FR2905858A1 - Utilisation cosmetique d'actifs stimulant l'expression de la matriptase - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant au moins un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1.Elle concerne également une composition renfermant cet actif en combinaison avec un autre actif à effet hydratant.

Description

1 Utilisation cosmétique d'actifs stimulant l'expression de la matriptase

La présente invention concerne un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1. La peau est principalement constituée de trois couches, à savoir, en partant de la plus superficielle, l'épiderme, le derme et l'hypoderme.

L'épiderme est en particulier constitué de kératinocytes (majoritaires), de mélanocytes (intervenant dans la pigmentation de la peau) et de cellules de Langerhans. Sa fonction est de protéger le corps de l'environnement extérieur et d'assurer son intégrité, et notamment de freiner la pénétration de micro-organismes ou de substances chimiques, et d'empêcher l'évaporation de l'eau contenue dans la peau.

Pour ce faire, les kératinocytes subissent un processus de maturation orientée continu au cours duquel les kératinocytes situés dans la couche basale de l'épiderme forment, au stade terminal de leur différenciation, des cornéocytes qui sont des cellules mortes totalement kératinisées sous forme d'enveloppes cornées constituées de protéines et de lipides tels que des céramides. Lors de ce processus de différenciation, des lipides épidermiques intercornéocytaires sont en 2905858 2 outre formés puis organisés sous forme de bicouches (feuillets) dans le stratum corneum, qui participent, avec les enveloppes cornées précitées, à la fonction barrière de l'épiderme.

5 La fonction barrière de l'épiderme peut toutefois se trouver perturbée dans certaines conditions climatiques (sous l'effet du froid et/ou du vent, par exemple), ou encore sous l'effet du stress ou de la fatigue, 10 notamment, favorisant ainsi la pénétration d'allergènes, d'agents irritants ou de micro-organismes qui occasionnent ainsi un dessèchement cutané susceptible de générer des sensations d'inconfort telles que des tiraillements ou des rougeurs, et également d'altérer 15 l'éclat du teint et la souplesse de la peau. Pour prévenir ce phénomène ou le corriger, il est connu d'appliquer sur la peau des compositions cosmétiques renfermant des agents hygroscopiques, tels 20 que des sucres ou des polyols, destinés à capter l'eau présente dans la peau et à freiner ainsi son évaporation. On a également classiquement recours à des corps gras permettant de former un film occlusif sur la peau, qui contribue à freiner l'évaporation de l'eau. Par ailleurs, 25 ces compositions incorporent fréquemment des actifs agissant sur une ou plusieurs des différentes cibles biologiques intervenant soit dans les processus de régénération de la peau, en particulier dans la différenciation des kératinocytes, la synthèse des 30 lipides épidermiques et la cohésion des cornéocytes, soit dans la synthèse endogène de constituants du facteur d'hydratation naturel (NMF, Natural Moisturizing Factor) 2905858 3 de la peau, en particulier dans la synthèse de protéoglycanes. Des exemples de tels actifs sont notamment les a- et 5 R-hydroxyacides, notamment l'acide lactique, l'acide glycolique et l'acide salicylique ; l'urée ; ou les composés aminosulfoniques. Toutefois, il subsiste toujours le besoin de 10 proposer de nouveaux actifs cosmétiques permettant de lutter plus efficacement contre le dessèchement cutané. En outre, compte tenu de la recherche toujours croissante par les consommateurs de produits naturels 15 renfermant le moins d'ingrédients synthétiques possibles, et des contraintes réglementaires de plus en plus lourdes pesant sur les composés issus de l'industrie chimique, il serait souhaitable que ces actifs cosmétiques soient d'origine végétale.

20 Or, la Demanderesse a eu le mérite de montrer qu'il était possible d'agir par voie topique sur une nouvelle cible biologique, à savoir la matriptase MT/SP1, pour lutter contre le dessèchement de la peau, de mettre au 25 point un test de criblage permettant de sélectionner des actifs agissant sur cette cible et d'identifier de nombreux extraits végétaux répondant à ce test, permettant ainsi de satisfaire aux besoins précités.

