FR2541113A1 - Application therapeutique de la n-methyl-n-bis (3,4-dimethoxyphenylethyl) amine et de ses sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables - Google Patents

Abstract

L'INVENTION A POUR OBJET UN COMPOSE REPONDANT A LA FORMULE I CI-APRES ET SES SELS D'ADDITION AVEC UN ACIDE PHARMACEUTIQUEMENT ACCEPTABLE: (CF DESSIN DANS BOPI) ON PREPARE LE COMPOSE I EN FAISANT REAGIR UNE BIS-2-(3,4-DIMETHOXYPHENYL)ETHYLAMINE AVEC DU FORMALDEHYDE DANS UN MILIEU REDUCTEUR. LES COMPOSES SELON L'INVENTION SONT UTILES DANS LE TRAITEMENT DES MALADIES CARDIOVASCULAIRES ET DES PERTURBATIONS DE LA CIRCULATION CEREBRALE.

Description

l

La présente invention concerne une N-méthyl-N-bis-( 3,4-di-

méthoxyphényléthyl)aminerépondant à la formule générale (I): CH 30 o H 30 -CH OCH 3

CH 3 O H 2-CH 2 N -CH -CH CHR 3

CH 3

ainsi que les sels d'addition d'acides pharmaceutiquement accep-

tables de ce composé de formule (I), ce composé et ces sels

possédant une activité antagoniste vis-à-vis du calcium.

Le composé selon l'invention, qui présente une très

faible toxicité, est donc utile pour le traitement thérapeuti-

que des maladiescardiovasculaires et des irrégularités de la

circulation cérébrale.

Rosenmund, Kllz et Buth, dans US 2006114, dans Ber.

72 B 18-28,1939 et dans DE 617647, ont décrit la synthèse d'une

série de bis phénéthylamines possédant des propriétés analo-

gues à la papavérine et des propriétés spasmolytiques; ils ont cité également la N-méthyl-N-bis-( 3,4-diméthoxyphényléthyl) amine. En fait, le composé cité par Rosenmund et al (pour lequel les auteurs n'ont donné aucun renseignement pour prouversa structure) doit avoir une structure différente de celle du composé faisant l'objet de l'invention, étant donné que pour son chlorhydrate, les auteurs indiquent un P F de 230 ou 242 C alors que le chlorhydrate du composé selon l'invention (dont la structure au contraire est confirmée par les données RMN) fond à 180-185 C même après des cristallisations répétées et dans un état de haute pureté En outre, comme on le verra par la suite, on a remarqué une différence très nette entre les propriétés pharmacologiques du composé selon l'invention et celles du composé mentionné par Rosenmund et al, Il est probable que la nature différente de ce dernier composé est en rapport avec le fait que l'on obtient l'amine secondaire correspondante non N-méthylée conformément à une réaction très peu usuelle, à savoir 1 hydrogénolyse de la ( 3,4-diméthoxy-phénéthyl)amine avec H 2 sur Pd/Ba SO 4 à des températures très élevées, selon le schéma: OCH 3 S\ Ba SO 4 /H 2 2 CH 30 CH 2-CH 2-NH 2 Ba SO 4/2

OCOCH 3 O O CH 3

CH 3 < CH 2-CH 2-NH-CH 2 -CH 2 OCH 3

En outre, le brevet allemand 617 647 décrit la méthylation de cette amine secondaire avec du formaldehyde en l'absence d'un agent réducteur quelconque; dans le brevet US 2 006 114, on effectue la méthylation en présence d'acide formique mais

il n'en reste pas moins que le chlorhydrate correspondant pré-

sente un point de fusion encore plus élevé ( 242 C) en comparai-

son de celui du chlorhydrate de N-méthyl-N-bis-( 3,4-diméthoxy-

phényléthyl)amine dont la structure, comme on l'a souligné pré-

cédemment, a été rigoureusement confirmée Au contraire, selon

les enseignements des antériorités citées, on obtient un compo-

sé différent comme on le constate en répétant les mêmes procédés

expérimentaux que ceux décrits dans ces documents.

On doit donc considérer le composé (I) comme un composé nouveau. Les propriétés pharmacologiques du composé (I) n'étaient

pas davantage prévisibles en se basant sur sa structure en rap-

port avec la papavérine.

