FR3104416A1 - Extraits de bourgeons de roses - Google Patents

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Abstract

La présente invention concerne un extrait de bourgeons de roses, ou une composition en contenant, pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.

Description

Extraits de bourgeons de roses
La présente invention concerne le domaine des compositions favorisant la cicatrisation. Elle concerne notamment un extrait de bourgeons de roses, ou une composition en contenant pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.
La cicatrisation est un processus complexe, comprenant une phase inflammatoire, suivie d’une phase d’angiogenèse, et d’une phase de migration et de prolifération cellulaire, pendant laquelle des différentes couches du tissu cutané se reconstituent. Finalement, la dernière étape du processus de cicatrisation est une phase dite de maturation et de remodelage au cours de laquelle on assiste notamment à un réarrangement de la matrice extracellulaire.
Ainsi, la cicatrisation est un processus complexe, mettant en jeu de nombreux types cellulaires, impliquant de multiples systèmes de régulation, une communication cellulaire complexe et la sécrétion d'un grand nombre de facteurs de transcription.
La peau est la première barrière de protection de l'organisme vis-à-vis de l'environnement. Elle peut être altérée par les processus intrinsèque ou extrinsèque, consécutivement à une agression, par exemple une agression physique ou une brulure. Par ailleurs, certaines maladies de peau telles que l’acné, vitiligo, eczéma, psoriasis, mycose, couperose, herpès peuvent, même après guérison laisser des traces ou lésions cutanées. Au niveau de la peau, ces cicatrises ou lésions, se traduisent par différents signes cliniques, notamment par une altération de la barrière cutanée, une diminution de l’épaisseur de la peau, une dépigmentation et/ou une peau plus sèche. La persistance de ces signes cliniques est souvent mal vécue par les personnes qui en sont atteintes, notamment lorsque les lésions sont présentes au niveau de zones visibles et en particulier au niveau du visage.
Il existe donc le besoin constant de trouver de nouveaux extraits capables de stimuler et/ou améliorer les capacités cicatricielles du tissu cutané.
Dans ce contexte, la Demanderesse a développé un extrait de bourgeons de roses qui, de manière surprenante, stimule l'expression de plusieurs gènes clefs intervenant dans les phénomènes de prolifération, migration, adhésion cellulaire. L’action combinée de cet extrait sur l’ensemble de ces voies de signalisation stimule l’épaisseur de l’épiderme et favorise les mécanismes de cicatrisation.
Le premier objet de l’invention concerne un extrait de bourgeons de roses, ou une composition en contenant, pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.
On entend par ‘matières kératiniques’ selon l’invention la peau et/ou ses phanères, et les lèvres. En particulier, il s’agira de la peau du visage, du cou et/ou du corps, et des lèvres.
Les ‘matières kératiniques’ selon l’invention sont des matières kératiniques lésées. Par ‘matières kératiniques lésées’, on entend notamment des matières kératiniques présentant des lésions cutanées et/ou altérations de la peau liées notamment à des brûlures et/ou des maladies de la peau, telles que l’acné en particulier. On parlera de lésions d’acné ou cicatrices d’acné.
Selon un mode de réalisation préféré, ledit extrait de bourgeons de roses, ou la composition en contenant, est destiné à améliorer la qualité de la peau pendant et/ou après la cicatrisation.
Selon un mode particulier et préféré, ledit extrait de bourgeons de roses est obtenu par un procédé de cryoextraction comprenant les étapes de :
a) broyage des bourgeons
b) extraction dans un solvant polaire,
c) clarification,
d) Ajout de glycérine,
e) optionnellement, ajout de conservateurs,
f) frigélisation,
g) filtration.
L’invention porte encore sur une composition contenant un extrait de bourgeons de roses en une teneur allant de 0,1% à 95 %, en particulier de 0,1% à 20%, de préférence de 0,5% à 10% et de préférence encore de 1% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.
Figure 1: Mesure de l’épaisseur de l’épiderme après traitement par le cryoextrait de bourgeons de roses de l’invention.
L’invention porte donc sur un extrait de bourgeons de roses, ou une composition en contenant, pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.
De manière avantageuse, ledit extrait de bougeons de roses, ou ladite composition en contenant est destiné à améliorer la qualité de la peau pendant et/ou après la cicatrisation.
De manière surprenante, la demanderesse a en effet pu montrer que les bourgeons de roses de première éclosion contenaient deux fois plus de facteurs régénératifs que les autres parties de la rose. Les bourgeons sont notamment riches en phytohormones et concentrent un nombre important de molécules indispensables à la croissance et au développement de la plante. Ces hormones, qui sont captées par des récepteurs des cellules de l’épiderme, ont la capacité de moduler l’expression génique dans ces cellules, favorisant notamment les phénomènes de cicatrisation cutanée.
Pour tirer parti des propriétés uniques des bourgeons de roses de première éclosion, la demanderesse a mis en œuvre un procédé d’extraction à très basse température. Ce procédé breveté (EP0425391) est particulièrement adapté à la nature fragile des bourgeons et permet d’en préserver les molécules actives.
Cette méthode « verte » assure ainsi l’obtention d’extraits hautement concentrés en molécules actives.