30 La matriptase MT/SP1 (encore désignée par ST14 et TAGD-15) est une protéase transmembranaire de type II largement exprimée dans la plupart des cellules d'origine épithéliale et notamment par les kératinocytes. Des 2905858 4 études récentes sur la souris ont montré que l'ablation de la matriptase MT/SP1 résultait en des malformations du stratum corneum, qui présentait un aspect plus compact et une stratification moins organisée, compromettant la 5 fonction barrière épidermique et finissant par entraîner la mort de la souris par déshydratation. Cette protéase est par ailleurs connue pour être exprimée dans une grande diversité de tumeurs humaines d'origine épithéliale, ainsi que lors de la cicatrisation et dans 10 des maladies de peau telles que l'ichtyose. Dans l'étude précitée, la souris est ainsi utilisée comme modèle pour l'étude de ces pathologies (K. List et al., Oncogene, 2002 ; 21:3765-3779). Une étude plus récente (List et al., J. Cell. Biol., 2003 ; 163:901-910) a montré que la 15 matriptase MT/SP1 était une enzyme clé dans la différenciation terminale épidermique et que la souris déficiente en matriptase constituait un bon modèle pour étudier l'ichtyose humaine sévère de type dit Harlequin.

20 Toutefois, à la connaissance de la Demanderesse, il n'a encore jamais été divulgué d'actifs cosmétiques stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1, ni a fortiori suggéré des les utiliser en application topique sur la peau humaine non pathologique.

25 La présente invention a ainsi pour objet un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une 30 composition renfermant au moins un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1.

2905858 5 La présente invention a également pour objet l'utilisation cosmétique d'un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 pour hydrater la peau humaine et/ou à la protéger vis-à-vis du 5 dessèchement. En préambule, il est précisé que par "actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1", on entend un composé ou (notamment dans le cas d'un extrait 10 botanique) un mélange de composés susceptible(s) de stimuler l'expression de la matriptase MT/SP1 par rapport à un témoin non traité, déterminée en particulier à l'aide de la méthode d'amplification en chaîne par polymérase en temps réel (RT-PCR) telle que décrite dans 15 les Exemples ci-après. L'actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 peut être utilisé à raison de 0. 00001 à 10 % en poids, de préférence à raison de 0.0001 à 5 % en poids, 20 et plus préférentiellement à raison de 0.001 à 1 % en poids, par rapport au poids total de la composition. Les actifs utilisables selon l'invention sont avantageusement des extraits botaniques, c'est-à-dire des 25 actifs obtenus par extraction à l'aide de tout type de solvant de toute partie d'une plante telle que l'écorce, le bois, les racines, les rhizomes, les tiges, les feuilles, les fruits ou les fleurs, par exemple. Des exemples de tels actifs comprennent : 30 - des extraits (en particulier de feuilles séchées) d'Ylang ou Cananga odorata Hook., avantageusement obtenus par extraction alcoolique à l'aide d'un monoalcool tel 2905858 6 que l'éthanol, éventuellement mélangé à de l'eau, et/ou d'un glycol tel que le propylène glycol ; - des extraits (en particulier d'écorce) de Katafray ou Cedrelopsis grevei, tels qu'une huile essentielle de 5 cette plante, avantageusement obtenue par hydrodistillation ; et - des extraits (en particulier de rameaux et/ou de feuilles) de ciste ou Cistus ladaniferus L., avantageusement obtenus par extraction liquide/liquide de 10 l'eau d'hydrodistillation de cette plante, après élimination de l'huile essentielle, à l'aide d'un solvant organique apolaire, ayant un indice de polarité inférieur à 1, tel que l'hexane, le cyclohexane, l'heptane et 1'isooctane.

15 D'une façon générale, l'extraction peut être réalisée sur tout ou partie de la plante considérée, qui peut être broyée ou réduite en morceaux de manière usuelle. L'extraction est généralement réalisée en 20 immergeant ou en agitant doucement le broyat dans un ou plusieurs des solvants cités ci-dessus à des températures allant, par exemple, de la température ambiante à 100 C, pendant une durée d'environ 30 min à 12 h. La solution est alors de préférence filtrée afin d'éliminer les 25 substances insolubles de la plante. On élimine également, le cas échéant, le solvant s'il s'agit d'un solvant volatil tel que, par exemple, l'éthanol, le méthanol, l'hexane ou le cyclohexane.

