FR2538395A1 - Produits comestibles et leur preparation - Google Patents

Abstract

Produit comestible renfermant un nouvel alpha-glycosyl ginsenoside, dans lequel un ou plusieurs résidus glucosyle sont liés en alpha à un résidu ginsenoside. On prépare cet alpha-glycosyle ginsenoside par soumission d'une solution aqueuse de ginsenoside et d'un alpha-glycosyl saccharide, à l'action d'une alpha-glucosyl transférase. Les produits obtenus possèdent toutes les propriétés du ginsenoside, sans en avoir la saveur déplaisante, c'est-à-dire amertume, astringence ou âpreté. (CF DESSIN DANS BOPI)

Description

-2538395

La présente invention concerne des produits

comestibles renfermant un nouvel alpha-glycosyl ginseno-

side, dans lequel un ou plusieurs résidus glucosyle sont liés en alpha à un résidu ginsenoside, ainsi que leurs préparations.

Le ginseng, ou ses extraits, sont utilisés de-

puis des temps reculés, comme médicament ou aliment de

santé, administré par voie interne, afin de faire profi-

ter de leurs effets stimulant, digestif, régulateur de

l'intestin, sanguin, anti-inflammatoire ou expectorant.

Ainsi qu'il est mentionné dans Yakugaku Zasshi, Vol 98,

N 8, pp 1048-1054 ( 1978), le ginseng renferme comme cons-

tituant actif un glycoside dénommé "ginsenoside" Ce ginsenoside se divise en deux classes, c'est-à-dire en gensinoside-Ro et en ginsenoside-Rx, selon la structure chimique de l'aglycone Ces structures sont reproduites ci-après: Structure chimique du ginsenoside-Ro

T A J/

COO glucose

O

I 21

acide glucuronique glucose Structure chimique du ginsenoside-Rx R 10 R R 3 Outre les gensinosides -Ro et -Rx, existent les dérivés suivants: Ginsenoside-Rb 1,6 M 1 22 i p 2 R = glucose glucose, R glucose glucose,

R = H;

Ginsenoside-Rb 2,2 1 r 6 1 611

R glucose arabinopyranose, R glucose glu-

cose, R = H; Ginsenoside-Rc, 1 i% 6 1 2 21

R =' glucose arabinofuranose, R glucose glu-

cose, R 3 = H; Ginsenoside-Rd, R 1 2 ?,2 f 11 3 R = glucose, R 2 glucose glucose, R = H; Ginsenoside-Re, R 1?' 2 3 (% 2 < 1 l R = glucose, R H, R = O glucose rhamnose; Ginsenoside-Rf, R 1 = R 2 = H, R 3 = Or glucose glucose Ginsenoside-Rg 1, i r-2 3 R = glucose, R = H, R = O glucose; et Ginsenoside-Rg 2, 3 2 ot 1

1 2 3

R 1 = R 2 = H, R 3 = O glucose rhamnose.

Ces ginsenosides sont trouvés dans un extrait obtenu par traitement d'un tissu ou organe de ginseng (par exemple Panax-ginseng C A Meyer ou Gynostemma pentaphyllum), avec un solvant comme eau ou alcool En général, ces ex- traits, ou leurs concentrés, sont utilisés comme "Extrait

de ginseng" par administration orale, y compris l'inges-

tion.

Cependant, l'extrait de ginseng présente un goût propre dé-

plaisant, tel que sensation âpre ou astringente, ainsi qu'

une amertume intense.

La présente invention permet d'éviter ces incon-

vénients de l'art antérieur: elle est basée sur la cons-

tatation-que le ginsenoside, lui-même, est responsable de

ces amertume, astringence ou âpreté, et que celles-ci pou-

vaient être pratiquement éliminées par conversion du gin-

senoside en un de ses dérivés alpha-glycosylé, qui s'hydro-

lyse facilement en ginsenoside sous l'action,in vivo, d'une

alpha-glycosidase, comme par exemple l'alpha-glucosidase.

Ainsi peut-on utiliser cet alpha-glycosyl ginsenoside à

la place du ginsenoside, sans crainte de toxicité ou d'ef-

fet médicamenteux supplémentaire.

Le nouveau dérivé de ginsenoside selon l'inven-

tion est caractérisé en ce qu'il comporte un ou plusieurs

résidus glucosyle fixés en alpha sur le résidu ginsenoside.

La présente invention se rapporte également à un procédé de préparation de ces dérivés, à l'échelle industrielle, qui consiste à soumettre à l'action d'une alpha-glucosyl

transférase, une solution aqueuse renfermant du ginsenosi-

de et un alpha-glucosyl saccharide, puis à récolter l'al-

pha-glycosyl ginsenoside résultant.

A partir de ce nouveau dérivé de ginsenoside, la demande-

resse a pu préparer des produits comestibles actifs Le ter-

me "produit comestible" tel qu'utilisé dans la présente

description, comprend outre les aliments et boissons en

général, tout produit pour lequel le goût constitue un facteur important, par exemple, liqueurs, tabac, pâtées et aliments pour animaux familiers; des cosmétiques comme gargarismes, dentifrices ou agents de fraîcheur buccale; et des médicaments comme pastille, ou ceux qui

sont destinés à l'administration interne.

Convient comme ginsenoside, conformément à l'in-

vention, tout extrait de ginseng brut, ou partiellement purifié, capable de donner un alpha-glycosyl ginsehoside,

aussi bien qu'un ginsenoside hautement purifié.

Les alpha-glycosyl saccharides, utilisables selon l'invention, sont ceux qui permettent la formation d'alpha-glycosyl ginsenoside, à partir de ginsenoside,

sous l'action d'une alpha-glucosyl transférase En consé-

quence, il est recommandé, afin de faciliter la formation

d'alpha-glycosyl ginsenoside, d'utiliser un substrat ap-

proprié, c'est-à-dire des alpha-glucosyl saccharides sen-

sibles à l'action de la transférase, y compris le sucrose ou l'hydrolysat partiel d'amidon Ainsi, par exemple, lorsqu'on utilise comme transférase l Ualpha-glucosidase (EC 3 2 1 20), il est préférable que l'alpha-glycosyl

saccharide soit un malto-oligosaccharide, y compris malto-

se, maltotriose et maltotétraose, un hydrolysat partiel d'amidon ayant un Equivalent de dextrose (ED) de l'ordre de 10-70, ou du sucrose Si on utilise de l'alpha-amylase (EC 3 2 1 1), convient un amidon gélifié ou partiellement

hydrolysé (dextrine) ayant un ED allant de 1 à 30 environ.

Dans le cas de la cyclodextrine glucanotransférase (EC 2 4.

1.19), conviennent des cyclodextrines ou un amidon gélifié ou partiellement hydrolysé, ayant un ED allant de 1 à 60

environ Enfin, le sucrose convient dans un procédé utili-

sant la dextransucrase (EC 2 4 1 5).