En fait on sait que les effets thérapeutiques de la papavérine ont été mis en doute (voir par exemple Goodman et Gilman "Pharmacological Basis of Therapeutics" McMillan, New York, 830 Needleman and Johnson, o l'on indique qu'"il n'a

pas été démontré que la papavérine possède une valeur théra-

peutique dans n'importe quelle condition")

Un Comité d'experts de la U S Food and Drug Administra-

tion est arrivé à des conclusions identiques et il a indiqué qu'on ne dispose d'aucun élément pour prouver l'efficacité de la papavérine dans l'une quelconque des indications citées par

les fabricants.

En se basant sur ces conclusions, la FDA a proposé de retirer la papavérine du marché (FDA Drug Bull 9,26, 1979;

Fed Reg 44, 30443, 1979).

Les composés décrits dans les brevets précités et dans

les autres documents n'ont donc jamais été utilisés en méde-

cine et aucune indication thérapeutique ne peut découler des enseignements de la technique antérieure.

La Demanderesse a maintenant découvert de façon sur-

prenante que le composé de formule (I) fait preuve d'une forte activité antagoniste vis-à-vis du calcium, comparable à celle de la nifédipine (un médicament connu et récent, antagoniste du calcium) et qui n'est pas en rapport avec des propriétés

analogues à celles de la papavérine.

En fait les actions de la papavérine sur l'ion calcium sont complexes et sont caractérisées par une stimulation des flux de l'ion calcium aux plus faibles concentrations (Carpenedo et al J Pharm Pharmacol 1971, 23, 502505) et par un antagonisme aux concentrations d'environ 10-4 M

(Sanguinetti et West, J Pharm Exp Ther, 219, 715, 1981).

Les mêmes auteurs ont également démontré que la papa-

vérine et le vérapamile, qui est un antagoniste connu du cal-

cium, sont mutuellement antagonistes des flux d'entrée lents des ions calcium dans les ventricules isolés de cobayes, La papavérine est donc entièrement dépourvue d'activité antagoniste vis-à-vis du calcium et on doit s'attendre à une caractéristique identique avec les autres composés de structure

voisine.

En outre, l'action biochimique principale de la papa-

vérine et de certains de ses dérivés est l'inhibition des phosphodiestérases (Kukovetz et Pach, Naunyn Schmiedebergs

Arch Pharm, 267, 189-194, 1970) Au contraire, la Demanderes-

se a découvert de façon surprenante que la N-méthyl-N-bis-

( 3,4-diméthoxyphényléthyl)-amine, outre qu'elle possède une

forte activité antagoniste vis-à-vis du calcium, est entière-

ment dépourvue d'une action inhibitrice sur les phosphodiesté-

rases. Le profil thérapeutique et pharmacologique des composés selon l'invention doit donc être considéré comme imprévisible, en se basant à la fois sur les documents cités plus haut et sur la pharmacologie de la papavérine, malgré d'éventuelles

analogies structurales.

Les composés selon l'invention sont donc de nouveaux agents thérapeutiques qui bloquent l'entrée du calcium et qui sont utiles pour le traitement de l'ischémie des myocardes et des maladies cérébro- vasculaires provoquées par l'oligomie cérébrale. Le composé selon l'invention est préparé en soumettant la bis-l 2-( 3,4-diméthoxyphényl) éthyllamine à une amination réductrice, c'est-à-dire par traitement par le formaldéhyde

en présence d'un agent réducteur.

L'exemple suivants dans lequel toutes les proportions sont en poids sauf stipulation contraire, sert à illustrer l'invention sans aucunement en limiter la portée;

EXEMPLE

a) Chlorure de 3,4-diméthoxyphénylacétyle On dissout 29,5 g d'acide 3,4diméthoxyphénylacétique dans 200 cm 3 de chloroforme anhydre exempt d'éthanol On ajoute alors 23,8 g de chlorure de thionyle, on chauffe le mélange sous reflux pendant 4 heures, on élimine sous pression réduite le solvant et l'excès de réactif et on distille le résidu huileux

sous pression réduite ( 10 10 Pa) en recueillant une frac-

760 1,2

tion qui est distillée à 170-1720 C On obtient ainsi le chlo-

rure pur à raison de 26 g (rendement 81 %).

