FI97055B

FI97055B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten /(1-aryylipyrrolidin-2-yyli)metyyli/piperatsiinijohdannaisten valmistamiseksi

Info

Publication number: FI97055B
Application number: FI912733A
Authority: FI
Inventors: Pascal George; Dennis Bigg; Jacques Menin; Jean-Pierre Merly; Daniel Obitz; Michel Peynot; Corinne Veronique
Original assignee: Synthelabo
Priority date: 1990-06-07
Filing date: 1991-06-06
Publication date: 1996-06-28
Also published as: NO177931C; EP0461012B1; PT97885B; IE64688B1; NZ238431A; CA2043981A1; PT97885A; KR920000751A; AU7819691A; DE69101740T2; DE69101740D1; IL98372A; FI97055C; KR100188902B1; HU911895D0; ES2054460T3; US5192763A; NO177931B; JPH04235958A; PL165187B1

Description

χ 97055

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten [(1-aryylipyr-roi1din-2-yy11)metyyl1]piperats1inijohdannaisten valmistamiseksi 5 Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten, kaavan (I) mukaisten [(1-aryylipyrroli-din-2-yyli)metyyli]piperatsiinijohdannaisten valmistamiseksi raseemisina seoksina tai enantiomeereinä, 1° N _ (I)

0'— N Z

15 jossa Z esittää kaavan N-Rx mukaista ryhmää, jossa R2 on vetyatomi, (C1.3)-alkyyliryhmä tai kaavan Ar-CnH2n mukainen ryhmä, jossa n esittää lukua 0, 1 tai 2 ja Ar esittää fe-nyyliryhmää, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla halogeeniatomilla ja/tai (C^jJ-alkyyli- tai 20 (Ci.3 )-alkoksiradikaalilla, tai kaavan C0R2 mukaista ryhmää, jossa R2 esittää CH3-, C6H5-, CH2C6H5- tai OC2H5-ryhmää, sekä niiden additiosuolojen valmistamiseksi farmaseuttisesti hyväksyttävien happojen kanssa.

Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat raseemisina seok-25 sinä tai enantiomeereinä, jotka ovat osa keksintöä.

• » I

*· *| Farmaseuttisesti hyväksyttävien happojen kanssa ‘ ’ muodostuvat kaavan 1 mukaisten yhdisteiden suolat ovat osa • · · * keksintöä.

Parhaita keksinnön mukaisia yhdisteitä ovat kaavan : 30 (I) mukaiset yhdisteet, joissa Z esittää radikaalia • I * N-(CH2)2-Ar, jossa Ar esittää fenyyliryhmää, joka on mah-. dollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla fluori- tai ’ kloorlatomilla ja/tai yhdellä tai useammalla metyyli- tai metoksiradikaalilla.

97055 2

Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa sivulla 18 annetun reaktiokaavion mukaisesti. Keksinnön mukaan - joko kaavan (II) mukainen proliinin esterijohdannainen 5 saatetaan reagoimaan inertissä liuottimessa, kuten toluee- nissa, 80 - 110 °C:n lämpötilassa kaavan (III) mukaisen trimetyylialumiiniamiinikompleksin kanssa, joka on valmistettu etukäteen ja joka on inertissä liuottimessa, kuten tolueenissa, lämpötilassa, joka on -20 eC:n ja 20 °C:n 10 välillä, jolloin saadaan kaavan (IV) mukaista yhdistettä - tai proliini (V) saatetaan reagoimaan halogenidin C6H5Hal kanssa joko Cu++-suolan läsnä ollessa CuO:n muodossa tai metallisen kuparin läsnä ollessa emäksisessä liuoksessa, esimerkiksi K2C03-liuoksessa aproottisessa liuottimessa, 15 kuten DMF:ssä tai N-metyylipyrrolidonissa 100 - 150 °C:n lämpötilassa olosuhteiden mukaisesti, joita on kuvattu Ullmanin reaktiossa [Synthesis 9(1974)], jolloin saadaan kaavan (VI) mukaista happoa; sitten suoritetaan hapon (VI) muutos amidiksi (IV) klassisella tavalla käsittelemällä 20 happoa (VI) karbonyylidi-imidiatsolilla liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa (THF) tai metyleenikloridissa (CH2C12) lämpötilassa, joka on 20 - 40 °C imidatsolidiväli-tuotteen muodostamiseksi, jota käsitellään in situ kaavan (III) mukaisella amiinilla, jossa Z merkitsee samaa kuin . 25 edellä.

*· *| Lopuksi saatu kaavan (IV) mukainen amidi pelkiste tään litium- ja alumiinihydridin avulla eetteriliuottimes- • · « V * sa, kuten eetterissä tai tetrahydrofuraanissa (THF) lämpö tilassa, joka on 20 - 50 °C, kaavan (I) mukaiseksi yhdis- ϊ : ' 30 teeksi.

• · ·

Kaavan (II) mukaisia estereitä voidaan valmistaa menetelmällä, joka on kuvattu julkaisussa Khim. Farm. Zh 1970,4 (9), sivut 27 - 31 (CA 74-012920).