L'amidon gélifié ou partiellement hydrolysé, qui peut être utilisé conformément à l'invention, peut être facilement

préparé à partir d'un amidon tubéreux ou de tige souterrai-

ne, de pomme de terre ou de patate douce; ou d'un amidon de céréale provenant de blé ou de mais Dans le cas o brut

l'extrait/de ginseng renferme une grande quantité d'ami-

don, on peut ne pas ajouter, éventuellement, d'amidon gé-

lifié ou partiellement hydrolysé L'amidon gélifié peut être préparé par chauffage d'une suspension d'amidon à

une température supérieure à sa température de gélifica-

tion, en général 70 -140 C L'hydrolysat partiel d'amidon peut s'obtenir par hydrolyse d'un amidon à un niveau d'ED voulu, à l'aide d'acide ou d'amylase Naturellement, on peut utiliser en combinaison deux ou plusieurs membres

du groupe des alpha-glycosyl saccharides.

L'alpha-glucosyl transféraseutilisable selon l'invention, peut être toute transférase qui agit sur

une solution aqueuse renfermant du ginsenoside et un alpha-

glucosyl saccharide approprié, et forme l'alpha-glycosyl ginsenoside sans décomposition du ginsenoside Conviennent

avantageusement selon l'invention,par exemple: lualpha-

glucosidase (EC 3 2 1 20) provenant d'animal (comme celle du foie de porc) , de végétaux (comme celles des graines de backwheat), de fongi (comme ceux du genre Mucor ou

Penicillium), ou de levures (comme celles du genre Saccha-

romyces); l'alpha-amylase (EC 3 2 1 1) provenant de diffé-

rents microorganismes, en particulier d'une bactérie du genre Bacillus ou d'un fongus du genre Aspergillus; la cyclodextrine glucanotransférase (EC 2 4 1 19 ') provenant d'une bactérie, par exemple du genre Bacillus ou Klebsiella; la dextranesucrase (EC 2 4 1 5) provenant d'une bactérie, par exemple du genre Leuconostoc; la dextrane dextrinase (EC 2 4 1 2) provenant d'une bactérie, par exemple du genre Acetobacter; l'amylosucrase (EC 2 4 1 4) provenant d'une

bactérie par exemple du genre Neisseria.

Ces alpha-glucosyl transférases ne doivent pas être néces-

sairement purifiées avant leur utilisation, et l'on obtient

généralement l'alpha-glycosyl ginsenoside grâce à l'utili-

sation-d'une enzyme brute, pourvu que celle-ci satisfasse aux exigences énumérées plus haut Par exemple, dans le cas d'une enzyme d'origine animale ou végétale, on peut préparer une alpha-glucosyl transférase satisfaisante, par relargage avec du sulfate d'ammonium d'un extrait provenant de tissu animal ou végétal broyé, ou par pré- cipitation de l'extrait au moyen de solvant organique

comme alcool ou acétone,pour réaliser la séparation L'en-

zyme brute ainsi obtenue peut être éventuellement purifiée

selon un mode opératoire classique, avant son utilisation.

Lors de la production de l'enzyme cherchée à partir d'un

microorganisme, on effectue généralement une culture so-

lide, comme une culture sur son de blé, ou une culture

liquide du type de celles qui nécessitent un fermenteur.

La préparation d'une alpha-glycosyl transférase à l'aide d'une culture solide, peut s'effectuer par extraction,

comme dans le cas de l'enzyme d'origine animale ou végé-

tale, et l'enzyme brute obtenue peut, éventuellement, ê-

tre purifiée de manière classique avant son utilisation.

Dans le cas d'une alpha-glucosyl transférase obtenue par

culture liquide, bien que l'on puisse utiliser, selon l'in-

vention, le bouillon de culture tel quel, on se sert en général de la partie surnageante qui contient l'enzyme

cherchée, mais est exempte de substances insolubles Par-

fois, on peut utiliser une enzyme dans la cellule entière, ou après extraction de cette cellule Naturellement, on

peut utiliser,conformément à l'invention, une alpha-gluco-

syl transférase beaucoup plus purifiée, ou disponible dans le commerce En outre, la réaction enzymatique provoquée

par l'alpha-glucosyl transférase peut s'effectuer en con-

tinu ou en discontinu, avec utilisation d'une enzyme im-

mobilisée L'alpha-glucosyl ginsenoside peut être égale-

ment formé par culture d'un microorganisme, ou d'un tissu d'origine animale ou végétale, sur un milieu de culture

renfermant un alpha-glucosyl saccharide et du ginsenoside.

Les conditions de réaction favorables, sont celles qui voient l'alphaglucosyl transférase agir sur

2538395,

une solution aqueuse renfermant du ginsenoside et l'alpha-

glucoside En général, le ginsenoside et l'alpha-glucosyl saccharide sont dissous ensemble dans l'eau, de manière à

donner des concentrations pondérales respectives de l'or-

dre de 0,1 à 30 % et de 1 à 50 %, et aussi un rapport pon- déral préféré alpha-glucosyl saccharide/ginsenoside de

l'ordre de 0,5 à 300 En ce qui concerne le p H et la tem-

pérature, utilisés au cours de la réaction enzymatique,

conviennent tout p H et température dans la mesuré o l'en-

zyme agit sur le substrat donné, pour former l'alpha-gly-

cosyl ginsenoside On utilise en général un p H compris en-

tre 3 et 10 et une température allant de 20 à 80 C.

Selon les produits comestibles considérés, le mélange réactionnel obtenu, renfermant l'alpha-glycosyl

ginsenoside, peut être utilisé tel quel, ou, si nécessai-

re, après purification Par exemple, après inactivation par la chaleur de l'enzyme, accompagnée d'une filtration,

le filtrat obtenu peut être laissé en contact avec une ma-

gnésie adsorbante comme "Neucillin", "Neucillin A" ou "Columnilite" (fabriqués par Fuji Chemical Industry Inc. Ltd), "Tomix Granular" ou "Tomix-S Granular"', "Neoalumin" ou "Neoalumin S" (fabriqués par Tomita Pharmaceutical Co, Ltd), "M-511 " (fabriqué par Hokkaido Soda Co, Ltd), à la

colorées -

fois pour adsorber et éliminer les impuretés,, puis on re-

cueille le liquide non adsorbé Ce liquide peut être con-

centré pour former un sirop, ou être séché et mis en pou-

dre avant son utilisation dans des produits comestibles.