b) N-C 2-( 3,4-diméthoxyphényl)éthyl-3,4-diméthoxyphgnylacéta-

mide On dissout 21,7 g de 2-( 3,4-diméthoxyphényl)éthylamine dans 150 cm 3 de chloroforme anhydre et ensuite on ajoute la solution à 15,2 g de triéthylamine anhydre On refroidit la solution à une température de 5 à 10 IC et ensuite on agite et on ajoute du chlorure de 3,4diméthoxyphénylacétyle préparé comme dans la partie a) à raison de 26 g en dissolution dans cm 3 de chloroforme anhydre On laisse la température monter jusqu'à la température ambiante On chauffe ensuite sous reflux pendant 8 heures Apres refroidissement du mélange par addition d'un supplément de 200 cm 3 de chloroforme, on lave la

phase organique avec de l'eau puis avec de l'acide chlorhydri-

que à 5 % et une nouvelle quantité d'eau, ensuite avec de l'hydroxyde de sodium à 5 % et finalement avec de l'eau On sèche la phase organique sur du sulfate de sodium anhydre et, après filtration, on évapore le solvant sous pression réduite, On recristallise la matière solide ainsi obtenue dans de l'éthanol absolu On obtient 36 g d'amide pur, c'est-à-dire avec un rendement de 84 %, P F 128 C Cette substance est unique en chromatographie en utilisant de l'éthanol comme éluant. c) Bis-F 2-3,4diméthoxyphényl)éthyl Jamine. On met en suspension 37,7 g de borohydrure de sodium dans 1500 cm 3 de tétrahydrofuranne anhydre en atmosphère inerte d'azote On ajoute à la suspension 36 g de l'amide préparé dans la partie b) tout en agitant le mélange et en refroidissant à 10 C, puis on ajoute 58 cm 3 d'acide acétique

glacial et on chauffe le mélange sous reflux pendant 4 heures.

A la fin de cette période, on évapore le solvant sous pression réduite, on traite le résidu avec de l'eau et ensuite avec de l'acide chlorhydrique dilué jusqu'à acidité totale On ajoute à ce mélange une solution d'hydroxyde de sodium jusqu'à

obtenir un p H alcalin et on extrait la matière à quatre repri-

ses, à chaque fois avec 300 cm 3 de dichlorométhane On extrait la phase organique avec de l'acide chlorhydrique dilué, on lave la solution acétique avec du dichlorométhane, puis on refroidit et on alcalinise avec du carbonate de potassium et finalement on extrait une fois de plus avec quatre portions de dichlorométhane en utilisant à chaque fois 200 cm On sèche la phase organique sur du sulfate de sodium anhydre, on filtre et on évapore Le résidu est l'amine brute qu'on recristallise dans l'éthanol pour ainsi obtenir 28,5 g (rendement 75 %) d'un produit pur dont le P F est de 56-58 C On obtient une seule tache en chromatographie en couche mince (gluant: n-butanol,

éthanol, acide acétique, eau = 60:20:40:10).

Analyse élémentaire Calculé (%): C = 69,54; H = 7,88; N = 4-,05;

Trouvé (%): C = 69,77; H = 8,01; N = 4,16.

d) N-méthyl-N-bis-( 3,4-diméthoxyphényléthyl)amine

On dissout le composé préparé dans la partie c), c'est-

à-dire 10,4 g dans 100 cm 3 de méthanol et on ajoute 30 cm 3 de

formaldéhyde à 37 % On fait bouillir le mélange avec agita-

tion pendant 40 minutes, puis on refroidit dans un bain de glace jusqu'à O C et on ajoute par petites portions 4 g de Na BH 4 On poursuit l'agitation à température ambiante pendant minutes et on évapore ensuite le méthanol sous pression réduite On dissout le résidu dans l'eau, on acidifie avec de l'acide chorhydrique et, après avoir agité pendant quelques

minutes, on refroidit et on alcalinise avec une solution d'hy-

droxyde de sodium On extrait la solution alcaline avec du dichlorométhane, on isole la phase organique, la lave avec de l'eau, la sèche sur du sulftae de sodium, puis la filtre et on évapore le solvant sous pression réduite à siccité On

cristallise le résidu à deux reprises dans du n-hexane en uti-

lisant à chaque fois 100 cm 3 et on obtient ainsi 6,7 g d'un produit pur (rendement 62 %; P F 67-69 C) Le produit est unique en chromatographie en couche mince (éluant identique

à celui utilisé dans le cas de l'amine au paragraphe c).

