FI95931C - Menetelmä (2R,3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidiinihapon alemman alkyyliesterin valmistamiseksi - Google Patents
Menetelmä (2R,3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidiinihapon alemman alkyyliesterin valmistamiseksi Download PDFInfo
- Publication number
- FI95931C FI95931C FI894022A FI894022A FI95931C FI 95931 C FI95931 C FI 95931C FI 894022 A FI894022 A FI 894022A FI 894022 A FI894022 A FI 894022A FI 95931 C FI95931 C FI 95931C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- genus
- methoxyphenyl
- enzyme
- ifo
- isomer
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
- C07D303/48—Compounds containing oxirane rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms, e.g. ester or nitrile radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
Description
95931
MENETELMÄ (2R,3S)-3-(4-METOKSIFENYYLI)GLYSIDIINIHAPON ALEMMAN ALKYYLIESTERIN VALMISTAMISEKSI
Keksinnön taustaa Tämä keksintö koskee uutta menetelmää (2R,3S)-3-(4-metoksi-fenyyli)glysidiinihapon alemman alkyyliesterin valmistamiseksi.
Optisesti aktiiviset 3-fenyyliglysidiinihappoesteriyhdisteet ovat tärkeitä synteettisinä välituotteina diltiatsemihydroklori-dille, joka on käyttökelpoinen sepelvaltimon laajentajana ja muina erilaisina farmaseuttisina yhdisteinä, ja tekniikan tasossa on menetelmänä tämän yhdisteen valmistamiseksi tunnettu menetelmä, jossa me tyyli-trans-3-(4-metoksifenyyli) -glysidaatti hydrolysoidaan vastaavaksi karboksyylihapoksi, ja karboksyylihappo hajotetaan optisesti optisesti aktiivisella amiinilla ja este-röidään (japanilaiset tutkimattomat patenttijulkaisut nro 13775/1985 ja 13776/1985).
Edelläolevassa menetelmässä on kuitenkin se haitta, että se sisältää monia vaiheita, ja silti haluttu optisesti aktiivinen metyyli-trans-3-(4-metoksifenyyli)glysidaatti voidaan saada vain öljynä, joka ei ole erityisen puhdasta.
Keksinnön yhteenveto Tämän keksinnön tekijät ovat intensiivisesti suorittaneet tutkimuksia tarkoituksenaan saada ratkaisu tähän haittaan, ja ovatkin löytäneet menetelmän, jolla pystytään saamaan optisesti aktiivisia 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdisteitä heti ja kiteinä raseemisista 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdisteistä, jolloin : tämä keksintö syntyi.
Tarkemmin, seuraavan kaavan mukaisen (2R,3S)-3-(4-metoksifenyyli) glysidiinihapon alemman alkyyliesterin valmistaminen: 2 95931
H3C0"f^\ o H
Uyv di
H CO-,R
jossa R on alempi alkyyli, valmistetaan tämän keksinnön mukaisesti menetelmällä, jossa (a) annetaan entsyymin, jolla on kyky stereoselektiivisesti hydrolysoida esterisidos, vaikuttaa kaksifaasisessa liuotinjärjestelmässä, joka sisältää vettä tai vesipitoista liuotinta ja orgaanista liuotinta, raseemiseen trans-3-(4-metoksifenyyli)glysi-diinihapon alempi alkyyliesteriin, jolloin sen (2S,3R)-isomeeri hydrolysoituu stereoselektiivisesti, ja (b) erotetaan ja kerätään talteen hydrolysoimaton (2R,3S)-isomeeri orgaanisesta faasista tavanomaisin menetelmin.
Lvhvt kuvaus piirroksista
Kuva 1 on metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidaatin IR-absorptiospektri; kuva 2 on saman yhdisteen NMR-spektri; ja kuva 3 on saman yhdisteen massaspektri.
··, Edullisten toteutusmuotojen kuvaus
Raseemisena 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdisteenä [I] käytetään, ei ainoastaan, joka sisältää (2S, 3R)-isomeeriä ja (2R, 3S)-isomeeriä yhtäsuuret määrät, vaan myös mitä tahansa, joka sisältää molempia optisesti aktiivisia isomeerejä.
Esimerkkejä tässä keksinnössä käytettävästä entsyymistä ovat ryhmä hydrolaaseja, joita kutsutaan lipaasiksi tai esteraasiksi. Nämä entsyymit voivat olla sellaisia, jotka on saatu joko mikro-organismeista tai sellaisia, jotka on johdettu eläinsoluista, ja edelleen sellaisia, jotka on johdettu kasvisoluista. Ne voivat 95931 olla uutettu myös tunnettujen menetelmien mukaan mikro-organis-misoluista, eläinsoluista tai kasvisoluista, jotka sisältävät näitä hydrolaaseja, tai kaupallisesti saatavia entsyymejä. Spesifisiä esimerkkejä voivat olla alkaalinen lipaasi (saatu Achro-mobacter-suvusta, valmistanut Wako Junyaku), lipaasi (saatu lajista Chromobacterium viscosum, valmistanut Toyo Jozo), lipaasi B (Pseudomonas fraqi 22-39B, valmistanut Wako Junyaku),lipaasi M "Amano" 10 (saatu lajista Mucor iavanicus. valmistanut Amano Seiyaku), lipaasi tyyppi XI (saatu lajista Rhizopus arrhizus. valmistanut Sigma, USA), talipaasi (saatu lajista Rhizopus dele-mar, valmistanut Tanabe Seiyaku), lipaasi NK-116 (saatu lajista Rhizopus iaponicus. valmistanut Nagase Sangyo), lipaasi N (saatu lajista Rhizopus niveus. valmistanut Amano Seiyaku), lipaasi tyyppi VII (saatu lajista Candida cvlindracea. valmistanut Sigma, USA), lipaasi (saatu porsaan haimasta, valmistanut Wako Junyaku), esteraasi (porsaan maksa, valmistanut Sigma, USA), ko-lesteroliesteraasi (saatu lajista Candida ruaosa. valmistanut Nagase Sangyo), jne. Tässä keksinnössä edellämainittua entsyymiä tuottavan mikro-organismin kasvualustaa, mainitusta kasvualustasta kerättyjä mikrobisoluja ja mainittujen mikrobisolujen pro-·.: sessoitua tuotetta voidaan myös käyttää entsyymin lähteenä.