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa Z = NH, voi-35 daan valmistaa myös 97055 3 1) joko debentsyloimalla kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä, joissa Z = N-CH2-C6H5, vedyn avulla katalysaattorin, kuten inerttiin kantajaan absorboidun palladiumin läsnä ollessa, 20 - 60 °C:n lämpötilassa proottisessa 5 liuottimessa, kuten etanolissa tai etikkahapossa 100 -400 kPa:n paineessa, jonka jälkeen pelkistetään näin saatu kaavan (IV) mukainen yhdiste, jossa Z = NH, LiAlH4:n avulla eetteriliuottimessa, kuten eetterissä tai THF:ssä 20 -50 °C:n lämpötilassa; 10 2) tai kaavan (IV) mukaisten yhdisteiden, jossa kaavassa Z = N-CH2-C6H5, reaktiolla alkyylikloroformiaatin, erityisesti etyylikloroformiaatin kanssa klooratussa liuottimessa, kuten CH2Cl2:ssa 0-20 °C:n lämpötilassa, jonka jälkeen suoritetaan kaavan (IV) mukaisten yhdistei-15 den saippuointi, jossa kaavassa Z = NC02Et, natriumhydrok-sidin avulla etanolissa 20 - 80 °C:n lämpötilassa, ja kaavan (IV) mukaisten yhdisteiden pelkistys, jossa kaavassa Z = NH, LiAlH4:llä samoissa olosuhteissa kuin edellä.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa Z esittää 20 kaavan NC0R2 mukaista ryhmää, voidaan valmistaa myös saattamalla kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa kaavassa Z = NH, reagoimaan kaavan R2C0Hal mukaisen reagenssin kanssa, jossa R2 on sama kuin edellä ja Hai esittää vetyatomia, inertissä liuottimessa, kuten CH2Cl2:ssa, tolueenissa . . 25 tai DMF:ssä, mahdollisesti epäorgaanisen emäksen, kuten ** K2C03:n, tai orgaanisen emäksen, kuten trietyyliamiinin (TEA) läsnäollessa 20 - 100 °C:n lämpötilassa.

* Raseemisia seoksia voidaan valmistaa käyttämällä lähtöaineena (D,L)-proliinia. Puhtaita enantiomeerejä voi-30 daan valmistaa käyttämällä lähtöaineina joko L(-)-prolii-nia tai D( + )-proliinia tai erottamalla raseemisesta seok-. sesta erottavan aineen, kuten optisesti aktiivisen hapon avulla.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksinnön mukaisten 35 yhdisteiden valmistamista.

4 97055

Analyysit ja IR- ja NMR-spektrit vahvistavat yhdisteiden rakenteen.

Esimerkki 1 [l-bentsyyli-4- (l-fenyylipyrrolidin-2-yyli)metyy-5 li]piperatsiini ja sen dihydrokloridi 1.1. [l-bentsyyli-4-(1-fenyylipyrrolidin-2-yyli)-karbonyyli]piperatsiini

Liuokseen, jossa on 3,8 g (0,0526 moolia) trimetyy-lialumiinia (22 cm3 25 % liuosta heksaanissa) 40 cm3:ssä 10 tolueenia, lisätään argonatmosfäärissä 0-5 °C:n lämpötilassa tipoittain liuos, jossa on 9,55 g (0,054 moolia) 1-bentsyylipiperatsiinia 20 cm3:ssä tolueenia. Sitten seoksen lämpötila nostetaan 50 °C:seen, lisätään hitaasti 7,43 g (0,0339 moolia) l-fenyylipyrrolidin-2-karboksylaa-15 tin etyyliesteriä 40 cm3:ssä tolueenia. Lisäyksen lopussa kuumennetaan 80 - 90 °C:seen, tislataan heksaani ja pidetään pystyjäähdyttäjän alla 3 tuntia. Saadaan kirkas oranssinvärinen liuos, joka jäähdytetään ja joka hydrolysoidaan 50 cm3:llä vettä. Liukenematon aines suodatetaan ja 20 huuhdotaan etyyliasetaatilla, orgaaninen faasi pestään vedellä ja kuivataan. Liuos konsentroidaan alennetussa paineessa, saadaan keltaista öljyä, joka liuotetaan syklo-heksaani/tolueeniseokseen (1/1). Liuos suodatetaan ja hienonnetaan, jolloin saadaan valkoista kiinteää ainetta.

.25 m = 10,3 g. Sp. = 99 - 100,5 eC.

• · · * l 1.2.[l-bentsyyli-4-(l-fenyylipyrrolidin-2-yyli)me- ] * tyyli]piperatsiini ja sen dihydrokloridi • · · *·* · 1 l:n kolmikaulakolviin pannaan argonatmosf äärissä 1,65 g (0,0434 moolia) LiAlH4 75 cm3:ssä kuivaa THF:ää, / 30 sitten lisätään 0-5 °C:ssa 10,1 g (0,0289 moolia) koh- ::: dassa 1.1. saatua yhdistettä 200 cm3:ssä kuivaa THF:ää.

• Annetaan reagoida 30 minuuttia, pannaan sitten 6 tunniksi pysty j äähdyttäj än alle. Seosta käsitellään 15 cm3:llä 6,5 % Na0H:a jäähdyttäen.

Il 97055 5

Saatu liuos suodatetaan, liukenematon aines huuhdotaan THFillä. Orgaaniset faasit kerätään yhteen, kuivataan ja konsentroidaan alennetussa paineessa. Näin saadaan keltaista öljyä. Yhdisteen hydrokloridi valmistetaan saat-5 tamalla 9,7 g (0,0289 moolia) emästä reagoimaan 580 cm3:n kanssa HCl:ää isopropanolissa (0,1 m/1). Liuos konsentroidaan täysin, lisätään AcOEt ja hienonnetaan. Kiinteä valkoinen aine kiteytetään uudelleen isopropanoli/MeOH seoksesta (1/1).

