FR2747884A1 - Extrait de girofle, son utilisation comme conservateur alimentaire et dans des compositions pour l'hygiene dentaire et cosmetique - Google Patents
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Abstract
Un agent germicide préparé en dissolvant de l'écorce et de la tige de fleur séchée de girofle dans de l'eau et en distillant la solution dans un appareil de distillation continu à circulation est utilisé dans une série d'applications notamment comme conservateur d'aliments, spray sanitaire, prévention de caries dentaires, cosmétique médical, etc. Il peut être utilisé seul ou en association avec d'autres agents. Il a une activité germicide supérieure tout en étant dépourvu de toxicité vis-à-vis du corps humain.
Description
La présente invention concerne un agent germicide extrait d'un végétal comestible et des compositions comprenant celui-ci comme ingrédient actif. Comme source d'agent germicide, on utilise l'écorce et/ou la tige de fleur séchée de girofle (Eugenia caryphyllafa), une plante naturelle à feuilles persistantes d'une région du sud de la Chine.
La composition comprenant l'agent germicide est utilisée comme conservateur d'aliments, comme fongicide ambiant, comme matière première pour produits médicaux et cosmétiques, et comme additif pour l'hygiène de la cavité orale, notamment des additifs pour pâte dentifrice et gomme à mâcher.
A ce jour, les conservateurs pour aliments sont dérivés de sources naturelles ou bien synthétisés par des procédés chimiques.
Comme exemples de conservateurs synthétiques, on peut citer l'acide benzoïque, le benzoate de sodium, l'acide diphénylsorbique, le sorbate de sodium, l'acide dihydroacétique, l'acétate de dihydrosodium, l'ester d'acide paraoxybenzoïque, le proponiate de sodium et l'hypobendazole (se référer à
Japanese Practical Knowledge of Food Additives, Ed. 2). En outre, des monoglycérides d'acides gras inférieurs contenant 4 à 12 atomes de carbone sont utilisés comme agents pour conserver la fraîcheur, comme décrit dans "Germicidal
Activity of Lower Fatty Acid Esters", New Food Industry, vol. 18, N" 11 (1976), p. 1-7. Selon ce document également, les agents sont formulés avec de l'acide polyphosphoreux, un acide organique tel que l'acide citrique et de l'acide acétique.
Japanese Practical Knowledge of Food Additives, Ed. 2). En outre, des monoglycérides d'acides gras inférieurs contenant 4 à 12 atomes de carbone sont utilisés comme agents pour conserver la fraîcheur, comme décrit dans "Germicidal
Activity of Lower Fatty Acid Esters", New Food Industry, vol. 18, N" 11 (1976), p. 1-7. Selon ce document également, les agents sont formulés avec de l'acide polyphosphoreux, un acide organique tel que l'acide citrique et de l'acide acétique.
Dans ce domaine, il y a de nombreux brevets qui ont trait à des conservateurs comprenant des monoglycérides d'acides gras inférieurs.
La glycine, la phénylalanine et la lysine sont bien connues comme conservateurs naturels. On rapporte également dans la publication de brevet japonais ouverte à l'inspection publique n" Heisei 2-1630 on peut ajouter aux aliments des matières germicides naturelles extraites de plantes, telles que celles qui sont extraites par des solvants organiques de l'oignon, de l'orégan, de la racine de liquorice, du girofle, du céleris, du houblon, de la vanille, du wasabi, de la cannelle et du thé.
En raison de l'existence de sévères standards d'utilisation, la majeure partie des conservateurs synthétiques sont cependant soumis à des restrictions en termes de quantité et de destination. En outre, les consommateurs n'aiment pas beaucoup les utiliser du fait qu'ils pourraient se révéler toxiques pour le corps humain.
Bien que classés dans les conservateurs synthétiques, les monoglycérides d'acides gras inférieurs existent dans la nature et on sait qu'ils sont inoffensifs pour le corps humain. Du fait que leur activité bactéricide est basée sur l'inhibition de l'activité enzymatique, les monoglycérides d'acides gras inférieurs ont un effet inhibiteur élevé sur la croissance de bactéries. Pour que leur effet s'exerce de manière suffisante, il est nécessaire d'ajouter une grande quantité de monoglycérides aux aliments, ce qui entraîne un changement de la saveur caractéristique des aliments.
Comme conservateurs typiques dérivés de sources naturelles, on peut citer la glycine, la protamine et la phénylalanine. Ces conservateurs naturels et d'autres extraits provenant de plantes comestibles sont innoffensifs pour l'être humain, mais ont de manière générale une faible activité bactéricide. Ainsi, ces conservateurs naturels sont ajoutés en quantités beaucoup plus grandes que celles des conservateurs synthétiques pour obtenir le même niveau d'effet germicide. En outre, les conservateurs naturels classiques issus de plantes comestibles offrent des saveurs et des couleurs caractéristiques lorsqu'ils sont présents en concentration efficace, ce qui modifie le goût spécifique de l'aliment.
Récemment, on a eu besoin de conservateurs naturels présentant une bonne activité antiseptique sans changer le goût spécifique ou d'autres propriétés physiques de l'aliment, tout en étant inoffensifs pour le corps humain.
En conséquence, la présente invention a pour objet principal de pallier le problème rencontré dans la technique antérieure et d'offrir un agent germicide dérivé de sources naturelles.
L'invention a encore pour objet un agent germicide ayant une activité germicide supérieure.
L'invention a en outre pour objet une activité germicide inoffensive pour le corps humain.
La présente invention a encore pour objet des compositions comprenant l'agent germicide comme principe actif, qui sont utilisables comme conservateurs d'aliments, stérilisateurs d'ambiance, compositions médicales et additifs pour l'hygiène de la cavité orale.
La Fig. 1 est un schéma représentant un procédé d'extraction de l'agent germicide végétal de la présente invention dans un appareil de distillation en continu, et
la Fig. 2 est un spectre d'absorption de l'extrait dérivé de girofle selon la présente invention.
la Fig. 2 est un spectre d'absorption de l'extrait dérivé de girofle selon la présente invention.
Du fait que l'agent germicide de la présente invention est dérivé du girofle, il est garanti, en tant que composé naturel, inoffensif pour le corps humain.
Des mélanges de l'agent germicide avec un monoglycéride d'acide gras inférieur, de l'alcool éthylique ou de la glycérine présentent une plus grande sécurité que celle prescrite dans les réglementations concernées. En particulier, on peut utiliser une quantité moindre de l'agent germicide pour obtenir le même effet germicide lorsqu'il est en combinaison avec ces autres composés que lorsqu'il est seul. En conséquence, ces mélanges affectent peu le goût des aliments.
Lors de l'application, l'agent germicide de la présente invention peut être formulé directement avec des matières brutes ou ajouté, étalé ou pulvérisé sous la forme d'une suspension aqueuse ou d'une solution alcoolique distincte.
On comprendra mieux la présente invention grâce aux exemples suivants qui sont censés illustrer la présente invention, mais sans la limiter en aucune manière.
EXEMPLE 1
Extraction de l'agent germicide
Les écorces et les tiges de fleurs de girofle qui avaient été recueillies à l'automne dernier et séchées jusqu'au printemps au soleil ont été immergées dans de l'eau selon un rapport pondéral de 1:3 à 1:10 de l'échantillon à l'eau. La solution a été distillée dans un appareil de distillation à circulation de manière à obtenir une matière incolore ou de couleur blanche jaunâtre soluble dans les graisses (pH 4,8-5,0). Le rendement était de 10 % à 18 % en poids par rapport au poids de l'échantillon séché. On a constaté que le distillat avait une activité germicide et une densité de 1,034 à 25"C.
Extraction de l'agent germicide
Les écorces et les tiges de fleurs de girofle qui avaient été recueillies à l'automne dernier et séchées jusqu'au printemps au soleil ont été immergées dans de l'eau selon un rapport pondéral de 1:3 à 1:10 de l'échantillon à l'eau. La solution a été distillée dans un appareil de distillation à circulation de manière à obtenir une matière incolore ou de couleur blanche jaunâtre soluble dans les graisses (pH 4,8-5,0). Le rendement était de 10 % à 18 % en poids par rapport au poids de l'échantillon séché. On a constaté que le distillat avait une activité germicide et une densité de 1,034 à 25"C.
On a également découvert que l'agent germicide ainsi obtenu se dissolvait bien dans de l'éthanol à 65 % ou plus et dans des solvants non polaires, était stable à 1 500C, était actif dans de larges plages de pH et résistait à la lumière, notamment aux U.V.
La Fig. 1 représente l'extraction par distillation de l'agent germicide.
Comme montré dans la Fig. 1, l'échantillon immergé dans de l'eau est tout d'abord introduit dans une cuve d'extraction 2 entourée par une chemise de vapeur d'eau 3.
En faisant tourner une hélice actionnée par un moteur 1, de la vapeur d'eau est générée et envoyée à travers un condenseur 4 et une chemise de refroidissement 5 dans une cuve de stockage 6.