Extrait de bourgeons de roses et procédé de préparation
Matériel végétal
Les extraits de l’invention sont des extraits de bourgeons de roses. Avantageusement, il s’agira d’un extrait de bourgeons de roses fraîches.
Le genreRosacomprend plus de 1000 espèces parmi lesquelles on peut citerRosa damascena , Rosa multiflora , Rosa centifolia , Rosa rugosa , Rosa chinensis , Rosa moschata , Rosa alba, Rosa alpina , Rosa cinnamonea , Rosa gallica , Rosa repens, Rosa rubrifolia , Rosa rubiginosa , Rosa sempervirens , Rosa spinosissima , Rosa stylosa , Rosa tomentosa ,ouRosa villosa .
L’homme du métier choisira de préférence des roses sélectionnées avec des capacités de résistance aux maladies, vigoureuses et florifères, en particulier avec des teintes pastel et dont les propriétés sont préservées par un environnement et un mode d’agriculture biologique. Selon un mode particulier et préféré, on utilisera un extrait de bourgeons de roses de la variété Evanrat ou rose ‘Jardin de Granville®’.
Le rosier ou rose ‘Jardin de Granville®’ est une variété hybride proposée exclusivement par « Roses anciennes André Eve S.A.S » et protégée par Certificat d’Obtention Végétale sous le N°20110345 avec pour espèce la dénominationRosa L. et pour la variété la dénomination EVANRAT. Ce rosier buisson appartient au groupe des hybrides modernes, qui, de mai à octobre, se couvre de roses en permanence, montrant ainsi un excellent caractère remontant.
De manière préférée, les bourgeons de roses sont issus de rosiers cultivés selon les normes de l’agriculture biologique. Ils peuvent ainsi exprimer pleinement leur résistance aux stress extérieurs et de ce fait produire un maximum des molécules d'intérêt. En outre, cela permet avantageusement de s’affranchir des résidus de pesticides qui pourraient être retrouvés dans l’extrait de bourgeons à l’issue de l’extraction.
La Rose de Granville fleurit à deux reprises, au printemps et à la fin de l’été. C’est au terme des mois d’hiver que les bourgeons de première éclosion commencent à se former. Plusieurs semaines leur sont nécessaires pour atteindre le stade ultime de leur maturation, et c’est au cours du mois de mai, que ces bourgeons de première éclosion atteignent, juste avant de s’ouvrir, leur concentration maximale en actifs moléculaires.
Selon un mode particulier et préféré, l’invention utilise des ‘bourgeons de première éclosion’, ou ‘bourgeons de printemps’. On parlera indifféremment dans la description de bourgeons, de bourgeons de roses, de bourgeons de première éclosion ou de bourgeons de printemps.
Dans le cadre de la présente invention, les bourgeons de roses peuvent être cueillis mécaniquement ou manuellement.
Selon un mode préféré, les bourgeons de roses utilisés pour préparer l’extrait de l’invention sont récoltés manuellement, c'est-à-dire sans outil.
Avantageusement, l’évolution de la croissance des bourgeons est surveillée de manière quotidienne afin que les bourgeons soient récoltés au moment où ils atteignent le stade ultime de leur maturation, juste avant éclosion. Cette récolte a lieu sur une période d’environ 15 jours de fin mai à début juin.
Selon un mode de réalisation particulier, les bourgeons de roses sont préalablement séchés avant extraction.
Selon un autre mode de réalisation particulier et préféré, les bourgeons récoltés sont stockés immédiatement à -20°C afin de préserver au mieux leur richesse en molécules actives. Une fois la récolte terminée, les bourgeons sont acheminés à cette même température, -20°C, sur le lieu de leur transformation où ils sont alors directement utilisés en vue de l’extraction.
Procédé de préparation
Le procédé d’extraction mis en œuvre dans l’invention utilise comme matériel végétal décrit ci-dessus. Il utilise donc des bourgeons de roses, de préférence des bourgeons de roses de première éclosion, de préférence de la variété rose Jardin de Granville®, et de préférence encore des bourgeons de roses directement stockés à -20°C après récolte.
L’extrait peut être préparé par différents procédés d’extraction connus de l’Homme du métier, mettant en œuvre des étapes de broyage du matériel végétal, dispersion de la matière broyée dans un solvant polaire, séparation des phases soluble et insoluble par filtration, concentration et éventuelle remise en solution.
Selon un mode particulier de l’invention, le procédé d’extraction mis en œuvre est un procédé de cryoextraction, et plus particulièrement le procédé décrit dans la demande de brevet EP0425391.
Selon un mode de réalisation préféré de l’invention, l’extrait de bourgeons de roses aussi appelé ‘cryoextrait de bourgeons de roses’ est obtenu selon un procédé d’extraction comprenant les étapes de :
a) broyage des bourgeons
b) extraction dans un solvant polaire,
c) clarification,
d) Ajout de glycérine,
e) optionnellement, ajout de conservateurs,
f) frigélisation,
g) filtration.
Préalablement à l’extraction elle-même, les bourgeons de roses peuvent avoir été séchés et/ou broyés.
Selon un mode de réalisation, l’étape de broyage des bourgeons, étape a), se fait à très basse température.
Par très basse température, on entend que la température est inférieure à -20°C, de préférence inférieure à -50°C et de préférence encore inférieure à -70°C.
