FI94415C - Menetelmä tyydyttämättömien aminohappoyhdisteiden valmistamiseksi - Google Patents

Description

94415

Menetelmä tyydyttymättömien aminohappoyhdisteiden valmistamiseksi - Förfarande för framställning av omättade amino-syraf öreningar

Keksinnön kohteena on menetelmä kaavan I

R3 r4 ίϊ J— B-C-Rg ^ (I), R, R2 mukaisten tyydyttymättömien aminohappoyhdisteiden ja niiden suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa R^ merkitsee vetyä, alkyyliä tai hydroksia, R2 merkitsee vetyä, alkyy-liä, halogeenialempialkyyliä, hydroksialempialkyyliä, alempialkoksialempialkyyliä, aryylialempialkyyliä, alempi-alkenyyliä, halogeenia tai aryyliä, R3 merkitsee vetyä, alkyyliä tai aryyliä, R4 merkitsee vetyä tai alkyyliä, R5 merkitsee mahdollisesti esteröityä tai amidoitua karbok-sia, R6 merkitsee substituoimatonta tai alempialkyylillä tai aryylialempialkyyIillä substituoitua aminoryhmää, A merkitsee substituoimatonta tai alkyylillä substituoitua, 1-3 hiiliatomia (C-atomia) sisältävää α,ω-alkyleeniä tai suoraa sidosta ja B merkitsee metyleeniä tai sidosta, edellyttäen, että A merkitsee substituoimatonta tai alkyylillä substituoitua, 1-3 C-atomia sisältävää α,ω-alky-leeniä, kun B merkitsee suoraa sidosta.

Kaavan I mukaiset yhdisteet sisältävät vähintään yhden ki-raalisen keskuksen ja ne voivat esiintyä enantiomeereinä tai enantiomeeriseoksina, kuten rasemaatteina, ja mikäli * ne sisältävät useamman kuin yhden kiraalisen keskuksen, myös diastereomeereinä tai diastereomeeriseoksina. Keksinnön mukaisten yhdisteiden hiili-hiili-kaksoissidos omaa tähteiden R2 ja R3 suhteen tai vast, tähteiden A ja B suhteen trans-konfiguraation, s.o. kaavan I mukaiset yhdisteet ovat E-ryhmän yhdisteitä.

2 94415

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa merkitsee vetyä, ovat fosfonihapokkeita (engl.: phosphonous acids), sellaiset, joissa R^ merkitsee alkyyliä, ovat fosfiinihappoja (engl.: phosphinic acids), sellaiset, joissa R1 merkitsee hydroksia, ovat fosfonihappoja (engl.: phosphonic acids).

Etuliitteenä kaavan I mukaisten yhdisteiden nimityksessä, joita nimitetään myös substituoiduiksi karboksyylihapoik-si, käytetään "fosfino" (R2 merkitsee vetyä), "fosfonyyli" (Rj merkitsee alkyyliä) ja "fosfono" (Rj^ merkitsee hydroksia) .

Esteröity karboksi on esimerkiksi alifaattisella tai ar-alifaattisella alkoholilla, kuten mahdollisesti substi-tuoidulla alempialkanolilla tai fenyylialempialkanolilla esteröity karboksi, kuten vastaava alempialkoksi- tai fe-nyylialempialkoksikarbonyyli. Etenkin tällöin on kyseessä farmaseuttisesti hyväksyttävä esteröity karboksi, kuten esim. esteröity karboksi, joka voidaan muuntaa fysiologisissa olosuhteissa karboksiksi. Kaavan I mukaisia esterei-tä voidaan nimittää myös prodrug-estereiksi.

Farmaseuttisesti hyväksyttävällä tavalla esteröity karboksi merkitsee esim. alempialkoksikarbonyyliä, korkeammassa kuin α-asemassa aminolla, mono- tai dialempialkyyliaminol-la tai hydroksilla substituoitua alempialkoksikarbonyyliä, karboksilla substituoitua alempialkoksikarbonyyliä, esim. or-karboksi-substituoitua alempialkoksikarbonyyliä, alempi-alkoksikarbonyylillä substituoitua alempialkoksikarbonyyliä, esim. a-alempialkoksikarbonyyli-substituoitua alempialkoksikarbonyyliä, aryylialempialkoksikarbonyyliä, esim. substituoimatonta tai substituoitua bentsyylioksikarbonyy-liä tai pyridyylimetoksikarbonyyliä, alempialkanoyylioksi-substituoitua metoksikarbonyyliä, esim. pivaloyylioksime-toksikarbonyyliä, alempialkanoyylioksilla tai alempialkok-silla substituoitua alempialkoksimetoksikarbonyyliä, bi-syklo[2.2. l]heptyylioksikarbonyyli-substituoitua metoksi- 3 - 94415 karbonyyliä, kuten bornyylioksikarbonyylimetoksikarbonyy-liä, 3-ftalidioksikarbonyyliä, alempialkyylillä, alempi-alkoksilla tai halogeenilla substituoitua 3-ftalidioksi-karbonyyliä tai alempialkoksikarbonyylioksi-alempialkoksi-karbonyyliä, esim. l-(metoksi- tai etoksikarbonyylioksi)-etoks ikarbonyy1iä.

Erittäin edullisia prodrug-estereitä ovat esim. korkeintaan 4 hiiliatomia sisältävät alempialkyyliesterit, kuten esim. butyyli- tai etyyliesteri, alempialkanoyylioksime-tyyliesterit, kuten esim. pivaloyylioksimetyyliesteri, korkeammassa kuin α-asemassa dialempialkyyliaminolla sub-stituoidut, 2-4 hiiliatomia jokaisessa alempialkyyli-ryhmässä sisältävät alempialkyyliesterit, kuten esim. 2-dietyyliaminoetyyliesteri, sekä pyridyy1imetyy1iesteri, kuten 3-pyridyylimetyyliesteri.

Amidoidussa karboksissa aminoryhmä merkitsee esimerkiksi mahdollisesti hydroksilla monosubstituoitua tai alifaatti-silla tähteillä mono- tai disubstituoitua aminoa, kuten aminoa, hydroksiaminoa, mono- tai dialempialkyyliaminoa tai 5-7 rengasjäsentä sisältävää alempialkyleeniaminoa. Etenkin tällöin on kyseessä farmaseuttisesti hyväksyttävä amidoitu karboksi, kuten esim. amidoitu karboksi, joka voidaan muuntaa fysiologisissa olosuhteissa karboksiksi.

Edullisia farmaseuttisesti hyväksyttäviä amideja ovat kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa Rs esiintyy karbamoyyli-nä, alempialkyylikarbamoyylinä, esim. etyylikarbamoyylinä, dialempialkyylikarbamoyylinä, esim. dietyylikarbamoyylinä tai N-(dialempialkyyliamino)alempialkyylikarbamoyylinä, esim. N-(2-dietyyliaminoetyyli)karbamoyylinä tai N-(3-di-etyyliaminopropyyli)karbamoyylinä.

Tämän keksinnön puitteissa alkyyli merkitsee tyydyttynyttä alifaattista hiilivetytähdettä, jossa on esim. korkeintaan . * 4 - 94415 12 hiiliatomia, etenkin korkeintaan 8 hiiliatomia, jolloin viimeksi mainittu alue esitetään myös käsitteellä alempi-alkyyli.

1-3 hiiliatomia sisältävä a,ω-alkyleeni on metyleeni, 1,2-etyleeni tai 1,3-propyleeni. Alkyylillä substituoitu a,ω-alkyleeni on substituoitu mielivaltaisessa asemassa.

Siten alkyylillä substituoitu metyleeni on esim. 1,1-ety-leeni, 1,l-butyleeni tai 1,1-oktyleeni, alkyylillä substituoitu 1,2-etyleeni on esim. 1,2-propyleeni, 1,2-butyleeni, 2,3-butyleeni, 1,2-pentyleeni tai 1,2-nonyleeni ja alkyylillä substituoitu 1,3-propyleeni on esim. 1,3-buty-leeni, 1,3-pentyleeni tai 1,3-dekyleeni.

Alempialkyylillä tai aryylialempialkyylillä substituoitu amino on mono- tai dialempialkyyliamino tai aryylialempi-alkyyliamino.

Aryyli merkitsee, myös sellaisissa määritelmissä kuin aro-yyli tai aryylialempialkoksikarbonyyli, aromaattisia hiili vetytähte itä, jotka ovat substituoimattomia tai alempialkyylillä, hydroksilla, suojatulla hydroksilla, alempial-koksilla, halogeenilla, aminolla, halogeenialempialkyylil-lä, hydroksialempialkyyIillä, aminoalempialkyyIillä tai nitrolla substituoituja, ja se on esim. substituoimaton tai vastaavasti substituoitu l- tai 2-naftyyli, etenkin • kuitenkin substituoimaton tai vastaavasti substituoitu fe-nyyli, kuten fenyyli, alempialkyylifenyyli, esim. metyyli-fenyyli, hydroksifenyyli, halogeenifenyyli, esim. 4-halo-geenifenyyli, kuten 4-kloorifenyyli, bentsyylioksifenyyli, * alempialkoksifenyyli, esim. metoksifenyyli, hydroksimetyy- lifenyyli, aminometyylifenyyli tai nitrofenyyli.

Edellä ja seuraavassa käytetyillä yleiskäsitteillä on seu- raavat merkitykset, mikäli niitä ei ole toisin määritelty: 5 - 94415 Käsite "alempi" merkitsee, että vastaavasti määritellyt ryhmät tai yhdisteet sisältävät korkeintaan 8, etenkin korkeintaan 4 hiiliatomia.

Alempialkyyli merkitsee esim. C^-C^alkyyliä, kuten metyyliä, etyyliä, n-propyyliä, isopropyyliä, n-butyyliä, iso-butyyliä tai tert.-butyyliä, mutta se voi merkitä myös c5-C8-alkyyliä, kuten n-pentyyliä, n-heksyyliä, n-heptyyliä tai n-oktyyliä, mutta etenkin se on metyyli.