10 m = 10,8 g. Sp. = 249 - 251 °C. Saanto = 91,5%.

Esimerkki 2 1-[ (l-fenyylipyrrolidin-2-yyli)metyyli]piperatsiini ja sen hemifumaraatti 2.1. 1-[(l-fenyylipyrrolidin-2-yyli)karbonyyli]pi-15 peratsiini

Synteesireitti 1 3,49 g (0,01 moolia) esimerkin 1.1. yhdistettä liuotettuna 100 ml:aan etanolia, saatetaan reagoimaan kaasumaisen vedyn kanssa 4 atm:n paineessa 5 tunnin ajan 20 -20 25 °C:n lämpötilassa 0,5 g:n 10 % Palladium/C:n ja 10 ml:n IN kloorivetyhappoa läsnä ollessa. Reaktion lopuksi katalysaattori suodatetaan ja suodos konsentroidaan alennetussa paineessa. Jäännöstä käsitellään ylimäärällä ammoniakkia ja uutetaan CH2Cl2:lla. Orgaaninen faasi kuivataan . . 25 Na2S04:n päällä ja konsentroidaan. Näin saadaan 2,5 g noin * * 96 % valkoista kiinteää ainetta. Sp * 128 - 130 eC.

] * Synteesireitti 2 *·’ ‘ 4-( [ (l-fenyylipyrrolidin-2-yyli)karbonyyli]piperat- sin-l-karboksylaatin etyyliesteri 30 Pannaan 53,0 g (0,152 moolia) esimerkin 1.1. yhdis- : : : tettä 500 cm3:iin CH2Cl2:a, argonatmosfäärissä ja lisätään ; huoneen lämpötilassa 18,2 g (0,168 moolia) etyylikloori- formiaattia. Seoksen annetaan sekoittua huoneenlämpötilassa 72 tuntia.

97055 6

Liuos konsentroidaan, jäännös liuotetaan CH2Cl2:een, pestään lipeävedellä, sitten vedellä, kuivataan ja konsentroidaan.

Saatu kiinteä aine kiteytetään uudelleen syklo-5 heksaani/tolueeniseoksesta (4/1). m = 42,7 g. Saanto = 84,9 %. Sp. - 139,5 - 141,5 eC.

1-[(1-fenyylipyrroiidin-2-yy1i)karbonyy1i]piperat-siini 1 l:n kolmikaulakolviin pannaan argonatmosfäärissä 10 46,1 g (0,139 moolia) edellä saatua yhdistettä ja 300 cm3 etanolia. Seos kuumennetaan kiehumispisteeseen ja siihen lisätään 85 cm3 (0,834 moolia) natriumhydroksidiliuosta.

Seoksen annetaan olla kiehumispisteessä 18 tunnin ajan.

Lisätään 700 cm3 vettä ja uutetaan CH2Cl2:lla. Orgaaninen 15 faasi kuivataan MgS04:n päällä. Konsentroidaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan valkoista kiinteää ainetta, joka kiteytetään uudelleen tolueenista.

m = 31,6 g. Saanto = 87,5 %. Sp. = 128 - 130 °C.

2.2. 1-[(l-fenyylipyrrolidin-2-yyli)metyyli]pipe- 20 ratsiini ja sen hemifumaraatti 1 l:n kolmikaulakolviin pannaan argonatmosfäärissä 5,84 g (0,154 moolia) LiAlH4:ä 600 cm3:ssä kuivaa THF:a, lisätään sitten 0-5 °C:ssa 26,6 g (0,103 moolia) kohdan 2.1 amidia. Annetaan reagoida 30 min, sitten seosta pide- 25 tään pystyjäähdyttäjän alla 2 tuntia. Sitten liuosta käsi- ** 'j tellään 30 cm3:llä 6,5 % NaOH:a jäähdyttäen. Saatu suspen- • · · » · sio suodatetaan ja liukenematon aines pestään etyyliase-‘ taatilla. Suodos kuivataan MgS04:n päällä ja konsentroi daan alennetussa paineessa. Näin saadaan keltainen öljy, i : ’ 30 m = 23,5 g, saanto = 93,3 %.

Tämän yhdisteen hemifumaraattia valmistetaan saat- . *. tamalla 5,0 g (0,0204 moolia) emästä 50 cm3:ssä etanolia • · · reagoimaan 1,19 g:n (0,0102 moolin) kanssa fumaarihappoa 100 cm3:ssä etanolia. Liuos konsentroidaan alennetussa pai-35 neessa ja jäännös kiteytetään uudestaan metanolista. m = 1,3 g. Saanto 22 %. Sp. = 179,5 - 181 °C.

7 97055

Esimerkki 3 1- (2-fenyylietyyli )-4- [ (l-fenyylipyrrolidin-2-yy- li)metyyli]piperatsiini ja sen dihydrokloridi 3.1. 1-(2-fenyylietyyli)-4-[(1-fenyylipyrrolidin- 5 2-yyli)karbonyyli]piperatsiini

Liuokseen, jossa on 3,8 g (0,0526 moolia) trimetyy-lialumiinia (22 cm3 25 % liuosta heksaanissa) 40 cm3:ssä tolueenia argonatmosfäärissä ja 0 - 5 °C:ssa, lisätään tipottain liuos, jossa on 10,3 g (0,0542 moolia) l-(2-fe-10 nyylietyyli)piperatsiinia 20 cm3:ssä tolueenia.