Selon un mode particulier et préféré, les bourgeons de roses, préalablement congelés et stockés à -20°C, sont encore refroidis jusqu’à une température de -80°C, température à laquelle ils sont alors broyés afin d’obtenir un ‘cryobroyât’.
Par ‘extrait de bourgeons de roses’ selon l’invention, on entend notamment que les composés polaires (hydrophiles) des bourgeons de roses se sont solubilisés et/ou ont été extraits dans un solvant polaire.
Selon la présente invention, l’expression ‘solvant polaire’ signifie que le solvant a une valeur d’indice de Polarité qui est égale ou supérieure à une valeur de 4. L’indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d’état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d’une molécule. On se reportera, pour les indices de polarité des solvants, à l'article de L.R. SNYDER : Classification of the solvent properties of common liquids ; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230.
Les solvants polaires préférés sont ceux constitués d’un composé comprenant au moins une liaison covalente polaire de type O-H. A titre de solvant polaire particulièrement préféré, on choisit un solvant ou un mélange de solvants choisi(s) parmi l’eau, les alcools en C1-C4, tel que l’éthanol, les glycols, tels que l’éthylène glycol, le glycérol, le butylène glycol et le propylène glycol, et leurs mélanges.
L’extrait de bourgeons de roses de l’invention est obtenu avantageusement au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable.
De préférence, on utilisera l’eau, l’éthanol ou leur mélange, et de préférence encore l’eau.
Selon un mode de réalisation particulier, on extrait le matériel végétal à l’aide d’un mélange hydroalcoolique, avantageusement un mélange d’eau et d’éthanol. En particulier, on extrait le matériel végétal à l’aide d’un solvant constitué d’eau et d’éthanol, l’éthanol représentant de 50% v/v à 99% v/v du mélange eau/éthanol. De préférence on extrait le matériel végétal à l’aide d’un mélange comprenant 30% v/v d’eau et 70% v/v d’éthanol. L’extraction peut être menée à chaud par reflux ou bien par macération à température ambiante.
Selon un mode de réalisation particulier et préféré, le solvant polaire utilisé pour extraire le matériel végétal est l’eau.
Selon un mode particulier de réalisation de l’étape b), le cryobroyât obtenu à l’étape a) est additionné d’eau. L’Homme du métier saura aisément adapter la quantité de solvant polaire, notamment d’eau, à ajouter lors de l’étape d’extraction. En effet, la quantité de solvant pourra notamment être adaptée selon que les bourgeons ont été préalablement séchés ou non et en fonction de la concentration finale en extrait sec souhaitée. Ce mélange est alors maintenu sous agitation à une température pouvant comprise entre 0 à +4°C.
Dans le cadre de la présente demande lorsque des gammes de valeurs sont énoncées, les valeurs extrêmes, ou bornes, sont incluses. Ainsi, par température comprise entre 0 à +4°C, on entend que la température peut être égale à 0°C ou égale à 4°C, ainsi qu’à n’importe quelle température comprise entre ces deux valeurs.
L’étape b) est de préférence mise en œuvre pour une durée comprise entre 6 et 24 heures, de préférence 8 à 15 heures et de préférence encore 10 à 12 heures.
Selon certains modes de réalisation, le procédé d’extraction mis en œuvre dans l’invention utilise les ultrasons en cours d’extraction afin d’améliorer le rendement massique de ladite extraction.
De manière avantageuse, il est possible de reproduire le cycle d’extraction puis filtration, plusieurs fois afin d’épuiser le matériel végétal des substances ayant une affinité pour le solvant d’extraction.
L’étape c) du procédé d’extraction est une étape de clarification. Cette étape qui permet de séparer la phase liquide du matériel végétal épuisé peut notamment être effectuée par centrifugation, décantation ou par filtration.
Selon un mode préféré, l’étape c) de clarification est effectuée par filtration.
Le procédé d’extraction peut en outre être complété par une étape optionnelle d’élimination partielle ou totale des solvants d’extraction. On peut avantageusement concentrer l’extrait en éliminant une partie du solvant ou du mélange du solvant d’extraction. On peut ainsi obtenir un concentré aqueux ou bien encore, en éliminant tout le solvant d’extraction, obtenir un résidu sec.
De façon alternative, l’extrait peut à ce stade du précédé être lyophilisé ou atomisé pour se présenter sous la forme d’une poudre.
A l’issue de l’étape de clarification c), on obtient un ‘volume V’ de ‘cryoextrait aqueux’.
Le contenu en matière sèche du cryoextrait aqueux est compris de préférence compris entre 0,1 % et 5%, de préférence entre 0.3% et 3%, de préférence encore entre 0.5% et 2%, notamment le ‘cryoextrait aqueux’ comprend environ 1 % de matière sèche par rapport au poids total dudit cryoextrait aqueux.
Par ‘environ’ 1%, on entend que la valeur de matière sèche peut varier dans des proportions faibles notamment dans des proportions inférieures à 20% et de préférence dans des proportions inférieures à 10%. Ainsi, dans le cadre de la présente invention, ‘environ’ 1% signifie compris entre 0,8% et 1,2% de préférence entre 0,9 et 1,1% de matière sèche par rapport au poids total dudit cryoextrait aqueux.