30 Un procédé d'hydrodistillation ou entraînement à la vapeur d'eau (distillation d'un mélange d'eau et de tout ou partie de la plante considérée) peut être également mis en œuvre pour l'obtention de l'extrait. Quelque soit 2905858 7 la nature des composés organiques mis en œuvre, la température d'ébullition du mélange est généralement inférieure à 100 C. On récupère selon ce procédé un mélange de substances organiques et de vapeur d'eau. La 5 température du mélange reste constante jusqu'à épuisement d'un des réactifs. Ensuite, à l'aide d'un réfrigérant à eau, la condensation de ce mélange gazeux provoque sa séparation en deux phases liquides : - une phase organique supérieure non miscible à 10 l'eau, dite huile essentielle, contenant la majorité des composés odorants, - une phase aqueuse inférieure, dite eau aromatique, qui n'en contient que très peu.

15 L'extraction ou l'hydrodistillation sont usuelles dans le domaine des extraits de plantes, et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels, sur la base de ses connaissances générales. Ces procédés d'extraction peuvent éventuellement être 20 complétés par d'autres étapes de fractionnement comme une étape de distillation à court jet (ou distillation moléculaire), une extraction liquide/liquide, une extraction par fluide supercritique, une filtration tangentielle ou encore une distillation fractionnée.

25 L'actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 est utilisé selon l'invention à des fins cosmétiques, pour favoriser la formation d'une barrière fonctionnelle et permettre une meilleure hydratation de 30 la peau humaine ou la protéger vis-à-vis du dessèchement. L'invention vise par conséquent à améliorer l'aspect de la peau humaine saine, non pathologique, par opposition aux peaux atteintes de maladies dermatologiques telles 2905858 8 que l'ichtyose. Les inventeurs ont mis en évidence que cet effet était atteint par une amélioration de la fonction barrière. Le procédé selon l'invention peut donc être mis en oeuvre pour lutter contre les signes cutanés 5 résultant d'une fonction barrière perturbée mais non pathologique, y compris la rugosité de la peau, les inconforts dont les rougeurs, les tiraillements, les picotements et les démangeaisons, la perte d'éclat du teint ou teint terne, la perte de souplesse de la peau et 10 les gerçures. L'effet hydratant de la composition utilisée selon l'invention peut notamment être mesuré par cornéométrie, selon des techniques habituelles bien connues de l'homme 15 du métier. De façon préférée, l'actif utilisé selon l'invention, ou la composition mise en oeuvre dans le procédé selon l'invention, sont appliqués sur une peau 20 sèche non pathologique. Ils peuvent être avantageusement appliqués sur la peau du visage, du cou et éventuellement du décolleté ou en variante sur une partie quelconque du corps.

25 La composition renfermant cet actif peut être appliquée le matin et/ou le soir, sur l'ensemble du visage, du cou et éventuellement du décolleté voire du corps.

30 La composition mise en oeuvre selon l'invention comprend généralement, outre l'actif décrit précédemment, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui convient à 2905858 9 une utilisation en contact avec la peau humaine sans risque de toxicité, d'incompatibilité, d'instabilité, de réponse allergique et notamment qui ne provoque pas de sensations d'inconfort (rougeurs, tiraillements, 5 picotements...) inacceptables pour l'utilisateur. Ce milieu contient généralement de l'eau et éventuellement d'autres solvants tels que l'éthanol.

10 La composition utilisée selon l'invention peut se présenter sous toute forme adaptée à une application topique sur la peau et en particulier sous forme d'émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou multiple (E/H/E ou H/E/H), qui peuvent éventuellement être des 15 microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme d'hydrodispersion, de solution, de gel aqueux ou de poudre. On préfère que cette composition se présente sous la forme d'une émulsion huile-dans-eau.

20 Cette composition est de préférence utilisée en tant que produit de soin ou de nettoyage de la peau du visage et/ou du corps et elle peut se présenter notamment sous forme de fluide, de gel ou de mousse, conditionnés par exemple dans un flacon-pompe, un aérosol ou un tube, ou 25 de crème conditionnée par exemple dans un pot. En variante, elle peut avoir la forme d'un produit de maquillage et en particulier d'un fond de teint ou d'une poudre libre ou compacte.