Mikro-organismi, jota voidaan käyttää tässä keksinnössä, voi olla sellainen, joka pystyy tuottamaan edellämainittua hydrolaa-sia, ja esimerkiksi sellaisia mikro-organismeja, kuten home, bakteerit, hiivat ja aktinomykeetit, joilla on tämä kyky, voi-• daan sopivasti käyttää. Spesifisesti niihin kuuluvat hiivana
mikro-organismit, jotka kuuluvat sukuun Absidia, sukuun Aspergillus . sukuun Fusarium, sukuun Gibberella. sukuun Mucor, sukuun Neurospora, sukuun Thricoderma tai sukuun Rhizopus: bakteerina mikro-organismit, jotka kuuluvat sukuun Achromobacter. sukuun Alcalioenes, sukuun Bacillus, sukuun Brevibacterium. sukuun Co-rynebacterium. sukuun Providencia, sukuun Pseudomonas. sukuun Serratia: ja hiivana mikro-organismit, jotka kuuluvat sukuun Candida tai sukuun Saccharomvcopsis: ja aktinomykeettinä mikro-organismit, jotka kuuluvat sukuun Nocardia. Spesifisiä esimerkkejä tällaisista mikro-organismeista voivat olla esimerkiksi Absidia corvmbifera IFO 4009 (NRRL 2982), IFO 4010, Aspergillus ochraceus IFO 4346, Aspergillus terreus IFO 6123 (ATCC 10020), Fusarium oxvsporum IFO 5942 ja ATCC 659, Fusarium solani IFO
4 95931 5232, Gibberella fujikuroi IFO 5268, Mucor anqulimacrosporus IAM 6149, Mucor circinelloides IFO 6746 (ATCC 42258), Mucor flavus IAM 6143, Mucor fraqilis IFO 6449, Mucor aenevensis IAM 6091, Mucor alobosus IFO 6745, Mucor hiemalis OUT 1045 ja OUT 1047, Mucor ianssenii OUT 1050 ja IFO 5398, Mucor iavanicus IFO 4569, IFO 4570, IFO 4572 ja IFO 5382, Mucor lamprosporus IFO 6337, Mucor petrinsularis IFO 6751, Mucor plumbeus, IAM 6117, Mucor praini IAM 6120, Mucor pusillus IAM 6122, Mucor racemosus IFO 4581, Mucor ramannianus, IAM 6128, Mucor recurvus IAM 6129, Mucor silvaticus IFO 6753, Mucor spinescens IAM 6071, Mucor subti-lissimus IFO 6338, Neurospora crassa IFO 6068 (ATCC 10336), Rhi-zopus arrhizus IFO 5780 (ATCC 11145), Rhizopus delemar ATCC 34612, Rhizopus iaponicus IFO 4758, Trichoderma viride OUT 4208 ja IFO 4847, Achromobacter cvcloclastes IAM 1013, Alcalioenes faecalis OUT 8030 (ACC 106), Bacillus sphaericus IFO 3525 (ATCC 10208), Bacillus subtilis OUT 8104 ja OUT 8106, Brevibacterium ketoolutamicum ATCC 15588, Corvnebacterium alkanolvticum ATCC 21511, Corvnebacterium hvdrocarboclasturn ATCC 15592, Corvnebacterium primorioxvdans ATCC 31015, Providencia alcalifaciens JCM 1673 (ATCC 9886), Pseudomonas mutabilis ATCC 31014, Pseudomonas putida ATCC 17426, ATCC 17453 ja ATCC 33015, Serratia liouefa-ciens ATCC 27592, Serratia marcescens ATCC 13880, ATCC 14764, ATCC 19180, ATCC 21074, ATCC 27117 ja ATCC 21212, Candida parap-silosis IFO 0585, Saccharomycopsis lipolvtica IFO 0717, IFO 0746 (NRRL Y-1095), IFO 1195, IFO 1209 (NRRL Y-1094) ja IFO 1548, Nocardia asteroides IFO 3384 (ATCC 330), IFO 3424 ja IFO 3423, Nocardia gardneri ATCC 9604, jne. Nämä voivat olla joko luonnossa esiintyviä lajeja tai mutanttikantoja, ja voivat lisäksi olla näistä mikro-organismeista saatuja bioteknisillä menetelmillä, kuten geenirekombinaatio, solufuusio, jne.
Kasvualusta ja mikrobisolut edelläolevasta mikro-organismista voidaan myös saada viljelemällä mainittua mikro-organismia kasvualustassa, jota tällä alalla tavallisesti käytetään, esimerkiksi kasvualusta, joka sisältää hiililähteitä, typpilähteitä ja tavallisesti käytettyjä epäorgaanisia suoloja, huoneenlämmössä tai kuumentaen (edullisesti noin 20-40°C) ja aerobisissa olosuhteissa pH-arvon ollessa noin 5-8, ja tarpeen vaatiessa solut erotetaan ja kerätään talteen kasvualustasta tavanomaisella tavalla .