Selon l’étape d) du procédé d’extraction, de la glycérine est ajoutée au cryoextrait aqueux. Le volume de glycérine ajouté est variable car dépendant du ‘volume V’ de cryoextrait aqueux.
Selon un mode préféré, le volume de glycérine ajouté est compris entre 0,5 fois et 2 fois le ‘volume V’, de préférence entre 0,7 fois et 1,5 fois le ‘volume V’ et de préférence encore entre 0,9 fois et 1,1 fois le ‘volume V’ de cryoextrait aqueux.
Selon un mode de réalisation préféré, le volume de glycérine ajouté est égal à 1 fois le ‘volume V’ de cryoextrait aqueux.
Selon un mode de réalisation particulier, le procédé d’extraction de l’invention comprend une étape optionnelle e) d’ajout de conservateurs.
L’Homme du métier connaît les conservateurs convenant à une utilisation cosmétique. Notamment, à titre d’exemple et de manière non limitative, on pourra utiliser l’acide citrique et/ ou le sodium benzoate et/ou le potassium sorbate.
Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, ledit extrait de bourgeons de rose de l’invention comprend au moins un conservateur choisi parmi l’acide citrique et/ ou le sodium benzoate et/ou le potassium sorbate et leurs mélanges.
Selon un mode de réalisation préféré, la quantité totale de conservateurs est inférieure à 5%, de préférence inférieure à 3 % et de préférence encore inférieure à 2%.
Le procédé de l’invention comprend encore une étape f) de frigélisation. Cette étape qui a pour but de faire précipiter les résidus insolubles est réalisée à une température comprise entre 0°C et 10°C, de préférence entre 2°C et 6°C et de préférence encore à 4°C.
De manière préférée, l’étape de frigélisation est réalisée pour une durée comprise entre 6 et 72 heures, de préférence entre 12 et 60 heures et de préférence encore entre 24 et 48 heures.
A l’issue de l’étape de frigélisation, l’extrait est alors filtré afin de séparer les matières insolubles précipitées à l’étape f). De préférence, l’étape de filtration g) est réalisée au moyen d’une membrane de microfiltration dont la taille des pores est comprise entre 0,2 et 0,2µm.
De manière avantageuse, la microfiltration permet en outre de stériliser l’extrait de bourgeons de roses de l’invention.
Le produit obtenu à l’issu du procédé d’extraction décrit ci-dessus est l’extrait de bourgeons de roses selon l’invention, autrement nommé ‘Cryoextrait’ ou ‘Cryoextrait de bourgeons’ dans les exemples illustratifs présentés ci-après.
Selon un mode de réalisation particulier, l’extrait de bourgeons de roses, ou la composition en contenant est caractérisé en ce que lesdits bourgeons de roses sont des bourgeons de roses de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville®.
De manière préférentielle, le ‘cryoextrait de bourgeons’ est conservé à basse température, notamment à une température comprise entre 0°C et 10°C, de préférence comprise entre 2°C et 6°C et de préférence encore à 4°C.
Selon un mode particulier et préféré, le ‘Cryoextrait’ de l’invention comprend de 0.1% à 3% en poids de matière sèche (matière active) d’extrait de bourgeons de roses, et 97 à 99.9% en poids d’un mélange d’eau et de glycérol 50/50. De préférence, le ‘Cryoextrait’ comprend 0.3 à 1.0% en poids de matière sèche (matière active), et 99 à 99.7% en poids d’un mélange d’eau et de glycérol 50/50.
De préférence, l’extrait de bourgeons de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville® utilisé selon l’invention est un extrait comprenant de 0,5% à 1% (correspondant à 75µg/mL à 150µg/mL) de matière sèche dans un mélange d’eau/glycérol (50/50).
Le nom INCI (International Nomenclature Cosmetics Ingrédients) de cet extrait de bourgeons de roses est: Water, Glycerin, Rose Extract.
Composition et Galéniques
Dans le cadre de l’invention, l’extrait de bourgeons de roses est utilisé dans une quantité efficace pour obtenir l’effet recherché. Il est notamment incorporé dans une composition adaptée à une application topique sur les matières kératiniques.
Selon un mode de réalisation particulier, ladite composition comprenant l’extrait de bourgeons de roses est une composition pour le soin de la peau et/ou des lèvres lésées et notamment de la peau du visage et/ou du cou.
L’invention porte donc également sur une composition contenant un extrait de bourgeons de roses en une teneur allant de 0,1% à 95 %, en particulier de 0,2% à 20%, de préférence de 0,3% à 10% et de préférence encore de 0,5% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition.
Dans un mode particulier, ladite composition comprend un extrait de bourgeons de roses tel que décrit ci-dessus.
Selon un mode particulier et préféré, ladite composition de l’invention comprend un extrait de bourgeons de roses, de préférence un extrait de bourgeons de roses de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville ®, obtenu selon un procédé d’extraction comprenant les étapes de:
a) broyage des bourgeons
b) extraction dans un solvant polaire,
c) clarification,
d) ajout de glycérine,
e) optionnellement, ajout de conservateurs,
f) frigélisation,
g) filtration.
De préférence, l’extrait de bourgeons de roses est mis en œuvre dans la phase aqueuse de la composition de l’invention.