30 Elle peut contenir différents adjuvants, tels qu'au moins un composé choisi parmi : 2905858 10 - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi : les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles, telles que les polydiméthylsiloxanes (dimethicones), les 5 polyalkylcyclosiloxanes (cyclomethicones) et les polyalkylphenylsiloxanes (phenyldimethicones); les huiles synthétiques telles que les huiles fluorées, les alkyl benzoates et les hydrocarbures ramifiés tels que le polyisobutylène; les huiles végétales et 10 notamment de soja ou de jojoba; et les huiles minérales telles que l'huile de paraffine; les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba; 15 - les élastomères de silicone obtenus notamment par réaction, en présence d'un catalyseur, d'un polysiloxane ayant au moins un groupe réactif (hydrogène ou vinyle, notamment) et portant au moins un groupe alkyle (notamment méthyle) ou phényle, 20 terminal et/ou latéral, avec un organosilicone tel qu'un organohydrogenopolysiloxane; -les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères, et en particulier les esters d'acides gras 25 et de polyols tel que les esters d'acides gras et de glycérol, les esters d'acides gras et de sorbitan, les esters d'acides gras et de polyéthylèneglycol et les esters d'acides gras et de sucrose; les éthers d'alcools gras et de polyéthylèneglycol; les 30 alkylpolyglucosides; les polysiloxanes modifiés polyéthers; la bétaïne et ses dérivés; les polyquaterniums; les sels de sulfate d'alcools gras éthoxylés; les sulfosuccinates; les sarcosinates; les 2905858 11 alkyl- et dialkylphosphates et leurs sels; et les savons d'acides gras; - les co-tensioactifs tels que les alcools gras linéaires et en particulier les alcools cétylique et 5 stéarylique; - les épaississants et/ou gélifiants, et en particulier les homo- et copolymères réticulés ou non, hydrophiles ou amphiphiles, d'acide acryloylméthylpropane sulfonique (AMPS) et/ou d'acrylamide et/ou d'acide 10 acrylique et/ou de sels ou d'esters d'acide acrylique; la gomme de xanthane ou de guar; les dérivés cellulosiques; et les gommes de silicone (dimethiconol); - les filtres organiques, tels que les dérivés de 15 dibenzoylméthane (dont le butyl methoxydibenzoylmethane), les dérivés d'acide cinnamique (dont l'ethylhexyl methoxycinnamate), les salicylates, les acides para-aminobenzoïques, les 3- R'-diphénylacrylates, les benzophénones, les dérivés 20 de benzylidène camphre, les phénylbenzimidazoles, les triazines, les phénylbenzotriazoles et les dérivés anthraniliques; les filtres inorganiques, à base d'oxydes minéraux sous forme de pigments ou de nanopigments, enrobés ou 25 non, et en particulier à base de dioxyde de titane ou d'oxyde de zinc; - les colorants; - les conservateurs; les charges, et en particulier les poudres à effet 30 soft-focus, qui peuvent être notamment choisies parmi les polyamides, la silice, le talc, le mica, les fibres (notamment de polyamide ou de cellulose); les séquestrants tels que les sels d'EDTA; 2905858 12 - les parfums; - et leurs mélanges, sans que cette liste ne soit limitative.

5 Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Sème Edition, 2002) qui décrit une grande variété, sans 10 limitation, d'ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques habituellement utilisés dans l'industrie du soin de la peau, qui conviennent pour être utilisés comme ingrédients additionnels dans les compositions selon la présente invention.

15 La composition utilisée selon l'invention peut également apporter des bénéfices additionnels, incluant une activité apaisante ou anti-inflammatoire, une activité blanchissante ou dépigmentante, une activité anti-âge et/ou une activité nettoyante.