5 95931
Viljelyn aikana on myös mahdollista nostaa entsyymiaktiivisuutta lisäämällä raseemista 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdistettä (I) kasvualustaan määrä noin 0,001% tai enemmän, erityisesti noin 0,1-1%.
Näiden mikrobisolujen prosessituotteena saattavat olla lyofili-soidut solut, asetonilla kuivatut solut, solujen itsehajonnut tuote, solu-uute, jauhettu solutuote, sonikoimalla käsitelty tuote edelläolevan mikro-organismin soluista. Lisäksi tämän keksinnön mikrobisolut tai solujen prosessituote voidaan immobili-soida tunnetun menetelmän mukaan, kuten polyakryyliamidimenetel-mä, menetelmä rikkipitoisen polysakkaridigeelin avulla (karra-geenangeelimenetelmä), algiinihappogeelimenetelmä, agargeeli-menetelmä, jne., ennen käyttöä.
Tämän keksinnön mukainen stereoselektiivinen hydrolyysireaktio voidaan suorittaa saattamalla entsyymi kosketuksiin raseemisen 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdisteen [I] kanssa sopivassa liuottimessa.
; Substraatin konsentraatio voi edullisesti olla 0,05-20%, ennen kaikkea 0,5-5%, ja reaktio tapahtuu sopivasti huoneenlämmössä tai kuumentaen, edullisesti 10-50°C:ssa, erityisen edullisesti 25-40°C:ssa. Reaktion aikana on edullista säätää reaktioseoksen pH arvoon 5-10, erityisesti 6-9. Tässä tapauksessa, koska suurin osa substraatista on veteen vaikealiukoista, on edullista suorittaa reaktio kaksifaasisessa liuotinjärjestelmässä, joka koostuu vedestä tai vesipitoisesta liuottimesta ja orgaanisesta liu-ottimesta. Esimerkkejä orgaanisesta liuottimesta voivat olla hiilitetrakloridi, kloroformi, dikloorimetaani, trikloorietylee-ni, klooribentseeni, bentseeni, tolueeni, ksyleeni, t-butyylime- ·' tyylieetteri, di-isopropyylieetteri, dietyylieetteri, metyyli-isobutyyliketoni, metyylietyyliketoni, etyyliasetaatti, butyy-liasetaatti, n-propyylialkoholi, isopropyylialkoholi, n-butyy-lialkoholi, t-butyylalkoholi, jne., erityisen edullisesti etyyliasetaatti, hiilitetrakloridi ja tolueeni. Kun entsyymilähteenä käytetään kasvualustaa tai mikrobisoluja, on edullista suorittaa edelläoleva reaktio pinta-aktiivisen aineen läsnäollessa tarkoituksena lyhentää reaktioaikaa tai kasvattaa optisesti aktiivisen 6 95931 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdisteen [I] saantoa. Tällaisena pinta-aktiivisena aineena voidaan käyttää setyylipyridiniumbro-midia, setyylitrimetyyli-ammoniumbromidia, polyetyleeniglykolia, polyoksietyleenioktyylifenyylieetteriä, jne., ja sen käytetty määrä voi edullisesti olla noin 0,0001-0,1% perustuen reaktio-seokseen.
Näin saadun optisesti aktiivisen 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdisteen [I] eristäminen reaktioseoksesta voidaan helposti toteuttaa tavanomaisella menetelmällä. Esimerkiksi, kun hydro-lyysireaktio suoritetaan veden ja orgaanisen liuottimen muodostamassa kaksifaasijärjestelmässä, 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdisteen [I] toinen optisesti aktiivinen isomeeri hydrolysoidaan siten, että se kulkeutuu vesikerrokseen, kun taas toinen optisesti aktiivinen isomeeri, joka ei ole reaktion kohteena, pysyy orgaanisessa liuottimessa, ja sen vuoksi optisesti aktiivinen 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdiste voidaan kerätä talteen kiteinä erottamalla orgaaninen liuotinkerros ja suorittamalla sille konsentrointi alipaineessa.
Tämän keksinnön mukaisesti optisesti aktiivinen 3-fenyyliglysidiinihapon esteriyhdiste [I] voidaan saada lyhyiden vaiheiden avulla ja silti erittäin puhtaina kiteinä, ja sen vuoksi menetelmä voi olla kaupallisesti edullinen valmistusmenetelmä.
Esimerkki 1 50 ml kasvualustaa (pH 7,0), joka sisälsi 0,5% glukoosia, 1% peptonia, 1% lihauutetta, 1,25% hiivauutetta ja 0,5% natriumklo-ridia, pantiin 500 ml:n vetoiseen ravistuspulloon ja steriloitiin 120°C:ssa 10 minuuttia. Kasvualustaan siirrostettiin yksi platinasilmukallinen lajia Serratia marcescens ATCC 27117, ja . viljely suoritettiin ravistaen 30°C:ssa 20 tuntia. Mikrobisolut, jotka oli kerätty sentrifugoimalla 5,4 litrasta ylläolevaa viljelmää, suspendoitiin fysiologiseen suolaliuokseen ja mikrobi-solut kerättiin edelleen sentrifugoimalla. Mikrobisolut suspendoitiin 1,8 litraan 10 mM fosfaattipuskuria (pH 7,5), joka sisälsi 0,01% setyylitrimetyyliammoniumbromidia, ja lisättiin 1,8 litraan hiilitetrakloridia, joka sisälsi 7,2 g raseemista metyy-li-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia. Sitten suoritettiin stereo-
II
7 95931 selektiivistä hydrolyysireaktiota 30°C:ssa 3 päivää, jolloin (2S, 3R)-3-(4-metoksifenyyli)glysidaatti hydrolysoitui täydellisesti. Hiilitetrakloridikerros erotettiin, konsentroitiin sitten alipaineessa, jolloin saatiin 3,0 g metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metok-sifenyyli)-glysidaattia epäpuhtaina kiteinä. Kun 3 g:aan epäpuhtaita kiteitä oli lisätty 10 ml isopropyylialkoholia, seos liuotettiin kuumentaen 80°C:een sekoittaen 20 minuuttia. Kun seos oli asteittain jäähtynyt 80°C:sta 20°C:een 3 tunnissa, seosta jäähdytettiin jäillä yksi tunti ja saostuneet kiteet suodatettiin, jolloin saatiin 2,9 g metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyy-li)-glysidaatin kiteitä.