Ainsi, selon un mode particulier, la composition de l’invention comprend au moins une phase aqueuse.
La phase aqueuse de la composition selon l'invention comprend généralement de l'eau et éventuellement un solvant hydrosoluble, en particulier choisi parmi :
- des mono-alcools inférieurs en C1-C5 tels que l'éthanol, l'isopropanol et leurs mélanges ;
- les glycols en C2-C8 tels que l'éthylène glycol, le propylène glycol, le 1,3-butylène glycol, le dipropylène glycol, et leurs mélanges;
- les polyols en C2-C32 tels que les polyglycérols, les polyéthylènes glycols, et leurs mélanges,
et leurs mélanges.
Elle peut comprendre également des gélifiants hydrophiles, des antioxydants, des conservateurs et leurs mélanges.
La phase aqueuse de la composition représentera généralement de 1% à 99% en poids du poids total de la composition.
La composition pourra comprendre en outre une phase huileuse, comprenant une huile ou un mélange d'huiles miscibles entre elles.
Ces huiles peuvent être volatiles ou non volatiles, végétale, minérale ou synthétique.
Selon un mode particulier, la composition de l’invention comprend au moins des huiles non volatiles hydrocarbonées, notamment les huiles hydrocarbonées d’origine végétale, les éthers de synthèse en C10-C40, les esters de synthèse en C10-C40, les alcools gras en C12-C26, les acides gras supérieurs en C12-C22, et leurs mélanges.
La phase huileuse, lorsqu’elle est présente dans la composition, représente généralement de 1% à 95% en poids du poids total de ladite composition.
La composition pourra comprendre en outre des tensioactifs, des gélifiants et/ou des épaississants, et leurs mélanges.
Ingrédients additionnels
La composition de l'invention peut également comprendre tout additif usuellement utilisé en cosmétique tels que desémulsionnants, des filtres UV, des antioxydants, des parfums, des agents émollients, des agents hydratants, des agents apaisants, des agents antipollution, et leurs mélanges.
Utilisation
De façon avantageuse, les extraits de bourgeons de roses, ou compositions comprenant l’extrait de bourgeons de roses, employés dans le cadre de l’utilisation de l’invention sont ceux décrits ci-dessus.
L’invention porte donc sur un extrait de bourgeons de roses, ou une composition en contenant, pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.
Les utilisations décrites ci-dessous sont destinées à une application sur des matières kératiniques lésées, en particulier des peaux et/ou des lèvres lésées.
Selon un mode particulier de l’invention, lesdits extraits de bougeons de roses de l’invention ou compositions en contenant sont destinés à améliorer la qualité de la peau pendant et/ou après la cicatrisation.
De par ses propriétés cicatrisantes, l’extrait de bourgeons de roses de l’invention est donc particulièrement avantageux pour une utilisation chez des sujets présentant des lésions cutanées et/ou des brûlures.
Ainsi, dans un mode de réalisation particulier, l’invention porte sur un extrait de bourgeons de roses, ou une composition en contenant, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation chez des sujets présentant des lésions cutanées et/ou des brûlures.
Selon un mode particulier et préféré, on entend par lésions cutanées des lésions liées à l’acné.
Selon un autre mode particulier et préféré, on entend par brûlures, des brûlures induites notamment par une exposition excessive au soleil ou à la suite d'une exposition à une forte source de chaleur.
La présente invention va désormais être illustrée dans les exemples non limitatifs suivants. Les % sont exprimés en poids de matière première par rapport au poids total de la composition, sauf indication contraire.
Exemples
Des études ont étés réalisées avec pour but d’identifier l’effet d’un cryoextrait de bourgeons de roses de Granville ® sur phénomènes de prolifération et de cicatrisation à partir d’explants de peau humaineex vivo.
L’extrait de bourgeons de roses utilisé dans les exemples ci-après est un extrait de bourgeons de roses de la variété Jardin de Granville ®, obtenu par le procédé de cryoextraction décrit dans la demande EP0425391. Cet extrait comprend de 0,5% à 1% en poids de matière sèche dans un mélange d’eau/glycérol (50/50). Ledit extrait est utilisé à une concentration de 3% dans une formule simplexe décrite ci-dessous (tableau 1).
Tableau 1: Formule simplexe
Ingrédients Nom INCI %
Eau purifiée qsp 100
Phenoxetol Phenoxyethanol 0,700 %
Rhodicare XC XANTHAN GUM 0,200 %
Carbopol ETD 2020 (carbomer) Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate Crosspolymer 0,150 %
Arlacel 165-PA (MV) Glyceryl Stearate (and) PEG-100 Stearate 5,000 %
Alcool cetylique MB Cetyl alcohol 1,000 %
Alcool stearylique MB Stearyl alcohol 1,000 %
Cerabeil blanchie DAB Beeswax 1,500 %
Parleam Hydrogenated Polyisobutene 7,700 %
Cetiol SN MB Cetearyl Isononanoate 1,500 %
Tri caprat/caprylat glycerol MB Glycerol Tricaprylate/Caprate 3,000 %
Dimethicone 100 CS Dimethiconeviscosté 100 cSt 1,000 %
Sodium hydroxyde Idem 0,027 %
Caprylyl glycol Idem 0,300 %
Cette formule simplexe contenant 3% en poids dudit cryoextrait, en tant que seul actif de la formule, est utilisée dans les exemples 1 et 2 ci-après pour évaluer les effets dudit cryoextrait.