Analyse élémentaire pour C 21 H 29 N 04 (PM = 359,47): Calculé (%): C = 70,16; H = 8,13; N = 3,89

Trouvé (%): C = 70,23; H = 8,17; N = 3,85.

Dans la suite du présent exposé, le composé ainsi obtenu sera désigné par YS 035 La structure de ce composé a été

confirmée par spectroscopie.

Spectre H 1 RMN (enregistré dans CDC 13, en utilisant TMS comme référence interne) Les valeurs des déplacements chimiques des protons sont expriméesen i: 2,35 (s, 3 H, N-CH 3); 2,7 (s, 8 H, N-(CH 2-CH 2)2); 3,8 (s, 12 H, 4 (OCH 3));

6,7 (s, 6 H aromatiques).

Le chlorhydrate du composé YS 035 présente un P F de

-185 C.

Analyse élémentaire pour C 21 H 30 NO 4 C 1 (PM = 395,93): Calculé (%): C = 63,70; H = 7,63; N = 3,54;

Trouvé (%): C = 63,42; H = 7,47; N = 3,39.

On soumet le composé YS 035 à une série de tests phar-

macotoxicologiques pour en déterminer l'activité par comparai-

son aux médicaments connus Nifédipine et Nicardipine qui font preuve d'une activité antagoniste vis-à-vis du calcium Les

résultats ainsi obtenus sont présentés plus loin.

Toxicité aiguë de YS 035 On détermine la toxicité aiguë par voie orale et par voie veineuse chez les rats mâles selon le procédé de Litchfield

et Wilcoxon (J Pharm Exp Therap 1949, 96, p 99), La subs-

tance YS 035 présente une toxicité DL 50 de 177,9 mg/kg par

voie orale et 19 mg/kg par voie veineuse.

PHARMACOLOGIE

Activité antagoniste vis-à-vis du calcium Inhibition de la capture de Ca 2 dans les synaptosomes du cerveau chez les rats. On prépare les synaptosomes à partir d'un homogénat de cerveau de rats par centrifugation dans un gradient de Filcoll à 23 500 tours/minute pendant une durée de 30 minutes et on dilue à 1,5 mg/cm dans un milieu constitué de: Na Cl 120 m M K Cl 30 m M Mg SO 4 1,2 m M KH 2 PO 4 0,4 m M Na HCO 3 - 5 m M TES 20 m M Glucose 10 m M. On ajoute la substance YS 035, ainsi que la nifédipine et la papavérine à titre de comparaison, à ce milieu en une concentration finale de 250 micromoles Après 15 minutes de pré-incubation, on ajoute du 45 Ca C 12, concentration finale

3 2

Im M( 0,2/Ci/cm)à ce milieu.

On effectue la première détermination deux minutes après l'addition Les concentrations trouvées sont utilisées comme valeurs au temps O On effectue les autres contrôles après 5 minutes, 10 minutes et 15 minutes Après chaque période, on

arrête la réaction par centrifugation et on détermine la radio-

activité dans le surnageant ainsi que dans les pastilles Ces

dernières sont dénaturées au préalable avec PCA, puis neutra-

lisées et ensuite centrifugées.

Les résultats apparaissant dans le Tableau I ci-après expriment la quantité de calcium transféré par mg de protéine

après une période maximale d'incubation de 15 minutes.

TABLEAU I

En se basant sur les données de ce tableau, on peut constater que l'activité inhibitrice sur la capture du calcium qu'on obtient par la nouvelle substance YS 035 dans les synaptosomes des cerveaux de rats est comparable à l'activité présentée par la Nifédipine alors que la papavérine est absolument

dépourvue d'activité antagoniste vis-à-vis du calcium.

Inhibition de la capture de Ca 2 dans les cellules de reins

de hamsters nouveaux-nés.