20 La composition utilisée selon l'invention peut en outre comprendre d'autres actifs que ceux stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1, et en particulier au moins un actif choisi parmi les agents kératolytiques et en particulier les a-hydroxyacides tels 25 que les acides glycolique, lactique et citrique, et leurs esters ou leurs sels; les (3-hydroxyacides, tels que l'acide salicylique et ses dérivés; les agents augmentant la différenciation et/ou la cornéification des kératinocytes, soit directement, soir indirectement en 30 stimulant par exemple la production de 3-endorphines, tels que les extraits de Thermus thermophilus ou de coques de fèves de Theobroma cacao, les extraits hydrosolubles de maïs, les extraits peptidiques de 2905858 13 Voandzeia substerranea et le niacinamide ; les lipides épidermiques et les agents augmentant la synthèse de lipides épidermiques, soit directement, soit en stimulant certaines R-glucosidases qui modulent la déglycosylation 5 de précurseurs lipidiques comme le glucosylcéramide en céramides, tels que les phospholipides, les céramides, les hydrolysats de protéine de lupin et les dérivés d'acide dihydrojasmonique ; les agents humectants, tels que les polyols et en particulier la glycérine, les 10 glycosaminoglycannes tels que l'acide hyaluronique, les sucres et leurs alkylesters, les acides aminés tels que la glycine, l'arginine, l'histidine, l'alanine, la thréonine, la lysine, l'acide glutamique, la taurine, la proline, la sérine et leurs dérivés, l'acide pyrrolidone 15 carboxylique (PCA) et ses sels, l'urée et ses dérivés, l'ectoïne, la glucosamine, la créatine, la choline, la bétaïne, les sels minéraux tels que les sels de chlore, de sodium, de potassium, de calcium, de magnésium, de zinc, de manganèse, de phosphate et les polymères 20 synthétiques humectants tels que les homoet copolymères de méthacryloyloxyéthyl-phosphorylcholine et les homo- et copolymères de (meth)acrylate de glycéryle ; les systèmes de comblement ; les agents facilitant l'absorption percutanée tels que les alcools, les alcools gras et les 25 acides gras et leurs dérivés ester ou éther, les pyrrolidones, les terpènes, les huiles essentielles et les a-hydroxyacides; les agents anti-oxydants et/ou antiradicalaires et/ou anti-pollution, tels que le tocophérol et ses esters, l'acide ascorbique et ses alkyl- et 30 phosphorylesters et certains extraits de plantes ou d'algues et en particulier de Thermus thermophilus ; et leurs mélanges, sans que cette liste ne soit limitative.

2905858 14 Les agents précités peuvent être éventuellement vectorisés dans des systèmes de ciblage tels que des liposomes, des micelles telles que les micelles à base de lactate de sodium et sodium PCA commercialisées par les 5 Laboratoires Sérobiologiques sous la dénomination commerciale Micelles Sèches LS8695, des oléosomes, des nanocapsules ou des nanoparticules, ou encore être véhiculés dans des matrices polymériques telles que la matrice filmogène à base de gomme d'acacia et d'alginate véhiculant de la 10 sérine, disponible auprès de la société COLETICA sous la dénomination commerciale MICROPATCH". Par "systèmes de comblement", on entend les systèmes de délivrance cutanée de composés susceptibles d'absorber 15 l'eau contenue dans la peau et d'augmenter de volume par suite de cette absorption. Des exemples de tels systèmes sont notamment des sphères de comblement à base de glycosaminoglycannes telles que les sphères à base d'acide hyaluronique ou de chondroïtine sulfate notamment 20 commercialisées par la société COLETICA. Il est apparu à la Demanderesse que l'association des actifs stimulant l'expression de la matriptase avec un ou plusieurs des agents décrits précédemment 25 permettait de combiner avantageusement dans une même formule les effets, respectivement à long terme et immédiat, de ces deux types d'actifs et d'obtenir ainsi une hydratation maximale et de longue durée de la peau.

30 L'invention a donc également pour objet une composition cosmétique renfermant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SPl et au moins un actif 2905858 15 choisi parmi les agents kératolytiques, les agents augmentant la différenciation et/ou la cornéification des kératinocytes, les lipides épidermiques et les agents augmentant la synthèse de lipides épidermiques, les 5 agents humectants, les systèmes de comblement et leurs mélanges. Plus particulièrement, l'invention a pour objet une composition renfermant, dans un milieu physiologiquement 10 acceptable, au moins un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 et au moins un actif choisi parmi : un extrait fermenté de Thermus thermophilus, le hyaluronate de sodium et leurs mélanges.