EXEMPLE D'ESSAI 1
Spectre d'absorption de l'avent germicide
L'agent germicide dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1, une matière soluble dans les graisses, a été dissous dans du méthanol et soumis à une colorimétrie. On a utilisé à cet effet un colorimètre, disponible dans le commerce auprès de Pharmacia LKB sous la dénomination commerciale "Biochrom 4060", pour effectuer des balayages à des longueurs d'onde allant de 200nm à 900 nm. Le résultat est illustré comme montré dans la Fig. 2. Trois spectres d'absorption principaux ont été lus sur le colorimètre.
Spectre d'absorption de l'avent germicide
L'agent germicide dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1, une matière soluble dans les graisses, a été dissous dans du méthanol et soumis à une colorimétrie. On a utilisé à cet effet un colorimètre, disponible dans le commerce auprès de Pharmacia LKB sous la dénomination commerciale "Biochrom 4060", pour effectuer des balayages à des longueurs d'onde allant de 200nm à 900 nm. Le résultat est illustré comme montré dans la Fig. 2. Trois spectres d'absorption principaux ont été lus sur le colorimètre.
EXEMPLE D'ESSAI 2
Essai d'activité spermicide du distillat de girofle
Le distillat obtenu dans l'exemple 1 a été testé pour son activité germicide en utilisant un procédé de diffusion par filtre. On a utilisé 12 souches de micro-organismes, à savoir 6 souches bactériennes telles qu'Escherichia coli
KCCM 11750, Bacillus subtilis KCCM 11733, Staphylococcus aureus KCCM 11764, Pseudomonas aeruginosa KCCM 11266, Klebsiella pneumoniae KCCM 11931 et Salmonella typhimurium KCCM 40253, et 6 souches fongiques telles qu'Aspergillus niger KCCM 11478, Penicillum citrinum KCCM 11663,
Trichoderma viride KCCM 11246, Tricophyton mentagrophytes KCCM 11960,
Candida utilis KCCM 11660 et Saccharomyces cerevisiae KCCM 11666.
Essai d'activité spermicide du distillat de girofle
Le distillat obtenu dans l'exemple 1 a été testé pour son activité germicide en utilisant un procédé de diffusion par filtre. On a utilisé 12 souches de micro-organismes, à savoir 6 souches bactériennes telles qu'Escherichia coli
KCCM 11750, Bacillus subtilis KCCM 11733, Staphylococcus aureus KCCM 11764, Pseudomonas aeruginosa KCCM 11266, Klebsiella pneumoniae KCCM 11931 et Salmonella typhimurium KCCM 40253, et 6 souches fongiques telles qu'Aspergillus niger KCCM 11478, Penicillum citrinum KCCM 11663,
Trichoderma viride KCCM 11246, Tricophyton mentagrophytes KCCM 11960,
Candida utilis KCCM 11660 et Saccharomyces cerevisiae KCCM 11666.
Avant de mesurer l'activité germicide, les 12 micro-organismes ont été soumis à une préculture. Parmi les six souches fongiques, deux souches de levure ont été cultivées dans un bouillon YM (Bacto Yeast extract 0,3%, Bacto
Malt Extract 0,3 %, Bacto Peptone 0,5 %, Bacto dextrose 1,0 %, pH 6,2) à 26"C sous agitation. La souche T. mentagrophytes a été placée dans un milieu de
Sabouraud dans un incubateur sous agitation à 26"C tandis que les trois souches restantes ont été cultivées dans un bouillon de dextrose de pomme de terre (infusion de pomme de terre à partir de 20 %, Bacto Dextrose 2 %, pH 5,1) à 24 26"C sous agitation.
Malt Extract 0,3 %, Bacto Peptone 0,5 %, Bacto dextrose 1,0 %, pH 6,2) à 26"C sous agitation. La souche T. mentagrophytes a été placée dans un milieu de
Sabouraud dans un incubateur sous agitation à 26"C tandis que les trois souches restantes ont été cultivées dans un bouillon de dextrose de pomme de terre (infusion de pomme de terre à partir de 20 %, Bacto Dextrose 2 %, pH 5,1) à 24 26"C sous agitation.
Pour les six souches bactériennes, la préculture a été réalisée dans un bouillon nutritif (Bacto Beef Extract 0,3 %, Bacto Peptone 0,5 %, pH 6,8) disponible dans le commerce chez DIFCO à 30-37"C sous agitation.
Pour tester l'activité germicide, les précultures de levure et de souches bactériennes ont été diluées dans 108 cellules par ml. On a prélevé 0,5 ml de la dilution que l'on a étalé sur une plaque d'agar nutritif. Ensuite, des filtres circulaires, chacun d'un diamètre de 8 mm, ont été placés à intervalle constant sur la plaque. Les filtres étaient en contact avec 50 ml du distillat dérivé du girofle.
Après avoir incubé la plaque pendant trois jours dans des conditions appropriées, on a effectué une observation pour savoir si des cercles inhibiteurs se formaient ou non.
Dans le cas des quatre souches fongiques, les précultures ont été toutes homogénéisées avec un homogénéiseur stérile et ajoutées dans des milieux appropriés en autoclave pour obtenir des diluants qui avaient tous une densité optique de 0,1 lorsqu'on effectuait les mesures à 660 nm au moyen d'un spectrophotomètre. Les diluants ont été mélangés à de l'agar supérieur nutritif (concentration de l'agar 0,9 % en poids) à raison de 10 % en poids et versés sur une plaque d'agar nutritif. Une fois l'agar supérieur solidifié, des filtres circulaires d'un diamètre de 8 mm ont été placés à intervalle constant sur l'agar supérieur solidifié. 50 ml du distillat dérivé de la girofle étaient en contact avec les filtres après quoi une culture a été réalisée pendant 5 à 7 jours dans des conditions appropriées pour observer s'il se formait ou non des cercles inhibiteurs.
Facultativement, après avoir incubé les plaques en contact avec l'agent germicide pendant 7 jours, on a effectué une observation pour savoir s'il se formait des cercles inhibiteurs ou non.
Dans ce test, l'agent germicide de la présente invention s'est révélé efficace contre les 12 micro-organismes nuisibles comme cela ressort de la formation de grands cercles inhibiteurs.
On a ainsi obtenu les concentrations minimales inhibitrices (CMI) de l'agent germicide nécessaires pour assurer l'activité germicide contre les 12 souches de micro-organismes.
Les résultats sont illustrés dans le tableau 1 ci-dessous
TABLEAU 1
CMI de l'extrait dérivé du girofle vis-à-vis des
bactéries et des fongi
Souches MIC (mg/ml)
Escherichia coli KCCM 11750 300
Bacillus subtilis KCCM11733 200
Staphylococcus aureus KCCM11764 200
Pseudomonas aeruginosa KCCM11226 250
Klebsiella pneumoniae KCCM 11391 250
Salmonella typhimurium KCCM40253 250
Penicillum citrinum KCCM11663 150
Aspergillus niger KCCM11478 150
Trichoderma viride KCCMI 1246 120
Trichophyton mentagrophytes KCCM11950 150
Candida utilis KCCMl 1660 200
Saccharomvces cerevisiae KCCM 11666 200
Il ressort des données du tableau 1 que le distillat dérivé du girofle présente une activité germicide suffisante à faible concentration et l'agent germicide est plus efficace contre les fongi que contre les bactéries et les levures.
TABLEAU 1
CMI de l'extrait dérivé du girofle vis-à-vis des
bactéries et des fongi
Souches MIC (mg/ml)
Escherichia coli KCCM 11750 300
Bacillus subtilis KCCM11733 200
Staphylococcus aureus KCCM11764 200
Pseudomonas aeruginosa KCCM11226 250
Klebsiella pneumoniae KCCM 11391 250
Salmonella typhimurium KCCM40253 250
Penicillum citrinum KCCM11663 150
Aspergillus niger KCCM11478 150
Trichoderma viride KCCMI 1246 120
Trichophyton mentagrophytes KCCM11950 150
Candida utilis KCCMl 1660 200
Saccharomvces cerevisiae KCCM 11666 200
Il ressort des données du tableau 1 que le distillat dérivé du girofle présente une activité germicide suffisante à faible concentration et l'agent germicide est plus efficace contre les fongi que contre les bactéries et les levures.
EXEMPLE 2, EXEMPLE DE REFERENCE 1 ET EXEMPLE
COMPARATIF 1
Un mélange du distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 et de monoglycéride a été testé pour son activité germicide contre les 12 microorganismes.
COMPARATIF 1
Un mélange du distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 et de monoglycéride a été testé pour son activité germicide contre les 12 microorganismes.
A cette fin, les 8 souches de bactéries et les levures ont été cultivées de la même manière que dans l'exemple d'essai 2 et ajoutées dans des milieux stériles appropriés pour obtenir des diluants qui avaient une densité optique de 0,08 lorsqu'on effectuait les mesures à 660 nm au moyen d'un spectrophotomètre.
Dans ce test, un mélange d'un rapport pondéral de 1:2 du distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 au monoglycéride d'acide gras inférieur a été ajouté à raison de 0,05 % en poids pour l'exemple 2, le distillat dérivé du girofle seul à raison de 0,16 % en poids pour l'exemple de référence 1 et le monoglycéride d'acide gras inférieur seul à raison de 0,034 % en poids pour l'exemple comparatif 1. Les milieux obtenus ont été cultivés dans un mcubateur sous agitation maintenu à la température appropriée pendant 3 jours. Les résultats sont illustrés dans le tableau 2 ci-dessous.