Seos kuumennetaan 50 °C:seen, lisätään tipoittain 7,43 g (0,0339 moolia) l-fenyylietyylipyrrolidin-2-karbok-sylaatin etyyliesteriä 40 cm3:ssä tolueenia. Lisäyksen loputtua seos kuumennetaan 80 °C:seen, heksaani tislataan ja 15 seosta pidetään pystyjäähdyttäjän alla 3 tuntia. Liuos jäähdytetään ja se hydrolysoidaan 50 cm3:llä vettä. Liuos suodatetaan, liukenematon aines huuhdellaan etyyliasetaatilla, dekantoidaan, pestään vedellä, kuivataan ja konsentroidaan. Öljy liuotetaan kuumaan sykloheksaaniin. Liuos 20 suodatetaan ja jäännös hienonnetaan. Näin saadaan valkoista kiinteää ainetta.

m * 11,4 g. Saanto = 92,7 %. Sp. * 123 - 124,5 eC.

3.2. 1-(2-fenyylietyyli)-4-[(1-fenyylipyrrolidin- 2-yyli)metyyli]piperatsiini ja sen hydrokloridi 25 500 cm3:n kolmikaulakolviin pannaan argonatmosfää- * * rissä 1,25 g (0,0330 moolia) LiAlH4:ä 50 cm3:ssä kuivaa ] * THF:ää, sitten lisätään 0-5 °C.ssa 8,0 g (0,0220 moolia) * kohdan 3.1. yhdistettä 100 cm3:ssä kuivaa THF:ää. Annetaan reagoida 30 minuuttia, sitten seosta pidetään pystyjääh-30 dyttäjän alla kiehumispisteessä 7,5 tuntia. Liuosta käsi-tellään 10 cm3:llä 6,5 % NaOH:a jäähdyttäen.

. Suspensio suodatetaan, liukenematon aines huuhdo taan THFillä, kuivataan ja konsentroidaan. Näin saadaan keltaista öljyä.

8 97055

Valmistetaan dihydrokloridia saattamalla 6,6 g (0,0189 moolia) kohdan 3.2. emästä reagoimaan 380 cm3:n kanssa HC1 isopropanolissa (0,1 m/1). Liuos konsentroidaan 3/4. Näin saadaan valkoista kiinteätä ainetta, joka suoda-5 tetaan ja kiteytetään uudelleen isopropanoli/MeOH-seokses-ta (1/3).

m = 6,9 g. Saanto = 74,2 %. Sp. » 272 - 275 eC.

Esimerkki 4 l-fenyylikarbonyyli-4- [ (1-f enyylipyrrolidin-2-yy-10 li)metyyli]piperatsiini ja sen hydrokloridi 500 cm3:n kolmikaulakolviin pannaan argonatmosfäärissä 5,0 g (0,0204 moolia) 1-[(l-fenyylipyrrolidin-2-yy-li)metyyli]piperatsiinia 75 cm3:ssä CH2Cl2:a. Lisätään 7,2 g (0,0714 moolia)bentsoyylikloridia 40 cm3:ssä CH2Cl2:a. Seos-15 ta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia. Liuosta käsitellään 200 cm3:llä vettä, orgaaninen faasi dekantoi-daan, pestään vedellä, kuivataan ja konsentroidaan alennetussa paineessa. Näin saadaan öljyä, joka kromatografoi-daan silikageelipylväällä (eluentti CH2Cl2/metanoli 99/1). 20 Valmistetaan hydrokloridia saattamalla 3,1 g (0,00887 moolia) emästä reagoimaan 89 cm3:n kanssa HCl:ää isopropanolissa (0,1 m/1). Liuos haihdutetaan kokonaan.

Näin saadaan kiinteä aine, joka kiteytetään uudelleen 2 kertaa isopropanoli/MeOH seoksesta (4/1).

. . 25 Sp. = 227 - 230 eC. Saanto 32,9 %.

* *' Esimerkki 5 (S) (-)-1-(2-fenyylietyyli)-4-[ (1-fenyylipyrrolidin- • » * l.‘ ’ 2-yyli)metyylipiperatsiini ja sen dihydrokloridi 5.1. (S)-l-fenyylipyrrolidin-2-karboksyylihappo 30 2 l:n kolmikaulakolviin pannaan 158 g (1,37 moo- : lia) (L)(-)proliinia, 220 g (1,40 moolia) bromibentseeniä, . *.e 194 g (1,40 moolia) K2C03 ja 10 g CuO 450 ml:ssa DMF:ää.

Seoksen lämpötila pidetään kiehumispisteessä pystyjäähdyt-täjän alla 37 tuntia. Seoksen annetaan jäähtyä, lisätään 35 1 litra vettä, suodatetaan Celitellä, epäpuhtaudet uute- tl 97055 9 taan CH2Cl2:lla, suodatetaan uudelleen ja tehdään happamaksi HCl:llä, joka on laimennettu pH 4,O:aan. Liuos uutetaan CH2Cl2:lla, pestään vedellä, kuivataan ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Näin saadaan valkoista 5 kiinteätä ainetta.

Sp. =80-81 °C.