Lorsqu'une purification plus poussée est souhaitable, l Val-

pha-glycosyl ginsenoside et les impuretés peuvent être sé-

parés, du fait de leurs aptitudes différentes à être ad-

sorbés, par utilisation d'une résine synthétique macroré-

ticulaire, par exemple-, "Diaion HP-10 ", "Diaion HP-20 "

ou "Diaion HP-40 " (fabriqués par Mitsubishi Chemical Indus-

tries, Ltd), "Amberlite XAD-1 ", "Amberlite XAD-4 ", "Amber-

lite XAD-7 " ou "Amberlite XAD-8 " (fa-

briqués par Rohm & Haas Company), "Imac Syn-42 ", "Imac

2538395 '

Syn-44 " ou "Imac Syn-46 " (fabriqués par Industrie de

Maatshappily activate N V) Ainsi, lorsqu'il est souhai-

table de séparer le saccharide libre des composés de gin-

senoside, y compris l'alpha-glycosyl ginsenoside et le ginsenoside résiduaire, on applique d'abord le mélange réactionnel sur lamagnésie adsorbante décrite plus haut,

afin d'éliminer les impuretés colorées, puis sur une co-

lonne de résine synthétique macroréticulaire, o les dits

composés sont adsorbés tandis que ie saccharide est élué.

Les composés de ginsenoside adsorbés sont élués de la colonne par introduction dans celle-ci d'une solution

d'alcool inférieur, par exemple une solution aqueuse d'é-

thanol à 40 % en volume/volume, et l'on concentre en un si-

rop, qui peut être séché et mis en poudre.

De plus, une préparation d'alpha-glycosyl ginsenoside de plus grande pureté peut être recueillie à partir de la

portion non adsorbée, lors du passage d'une solution con-

tenant l'alpha-glycosyl ginsenoside et le ginsenoside ré-

siduaire, sur une colonne de résine synthétique macroréti-

culaire qui adsorbe de manière sélective le ginsenoside.

Cette préparation peut, éventuellement, être à nouveau purifiée, et désionisée avec une résine échangeuse d'ions, par exemple une résine échangeuse d'ions fortement acide

(forme-OH) ou une résine échangeuse d'ions faiblement anio-

nique (forme-H), ou être chromatographiée, avant son uti-

lisation.

Comme, contrairement au ginsenoside, l'alpha-gly-

cosyl ginsenoside obtenu de cette manière est presque

exempt de saveurs déplaisantes, c'est-à-dire amertume, as-

tringence ou âpreté, il peut être utilisé comme produit

comestible isolément ou en combinaison avec d'autres cons-

tituants, quel que soit sa pureté ou son degré de purifica-

tion. De plus; comme cet alpha-glycosyl ginsenoside est

facilement hydrolysable en ginsenoside sous l'action d'al-

pha-glycosidase in vivo, comme l'alpha-glucosidase, il peut avantageusement remplacer celui-ci, sans qu'il y ait

à craindre une toxicité ou une action médicamenteuse au-

tre, dans les cas o sont souhaitées les propriétés pro-

pres au ginsenoside, comme effet stimulant, digestif, régulateur de l'intestin, sanguin, anti-inflammatoire

et/ou expectorant En conséquence, on peut avantageuse-

ment obtenir un produit comestible renfermant de l'alpha-

glycoside ginsenoside, destiné à améliorer, maintenir ou restaurer la santé En plus des produits alimentaires en

général, comme assaisonnement, confiseries, desserts gla-

cés, sirops, fruits ou légumes transformés, pickles ou

produits en marinade, viande ou chair de poisson trans-

formées, friandises, aliments en boîtes ou en bocaux, li-

queurs, boissons sucrées, ou similaires, le concept "pro-

duits comestibles", conformément à l'invention, s'étend à

différents produits liquides, pâteux ou solides, comme pâ-

tées et aliments pour les animaux domestiques, les pois-

-sons ou les volailles, les tabacs, les cosmétiques et les médicaments y compris dentifrice, rouge à lèvres, crème à lèvres, médicaments pour administration interne, pastilles, gouttes d'huile de foie de morue, gargarismes ou agents rafraîchissants buccaux, dans la mesure o la saveur y

tient une grande place L'effet médicinal de l'alpha-gly-

cosyl ginsenoside peut être augmenté en y incorporant une ou plusieurs substances, par exemple des médicaments, y

compris ceux qui favorisent la nutrition.

En ce qui concerne le mode opératoire selon le-

quel l'alpha-glycosyl ginsenoside est ajouté à ces produits

comestibles ou y est préparé, on peut, conformément à l'in-

vention, utiliser des modes opératoires classiques, dans la mesure o ces produits comestibles peuvent être préparés avec ou additionnés d'alphaglycosyl ginsenoside, avant

l'achèvement de leur transformation; par exemple convien-

nent brassage, pétrissage, dissolution, macération, impré-

gnation, pulvérisation, revêtement et injection.

2538395 3

L'alpha-glycosyl ginsenoside selon l'invention

est décrit ci-après avec référence à quelques expérimen-

tations.

EXPERIMENTATION 1

Préparation de l'alpha-glycosyl ginsenoside Expérimentation 1-1 Pr Eparation d'une alpha-glucosyl transférase

Une culture de germes de Bacillus stearothermophilus FERM-

P N 2222 est ensemencée dans 10 litres d'un milieu li-

quide stérilisé, comprenant en poids/volume, 2 % d'amidon

soluble, 1 % de NH 4 NO 3, 0,1 % de KH 2 P 04, 0,05 % de Mg SO 4.

7 H 20, 0,5 % de liqueur d'infusion de maïs, 1 % de Ca CO 3 et de l'eau, et l'on cultive à 50 C pendant 3 jours, sous agitation et aération Lorsque la culture est achevée,

on centrifuge le bouillon, et on ajoute à la partie surna-

geante suffisamment de sulfate d'ammonium pour obtenir une saturation de 0,7 et réaliser aussi le relargage qui

donne une préparation d'enzyme brute, d'environ 80 000 uni-

tés de cyclodextrine glucanotransférase (EC 2 o 4 1 19).

On définit l'unité d'activité de cyclodextrine glucano-

transférase, comme la quantité de cette enzyme qui élimine complètement le développement de l'iode de 15 mg d'amidon

soluble, par réaction enzymatique dans les conditions sui-

vantes: à 5 ml d'une solution d'amidon soluble à 0,3 %

poids/poids, dans un tampon acétate à 0,02 M (p H 5,5), ren-

fermant 2 x 10-3 M de chlorure de calcium, est ajouté 0,2 ml d'une solution diluée d'enzyme, et l'on fait incuber ce mélange à 40 C pendant 10 minutes Puis, on additionne

0,5 ml de ce mélange réactionnel, de 15 ml d'acide sulfuri-

que 0,02 N, afin d'arrêter la réaction enzymatique, et 1 ' on ajoute à ce mélange 0,2 ml d'une solution 0,1 N de I 2-KI, afin de réaliser le développement de l'iode Ensuite, on détermine la capacité d'absorption à une longueur d'onde

de 660 nm.