Aryylialempialkyyli merkitsee, myös sellaisissa määritelmissä, kuten aryylialempialkyyliamino, esim. aryyli-C1-C4-alkyyliä, jossa aryylillä on edellä esitetyt merkitykset ja se merkitsee ensisijassa esim. substituoimatonta fenyyli-Cj^-^-alkyyliä, kuten bentsyyliä tai 1- tai 2-fe-nyylietyyliä.

Alempialkenyyli sisältää mieluummin korkeintaan 6 hiili-atomia ja se on sidottu sp3-hybridisoidun hiiliatomin kautta, ja se on esim. 2-propenyyli, 2- tai 3-butenyyli tai 3-pentenyyli, mutta se voi olla myös vinyyli.

Alempialkoksi merkitsee ensisijassa C^-C^-alkoksia, kuten metoksia, etoksia, n-propoksia, isopropoksia, n-butoksia, . isobutoksia tai tert-butoksia.

Halogeenin järjestysluku on etenkin 35 ja se on etenkin kloori, edelleen fluori tai bromi, mutta se voi olla myös jodi.

Halogeenialempialkyyli on esim. halogeeni-C^-C^-alkyyli, kuten fluorimetyyli, trifluorimetyyli tai 1- tai 2-kloori-etyyli.

Hydroksialempialkyyli on esim. mono- tai dihydroksi-C^-C-j-alempialkyyli, sisältää hydroksiryhmän (-ryhmät) etenkin -94415 6 korkeammassa kuin α-asemassa, ja merkitsee esim. hydroksi-metyyliä tai etenkin mono- tai dihydroksi-c2-C7-alkyyliä, kuten 2-hydroksietyyliä, 3-hydroksi- tai 2,3-dihydroksi-propyyliä, 4-hydroksi- tai 2,4-dihydroksibutyyliä, 5-hyd-roksi-, 2,5-dihydroksi- tai 3,5-dihydroksi-pentyyliä.

Alempialkoksialempialkyyli on esim. mono- tai di-^-C^-al-koksi-C^-Cj-alkyyli, se sisältää alempialkoksiryhmän (-ryhmät) esimerkiksi etenkin korkeammassa kuin α-asemassa ja on etenkin C1-C4-alkoksi-C2-C4-alkyyli, esim. 2-metoksi-, 2-etoksi-, 2-propoksi- tai 2-isopropoksi-etyyli, 3-metoksi-tai 3-etoksi-propyyli tai 3,3-dimetoksi-, 3,3-dietoksi-, 2,3-dimetoksi- tai 2,3-dietoksipropyyli tai 4,4-dimetoksi-butyyli, mutta se voi olla myös metoksi-, etoksi-, dimetoksi- tai propoksi- tai isopropoksimetyyli.

Mono- tai dialempialkyyliamino on esim. N-C1-C4-alkyyli-tai N,N-di-C1-C4-alkyyliamino, kuten metyyliamino, di-metyyliamino, etyyliamino, dietyyliamino, propyyliamino, isopropyyliamino tai butyyliamino.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden suolat ovat ensisijassa kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti käyttökelpoisia, ei-toksisia suoloja. Tällaisia suoloja muodostetaan esimerkiksi kaavan I mukaisissa yhdisteissä esiintyvästä karboksiryhmästä ja ne ovat ensisijassa metalli- tai ammo-niumsuoloja, kuten alkalimetalli- ja maa-alkalimetallisuo-loja, esim. natrium-, kalium-, magnesium- tai kalsiumsuolo-ja, sekä ammoniumsuoloja, jotka on muodostettu ammoniakin tai sopivien orgaanisten amiinien, kuten alempialkyyliamii-nien, esim. metyyliamiinin, dietyyliamiinin tai trietyyli-amiinin, hydroksialempialkyyliamiinien, esim. 2-hydroksi-etyyliamiinin, bis-(2-hydroksietyyli)-amiinin, tris-(hyd-roksimetyyli)metyyliamiinin tai tris(2-hydroksietyyli)-amiinin, karboksyylihappojen emäksisten alifaattisten este-reiden, esim. 4-aminobentsoehappo-2-dietyyliaminoetyylies- - 94415 terin, alempialkyleeniamiinien, esim. 1-etyylipiperidiinin, alempialkyleenidiamiinien, esim. etyleenidiamiinin, syklo-alkyyliamiinien, esim. disykloheksyyliamiinin, tai bentsyy-liamiinien, esim. Ν,Ν'-dibentsyylietyleenidiamiinin, bent-syylitrimetyyliammoniumhydroksidin, dibentsyyliamiinin tai N-bentsyyli-0-fenyylietyyliamiinin kanssa. Primaarisen tai sekundaarisen aminoryhmän sisältävät kaavan I mukaiset yhdisteet voivat muodostaa myös happoadditiosuoloja, esim. etenkin farmaseuttisesti hyväksyttävien epäorgaanisten happojen, kuten halogeenivetyhappojen, esim. suolahapon tai bromivetyhapon, rikkihapon, typpihapon tai fosforihapon, tai sopivien orgaanisten karboksyyli- tai sulfonihappojen, esim. etikkahapon, propionihapon, meripihkahapon, glykoli-hapon, maitohapon, fumaarihapon, maleiinihapon, viinihapon, oksaalihapon, sitruunahapon, palorypälehapon, bentsoehapon, mantelihapon, omenahapon, askorbiinihapon, pamoahapon, ni-kotiinihapon, metaanisulfonihapon, etaanisulfonihapon, hyd-roksietaanisulfonihapon, bentseenisulfonihapon, 4-tolueeni-sulfonihapon tai naftaliinisulfonihapon kanssa.

Eristykseen ja puhdistukseen voidaan käyttää myös farmaseuttisesti sopimattomia suoloja. Terapeuttiseen käyttöön tulevat ainoastaan farmaseuttisesti käyttökelpoiset, ei-toksiset suolat, jotka ovat tästä syystä etusijalla.

Keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia. Siten ne ovat esimerkiksi N-metyyli-D-asparagiinihapolle (NMDA) sensitiivisten eksitatoristen aminohappo-reseptoreiden aktiivisia ja selektiivisiä antagonisteja nisäkkäissä. Tästä syystä niitä voidaan käyttää sairauksien hoitoon, jotka reagoivat NMDA-sensitiivisten reseptoreiden salpaukseen, kuten esim. se-rebraalinen iskemia, lihasspasmit (spastisuus), konvulsiot (epilepsia), pelkotilat tai maaniset tilat.

Nämä edulliset vaikutukset voidaan osoittaa in vitro- tai ' in vivo-testiiäriestelvissä. Tällöin käytetään etenkin ni- 8 - 94415 säkkäitä, esim. hiiriä, rottia tai apinoita tai tällaisten nisäkkäiden kudoksia tai entsyymipreparaatteja. Yhdisteet voidaan antaa enteraalisesti tai parenteraalisesti, etenkin oraalisesti, tai subkutaanisesti, intravenoosisesti tai intraperitoneaalisesti, esim. gelatiinikapseleina tai vesipitoisten suspensioiden tai liuosten muodossa. Käytettävä in vivo-annos on 0,1 - 600 mg/kg, etenkin 1 - 300 mg/kg. in vitro yhdisteitä voidaan käyttää vesiliuosten muodossa, jolloin konsentraatiot voivat olla 10-4-molaari-sia ja 10“8-molaarisia liuoksia.

NMD-sensitiivisiin eksitatorisiin aminohappo-reseptoreihin kohdistuva inhiboiva vaikutus voidaan määrittää in vitro siten, että julkaisun G. Fagg ja A. Matus, Proc. Nat.

Acad. Sei., USA, 8i, 6876-80 mukaisesti mitataan, missä määrin L-3Hglutamiinihapon sitoutuminen NMDA-sensitiivi-siin reseptoreihin estyy. In vivo inhiboiva vaikutus NMD-sensitivisiin eksitatorisiin aminohappo-reseptoreihin näkyy siten, että NMDA-indusoidut konvulsiot hiiressä estyvät.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden antikonvulsiiviset ominaisuudet voidaan osoittaa edelleen niiden tehokkuudella estettäessä audiogeenisesti aiheutetut kohtaukset DBA/2-hiirissä (Chapman et ai., Arzneimittel-Forsch. 3±, 1261, 1984) .

Antikonvulsiiviset ominaisuudet voidaan osoittaa edelleen keksinnön mukaisten yhdisteiden tehokkuudella sähköiskun antagonisteina hiiressä tai rotassa.

• · . .

Viitteen tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden anksiolyyt-tisestä aktiivisuudesta antaa niiden tehokkuus Cook/David-sonin konflikti-mallissa (Psychopharmacologia IS, 159-168 (1968)).

9 - 94415

Kaavan I mukaisten yhdisteiden hyvä tehokkuus riippuu yllättävän suuressa määrin kaksoissidoksen konfiguraatiosta.

Siten julkaisusta Agric. Biol. Chem. 4JL, 573 - 579 (1979), B.K. Park et ai., tunnetun D-2-amino-5-fosfono-3-cis-pen-teenihapon rasemaatti osoittautuu paljon huonommaksi esim. kyvyssään sitoutua NMDA-sensitiiviseen reseptoriin kuin keksinnön mukaisesti valmistetun 2-amino-5-fosfono-3-trans-penteenihapon rasemaatti (esimerkkiosassa näitä yhdisteitä nimitetään ME-ryhmänM yhdisteiksi). Erittäin tehokkaiksi ovat osoittautuneet kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa ryhmän Rg sisältävällä C-atomilla on R-konfiguraa-tio.

Etusijalla ovat kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R2 merkitsee vetyä, alkyyliä tai aryyliä.