Sp.: 87-88°C
[α]^° : -207,08° (C=l, metanoli)
Puhtaus: 100%
Alkuaineanalyysi: Lask. C:63,45; H:5,81; 0:30,74 Löyd. C:63,44; H:5,80; 0:30,76 IR-spektri: kuva 1 NMR-spektri: kuva 2 Massaspektri: kuva 3
Esimerkki 2
Esimerkissä 1 esitettyyn kasvualustaan siirrostettiin kutakin taulukossa 1 esitettyä bakteeria, ja viljeltiin 30°C:ssa 20 tuntia. Mikrobisolut, jotka oli kerätty 45 ml:sta ylläolevaa kasvualustaa sentrifugoimalla, suspendoitiin fysiologiseen suolaliuokseen ja solut kerättiin edelleen sentrifugoimalla. Mainitut solut suspendoitiin 15 ml:aan 10 mM fosfaattipuskuria (pH 7,5), joka sisälsi 0,01% setyylitrimetyyliammoniumbromidia, ja lisättiin 15 ml:aan hiilitetrakloridia, joka sisälsi 60 mg raseemista metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia, stereoselektiivisen hydrolyysin suorittamiseksi 30°C:ssa 3 päivää. Reaktion jälkeen hiilitetrakloridikerros erotettiin, jolloin saatiin reaktioseos, joka sisälsi metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia. (2R, 3S)-isomeerin pitoisuus reaktioseoksessa on sellainen kuin taulukossa 1 on esitetty, eikä reaktioseoksessa todettu käytännöllisesti katsoen lainkaan (2S, 3R)-isomeeriä, joka on sen an-tipodi.
8 95931
Ylläolevan optisen isomeerin kvantitointi suoritettiin korkean erotuskyvyn nestekromatografiällä käyttämällä kiraalista solua 0J4> 4,6 x 250 mm, valmistanut Dicel Kagaku Kogyo K.K (tässä jäljessä sama) .
Taulukko 1 Käytetty mikro-organismi (2R, 3S)-isomeerin _pitoisuus fma/mll
Achromobacter cycloclastes IAM 1013 0.8
Alcaligenes faecalis OUT 8030 0.7
Bacillus sphaericus IFO 3525 0.7
Bacillus subcilis OUT 8104 0.8
Brevihacterium ketoglutamicum ATCC 15588 0.7
Corynebacterium alkanolyticum ATCC 21511 1.8
Corynebacterium primorioxidans ATCC 31015 1.8 . Providencia alcalifaciens JCM 1673 1.8
Pseudomonas mutabilis ATCC 31014 1.8
Pseumodonas putida ATCC 17453 1.8
Serratia liguefaciens ATCC 275S2 1.6
Serratia marcescens ATCC 27117 1.8
Esimerkki 3 50 ml kasvualustaa (pH 6,2), joka sisälsi 1% glukoosia, 0,5% • peptonia, 0,3% hiivauutetta, 0,3% mallasuutetta, pantiin 500 ml:n vetoiseen ravistuspulloon, ja steriloitiin 120°C:ssa 10 minuuttia. Tähän kasvualustaan siirrostettiin yksi platinasilrau-kallinen taulukossa 2 esitettyä hometta tai hiivaa, ja hometta viljeltiin 27°C:ssa 68 tuntia sekoittaen, ja hiivaa 27°C:ssa 20 tuntia sekoittaen. 45 ml:aan ylläolevaa kasvualustaa lisättiin 15 ml hiilitetrakloridia, joka sisälsi 60 mg raseemista metyyli- 3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia, ja lisättiin edelleen setyyli- li 9 95931 trimetyyliammoniumbromidia sellainen määrä, että konsentraatiok-si saatiin 0,001% reaktioseoksessa, ja stereoselektiivisen hyd-rolyysireaktion annettiin tapahtua 30°C:ssa 3 päivää. Reaktion tapahduttua hiilitetrakloridikerros erotettiin, jolloin saatiin reaktioseos, joka sisälsi metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)-glysidaattia. (2R, 3S)-isomeerin pitoisuus reaktioseoksessa oli taulukossa 2 esitetyn kaltainen, eikä reaktioseoksessa todettu käytännöllisesti katsoen yhtään (2S, 3R)-isomeeriä, joka on sen antipodi.