2538395 i Expérimentation 1-2 Réaction enz ymatigue On dissout ensemble, dans 500 ml d'eau chaude, 140 g de

"KORAI-NINJIN EKISU", nom commercial d'un extrait de gin-

seng fabriqué par Lotte Bussan Co, et 500 g de maltodex- trine (ED 20) Après ajustage du p H à 6, on additionne

cette solution de 5 000 unités de la cyclodextrine gluca-

notransférase brute, décrite plus haut, et l'on fait in-

cuber à 60 C pendant 24 heures, avec maintien du p H à 6,

pour que s'effectue la réaction enzymatique -Après main-

tien de ce mélange réactionnel à 95 C pendant 10 minutes,

pour inactiver l'enzyme, le produit résultant, échantil-

lon N 3 du tableau I, est filtré, concentré sous vide à une température inférieure à 70 C, et séché, pour donner une poudre qui est représentée dans le tableau I comme

l'échantillon N 4.

Les échantillons témoins N 1 et N 2 sont préparés comme plus haut, par dissolution de 100 g d'extrait de ginseng, avec ou sans 500 g de maltodextrine, dans 5 litres d'eau, avec chauffage et mise en incubation du mélange résultant,

en l'absence ou la présence de 5 000 unités de cyclodex-

trine glucanotransférase au préalable thermiquement inac-

tivée.

Les compositions respectives des échantillons sont repré-

sentées dans-le tableau I.

Voir Tableau I à la page 27.

EXPERIMENTATION 2

Essais comparatifs On prépare une solution aqueuse par dissolution dans l'eau de l'échantillon N 4, de façon à obtenir une concentration identique à celle de l'échantillon n 3 Puis on réalise un

* essai organoleptique, avec les solutions aqueuses des échan-

tillons 1 à 4, à 25 C, avec des groupes de 20 membres, et dans chaque groupe sont désignés le nombre de préparations les plus désirables et les plus indésirables, ainsi que les

2538395,'

commentaires sur les saveurs Les résultats sont indiqués

dans le tableau II.

Voir Tableau II à la page 28.

Ainsi qu'il ressort de ce tableau II, la supériorité des échantillons N 3 et N 4 sur les échantillons N 1 et N 2, quant à la saveur, est évidente Le go t ou l'arrière goût déplaisant de l'extrait classique de ginseng ou de son mélange avec des saccharides est éliminé dans le cas de l'extrait de ginseng alpha-glycosylé selon l'invention,

d'o l'avantage présenté par ce dernier lors d'une inges-

tion.

EXPERIMENTATION 3

Identification de l'alpha-glycosyl ginsenoside A une solution aqueuse, préparée par dissolution de 50 g de l'échantillon N 4 (préparé dans l'expérimentation 1-2)

dans 100 ml d'eau, on ajoute 2 g de " 4-511 ", nom commer-

cial d'une magnésie adsorbante fabriquée par Hokkaido Soda Co., Ltd, et l'on soumet ce mélange pendant 30 minutes à

une agitation douce, avant de filtrer Le filtrat est a-

lors appliqué sur une colonne de 200 ml de "Diaion HP-20 ", une résine synthétique macroréticulaire, puis on rince cette colonne avec suffisamment d'eau pour éliminer les

saccharides libres On y introduit ensuite 2 000 ml de so-

O

lution aqueuse de méthanol à 50 % volume/volume, afin dé-

luer les composés de ginsenoside, y compris l'alpha-glyco-

syl ginsenoside, puis l'éluat est concentré, séché et ré-

duit en poudre,ce qui donne environ 7 g d'une poudre dési-

gnée ci-après comme l'échantillon N 5.

L'échantillon N 5 est une substance sans odeur, facilement presque neutre, soluble dans l'eau,fen forme de poudre blanche, ayant une légère saveur amère, astringente ou âpre Cet échantillon est partiellement soluble dans un alcool inférieur comme méthanol, éthanol ou n-butanol, mais difficilement dans le

chloroforme ou l'éther Un spectre infra-rouge de cet é-

chantillon, selon le procédé de la pastille de K Br, est re-

2538395 1 '

présenté dans la figure annexée.

On soumet une petite quantité de l'échantillon n 5, dans un minimum d'eau, à l'action à 50 C, d'une glucoamylase

(EC 3 2 1 3) cristallisée du commerce, dans du tampon acé-

tate 0,02 M (p H 5), afin de réaliser la réaction enzymati-

que Au cours de la réaction,de petites quantités de mé-

lange réactionnel sont périodiquement prélevées, et dépo-

sées sur "Kieselgel 60 ", nom commercial d'une plaque en couche mince, fabriquée par Merck & Co, Inc, et l'on fait un développement ascendant à l'aide d'un mélange solvant de n-butanol, acétate d'éthyle et eau, dans la proportion de 4/1/5 Apres séchage de la plaque en couche mince, on y pulvérise une solution à 1 % de Ce( 504)2 dans de l'acide sulfurique à 10 %, et on laisse développer à

100 C, pendant 10 minutes, avec séchage par la chaleur.

Du D-glucose, et un ginsenoside purifié, utilisé comme

témoin, obtenu à partir de l'échantillon N 1 comme l'é-

chantillon n 5 avait été obtenu à partir de l'échantillon

N 4, sont déposés et développés sur la même plaque en cou-

che mince.

On constate que, tandis qu'une série de taches à Rf 0,84, 0,67, 0,52, 0, 41, 0,33, 0,29, 0,22, 0,19 et 0,11, qui correspondent aux ginsenoside-Ro, -Rb 1,-Rb 2, -Rc, -Rd, -Re,-Rf, -Rg 1 et Rg 2 se retrouvent dans le chromatogramme du ginsenoside, dans celui de l'échantillon N 5 on retrouve une tache relativement grande, nouvellement formée, à Rf proche de 0,36, une petite tache à Rf proche de 0,24, et un inséparable s'étalant de l'origine à Rf proche de 0,24, en plus de plusieurs petites ou non distingables taches correspondant à ginsenoside-Rb 1, -Rb 2 et -Re Les taches nouvellement formées et l'étalement apparaissent également

de couleur rouge pourpre comme le ginsenoside.

On peut donc en conclure que l'échantillon N 5 est un mélan-

ge d'une petite quantité de ginsenoside résiduaire et d'une série de nouvelles substances correspondant à unetache de 2538395 j; Rf proche de 0,36, une tache de Rf proche de 0,24, et à un inséparable s'étalant de l'origine à Rf proche de

0,24, qui sont formées par l'alpha-glucosyl transférase.

L'échantillon N 5 est soumis à l'action de la glucoamylase, et l'on prélève périodiquement des échantillons du mélan-

ge réactionnel que l'on chromatographie comme plus haut.

On constate que la série de nouvelles substances corres-

pondant aux nouvelles taches et au résidu, sont peu à peu hydrolysées au cours de la réaction et donnent finalement

une série de taches rouge pourpre correspondantaux ginseno-

side-Ro, -Rb 1, -Rb 2, -Rc, -Rd, -Re, -Rf, -Rg 1, et -Rg 2, et une tache brune à Rf proche de 0,13 correspondant au

D-glucose L'hydrolysat résultant présente une saveur as-

tringente, amer et âpre, similaire à celle du ginsenoside.

