz patentnog zahtjeva 6, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol.

8. Metoda iz patentnog zahtjeva 1, naznačeno time da su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid dani u razmaku unutar deset dana.

9. Metoda iz patentnog zahtjeva 8, naznačeno time da su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid dani u razmaku unutar pet dana.

10. Metoda iz patentnog zahtjeva 9, naznačeno time da su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid dani u razmaku unutar dvadeset četiri sata.

11. Metoda iz patentnog zahtjeva 10, naznačeno time da su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid dani istovremeno.

12. Metoda iz patentnog zahtjeva 11, naznačeno time da su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid dani u istoj farmaceutskoj formulaciji.

13. Metoda iz patentnog zahtjeva 1, naznačeno time da rečeni imunoupalni poremećaj jeste: reumatoidni artritis, psorijaza, ulcerativni kolitis, Cronova bolest, upalna dermatoza ili smrt stanica mozga izazvana udarom.

14. Metoda iz patentnog zahtjeva 1, naznačeno time da je rečeni spoj dan u količini od 0.5-800 mg/danu, a da je rečeni kortikosteroid dan u količini od 0.1-1500 mg/danu.

15. Metoda iz patentnog zahtjeva 14, naznačeno time da je rečeni spoj dan u količini od 18-600 mg/danu, a da je rečeni kortikosteroid dan u količini od 0.5-30 mg/danu.

16. Metoda iz patentnog zahtjeva 15, naznačeno time da je rečeni kortikosteroid dan u količini od 0.5-10 mg/danu.

17. Farmaceutski pripravak, naznačeno time da sadrži (i) kortikosteroid, te (ii) spoj koji ima formulu: [image] u kojoj svaki Z i svaki Z' neovisno jeste N, O, C, [image] , [image] , ili [image] , pri čemu jada Z ili Z' jeste O ili [image] , tada p=1, kada Z ili Z' jeste N, [image] ili [image] , tada p=2, kada Z ili Z' jeste C, tada p=3; svaki R1 jeste neovisno X, OH, N-alkil, razgranata ili nerazgranata alkilna skupina koja ima 1 do 20 atoma ugljika, ili je heterocikl, ili kada je p>1, dvije R1 skupine od zajedničkih Z ili Z' atoma u kombinaciji jedan s drugim mogu predstavljaju -(CY2)k- pre čemu k jeste cijeli broj između 4 i 6, uključujući; svaki X neovisno jeste Y, CY3, C(CY3)3, CY2CY3, (CY2)1-5OY, CnY2n-1, pri čemu n=3-7 uključivo, te svaki Y je neovisno H, F, Cl, Br ili I; te (iii) farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.

18. Pripravak iz patentnog zahtjeva 17, naznačeno time da rečeni spoj jeste 2,6-disupstituirani 4,8-dibenzilaminopirinido[5,4-d]pirimidin.

19. Pripravak iz patentnog zahtjeva 18, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol, mopidamol, dipiridamol monoacetat, NU3026, NU3059, NU3060 ili NU3076.

20. Metoda iz patentnog zahtjeva 17, naznačeno time da rečeni kortikosteroid jeste: algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, te vortmanin. algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, ili vortmanin.

21. Farmaceutski paket, naznačeno time da sadrži (i) kortikosteroid, te (ii) spoj koji ima formulu: [image] u kojoj svaki Z i svaki Z' neovisno jeste N, O, C, [image] , [image] , ili [image] , pri čemu jada Z ili Z' jeste O ili [image] , tada p=1, kada Z ili Z' jeste N, [image] ili [image] , tada p=2, kada Z ili Z' jeste C, tada p=3; svaki R1 jeste neovisno X, OH, N-alkil, razgranata ili nerazgranata alkilna skupina koja ima 1 do 20 atoma ugljika, ili je heterocikl, ili kada je p>1, dvije R1 skupine od zajedničkih Z ili Z' atoma u kombinaciji jedan s drugim mogu predstavljaju -(CY2)k- pre čemu k jeste cijeli broj između 4 i 6, uključujući; svaki X neovisno jeste Y, CY3, C(CY3)3, CY2CY3, (CY2)1-5OY, CnY2n-1, pri čemu n=3-7 uključivo, te svaki Y je neovisno H, F, Cl, Br ili I.

22. Farmaceutski paket iz patentnog zahtjeva 21, naznačeno time da rečeni spoj jeste 2,6-disupstituirani 4,8-dibenzilaminopirinido[5,4-d]pirimidin.

23. Farmaceutski paket iz patentnog zahtjeva 22, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol, mopidamol, dipiridamol monoacetat, NU3026, NU3059, NU3060 ili NU3076.

24. Farmaceutski paket iz patentnog zahtjeva 23, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol.

25. Farmaceutski paket iz patentnog zahtjeva 21, naznačeno time da rečeni kortikosteroid jeste: algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, te vortmanin. algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, ili vortmanin.

26. Farmaceutski paket iz patentnog zahtjeva 21, naznačeno time da su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid formulirani odvojeno u individulanim količinama doze.

27. Farmaceutski paket iz patentnog zahtjeva 21, naznačeno time da su rečeni spoj i rečeni kortikosteroid formulirani zajedno u individulanim količinama doze.

