FR2810887A1 - Preparations cosmetiques ou dermo-pharmaceutiques renfermant un extrait de feuilles d'olivier qui protege les cellules des agressions - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne les préparations cosmétiques ou dermo-pharmaceutiques à usage externe, d'hygiène ou de soins de la peau et des cheveux, caractérisées en ce qu'elles renferment un extrait de feuilles d'olivier qui protège les cellules des agressions. Ces agressions sont les rayonnements solaires, les produits chimiques ou les détergeants.
Description
-1- La présente invention concerne les préparations cosmétiques ou dermo-
pharmaceutiques à usage externe, d'hygiène ou de soins de la peau et des cheveux, caractérisées en ce qu'elles renferment
un extrait de feuilles d'olivier qui protège les cellules des agressions.
Ces agressions sont les rayonnements solaires, les produits chimiques ou les détergeants.
L'olivier un arbre millénaire Originaire d'Asie Mineure, la culture de l'olivier est connue depuis l'Antiquité (attesté 1300 ans av. J.-C. en Égypte, introduit en Europe occidentale par les Phéniciens au début du premier millénaire av. J.-C.) et largement cultivé dans tous les pays ensoleillés et à hiver doux (l'olivier
gèle au-dessous de - 8 C). L'olivier ne pousse pas à une altitude supérieure à 600 m environ.
Il y a 2 500 ans, les Phocéens puis les Grecs et les Romains, ont apporté une nouvelle manière de cultiver et d'utiliser les fruits de cet arbre qui est devenue ce que l'on appelle aujourd'hui
1 5 oléiculture.
L'olivier est présent depuis fort longtemps en France. Des pollens fossiles à Tautavel (Languedoc), des feuilles fossiles au pied de la Sainte Baume (Provence), attestent de cette présence depuis au moins 20 000 ans. De récents travaux de l'Université de Montpellier (Etude par des marqueurs moléculaires de la diversité génétique de l'olivier cultivé et des formes sauvages apparentées: applications en identification variétale et pour la gestion de la ressource génétique par Guillaume BESNARDOctobre 1999) montrent que la sélection des variétés que l'on trouve aujourd'hui serait le résultat d'un isolement ancestral (datant de la dernière glaciation) de 3 populations d'oliviers: Afrique du Sud, Asie et Bassin Méditerranéern Dans ce dernier, il existe des différences génétiques significatives entre les variétés de l'Ouest de la Méditerranée (dont la zone Française) et celles de l'Est. Les spécificités variétales constatées aujourd'hui remontent donc à fort longtemps. A la fin de la préhistoire, l'olivier était déjà présent et ses fruits
certainement récoltés sur le littoral méditerranéen français.
-2-
Description botanique de l'olivier
Olea europaea (Linné), famille des Oleaceae (oléacées).
Synonymes: Olea oleuster. Olea lancifolia. Olea gallica.
L'olivier est un arbre de 2 à 15 mètres de hauteur, pouvant vivre plus de 1000 ans, au tronc tourmenté portant à sa base de nombreux rejets; le bois d'olivier, brun clair veiné de marbrures
sombres, est apprécié par les ébénistes et les sculpteurs.
C'est un arbre à feuilles opposées, persistantes, coriaces, longues, lancéolées, simples et entières, vertes dessus, blanchâtres en dessous. La floraison a lieu entre avril et mai. L'arbre produit des fleurs à calice à quatre dents, une corolle, deux étamines, un ovaire arrondi portant un style épais et terminé par un stigmate. Cet ovaire contient deux ovules pendants. Les fleurs sont regroupées en courtes grappes donnant une drupe ovoïde et charnue (l'olive), à la pulpe (le mésocarpe) plus ou moins molle, à la peau lisse et dont la couleur, à maturation, va du rougeâtre au noir selon les variétés. À l'intérieur, un noyau (l'endocarpe) extrêmement dur adhère à la pulpe et protège la ou
les graines. Le mésocarpe est riche en huile.