Pour les quatre souches fongiques, les précultures obtenues dans l'exemple 1 ont été homogénéisées dans un homogénéiseur stérile et ajoutées dans des milieux appropriés en autoclave pour donner des solutions qui avaient une densité optique de 0,05 lorsqu'on effectuait les mesures à 660 nm au moyen d'un spectrophotomètre. Dans la solution, un mélange d'un rapport pondéral de 1:2 de distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 au monoglycéride d'acide gras inférieur a été ajouté à raison de 0,05 % en poids pour l'exemple 2, le distillat dérivé du girofle seul à raison de 0,07 % en poids pour l'exemple de référence 1 et le monoglycéride d'acide gras inférieur seul à raison de 0,034 % en poids pour l'exemple comparatif 1. Les milieux obtenus ont été cultivés dans un incubateur sous agitation maintenu à la température appropriée pendant 7 jours. Les résultats sont illustrés dans le tableau 2 ci-dessous.
Tableau 2
Effet inhibiteur de croissance du mélange d'extrait dérivé du girofle et de
monoalycéride vis-à-vis des bactéries et des fbnoi
Quantité de conservateur (% en poids)
Ex. de réf. 1 Ex. comp. 1 Ex. 1
Souches 0,016 % 0,034 % 0,05 %
Escherichia coli KCCM11750 tt
Bacillus subtilis KCCMI 1733 +
Staphylococcus aureus KCCM11764 +
Pseudomonas aeruginosa KCCM 1226 ++
Klebsiella pneumoniae KCCM11391 + ++
Salmonella typhimurium KCCM40253 ++ tt
Penicillum citrinum KCCM 1663 tt
Aspergillus niger KCCM11478 +
Trichoderma viride KCCM 11246 +
Trichophyton mentagrophytes
KCCM11950 + <
Candida utilis KCCMl 1660 tt
Saccharomyces cerevisiae
KCCM 11666 <
* - : Forte inhibition, +: Faible inhibition, tut : Pas d'inhibition
EXEMPLE 3, EXEMPLE DE REFERENCE 2 ET
EXEMPLES COMPARATIFS 2 ET 3
Un mélange du distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1, de glycine et d'alcool éthylique a été testé pour son activité germicide contre les 12 micro-organismes.
Effet inhibiteur de croissance du mélange d'extrait dérivé du girofle et de
monoalycéride vis-à-vis des bactéries et des fbnoi
Quantité de conservateur (% en poids)
Ex. de réf. 1 Ex. comp. 1 Ex. 1
Souches 0,016 % 0,034 % 0,05 %
Escherichia coli KCCM11750 tt
Bacillus subtilis KCCMI 1733 +
Staphylococcus aureus KCCM11764 +
Pseudomonas aeruginosa KCCM 1226 ++
Klebsiella pneumoniae KCCM11391 + ++
Salmonella typhimurium KCCM40253 ++ tt
Penicillum citrinum KCCM 1663 tt
Aspergillus niger KCCM11478 +
Trichoderma viride KCCM 11246 +
Trichophyton mentagrophytes
KCCM11950 + <
Candida utilis KCCMl 1660 tt
Saccharomyces cerevisiae
KCCM 11666 <
* - : Forte inhibition, +: Faible inhibition, tut : Pas d'inhibition
EXEMPLE 3, EXEMPLE DE REFERENCE 2 ET
EXEMPLES COMPARATIFS 2 ET 3
Un mélange du distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1, de glycine et d'alcool éthylique a été testé pour son activité germicide contre les 12 micro-organismes.
A cette fin, les 8 souches de bactéries et les levures ont été cultivées de la même manière que dans l'exemple d'essai 2 et ajoutées dans des milieux stériles appropriés pour obtenir des diluants qui avaient une densité optique de 0,08 lorsqu'on effectuait les mesures à 660 nm au moyen d'un spectrophotomètre.
Dans ce test, un mélange d'un rapport pondéral de 1:3,6:5,4 du distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 à la glycine à l'alcool éthylique a été ajouté à raison de 0,05 % en poids pour l'exemple 3, le distillat dérivé du girofle seul à raison de 0,005 % en poids pour l'exemple de référence 2, la glycine seule à raison de 0,018 % en poids pour l'exemple comparatif 2 et l'alcool éthylique seul à raison de 0,027 % en poids pour l'exemple comparatif 3. Les milieux obtenus ont été cultivés dans un incubateur sous agitation maintenu à la température appropriée pendant 3 jours. Les résultats sont illustrés dans le tableau 3 ci-dessous.
Pour les quatre souches fongiques, les précultures obtenues dans l'exemple 1 ont été homogénéisées dans un homogénéiseur stérile et ajoutées dans des milieux appropriés en autoclave pour donner des solutions qui avaient une densité optique de 0,05 lorsqu'on effectuait les mesures à 660 nm au moyen d'un spectrophotomètre. Dans la solution, un mélange d'un rapport pondéral de 1:3,6:5,4 du distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 à la glycine à l'alcool éthylique a été ajouté à raison de 0,05 % en poids pour l'exemple 3, le distillat dérivé du girofle seul à raison de 0,005 % en poids pour l'exemple de référence 2, la glycine seule à raison de 0,018 % en poids pour l'exemple comparatif 2 et l'alcool éthylique seul à raison de 0,027 % en poids pour l'exemple comparatif 3. Les milieux obtenus ont été cultivés dans un incubateur sous agitation maintenu à la température appropriée pendant 7 jours. Les résultats sont illustrés dans le tableau 3 ci-dessous.
Tableau 3
Effet inhibiteur de croissance du mélange de l'extrait dérivé de girofle et de
l'alcool éthylique vis-à-vis des bactéries et des fongi
Quantité de conservateur (% en poids)
Ex. réf. 2 Ex. canp. 2 Ex. camp. 3 Ex. 3
Souches 0,005 % 0,018 % 0,027 % 0,05 %
E. coli KCCM11750 ++ ++ ++
B. subtilis KCCM11733 + ++ ++
S. aureus KCCM11764 + ++ ++
P. aeruginosa KCCM 11226 ++ ++ ++
K. pneun on iae KCCM 11391 ++ ++ ++
S. typh,muri.um KCCM40253 ++ ++ ++
P. citrinum XCCM11663 + ++ ++
A. n iger KCCM11478 + ++ ++
T. viride KCCM11246 + ++ ++
T. mentagrophytes
KCCM 11950 + ++ ++
C. utilis KCCM11660 ++ ++ ++
S. cerevisiae KCCM11666 ++ ++ ++
* - : Forte inhibition, +: Faible inhibition, ++: Pas d'inhibition
EXEMPLES 4 A 20 ET EXEMPLE COMPARATIF 4
Activité germicide dans un bouillon de boeuf
Un bouillon de boeuf a été préparé en faisant bouillir 300 g de
boeuf dans un litre d'eau pendant une heure, en refroidissant l'eau, en retirant la
graisse solidifiée et en laissant l'eau à température ambiante pendant un jour.
Effet inhibiteur de croissance du mélange de l'extrait dérivé de girofle et de
l'alcool éthylique vis-à-vis des bactéries et des fongi
Quantité de conservateur (% en poids)
Ex. réf. 2 Ex. canp. 2 Ex. camp. 3 Ex. 3
Souches 0,005 % 0,018 % 0,027 % 0,05 %
E. coli KCCM11750 ++ ++ ++
B. subtilis KCCM11733 + ++ ++
S. aureus KCCM11764 + ++ ++
P. aeruginosa KCCM 11226 ++ ++ ++
K. pneun on iae KCCM 11391 ++ ++ ++
S. typh,muri.um KCCM40253 ++ ++ ++
P. citrinum XCCM11663 + ++ ++
A. n iger KCCM11478 + ++ ++
T. viride KCCM11246 + ++ ++
T. mentagrophytes
KCCM 11950 + ++ ++
C. utilis KCCM11660 ++ ++ ++
S. cerevisiae KCCM11666 ++ ++ ++
* - : Forte inhibition, +: Faible inhibition, ++: Pas d'inhibition
EXEMPLES 4 A 20 ET EXEMPLE COMPARATIF 4
Activité germicide dans un bouillon de boeuf
Un bouillon de boeuf a été préparé en faisant bouillir 300 g de
boeuf dans un litre d'eau pendant une heure, en refroidissant l'eau, en retirant la
graisse solidifiée et en laissant l'eau à température ambiante pendant un jour.
Dans le bouillon de boeuf, le distillat dérivé du girofle obtenu dans
l'exemple 1 a été ajouté seul ou associé à de la glycérine, un monoglycéride d'acide
gras inférieur et/ou à de l'alcool éthylique. Les résultats de conservation après
stockage dans un incubateur maintenu à 10"C sont illustrés dans le tableau 4 ci dessous. L'exemple comparatif 4 consiste en du bouillon de boeuf dans lequel se trouve le distillat dérivé du girofle.
l'exemple 1 a été ajouté seul ou associé à de la glycérine, un monoglycéride d'acide
gras inférieur et/ou à de l'alcool éthylique. Les résultats de conservation après
stockage dans un incubateur maintenu à 10"C sont illustrés dans le tableau 4 ci dessous. L'exemple comparatif 4 consiste en du bouillon de boeuf dans lequel se trouve le distillat dérivé du girofle.