5.2.(S)(-)-1-(2-fenyylietyyli)-4-[(1-fenyylipyrro-lidin-2-yyli)karbonyyli]piperatsiini

Liuokseen, jossa on 14,2 g kohdassa 5.1. valmistet-10 tua happoa 100 ml:ssa THF:ää, lisätään 16,2 g (0,1 moolia) karbonyylidi-imidatsolia ja annetaan sekoittua 2 tuntia 20 °C:ssa, sitten 12 tuntia 40 °C:ssa. Sitten lisätään 14 g (0,074 moolia) l-(2-fenyylietyyli)piperatsiinia ja annetaan sekoittua yön yli 20 eC:ssa, sitten 3 tuntia 15 50 °C:ssa. Seos haihdutetaan kuiviin, jäännös liuotetaan natriumkarbonaattia sisältävään veteen, uutetaan CH2Cl2:lla, orgaaninen faasi kuivataan ja konsentroidaan alennetussa paineessa. Näin saadaan ruskeata öljyä, joka puhdistetaan silikageelikromatografiapylväällä (eluentti:-20 CH2Cl2-etyyliasetaatti 95/5, sitten CH2Cl2-metanoli 95/5).

Otetaan talteen 10 g raakatuotetta, joka liuotetaan eetteriin ja seostetaan uudelleen pentaanista. Näin saadaan 8 g kiinteätä valkoista ainetta (eli 30 %:n saanto), jota käytetään sellaisenaan seuraavassa vaiheessa.

25 5.3.(S)(-)-1-(2-fenyylietyyli)-4-[(l-fenyylipyrro- • * * ! lidin-2-yyli)metyyli]piperatsiini ja sen dihydrokloridi • » * · ... Liuokseen, jossa on 6,9 g (0,019 moolia) kohdassa 1 · * ·* 5.2 valmistettua amidia 100 ml:ssa kuivaa THFrää, lisä tään suspensio, jossa on 1,07 g (0,028 moolia) LiAlH4:ä 4 M.; 30 100 ml:ssa kuivaa THF:ää. Seoksen lämpötila pidetään kie- »·· J.i · humispisteessä pystyjäähdyttäjän alla 3 tuntia, sitten : ,·. seos jäähdytetään ja hydrolysoidaan IN NaOH:lla. Muodostuu kiinteä aine, orgaaninen faasi dekantoidaan, laimennetaan CH2Cl2:lla ja kuivataan. Liuottimet haihdutetaan alenne-35 tussa paineessa. Näin saadaan 7 g öljyä, joka puhdistetaan 97055 10 silikageelipylväskromatografiällä (eluantti: CH2Cl2-etyy-liasetaatti 97/3, sitten CH2C12 - metanoli 95/5). Eristetään 6 g öljyä.

Dihydrokloridi valmistetaan käyttäen 5,43 g 5 (0,0155 moolia) emästä ja 311 ml 0,1N kloorivetyhappoa 2-propanolissa, suola kiteytetään uudelleen metanolista. Näin saadaan 5,2 g dihydrokloridia.

Sp. = 266 - 267 eC, [a]D = - 15 e (c - 0,2, etanoli).

Seuraavassa taulukossa esitetään joitakin keksinnön 10 mukaisia yhdisteitä, joita on valmistettu esimerkkeinä.

« · · • 1 · • « • · • I 1 • 1 · * 1 · • • · i • · 4

« « I

• « f • · « • · ♦ • · 9 « · 11 97055

I I

I O I

I I

I Q I .

I r—! I

I Ö I k*.*.....»»*.·.?· I I—I I OTJOOOflOTJO^

I I

.. _ _ _ __ _ — —— __ —— ^ mt _ _ _ _ _ _ » » — « _ — — _ _ w w ^ — —— —— — · k — —

I I

ii in in ·· - * _

I IrHNCVJrHHinCOCOOOO

I I coCTiininint^^infM^i

I -- I HrHOJNCM<Nt-inJMN

I u I

I O I I I I I I I I I I 1 • — 1 ^ I ιιηιηοοσ»σ'(ΝΟΐηνοΐ> I α I - cs cs iwicriOcscscscs<-iocsN '— I I ^ o' m

I I .-1 .-1 (N

I I

I I * lie N I I 3 H H r-l s

C>v. I(OI»HHHUU03HHH

IHI UOZSCZM-iUUO

I o I n as a sc sc *

J I 3 I \ <N <N <N CM

I CO I iH

5 J I I

t Cr :: 3 \ z 1 1

<0 ^ I I

. .. H Y^i i i % v II a m a .·. : ii mam ·. ·: ii o mo . I I m I o I in ..... I I roman I cnajn iNiaascmocsroacssc ... I iiomUi^KOOm ::: i iziui^csuooio • I I z I rj w a w o o o I I z a I o I I o u

I I o cs v- a z I I

I I I a I u z z

. .·. ii z o z I

·.:.· ii I z ... II 2 :: : J_______1___________________________________________ • · I 0 I o

i^iirHcsco^mvoc^aoNn I C I

97055

I I

I I ·—' χ —^ ^

l I K O K X X

I I ο ~ -μ o o o I I -μ tn ω -μ -μ μ ι ι ω ς ω ω ω ι ι ρν ρ in dp cs m ι ι - - -in - <#> - <#> - <#> ι ^ ι in cs vo-^fD>o>incoincsm 10 I H - HHHHHHCO «.HONHOiHCTi

l<w-| O - - - - H (S

ι ι ι II Ό Ό Ό Ό ι Ο ι - I - t

I P I 0 — O r-l ι—I ι—I

I I—I I w HUHU

löi 0 0 0 0 I I—I ι ---

I I

I I -—- λ

I Its OCTiC^COC" S · . CO

ι ivo m n in oo in *r-> t->

I '—- I C^J 0S CS CS CS CS OS <0 (0 CS

I υ ι A A

I 0 II I I I I I I ·— W I

I w I

ι ι vo co s in o m in O O i-h ι Λ i <d in oo in ro in in in ι co i cs os os cs os cs cm cs cs cs ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι ι