Composition et utilisation de la feuille d'olivier Plusieurs études de chimie analytique ont mis en évidence de nombreuses substances dans la feuille d'olivier. Les principaux composés décrits sont repris ci-dessous en terme qualitatif,
aucune étude exhaustive ne permettant d'en fournir une description quantitative:
* COMPOSES POLYPHENOLIQUES (OU FLAVONOIDES OU IRIDOIDES):
Lutéoline Lutéoline-7-glucoside Diosmétine Diosmétine-7-glucoside Apigénine Apigénine-7-glucoside Rutine Oleuropéine -3 -
* DERIVES TERPENIQUES
* MONO/SESQUITERPENES:
Oléoside Oleuroside
* TRITERPENOLS
* ACIDES TRITERPENIQUES
Acide oléanolique Acide ursolique Acide bétulinique Acide oleuropéique Acide maslinique
* STEROLS:
Sitostérol Stigmastérol
* METHYL PHENYL ESTERS
* ACIDES GRAS POLYINSATURES - GLYCEROLIPIDES:
Acide oléique (18:1) Acide linoléique (18:2) Acide c-linoléique (18:3) Acide palmitique
* SUCRES:
Fructose Glucose mannitol Di-, tri-, tétrasaccharides
* AUTRE SUBSTANCES LIPOSOLUBLES:
Hydrocarbures saturés et misaturés Carotènes Esters d'acides gras Alcools terpéniques Alcools gras ox-tocophérol Triglycérides -4- Les feuilles constituent la partie active. Elles sont hypotensives et agissent sur l'ensemble des troubles subjectifs de l'hypertension artérielle. Les feuilles ont aussi un effet diurétique. L'olivier est utile dans la prévention de l'artériosclérose et des maladies coronariennes en régulant le taux de cholestérol. C'est aussi un régulateur du rythme cardiaque. L'innocuité de la feuille (absence de contre-indications et d'effets indésirables) et son efficacité prouvée, font de l'olivier un traitement préventif et curatif de l'hypertension artérielle. Il a de plus une action
hypoglycémiante à la base de son utilisation dans les traitements des diabètes non insulino-
dépendants. La peau protège l'organisme La peau est une enveloppe qui sépare l'organisme de l'environnement extérieur, évite les déperditions d'eau et la pénétration de substances toxiques. Sa surface est en moyenne de 1,80
m2 chez l'adulte.
C'est un organe de revêtement complexe dont l'épiderme, recouvert d'une couche cornée, repose sur un tissu de soutien fibrillaire, le derme, reposant lui-même sur l'hypoderme, coussin cellulo-adipeux. L'innervation cutanée est très abondante et assure la sensibilité tactile, douloureuse et thermique ainsi que la vasomotricité et la sécrétion sudoripare. La principale fonction de la peau consiste à protéger l'organisme de la déshydratation et des stress environnants. Cette protection vis-à-vis des agents extérieurs, directe contre les agressions mécaniques, caloriques, lumineuses et chimiques et indirectes avec les fonctions pilo-sébacées et sensorielles, est réalisée grâce à la
présence d'un épithélium stratifié kératinisé, l'épiderme, ainsi que du derme, et de l'hypoderme.
La protection contre les agressions mécaniques est principalement due à l'épiderme et au derme.
La protection contre les agressions caloriques, elle, met en jeu le derme et l'hypoderme, alors que celle contre les agressions chimiques et des rayonnements ultraviolets sont assurées par
l'épiderme seul.
La protection contre les bactéries et les virus est due à la barrière mécanique, mais aussi par le
film superficiel lipido-protidique.
-5 - L'extrait de feuilles d'olivier comme protecteur cellulaire et cutané Les inventeurs ont réalisé un extrait de feuilles d'olivier (voir exemple 1) qui peut être incorporé dans une formule cosmétique ou dermopharmaceutique (voir exemple 2) et qui protège les cellules et la peau envers les rayonnements solaires (voir exemple 4), les produits chimiques
(voir exemple 3) ou les détergeants (voir exemple 4).
De telles préparations cosmétiques vont permettre la réparation de la barrière cutanée (voir
exemple 5). Elles sont utilisées comme anti-toxique et désintoxiquant (voir exemple 3), anti-
inflammatoire, ou anti-érythémateux (voir exemple 5).