Pour déterminer l'effet conservateur, on a observé le changement d'aspect (odeur et couleur) des bouillons de boeuf. En outre, les échantillons obtenus en cultivant les bouillons de boeuf dans un bouillon YM ont été comparés mutuellement. Les effets de conservation ont été mesurés en jours de conservation effectifs.
TABLEAU 4
Effet de conservation du mélange d'extrait
dérivé du girofle avec d'autres additifs
sur un bouillon de boeuf
Comp. du conservateur (X en poids)
Ex n Bouft.de Temps de stockage
boeuf Extrait de Monoglycéride Glycérine EtOH Total effectif (jours)
(X en pds) girofle
C.4 100 - - - - - 1,8
4 100 - - - - 0,05 5,6
5 100 0,05 0,05 - - 0,05 3,5
6 100 - - 0,05 - 0,05 2,4
7 100 - - - 0,05 0,05 1,8
8 100 0,025 0,26 - - 0,05 5
9 100 0,025 0,025 - 0,05 4
10 100 0,025 - - 0,025 0,05 3
11 100 - 0,025 0,025 - 0,05 3,5
12 100 - 0,025 - 0,025 0,05 2,8
13 100 - - 0,025 0,025 0,05 2,3
14 100 0,1 - - - 0,1 9
15 100 0,05 0,05 - 0,1 12,8
16 100 0,05 - 0,05 0,05 0,1 10,5
17 100 0,05 - - 0,1 6,9
18 100 0,05 0,05 0,05 0,1 7,5
19 100 - 0,05 - - 0,1 6
20 100 - - 0,05 0,05 0,1 4,5
EXEMPLES 21 A 37 ET EXEMPLE COMPARATIF 5
Activité oermicide dans des nouilles
Des nouilles ont été préparées en mélangeant suffisamment 500 g
de farine de blé avec 60 ml d'eau en présence de conservateurs comme indiqué dans le tableau 5 ci-dessous, en extrudant la pâte rigide en nouilles, en faisant bouillir à demi les nouilles dans de l'eau chaude pendant 4 minutes et en refroidissant à l'eau. Les nouilles ont été emballées dans des sachets de polyéthylène d'une dimension appropriée qui ont été ensuite scellés. Tandis que ces sachets étaient stockés dans un incubateur maintenu à 25 C, l'aspect (odeur, couleur, structure et croissance de fongi) des nouilles a été observé pour
déterminer l'effet de conservation. Les nouilles qui ne comprenaient pas le
conservateur de la présente invention étaient celles de l'exemple comparatif 5. Les
effets de conservation ont été mesurés en jours de conservation effectifs.
Effet de conservation du mélange d'extrait
dérivé du girofle avec d'autres additifs
sur un bouillon de boeuf
Comp. du conservateur (X en poids)
Ex n Bouft.de Temps de stockage
boeuf Extrait de Monoglycéride Glycérine EtOH Total effectif (jours)
(X en pds) girofle
C.4 100 - - - - - 1,8
4 100 - - - - 0,05 5,6
5 100 0,05 0,05 - - 0,05 3,5
6 100 - - 0,05 - 0,05 2,4
7 100 - - - 0,05 0,05 1,8
8 100 0,025 0,26 - - 0,05 5
9 100 0,025 0,025 - 0,05 4
10 100 0,025 - - 0,025 0,05 3
11 100 - 0,025 0,025 - 0,05 3,5
12 100 - 0,025 - 0,025 0,05 2,8
13 100 - - 0,025 0,025 0,05 2,3
14 100 0,1 - - - 0,1 9
15 100 0,05 0,05 - 0,1 12,8
16 100 0,05 - 0,05 0,05 0,1 10,5
17 100 0,05 - - 0,1 6,9
18 100 0,05 0,05 0,05 0,1 7,5
19 100 - 0,05 - - 0,1 6
20 100 - - 0,05 0,05 0,1 4,5
EXEMPLES 21 A 37 ET EXEMPLE COMPARATIF 5
Activité oermicide dans des nouilles
Des nouilles ont été préparées en mélangeant suffisamment 500 g
de farine de blé avec 60 ml d'eau en présence de conservateurs comme indiqué dans le tableau 5 ci-dessous, en extrudant la pâte rigide en nouilles, en faisant bouillir à demi les nouilles dans de l'eau chaude pendant 4 minutes et en refroidissant à l'eau. Les nouilles ont été emballées dans des sachets de polyéthylène d'une dimension appropriée qui ont été ensuite scellés. Tandis que ces sachets étaient stockés dans un incubateur maintenu à 25 C, l'aspect (odeur, couleur, structure et croissance de fongi) des nouilles a été observé pour
déterminer l'effet de conservation. Les nouilles qui ne comprenaient pas le
conservateur de la présente invention étaient celles de l'exemple comparatif 5. Les
effets de conservation ont été mesurés en jours de conservation effectifs.
TABLEAU 5
Effet de conservation du mélange d'un extrait
dérivé du girofle avec d'autres additifs
sur des nouilles
Comp. du conservateur (% en poids) Ex. n Temps de stockage
Nouilles Extrait de Monogtycéride Glycérine EtOH Total effectif (jours)
(X en pds) girofle
C.5 100 - - - - - 2,0
21 100 0,05 - - - 0,05 6,0
22 100 - 0,05 - 0,05 3,7
23 100 - 0,05 - 0,05 2,9
24 100 - - - 0,05 0,05 2,2
25 100 0,025 0,025 - - 0,05 5,7
26 100 0,025 0,025 - 0,05 4,8
27 100 0,025 - - 0,025 0,05 3,5
28 100 - 0,025 0,025 - 0,05 3,9
29 100 - 0,025 0,025 0,05 3,1
30 100 - - 0,025 0,025 0,05 2,7
31 100 0,1 - 0,1 11,0
32 100 0,05 0,05 - - 0,1 10,5
33 100 0,05 - 0,05 - 0,1 8,9
34 100 0,05 - 0,05 0,1 7,3
35 100 - 0,05 0,05 0,1 5,6
36 100 - 0,05 - 0,05 0,1 4,0
37 100 - - 0,05 0,05 0,1 3,7
EXEMPLES 38 A 54 ET EXEMPLE COMPARATIF 6
Activité .germicide dans un gâteau de riz
Des gâteaux de riz ont été préparés en imbibant le riz dans de l'eau,
en pulvérisant le riz en poudre, en mélangeant la poudre associée à des
conservateurs comme indiqué dans le tableau 6 ci-dessous, en exposant à la vapeur d'eau la pâte rigide, en l'extrudant sous forme de tiges et en les découpant aux dimensions appropriées. Ces gâteaux de riz ont été emballés dans des sachets de polyéthylène d'une dimension appropriée qui ont été ensuite scellés. Tandis que ces sachets étaient conservés dans un incubateur maintenu à 30"C, l'aspect (odeur, couleur, structure et croissance de fongi) des gâteaux de riz a été observé pour déterminer l'effet de conservation. Le gâteau de riz qui ne comprenait pas le conservateur de la présente invention correspondait à l'exemple comparatif 6. Les effets de conservation ont été mesurés en jours de conservation effectifs.
Effet de conservation du mélange d'un extrait
dérivé du girofle avec d'autres additifs
sur des nouilles
Comp. du conservateur (% en poids) Ex. n Temps de stockage
Nouilles Extrait de Monogtycéride Glycérine EtOH Total effectif (jours)
(X en pds) girofle
C.5 100 - - - - - 2,0
21 100 0,05 - - - 0,05 6,0
22 100 - 0,05 - 0,05 3,7
23 100 - 0,05 - 0,05 2,9
24 100 - - - 0,05 0,05 2,2
25 100 0,025 0,025 - - 0,05 5,7
26 100 0,025 0,025 - 0,05 4,8
27 100 0,025 - - 0,025 0,05 3,5
28 100 - 0,025 0,025 - 0,05 3,9
29 100 - 0,025 0,025 0,05 3,1
30 100 - - 0,025 0,025 0,05 2,7
31 100 0,1 - 0,1 11,0
32 100 0,05 0,05 - - 0,1 10,5
33 100 0,05 - 0,05 - 0,1 8,9
34 100 0,05 - 0,05 0,1 7,3
35 100 - 0,05 0,05 0,1 5,6
36 100 - 0,05 - 0,05 0,1 4,0
37 100 - - 0,05 0,05 0,1 3,7
EXEMPLES 38 A 54 ET EXEMPLE COMPARATIF 6
Activité .germicide dans un gâteau de riz
Des gâteaux de riz ont été préparés en imbibant le riz dans de l'eau,
en pulvérisant le riz en poudre, en mélangeant la poudre associée à des
conservateurs comme indiqué dans le tableau 6 ci-dessous, en exposant à la vapeur d'eau la pâte rigide, en l'extrudant sous forme de tiges et en les découpant aux dimensions appropriées. Ces gâteaux de riz ont été emballés dans des sachets de polyéthylène d'une dimension appropriée qui ont été ensuite scellés. Tandis que ces sachets étaient conservés dans un incubateur maintenu à 30"C, l'aspect (odeur, couleur, structure et croissance de fongi) des gâteaux de riz a été observé pour déterminer l'effet de conservation. Le gâteau de riz qui ne comprenait pas le conservateur de la présente invention correspondait à l'exemple comparatif 6. Les effets de conservation ont été mesurés en jours de conservation effectifs.