On lave des cellules de reins de hamsters nouveaux-nés

et on les remet à plusieurs reprises en suspension en une concen-

tration de 5 x 106/cm 3 dans le milieu ayant la composition sui-

vante: Na Cl 120 m M K Cl 5,5 m M Glucose 5,5 m M Na 2 HPO 4 Na 2 P 04 0, 7 m M Na HCO 3 25 mm

Mg C 12 1,3 m M -

Tris H Cl à p H 7,4 10 m M. On ajoute la substance YS 035 et la nifédipine à titre

de comparaison en une concentration finale de 250 micromoles.

Après 15 minutes de pré-incubation à 30 C, on fait dé-

buter la réaction en ajoutant au milieu du 45 Ca Cl 21 m M

( 0,1/Ci/cm) Les concentrations au temps O sont les concen-

trations déterminées 2 minutes après l'addition On effectue les autres contrôles après 5, 10 et 20 minutes On effectue

la détermination de úCa 2 + comme dans l'essai précédent.

Composé Capture de Ca 2 (n g ions/mg prot/15 min)

IL _

Témoin 80 + 7 Papavérine ( 250/A M) 79 + 5 Nifédipine ( 250/A M) 42 + 5

YS 035 ( 250/M) 47 + 4

Les résultats apparaissent dans le Tableau II sous forme de la quantité de Ca transférée par mg de protéine

( 1 mg de protéine = 5 x 10 cellules) après une période maxi-

male d'incubation de 15 minutes Les résultats obtenus démon-

trent dans ce modèle expérimental l'action inhibitrice sur la capture de Ca, dont font preuve aussi bien le composé YS 035 que la nifédipine Cependant l'activité du nouveau composé est

quantitativement supérieure à l'activité de la nifédipine.

TABLEAU II

Composition Capture de Ca 2 + (N g ions/mg du prot/15 ')

-_ 11,9

YS 035 7,5 (-36,9 % de l'inhibition) nifédipine 7,9 (-33,6 % de l'inhibition) Inhibition de la capture de Ca 2 dans les mitochondries du

foie chez les rats.

On dilue les mitochondries préparées par les procédés classiques jusqu'a une concentration de 1,5 mg/cm 3 dans un milieu d'incubation ayant la composition ci-après Saccharose 200 m M K C 11 20 m M Tris H Cl à p H 7,4 10 m M Succinate 2 m M

Rotgnone 1/LM.

On ajoute le composé Y 5035 et la nifédipine à titre de comparaison à ce milieu jusqu'à une concentration finale de

250 micromoles Après une période de 15 minutes de pré-incuba-

tion à 20 C, on ajoute de 45 Ca C 12 ( 50 N mol/mg de prot).

De façon analogue aux expériences précédentes, les concen-

trations déterminées après 2 minutes sont appelées concentrations au temps O Les autres contrôles sont effectués après 5, 10 et 15 minutes La détermination de Ca 2 + est effectuée de façon et 15 minutes La détermination de Ca est effectuée de façon analogue à celle dans les expériences précédentes 9 Les résultats apparaissent dans le Tableau III sous

forme de la quantité de Ca transférée par mg de protéine.

TABLEAU III

L'activité inhibitrice du composé YS 035 sur la capture de Ca au niveau des mitochondries du foie chez les rats est

évidente à l'examen de ces résultats, bien que dans les con-

ditions expérimentales utilisées elle soit légèrement infé-

rieure à celle de la nifédipine.

Etude de la diffusion de Ca 2 dans les mitochondries du foie de rats On utilise les mitochondries du foie de rats préparées comme dans l'essai précédent et on la "charge" avec Ca et

ultérieurement on reprend dans un milieu dépourvu de cet ion.

En présence d'un agent de découplage ou de "Rouge de Ruthénium", on observe une diffusion de l'ion C-a 2 + depuis les mitochondries

vers le milieu.

On ajoute les substances YS 035 et nifédipine en une concentration de 250 micromoles dans chaque cas, aussi bien en présence qu'en l'absence des deux types d'activants pour

le flux d'entrée de Ca.