Exemple 1: E tude des e ffet s du cryoextrait de bourgeons de roses de l’invention sur la viabilité tissulaire, l’épaisseur de l’épiderme et sur la prolifération cellulaire
Matériel et méthodes
Préparation des explants
Les explants de peau humaine (3 par condition) d’un diamètre d’environ 12 mm (± 1 mm) ont été préparés à partir d’une plastie abdominale d’une femme âgée de 61 ans. Les explants ont été mis en survie en milieu BEM (BIO-EC’s Explants Medium) à 37°C en atmosphère humide, enrichie de 5 % de CO2.
Application des produits
Les extraits testés ont été appliqués en topique sur les explants à raison de 2 µl par explant (2 mg/cm2) et étalés à l’aide d’une spatule à J0, J2, et J4 (soit 3 applications).
Les lots non traités T n’ont reçu aucun traitement excepté le renouvellement du milieu.
Le milieu a été renouvelé pour moitié (1 ml par puits) à J1, J2 et J4.
Prélèvement
A J0, les explants du lot T0 ont été prélevés et coupés en trois. Un tiers a été fixé dans du formol tamponné, un tiers a été inclus en OCT et congelé à –80°C, et le dernier tiers a été conservé dans du RNAlater pour analyse transcriptomique.
A J1 et J6, les 3 explants de chaque lot ont été prélevés et traités de la même manière. De plus, les 2mL de milieu BEM de chaque explant a été prélevé en même temps que les explants et conservé à -20°C.
Traitements histologiques
Les explants ont été fixés pendant 18-24h dans une solution de formol (4%) tamponné, puis déshydratés et imprégnés en paraffine à l’aide d’un automate de déshydratation Leica PEARL.
Ils ont été mis en bloc à l’aide d’une station d’enrobage Leica EG 1160.
Des coupes de 5 µm ont été réalisées à l’aide d’un microtome type Minot, Leica RM2125 et montées sur des lames de verre histologiques Superfrost®.
Les observations microscopiques ont été réalisées en microscopie optique, à l’aide d’un microscope Leica type DMLB ou Olympus BX43. Les prises de vue ont été réalisées à l’objectif x40 avec une caméra Olympus DP72 et le logiciel d’acquisition et d’archivage Cell^D Olympus.
Contrôle de viabilité
La viabilité tissulaire a été examinée sur coupes en paraffine colorées au trichrome de Masson variante de Goldner. Elle a été évaluée par un examen microscopique.
Mesure de l’épaisseur de l’épiderme
L’épaisseur de l’épiderme a été examinée sur coupes en paraffine et mesurée en plusieurs points à l’aide du module de mesure du logiciel Olympus Cell^D. 3 mesures d’épaisseur ont été réalisées pour chaque image, correspondant à 9 mesures par explant et 27 mesures par lot.
Immunomarquage du Ki67
Ki67 a été marqué sur coupes paraffine formol avec un anticorps monoclonal anti-Ki67 (Zymed), dilué au 1/200ème dans du PBS-BSA 0.3% pendant 1 h à température ambiante avec un système amplificateur biotine/streptavidine, puis révélé par le système révélateur VIP, un substrat violet de peroxydase (Vector).
L’immunomarquage a été évalué par un dénombrement des cellules KI67 positives par centimètre d’épiderme à l’aide du logiciel Cell^D.
Effets du cryoextrait de bourgeons de roses de l’invention sur l’épaisseur de l’épiderme
La figure 1 montre que le cryoextrait de bourgeons de roses de l’invention induit une augmentation significative de l’épaisseur des explants de peau de 15%. On note par ailleurs que la viabilité tissulaire n’est pas affectée par le cryoextrait.
Effets du cryoextrait de bourgeons de roses de l’invention sur la prolifération cellulaire
Comme le montre les résultats du tableau 2, on observe on forte augmentation de l’expression de KI67 (+212%) dans ces explants de peau après application de l’extrait de bourgeons de roses de l’invention.
Tableau 2: niveau d’expression protéique de KI67, impliquée dans la prolifération cellulaire

Protéine étudié e
Nom développé 		Cryoextrait bourgeons RdG 3% (Matière première)
Ki67 «Antigen KI-67» +212%
Conclusion s
On peut donc en conclure de ces expériences, que l’extrait de bourgeons de roses de l’invention stimule la prolifération cellulaire au niveau cutané et permet un accroissement de l’épaisseur de l’épiderme.
Exemple 2: Effet du cryoextrait de bourgeons de roses de l’invention sur l’expression de gènes impliqués dans les phénomènes de cicatrisation
Matériel et méthodes
Préparation et traitement
Des explants de peau ont été préparés de manière similaire à ce qui a été décrit à l’exemple 1. L’extrait de bourgeons de roses selon l’invention a été appliqué à J1 et à J6 en topique à raison de 2mg/cm2 excepté sur les témoins T. Trois explants par condition ont été utilisés.
L’extrait de bourgeons de roses de l’invention a été appliqué à J1 et à J6 en topique à raison de 2mg/cm2 excepté sur les témoins T. Trois explants par condition (A, B et C) ont été utilisés
Expression génique en RT- qPCR
A J6, les ARN ont été extraits à partir des explants de peauex vivo, évalués de manière qualitative et quantitative puis analysés par RT-qPCR.