Exemple 1: Procédé d'extraction Deux extractions à l'alcool à 96 % sont réalisées sur des feuilles d'oliviers séchées et broyées
(cinq à dix volumes d'alcool).
Puis le solvant est évaporé et trois à cinq lavages à l'eau chaude (50 à 80 C) sont effectués avec
les mêmes volumes.
Le produit est ensuite repris dans un volume d'alcool à 96 % et agité avec un charbon actif.
Le produit est enfin filtré et évaporé.
-6- Exemple 2: Formule de crème L'extrait est incorporé dans des préparations de telle façon qu'elles contiennent de 0,01% à 10%
de l'extrait de feuilles d'olivier.
Par exemple:
Ingredients INCI % w/w
PHASE A
Emulgade SEV PEG 100 Stearate 7.00 Cetearyl alcohol Ceteareth alcohol Lanette O Cetearyl alcohol 1.00 Miglyol 812 Caprylic 3.00 Capric Triglycéride Eutanol G Octyldodecanol 4.00 Silicone DC 345 Cyclomethicone 0.50 Extrait de feuilles d'olivier Oliv leaves extract 1.00 Phenonip Phenoxyethanol and 0.30 Methylparaben and Buthylparaben and Ethylparaben and Propylparaben
PHASE B
Eau Déminéralisée Demineralised Water 81.90 Propylene Glycol Propylene Glycol 1.00
PHASE C
Parfum Fragrance 0.30 - 7- Exemple 3: Action in vitro anti-toxique et désintoxiquante L'effet de l'extrait de feuilles d'olivier est étudié au niveau de la protection de cellules cutanées de type A431 (lignée établie de kératinocytes humains) et de fibroblastes humains, contre les agressions par des solvants. Des chambres de puits sont ensemencées à 8000 cellules par puits environ et cultivées jusqu'à
obtenir une confluence de 60 à 80%.
Les cellules sont ensuite, pendant 24h, mises en présence des produits suivants: - 0,2 % d'extrait de feuilles d'olivier, 0,5 % de chloroforme et 0,5 % de DMSO, - 0,5 % de chloroforme et 0,5 % de DMSO,
- soit laissées sans application comme contrôle négatif.
Le milieu est ensuite éliminé et les cellules sont fixées par du méthanol à froid pendant 4 minutes. On procède ensuite à la coloration suivante:
2 min. dans l'hématoxyline.
4 min sous l'eau courante tiède 2 min. dans l'éosine 30%
Rinçage dans l'alcool 80%.
Rinçage dans l'alcool à 90% Montage aqueux avec Aquatex Cette coloration permet de donner des indications sur la morphologie des cellules, et donc sur
l'effet des solvants sur celles-ci.
Les colorations obtenues permettent très clairement d'observer un effet bénéfique de l'extrait de feuilles d'olivier sur les cellules soumises à un effet toxique induit par un solvant tel que le chloroforme et le DMSO (diméthyl sulfoxyde). Cet effet s'observe autant sur les kératinocytes
que sur les fibroblastes.
Alors que les puits sans extrait de feuilles d'olivier ne contiennent plus que quelques cellules mourantes, les puits avec extrait de feuilles d'olivier montrent une forte densité de cellules,
attestant d'un fort effet protecteur de l'extrait, d'un rôle anti-toxique et détoxifiant.
-8- Exemple 4: Action ex vivo de protection contre les UVB et les détergeants L'effet protecteur de l'extrait de feuilles d'olivier lors d'une agression par les UVB a été étudié
au niveau de la morphologie de la peau en culture.
Des échantillons de peau saine sont cultivés dans une étuve à 37 C. En premier lieu les crèmes sont appliquées de façon homogène et étalées sur la peau pendant quelques minutes à l'aide d'un pinceau pour faire pénétrer la crème. Des essais sont réalisés avec des crèmes placebo (sans
actif) ou des crèmes contenant 1 % de l'extrait de feuilles d'olivier.