Les résultats indiqués dans le Tableau IV expriment la quantité de Ca transférée à partir des mitochondries par mg de protéine par minute En se basant sur ces données, on constate une action de découplage de la nifédipine mais la

substance YS 035 ne fait pas preuve d'une telle action.

Composition Capture de Ca 2 + (n g ions/mg de prot) 14,3 Nifédipine 9,5

YS 035 11,0

TABLEAU IV

Composition Diffusion de Ca (n g ions/mn, mg/prot) induite par:

Rouge de agent de dé-

ruthénium couplage l 0,O 0,7 8,3 Nifédipine ( 250,w M) 3,8 2,2 8,5

YS 035 ( 250,AM) 0,0 0,6 5,4

Activité antagoniste sur les contractions produites par l'acide

arachidonique sur l'aorte-de lapins.

Etude in vitro.

On effectue cette étude par comparaison avec la Nicardi-

pine en utilisant du sang autologue comme liquide de perfusion.

L'addition de 0,1 mg d'arachidonate au liquide provoque une contraction isométrique de l'aorte qui est enregistrée par un transducteur A partir des résultats indiqués dans le Tableau V, on constate que l'effet inhibiteur de deux produits sur la contraction produite par l'arachidonate est comparable car les deux, molécules peuvent induire une "dérivation" ("by-pass") entre la synthèse de Thromboxane A 2 et la synthèse de PGI 2 Ce phénomène est démontré par la relaxation qui suit l'addition de l'arachidonate au sang de perfusion On peut remarquer cet effet avec 0,1 mg/kg de YS 035 et 1 mg/kg de Nicardipine.

2 541113

TABLEAU V

N = Nombre total des portions de l'aorte examinées.

() Valeur des petites contractions constatées parfois avant

la relaxation.

Inhibition de l'activité des phosphodiestérases

On détermine l'inhibition de l'activité des phospho-

diestérases de YS 035 et de la papavérine selon le procédé de

K.G Nair (Biochemistry 5, 150, 1966).

On utilise un milieu contenant: 2,5 ml de tampon tris-HC 1 0,1 M, p H 7,4; A Ll de Mg SO 4 7 H 20 ( 10 kug/ml); 50 A/1 de CAP "Sigma" ( 1 mg/ml); /Ul d'Adénosine-désaminase ( 2 mg/ml); ,41 de phosphatase alcaline "Sigma" ( 2,6 mg/ml);

/Ml de phosphodiestérase ( 10 mg/ml).

On ajoute YS 035 en une concentration finale de 100 m M et la papavérine en une concentration de 10 m M Les valeurs DI 50 (dose inhibitrice à 50 %) sont 0,04 m M pour la papavérine

alors que YS 035 se révèle entièrement inactif.

h N Contraction de Contraction de la seconde et Composé la première por de la troisième portions de tion de l'aorte -l'aorte (mm) N= 4 dose 1 N Variation ld se-I N Variation mg.kg

0,01 3 -42 31,0

YS 035 48 + 6,7 0,1 4 (-60 29,3)

1,0 1 -132 + 16,1

-16

0,01 1 -6

Nicardipine 38 4,9 0,1 4 -48 + 15,5

1,0 3 (-84) 162

Etudes in vivo On administre par voie orale pendant 3 jours consécutifs à des lapins les deux substances YS 035 et Nicardipine de manière que la dernière administration de chaque substance soit effectuée 1 heure avant le sacrifice de l'animal On incube ensuite les portions de l'aorte dans PRP ou bien dans le liquide

de Krebs-Henseleit.

Les résultats obtenus après l'addition d'acide arachido-

nique sont indiqués dans le Tableau VI ci-après:

TABLEAU VI

Dose Amplitude de la contraction(mm) Composé mg kg P PRP milieu Krebs valeur indi m-ET valeurs m ET

viduelle individ.

+ 26 + 4

+ 48 + 25

+ 23 + 12

Témoins _ + 20 30 8,0 + 10 12 2,3

+ 35 + 8

+ 37 + 8

+ 36 + 18

+ 16 + 12

Nicardipine 1 + 24 30 -

+ 55 -10

YS 035 10 + 28 6

+ 28 + 7

Cette étude démontre qu'aussi bien YS 035 que la Nicardi-

pine agissent plutôt directement sur la synthèse des prostaglan-

dines et surtout PGI 2 au niveau endothélial de l'aorte, que sur

l'effet vasoconstructeur de la Thromboxane A 2 sur les plaquettes.