TABLEAU 6
Effet de conservation du mélange d'extrait dérivé
du girofle avec d'autres additifs
sur des gâteaux de riz
Effet de conservation du mélange d'extrait dérivé
du girofle avec d'autres additifs
sur des gâteaux de riz
<tb> <SEP> Comp. <SEP> du <SEP> conservateur <SEP> (X <SEP> en <SEP> Temps <SEP> de <SEP> poids)
<tb> Ex <SEP> nO <SEP> Gâteau <SEP> de <SEP> Temps <SEP> de <SEP> stockage
<tb> <SEP> riz <SEP> Extrait <SEP> de <SEP> Monoglycéride <SEP> Glycérine <SEP> EtOH <SEP> Total <SEP> effectif <SEP> (jours)
<tb> <SEP> CX <SEP> en <SEP> pds) <SEP> girofle
<tb> <SEP> 2,0
<tb> C.6 <SEP> 100 <SEP>
<tb> <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 5,0
<tb> 38 <SEP> 100 <SEP> 0,05
<tb> 39 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 3,0
<tb> 40 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 2,8
<tb> 41 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 2,5
<tb> 42 <SEP> 100 <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 5,2
<tb> 43 <SEP> 100 <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 4,1
<tb> <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 3,4
<tb> 44 <SEP> 100 <SEP> 0,025
<tb> 45 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 3,0
<tb> 46 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 2,6
<tb> 47 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 2,5
<tb> 48 <SEP> 100 <SEP> 0,1 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,1 <SEP> 8,9
<tb> 49 <SEP> 100 <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,1 <SEP> 10,5
<tb> 50 <SEP> 100 <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,1 <SEP> 8,0
<tb> 51 <SEP> 100 <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 6,7
<tb> 52 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 6,0
<tb> 53 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 4,2
<tb> 54 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 3,8
<tb>
EXEMPLES 55 A 71 ET EXEMPLE COMPARATIF 7
Activité germicide dans des gâteaux
Des gâteaux ont été préparés en mélangeant suffisamment 500 g de farine de blé avec 550 g de sucre, 500 g d'oeufs, 19 g de sel, 10 g de levure en poudre, 15 g de monoglycéride et 200 g de graisse dans 250 g d'eau associée à des conservateurs indiqués dans le tableau 6 ci-dessous, et en cuisant le mélange dans un four à 200-2100C. Les gâteaux ont été découpés à la dimension appropriée et ont été ensuite emballés dans des sachets de polyéthylène. Tandis que ces sachets étaient conservés dans un incubateur maintenu à 30"C, l'aspect (odeur, couleur, structure et croissance des fongi) du gâteau a été observé pour déterminer l'effet de conservation. Le gâteau qui ne comprenait pas le conservateur de la présente invention correspondait à l'exemple comparatif 7. Les effets de conservation ont été mesurés enjours de conservation effectifs.
<tb> Ex <SEP> nO <SEP> Gâteau <SEP> de <SEP> Temps <SEP> de <SEP> stockage
<tb> <SEP> riz <SEP> Extrait <SEP> de <SEP> Monoglycéride <SEP> Glycérine <SEP> EtOH <SEP> Total <SEP> effectif <SEP> (jours)
<tb> <SEP> CX <SEP> en <SEP> pds) <SEP> girofle
<tb> <SEP> 2,0
<tb> C.6 <SEP> 100 <SEP>
<tb> <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 5,0
<tb> 38 <SEP> 100 <SEP> 0,05
<tb> 39 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 3,0
<tb> 40 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 2,8
<tb> 41 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 2,5
<tb> 42 <SEP> 100 <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 5,2
<tb> 43 <SEP> 100 <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 4,1
<tb> <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 3,4
<tb> 44 <SEP> 100 <SEP> 0,025
<tb> 45 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 3,0
<tb> 46 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 2,6
<tb> 47 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,025 <SEP> 0,025 <SEP> 0,05 <SEP> 2,5
<tb> 48 <SEP> 100 <SEP> 0,1 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,1 <SEP> 8,9
<tb> 49 <SEP> 100 <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> - <SEP> 0,1 <SEP> 10,5
<tb> 50 <SEP> 100 <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,1 <SEP> 8,0
<tb> 51 <SEP> 100 <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 6,7
<tb> 52 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 6,0
<tb> 53 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 4,2
<tb> 54 <SEP> 100 <SEP> - <SEP> 0,05 <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 3,8
<tb>
EXEMPLES 55 A 71 ET EXEMPLE COMPARATIF 7
Activité germicide dans des gâteaux
Des gâteaux ont été préparés en mélangeant suffisamment 500 g de farine de blé avec 550 g de sucre, 500 g d'oeufs, 19 g de sel, 10 g de levure en poudre, 15 g de monoglycéride et 200 g de graisse dans 250 g d'eau associée à des conservateurs indiqués dans le tableau 6 ci-dessous, et en cuisant le mélange dans un four à 200-2100C. Les gâteaux ont été découpés à la dimension appropriée et ont été ensuite emballés dans des sachets de polyéthylène. Tandis que ces sachets étaient conservés dans un incubateur maintenu à 30"C, l'aspect (odeur, couleur, structure et croissance des fongi) du gâteau a été observé pour déterminer l'effet de conservation. Le gâteau qui ne comprenait pas le conservateur de la présente invention correspondait à l'exemple comparatif 7. Les effets de conservation ont été mesurés enjours de conservation effectifs.
TABLEAU 7
Effet de conservation du mélange d'extrait dérivé du
girofle avec d'autres additifs sur des gâteaux
Comp. du conservateur (X en poids)
Ex n,, Gateau de Temps de stockage
riz Extrait de Monoglycéride Glycérine EtOH Total effectif (jours)
(X en pds) girofle
C.7 100 - - 4,0
55 100 0,05 - - 0,05 7,1
56 100 - 0,05 - - 0,05 5,3
57 100 - - 0,05 - 0,05 4,2
58 100 - 0,05 0,05 4,1
59 100 0,025 0,25 - 0,05 7,0
60 100 0,025 0,025 - 0,05 6,2
61 100 0,025 - 0,025 0,05 5,5
62 100 - 0,025 0,025 0,05 5,0
63 100 - 0,025 - 0,025 0,05 4,6
64 100 - 0,025 0,025 0,05 3,9
65 100 0,1 - 0,1 13,0
66 100 0,05 0,05 0,1 15,3
67 100 0,05 0,05 0,1 12,8
68 100 0,05 - - 0,05 0,1 10,9
69 100 - 0,05 0,05 - 0,1 8,9
70 100 0,05 0,05 0,1 7,8
71 100 - 0,05 0,25 0,1 6,4
EXEMPLES 72 A 88 ET EXEMPLE COMPARATIF 8
Activité germicide sur des sauces
coréennes traditionnelles
Des sauces coréennes traditionnelles ont été préparées de manière classique. On a ajouté à ces sauces des conservateurs que l'on a mélangés comme indiqué dans le tableau 8. Ensuite les sauces coréennes traditionnelles ont été placées par fractions aliquotes dans des boîtes de Pétri en verre qui ont été ensuite stockées à 30"C dans un incubateur. Dans l'intervalle, I'aspect (odeur, couleur, structure et croissance de fongi) des échantillons a été observé pour déterminer l'effet de conservation. La sauce coréenne traditionnelle qui ne comprenait pas le conservateur de la présente invention correspondait à l'exemple comparatif 8. Les effets de conservation ont été mesurés en j ours de conservation effectifs.