Taulukko 2 Käytetty mikro-organismi (2R, 3S)-isomeerin ___pitoisuus fmo/mll
Absidia corymbifera IFO 4010 0.8
Asperigillus ochraceus IFO 4346 0.8
Asperigillus terreus IFO 6123 1.3 ·.; Fusarium oxysporum IFO 5942 0.8
Fusarium solani IFO 5232 0.7
Gibberella fujikuroi IFO 5268 0.8
Mucor globosus, IFO 6745 1.8
Mucor javanicus IFO 4572 1.8
Mucor lamprosporus IFO 6337 1.8
Mucor silvaticus IFO 6753 1.8
Neurospora erässä IFO 6068 0.7
Rhizopus arrhizus IFO 5780 1.8
Rhizopus japonicus IFO 4758 1.8
Trichoderma viride OUT 4208 0.7
Candida parspsilosis IFO 0585 0.8
Saccharomycopsis lipolytica IFO 0717 1.8 10 95931
Esimerkki 4 50 ml kasvualustaa (pH 7,3), joka sisälsi 0,4% glukoosia, 0,4% hiivauutetta ja 1,0% mallasuutetta, pantiin 500 ml:n vetoiseen ravistuspulloon, ja steriloitiin 120°C:ssa 10 minuuttia. Tähän kasvualustaan lisättiin yksi platinasilmukallinen aktinomykeet-tejä, jotka on esitetty taulukossa 3, ja viljelyä suoritettiin ravistaen 27°C:ssa 68 tuntia. 45 ml:aan ylläolevaa viljelmälien-tä lisättiin 15 ml hiilitetrakloridia, joka sisälsi 60 mg rasee-mista metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia, ja edelleen lisättiin setyylitrimetyyliammoniumbromidia sellainen määrä, että konsentraatioksi tuli 0,001% reaktioseoksessa, ja stereoselek-tiivisen hydrolyysin annettiin tapahtua 30°C:ssa 3 päivää. Reaktion jälkeen hiilitetrakloridikerros erotettiin, jolloin saatiin reaktioseos, joka sisälsi metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli-)glysidaattia. (2R, 3S)-isomeeriä on reaktioseoksessa se, mikä taulukossa 3 on esitetty, eikä reaktioseoksessa havaittu oleellisia määriä (2S, 3R)-isomeeriä, joka on sen antipodi.
Taulukko 3 Käytetty mikro-organismi (2R, 3S)-isomeerin _pitoisuus fmq/mll
Nocardia asteroides IFO 3384 1.3
Nocardia gardneri ATCC 9604 0.8
Esimerkki 5
Kun kukin taulukossa 4 esitetty lipaasi- tai esteraasientsyymi oli suspendoitu 1 ml:aan 10 mM fosfaattipuskuria, jonka pH oli säädetty jokaiselle entsyymille optimaaliseen arvoon, lisättiin 1 ml hiilitetrakloridia, joka sisälsi 4 mg raseemista metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia, ja stereoselektiivistä hydro-lyysireaktiota suoritettiin 30°C:ssa 2 päivää. Reaktion jälkeen hiilitetrakloridikerros erotettiin, jolloin saatiin reaktioseos, jossa oli metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia.
(2R, 3S)-isomeerin pitoisuus reaktioseoksessa on sellainen kuin
II
u 95931 taulukossa 4 on esitetty, eikä reaktioseoksessa todettu käytännöllisesti katsoen lainkaan (2S, 3R)-isomeeriä, joka on sen an-tipodi.
Taulukko 4 Käytetty entsyymi (2R, 3S)-isomeerin _(100 vksikköäl_pitoisuus (mq/ml)
Alkaalinen (saatu Achromobacter-lai ista. 0,7 lipaasi valmistanut Wako Junyaku)
Lipaasi (saatu lajista Chromobacterium 0,7 viscosum. valm. Toyo Jozo)
Lipaasi B (saatu lajista Pseudomonas flaoi 0,7 22-39B. valm. Wako Junyaku)
Lipaasi M (saatu lajista Mucor iavanicus. 1,6 "Amano" 10 valmistanut Amano Seiyaku)
Lipaasi (saatu lajista Rhizopus arrhizus, 1,8 tyyppi XI valmistanut sigma, USA)
Talipaasi (saatu lajista Rhizopus delemar. 1,8 valmistanut Tanabe Seiyaku) ’· Lipaasi (saatu lajista Rhizopus iaponicus. 1,8 NK-116 valmistanut Nagase Sangyo)
Lipaasi (saatu lajista Rhizopus nibius. 1,8 valmistanut Nagase Sangyo)
Lipaasi (saatu lajista Candida cvlindracia 1,6 tyyppi VII valmistanut Sigma)
Lipaasi (saatu porsaan haimasta, 0,7 valmistanut Wako Junyaku)
Esteraasi (saatu porsaan maksasta, 0,7 valmistanut Sigma, USA)
Kolesteroli- (saatu lajista Candida ruaosa. 1,5 esteraasi valmistanut Nagase Sangyo)
Esimerkki 6
Kun kukin taulukossa 5 esitetyistä lipaasientsyymeistä (10 mg) oli suspendoitu 1 ml:aan 100 mM fosfaattipuskuria, joka oli säädetty kullekin entsyymille optimaaliseen pH-arvoon, lisättiin 1 ml hiilitetrakloridia, joka sisälsi 4 mg raseemista metyyli-3- 12 95931 (4-metoksifenyyli)glysidaattia, stereoselektiivisen hydrolyysi-reaktion suorittamiseksi yhden päivän ajan. Reaktion jälkeen hiilitetrakloridikerros erotettiin reaktioseoksen saamiseksi, joka sisälsi metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia. (2R, 3S)-isomeerin pitoisuus reaktioseoksessa oli sellainen kuin taulukossa 5 on esitetty, eikä reaktioseoksessa todettu olennaisesti lainkaan (2S, 3R)-isomeeriä, joka on sen antipodi.