15 L'invention sera maintenant illustrée par les exemples non limitatifs suivants. EXEMPLES Exemple 1 : Test de stimulation de l'expression de l'ARNm de la matriptase MT/SP1 (RT-PCR) Extraits testés : 25 On a évalué l'activité de trois extraits botaniques, à savoir : - un extrait éthanolique de feuilles séchées de Cananga odorata Hook., 30 - une huile essentielle de Cedrelopsis grevei, obtenue par hydrodistillation classique, et - un extrait de rameaux et de feuilles de Cistus ladaniferus L., obtenu par extraction liquide/liquide de 20 2905858 16 l'eau d'hydrodistillation de cotte plante, après élimination de l'huile essentielle (Cistus Water Concentrate F0940 fourni par BIOLANDES).

5 Protocole : L'effet des extraits botaniques sur l'expression de l'ARNm de la matriptase MT/SP1 a été évalué par amplification en chaîne par polymérase en temps réel (en anglais RT-PCR pour real- 10 time polymerase chain reaction ), en vue de quantifier l'expression de l'ARN messager de la matriptase MT/SP1 dans un échantillon traité par rapport à un échantillon non traité. Les résultats sont normalisés par rapport à l'expression de gènes domestiques dans ces échantillons.

15 Les résultats sont exprimés en nombre de fois d'augmentation ou de diminution d'expression du gène cible (matriptase MT/SP1) dans l'échantillon traité, et non en nombre absolu de copies.

20 Les séquences des ADNc/ARNm des gènes investigués ont été obtenues chez GenBank. Gène cible : Matriptase MT/SP1 Gène domestique : (3-2-microglobuline 25 Toutes les amorces de PCR ont été obtenues en utilisant le logiciel PRIMER3 de Whitehead Institute for Biomedical Research. L'ARNm a été isolé en utilisant le kit Qiagen RNeasy 30 (QIAGEN) selon les recommandations du fabricant. La transcription inverse en ADNc a été effectuée à l'aide du kit gene Amp RNA PCR (Applied Biosystems) selon les recommandations du fabricant.

2905858 17 La mesure de PCR en temps réel a été effectuée en utilisant l'appareil iCYCLER IQ (Biorad) avec détection SYBR Green I. Dans tous les essais, l'ADNc a été amplifié 5 en utilisant un programme standardisé. Chaque échantillon a été chargé avec du supermixe IQ SYBR Green I, de l'eau et de l'amorce (stock) ; la quantité finale d'ADNc par réaction correspondait à 50 ng d'ARN total utilisé pour la transcription inverse.

10 La quantification relative de l'expression du gène cible a été effectuée en utilisant le modèle mathématique de Pfaffl (Pfaffl, MW, Nucleic Acids Res. 29(9), p. E45, 2001). Le test a été réalisé sur des kératinocytes humains normaux en culture en triplicat traités avec les extraits pendant six heures. Les résultats positifs ont été confirmés en utilisant des cellules de deux donneurs 20 différents. Résultats : Les résultats sont rapportés dans le tableau 2 ci-25 dessous : Actif testé Concentration(u Stimulation de Ecart-type la matriptase* Cananga 100 pg/ml + 36 0.15 odorata Hook. ) Cedrelopsis 50 pg/ml + 50% 0.17 grevei Cistus 0.005 + 55% 0.09 ladaniferus L. 15 2905858 18 (1) les concentrations des extraits sont exprimées en poids d'extrait brut par poids ou volume de préparation (2) extrait dilué à 80% en poids dans du propylène glycol 5 * par rapport au témoin non traité Il ressort de ce test que les actifs testés permettent de stimuler l'activité de la matriptase MT/SP1. Bien que cet effet soit de faible amplitude, il a été observé de façon 10 reproductible sur les deux lots de kératinocytes testés et pour différentes concentrations en extrait et de façon dose-dépendante. Exemple 2 : Test de stimulation de l'expression de la 15 protéine matriptase MT/SP1 (immunofluorescence) Protocole : La stimulation de l'expression de la matriptase obtenue avec 20 les extraits décrits à l'Exemple 1 a été évaluée dans un modèle de peau reconstruite. Ce modèle a été préparé de la manière suivante : une solution de collagène contenant du collagène de type I de queue de rat 25 (BD), du milieu DMEM 10X (Gibco), du bicarbonate de sodium (Gibco) et des fibroblastes a été versée dans des inserts de culture cellulaire de 24 mm (Falcon, Becton Dickinson, Schwechat, Autriche) qui ont été placés dans des plaques à six puits (Falcon). Après deux heures à 37 C, les gels ont 30 été équilibrés dans du KGM à 37 C dans un environnement à 5% de CO2 / 95% d'air, au sein d'un incubateur humidifié. Après deux heures, du KGM contenant des kératinocytes a été ajouté au gel. Après immersion de la culture pendant la nuit, le 2905858 19 milieu a été remplacé par du milieu de kératinocytes sans sérum (SKDM, qui est un milieu riche en Cal'consistant en KGM sans extrait pituitaire bovin, transferrine de SIGMA, BSA de SIGMA et acide L-ascorbique de SIGMA) à l'extérieur de 5 l'insert, et les kératinocytes ont été maintenus à l'interface air-liquide. Le milieu de culture des peaux reconstruites a été remplacé tous les deux jours par du SKDM frais préchauffé, et la culture a été poursuivie jusqu'à sept jours, avec ou sans les actifs à différentes concentrations.