Effet sur l'infarctus cérébral multiple chez les rats Une injection intracarotidienne de l'arachidonate de sodium ( 0,1 mg) provoque chez les rats une réaction oedàmateuse accompagnée d'une accumulation de calcium dans les tissus du

cerveau et, d'autre part, une diminution du niveau de choles-

térol La substance YS 035 administrée par voie intraveineuse 15 minutes avant l'infarctus à une dose de 1, 3,3 et 10 mg/kg réduit modérément l'entrée du calcium au niveau de 1 mg/kg mais n'a aucun effet sur les autres changements au niveau biochimique. Effet antagoniste sur les perturbations biochimiques et la déficience neurologique au cours de la période post-oligémique

chez les rats.

L'oligémie chez les rats est provoquée par l'occlusion bilatérale simultanée des artères carotides en association avec une faible diminution ( 8 à 9 k Pa) de la tension sanguine et est maintenue pendant 60 minutes Après l'élimination de l'occlusion, la période post-oligémique dure pendant plusieurs jours Dans ces cas, on continue les observations jusqu'au troisième jour, moment o l'accumulation des ions Ca dans le cerveau atteint son maximum

On administre YS 035 et la Nicardipine aux rats respec-

tivement 1, 5, 18, 24, 42 et 71 heures après la suppression de l'occlusion des carotides On sacrifie les rats 72 heures après et les tissus sont rapidement prélevés pour en déterminer la teneur en eau, en calcium et en potassium Les résultats

sont répertoriés dans le Tableau VII ci-après.

TABLEAU VII

N = Nombre de rats dans chaque groupe P = 0,05 selon le test de Student ou Cochran * par rapport aux témoins ** par rapport aux témoins postoligémiques Ces résultats montrent que YS 035 est capable de réduire

la gravité de l'oedéme cérébral et surtout de réduire notable-

ment l'accumulation intracellulaire des ions Ca++ Il semble également que la Nicardipine agisse de la même façon bien que son action soit beaucoup moins notable surtout en ce qui

concerne l'accumulation des ions Ca.

Effet anti-arythmique et effet anti-ischémique chez les rats Quand on ligature l'artère coronaire de gauche, on provoque chez les rats anesthésiés une arythmie précoce ( 30 minutes), en particulier des battements ectopiques, une tachycardie ventriculaire (TV) et la fibrillation venticulaire

(FV) (protocoles de Selye 1960, Clark 1980 et Parrat 1982).

Concentration cérébrale Groupe N mg kg 1 H 20 K+ Ca

P.O 2

7 x

*% mmol kg de subs-

_ _ tance sèche Témoins 36 78,7-0,05 499,3-3,45 4,4 0,20 Témoins postoli 11 80,1-0,37 366,2-12,58 28,2-3,22 gémiques 0,005 * 0,0001 0,0001 (+ 72 h) Nicardipine 4 3 79,2-0,42 368,5 + 19,69 19,3-4,92

*NS ** NS * 0,01 **NS NS 5 *NS

YS 035 8 3 79,0 + 0,44 420,0 + 11,85 10,7-2,46

* NS * 0,0000 k 0,0500

* 0,0309 * 0,004 * O,0004

Par injection intraveineuse de YS 035, 15 minutes avant la ligature de l'artère coronaire à une dose comprise entre

0,156 et 20 mg/kg, on obtient les résultats ci-après.

TABLEAU VIII

1 O -15 Il ressort de ce tableau que l'administration par voie endoveineuse des substances YS 035 empêche l'apparition de la plus sérieuse arythmie telle que FV et TV et la mort à une dose comprise entre 0,625 et 10 mg/kg Il n'existe aucun rapport entre la dose et l'effet observé car au-dessus d'une certaine dose ( 10 mg/kg),

on observe une régression des résultats.

Effet sur l'infarctus du myocarde dans la phase subaiguë chez

les chiens.