Effet de conservation du mélange d'extrait dérivé du
girofle avec d'autres additifs sur des gâteaux
Comp. du conservateur (X en poids)
Ex n,, Gateau de Temps de stockage
riz Extrait de Monoglycéride Glycérine EtOH Total effectif (jours)
(X en pds) girofle
C.7 100 - - 4,0
55 100 0,05 - - 0,05 7,1
56 100 - 0,05 - - 0,05 5,3
57 100 - - 0,05 - 0,05 4,2
58 100 - 0,05 0,05 4,1
59 100 0,025 0,25 - 0,05 7,0
60 100 0,025 0,025 - 0,05 6,2
61 100 0,025 - 0,025 0,05 5,5
62 100 - 0,025 0,025 0,05 5,0
63 100 - 0,025 - 0,025 0,05 4,6
64 100 - 0,025 0,025 0,05 3,9
65 100 0,1 - 0,1 13,0
66 100 0,05 0,05 0,1 15,3
67 100 0,05 0,05 0,1 12,8
68 100 0,05 - - 0,05 0,1 10,9
69 100 - 0,05 0,05 - 0,1 8,9
70 100 0,05 0,05 0,1 7,8
71 100 - 0,05 0,25 0,1 6,4
EXEMPLES 72 A 88 ET EXEMPLE COMPARATIF 8
Activité germicide sur des sauces
coréennes traditionnelles
Des sauces coréennes traditionnelles ont été préparées de manière classique. On a ajouté à ces sauces des conservateurs que l'on a mélangés comme indiqué dans le tableau 8. Ensuite les sauces coréennes traditionnelles ont été placées par fractions aliquotes dans des boîtes de Pétri en verre qui ont été ensuite stockées à 30"C dans un incubateur. Dans l'intervalle, I'aspect (odeur, couleur, structure et croissance de fongi) des échantillons a été observé pour déterminer l'effet de conservation. La sauce coréenne traditionnelle qui ne comprenait pas le conservateur de la présente invention correspondait à l'exemple comparatif 8. Les effets de conservation ont été mesurés en j ours de conservation effectifs.
TABLEAU 8
Effet de conservation du mélange d'extrait dérivé
du girofle avec d'autres additifs sur des sauces coréennes traditionnelles
Coup. du conservateur (X en poids) Temps de stockage
effectif (jours)
Ex n Gateau de
riz Extrait de Monoglycéride Glycérine EtOH Total Sauces coréennes
girofle I II III
(Z en pds)
C.a 100 - - - - - 7,0 4,5 6,0
72 100 0,05 - - - 0,05 15,0 9,5 12,0
73 100 - 0,05 - - 0,05 9,7 5,1 7,2
74 100 - - 0,05 - 0,05 10,0 6,0 9,3
75 100 - - - 0,05 0,05 7.6 4,6 6,3
76 100 0,025 0,25 - - 0,05 14,2 9,0 10,3
77 100 0,025 - 0,025 - 0,05 14,4 9,1 10,2
78 100 0,025 - - 0,ou5 0,05 14,8 10,8 12,2
79 100 - 0,025 0,025 - 0,05 9,6 5,8 6,9
80 100 - 0,025 - 0,025 0,05 10,9 5,8 7, 0
81 100 - - 0,025 0,025 0,05 10,6 6,1 7,0
82 100 0,1 - - - 0,1 28,0 17,5 22,0
83 100 0,05 0,05 - - 0,1 23,0 15,1 20,0
84 100 0,05 - 0,05 -
EXEMPLE D'ESSAI 3
Préparation d'un spray germicide
Le distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 a été formulé avec de l'alcool éthylique et du propylène glycol, comme indiqué dans le tableau 9 ci-dessous, pour donner quatre agents A, B, C et D. Ces agents ont été introduits dans des pulvérisateurs.
Effet de conservation du mélange d'extrait dérivé
du girofle avec d'autres additifs sur des sauces coréennes traditionnelles
Coup. du conservateur (X en poids) Temps de stockage
effectif (jours)
Ex n Gateau de
riz Extrait de Monoglycéride Glycérine EtOH Total Sauces coréennes
girofle I II III
(Z en pds)
C.a 100 - - - - - 7,0 4,5 6,0
72 100 0,05 - - - 0,05 15,0 9,5 12,0
73 100 - 0,05 - - 0,05 9,7 5,1 7,2
74 100 - - 0,05 - 0,05 10,0 6,0 9,3
75 100 - - - 0,05 0,05 7.6 4,6 6,3
76 100 0,025 0,25 - - 0,05 14,2 9,0 10,3
77 100 0,025 - 0,025 - 0,05 14,4 9,1 10,2
78 100 0,025 - - 0,ou5 0,05 14,8 10,8 12,2
79 100 - 0,025 0,025 - 0,05 9,6 5,8 6,9
80 100 - 0,025 - 0,025 0,05 10,9 5,8 7, 0
81 100 - - 0,025 0,025 0,05 10,6 6,1 7,0
82 100 0,1 - - - 0,1 28,0 17,5 22,0
83 100 0,05 0,05 - - 0,1 23,0 15,1 20,0
84 100 0,05 - 0,05 -
EXEMPLE D'ESSAI 3
Préparation d'un spray germicide
Le distillat dérivé du girofle obtenu dans l'exemple 1 a été formulé avec de l'alcool éthylique et du propylène glycol, comme indiqué dans le tableau 9 ci-dessous, pour donner quatre agents A, B, C et D. Ces agents ont été introduits dans des pulvérisateurs.
TABLEAU 9
Compositions de spray ermicide comprenant l'extrait
dérivé du girofle et d'autres additifs
Compositions (parties en poids)
Composants Agent A Agent B Agent C Agent D
Extrait de girofle 0,5 1,0 3,0 5,0
Alcool éthylique 65,0 65,0 65,0 65,0
Eau 24,5 24,0 22,0 20,0
Propylène glycol 10,0 10,0 10,0 10,0
EXEMPLE 89 ET EXEMPLES COMPARATIFS 9 ET 10
Test d'activité germicide du spray germicide
1) Procédé de la plaque de contact
Les agents germicides préparés dans l'exemple d'essai 3 ont été pulvérisés sur les surfaces de murs ou sur les surfaces de tables de travail de boulangerie, des emplacements où des bactéries et fongi divers sont censés se développer. Des boîtes de Pétri, vendues par 3M, ont été mises en contact avec les surfaces des murs ou les surfaces des tables de travail pour contaminer les surfaces des boîtes de Pétri.
Compositions de spray ermicide comprenant l'extrait
dérivé du girofle et d'autres additifs
Compositions (parties en poids)
Composants Agent A Agent B Agent C Agent D
Extrait de girofle 0,5 1,0 3,0 5,0
Alcool éthylique 65,0 65,0 65,0 65,0
Eau 24,5 24,0 22,0 20,0
Propylène glycol 10,0 10,0 10,0 10,0
EXEMPLE 89 ET EXEMPLES COMPARATIFS 9 ET 10
Test d'activité germicide du spray germicide
1) Procédé de la plaque de contact
Les agents germicides préparés dans l'exemple d'essai 3 ont été pulvérisés sur les surfaces de murs ou sur les surfaces de tables de travail de boulangerie, des emplacements où des bactéries et fongi divers sont censés se développer. Des boîtes de Pétri, vendues par 3M, ont été mises en contact avec les surfaces des murs ou les surfaces des tables de travail pour contaminer les surfaces des boîtes de Pétri.
Les boîtes de Pétri ont été incubées à 24 à 30"C pendant 7 jours après quoi on a recherché la croissance de germes.
L'exemple comparatif 9 se rapporte à un témoin qui était en contact avec la surface du mur ou la surface de la table de travail avant la pulvérisation.
2) Procédé par échantillonneur d'air
Les agents germicides préparés dans l'exemple d'essai 3 ont été pulvérisés dans l'air d'une boulangerie contaminée. Une quantité appropriée d'air a été prélevée par un échantillonneur d'air équipé de boîtes de Pétri. Après incubation à 24-30"C, on a contrôlé la croissance de germes sur les boîtes de Pétri.
Les agents germicides préparés dans l'exemple d'essai 3 ont été pulvérisés dans l'air d'une boulangerie contaminée. Une quantité appropriée d'air a été prélevée par un échantillonneur d'air équipé de boîtes de Pétri. Après incubation à 24-30"C, on a contrôlé la croissance de germes sur les boîtes de Pétri.
Un témoin qui a été préparé avant la pulvérisation correspondait à l'exemple comparatif 10.
TABLEAU 10
Activité germicide contre les bactéries et les fongi
Croissance de germes
Agents germicides Plaque de contact Echantil. d'air
Ex. comp. 9 ++ ++
Ex. comp. 10 ++ ++
Agent A + +
Agent B - +
Agent C
Agent D
- : Pas de croissance, + : Faible croissance,
++: Croissance
EXEMPLES 90 A 95 ET EXEMPLE COMPARATIF 1 1
L'agent gennicide obtenu dans l'exemple 1 a été testé pour son activité antibactérienne vis-à-vis de Streptococcus mutans KCT3065, une bactérie provoquant des caries dentaires.
Activité germicide contre les bactéries et les fongi
Croissance de germes
Agents germicides Plaque de contact Echantil. d'air
Ex. comp. 9 ++ ++
Ex. comp. 10 ++ ++
Agent A + +
Agent B - +
Agent C
Agent D
- : Pas de croissance, + : Faible croissance,
++: Croissance
EXEMPLES 90 A 95 ET EXEMPLE COMPARATIF 1 1
L'agent gennicide obtenu dans l'exemple 1 a été testé pour son activité antibactérienne vis-à-vis de Streptococcus mutans KCT3065, une bactérie provoquant des caries dentaires.
Il a été précultivé pendant une nuit à 350C dans un incubateur dans un bouillon BlIl (Brain Heart Infusion 20 %, Beef Heart 25 %, Protéase Peptone 1,0 %, Bacto Dextrose 0,2 %, chlorure de sodium 0,5 %, phosphate disodique 0,25 %). Cette culture a été diluée dans 1,4 x 107 cellules par ml et utilisée comme échantillon.