Les échantillons sont placés pendant 6 heures à l'étuve à 37 C. Après 6 heures, des agressions sont réalisées ou non sur les échantillons, et ceux-ci sont ensuite laissés pendant 19 heures à 37 C. Les agressions réalisées sont de deux types: Agression physique: Radiation UVB 250 mJ/cm2 Agression chimique: solvant SDS 30 pg/ml (Sodium Dodécyl Sulfate) Les tissus sont ensuite fixés par du formol sale et inclus dans de la paraffine après déshydratation. Des coupes de 4 jim au microtome sont réalisées et collées sur des lames dégraissées ou
polylysinées suivant les expériences à pratiquer par la suite.
Une coloration HES à l'hématoxyline (coloration nucléaire), à l'éosine (coloration cytoplasmique) et au safran (coloration des fibres collagéniques) est réalisée sur une partie des
coupes afin d'évaluer la morphologie des peaux après agressions.
Les échantillons de peau sur lesquels la crème contenant l'actif a été appliquée présentent une morphologie normale, proche des échantillons qui n'ont pas subi l'agression. Par contre, les échantillons sans crème ou avec la crème placebo montrent les signes caractéristiques de
dégénérescence accompagnant une agression UVB ou SDS.
-9- Exemple 5: Action in vivo de protection contre les détergeants, de réparation de la barrière cutanée, action anti-inflammatoire et antiérythémateuse volontaires sains, âgés de 28 à 40 ans ont participé à cette étude. Elle s'est déroulée sur une période de 14 jours. L'étude a été réalisée en double aveugle. Trois zones de mesures ont été définies, chacune a été en contact avec du SLS (Sodium Lauryl Sulfate) à 10 % sous occlusion pendant 5 heures. Un
espace d'au moins 1 cm lors de la pose de chaque patch a été respecté.
Les produits ont été appliqués sur les zones suivantes: - zone supérieure (haut): placebo - zone inférieure (bas): extrait de feuilles d'olivier à 0,5% dans une crème
- zone du milieu: contrôle SLS.
L'hydratation de la peau a été quantifiée à l'aide du Cornéomètre CM825 (Courage and Khazaka Electronic, Koln, Germany). La capacitance (unité internationale), est une mesure de la teneur en eau du stratum corneum. La valeur obtenue est la moyenne de 3 mesures répétées successivement.
La perte insensible en eau (PIE) a été réalisée avec l'appareil Dermalab (Cortex Technology).
La mesure est exprimée en g/m2/h et s'interrompt quand l'écart type est = 0.1 ou quand elle atteint 60 secondes. La mesure a été pratiquée sous des conditions contrôlées de température et d'humidité. (22 C + 1 et 50% + 5) Des photos couleurs, ainsi qu'un examen clinique détaillé ont également été réalisés afin
d'étudier l'érythème.
J0: Après une phase d'acclimatation d'au moins 20 min, une mesure basale de l'hydratation et de la PIE ont été Téalisées, ainsi que des photos couleurs. Les 3 zones ont alors été mises en contact avec du SLS à 10 %. Au bout des 5 heures, les patchs ont été retirés et les zones
abondamment rincées.
La première application des produits, à raison de 10 mg/cm2, est réalisée au laboratoire, puis il
est demandé aux volontaires de s'appliquer les crèmes 2 fois par jour pendant 14 jours.
- 10 -
Des mesures ont ensuite été réalisées pour l'hydratation, la PIE et les photos prises à J1, J2, J3,
J7, J8, J9, J10.
L'analyse statistique a été pratiquée, en utilisant le test non paramétrique de Wilcoxon pour les séries appariées, sur les Aires Sous Courbe (AUC), pour chaque sujet. Les AUC ont été calculées à l'aide de la "méthode trapézoïdale ". Les surfaces ainsi calculées représentent la différence totale d'hydratation sur 3 heures entre notre produit Actif (A) et le Placebo (P) Hydratation: A JI1, on observe une augmentation de l'hydratation sur les 3 zones, due au suintement causé par l'altération de la barrière cutanée. Mais dès J2 le processus de cicatrisation est en cours, ce qui se traduit par une diminution de l'hydratation. Cette diminution est à ce stade déjà plus élevée
sur la zone ayant reçu l'extrait de feuilles d'olivier.