Keksinnön kohteena on ensisijassa menetelmä kaavan I mukaisten yhdisteiden sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joissa yhdisteissä R^ merkitsee vetyä, korkeintaan 12 hiiliatomia sisältävää alkyyliä tai hydroksia, R2 merkitsee vetyä, alempialkyyliä, halogeenialempialkyyliä, hydroksialempialkyyliä, alempial-koksialempialkyyliä, substituoimatonta tai fenyyliosassa substituoitua fenyylialempialkyyliä, alempialkenyyliä, ha-·. logeenia tai substituoimatonta tai substituoitua fenyyliä, R3 merkitsee vetyä, alempialkyyliä tai substituoimatonta tai substituoitua fenyyliä, R4 merkitsee vetyä tai alempialkyyliä, R5 merkitsee vapaata tai farmaseuttisesti hyväksyttävää esteröityä tai amidoitua karboksia, Rg merkitsee aminoa, mono- tai dialempialkyyliaminoa, A merkitsee subs-... tituoimatonta tai alempialkyylillä substituoitua, 1-3 hiiliatomia sisältävää α,ω-alkyleeniä tai sidosta ja B merkitsee metyleeniä tai sidosta, edellyttäen, että A on muu kuin sidos, kun B merkitsee sidosta, jossa fenyylin substi-tuentteina on alempialkyyli, hydroksi, alempialkoksi, halogeeni, amino, halogeenialempialkyyli, hydroksialempialkyy- ♦ j - 94415 10 li, aminoalempialkyyli ja nitro ja alemmat tähteet sisältävät esimerkiksi korkeintaan 8 C-atomia.

Tällöin etusijalla on menetelmän käyttö kaavan I mukaisten yhdisteiden, etenkin tällaisten yhdisteiden aminoryhmän sisältävän atomin suhteen R-enantiomeerien sekä farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joissa yhdisteissä tähteillä R^ - R4, A ja B on edellä määritellyt merkitykset ja toisaalta R5 merkitsee alempialkoksikarbo-nyyliä tai aminolla, mono- tai dialempialkyyliaminolla, hydroksilla tai alempialkanoyylioksilla substituoitua alempialkoksikarbonyyliä ja Rg merkitsee aminoa tai alem-pialkyyliaminoa tai toisaalta R5 merkitsee karboksia ja Rfi merkitsee aminoa.

Samoin etusijalla on menetelmän käyttö kaavan I mukaisten yhdisteiden, etenkin tällaisten yhdisteiden aminoryhmän sisältävän atomin suhteen R-enantiomeerien ja farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joissa yhdisteissä tähteillä R^, R4 - Rg sekä A ja B on välittömästi edellä mainitut merkitykset ja joissa R2 ja R3 merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä, alempialkyyliä, fenyy-liä tai alempialkyylillä, hydroksilla, alempialkoksilla, halogeenilla, aminolla, halogeenialempialkyylillä, hydrok-.·. sialempialkyylillä, aminoalempialkyylillä tai nitrolla substituoitua fenyyliä.

Keksinnön kohteena on ennen kaikkea menetelmä kaavan I mukaisten yhdisteiden, etenkin tällaisten yhdisteiden aminoryhmän sisältävän atomin suhteen R-enantiomeerien ja far-... maseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joissa yhdisteissä R^ merkitsee vetyä, korkeintaan 12 hiiliatomia sisältävää alkyyliä tai hydroksia, R2 merkitsee vetyä, alempialkyyliä, fenyyliä, halogeenifenyyliä tai fe-nyylialempialkyyliä, R3 ja R4 merkitsevät vetyä tai alempialkyyliä, ja toisaalta R5 merkitsee alkoksikarbonyyliä H . 94415 tai hydroksialempialkoksikarbonyyliä ja Rg merkitsee ami-noa tai monoalkyyliaminoa tai toisaalta R5 merkitsee kar-boksia ja R6 merkitsee aminoa, jolloin kulloinkin A merkitsee substituoimatonta tai alempialkyylillä substituoi-tua, 1-3 hiiliatomia sisältävää α,ω-alkyleeniä tai sidosta ja B merkitsee metyleeniä tai sidosta, edellyttäen, että A on muu kuin sidos, kun B merkitsee sidosta.

Keksinnön kohteena on etenkin menetelmä kaavan I mukaisten yhdisteiden, etenkin tällaisten yhdisteiden aminoryhmän sisältävän atomin suhteen R-enantiomeerien ja farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joissa yhdisteissä R3 merkitsee vetyä, korkeintaan 12 hiiliatomia sisältävää alkyyliä tai hydroksia, R2 merkitsee vetyä, alempialkyyliä tai halogeenifenyyliä, R3 merkitsee vetyä tai halogeenifenyyliä, R4 merkitsee vetyä ja toisaalta R5 merkitsee alempialkoksikarbonyyliä tai hydroksialempial-koksikarbonyyliä ja Rg merkitsee aminoa tai monoalempial-kyyliaminoa tai toisaalta Rg merkitsee karboksia ja Rg merkitsee aminoa, jolloin kulloinkin A merkitsee 1-3 hiiliatomia sisältävää α,ω-alkyleeniä tai sidosta ja B merkitsee metyleeniä tai sidosta, edellyttäen, että A on muu kuin sidos, kun B merkitsee sidosta.

Keksinnön kohteena on etenkin menetelmä kaavan I mukaisten yhdisteiden, etenkin tällaisten yhdisteiden aminoryhmän sisältävän atomin suhteen R-enantiomeerien sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joissa yhdisteissä R1 merkitsee vetyä, alempialkyyliä tai hydroksia, R2 merkitsee vetyä tai alempialkyyliä, R3 ja R4 « ··. merkitsevät vetyä ja toisaalta R5 merkitsee alempialkoksi karbonyyliä tai toisaalta karboksia ja R6 merkitsee aminoa, jolloin kulloinkin A merkitsee 1-3 hiiliatomia sisältävää α,ω-alkyleeniä ja B merkitsee sidosta.

Keksinnön kohteena on aivan ensisijassa menetelmä kaavan 1 . mukaisten yhdisteiden, etenkin tällaisten yhdisteiden ami- 9 i2 - 94415 noryhmän sisältävän atomin suhteen R-enantiomeerien sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, joissa yhdisteissä R^ merkitsee hydroksia, R2 merkitsee vetyä tai alempialkyyliä, R3 ja R4 merkitsevät vetyä ja R5 merkitsee alempialkoksikarbonyyliä tai karbok-sia, R6 merkitsee aminoa, A merkitsee metyleeniä ja B merkitsee sidosta.

Keksinnön kohteena on nimenomaan esimerkeissä esitettyjen yhdisteiden ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistus.

Keksinnön mukainen menetelmä on tunnettu siitä, että kaavan I* I* x-aV-6-?-25 («>.

Ä. 26 mukainen yhdiste, jossa tähteillä R2, R3, R4, A ja B on kaavan I yhteydessä määritellyt merkitykset, tähteellä Z5 on tähteen R5 merkitys tai se merkitsee suojattua karbok-.·, siä, Z6 merkitsee suojattua ryhmää Rg ja X merkitsee reak tiokyky istä esteröityä hydroksia, saatetaan reagoimaan kaavan

OR

Ζ,-P (HI) Z2 mukaisen yhdisteen kanssa, jossa merkitsee suojattua hydroksia, Z2 merkitsee vetyä, alkyyliä tai suojattua hydroksia ja R merkitsee eetteröivää ryhmää, siten, että saadussa kaavan i3 - 94415 9» R4 o 1 II —B —C —Zg (IV) z'-?-A-f i.

Z2 R2 mukaisessa välituotteessa suojatusta hydroksiryhmästä Z1 ja mahdollisesti Z2 vapautetaan hydroksi, suojatusta ami-noryhmästä Zg amino ja mahdollisesti läsnä olevasta suojatusta karboksiryhmästä Z5 karboksi käsittelemällä trialem-pialkyylihalogeenisilaanilla halogenoidussa alifaattisessa hiilivedyssä -25 - +50°C:ssa ja solvolysoimalla, ja menetelmän mukaisesti saatavassa yhdisteessä, jossa R5 merkitsee esteröityä tai amidoitua karboksia, muunnetaan es-teröity tai amidoitu karboksiryhmä karboksiksi ja/tai haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muunnetaan suolaksi tai saatu suola joksikin toiseksi suolaksi tai kaavan I mukaiseksi vapaaksi yhdisteeksi ja/tai haluttaessa erotetaan optinen isomeeri saadun kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen suolan stereoisomeeristen muotojen seoksesta.

Julkaisussa DE 3,211,566 kuvataan dialkyylifosfonoryhmien muuntamista käsittelemällä trimetyylibromisilaanilla bis-*. (trimetyylisilyyli)fosfonossa, jolloin esteröity karboksi säilyy, ja vapauttamalla fosfono kuumentamalla alempialka-nolin kanssa. Julkaisussa DD 212,739 kuvataan alkoksikar-bonyylin muuntamista käsittelemällä trimetyylijodisilaa-nilla trimetyylisilyylioksikarbonyylissä ja vapauttamalla fosfono silyylisuojatusta fosfonoryhmästä ja samanaikai-sesti amino silyylisuojatusta aminoryhmästä samoin kuin karboksi trimetyylisilyylioksikarbonyylistä käsittelemällä ekvimolekulaarisella määrällä alempialkanolia.

Julkaisun DE 3,211,566 mukainen reaktio tapahtuu ilman liuotinta. Pelkällä trimetyylibromisilaanikäsittelyllä ei ·· 94415 14 siis saada aikaan fosfonon vapautumista. Julkaisun DD 212,739 mukaan saadaan käsittelemällä trimetyylijodisilaa-nilla tetrahydrofuraanissa samanaikaisesti lämmittäen aikaan vaikutus, jonka johdosta esteröity karboksi lohkeaa. Ankarissa olosuhteissa saattaa tapahtua myös esterin loh-keaminen. Näin ollen pelkkä käsittely jollakin trialkyyli-halogeenisilaanilla toisaalta voi olla riittämätön P- ja N- suojauksen poistoon ja toisaalta voi lohkaista myös karboksylaattiesterin.