Séparément, l'échantillon N 5 est soumis à l'action d'une alphaglucosidase partiellement purifiée, provenant d'un extrait de foie de porc, et le mélange réactionnel est

chromatographié Les résultats confirment que les nouvel-

les substances dans l'échantillon N 5 sont facilement hy-

drolysables par l'enzyme, en ginsenoside et D-glucose, com-

me dans le cas oh l'on utilise la glucoamylase.

De ces résultats expérimentaux, on peut conclure que les

nouvelles substances, formées par l Valpha-glucosyl transfé-

rase, comprennent un ou plusieurs résidus D-glucose, liés en alpha au résidu ginsenoside Cela suggère que lors de son ingestion, l'alphaglycosyl ginsenoside s'hydrolyse

facilement in vivo en ginsenoside et D-glucose.

L'échantillon N 5, contrairement au ginsenoside, est à

peine amer, astringent ou âpre, et ressemble aux échantil-

lons N 3 et N 4.

On peut conclure de ce qui précède que l'on aboutit, confor-

mément à l'invention, à l'élimination de la saveur déplai-

sante du ginsenoside, en soumettant une solution aqueuse

renfermant cette substance et de l'alpha-glucosyl sacchari-

de, à l'action d'une alpha-glucosyl -transférase, qui forme

2538395 1

un alpha-glycosyl ginsenoside.

Laprésente invention est plus clairement illus-

trée par les exemples non limitatifs suivants.

EXEMPLE 1

Sirop renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside Une culture de germes de Mucor javanicus IFO 4570 est ensemencée dans 5 litres d'un milieu de culture stérilisé, comprenant en poids/volume 4 % de maltose, 0,1 % de KH 2 PO 4, 0,1 % de NH 4 N 03, 0,1 % de Na NO 3, 0,05 % de Mg SO 4 7 H 20, 0, 05 %

de K Cl, 0,2 % de polypeptone, de l'eau et 1 % de Ca CO 3 (sté-

rilisé séparément et ajouté),et l'on cultive à 30 C pen-

dant 44 heures, sous aération et agitation 480 g de cel-

lules humides, obtenues à partir du bouillon de culture, sont additionnées de 5 litres de solution d'urée 4 M dans du tampon acétate 0, 5 M (p H 5,3),et on laisse reposer à

C pendant 40 heures Puis on dialyse la partie surna-

geante contre de l'eau courante du robinet, une nuit du-

rant, on ajoute du sulfate d'ammonium pour amener la satu- ration à 0,9 et on laisse reposer une nuit durant à 4 C.

Après centrifugation, le précipité résultant est mis en suspension dans 100 ml de tampon acétate (p H 6), et l'on centrifuge pour obtenir une partie surnageante qui est

une solution d'alpha-glucosidase (EC 3 2 1 20).

On dissout dans 500 ml d'eau chaude, 60 g de "Korai-Ninjin Ekisu" qui est un extrait de ginseng du commerce fabriqué par Kanebo Pharmaceuticals Ltd, et 300 g de maltodextrine,

et la solution résultante est ajustée à 50 C et p H 6, ad-

ditionnée de la solution d'alpha-glucosidase, et mise à in-

cuber pendant 24 heures afin que s'effectue la réaction

enzymatique.

Le mélange réactionnel est chauffé pour inactiver l'enzyme,

puis on filtre Le filtrat résultant est alors appliqué d'a-

bord sur une colonne, chargée de 5 g de "Columnlite", afin d'éliminer les impuretés colorées, puis sur une colonne de résines échangeuses d'ions, "Amberlite IR-120 B (forme-H)"

2538395 '

et "Amberlite IRA-94 (forme -OH)", pour effectuer la dé-

sionisation, et ensuite on concentre sous vide pour obte-

nir un sirop renfermant l'alpha-glycosyl ginsenoside ayant

une teneur en humidité de 20 % Le rendement total, rap-

porté au solide sec, est de l'ordre de 95 %. Ce sirop est pratiquement exempt de saveur déplaisante, mais a une douceur sucrée Aussi, peut-il être ingéré tel

quel, ou utilisé dans un produit comestible.

EXEMPLE 2

Poudre renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside Une culture de germes de Bacillus megaterium FERM-P N 935 est ensemencée dans 5 litres d'un milieu de culture frais ayant une composition identique à celle qui est utilisée au cours de l'expérimentation 1-1, et on cultive à 28 C

pendant 3 jours, sous aération et agitation Lorsque l'o-

pération est achevée, le bouillon de culture est centrifugé, et la partie surnageante est additionnée de suffisamment de sulfate d'ammonium pour avoir une saturation de 0,7, puis

une nouvelle centrifugation permet de recueillir un préci-

pité renfermant 3 x 105 unités d'activité de cyclodextrine glucanotransférase, définies comme dans l'expérimentation 1-1.

On dissout avec chauffage, dans 500 ml d'eau, 60 g de "Ko-

rai-Ninjin Ekisu", un extrait de ginseng du commerce, et 180 g de bétacyclodextrine La solution résultante est

refroidie à 50 C, ajustée à p H 5,5, additionnée de 15 uni-

tés de cyclodextrine glucanotransférase par gramme de

Ä-cyclodextrine, et mise à incuber à 50 C et p H 5,5, pen-

dant 24 heures, pour que s'effectue la réaction enzymati-

que, puis on inactive l'enzyme par la chaleur On filtre

le mélange réaqtionnel, et le filtrat résultant est appli-

qué sur une colonne, chargée de 3 litres d'"Amberlite XAD-

7 " une résine macroréticulaire du commerce Cette colonne est d'abord rincée avec suffisamment d'eau pour enlever les saccharides libres, puis est chargée avec 10 litres

2538395 7

d'une solution aqueuse d'éthanol à 50 % volume/volume L'é-

luat est concentré et séché pour donner environ 21 g de

poudre renfermant l'alpha-glycosyl ginsenoside.

Cette poudre est chromatographiée à l'aide d'une plaque en couche mince, comme l'échantillon N 5 de l'expérimen- tation 3 On observe une petite tache de ginsenoside-Rb 2 à Rf 0,52 et un inséparable de l'origine à Rf proche de

0,10 Ces tacheset inséparable apparaissent rouge pour-

pre. Séparément, la poudre est d'abord soumise à l'action de

la glucoamylase, puis on la chromatographie comme l'échan-

tillon N 5 Il se confirme que, au cours de la réaction enzymatique, la poudre sghydrolyse peu à peu pour donner une série de taches rouge pourpre et une tache brune, qui correspondent respectivement aux ginsenoside-Ro, -Rb 1,

-Rb 2, -Rc, -Rd, -Re, -Rf, -Rgl, -Rg 2 et au D-glucose.

Cette poudre est dénuée de saveur déplaisante comme amer-

tume, astringence ou âpreté Elle peut donc être ingérée

tel quel, ou éventuellement être assaisonnée avec un édul-

corant ou un acides avant d'être utilisée.