10 Les peaux reconstruites ont ensuite été préparées en vue de leur analyse par immunofluorescence. Des coupes de 5 pm d'épaisseur ont été réalisées à partir de peaux reconstruites fixées par du paraformaldéhyde puis congelées. Les liaisons 15 non spécifiques des coupes ont été bloquées avec du sérum (sérum albumine bovine). Les échantillons de peaux reconstruites ainsi préparés ont été incubés avec un anticorps anti-matriptase (Bethyl Laboratories, TX), puis marqués dans une seconde étape par un second anticorps 20 complexé à un agent fluorescent (anti lapin Alexa Fluor 546, Molecular Probes, UK). La détection a été effectuée par immunofluorescence. Les lames ont été examinées à l'aide d'un microscope Leica.

25 Résultats : On a observé que les extraits deCistus Ladaniferus L. (0.005%), de Cedrelopsis grevei (50 pg/ml) et de Cananga odorats Hook. (100 pg/ml) stimulaient tous l'expression de la 30 matriptase MT/SP1, visible au niveau du stratum granulosum. Ces résultats ont été confirmés en utilisant des cellules issues de deux donneurs.

2905858 20 Exemple 3 : Compositions cosmétiques Les compositions suivantes peuvent être préparées de façon classique pour l'homme du métier. Les quantités 5 indiquées ci-dessous sont exprimees en pourcentages pondéraux. Les ingrédients en majuscules sont identifiés conformément à la dénomination INCI.

3A - Gel crème (émulsion huile-dans-eau) 10 EDTA tétrasodique 0.05 % 0 Glycérine 5.00 % Gélifiants de phase aqueuse 4.00 % Alcool 3.00 % 15 Conservateurs 0.50 % Extrait de Cananga odorata(u 0.10 % Hyaluronate de sodium 3.00 % Cyclomethicone 8.00 % Dimethicone 3.00 % 20 Isononanoate d'isononyle 3.00 % Parfum qs Colorants qs Eau qsp 100.00 % 25 (1) tel que décrit à l'Exemple 1 puis dilué à 80% en poids dans du propylène glycol Cette composition peut être appliquée quotidiennement, matin et/ou soir, sur la peau du visage pour l'hydrater et la 30 rendre souple, lisse et lumineuse.

3B - Sérum (émulsion eau-dans-silicones) 2905858 21 GLYCERYL POLYMETHACRYLATE & PROPYLENE GLYCOL(2) 10.00 % Glycérine 5.00 % Conservateurs qs 5 Alcool 10.00 % Extrait de Cedrelopsis grevei(3) 0.50 % Mélange de sucres et d'acides aminés(4) 3.00 % Pyrrolidone carboxylate de sodium 4.00 % Hyaluronate de sodium 2.50 % 10 SACCHARIDE ISOMERATE(5) 1.00 % Micelles sèches hydratantes(6) 20.00 % Extrait de Thermus thermophillus(7) 3.00 % CYCLOPENTASILOXANE & PEG/PPG-18/8 DIMETHICONE 20.00 % Colorants qs 15 Eau qsp 100.00 % (2) LUBRAJEL MS0 de GUARDIAN LABORATORRES (3) tel que décrit à l'Exemple 1 (4) HYDRATYL LS 8453 de LABORATOIRES SEROBIOLOGIQUES 20 5) PENTAVITIN de PENTAPHARM (6) Micelles Sèches LS8695 de LABORATOIRES SEROBIOLOGIQUES (7) Venuceane de SEDERMA Cette composition peut être appliquée quotidiennement, 25 matin et/ou soir, sur des peaux particulièrement déshydratées et/ou exposées aux agressions de l'environnement, pour améliorer leur confort et leur aspect.