Keksinnön mukaisen menetelmän mukaan käsittely trialkyyli-halogeenisilaanilla suoritetaan käyttäen liuottimena halo-geenialkaania lämpötila-alueella, joka on 0°C:sta huoneenlämpötilaan, ja solvolysoimalla. Jälkikäsittely epoksial-kaanilla ei ole välttämätön, kuten hakemuksemme esimerkeissä 4 ja 6-8 osoitetaan. Se saa aikaan ainoastaan ylimääräisen halogeenivetyhapon poistumisen eikä siten ole keksinnön kannalta tunnusomainen vaihe. Sama pätee myös karboksin välisuojaukseen silylointiainekäsittelyn aikana.

Kaavan IV mukaisissa välituotteissa suojattu hydroksi Z1 ja/tai Z2 on esimerkiksi alifaattisella alkoholilla eette-röity hydroksi, kuten mahdollisesti halogeenilla tai korkeammassa kuin α-asemassa hydroksilla, oksolla, alempial-.·, koksilla, alempialkanoyylioksilla ja/tai mono- tai dialem- pialkyyliaminolla substituoidulla alempialkanolilla, alem-pialkenolilla tai alempialkynolilla eetteröity hydroksi ja se merkitsee esimerkiksi alempialkoksia, halogeenialempi-alkoksia tai vastaavaa hydroksi-, okso-, alempialkoksi-, alempialkanoyylioksia tai mono- tai dialempialkyyliamino-.. alempialkoksia. Yhdisteet IV, joissa Z1 ja/tai Z2 merkit see eetteröityä hydroksia, ovat fosforipitoisen happoryh-män estereitä ja riippuen tähteen R·^ merkityksestä fosfo-nihapoke-estereitä, fosfiinihappoestereitä tai fosfonihap-poestereitä. Parhaimpia estereitä ovat kulloinkin kyseessä olevat alempialkyyliesterit ja hydroksialempialkyylieste-v rit.

X5 - 94415

Kaavan IV mukaisissa välituotteissa ryhminä Z6 ovat esimerkiksi asyylillä substituoidut ryhmät R6, s.o. mahdollisesti alempialkyylillä tai aryylialempialkyylillä N-sub-stituoitu asyyliamino, jossa asyyli on orgaanisen, esim. korkeintaan 18 hiiliatomia sisältävän hapon, etenkin mahdollisesti esim. halogeenilla, aminolla tai fenyylillä substituoidun alkaanikarboksyylihapon tai mahdollisesti esim. halogeenilla, alempialkoksilla tai nitrolla substituoidun bentsoehapon tai hiilihappopuoliesterin asyylitäh-de. Tällaisia asyyliryhmiä ovat esimerkiksi alempialka-noyyli, kuten formyyli, asetyyli tai propionyyli, halogee-nialempialkanoyyli, kuten 2-halogeeniasetyyli, etenkin 2-fluori-, 2-bromi-, 2-jodi-, 2,2,2-trifluori- tai 2,2,2-triklooriasetyyli, aroyyli, kuten mahdollisesti substi-tuoitu bentsoyyli, esim. bentsoyyli, halogeenibentsoyyli, kuten 4-klooribentsoyyli, alempialkoksibentsoyyli, kuten 4-metoksibentsoyyli tai nitrobentsoyyli, kuten 4-nitro-bentsoyyli. Etenkin sopivia ovat myös alempialkenyyli-oksikarbonyyli, esim. allyylioksikarbonyyli, tai ennen kaikkea mahdollisesti 1-tai 2-asemassa substituoitu alem-pialkoksikarbonyyli, kuten alempialkoksikarbonyyli, esim. tert-butoksi-. edelleen metoksi- tai etoksikarbonyyli, edelleen mahdollisesti substituoitu bentsyylioksikarbonyy-li, esim. bentsyylioksikarbonyyli tai 4-nitrobentsyyliok- ,·. sikarbonyyli, tai aroyylimetoksikarbonyyli, jossa aroyy- liryhmä merkitsee mahdollisesti esim. halogeenilla, kuten bromilla substituoitua bentsoyyliä, esim. fenasyylioksi-karbonyyli tai bromifenasyylioksikarbonyyli.

Edelleen vastaavassa asyyliaminoryhmässä Z6 asyyli voi ..1 merkitä aminolla ja/tai fenyylillä, karbamoyylillä, kar- boksilla, imidatsolyylillä, alempialkyylitiolla, tetrahyd-ropyrrolyylillä, hydroksilla, indolyylillä tai hydroksife-nyyIillä substituoitua alkanoyyliaminoa, niin että näillä tarkoitetaan esim. aminohappojen, esim. luonnossa esiintyvien aminohappojen, kuten alaniinin, asparagiinin, aspar- * « 16 - 94415 tiinin, glysiinin, histidiinin, isoleusiinin, leusiinin, lysiinin, metioniinin, fenyylialaniinin, proliinin, serii-nin, treoniinin, tryptofaanin, tyrosiinin tai valiinin asyylitähteitä, samoin näihin kuuluvat oligopeptidien, esim. di- tai tripeptidien, kuten alaniinista, asparagii-nistä tai asparagiinihaposta koostuvien oligopeptidien asyylitähteet.

Edelleen suojattu amino Z6 voi merkitä diasyyliaminoryh-mää. Tässä diasyyli merkitsee esim. kahta edellä määriteltyä asyylitähdettä, tai diasyyli on esimerkiksi orgaanisen, esim. korkeintaan 1Z hiiliatomia sisältävän dikar-boksyylihapon, etenkin vastaavan aromaattisen dikarboksyy-lihapon, kuten ftaalihapon asyylitähde. Tällainen ryhmä on ensisijassa ftaali-imido.

Tämän lisäksi suojattu amino Z6 voi olla myös substituoi-dulla alempialkoksikarbonyylillä suojattu amino, kuten 2-halogeenialempialkoksikarbonyylillä, esim. 2,2,2-trikloo-rietoksikarbonyylillä, 2-kloorietoksikarbonyylillä, 2-bro-mietoksikarbonyyIillä tai 2-jodietoksikarbonyylillä, tai 2-(tris-substituoitu-silyyli)-etoksikarbonyylillä, kuten 2-trialempialkyylisilyylietoksikarbonyylillä, esim. 2-tri-metyylisilyylietoksikarbonyylillä tai 2-(di-n-butyyli-me-tyyli-silyyli) -etoksikarbonyylillä, tai 2-triaryylisilyy-li-etoksikarbonyylillä, kuten 2-trifenyylisilyylietoksi-karbonyylillä substituoitu amino tai eetteröity merkap-toamino tai silyyliamino, tai se voi esiintyä enamino-, nitro- tai atsidoryhmänä. Eetteröity merkaptoryhmä on ensisijassa mahdollisesti alempialkyylillä, kuten metyylillä .. tai tert-butvvlillä. alempialkoksilla, kuten metoksilla, halogeenilla, kuten kloorilla tai bromilla ja/tai nitrolla substituoitu fenyylitioaminoryhmä tai pyridyylitioamino-ryhmä. Vastaavia ryhmiä ovat esimerkiksi 2- tai 4-nitrofe-nyylitioamino tai 2-pyridyylitioamino. Silyyliaminoryhmä on ensisijassa orgaaninen silyyliaminoryhmä. Näissä pii- it - 94415 atomi sisältää substituentteina etenkin alempialkyylin, esim. metyylin, etyylin, n-butyylin tai tert-butyyIin, edelleen aryylin, esim. fenyylin. Sopivia silyyliryhmiä ovat ensisijassa trialempialkyylisilyyli, etenkin trime-tyylisilyyli tai dimetwli-tert-butwlisilwli. Enamino-ryhmät sisältävät 2-aseman kaksoissidoksessa elektroneja puoleensa vetäviä substituentteja, esimerkiksi karbonyyli-ryhmän. Tämän tyyppisiä suojaryhmiä ovat esimerkiksi 1-asyyli-alempialk-l-en-2-yyli-tähteet, joissa asyyli merkitsee esim. alempialkaanikarboksyylihapon, esim. etikka-hapon, mahdollisesti esim. alempialkyylillä, kuten metyylillä tai tert-butvvlillä. alempialkoksilla, kuten metok-silla, halogeenilla, kuten kloorilla ja/tai nitrolla subs-tituoidun bentsoehapon, tai etenkin hiilihappopuolieste-rin, kuten hiilihappo-alempialkyylipuoliesterin, esim. -metyylipuoliesterin tai -etyylipuoliesterin vastaavaa tähdettä, ja alempialk-l-eeni merkitsee etenkin 1-propee-nia. Vastaavia suojaryhmiä ovat ensisijassa 1-alempial-kanoyyli-prop-l-en-2-yyli, esim. l-asetyyli-prop-l-en-2-yyli, tai l-alempialkoksikarbonyyli-prop-l-en-2-yyli, esim. l-etoksikarbonyyli-prop-l-en-2-yyli.