On chromatographie cette poudre sur une colonne de gel de silice en utilisant un mélange dans la proportion 4/1/5 de n-butanol, acétate d'éthyle et eau, comme solvant de

développement, et la fraction de nouvelle substance s'éta-

lant de l'origine à Rf 0,10, est recueillie et séchée pour donner une poudre Cette substances facilement soluble dans

l'eau, est presque neutre et ne présente que faible amer-

tume, astringence ou âpreté Elle est partiellement solu-

ble dans un alcool inférieur comme méthanol, éthanol ou n-butanol, mais à peine soluble dans le chloroforme ou l' éther.

EXEMPLE 3

Sirop renfermant de l'alpha-glycosy I ginsenoside

On hache 1 kg de ginseng "Hakujin" sec, on y ajoute 5 li-

tres de solution aqueuse de méthanol à 40 % en volume/volume,

2538395 1

18. et on laisse macérer toute la nuit pour que s'effectue l'extraction Après filtration pour séparer l'extrait du résidu, on extrait à nouveau ce dernier avec une quantité identique de solution aqueuse fraîche de méthanol à 40 % en volume/volume, comme précédemment, puis on recueille

un nouvel extrait.

Ces deux extraits sont rassemblés et concentrés sous vide

au dessous de 500 C, afin de faire évaporer le méthanol.

On dissout ensemble dans 300 ml d'eau, 60 g du concentré obtenu et 200 g de maltodextrine (ED 30), on y ajoute 10 unités de cyclodextrine glucanotransférase par gramme de maltodextrine, et on met à incuber pendant 24 heures,

à p H 5,5 et 60 C, pour que s'effectue la réaction enzyma-

tique; après quoi, l'enzyme est inactivée par la chaleur.

Le mélange réactionnel est filtré, et le filtrat après concentration donne environ 300 g de sirop renfermant

l'alpha-glycosyl ginsenosideï à teneur en humidité de 20 %.

Ce sirop est pratiquement dénué de saveurs déplaisantes

comme amertume, astringence ou âpreté, et possède une dou-

ceur sucrée Aussi peut-on l'ingérer tel quel ou l'utiliser

dans un produit comestible.

EXEMPLE 4

Sirop renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside 1 kg de "Kohjin", ginseng sec, est haché et additionné

de 5 litres de solution aqueuse de méthanol à 30 % en volu-

me/volume; on laisse macérer toute une nuit à température ambiante afin que s'effectue l'extraction, puis'on filtre pour recueillir un extrait Le résidu est additionné avec une même quantité de solution aqueuse fraîche d'éthanol à 30 % en volume/volume et on opère comme précédemment pour

obtenir un nouvel extrait.

Ces extraits sont rassemblés, mis en contact avec une ma-

gnésie adsorbante afin d'éliminer les impuretés colorées, désionisés et purifiés avec une résine échangeuse d'ions, puis concentrés sous vide pour donner 50 g de concentré, 2538395-i

comme dans l'exemple 1.

Une culture à 1 % de germes de Leuconostoc mesenteroides

IAM 1151 est ensemencée dans 10 litres d'un milieu de cul-

ture comprenant 50 g de ce concentré, 40 g de sucrose, 5 g d'extrait de levure, 8 g de KH 2 PQ 4, 24 g de K 2 HPO 4, 0,2 g de Mg SO 4 7 H 20 et de l'eau, et on cultive à 25 C pendant 24 heures Après centrifugation du bouillon de culture, la partie surnageante est additionnée de 10 g de "M511 " (magnésie adsorbante), et l'on agite pendant 15 minutes avant de filtrer pour éliminer les impuretés colorées Le filtrat est alors désionisé par application sur des résines échangeuses d'ions, "Afàberlite IR-200 C"

(forme-H) et "Amberlite IRA-93 (forme-OH), et l'on con-

centre sous vide pour obtenir 70 g de sirop renfermant

l'alpha-glycosyl ginsenoside à teneur en humidité de 30 %.

Ce sirop est pratiquement-dénué de saveurs déplaisantes -

comme amertume, âpreté ou astringence Aussi peut-il être

ingéré tel quel, ou utilisé dans des produits comestibles.

Une autre portion de la culture de germes est ensemencée et cultivée sur un milieu frais de même composition que

plus haut, sauf pour le concentré qui est omis Après cen-

trifugation du bouillon de culture, la partie surnageante est additionnée de gel de H Ca PO 4, dialysée, et soumise à

un 4 centrifugation Le gel recueilli est alors misen sus-

pension dans une solution 0,2 M de Na 2 HPO 4 (saturation 0,35, sulfate d'ammonium) afin d'effectuer l'élution, et

la concentration de cet éluat donne 100 ml de solution con-

tenant de la dextranesucrase (EC 2 4 1 5) Cette solution est additionnée de 100 ml de solution aqueuse renfermant 30 g de sucrose et 20 g d'extrait de ginseng concentre, obtenu comme plus haut La solution résultante est soumise

à une réaction enzymatique à p H 5,3 et 30 C pendant 16 heu-

res, puis est purifiée et concentrée pour donner environ g d'un sirop renfermant l'alpha-glycosyl ginsenoside Ce

sirop a des propriétés similaires à celles des sirops dé-

crits plus haut.

Le constituant alpha-glycosyl ginsenoside de ce sirop est peu à peu hydrolysé par l'isomaltodextranase (EC 3 2 1 94) en ginsenoside et isomaltose Cela suggère que l'un au moins des résidus D-glucose est lié au résidu ginsenoside

en alpha-1,6.

EXEMPLE 5

Poudre renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside

On ajoute à 1 litre d'eau, 300 g d'amidon'de pomme de ter-

re et 60 g d'un extrait concentré de ginseng, préparé par le procédé de l'exemple 3, et la solution résultante est

ajustée à p H 6 et est additionnée d'une alpha-amylase li-

quéfiante du commerce (EC 3 2 1,1) d'origine bactérienne, fabriquée par Seikagaku Kogyo Co Ltd, à raison de 10 unités par gramme d'amidon, exprimées en unités définies comme dans l'expérimentation 1-1, et on liquéfie par chauffage à 80 C, sous agitation Lorsque la liquéfaction est terminée, le produit résultant est refroidi à 60 C,

puis est soumis à nouveau à une réaction enzymatique pen-

dant 2 jours supplémentaires Puis, comme dans l'exemple 1, le mélange réactionnel est chauffé pour inactiver 1 ' alpha-amylase, il est filtré, purifié avec une magnésie adsorbante et des résines échangeuses d'ions, concentré

sous vide, séché et réduit en une poudre qui renferme 11 al-

pha-glycosyl ginsenoside Le-rendement global est de l'or-

dre de 97 %, rapporté au solide sec.

Cette poudre est pratiquement dénuée de saveurs déplaisan-

tes comme âpreté, amertume ou astringence, mais elle pos-

sède une douceur sucrée Aussi peut-elle être ingérée tel

quel ou utilisée dans un produit comestible.