La ligature de l'artère coronaire intraventriculaire par le procédé de Harris provoque les effets suivants:

a) Une diminution de la circulation du sang dans les coronaires.

b) Une augmentation de la résistance vasculaire dans Ies coronaires.

c) Une diminution de l'indice de travail du ventricule gauche.

d) une augmentation du rapport DPTI/TTI

e) Une diminution de l'indice de la circulation dans l'aorte.

f) Une diminution de la consommation de glucose, d'oxygène et

du lactate sur une partie du myocarde.

Valeurs significatives pour chaque groupe -Groupe Dose N Nombre T V F V Nombre Pério % de Période mg/kg de bat sec sec de pha de la morta-Latente I.V tements ses (%) tente lits de la ectopiques FV FV mort _________ C; (mn) Témoins 12 1324 113 71 75 14 58 20

0,156 5 907 34 4 40 22 20 26

0,625 5 646 9 O O 30 O > 30

Y 50351,25 5 684 29 O O 30 O > 30

YS 035 _

2,5 5 725 34 9 20 26 O > 30

2 1287 62 5 50 21 O > 30

3 474 9 O O 30 O 30

2 777 22 10 50 20 O 030

g) Une diminution de la capture des acides gras libres par le myocarde. Le traitement avec YS 035 à une dose de 0,1 mg/kg par

voie intraveineuse, effectué après la ligature de l'artère co-

ronaire et trois fois dans les 48 heures à la même dose donne les résultats suivants: a) La circulation du sang dans les coronaires reste similaire à celle des groupes témoins ou, au maximum, tend à augmenter

modérément au cours de l'essai.

b) La résistance vasculaire des coronaires n'est pas seulement

réduitemais devient inférieure à celle du groupe témoin.

c) L'indice de travail du ventricule gauche est notablement plus élevé que celui chez les chiens souffrant d'infarctus,

d) Le rapport DPTI/TTI ne change pas. e) L'indice de la circulation dans l'aorte ne change pas.

f) La consommation du glucose par le myocarde ne change pas alors que la consommation d'oxygène augmente notablement et la consommation du lactate tend à revenir à une valeur normale. g) La capture des acides gras libres augmente et atteint une valeur double de la valeur de base mesurée chez des animaux

témoins en bonne santé.

La présente invention couvre également tous les aspects industriels applicables en rapport avec l'emploi des composés

de formule I dans la thérapie cardiovasculaire.

Un aspect essentiel de l'invention concerne donc des com-

positions pharmaceutiques qui contiennent, comme principe actif, ou même un composé choisi par le composé de formule

(I) et ses sels d'addition d'acides pharmaceutiquement accep-

tables qui peuvent être employés ensemble avec des excipients

classiques normalement utilisés dans les compositions phar-

maceutiques. Les composés selon l'invention peuvent être administrés par voie orale ou par voie parentérale; quand il s'agit de YS 035, la dose journalière moyenne par voie orale est comprise

entre 20 et 150 mg administrée en deux ou trois prises.

On peut poursuivre le traitement pendant une période

prolongée Dans le cas d'un état aigu, on peut également adminis-

trer la substance YS 035 par infusion lente dans les veines

à une dose comprise entre 10 et 20/wg/kg.

Comme exemples de compositions pharmaceutiques, selon l'invention, on peut mentionner: des gélules de gélatine opercules contenant 10 mg de YS 035

des compresses contenant 20 mg de YS 035 en plus des exci-

pients normalement utilisés dans les compositions pharma-

ceutiques; des ampoules stériles qui conviennent pour l'administration par voie parentérale et contenant I mg/cm 3 de chlorhydrate

de YS 035 dans de l'eau stérile apyrogène distille.

Claims (2)

REVENDICATIONS

1 Médicament, caractérisé en ce qu'il est constitué par la N-

méthyl-N-bis( 3,4-diméthoxyphényléthyl) amine répondant à la formule:

CCH 30

CH 30 " H 2-CH 2-N - CH 2 CH 2 O CH 3

0 H 3 CH 3

ou ses sels d'addition avec des acides pharmaceutiquement acceptables.

2 Composition pharmaceutique pour le traitement des maladies

cardiovasculaires et des perturbations de la circulation cérébrale, carac-

térisée en ce qu'elle contient à titre de principe actif, au moins un médi-

cament selon la revendication 1, en association avec excipient inerte.