l li—l ι—l r-l ι—I H ·—I r—I ιΗ ι—I I—I

iioiu uouou ο α u o

IrHIX x x x x x X X X X

I 0 I

I 3 I OS N (S N N N OS OS OS OS

I CO I

I I

I I ^

I I X'-'XX

I I vO^iO-^vDX X X

I I OKU’S'O Ό ID VOX

ι ι in ivoixi u O CJ vo

1 IX OUOiDO I I I U

I IVO 00 I CO O 00 00 00 00 I

: ι iu XHXix x x x h ·. ·: ι ii uoutnu o o a a

. 1 N I OS I I I I I I I I I

..... I I ^ (I) ^ CS Vf CO OS OS

I ICS w^www <— w w

... I IX I I I I I I 1 I I

::: I I u os os os os os os os cs cs • I I ' ' ----- / V > . -—- ----- — - Λ -—- I II OS cs cs cs cs cs cs cs cs

I ι z xxxxx X X X X

ι ι uauuo o a u o

·.·.· I I I I I I I I I I I

... ι I z z z z z z z z z • Φ ·

* I I

··, ι ο ι ή cs η ί in ιο s co σ> o

• 1 1 I μ I r-l rH i—I r—I rH r—I ιΗ ιΗ H CS

I G I

13 97055

----------------------------------------------------------------I

I I ~ ac a a a i

I I a o o o o I

I I o -μ -p -p -μ ^ I

I I -μ ω ω ω ω a ι I ^ I ω οι

I o I dP dp H dP dp M -P I

iwi v in in» in in »Ui ι ii-iincocyiincnOcriaicoaiin i

I Q I M » M M (N » CO » H » I

I ι-1 IO » rH H H M I

I C3 I I II I ·—I I » I »I » + » I

I ι—ι I o » ο ο ο O I

I I —' o II II II II I

II il 0 U 0 Ο ι II w w w ι

----------------------------------------------------------------I

I I I

ι ι ι ι ι ι ι ι oo vo O mo a» oo ι ι ι ^ Ο ι—ι M in in ι

I I M M (N M M M M I

I U I I

I 0 I I I I II I I

ι ι in tji oo o C" vo vo ι ι a ι -vf o o m in ι

I W I M (N <N MM M M I

I I I

----------------------------------------------------------------I

I I I

I I 1 1 I

I I H S H H H H I

1(010 3 <0 HO O O I

iHia ή ε oa a a ι ι ο ι a ι

I 3 I M M M M M M I

ι ω ι ι

I I I

----------------------------------------------------------------I

I I CO I

ι ι a co ι ι ι ^ vo a ι , ι ι a u vo ι ri zj I I vo I ο ι -P 15 ι ι u ο ι , -P r r<

I II (OH "«1 I 2 -P P

ι inao as ι <o -p P

ι iu o h vo vo ι pah.

.. I II Η ό o u 1 2 !° -¾ rl I ICO Ό ι ι ι 1 § h P t! ·· ι ii ι ^ infe ti in 1 P 2 id t! • ι im n· » ai ι a 1 § T? 2 ·:··; ι ι -» » co vo m co vo "d .3 21 2

ι im co O'-- ^ U 1 Ε« H

I N I a w I II I I ι Φ H H 2 ... I ΙΟ I M MM M M ι .C Ό Ό 6 ι ι »—' cn —' a - --- ι

I II ^ Μ Ο Μ Μ Μ ι II II II II

ι iz m a ι a a a ι . ι ι a u ο ο ο ο ι · ;;; I I O w Uw w w ι g ... I I w I II I I I P · , · ... ι ι ι 2 22 2 2 1 ^ § Tl ^ : : : ι ι 2 ι 3 υ g II 1^

I o I H M CO in VO f» |HMMM

:.:: ιριμ μ μ mm μ μ i ... ι C ι ι 97055 14

Keksinnön mukaisilla yhdisteillä on tehty farmakologinen koesarja, joka todistaa yhdisteiden hyödyn terapeuttisesti vaikuttavina aineina.

Anti-iskeeminen vaikutus 5 1. Keksinnön mukaisten yhdisteiden anti-iskeemisiä ominaisuuksia aivoihin on määritetty aivojen kokonaisiske-miatestillä hiirellä.

Aivojen kokonaisiskemia syntyy hiirellä sydänpysäh-dyksen jälkeen, joka on aiheutettu kyllästetyn MgCl2-liuok-10 sen injektiolla häntälaskimoon. Alustavat tutkimukset ovat osoittaneet, että valtimopaineen lasku on saman kaltainen kaikilla eläimillä ja että se on käytännöllisesti katsoen nolla 6,3 ± 0,8 sekunnin kuluttua. Sydänpysähdys on riittävän raju, ettei magnesiumkloridi pääse aivoverisuonten 15 kapillaarikerrokseen.

"Elinaika" on aika, joka kuluu magnesiumkloridi-injektiosta viimeiseen hengitysliikkeeseen. Aivojen ener-giavarastojen täydellinen häviäminen tai tarkemmin sanottuna aivojen hengityskeskusten toiminnan loppuminen ilme-20 nee rintakehän liikkeiden pysähdyksenä. Tämä hengityspy-sähdys tapahtuu noin 19 sekunnin kuluttua magnesiumklori-di-injektiosta.