Suojattu karboksi Z5 on on suojattu tavanomaisesti este-röidyssä muodossa, jolloin esteriryhmä voidaan lohkaista helposti pelkistävissä, kuten hydrogenolyyttisissä, tai solvolyyttisissä, kuten asidolyyttisissä tai hydrolyytti-sissä, kuten happamasti, emäksisesti tai neutraalisti hyd-rolyyttisissä olosuhteissa. Suojattu karboksiryhmä voi olla edelleen fysiologisissa olosuhteissa lohkaistava tai helposti joksikin toiseksi karboksiryhmäksi funktionaali-·· sesti muunnettava karboksiryhmä, kuten joksikin toiseksi esteröidyksi karboksiryhmäksi muunnetteva esteröity karboksiryhmä. Tällaiset esteröidyt karboksiryhmät sisältävät esteröivinä ryhminä ensisijassa silyyliryhmiä, etenkin trialempialkyylisilyyliryhmiä, edelleen 1- tai 2-asemassa sopivasti substituoituja alempialkyyliryhmiä. Edullisia • , ψ « - '94415 esteröidyssä muodossa esiintyviä karboksiryhmiä ovat mm. trialempialkyylisilyylioksikarbonyyli, esim. trimetyylisi-lyylioksikarbonyyli, (hetero-)aryylimetoksikarbonyyli, jossa on 1 - 3 aryylitähdettä tai yksi roonosyklinen hete-roaryylitähde, jolloin nämä on mahdollisesti mono- tai poly substi tuo itu esim. alempialkyylillä, kuten tert-alempi-alkyylillä, esim. tert-butvvlillä.halogeenilla. esim. kloorilla ja/tai nitrolla. Esimerkkeinä tällaisista ryhmistä mainittakoon mahdollisesti, esim. edellä mainitulla tavalla substituoitu bentsyylioksikarbonyyli, esim. 4-nit-robentsyylioksikarbonyyli, mahdollisesti, esim. yllä esitetyllä tavalla substituoitu difenyylimetoksikarbonyyli, esim. difenyylimetoksikarbonyyli tai trifenyylimetoksikar-bonyyli, tai mahdollisesti yllä esitetyllä tavalla substituoitu pikolyylioksikarbonyyli, esim. 4-pikolyylioksikar-bonyyli, tai furfuryylioksikarbonyyli, kuten 2-furfuryyli-oksikarbonyyli.

Suojattu hydroksi Z1 ja/tai Z2 on etenkin alempialkoksi, kuten metoksi, etoksi tai isopropyylioksi, suojattu kar-boksi on trialempialkyylisilyylioksikarbonyyli, kuten tri-metyylisilyylioksikarbonyyli ja suojattu, mahdollisesti alempialkyylillä tai aryylialempialkyylillä substituoitu amino Z6 on alempialkanoyyliamino, ennen kaikkea formyy-liamino, N-alempialkanoyyli-N-alempialkyyliamino, ennen kaikkea N-fonnyyli-N-alempialkyyli-amino, esim. N-formyy-li-N-metyyli-amino, tai alempialkoksikarbonyyliamino, etenkin tert-butwlioksikarbonwliamino.

Trialempialkyylihalogeenisilaaneja ovat esimerkiksi tri-alempialkyylijodisiläänit tai etenkin trialempialkyylibro-misilaanit, etenkin sellaiset, joissa alempialkyyliryhmät merkitsevät identtisiä C1-C4-alkyylitähteitä. Etenkin edullinen on trimetyylibromisilaani, toisella sijalla tri-metyylijodisilaani. 1 · - 94415 19

Suojattujen ryhmien vapauttaminen, s.o. hydroksin vapauttaminen suojatuista hydroksiryhmistä Z^ ja/tai Z2, karbok-sin vapauttaminen suojatuista karboksiryhmistä Z5 ja/tai mahdollisesti alempialkyylillä tai fenyylialempialkyylillä substituoidun aminon vapauttaminen suojatuista aminoryh-mistä Z6 käsittelemällä trialempialkyylihalogeenisilaanil-la tapahtuu inertissä liuottimessa, kuten halogenoidussa alifaattisessa hiilivedyssä, esim. dikloorimetaanissa tai toisella sijalla tri- tai tetrakloorimetaanissa, trikloo-rietaanissa tai tetrakloorietaanissa, n. -25 - +50eC:n, etenkin n. 0 - n. 30°C:n, esim. huoneen lämpötilan alueella olevissa lämpötiloissa, s.o. n. 15 - n. 25°C:n lämpötilassa, edullisesti pitkälti vedettömissä olosuhteissa ja inertin kaasun, esim. argonin tai typen atmosfäärissä.

Loppuvaiheet suoritetaan sinänsä tunnetulla tavalla, jolloin käytetään edullisesti etenkin kahta puhdistuskäsitte-lyä. Raakatuote voidaan joko muuntaa helposti haihtuvaksi johdannaiseksi, esim. silyloimalla ja ottaa sellaisenaan talteen tislaamalla ja desilyloida tämän jälkeen, tai raa-katuotteeseen sekoitetaan ainetta, joka reagoi ylimääräisen hapon, kuten halogeenivetyhapon kanssa ja poistaa sen näin. Kysymykseen tulevat esim. yhdisteet, joihin vastaava happo voi liittyä, esim. alempialkyleenioksidit (epoksi-.·. dit), kuten propyleenioksidi.

Jos on saatava kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa R2 merkitsee esteröityä tai amidoitua karboksia, kuten alem-pialkoksikarbonyyliä tai karbamoyyliä, kaavan IV mukaiset lähtöaineet ja menetelmän olosuhteet valitaan siten, että .1!:1 viimeisessä vaiheessa vapautetaan tosin Z^, Z2 ja Z6, mut ta sitä vastoin Z5, joka merkitsee haluttua ryhmää R5, pysyy muuttumattomana tässä menetelmän vaiheessa.

Erään erittäin edullisen suoritusmuodon kohteena on siten kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus, joissa Rs mer- « • » 20 - 94415 kitsee Cj-^-alkoksikarbonyyliä ja Rg merkitsee aminoa.

Tämän suoritusmuodon mukaisesti lähdetään mieluummin kaavan IV mukaisista yhdisteistä, joissa ja Z2 merkitsevät alempialkoksia tai korkeammassa kuin etuasemassa halogeenilla, kuten kloorilla substituoitua alempialkoksia, Z5 merkitsee C1-C4-alkoksikarbonyyliä ja Z6 merkitsee alempi-alkanoyyliaminoa, kuten formyyliaminoa, tai alempialkoksi-karbonyyliaminoa, kuten tert-butvylioksikarbonyvliaminoa♦ Lähdettäessä tällaisista kaavan IV mukaisista yhdisteistä suojattujen ryhmien vapauttamista inertissä liuottimessa, kuten halogenoidussa hiilivedyssä, esim. dikloorimetaanis-sa, huoneen lämpötilan alueella olevissa lämpötiloissa reagenssilla, kuten trimetyylibromisliaanilla voidaan ohjata käsittelemällä tämän jälkeen alempialkanolilla, kuten etanolilla, ja halogeenivety-sieppaajalla, kuten alifaat-tisella epoksidillä, etenkin epoksialempialkaanilla, esim. propyleenioksidilla, siten, että saadaan välittömästi kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa merkitsee hydroksia, R5 merkitsee C1-C4-alkoksikarbonyyliä, R6 merkitsee aminoa ja muuttujilla R2, R3 ja R4 on kaavan I yhteydessä esitetyt merkitykset.

Tätä menetelmää käytetään etenkin kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa A merkitsee metyleeniä tai 1,3-propyleeniä ja B merkitsee sidosta, R3 ja R4 merkitsevät vetyä ja R2 merkitsee korkeintaan 4 hiiliatomia sisältävää alkyyliä, kuten metyyliä.

Erään toisen, samoin edullisen suoritusmuodon kohteena on kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus, joissa R5 mer-

:* kitsee karboksia. Tässä tapauksessa lähdetään kaavan IV

mukaisista yhdisteistä, joissa Z^ ja Z2 merkitsevät alempialkoksia tai korkeammassa kuin α-asemassa halogeenilla, kuten kloorilla substituoitua alempialkoksia, Zg merkitsee mahdollisesti suojattua, esim. Ν,Ο-bis-trimetyylisilyyli-asetamidilla silyloitua karboksia ja Z6 merkitsee alempi- t • · 2i - 94415 alkoksikarbonyyliaminoa, etenkin α-haaratunutta alempial-koksikarbonyyliaminoa, kuten tert-butvv1ioksikarbonyy-liaminoa. Tässä tapauksessa karboksiryhmä suojataan edullisesti, joskaan ei välttämättä, välillisesti, esimerkiksi käsittelemällä silylointiaineella, kuten N,0-silyylialem-pialkaanihappoamidilla, esim. Ν,Ο-trimetyylisilyyliaset-amidilla.

Kaavan II mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa esim. siten, että kaavan Z5-JH-Z5 (V) , Ζβ mukainen N-suojattu aminomalonihappoesteri, jossa Z5 ja Z5' merkitsevät samanlaisia tai erilaisia esteröityjä kar-boksiryhmiä, esim. alempialkoksikarbonyyliryhmiä, saatetaan reagoimaan sinänsä tunnetulla tavalla kaavan f3 I—Β_χ· (VI) Χ-Α-γ K2 mukaisten yhdisteiden kanssa, joissa X ja X' merkitsevät toisistaan riippumatta reaktiokykyistä esteröityä hydrok-.· siä, kuten halogeenia. Näin saadut kaavan ka li , (VII) X-A-?/ Z* R.2 • ♦ · ♦ mukaiset yhdisteet voidaan muuntaa kaavan II mukaisiksi yhdisteiksi, joissa R4 merkitsee vetyä, siten, että ne saippuoidaan ja dekarboksyloidaan esim. hydrolyyttisissä olosuhteissa, kuten happaman hydrolyysin olosuhteissa, esim. halogeenivetyhapoilla, kuten suolahapolla, etenkin 1 · • · 22 94415 lämmittäen tai ne dealkoksikarbonyloidaan ilman edeltävää saippuointia kuumentaen vesipitoisessa aproottisessa liuot-timessa, kuten dimetyylisulfoksidissa aikaiihalogenidin, kuten natriumkloridin läsnäollessa.