L'agent germicide obtenu dans l'exemple 1 a été ajouté à du bouillon Blil traité en autoclave, le tout étant suivi d'une inoculation avec l'échantillon précultivé. Le bouillon inoculé a été incubé à 37"C pendant 15 heures et, au cours de cette opération, la croissance des bactéries a été mesurée à intervalles d'une heure. L'effet Inhibiteur de l'agent germicide sur la croissance des bactéries a été déterminé en mesurant la densité optique au moyen d'un spectrophotomètre et en incubant la plaque d'agar sur laquelle l'échantillon a été appliqué.
Les résultats sont illustrés dans le tableau 1 1 ci-dessous.
L'exemple comparatif 1 1 représentait un témoin qui ne contenait pas l'agent germicide.
TABLEAU 1 1
Activité germicide contre les bactéries et les fongi
Ex nO Bouillon BIH Germicide Croissance
(part. en pds) (part. en pds) de germes
C. 11 100 - ++
90 100 0,05 +
91 100 0,1
92 100 0,2
93 100 0,5
94 100 0,7
95 100 1,0
- : Pas de croissance, +: Faible croissance,
++: : Croissance
EXEMPLES 96 A 100 ET EXEMPLE COMPARATIF 12
Activité antibactérienne contre les bactéries
provoquant des caries dentaires
Gomme
De la gomme a été préparée en mélangeant 58 % en poids de sorbitol, 1,0 % en poids de xylitol, 4,0 % en poids de mannitol 7020 et 28 % en poids de base de gomme en combinaison avec l'agent germicide de la présente invention, en moulant le mélange en une forme souhaitée et en le découpant en pièces de 2,5 g.
Activité germicide contre les bactéries et les fongi
Ex nO Bouillon BIH Germicide Croissance
(part. en pds) (part. en pds) de germes
C. 11 100 - ++
90 100 0,05 +
91 100 0,1
92 100 0,2
93 100 0,5
94 100 0,7
95 100 1,0
- : Pas de croissance, +: Faible croissance,
++: : Croissance
EXEMPLES 96 A 100 ET EXEMPLE COMPARATIF 12
Activité antibactérienne contre les bactéries
provoquant des caries dentaires
Gomme
De la gomme a été préparée en mélangeant 58 % en poids de sorbitol, 1,0 % en poids de xylitol, 4,0 % en poids de mannitol 7020 et 28 % en poids de base de gomme en combinaison avec l'agent germicide de la présente invention, en moulant le mélange en une forme souhaitée et en le découpant en pièces de 2,5 g.
La gomme préparée a été placée dans un mortier dans lequel une certaine quantité d'eau a été ajoutée. La gomme a été mâchée mécaniquement et la solution obtenue extraite a été ajoutée dans les bouillons Blil qui avaient été inoculés par la préculture des bactéries provoquant des caries dentaires comme dans les exemples 96 à 100. Ces bouillons ont été cultivés à 370C sans agitation.
L'effet inhibiteur de croissance a été déterminé en mesurant la densité optique des bouillons cultives.
Les résultats sont illustrés dans le tableau 12 ci-dessous.
L'exemple comparatif 12 correspondait à un témoin qui ne contenait pas l'agent germicide de la présente invention.
TABLEAU 12
Activité germicide contre les bactéries
provoquant des caries dentaires
(S. mutans KCTC3065) dans de la gomme
Ex nO Gomme Germicide Croissance
(part. en pds) (part. en pds) de germes
C. 12 100 - ++
96 100 0,05 +
97 100 0,1
98 100 0,2
99 100 0,3
100 100 0,5
- : Pas de croissance, +: Peu de croissance,
++: Croissance
EXEMPLES 101 A 105 ET EXEMPLE COMPARATIF 13
Activité aermicide contre les bactéries
provoquant des caries dentaires dans des dentifrices
Des dentifrices ont été préparés en mélangeant dans un mélangeur à haute vitesse 42 % en poids de phosphate de calcium, 19 % en poids de glycérine, 9,5 % en poids de carrageenan, 1,2 % en poids de dodécylsulfate de sodium (SDS), 1,0 % en poids de saccharine, 1,0 % en poids d'un composé de polyphénol, 0,005 % en poids d'acide butylparaoxybenzoïque, en association avec 0,05 à 0,5 partie en poids de l'agent germicide de la présente invention sur la base de 100 % en poids de la composition.
Activité germicide contre les bactéries
provoquant des caries dentaires
(S. mutans KCTC3065) dans de la gomme
Ex nO Gomme Germicide Croissance
(part. en pds) (part. en pds) de germes
C. 12 100 - ++
96 100 0,05 +
97 100 0,1
98 100 0,2
99 100 0,3
100 100 0,5
- : Pas de croissance, +: Peu de croissance,
++: Croissance
EXEMPLES 101 A 105 ET EXEMPLE COMPARATIF 13
Activité aermicide contre les bactéries
provoquant des caries dentaires dans des dentifrices
Des dentifrices ont été préparés en mélangeant dans un mélangeur à haute vitesse 42 % en poids de phosphate de calcium, 19 % en poids de glycérine, 9,5 % en poids de carrageenan, 1,2 % en poids de dodécylsulfate de sodium (SDS), 1,0 % en poids de saccharine, 1,0 % en poids d'un composé de polyphénol, 0,005 % en poids d'acide butylparaoxybenzoïque, en association avec 0,05 à 0,5 partie en poids de l'agent germicide de la présente invention sur la base de 100 % en poids de la composition.
Les dentifrices ont été ajoutés dans les bouillons BHI qui avaient été inoculés par la préculture des bactéries provoquant des caries dentaires comme dans les exemples 90 à 95. Ces bouillons ont été cultivés à 370C sans agitation.
L'effet inhibiteur de croissance a été déterminé en mesurant la densité optique des bouillons cultives.
Les résultats sont illustrés dans le tableau 13 ci-dessous.
L'exemple comparatif 13 correspondait à un témoin qui ne contenait pas l'agent germicide de la présente invention.
TABLEAU 13
Activité germicide contre les bactéries
provoquant des caries dentaires
(S. mutans KCTC3065 dans des dentifrices
Ex nO Dentifrice Germicide Croissance
(part. en pds) (part. en pds) de germes
C. 13 100 - ++
101 100 0,05 +
102 100 0,1
103 100 0,2
104 100 0,3
105 100 0,5
- : Pas de croissance, +: Peu de croissance,
++: Croissance
EXEMPLES 106 A 109 ET EXEMPLE COMPARATIF 14
La présente invention vise une matière cosmétique médicale qui empêche la génération de pellicules et de démangeaisons avec une longue durabilité de cet effet, mais ne pique pas la peau du crane.
Activité germicide contre les bactéries
provoquant des caries dentaires
(S. mutans KCTC3065 dans des dentifrices
Ex nO Dentifrice Germicide Croissance
(part. en pds) (part. en pds) de germes
C. 13 100 - ++
101 100 0,05 +
102 100 0,1
103 100 0,2
104 100 0,3
105 100 0,5
- : Pas de croissance, +: Peu de croissance,
++: Croissance
EXEMPLES 106 A 109 ET EXEMPLE COMPARATIF 14
La présente invention vise une matière cosmétique médicale qui empêche la génération de pellicules et de démangeaisons avec une longue durabilité de cet effet, mais ne pique pas la peau du crane.
Comme ingrédient essentiel, I'agent germicide obtenu dans l'exemple 1 a été dissous dans de l'alcool éthylique, un solvant aqueux. Des formulations détaillées de la matière cosmétique sont illustrées dans le tableau 14 ci-dessous. Elles ont été préparées de manière ordinaire. L'exemple comparatif 14 était celui d'un témoin qui ne contenait pas l'agent germicide de la présente invention.
TABLEAU 14
Préparation de matières cosmétiques médicales
comprenant l'agent germicide
Corpositions (% en poids) Composants
Ex. comp. 14 Ex. 106 Ex. 107 Ex. 108 Ex. 109
Extrait de girofle - 0,05 0,1 0,5 1,0
Alcool éthylique 60,0 60,0 60,0 60,0 60,0
Acide citrique 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5
Citrate de sodium 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0
(Parfum)
Paraffine liquide 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3
Polyoxyéthylène 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0
Cétyléther 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Eau purifiée 33,7 33,65 33,6 33,2 32,7
Les matières cosmétiques médicales préparées dans les exemples 106 à 109 et dans l'exemple comparatif 14 ont été testées pour déterminer l'effet inhibiteur sur la croissance de bactéries aérobies sur la peau du crâne, comme décrit ci-dessous. Les résultats sont illustrés dans le tableau 15.
Préparation de matières cosmétiques médicales
comprenant l'agent germicide
Corpositions (% en poids) Composants
Ex. comp. 14 Ex. 106 Ex. 107 Ex. 108 Ex. 109
Extrait de girofle - 0,05 0,1 0,5 1,0
Alcool éthylique 60,0 60,0 60,0 60,0 60,0
Acide citrique 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5
Citrate de sodium 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0
(Parfum)
Paraffine liquide 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3
Polyoxyéthylène 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0
Cétyléther 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Eau purifiée 33,7 33,65 33,6 33,2 32,7
Les matières cosmétiques médicales préparées dans les exemples 106 à 109 et dans l'exemple comparatif 14 ont été testées pour déterminer l'effet inhibiteur sur la croissance de bactéries aérobies sur la peau du crâne, comme décrit ci-dessous. Les résultats sont illustrés dans le tableau 15.