Elinaika mitataan 10 minuutin kuluttua tutkittavan yhdisteen injektiosta vatsaonteloon tai 30 minuutin kulut-25 tua suun kautta annetusta annoksesta. Elinajan ero kont- * * rollieläinten ja tutkittavia yhdisteitä saaneiden eläinten [ / välillä ilmaistaan graafisesti annoksen logaritmin funk- • * * *.* * tiona (ilmaistuna emäksenä). ED3- on annos, joka lisää yh disteitä saaneiden eläinten elinikää 3 sekunnilla. Tämä :: r 30 arvo on toistettava ja aina tilastollisesti merkitsevä.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden ED3.:t sijoittuvat . \·% välille 10 - 200 mg/kg vatsaontelon sisäisesti ja/tai suun kautta annosteltuna.

2. Keksinnön mukaisten yhdisteiden hermoja suojaava 35 vaikutus on osoitettu fokaalisella iskemiamallilla sito- 97055 15 maila hiiren keskikokoinen aivovaltimosuoni, analogisesti julkaisussa Brain Research, 522, (1990), 290 - 307 kuvatulle menetelmälle. Kuusi päivää halotaaninukutuksessa suoritetun keskikokoisen aivovaltimon sähköisellä koagu-5 laatiolla aiheutetun tukkeuman jälkeen hiiret nukutetaan uudestaan ja tukkeuman samanpuoleinen aivojen kuorikerros poistetaan. Kudoksen homogenisoinnin jälkeen aivoinfarktin laajuus mitataan perifeeristen bentsodiatsepiinin sitoutumispaikkojen tiheyden lisääntymisellä ( 3) New 10 England Nuclearin [3H]-PK 11195 -yhdisteen avulla. Käsittelyinä on vaikuttavan yhdisteen anto ajankohtina 5 min, 3t, 6t, 18 t ja 24 t vatsaontelon sisäisesti.

Keksinnön yhdisteillä leesion koon pienentyminen on 40 - 70 % (0,1 - 30 mg/kg annoksella).

15 Kouristusta ehkäisevä vaikutus

Keksinnön mukaiset yhdisteet ehkäisevät tahdosta riippumattomia kouristuksia, jotka aiheutetaan hiirelle supramaksimaalisella sähköshokilla. Yhdisteet annetaan vatsaontelon sisäisesti 30 minuuttia tai suun kautta 60 20 minuuttia ennen sarveiskalvolle annettua sähköshokkia (10 mA, 50 Hz 0,5 sekunnin ajan), määritetään graafisesti AD50-annokset, jotka estävät sähköshokin kouristusvaikutuk-set 50 %:lla eläimistä.

Keksinnön mukaisille yhdisteille AD50-arvot sijoit-25 tuvat välille 10 - 100 mg/kg vatsaontelon sisäisesti an- • · 1 ’· 1· nettuina.

t 1 Spesifinen sitoutuminen sigma-reseptoreihin

• M

: Yhdisteillä on tehty [3H]-(+)-3-(3-hydroksifenyy- li)-N-(1-propyyli)piperidiinin tai [3H]-(+)-3-PPP:n sitou- ::’t 30 tumisen inhibiitiokokeet rotan aivojen σ-reseptoreihin

Largentin ja työtovereiden kuvaaman protokollan mukaises- .1. ti, J. Pharmacol. Exp. Ther., 238, 739 - 748 (1986). Tape- • · · “ taan 150 - 200 g:n painoisia koiraspuolisia Sprague-Daw-ley-rottia ja homogenisoidaan niiden aivojen kuorikerros 35 25 tilavuuteen jääkylmää 50 mM Tris-HCl-puskuria (pH =7,4 97055 16 25 °C:ssa) Ultra-Turrax™-laitteella. Seos pestään kaksi kertaa sentrifugoimalla se 10 minuuttia 45 000 g:ssä ja suspendoimalla sakka tuoreeseen puskuriin. Pesty sakka laimennetaan 20 tilavuuteen Tris-puskuria (HC1 50 mM pH = 5 8,0 22 eC:ssa) ja 75 μ1:η eriin jaettuja näytteitä inku- boidaan 250 μ1:η kokonaistilavuudessa, jossa on 2 nM [3H]-(+)-3-PPP:tä (spesifinen aktiivisuus: 90 Ci/mmooli, New England Nuclear), 90 minuuttia 25 eC:ssa kilpailevien aineiden läsnä ollessa tai ilman niitä.

10 inkuboinnin jälkeen membraanit otetaan talteen suodattamalla Whatman GF/B™-suodattimilla, joita on käsitelty 0,05-prosenttisella polyetyleeni-imiinillä Scatron Cell Harvester™-laitteen avulla, ja niitä pestään noin 2,5 ml:lla jääkylmää Tris-HCl-puskuria (pH « 7,7 0®C:ssa). 15 Epäspesifinen sitoutuminen määritetään 1 μΜ halope- ridolilla, analysoidaan tiedot tavanomaisilla menetelmillä ja lasketaan kunkin yhdisteen IC50-konsentraatio, joka inhiboi 50 % [3H]—(+)—3—PPPcn sitotumisesta.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden IC50:t sijoittuvat 20 välille 0,001 - 0,2 μΜ.

Lopuksi määritettiin keksinnön mukaisten yhdisteiden akuutti toksisuus hiirellä. Tappavat annokset, jotka aiheuttavat 50 %:n kuolleisuuden eläimillä, sijoittuvat välille 30 - 300 mg/kg vatsaontelon sisäisesti ja 100 -. . 25 1 000 mg/kg suun kautta annosteltuina.

*· 1 Kokeiden tulokset osoittavat, että yhdisteet syr- ] 1 jäyttävät in vitro [3H]-(+)-3-PPP:n aivojen sitoutumispai- 5·1 1 koista ja sen vuoksi niillä on affiniteettia sigma-sitou- tumispaikkoihin.