EXEMPLE 6

Edulcorant On mélange 1 kg de "Funmatsu Mabit", poudre cristalline de maltitol, fabriquée par Hayashibara Shoji, Inc, avec 30 g de " k-G-Sweet", un alpha-glycosyl stevioside fabriqué

par Toyo Sugar Refining CO, Ltd, et 20 g de sirop ren-

fermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside, préparé par le procédé de l'exemple 1 Le mélange résultant est placé dans un moule et formé par application d'une pression un peu forte, puis on démoule pour obtenir des cubes de 3 g

environ d'édulcorant.

Cet édulcorant renferme de l'alpha-glycosyl ginsenoside, et peut être avantageuseement utilisé pour sucrer café,

thé, ou boisson sucrée et leur communiquer les effets pro-

pres du ginsenoside mentionnés plus haut Ce produit est aussi un édulcorant faiblement cariogène et à bas pouvoir calorique.

EXEMPLE 7

Edulcorant Dans 20 ml d'eau, on dissout 50 g de poudre renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside, préparé comme dans l'exemple

2 On mélange à cette solution 1 kg de miel.

L'édulcorant ainsi obtenu peut être ingéré tel quel, ou être utilisé pour sucrer des aliments ou boisson de santé,

aussi bien que pour améliorer la saveur d'herbes médicina-

les.

EXEMPLE 8

Bonbons durs On dissout avec chauffage, dans 5 litres d'eau, 6 kg de sucrose, 3 kg de "Sunmalt", poudre de maltose cristalline fabriquée par Hayashibara Company Ltd, et 1 kg de sirop renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside préparé par le procédé décrit dans l'exemple 3, puis on porte la solution résultante à ébullition jusqu'à 145 -150 C, et on concentre

sous vide avec chauffage pour obtenir une teneur en humidi-

té inférieure à 2 % Le concentré résultant est mélangé avec g d'acide citrique et de petites quantités de parfum de

citron et d'agent colorant, puis on façonne de manière ha-

bituelle pour obtenir le produit annonce Ce produit peut

être avantageusement utilisé comme bonbons durs qui pré-

sentent les effets propres au ginsenoside, c'est-à-dire un 2538395 i

effet stimulant, anti-inflammatoire ou expectorant.

EXEMPLE 9

Gomme à mâcher Après ramollissement par la chaleur, 2 kg de gomme de base sont mélangés avec 7 kg de "Funmatsu Mabit", 20 g

de " O L-G-Sweet", 300 g d'une poudre renfermant de l'al-

pha-glycosyl ginsenoside préparée par le procédé décrit dans l'exemple 5, et de petites quantités de menthol et d'

agent colorant Ce mélange est alors pétri avec un cylin-

dre et façonné de manière habituelle pour donner le pro-

duit annoncé.

Comme ce produit a un pouvoir édulcorant et une texture excellents, il peut être avantageusement utilisé comme chewing-gum présentant les effets propres au ginsenoside, c'

est-à-dire effets stimulant, anti-inflammatoire, expecto-

rant, ou similaire Ce produit convient également comme

chewing-gum faiblement cariogène et à bas pouvoir calori-

que.

EXEMPLE 10

Chocolat Une composition comprenant: 40 kg de pâte de cacao, 10 kg de beurre de cacao, 15 kg de sucre en poudre, 15 krg de lait

entier en poudre, et 500 g de poudre renfermant de l'alpha-

glycosyl ginsenoside, préparée par le procédé décrit dans l'exemple 2, est brassée et placée dans un raffineur afin

de réduire la dimension des particules Le tout est ensui-

te transféré dans une conque, additionné de 500 g de léci-

thine, et l'on pétrit à 50 C pendant 2 jours Puis le con-

tenu est placé dans un appareil à façonner et y est soli-

difié pour donner le produit annoncé.

Ce produit, de texture et parfum excellents, ne présente

pas de loupes de graisse ou de sucre au cours de l'entrepo-

sage. Il peut être utilisé comme chocolat présentant les effets

propres au ginsenoside.

*2538395 P

EXEMPLE 11

Boisson au lait aigre kg de lait écrémé sont pasteurisés à 80 C pendant 20

minutes, refroidis à 40 C et additionnés de 300 g d'a-

morce, puis on laisse incuber pendant 10 heures à 35 - 37 C Le produit résultant est homogénéisé, additionné de 9,6 kg de sucrose, et de 400 g d'un sirop renfermant de

l'alpha-glycosyl ginsenoside, préparé par le procédé dé-

crit dans l'exemple 4 utilisant la dextranesucrase, puis l'on pétrit suffisamment à 80 -85 C sous agitation, afin

d'effectuer la pasteurisation.

Ce mélange est refroidi, mélangé avec une petite quantité

de parfum, et mis en bouteille.

Ce produit convient comme boisson revigorante, au lait

aigre.

EXEMPLE 12

Boisson gazeuse Dans 8 litres d'eau sont dissous, sous agitation, 1,97 kg

de solution de sucre isomérisé du commerce (degré de con-

version 55 %), 12,5 g de sirop renfermant de l'alpha-glyco-

syl ginsenoside préparé par le procédé décrit dans l'exem-

ple 3, 23 g d'acide citrique, 0,2 g de sulfate de vita-

mine Bl et 0,5 g de vitamine B 6, et la solution résultante est gazéifiée avec 2 volumes de CO 2, à l'aide d'un appareil

ad hoc, de manière habituelle.

Ce produit peut être utilisé comme boisson stimulante.

EXEMPLE 13

Gelée 300 g d'extrait de prune (teneur en-humidité 30 %), 2 kg de sucrose, 2 kg de glucoses 2 kg de sirop de mais (teneur en humidité 25 %), 16 g de sirop renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside, préparé par le procédé de l'exemple 3, et 2,13 litres d'eau, sont mélangés, et ce mélange est porté à ébullition sous agitation, afin d'aboutir à une teneur en humidité de 20 % Le produit résultant est additionné d'une

2538395 1

solution aqueuse chaude à 5 % en poids ( 60 C), renfermant

en dissolution 350 g de "Yellow Ribbon", une pectine for-

tement méthoxylée, fabriquée par Yukijirushi Shokuhin KK; on fait bouillir par chauffage jusqu'à ce que la teneur en humidité atteigne 22- 23 %, on ajoute 200 g de solution aqueuse d'acide citrique à 50 % poids/poids sous agitation

énergique, on verse dans un moule à une température supé-

rieure à 90 C, et on laisse solidifier à température am-

biante pendant 8 heures On démoule, sèche par ventilation

d'air à 40 C et e mballe.

Ce produit est une excellente gelée piquante et stimulante.

EXEMPLE 14

Gelée On mélange à chaud une composition comprenant 1,5 kg de sucrose, 30 g de citrate de sodium, 110 g de "GF 10 ", un stabilisant fabriqué par Nitta Gelatine Co, Ltd, 12,5 g

de sirop renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside, pré-

paré par le procédé de l'exemple 3, et 7,3 litesd'eau Le mélange résultant est maintenu à 80 C pendant 10 minutes,

puis on y ajoute 1 kg d'extrait de prune (teneur en humi-

dité 30 %) et 30 g d'acide citrique" dissous dans un minimum

d'eau, sous agitation Le tout est introduit dans un réci-

pient à 60 -70 C, stérilisé à 90 C pendant 30 minutes, et

refroidi pour donner le produit annoncé.