Pour examiner l'effet préventif des démangeaisons sur la peau du crâne, les matières cosmétiques médicales ont été appliquées sur la peau du crâne.
Sur la base du standard de décision suivant, I'effet préventif a été exprimé en valeur moyenne après mesure du panel (NO de panel 5), qui est représenté dans le tableau 16.
1) standard de décision
Beaucoup de démangeaisons + 2
Démangeaisons + 1
Pas de démangeaisons 0
2) Comptage du nombre de bactéries aérobies sur la peau du crâne
Une quantité prédéterminée de matière cosmétique médicale a été appliquée sur la peau du crâne. Un temps prédéterminé après l'application, une solution saline physiologique a été appliquée au crane pour obtenir des extraits de la peau du crane qui ont été ensuite placés dans des coupelles de verre d'un diamètre interne de 2 cm. Ces extraits ont été inoculés dans des milieux CSD (Bacto tryptone 1,7 %, Bacto soytone 0,3 %, Bacto dextrose 0,25 %, chlorure de sodium 0,5 %, phosphate dipotassique 0,25 %, pH 7,3) à 37"C pendant 48 heures.
Beaucoup de démangeaisons + 2
Démangeaisons + 1
Pas de démangeaisons 0
2) Comptage du nombre de bactéries aérobies sur la peau du crâne
Une quantité prédéterminée de matière cosmétique médicale a été appliquée sur la peau du crâne. Un temps prédéterminé après l'application, une solution saline physiologique a été appliquée au crane pour obtenir des extraits de la peau du crane qui ont été ensuite placés dans des coupelles de verre d'un diamètre interne de 2 cm. Ces extraits ont été inoculés dans des milieux CSD (Bacto tryptone 1,7 %, Bacto soytone 0,3 %, Bacto dextrose 0,25 %, chlorure de sodium 0,5 %, phosphate dipotassique 0,25 %, pH 7,3) à 37"C pendant 48 heures.
Le nombre de bactéries a été compté.
TABLEAU 15
Activité germicide contre les bactéries aérobies
sur la peau du crâne pour la matière
cosmétique médicale
Nombre de bactéries aérobies sur la peau
du crâne (cellules/cm2)
Ex nO
0 heure 24 heures 48 heures
Référence 1,0 x 106 4,8 x 106 1,9 x
C. 14 5,0 x 105 2,3 x 106 8,1 x 106
106 2,0 x 105 1,0 x 106 5,1 x 106
107 2,8 x 104 1,2 x 105 6,9 x 105
108 6,3 x 103 9,7 x 102 1,2 x
109 4,6 x 102 7,8 x 102 1,2 x 103
TABLEAU 16
Effet préventif de la matière cosmétique médicale
sur des démanoeaisons de la peau du crâne
Ex nO 6 heures 24 heures 48 heures
Non appliqué 0 0,7 1,8
106 0 0,4 1,5
107 0 0,2 1,0
108 0 0 0,7
109 0 0 0,1
La présente invention a été décrite de manière illustrative et il est bien entendu que la terminologie utilisée est destinée à servir à la description plutôt qu'à la limiter.
Activité germicide contre les bactéries aérobies
sur la peau du crâne pour la matière
cosmétique médicale
Nombre de bactéries aérobies sur la peau
du crâne (cellules/cm2)
Ex nO
0 heure 24 heures 48 heures
Référence 1,0 x 106 4,8 x 106 1,9 x
C. 14 5,0 x 105 2,3 x 106 8,1 x 106
106 2,0 x 105 1,0 x 106 5,1 x 106
107 2,8 x 104 1,2 x 105 6,9 x 105
108 6,3 x 103 9,7 x 102 1,2 x
109 4,6 x 102 7,8 x 102 1,2 x 103
TABLEAU 16
Effet préventif de la matière cosmétique médicale
sur des démanoeaisons de la peau du crâne
Ex nO 6 heures 24 heures 48 heures
Non appliqué 0 0,7 1,8
106 0 0,4 1,5
107 0 0,2 1,0
108 0 0 0,7
109 0 0 0,1
La présente invention a été décrite de manière illustrative et il est bien entendu que la terminologie utilisée est destinée à servir à la description plutôt qu'à la limiter.
De nombreuses variantes et modifications de la présente invention sont possibles à la lumière des enseignements précités. En conséquence, il est bien entendu que la présente invention peut être mise en oeusTe autrement que décrit
spécifiquement sans sortir du cadre des revendications ci-annexées.
spécifiquement sans sortir du cadre des revendications ci-annexées.
Claims (11)
1. Agent germicide végétal comprenant un extrait qui est préparé en dissolvant de l'écorce et de la tige de fleur séchée de girofle (Eugenia caiyophyllata) dans de l'eau selon un rapport pondéral de 1:3 à 1:10 de l'écorce et de la tige de fleur séchée à l'eau et en distillant la solution dans un appareil de distillation en continu à circulation.
2. Conservateur alimentaire, comprenant un extrait dérivé du girofle, seul ou en association avec au moins un conservateur ordinaire, ledit extrait dérivé du girofle étant préparé en dissolvant de l'écorce et de la tige de fleur séchée de girofle dans de l'eau selon un rapport pondéral de 1:3 à 1:10 de l'écorce et de la tige de fleur séchée à l'eau et en distillant la solution dans un appareil de distillation en continu à circulation.
3. Conservateur selon la revendication 2, dans lequel ledit conservateur ordinaire est sélectionné parmi les monoglycérides d'acides gras inférieurs contenant 4 à 12 atomes de carbone, de la glycérine et de l'alcool éthylique.
4. Conservateur selon la revendication 3, dans lequel ledit extrait dérivé du girofle est mélangé à de l'alcool éthylique selon un rapport pondéral de l:4à4:1.
5. Conservateur selon la revendication 2, dans lequel ledit extrait dérivé du girofle est mélangé à de la glycérine et à de l'alcool éthylique selon un rapport pondéral de 1:3,6:5,4 à 4:1,5:4,5 de l'extrait dérivé de girofle à la glycérine à l'alcool éthylique.
6. Conservateur selon la revendication 3, dans lequel ledit extrait dérivé du girofle est mélangé audit monoglycéride d'acide gras inférieur selon un rapport pondéral de 1:2 à 2:1.
7. Procédé de conservation d'aliments, qui consiste à ajouter l'extrait dérivé du girofle de la revendication 2 en quantité d'environ 0,05 à 0,5 partie en poids sur la base de 100 parties en poids d'aliments en général, notamment des bouillons de boeuf, des nouilles, des gâteaux de riz, et des gâteaux en général.
8. Spray germicide pour désinfection sanitaire ambiante, comprenant un extrait dérivé du girofle en combinaison avec de l'alcool éthylique et du propylène glycol, ledit extrait dérivé du girofle étant préparé en dissolvant de l'écorce et de la tige de fleur séchée de girofle dans de l'eau selon un rapport pondéral de 1:3 à 1:10 de l'écorce et de la tige de fleur séchée à l'eau et en distillant la solution dans un appareil de distillation continu à circulation.
9. Spray germicide selon la revendication 8, dans lequel le rapport pondéral dudit extrait dérivé du girofle à l'alcool éthylique et au propylène glycol est de l'ordre de 0,5:89,5:10 à 5:85:10.
10. Composition pour l'hygiène dentaire, comprenant un extrait dérivé du girofle en quantité d'environ O,05 à 1,0 partie en poids sur la base de 100 parties en poids de dentifrice ou de chewing-gum, ledit extrait dérivé du girofle étant préparé en dissolvant de l'écorce et de la tige de fleur séchée de girofle dans de l'eau selon un rapport pondéral de 1:3 à 1:10 de l'écorce et de la tige de fleur séchée à l'eau et en distillant la solution dans un appareil de distillation continu à circulation.
11. Composition cosmétique, comprenant un extrait dérivé du girofle en quantité d'environ 0,05 à 1,0 partie en poids sur la base de 100 parties en poids de ladite composition, ledit extrait dérivé du girofle étant préparé en dissolvant de l'écorce et de la tige de fleur séchée de girofle dans de l'eau selon un rapport pondéral de 1:3 à 1:10 de l'écorce et de la tige de fleur séchée à l'eau et en distillant la solution dans un appareil de distillation continu à circulation
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| FR9605330A FR2747884A1 (fr) | 1996-04-26 | 1996-04-26 | Extrait de girofle, son utilisation comme conservateur alimentaire et dans des compositions pour l'hygiene dentaire et cosmetique |
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| FR2747884A1 true FR2747884A1 (fr) | 1997-10-31 |
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| FR9605330A Pending FR2747884A1 (fr) | 1996-04-26 | 1996-04-26 | Extrait de girofle, son utilisation comme conservateur alimentaire et dans des compositions pour l'hygiene dentaire et cosmetique |
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