Tämä muunnelma soveltuu siten etenkin kaavan II mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R4 merkitsee vetyä, Z5 merkitsee vapaata tai esteröityä karboksia ja Zg merkitsee suojattua aminoa, kuten alempialkanoyyliaminoa.

Välituotteet II, joissa A merkitsee mahdollisesti alkyy-lillä substituoitua metyleeniä, B merkitsee sidosta, X merkitsee halogeenia ja Z6 merkitsee formyyliaminoa, voidaan valmistaa edelleen siten, että kaavan /** D-Cf (VIII), Π0 mukainen yhdiste, jossa D merkitsee mahdollisesti alkyylil-lä substituoitua metylideeniä, kuten vastaava a,/3-tyydyt-tymätön aldehydi, esim. akroleiini tai metakroleiini saatetaan reagoimaan α-isosyaanietikkahappojohdannaisen, kuten a-isosyaanietikkahappoalempialkyyliesterin kanssa. Sopivassa katalyysissä, kuten alempiarvoisilla, s.o. alkuai-' neiden jaksollisen järjestelmän ryhmien I ja II metalleis ta johdetuilla metallisuoloilla, esim. vastaavilla metal-lioksideilla tai metallihalogenideilla, kuten sinkkiklori-dilla, kadmiumkloridillä, hopeaoksidilla tai etenkin kuparioksidilla tai kulta-I-tetrafluoriboraatin ja alifaattis-ten tai sykloalifaattisten isosyanidien komplekseilla, *: esim. bis(sykloheksyyli-isosyanidi)kulta(I)tetrafluorobo- raatilla saadaan näin sinänsä tunnetulla tavalla kaavan « 23 94415 D-Cxf! /s i—i ux> • ' mukaisia 5-vinyyli-2-oksatsoliini-4-karboksyylihappojohdannaisia, esim. -estereitä, jotka voidaan muuntaa kaavan OH Ru Λ—C—Z5 (X)

D= · 1 I

i, s is mukaisiksi avoinketjuisiksi yhdisteiksi, joissa D merkitsee mahdollisesti alkyylillä substituoitua metylideeniä.

Nämä yhdisteet voidaan muuntaa puolestaan kaavan II mukaisiksi yhdisteiksi selektiivisen halogenoinnin, kuten bro-mauksen tai kloorauksen avulla, etenkin jäähdyttäen, ja siirtämällä kaksoissidos allyylisiirrolla.

Eräs toinen menetelmä kaavan IV mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R4 merkitsee vetyä, A merkitsee mety-leeniä tai 1,3-propyleeniä ja R5 merkitsee karboksia, perustuu siihen periaatteeseen, että kaavan <> mukainen yhdiste, jossa RÄ ja RB merkitsevät vetyä tai etenkin alempialkyyliä, kuten metyyliä ja R^ merkitsee aminosuojaryhmää, kondensoidaan 2-R2-etikkahappoesterin tai ensin l-R2-eteenimetalliyhdisteen, esim. isopropenyy-limagnesiumbromidin ja sitten etikkahappoesterin kanssa, saadussa kaavan • · 24 , 94415 χΖ4 ( Rj C^zCHz-Zi /=Ί (/ 'X Rz (Xlla) vast. < X Rz (Xllb) \'\ \/ \ r/ \ v/\ ra rb ra rb mukaisessa yhdisteessä, jossa Z5# merkitsee esteröityä kar-boksia, esim. alempialkoksikarbonyyliä, tämä ryhmä pelkistetään esim. di-isobutyylialuminiumhydridin avulla hydrok-simetyyliksi, halogenoidaan hydroksimetyyliryhmä, esim. bromataan tetrabromimetaani/trifenyylifosfiinilla, saatu kaavan /-On"» '"u>· -n, mukainen yhdiste, jossa A merkitsee metyleeniä tai vast.

1,3-propyleeniä, X merkitsee halogeenia, esim. bromia, saatetaan edelleen reagoimaan kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa, lohkaistaan oksatsolidiinirengas esim. ioninvaih-timen, kuten Amberlyst 15*:n avulla ja saadussa kaavan ; Zl_l_cHl_ (xiv) mukaisessa yhdisteessä, jossa Zg merkitsee kaavan RC-NH-(II') mukaista suojattua aminoryhmää, hapetetaan hydroksi-metyyliryhmä tavanomaisella tavalla karboksiksi.

·· •

Suoritettaessa edellä esitetty menetelmä välituotteiden II valmistamiseksi ja saatettaessa ne edelleen reagoimaan välituotteiksi IV ei ole tarpeen eristää kaikkia välivaiheita. Siten etenkin yhdisteiden X muunto yhdisteiksi II sekä niiden edelleenreaktio yhdisteiden III kanssa väli-·.: tuotteiksi IV voidaan suorittaa edullisesti in situ.

94415 25

Keksinnön mukaisen menetelmän eräs edullinen suoritusmuoto on siten sellainen, että kaavan I3 I4 x-A-f-B~crZs r2 mukainen yhdiste, jossa tähteillä R2, R3, R4, A ja B on kaavan I yhteydessä määritellyt merkitykset, tähteellä Z5 on tähteen R5 merkitys tai se merkitsee suojattua karbok-sia, Z6 merkitsee suojattua ryhmää Rg, esimerkiksi suojattua aminoa ja X merkitsee reaktiokykyistä esteröityä hyd-roksia, saatetaan reagoimaan kaavan

OR

Zi-P (III)

L

mukaisen yhdisteen kanssa, jossa Z1 merkitsee mahdollisesti suojattua hydroksia, tähteellä Z2 on tähteen R^ merkitys tai se merkitsee suojattua hydroksia ja R merkitsee eetteröivää ryhmää, vapautetaan suojatut ryhmät Z6 ja mahdollisesti Z^, Z2 ja/tai Z5 käsittelemällä trialempial-.· kyylihalogeenisilaanilla, esimerkiksi trimetyylibromisi- laanilla, ja haluttaessa muunnetaan saatu kaavan I mukainen yhdiste joksikin toiseksi kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi ja/tai haluttaessa muunnetaan saatu kaavan I mukainen yhdiste suolaksi tai saatu suola joksikin toiseksi suolaksi tai vapaaksi kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi ..V: ja/tai haluttaessa erotetaan optinen isomeeri saadun kaa van I mukaisen yhdisteen tai sen suolan stereoisomeeristen muotojen seoksesta.

Reaktiokykyinen esteröity hydroksiryhmä, kuten X, on vahvalla orgaanisella hapolla esteröity hydroksiryhmä, esim.

• ·

« I

26 9 4 4 1 5 alifaattisella tai aromaattisella sulfonihapolla (kuten alempialkaanisulfonihapolla, etenkin metaanisulfonihapol-la, trifluorimetaanisulfonihapolla, etenkin bentseenisul-fonihapolla, p-tolueenisulfonihapolla, p-bromibentseeni-sulfonihapolla ja p-nitrobentseenisulfonihapolla) tai vahvalla epäorgaanisella hapolla, kuten etenkin rikkihapolla, tai halogeenivetyhapolla, kuten kloorivetyhapolla tai etenkin edullisesti jodivetyhapolla tai bromivetyhapolla esteröity hydroksiryhmä.

Viitattakoon tässä yhteydessä siihen yllättävään toteamukseen, että välituotteiden IV valmistus ja niiden keksinnön mukainen edelleenmuunto lopputuotteiksi I voidaan suorittaa selektiivisesti. S.o. reaktiojaksossa II + III—>IV tai vast. Ha—>1 ja reaktio jaksoissa X—>11 ja XI—>XII ->XIII ->XIV ->IV ei tapahdu konfiguraation paluuta tai mainittavaa rasemisointia. Keksinnön mukainen menetelmä soveltuu tästä syystä erinomaisesti kaavan I mukaisten, edullisen R-konfiguraation aminoryhmän R6 sisältävässä C-atomissa omaavien yhdisteiden valmistamiseksi suoraan.

Kaavan I mukaisten, steerisesti yhdenmukaisten yhdisteiden sekä kaavojen IV, II, X, XI, XII, XIII ja/tai XIV mukaisten, steerisesti yhdenmukaisten välituotteiden valmistus on tämän keksinnön eräänä toisena kohteena.

Erään toisen edullisen suoritusmuodon mukaisesti kaavan OH Ru •-C-Rs (X) D=: Ra Zs Rj ..*· mukainen yhdiste halogenoidaan selektiivisesti, esim. tio- nyylikloridin avulla vastaavaksi välituotteeksi II ja tämä saatetaan reagoimaan jin situ, s.o. eristämättä, komponentin III kanssa.

Kuten mainittiin, keksinnön mukaisesti saatavat yhdisteet V voidaan muuntaa toisiksi kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi.

94415 27

Etenkin vapaa aminoryhmä Rg voidaan substituoida, esim. muuntaa mahdollisesti fenyloiduksi alkyyliaminoryhmäksi, vapaa karboksi Rg voidaan esteröidä tai vast, esteröity tai amidoitu karboksi R5 voidaan muuntaa vapaaksi karbok-siksi ja/tai vapaa tai esteröity karboksi Rg voidaan muuntaa amidoiduksi karboksiksi.

Aminoryhmän muuntamiseksi mahdollisesti fenyloiduksi al-kyyliaminoryhmäksi aminoryhmä voidaan alkyloida substitu-tiivisesti esim. reaktiokykyisellä esteröidyllä mahdollisesti fenyloidulla alkanolilla, kuten alkyylihalogenidil-la, tai pelkistyksen avulla käyttämällä pelkistysaineena aldehydiä tai ketonia, sekä katalyyttisesti aktivoitua vetyä, tai formaldehydin ollessa kyseessä edullisesti muurahaishappoa .