Extraction des ARN et validation
Les ARN totaux ont été extraits avec le kit Promega's ReliaPrep™ RNA Tissue Miniprep System (fibrous) et élués avec 35µl H2O RNase-free.
La quantification a été réalisée avec le spectrophotomètre Biodrop, l'évaluation qualitative par électrophorèse capillaire avec Experion (BioRad). Le RQI indique le "RNA quality indicator".
Les profils obtenus montrent l’excellente qualité des ARN avec des valeurs de RIN comprises entre 8.6 et 9.9.
Reverse transcription des ARN et qPCR
Pour générer l'ADN complémentaire (ADNc), 100ng de chaque échantillon d'ARN ont été soumis à une rétrotranscription avec le kit iScript de Bio-Rad.
Pour les réactions de qPCR ultérieures, l'ADNc a été dilué à 1/10 dans l'eau RNase/DNase-free et amplifié avec des paires d'amorces pour les gènes sélectionnés ainsi que pour deux gènes de ménage (B2M et GAPDH), permettant la normalisation des amplifications). Les contrôles inclus étaient i) NTC (contrôle sans matrice) qui renseigne sur l’existence ou non d’un signal non spécifique généré par les paires d'amorces ; ii) NRT (ARN sans rétrotranscription) pour indiquer la présence potentielle d'ADN contaminant. Ces contrôles n'ont montré aucune amplification génique non spécifique.
Pour la quantification, le nombre de cycles a été normalisé selon les deux gènes de référence : GAPDH et B2M.
Un gène est considéré comme induit si son expression présente un rapport d’induction (RI) par rapport au contrôle ≥1,5. Inversement, un gène est considéré comme réprimé pour un RI ≤0,6. Les valeurs pour chaque explant traité avec la formule contenant 3 % de cryoextrait de bourgeons de RDG ont été comparées à la moyenne des témoins.
Entre les trois répliques biologiques du même donneur pour chaque condition, une fluctuation de détection des gènes sélectionnés peut être observée en raison de différences locales de l'épiderme.
Les variations de RI obtenus pour les ARN extraits des différents explants pour une même condition ont été normalisés en utilisant GAPDH ou B2M.
De manière générale l’utilisation des gènes de normalisation B2M et GAPDH donnent des RI similaires.
Résultats
Tableau 3: niveau d’expression de gènes impliqués dans les phénomènes de cicatrisation

Gènes étudiés
Nom développé 		Cryoextrait bourgeons RdG 3% (Matière première)
S100A7 calcium-binding protein A7 +209%
FGF7/KGF Keratinocyte growth factor +92%
DNMT1 DNA methyltransferase +82%
AQP3 Aquaporin 3 +50%
SIRT6 sirtuin 6 +48%
Les résultats du tableau 3 montrent que le cryoextrait de bourgeons de l’invention induit une augmentation de l’expression de plusieurs gènes clefs impliqués dans les phénomènes de prolifération cellulaire (DnMT1, FGF7), de migration et d’adhésion cellulaire (S100A7) ou encore de cicatrisation (AQP3, SIRT6).
Conclusions
De manière surprenante, les résultats montrent que l’extrait de bourgeons de roses de l’invention permet d’augmenter l’épaisseur de l’épiderme, d’activer la prolifération cellulaire et d’activer l’expression de gènes impliqués dans les phénomènes de cicatrisation.
Ainsi, de par ces effets, l’extrait de bourgeons de roses peut être considéré comme un actif d’intérêt pour une application topique sur les matières kératiniques, notamment la peau et ou les lèvres et en particulier la peau du visage et/ou du cou.
Notamment, les résultats montrent que l’extrait de bourgeons de roses de l’invention est particulièrement avantageux pour une utilisation en application topique pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.
Exemple 3: Formulations cosmétiques
Composition sous la forme d’une crème riche
Ingrédients % en poids
Glycerine 7,5000
Acrylates/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer 0,3000
Gomme xanthan 0,2000
Cetyl alcool/glyceryl stearate/PEG-75/ceteth/steareth-2 5,2500
C10-C18 triglycerides 5,0000
Hydrogenated coco-glycerides 2,5000
Cetyl alcohol 1,0000
Hydrogenated polyisobutene 8,2000
Acide citrique 0,0200
Citrate trisodique 0,1400
Cryoextrait de bourgeons de roses * 3,0 000
Tocopheryl acetate 0,2000
Parfum, neutralisant, conservateur qs
Eau purifiée qsp 100%
*tel que décrit dans la partie introductive des exemples
La composition est préparée selon le mode opératoire suivant :
La glycérine et l’eau sont mélangés sous agitation jusqu’à homogénéité. Les gélifiants acrylates/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer et gomme xanthane sont dispersés sous agitation turbulente.
Cette phase est chauffée à 80°C et l’ensemble cetyl alcool/glyceryl stearate/PEG-75/ceteth/steareth-2; C10-C18 triglycérides, hydrogenated coco-glycerides, cetyl alcohol et hydrogenated polyisobutene préalablement chauffé à 80°C est ajouté et l’ensemble est émulsionné sous forte agitation. A 60 ° C, le couple acide citrique/ citrate trisodique et le neutralisant sont additionnés, puis les poudres sont ajoutées. A la température de 35°C, le cryoextrait de bourgeons de roses est ajouté avant le parfum.