30 In vivo -yhdisteillä on anti-iskeemisiä ja kouris- : tuksia ehkäiseviä vaikutuksia.

. Yhdisteitä voidaan käyttää hoidettaessa erilaisista syistä johtuvia aivoiskemioita tai suojeltaessa niiltä, kuten hypoglykemiassa, hypoksiassa ja yleensä hoidettaessa 35 metabolisia aivosairauksia, suojeltaessa hermojen degene- 97055 17 raatiolta sekä aminohapposairauksilta, jotka johtuvat hermotoiminnan häiriöistä ja hoidettaessa neurologisia sairauksia. Niitä voidaan käyttää myös hoidettaessa neurologisia häiriöitä, kuten yleensä kouristustiloja, epilep-5 siaa ja erityisesti spastisuutta, stressi- ja tuskatiloja, yleensä psykoottisia tiloja ja skitsofreniaa.

Tässä mielessä yhdisteet voivat olla missä tahansa oraaliseen tai parenteraaliseen annostukseen sopivassa muodossa sekoitettuna mihin tahansa sopivaan täyteainee-10 seen ja annosteltuna niin, että päivittäinen annos voi olla 1-1 000 mg.

• · · • · · • · • · • · · • · · • · · « • · · * · r

• · I

• « · • · « • · · 1 · • · · 5 18 97055

Reaktiokaavlo HN -/ (V)

Voh

O

1- K2C03, CuO

10 2-C6H5Hal (Π) N_/ Ö >“ q

15 \ /=/ /-OH W

\ \J °

Me3Al, \ 20 _ \ / (ΙΠ) z7 NH \ / ^C·01· : \ / / \ //2- ^NH (ΙΠ)

25 O

N~~\ /—v T /=( V-N Z (IV) \J 0 w 30 • · « A1UH4 • · • · · ” o Ö - -

Claims

97055 19

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten, kaavan (I) mukaisten [(l-aryylipyrrolidin-2-yyli)metyyli]pi-5 peratsiinijohdannaisten valmistamiseksi raseemisina seok sina tai enantiomeereinä, o N\ /—\ (I) 10 /=^ '— N z jossa Z esittää kaavan N-Rx mukaista ryhmää, jossa Rx on vetyatomi, (C^J-alkyyliryhmä tai kaavan Ar-CnH2n mukainen 15 ryhmä, jossa n esittää lukua 0, 1 tai 2 ja Ar esittää fe-nyyliryhmää, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla halogeeniatomilla ja/tai (C^J-alkyyli- tai (C1.3)-alkoksiradikaalilla, tai kaavan COR2 mukaista ryhmää, jossa R2 esittää CH3-, C6H5-, CH2C6H5- tai OC2H5-ryhmää, 20 sekä niiden additiosuolojen valmistamiseksi farmaseuttisesti hyväksyttävien happojen kanssa, tunnettu siitä, että - kaavan (II) mukainen proliiniesterijohdannainen ;··” 25 O • : n-/ (id /S v°-r 30 saatetaan reagoimaan inertissä liuottimessa, kuten toluee-. ; nissa, 80 - 110 °C:n lämpötilassa kaavan (III) mukaisen • *·. trimetyylialumiiniamiinikompleksin kanssa, 35 /NH ' Me3Al (III) 20 97055 joka on valmistettu etukäteen ja joka on inertissä liuot-timessa, kuten tolueenissa, lämpötilassa, joka on -20 eC:n ja 20 °C:n välillä, jolloin saadaan kaavan (IV) mukainen yhdiste c/k> 10 - tai proliini (V) o HN —( 15 you O saatetaan reagoimaan halogenidin C6H5Hal kanssa joko Cu++-suolan läsnä ollessa Cu0:n muodossa tai metallisen 20 kuparin läsnä ollessa emäksisessä liuoksessa, esimerkiksi K2C03-liuoksessa, aproottisessa liuottimessa, kuten DMF:ssä tai N-metyylipyrrolidonissa 100 - 150 °C:n lämpötilassa, jolloin saadaan kaavan (VI) mukainen happo; :·; 25 O • : n—( (vi) Γ /={ V™ O ° : : : 30 sitten happo (VI) muutetaan amidiksi (IV) käsittelemällä : happoa (VI) karbonyylidi-imidatsolilla liuottimessa, kuten . *.t tetrahydrofuraanissa (THF) tai metyleenikloridissa (CH2C12) * ♦ * lämpötilassa, joka on 20 - 40 °C, imidatsolidivälituotteen muodostamiseksi, jota käsitellään in situ kaavan (III) 97055 21 mukaisella amiinilla, jossa Z merkitsee samaa kuin edellä, ja lopuksi saatu kaavan (IV) mukainen amidi o 5 /N \ /—\ (IV) pelkistetään litium- ja alumiinihydridin avulla eetteri-10 liuottimessa, kuten eetterissä tai tetrahydrofuraanissa (THF) lämpötilassa, joka on 20 - 50 °C, kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jossa Z 15 esittää radikaalia N-(CH2)2-Ar, jossa Ar esittää fenyyli-ryhmää, joka on mahdollisesti substituoitu yhdellä tai useammalla fluori- tai klooriatomilla ja/tai yhdellä tai useammalla metyyli- tai metoksiradikaalilla. • · • · »« · • · • « I i : : • t · * · · Mi <*l • · i ♦ · · « · • · · 97055 22