Kaavan I mukaiset vapaat karboksyylihapot tai niiden suolat voidaan muuntaa sopivilla alkoholeilla tai niiden vastaavilla johdannaisilla tunnettujen menetelmien mukaisesti vastaaviksi estereiksi, s.o. kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi, jotka esiintyvät esim. alempialkyyli-, aryylialem-alkyyli-, alempialkanoyylioksimetyyli- tai alempialkoksi-karbonyylialempialkyyliesterinä.

Esteröintiä varten karboksyylihappo voidaan saattaa suoraan reagoimaan diatsoalkaanin, etenkin diatsometaanin, tai vastaavan alkoholin kanssa vahvasti happaman katalysaattorin (esim. halogeenivetyhapon, rikkihapon tai orgaanisen sulfonihapon) ja/tai dehydratisoivan aineen (esim. disykloheksyylikarbodi-imidin) läsnäollessa. Vaihtoehtoisesti karboksyylihappo voidaan muuntaa reaktiokykyiseksi johdannaiseksi, kuten reaktiokykyiseksi esteriksi tai seka -anhydr idiksi esim. happohalogenidilla (esim. etenkin happokloridilla) ja tämä aktivoitu välituote saatetaan reagoimaan halutun alkoholin kanssa.

94415 28

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R5 merkitsee esteröi-tyä karboksia, kuten etenkin alempialkoksikarbonyyliä, esim. etoksikarbonyyliä, voidaan muuntaa kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi, joissa R5 merkitsee karboksia, esim. hydrolyysillä etenkin epäorgaanisten happojen, kuten halo-geenivetyhappojen tai rikkihapon, tai toisella sijalla vesipitoisten alkalien, kuten alkalimetallihydroksidien, esim. litium- tai natriumhydroksidin läsnäollessa. Tässä yhteydessä viitattakoon siihen, että myös karboksin vapauttaminen esteröidystä karboksista voidaan suorittaa siten, ettei tapahdu mitään mainittavaa rasemisointia. Tämä saadaan aikaan etenkin siten, että käsitellään n. 0,2 - n.

4-normaalisella, esim. n. 1-normaalisella, s.o. n.

0,5-...n. 2-normaalisella, vesipitoisella mineraalihapol-la, tarvittaessa lämmittäen, esim. n. 60eC:seen - n. kie-humislämpötilaan, s.o. suunnilleen 100°C:seen. Yllättävällä tavalla esim. kaavan I mukaisten fosfonihappokarboksyy-lihappoalempialkyyliestereiden saippuointi tapahtuu myös ilman happamia tai emäksisiä reagensseja suurella saannolla. Eräs edullinen menetelmä kaavan I mukaisten karboksyy-lihappojen valmistamiseksi vastaavista alempialkyylieste-reistä, kuten kulloinkin kyseessä olevista etyyliestereis-tä, on siten hapan hydrolyysi käsittelemällä n. 0,2-...n.

4-normaalisella vesipitoisella mineraalihapolla, esim.

*, suolahapolla, rikkihapolla, fosforihapolla tai vastaavalla sekä - mahdollisesti autokatalyyttinen - saippuointi vedessä, etenkin korotetuissa lämpötiloissa, kuten kuumentaen palautusjäähdyttäen.

Edellä esitetyt reaktiot suoritetaan vakiomeneteImien mukaisesti laimentimien, etenkin sellaisten, jotka ovat re-aktioaineiden suhteen inerttejä ja jotka ovat niiden liuottimia, katalysaattoreiden, kondensaatioaineiden tai vast, muiden väliaineiden läsnäollessa tai ilman tällaisia aineita ja/tai inertissä atmosfäärissä, alhaisissa lämpötiloissa, huoneenlämpötilassa tai korotetuissa lämpöti- • 94415 29 loissa, etenkin käytetyn liuottimen kiehumispisteessä, atmosfäärisessä tai superatmosfäärisessä paineessa.

Keksinnön kohteena ovat edelleen näiden menetelmien kaikki muunnelmat, joissa jossakin vaiheessa saatu välituote käytetään lähtöaineena ja suoritetaan puuttuvat vaiheet tai menetelmä katkaistaan jossakin vaiheessa tai jossa lähtöaine muodostetaan reaktio-olosuhteissa tai jossa reaktio-komponentit käytetään niiden suolojen muodossa tai optisesti puhtaina antipodeina. Pääasiassa tulisi käyttää sellaisia lähtöaineita näissä reaktioissa, jotka johtavat edellä erittäin arvokkaiksi kuvattuihin yhdisteisiin.

Keksinnön kohteena ovat myös uudet lähtöaineet ja menetelmät niiden valmistamiseksi.

Riippuen lähtöaineiden valinnasta ja menetelmistä uudet yhdisteet voivat esiintyä jonkin mahdollisen isomeerin tai isomeeriseosten muodossa, esimerkiksi riippuen asymmetristen hiiliatomien määrästä, puhtaina optisina isomeereinä, kuten antipodeina, tai optisten isomeerien seoksina, kuten rasemaatteina, tai diastereoisomeerien seoksina, joista antipodit voidaan haluttaessa erottaa.

• Saadut diastereoisomeerien seokset ja rasemaattien seokset voidaan erottaa aineosien pysikaalis-kemiallisten erojen perusteella tunnetulla tavalla puhtaiksi isomeereiksi, diastereoisomeereiksi tai rasemaateiksi, esim. kromatogra-fian ja/tai jakokiteytyksen avulla.

. Saadut rasemaatit (raseemiset diastereoisomeerit) voidaan erottaa edelleen optisiksi antipodeiksi sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti, esimerkiksi kiteyttämällä uudelleen optisesti aktiivisesta liuottimesta, vapaassa tai immobilisoidussa muodossa esiintyvien mikro-organismien tai vast, entsyymikatalysaattoreiden avulla tai saattamal- • « 94415 30 la hapan lopputuote reagoimaan optisesti aktiivisen emäksen kanssa, joka muodostaa suoloja raseemisen hapon kanssa, ja erottamalla tällä tavalla saadut suolat, esimerkiksi niiden erilaisten liukenevuuksien perusteella diaste-reoisomeereiksi, joista antipodit voidaan vapauttaa sopivien aineiden vaikutuksessa. Emäksiset raseemiset tuotteet voidaan erottaa samalla tavalla antipodeiksi, esim. erottamalla niiden diastereoisomeerisistä suoloista, esim. jakokiteyttämällä niiden d-tai 1-tartraatit. Mitkä tahansa raseemiset välituotteet tai lähtöaineet voidaan erottaa vastaavalla tavalla.

Lopuksi keksinnön mukaiset yhdisteet saadaan joko vapaassa muodossa tai niiden suolojen muodossa. Mikä tahansa saatu emäs voidaan muuntaa vastaavaksi happoadditiosuolaksi, etenkin käyttämällä farmaseuttisesti sopivaa happoa tai anioninvaihtopreparaattia, tai saadut suolat voidaan muuntaa vastaaviksi vapaiksi emäksiksi, esimerkiksi käyttämällä vahvempaa emästä, kuten metalli- tai ammoniumhydroksi-dia tai emäksistä suolaa, esim. alkalimetallihydroksidia tai -karbonaattia, tai kationinvaihtopreparaattia. Kaavan I mukainen yhdiste voidaan muuntaa myös vastaavaksi metalli- tai ammoniumsuoläksi. Näitä ja muita suoloja, esimerkiksi pikraatteja voidaan käyttää myös saatujen emästen . puhdistukseen. Emäkset muunnetaan suoloiksi, suolat erote taan ja emäkset vapautetaan suoloista. Johtuen vapaiden yhdisteiden ja suolojen muodossa esiintyvien yhdisteiden läheisestä suhteesta, aina, kun tässä hakemuksessa puhutaan yhdisteestä, tarkoitetaan myös tämän yhdisteen vastaavaa suolaa, edellyttäen, että tämä on vallitsevissa olosuhteissa mahdollista tai mielekästä.

Yhdisteet sekä niiden suolat voidaan saada myös niiden hydraattien muodossa tai ne voivat sisältää muita kiteytykseen käytettyjä liuottimia.

94415 31

Keksinnön mukaiset farmaseuttiset valmisteet on tarkoitettu enteraaliseen, kuten oraaliseen tai rektaaliseen, ja parenteraalieen käyttöön nisäkkäille, mukaanlukien ihmisille sairauksien hoitamiseksi tai estämiseksi, jotka reagoivat NMDA-reseptoreiden salpaukseen, kuten esim. se-rebraalinen iskemia, lihasspasmit (spastisuus), konvulsiot (epilepsia), pelkotilat tai maaniset tilat. Ne sisältävät tehokkaan määrän farmakologisesti aktiivista kaavan 1 mukaista yhdistettä tai sen farmaseuttisesti sopivaa suolaa yksinään tai yhdessä yhden tai useamman farmaseuttisesti sopivan kantoaineen kanssa.