Appliquée sur la peau, en particulier sur le visage, seule ou à la suite de l’application d’un sérum, cette composition apporte une action hydratante et cicatrisante.
Composition sous la forme d’un sérum
Ingrédients % en poids
Cetearyl isononate 7,0000
Steareth-2 0,5000
Steareth-21 0,5000
Jojoba esters 1,5000
Butylene glycol 1,0000
Glycerine 6,0000
Sodium hyaluronate 0,0500
Acrylates/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer 0,2500
Gomme xanthan 0,1000
Acide citrique 0,0200
Citrate trisodique 0,1400
Polymethyl methacrylate 1,8000
Cryoextrait de bourgeons de roses * 4 ,0 000
Tocopheryl acetate 0,2000
Parfum, neutralisant, conservateur qs
Eau purifiée qsp 100%
*tel que décrit dans la partie introductive des exemples
Le sérum est appliqué sur l’ensemble du visage et en particulier sur les zones présentant des lésions cutanées, telles que des cicatrices d’acné.
Outre sa texture agréable à l’application, il présente une efficacité cicatrisante remarquable.
Composition sous la forme d’une crème SPF 15
Ingrédients % en poids
Octocrylene 2,0000
Methoxycinnamate d’octyle 7,5000
Ethyl 2 hexyle palmitate 4,0000
Phenyl trimethicone 0,5000
Glycerol monostearate 0,2000
Cetearyl alcohol/dicetylphopshate/ceteth-10 phosphate 2,0000
Glyceryl stearate/ PEG-100 stearate 2,0000
Cetyl alcohol 2,0000
Cire d’abeille polyglyceryl-3 0,4000
Benzophenone-3 1,5000
Caprylic/caric triglyceride 3,5000
Butylene glycol dicaprylate/dicaprate 2,5000
C12-15 alkyl benzoate/ titanium dioxide/polyhydroxystearic acid / aluminium stearate / alumina
2,5000
Sodium polyacrylate 0,6000
Butylene glycol 2,0000
Diglycerine 1,0000
Glycerine 3,5000
Sodium hyaluronate 0,0500
Gomme xanthan 0,2000
Ammonium acryloyldimethyltaurate/VP copolymer 0,3500
Acide citrique 0,0200
Trisodium citrate 0,1200
Aluminium starch octenyl succinate 1,5000
Cryoextrait de bourgeons de roses * 2 , 0 00 0
Tocopheryl acetate 0,2000
Parfum, neutralisant, conservateur qs
Eau purifiée qsp 100%
*tel que décrit dans la partie introductive des exemples
Le cryoextrait de bourgeons de roses est mis en solution dans la phase continue aqueuse de la crème.
Chaque phase est préparée séparément puis la phase grasse est ajoutée sous agitation dans la phase aqueuse de façon à obtenir une dispersion homogène des gouttelettes de phase grasse dans la phase continue. La crème a une texture particulièrement agréable à l’application. Elle est appliquée, sur le visage, par un massage léger, en insistant sur les zones cicatricielles.

Claims (10)

  1. Extrait de bourgeons de roses, ou composition en contenant, pour une application topique sur les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation.
  2. Extrait de bourgeons de roses, ou composition en contenant, pour une utilisation selon la revendication précédente destiné à améliorer la qualité de la peau pendant et/ou après la cicatrisation.
  3. Extrait de bourgeons de roses, ou composition en contenant, pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes chez des sujets présentant des lésions cutanées et/ou des brûlures.
  4. Extrait de bourgeons de roses, ou composition en contenant, pour une utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que les lésions cutanées sont liées à l’acné.
  5. Extrait de bourgeons de roses, ou composition en contenant, pour une utilisation selon la revendication 3, caractérisées en ce que les brûlures sont induites notamment par une exposition excessive au soleil ou à la suite d'une exposition à une forte source de chaleur.
  6. Extrait de bourgeons de roses, ou composition en contenant, pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ledit extrait de bourgeons de roses est obtenu par un procédé de cryoextraction comprenant les étapes de:
    a) broyage des bourgeons
    b) extraction dans un solvant polaire,
    c) clarification,
    d) ajout de glycérine,
    e) optionnellement, ajout de conservateurs,
    f) frigélisation,
    g) filtration.
  7. Extrait de bourgeons de roses, ou composition en contenant, pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que lesdits bourgeons de roses sont des bourgeons de roses de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville®.
  8. Composition contenant un extrait de bourgeons de roses en une teneur allant de 0,1% à 95%, en particulier de 0,2% à 20%, de préférence de 0,3% à 10% et de préférence encore de 0,5% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition, pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 5.
  9. Composition selon la revendication 8 pour une utilisation pour favoriser et/ou stimuler la cicatrisation l’une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle l’extrait de bourgeons de roses est tel que défini selon l’une des revendications 6 ou 7.
  10. Composition selon la revendication 8 ou la revendication 9, pour une application topique sur les matières kératiniques de sujets présentant des lésions cutanées et/ou des brûlures.
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