Ce produit est une gelée sucrée de saveur rafraîchissante.

on

Elle peut être utilisée comme gelée stimulante.

EXEMPLE 15

"Tsukudani" 250 g d'algues sont traités pour enlever le sable, mis à macérer dans une solution acide, et coupés en carrés de manière habituelle Puis on fait macérer ces algues dans une solution mixte comprenant 212 ml de sauce de soja, 318 ml de solution d'amino-acides, 30 g de sucrose, 20 g de sirop de mais, 1 g de pullulane et 10 g de sirop renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside, préparé selon le procédé 2538395 i

décrit dans l'expérimentation 1-2 pour l'échantillon N 04.

Au cours de l'ébullition qui suit, ce mélange est addi-

tionné de 12 g de glutamate monosodique, 8 g de caramel et 21 ml de "Mirin", une ligueur typiquement japonaise, et on porte à ébullition jusqu'à obtention de "Tsukudani", une

conserve typiquement japonaise.

Ce produit est appétissant, avec d'excellents coloration,

aspect, éclat, parfum et saveur Il peut être utilisé com-

me Tsukudani revigorant.

EXEMPLE 16

Echalote marinée kg d'échalotes brutes sont mis à macérer dans 2,5 litres de solution aqueuse à environ 20 % de chlorure de sodium,

pendant 3 semaines Après élimination de l'eau par écoule-

ment, les échalotes sont mises à mariner pendant 1 mois dans une solution d'acide acétique comprenant 2 litres d' eau, 80 ml d'acide acétique glacial et 80 g de chlorure

de sodium Puis on fait macérer pendant 10 jours ces écha-

lotes dans une solution d'assaisonnement, comprenant 800

ml de vinaigre, 40 ml de "Mirin", 10 g de poivre de Cayen-

ne et 5 g de poudre renfermant de l'alpha-glycosyl ginseno-

side, préparé par le procédé décrit dans l'exemple 2, et

l'on obtient ainsi de l'échalote marinée d'excellent par-

fum, qui peut servir d'aliment revigorant.

EXEMPLE 17

Comprimés Un mélange comprenant 100 g de "Sunmalt", un maltose en poudre, 10 g d'amidon de mais et une poudre renfermant de l'alpha-glycosyl ginsenoside, préparé par le procédé de l'exemple 5, est soigneusement pétri Puis on le façonne, à l'aide d'une machine à fabriquer des comprimés, munie de emporte-pièces de 12 mm de diamètre, en comprimés de 680

mg chacun,épais de 5,25 mm et d'une dureté de 8-1 kg.

Ce produit, facilement ad ninistrable, présente les effets

du ginsenoside mentionnés précédemment.

2538395 1-

EXEMPLE 18

Dentifrice On prépare un dentifrice par pétrissage d'une composition comprenant 45 % de Ca HPO 4, 2,75 % de pullulane, 1,5 % de sulfate de lauryle sodique, 18 % de glycérine, 0,5 % de monolaurate de polyoxyéthylène sorbitane, 0,05 % d'agent antiseptique, 0,2 % de "o -GSweet", un alpha-glycosyl stevioside, 2 % de poudre renfermant de l'alphaglycosyl ginsenoside, préparé par le procédé de l'exemple 2, et

30 % d'eau, de manière habituelle.

Ce produit peut être utilisé comme dentifrice qui présente

des effets anti-inflammatoire ou expectorant.

Il est bien entendu que la description détaillée

et les exemples particuliers indiquant des formes de réa-

lisation préférées de l'invention, ne sont données qu'à

titre d'illustration; différents changements et modifi-

cations possibles apparaitront à l'homme de l'art en par-

tant de cette description détaillée, sans sortir du cadre

de l'invention.

TABLEAU I

Echantillon N 1 * N 2 * N 3 ** N 14 ** g 100 g 100 g 100 g d'extrait de d'extrait de d'extrait de d'extrait de Ginseng Ginseng Ginseng Ginseng

+ + +

500 g 500 g 500 g Maltodextrine Maltodextrine Maltodextrine Composition + + +

5000 5000 5000

unités de l'en unités d'en unités d'en-

zyme, thermi zyme active zy me active quement inactivée

au préalable.

t', -j

Note: *),témoin et **),échantillons selon l'invention.

ro tn LQ Co Ln

TABLEAU II

Appréciation Echantillon Echantillon Echantillon Echantillon NO 1 * N 02 * No 3 ** No 4 ** Plus désirable O O O 10 10 Plus indésirable 11 9 O O Saveur Forte amertume, astringence et Presque exempts d'amertume, âpreté, persistent à donner d'astringence ou d'âpreté,

un arrière goût indésirable d'o,pas d'arrière-goût in-

désirable.

Note: *) Témoin, **) Echantillon selon l'invention.

ri tn w Co w e L %"

Claims (7)

Revendications

1 Dérivé de ginsenoside caractérisé en ce qu'ii comporte un ou plusieurs résidus glucosyle fixés en

alpha sur le résidu ginsenoside.

2 Procédé de préparation d'un produit selon la re-

vendication 1, caractérisé en ce qu'on soumet à l'action d'une alphaglucosyl transférase, une solution aqueuse renfermant du ginsenoside et un alpha-glucosyl saccharide,

puis on récolte l'alpha-glucosyl ginsenoside résultant.

3 Procédé selon la revendication 2, caractérisé en

ce que l'alpha-glucosyl transférase est notamment alpha-

glucosidase, alpha-amylase, cyclodextrine glucanotransfé-

rase, dextranesucrase, dextrane dextrinase ou amylosucra-

se.

4 Procédé selon une des revendications 2 ou 3, carac-

térisé en ce que l'alpha-glucosyl saccharide est notamment maltooligosaccharide, amidon liquéfié, hydrolysat partiel

d'amidon, ou sucrose.

Procédé selon une des revendications 2 à 4, carac-

térisé en ce que la solution aqueuse contient, en poids, de 0,1 à 30 % de ginsenoside et de 1 à 50 % d'alpha-glucosyl saccharide.

6 Procédé selon une des revendications 2 à 5, carac-

térisé en ce que dans la solution aqueuse le rapport pondé-

ral ginsenoside/alpha-glucosyl saccharide est compris dans

l'intervalle de 0,5 à 300.

7 Procédé selon une des revendications 2 à 6, carac-

térisé en ce que l'on fait agir l'alpha-glucosyl transfé-

rase à un p H de 3 à 10, et à une température comprise entre

et 80 C.

8 Composition utilisable oralement, caractérisée en ce qu'elle renferme l'alpha-glycosyl ginse Inoside selon la

revendication 1.