3C - Crème (émulsion huile-dans-eau) Panthénol GLYCERYL POLYMETHACRYLATE & PROPYLENE GLYCOL(2) 30 0.40 % 10.00 % 2905858 22 Polymère carboxyvinylique 0.60 % Solution de soude à 25% 0.30 % Hyaluronate de sodium 0.30 % Glycérine 3. 00 % 5 Extrait de Cistus ladaniferus L.(') 1.00 % Stéarate de glycéryle 1.50 % Alcool cétylique 1.50 % Stéarate de polyoxyéthylène (40 0E) 2.00 % Alcool stéarylique oxyéthyléné (2 0E) 0.50 % 10 Néopentanoate d'octyldodécyle 5.00 % Benzoate d' alkyles en Clz_15 3.00 % Huiles végétales 3.00 % Esters de phytostérol 1.00 % Acétate de tocophéryle 1.00 % 15 Huiles de silicone 4.00 % EDTA disodique 0.05 % Conservateurs 0.90 % Colorants qs Eau qsp 100.00 % 20 (2) LUBRAJEL MS de GUARDIAN LABORATORIES (7) tel que décrit à l'Exemple 1 Cette crème peut être appliquée sur une peau sèche le 25 matin et/ou le soir, pour améliorer sa douceur et sa souplesse et empêcher la formation de stries de déshydratation.

Claims (18)

REVENDICATIONS

1. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à l'hydrater et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement, comprenant l'application topique sur la peau d'une composition renfermant au moins un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 est un extrait botanique.

3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'actif est un extrait de Cananga odorata Hook.

4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'actif est un extrait de feuilles séchées.

5. Procédé selon la revendication 3 ou 4, 20 caractérisé en ce que l'extrait est susceptible d'être obtenu par extraction alcoolique à l'aide d'un monoalcool éventuellement mélangé à de l'eau et/ou d'un glycol.

6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en 25 ce que l'extrait est susceptible d'être obtenu par extraction éthanolique.

7. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'actif est un extrait de Cedrelopsis grevei.

8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'actif est un extrait d'écorce. 30 2905858 24

9. Procédé selon la revendication 7 ou 8, caractérisé en ce que l'extrait est une huile essentielle susceptible d'être obtenue par hydrodistillation. 5

10. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'actif est un extrait de Cistus ladaniferus L.

11. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que l'actif est un extrait de rameaux et/ou de 10 feuilles.

12. Procédé selon la revendication 10 ou 11, caractérisé en ce que l'extrait est susceptible d'être obtenu par extraction liquide/liquide de l'eau 15 d'hydrodistillation, après élimination de l'huile essentielle, à l'aide d'un solvant organique apolaire, ayant un indice de polarité inférieur à 1.

13. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisé en ce qu'il est mis en oeuvre pour lutter contre les signes cutanés résultant d'une fonction barrière perturbée non pathologique.

14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que lesdits signes sont choisis parmi : la rugosité de la peau, les rougeurs, les tiraillements, les picotements, les démangeaisons, la perte d'éclat du teint, la perte de souplesse de la peau et les gerçures.

15. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, caractérisé en ce qu'il est mis en oeuvre sur une peau sèche non pathologique. 2905858 25

16. Utilisation cosmétique d'un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 pour hydrater la peau humaine et/ou à la protéger vis-à-vis du dessèchement. 5

17. Composition cosmétique renfermant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un actif stimulant l'expression de la matriptase MT/SP1 et au moins un actif choisi parmi : les agents kératolytiques, 10 les agents augmentant la différenciation et/ou la cornéification des kératinocytes, les lipides épidermiques et les agents augmentant la synthèse de lipides épidermiques, les agents humectants, les agents facilitant l'absorption percutanée, les systèmes de 15 comblement et leurs mélanges.

18. Composition selon la revendication 17, caractérisée en ce que l'actif est choisi parmi un extrait fermenté de Thermus thermophilus, le hyaluronate 20 de sodium et leurs mélanges.