De J2 à J10, la croûte est bien présente sur la zone placebo et non traitée, avec une hydratation
qui diminue jusqu'à J7, et qui revient presque à la valeur basale à JI0.
Avec l'extrait de feuilles d'olivier, même si la courbe d'hydratation diminue jusqu'à J7 à cause de la formation d'une fine croûte, elle reste largement supérieure aux 2 autres zones. De plus de J7 à J10, l'hydratation augmente à nouveau et est largement supérieure à la valeur basale ainsi
qu'au placebo et à la zone non traitée.
Le calcul statistique des Aires Sous Courbes (AUC) selon la méthode décrite ci-dessus nous permet de conclure que l'hydratation avec l'extrait de feuilles d'olivier est significative
comparée à celle observée sous placebo (p = 0.0321).
PIE: A J1, les valeurs de la perte insensible en eau augmentent sur les 3 zones, du fait de l'altération de la barrière cutanée induite par le SLS. Dès J1, l'application de l'extrait de feuilles d'olivier après l'enlèvement des patchs a permis d'observer une diminution de la valeur de la PIE (perte
insensible en eau) par rapport aux 2 autres zones.
De J1 à J7, la PIE diminue sur les 3 zones, avec une PIE plus faible sur la zone ayant reçue
l'extrait de feuilles d'olivier.
- 11 -
De J7 à J10, la mesure de la PIE diminue plus lentement sur l'ensemble des zones car le processus de réparation est presque terminé. Mais seule la zone traitée avec l'extrait de feuilles
d'olivier arrive pratiquement à la valeur basale.
Le calcul statistique des Aires Sous Courbes (AUC) selon la méthode décrite ci-dessus nous permet de conclure que la PiE avec l'extrait de feuilles d'olivier est pratiquement significative
comparée à celle observée sous placebo (p = 0.0625).
Erythème: A J 1, on observe un érythème régulier sur les trois zones pour 4 volontaires. Alors que sur le 5ec ,on ne voit déjà plus d'érythème sur la zone de l'actif., A J2 et J3 pour trois volontaires, on ne constate plus d'érythème sur la zone ayant reçu l'actif, et
pratiquement plus sur les autres. Seul un volontaire n'a plus d'érythème sur la zone placebo.
A partir de J7, on observe davantage un phénomène de cicatrisation. Ainsi, sur la plupart des sujets, on peut voir que la barrière cutanée est complètement restaurée au niveau de la zone ayant reçu l'extrait de feuilles d'olivier alors que sur les 2 autres zones, le processus de
cicatrisation est toujours en cours.
CONCLUSION
L'application immédiate de l'extrait de feuilles d'olivier, suite à une altération de la barrière cutanée, permet une réparation plus rapide de l'épiderme. En effet, en présence de l'actif, on observe un érythème moins prononcé, une meilleure hydratation ainsi qu'une PIE inférieure si
on la compare à la zone du placebo et à la zone non traitée.
- 12-
Claims (5)
1. Préparations cosmétiques ou dermo-pharmaceutiques à usage externe, d'hygiène ou de soins de la peau et des cheveux, caractérisées en ce qu'elles renferment un extrait de feuilles d'olivier qui protège les cellules des agressions.
2. Préparations selon la revendication I caractérisées en ce que l'extrait de feuilles d'olivier utilisé protège les cellules et la peau envers les rayonnements solaires, les produits chimiques
ou les détergeants.
3. Préparations selon les revendications I et 2 caractérisées en ce qu'elles vont permettre la
réparation de la barrière cutanée.
4. Préparations selon les revendications 1, 2 et 3 caractérisées en ce qu'elles sont utilisées
comme anti-toxique, désintoxiquant, anti-inflammatoire, ou antiérythémateux.
5. Préparations selon les revendications 1, 2, 3 et 4 caractérisées en ce qu'elles contiennent de
0,01 % à 10 % de l'extrait de feuilles d'olivier.
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