28. Metoda tretmana pacijenta koji ima imunoupalni poremećaj ili pacijenta koji je rizičan za razvitak upalnog poremećaja, naznačeno time da rečena metoda sadrži davanje rečenom pacijentu: (a) dva ili više kortikosteroida, te (b) spoj koji ima formulu: [image] u kojoj svaki Z i svaki Z' neovisno jeste N, O, C, [image] , [image] , ili [image] , pri čemu jada Z ili Z' jeste O ili [image] , tada p=1, kada Z ili Z' jeste N, [image] ili [image] , tada p=2, kada Z ili Z' jeste C, tada p=3; svaki R1 jeste neovisno X, OH, N-alkil, razgranata ili nerazgranata alkilna skupina koja ima 1 do 20 atoma ugljika, ili je heterocikl, ili kada je p>1, dvije R1 skupine od zajedničkih Z ili Z' atoma u kombinaciji jedan s drugim mogu predstavljaju -(CY2)k- pri čemu k jeste cijeli broj između 4 i 6, uključujući; svaki X neovisno jeste Y, CY3, C(CY3)3, CY2CY3, (CY2)1-5OY, CnY2n-1, pri čemu n=3-7 uključivo, te svaki Y je neovisno H, F, Cl, Br ili I, pri čemu su rečeni spoj i rečena dva ili više kortikosteroida dani u količini dovoljnoj za tretman rečenog pacijenta.

29. Metoda iz patentnog zahtjeva 28, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol, mopidamol, dipiridamol monoacetat, NU3026, NU3059, NU3060 ili NU3076.

30. Metoda iz patentnog zahtjeva 29, naznačeno time da rečeni spoj jeste dipiridamol.

31. Metoda iz patentnog zahtjeva 28, naznačeno time da rečeni kortikosteroid jeste: algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, te vortmanin. algeston, 6-alfa-fluorprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon, 6-alfa-metilprednisolon-21-acetat, 6-alfa-metilprednisolon-21 hemisukcinat natrijeva sol, 6-alfa,9-alfa-difluorprednisolon-21-acetat-17-butirat, amcinafal, beklometazon, beklometazon dipropionat, beklometazon dipropionat monohidrat, 6-beta-hidroksikortizol, betametazon, betametazon-17-valerat, budesonid, klobetazol, klobetazol-propionat, klobetasozon, klokortolon, klokortolon-pivalat, kortizon, kortizon-acetat, kortodokson, deflazakort, 21-deoksikortizol, deprodon, descinolon, desonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon-21-acetat, diklorison, diflorason, diflorason-diacetat, diflukortolon, doksibetazon, fludrokortizon, flumetazon, flumetazon-pivalat, flumonoksid, flunisolid, fluocinonid, fluocinolon-acetonid, 9-fluorkortizon, fluorhidroksiandrostendion, fluormetolon, fluormetolon-acetat, fluoksimesteron, fluprediden, fluprednisolon, fluorandrenolid, formokortal, halcinodin, halometazon, halopredon, hirkanozid, hidroksikortizon, hidroksikortizon-acetat, hidroksikortizon-butirat, hidroksikortizon-cipionat, hidroksikortizon natrijev fosfat, hidroksikortizon natrijev sukcinat, hidroksikortizon-probutat, hidrokortizon-valerat, 6-hidroksideksametazon, izoflupredon, izoflupredon-acetat, izopredniden, meklorizon, metilprednisolon, metilprednisolon-acetat, metilprednisolon natrijev sukcinat, parametazon, parametazon-acetat, prednisolon, prednisolon-acetat, prednisolon-metasulfobenzoat, prednisolon natrijev fosfat, prednisolon tebutat, prednisolon-21-hemisukcinat slobodna kiselina, prednisolon-21-acetat, prednisolon-21(beta-D-glukuronid), prednison, predniliden, procinonid, tralonid, triamicinolon-diacetat, triamicinolon-heksacetonid, ili vortmanin.

32. Metoda za identifikaciju kombinacija spojeva korisnih za tretman pacijenta koji ima imunoupalni poremećaj, naznačeno time da rečena metoda sadrži sljedeće korake: (a) dovođenje u in vitro doticaj stanica s (i) prvim spojem odabranim iz skupine koju čine: dipiridamol, fludrokortizon i prednisolon, te (ii) sa spojem kandidatom, te (b) određivanje je li kombinacija rečenog prvog spoja i rečenog spoja kandidata smanjuje razine TNFα u rečenim imunim stanicama relativno prema imunim stanicama koje su dovedene u doticaj s rečenim prvim spojem ali nisu došle u doticaj sa spojem kandidatom, ili su monomuklearne stanice periferne krvi došle u doticaj sa spojem kandidatom ali ne s rečenim prvim spojem, pri čemu je smanjivanje rečenih razina TNFα upućuje na to da je rečena kombinacija kao kombinacija korisna za tretman pacijenta koji ima imunoupalni poremećaj.

33. Metoda za smanjivanje produkcije jednog ili više proinflamatornih vitokina kod pacijenta koji za tim ima potrebu, naznačeno time da rečena metoda sadrži davanje pacijentu farmaceutskog pripravka iz patentnog zahtjeva 17 u količini koja smanjuje citokin.

34. Metoda iz patentnog zahtjeva 33, naznačeno time da rečeni citokin jeste TNFα.

35. Dijagnostički paket, naznačeno time da sadrži (i) farmaceutski paket iz patentnog zahtjeva 21 i (ii) upute za davanje rečenog paketa pacijentu kojem je dijagnosticiran razvitak ili je rizičan na imunoupalni poremećaj.

36. Metoda tretmana pacijenta koji ima ili je rizičan na razvitak imunoupalnog poremećaja, naznačeno time da rečena metoda sadrži davanje rečenom pacijentu (i) dipiridamol i (ii) prednisolon ili fludrikortizon unutar jedna sata razmaka jedan od drugog, a u količinama i u trajanju dovoljnim za tretman rečenog pacijenta.