Taulukko 5 Käytetty entsyymi (2R, 3S)-isomeerin _f 10 mg/ml^_pitoisuus (mg/ml\
Palataasi A (saatu lajista Aspergillus niqer, 1,2 valmistanut Novo)
Lipaasi AY (saatu lajista Candida cvlindraceae, 1,3 valmistanut Amano Seiyaku)
Lipaasi (saatu lajista Candida cvlindracea. 1,8 OF-360 valmistanut Meito Sangyo)
Lipaasi CE (saatu lajista Humicola lannginosa, 1,2 ·· valmistanut Amano Seiyaku)
Palataasi M (saatu lajista Mucor miehei. 1,7 valmistanut Novo)
Lipaasi P (saatu lajista Pseudomonas fluorescens, 1,6 valmistanut Amano Seiyaku)
Lipaasi CES (saatu lajista Pseudomonas sp., 1,7 valmistanut Amano Seiyaku)
Lipaasi YS (saatu lajista Pseudomonas sp., 1,3 valmistanut Amano Seiyaku)
Lipaasi (saatu lajista Rhizopus chinensis. 1,2 valmistanut Yukijirushi)
Lipaasi (saatu lajista Rhizopus iaponicus. 1,8 ’ (Saiken)lOO valmistanut Nagase Sangyo)
Lipaasi P (saatu lajista Rhizopus iavanicus. 1,2 valmistanut Amano Seiyaku)
Lipaasi B (saatu lajista Pseudomonas frag:22-39B. 1,2 valmistanut Wako Junyaku)
Lipaasi LP (saatu lajista Chromobacterium viscosum. 0,7 valmistanut Toyo Jozo) » 95931
Lipaasi M (saatu lajista Mucor iavanicus. 1,7 valmistanut Amano Seiyaku)
Talipaasi (saatu lajista Rhizopus delemar. 1,6 valmistanut Tanabe Seiyaku)
Lipaasi N (saatu lajista Rhizopus niveus. 1,6 valmistanut Amano Seiyaku)
Esimerkki 7 500 mlsaan 0,5 M fosfaattipuskuria (pH 7,5) sisältyvä 5 g/1 li-paasia OF-360 (saatu lajista Candida cylindracea. valmistanut Meito Sangyo), lisättiin 500 mlsaan tolueenia, joka sisälsi 100 g raseemista metyyli-3-(4-metoksifenyyli)glysidaattia, ja sitten vesifaasi ja tolueenifaasi sekoitettiin sekoitusnopeuden ollessa 600 rpra, ja stereoselektiivisen hydrolyysireaktion annettiin tapahtua 6 tuntia. Reaktion jälkeen tolueenikerros erotettiin ja konsentroitiin alipaineessa, jolloin saatiin 42,5 g metyyli-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyliJglysidaattia epäpuhtaina kiteinä. Kun näihin 42,5 g:aan epäpuhtaita kiteitä oli lisätty 140 ml isopro-pyylialkoholia, seos liuotettiin kuumentamalla 80°C:ssa sekoittaen 20 minuuttia. Kun seos oli asteittain jäähdytetty 80°Cssta 20°C:een 3 tunnin kuluessa, sitä jäähdytettiin jäillä yksi tunti ja saostuneet kiteet suodatettiin, jolloin saatiin 40,2 g metyy-li-(2R, 3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidaatin kiteitä.
. Sp. : 87-88° C
(a]20 : -206,4° (C=l, metanoli)
Puhtaus: > 99%
Claims (7)
1. Menetelmä seuraavan kaavan mukaisen (2R,3S)-3-(4-metoksi-fenyyli)glysidiinihapon alempi alkyyliesterin valmistamiseksi: H3C0^^\ 0 (i) H C02R jossa R on alempi alkyyli, tunnettu siitä, että (a) annetaan entsyymin, jolla on kyky stereoselektiivisesti hydrolysoida esterisidos, vaikuttaa kaksifaasisessa liuotinjärjestelmässä, joka sisältää vettä tai vesipitoista liuotinta ja orgaanista liuotinta, raseemiseen trans-3-(4-metoksifenyyli)glysidiinihapon alempi alkyyliesteriin, jolloin sen (2S,3R)-isomeeri hydrolysoituu stereoselektiivisesti, ja (b) erotetaan ja kerätään talteen hydrolysoimaton (2R,3S)-isomeeri orgaanisesta faasista tavanomaisin menetelmin.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että entsyymi on esteraasi tai lipaasi.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että erotettava ja talteenkerättävä hydrolysoimaton ·· (2R,3S)-isomeeri on metyyli-(2R,3S)-3-(4-metoksifenyyli)gly- sidaatti.
4. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että entsyyminä käytetään mainittua entsyymiä tuottavan mikro-organismin kasvualustaa, kyseisestä kasvualustasta kerättyjä mikrobisoluja tai mikrobisoluista tehtyä entsyymiuutetta.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mikro-organismi on mikro-organismi, joka kuuluu sukuun Absidia, sukuun Asperigillus, sukuun Fusarium, sukuun Gib-berella, sukuun Mucor, sukuun Neurospora, sukuun Rhizopus. sukuun Trichoderma. sukuun Achromobacter, sukuun Alcaliqenes. su 95931 kuun Bacillus. sukuun Brevibacterium. sukuun Corvnebacterium. sukuun Providencia. sukuun Pseudomonas. sukuun Serratia. sukuun Candida, sukuun Saccharomvcopsis tai sukuun Nocardia.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että substraatin konsentraatio on 0,05-20%.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että orgaaninen liuotin on valittu ryhmästä, johon kuuluvat hiilitetrakloridi ja tolueeni. t KRAV
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22101688 | 1988-09-02 | ||
| JP22101688 | 1988-09-02 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI894022A0 FI894022A0 (fi) | 1989-08-28 |
| FI894022A FI894022A (fi) | 1990-03-03 |
| FI95931B FI95931B (fi) | 1995-12-29 |
| FI95931C true FI95931C (fi) | 1996-04-10 |
Family
ID=16760161
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI894022A FI95931C (fi) | 1988-09-02 | 1989-08-28 | Menetelmä (2R,3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidiinihapon alemman alkyyliesterin valmistamiseksi |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0362556B1 (fi) |
| KR (1) | KR960004455B1 (fi) |
| CN (1) | CN1041785A (fi) |
| AT (1) | ATE113661T1 (fi) |
| AU (1) | AU619890B2 (fi) |
| DE (1) | DE68919184T2 (fi) |
| DK (1) | DK173105B1 (fi) |
| ES (1) | ES2065957T3 (fi) |
| FI (1) | FI95931C (fi) |
| HU (1) | HU203581B (fi) |
| IE (1) | IE65881B1 (fi) |
| IL (1) | IL91453A0 (fi) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5274300A (en) | 1988-10-26 | 1993-12-28 | Sepracor, Inc. | Enzymatic hydrolysis of glycidate esters in the presence of bisulfite anion |
| US6521445B1 (en) * | 1988-10-26 | 2003-02-18 | Sepracor, Inc. | Process for preparing optically active glycidate esters |
| DE3927370A1 (de) * | 1989-08-19 | 1991-02-21 | Bayer Ag | Verfahren zur herstellung von clausenamid und neoclausenamid und deren derivate |
| US5244803A (en) * | 1989-09-13 | 1993-09-14 | Tanabe Seiyaku Co., Ltd. | Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters |
| CA2037634C (en) * | 1990-03-13 | 1995-11-21 | Takeji Shibatani | Esterase and process for preparing the same |
| JPH0779706B2 (ja) * | 1990-03-22 | 1995-08-30 | 田辺製薬株式会社 | ２―クロロ―３―ヒドロキシ―３―フエニルプロピオン酸エステル類の製法 |
| IT1249777B (it) * | 1990-05-17 | 1995-03-18 | Zambon Spa | Processo per la preparazione di intermedi per la sintesi del diltiazem |
| FR2672600B1 (fr) * | 1991-02-08 | 1994-10-14 | Synthelabo | Procede de preparation du (-)-(2r,3s)-2,3-epoxy-3-(4-methoxyphenyl) propionate de methyle. |
| FI93833C (fi) * | 1992-05-14 | 1995-06-12 | Orion Yhtymae Oy | Menetelmä propionihappojohdosten valmistamiseksi |
| EP0644940A1 (en) * | 1992-05-15 | 1995-03-29 | Syntex Pharmaceuticals International Limited | PROCESS FOR ENZYMATIC PREPARATION OF -i(S)-6-METHOXY-A-METHYL-2-MAPHTHALENEACETIC ACID |
| US6020174A (en) * | 1992-07-27 | 2000-02-01 | The Board Of Governors For Higher Education | Chemoenzymatic synthesis of the taxol C-13 side chain N-benzolyl- (2R,3S)-Phenylisoserine |
| NL9202208A (nl) * | 1992-12-18 | 1994-07-18 | Dsm Nv | Werkwijze voor de enzymatische bereiding van optisch aktieve glycidezure esters. |
| JP3794702B2 (ja) * | 1994-10-12 | 2006-07-12 | バンダービルト・ユニバーシテイ | キラル−α−第３級カルボン酸エステルの酵素的調製法 |
| US5529929A (en) * | 1995-06-07 | 1996-06-25 | Seprachem, Inc. | Optical resolution of alkyl 1,4-benzodioxan-2-carboxylates using esterase from serratia marcescens |
| US5658796A (en) * | 1995-06-07 | 1997-08-19 | Seprachem, Inc. | Optical resolution of alkyl chroman-2-carboxylates |
| IL121525A0 (en) * | 1996-08-26 | 1998-02-08 | Tanabe Seiyaku Co | Process for preparing optically active benzothiazepine compound and intermediate therefor |
| IL123352A0 (en) * | 1997-02-27 | 1998-09-24 | Tanabe Seiyaku Co | Process for preparing an optically active trans-3-substituted glycidic acid ester |
| EP0988297A2 (en) * | 1997-06-11 | 2000-03-29 | Tanabe Seiyaku Co., Ltd. | Process for preparing optically active phenyloxirane compounds |
| US7169944B2 (en) | 2002-09-25 | 2007-01-30 | Tosoh Corporation | Optically active epoxy compounds and processes for their production |
| KR100846676B1 (ko) * | 2006-04-27 | 2008-07-16 | 엔자이텍 주식회사 | 효소적 방법에 의한 광학활성 2-할로-2-(엔-치환된페닐)아세트산 에스테르와 2-할로-2-(엔-치환된페닐)아세트산의 제조 방법 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4585768A (en) * | 1984-04-10 | 1986-04-29 | Tanabe Seiyaku Co., Ltd. | 1,5-benzothiazepine derivatives and processes for preparing the same |
| DE3532026A1 (de) * | 1985-09-09 | 1987-03-19 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung optisch aktiver (alpha)-phenoxypropionsaeure und deren derivate |
| IT1189069B (it) * | 1986-03-14 | 1988-01-28 | Donegani Guido Ist | Processo per la preparazione biotecnologica della l(-)-carnitina cloruro |
| DE3752086T2 (de) * | 1986-04-16 | 1998-02-26 | Sumitomo Chemical Co | Verfahren zur Herstellung von optisch-aktiven Cyclopropancarbonsäure |
-
1989
- 1989-08-28 IL IL91453A patent/IL91453A0/xx unknown
- 1989-08-28 FI FI894022A patent/FI95931C/fi not_active IP Right Cessation
- 1989-08-31 EP EP89116104A patent/EP0362556B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-31 ES ES89116104T patent/ES2065957T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-08-31 AU AU40977/89A patent/AU619890B2/en not_active Ceased
- 1989-08-31 DE DE68919184T patent/DE68919184T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-08-31 AT AT89116104T patent/ATE113661T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-09-01 DK DK198904348A patent/DK173105B1/da not_active IP Right Cessation
- 1989-09-01 IE IE281789A patent/IE65881B1/en not_active IP Right Cessation
- 1989-09-01 KR KR1019890012612A patent/KR960004455B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1989-09-01 HU HU894539A patent/HU203581B/hu not_active IP Right Cessation
- 1989-09-02 CN CN89107005A patent/CN1041785A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0362556B1 (en) | 1994-11-02 |
| DK434889A (da) | 1990-03-03 |
| AU4097789A (en) | 1990-03-08 |
| EP0362556A1 (en) | 1990-04-11 |
| DE68919184D1 (de) | 1994-12-08 |
| FI95931B (fi) | 1995-12-29 |
| DE68919184T2 (de) | 1995-04-13 |
| FI894022A0 (fi) | 1989-08-28 |
| DK434889D0 (da) | 1989-09-01 |
| HU203581B (en) | 1991-08-28 |
| CN1041785A (zh) | 1990-05-02 |
| ATE113661T1 (de) | 1994-11-15 |
| FI894022A (fi) | 1990-03-03 |
| IE892817L (en) | 1990-03-02 |
| DK173105B1 (da) | 2000-01-17 |
| AU619890B2 (en) | 1992-02-06 |
| KR960004455B1 (ko) | 1996-04-06 |
| HUT52162A (en) | 1990-06-28 |
| IE65881B1 (en) | 1995-11-29 |
| IL91453A0 (en) | 1990-04-29 |
| KR900004711A (ko) | 1990-04-12 |
| ES2065957T3 (es) | 1995-03-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI95931C (fi) | Menetelmä (2R,3S)-3-(4-metoksifenyyli)glysidiinihapon alemman alkyyliesterin valmistamiseksi | |
| US5919672A (en) | Resolution of trans-2-(alkoxycarbonylethyl)-lactams useful in the synthesis of 1-(4-fluoro-phenyl)-3(R)- (S)-hydroxy-3-(4-fluorophenyl)-propyl!-4(S)-(4-hydroxyphenyl)-2-azetidinone | |
| Matsumae et al. | Lipase-catalyzed asymmetric hydrolysis of 3-phenylglycidic acid ester, the key intermediate in the synthesis of diltiazem hydrochloride | |
| US4962031A (en) | Process for producing optically active compounds | |
| US4985364A (en) | Preparation of cyclopropanecarboxylic acids | |
| US5244803A (en) | Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters | |
| EP0149674A1 (en) | Process for biochemical optical resulution of cyclopentenolone derivative | |
| JP3794702B2 (ja) | キラル−α−第３級カルボン酸エステルの酵素的調製法 | |
| US4415657A (en) | Process for preparation of an optically active monoalkyl ester of β-(S)-aminoglutaric acid | |
| EP0350811A2 (en) | Enzymatic resolution process | |
| US6121025A (en) | Process for producing optically active 3-quinuclidinol derivatives | |
| US5106736A (en) | Enzymatic process for enantiomer-specific perparation of mercapto alkanoic acid compounds | |
| CA2074674C (en) | Process for preparing (2s, 3r)- or (2r, 3s)-3- (alkylphenyl) glycidic acid esters using hydrolase | |
| JPH0315398A (ja) | 光学活性３―フェニルグリシッド酸エステル類化合物の製法 | |
| US5986095A (en) | Enantioselective preparation of halophenyl alcohols and acylates | |
| EP0148272B1 (en) | Process for producing optically active benzyl alcohol compounds | |
| US5459067A (en) | Method for producing optically active norborneol by ester hydrolysis | |
| US5248601A (en) | Process for preparing L(-)-carnitine chloride | |
| JPH08259552A (ja) | 光学活性フェニルグリシッド酸エステル類の製法 | |
| JP3741758B2 (ja) | 光学活性グリセロール誘導体の製法 | |
| JPH0632634B2 (ja) | 光学活性カルボン酸エステルの製造法 | |
| JPH05244992A (ja) | 酵素反応による光学活性ベンゾチアゼピン類の製造法 | |
| JPH0560919B2 (fi) | ||
| MXPA01003373A (en) | Resolution of trans-2 -(alkoxycarbonylethyl) -lactams useful in the synthesis of 1- (4-fluorophenyl) -3(r) -[3(s) -hydroxy-3 -(4-fluorophenyl) -propyl)]-4(s) -(4-hydroxyphenyl) -2-azetidinone | |
| JPH099991A (ja) | 酵素反応による光学活性ベンゾチアゼピン類化合物の製法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: TANABE SEIYAKU CO., . LTD. |