Keksinnön mukaisia farmakologisesti aktiivisia yhdisteitä voidaan käyttää farmaseuttisten koostumuksen valmistamiseksi, jotka sisältävät tehokkaan määrän niitä yksinään tai sekoitettuna täyteaineiden tai kantoaineiden kanssa, jotka soveltuvat enteraaliseen tai parenteraaliseen käyttöön. Etenkin käytetään tabletteja tai gelatiinikapselei-ta, jotka sisältävät aktiivisen aineosan yhdessä a) lai-mentimien, esim. laktoosin, dekstroosin, sakkaroosin, man-niitin, sorbiitin, selluloosan ja/tai glysiinin, b) voiteluaineiden, esim. piidioksidin, talkin, steariinihapon, sen magnesium- tai kalsiumsuolan ja/tai polyeteeniglykoIin kanssa. Tabletit voivat sisältää myös c) sideaineita, m esim. magnesiumaluminiumsilikaattia, tärkkelystahnaa, gelatiinia, traganttia, metyyliselluloosaa, natriumkarboksi-metyyliselluloosaa ja/tai polyvinyylipyrrolidonia, haluttaessa d) hajotusaineita, esim. tärkkelyksiä, agaria, al-giinihappoa tai sen natriumsuolaa, tai kuohuseoksia, ja/tai e) absorptioaineita, väriaineita, makuaineita ja makeutusaineita. Injektoitavat valmisteet ovat mieluummin isotonisia vesiliuoksia tai suspensioita, ja suppositoriot valmistetaan edullisesti rasvaemulsioista tai -suspensioista. Nämä valmisteet voidaan steriloida ja/tai ne voivat sisältää apuaineita, kuten säilöntä-, stabilointi-, kostutus- tai emulgointiaineita, liukoiseksi tekeviä ai- - 94415 32 neita, suoloja osmoottisen paineen säätämiseksi ja/tai puskureita. Lisäksi ne voivat sisältää myös muita terapeuttisesti arvokkaita aineita. Nämä valmisteet valmistetaan tavanomaisilla sekoitus-, granulointi- tai vast, päällystysmenetelmillä ja ne sisältävät n. 0,1 % - 100 %, etenkin n. 1 % - n. 50 % aktiivista aineosaa. Yksittäisan-nos noin 50 - 70 g painavalle nisäkkäälle voi olla n. 1 -500 mg, etenkin noin 10 - 500 mg aktiivista aineosaa.

Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksintöä eivätkä ne ole rajoittavia. Lämpötilat on esitetty celsiusasteina ja kaikki osat ovat paino-osia. Mikäli toisin ei ole mainittu, kaikki haihdutukset suoritetaan alennetussa paineessa, etenkin n. 2-13 kilopaskalissa (kPa).

Esimerkki lt E-2-amino-4-metwli-5-fosfono-3-penteenihap- ppefrYYliestsri a) 5-(2-propenyyli)-oksatsoliini-4-karboksyylihappoetyyli-esteri(1) 1,6 g punaista kupari(I)oksidia laitetaan 200 ml:aan bent-seeniä. Sekoittaen tehokkaasti tähän suspensioon lisätään tipoittain 10 minuutin kuluessa liuos, jossa on 140 g iso-.* syaanietikkahappoetyyliesteriä ja 105 g vastatislattua metakroleiinia 200 ml:ssa bentseeniä. Reaktiolämpötila pidetään tällöin jääjäähdytyksen avulla 30 - 32°:ssa. Lisäyksen päätyttyä erä pidetään eksotermian päättymiseen asti 30 - 32°:ssa ja sitä sekoitetaan tämän jälkeen tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Ylimääräisen kupari(I)oksidin ..1 suodattamisen jälkeen suodos haihdutetaan tyhjiössä 30°:ssa. Jäännökseen lisätään 600 ml eetteriä, suodatetaan Celiten läpi ja haihdutetaan kuiviin tyhjiössä. Näin saadaan 5-(2-propenyyli)-2-oksatsoliini-4-karboksyylihappo-etyyliesteri värittömänä öljynä, kp. 110 - 130° (5,3 Pa).

94415 33 b) E-2-formyyliamino-3-hydroksi-4-metyyli-4-penteenihappo-etyyliesteri (2) 139 g 5-(2-propenyyli)-2-oksatsoliini-4-karboksyylihappo-etyyliesteriä liuotetaan 70 ml:aan tetrahydrofuraania ja sitten lisätään 27,4 g vettä ja 3,5 g trietyyliamiinia. Reaktioseosta sekoitetaan 62 tunnin ajan 65 - 70°:ssa ja jäähtymisen jälkeen se otetaan 200 ml:aan dikloorimetaa-nia. Liuos kuivatetaan magnesiumsulfaatin (200 g) päällä, suodatetaan ja haihdutetaan tyhjiössä. Jäljelle jäävän öljyn puhdistus pylväskromatografiällä (piihappogeeli; heksaani/etikkaesteri 3:2) tuottaa 2-formyyliamino-3-hyd-roksi-4-metyyli-4-penteenihappoetyyliesterin diastereomee-riseoksena, sp. 67°.

c) E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-di-isopropyylifosfono-3-penteenihappoetyyliesteri(2)

Liuokseen, jossa on 40,20 g raakaa 2-formyyliamino-3-hyd-roksi-4-metyyli-4-penteenihappoetyyliesteriä 600 ml:ssa 1,2-dikloorimetaania, lisätään tipoittain 20°:ssa argon-atmosfäärissä 18,6 ml tionyylibromidia 5 minuutin kuluessa (hieman jäähdyttäen). Sekoitetaan 2 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten lisätään 400 ml vettä, jolloin en-V simmäiset 50 ml lisätään hitaasti tipoittain. Seosta se koitetaan hyvin vielä 15 minuutin ajan. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään 3 kertaa jäävedellä ja kerran jää/ kyllästetty kaliumbikarbonaatti-liuoksella (pH n. 7,5). Kuivatetaan natriumsulfaatin päällä ja tislataan 1,2-di-kloorietaani 35°:ssa tyhjiössä pois, jolloin saadaan välituotteena raaka bromidi, johon lisätään huoneen lämmössä 160 ml tri-isopropyylifosfiittia ja sekoitetaan sitten 75°:ssa (haudelämpötila) osatyhjiössä (n. 13 kPa) 17 tunnin ajan. Sitten ylimääräinen tri-isopropyylifosfiitti ja muut haihtuvat sivutuotteet tislataan pois suurtyhjiössä (haudelämpötila 90°). Kromatografoimalla jäännös kymmen- « 94415 34

Vertaisessa painomäärässä piihappogeeliä (raekoko 0,04 -0,06 mm) käyttämällä eluointlaineena etikkaesteriä saadaan E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-di-isopropyylifosfono-3-pen-teenihappoetyyliesteri vaaleankeltaisena hunajana, IR (CH2C12): 3410 (NH), 1740 (CO-esteri), 1690 (CO-amidi), 1235 (P=0), 980 - 1015 (P-O-C).

d) E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyylies-teri(4)

Liuokseen, jossa on 25,42 g E-2-formyyliamino-4-metyyli- 5-di-isopropyylifosfono-3-penteenihappoetyyliesteriä 102 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, lisätään 20*:ssa tipoit-tain argon-atmosfäärissä 56,7 ml trimetyylibromisilaania 15 minuutin kuluessa. Sekoitetaan 20 tunnin ajan huoneen lämmössä ja sitten lisätään tipoittain 15 minuutin kuluessa 102 ml etanolia ja seosta sekoitetaan vielä 20 tunnin ajan. Tämän jälkeen kirkas reaktioliuos haihdutetaan täysin tyhjiössä. Jäännökseen lisätään 3 kertaa kulloinkin 100 ml tolueenia ja sitten se haihdutetaan. Öljyinen jäännös liuotetaan 102 ml:aan etanolia ja siihen lisätään tipoittain liuos, jossa on 102 ml propyleenioksidia 102 ml:ssa etanolia. Kiteisenä saostuva tuote suodatetaan pois 2 tunnin kuluttua (huoneen lämpötila) ja pestään etanolil-la ja eetterillä. Kuivatetaan (80°, 4 tuntia) suurtyhjiös-sä, minkä jälkeen saadaan E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri analyysipuhtaana, sp. 212° (haj.).

♦ • « 94415 35

Esimerkki 2: E-2-amino-4-roetwli-5-fosfono-3-penteenihap- ppetYYliesteri a) E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-dimetyylifosfono-3-pen-teenihappoetyyliesteri (1) 100,5 g 2-formyyliamino-3-hydroksi-4-metyyli-4-penteeni-happoetyyliesteriä liuotetaan 1,5 l:aan dikloorietaania, lisätään tipoittain 20 - 25*:ssa 47 ml tionyylibromidia ja erää sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Reak-tioseokseen lisätään 750 ml vettä ja sekoitetaan tehokkaasti 10 minuutin ajan. orgaaninen faasi erotetaan, uutetaan 1 1:11a jäävettä, 1 1:11a 1 N kaliumvetykarbonaatti-liuosta ja vielä kerran 1 1:11a jäävettä, kuivatetaan magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Näin saatuun E-5-bromi-2-formyyliamino-4-metyyli-3-penteenihappoetyylieste-riin (keltainen öljy) lisätään välittömästi 50 ml trime-tyylifosfiittia ja sekoitetaan 15 tunnin ajan 70·:n haude-lämpötilassa ja n. 15 kPa:ssa. Reaktioseoksesta poistetaan kaasua 30 minuutin ajan vesisuihkutyhjiössä ja tunnin ajan suurtyhjiössä 40 - 50°:ssa. Saatu tuote otetaan 600 ml:aan vettä ja uutetaan 3 kertaa kulloinkin 500 ml:11a etikkaes-teriä. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestään 2 kertaa kulloinkin 300 ml:11a vettä. Kaikki vesifaasit yhdistetään, . kyllästetään natriumkloridilla ja uutetaan 3 kertaa kul loinkin 500 ml:11a dikloorimetaania. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivatetaan magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Tuote kromatografoidaan piihappogeelillä (etikkaes-teri/isopropanoli 7:2). Näin saadaan E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-dimetyylifosfono-3-penteenihappoetyyliesteri keltaisena öljynä. 1H-NMR (DMSO): 1,82 (d, 3H, 4-CH3), 2,69 (d, 2H), 5,03 (m, 1H), 5,32 (m, 1H).

94415 36 b) E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyylies-teri(2) 16,9 g E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-dimetyylifosfono-3-penteenihappoetyyliesteriä liuotetaan 80 ml:aan dikloori-metaania typpi-atmosfäärissä ,ja sitten lisätään tipoittain n. 25°:ssa 30 ml trimetyylibromisilaania 30 minuutin kuluessa. Sekoitetaan 20 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja tämän jälkeen lisätään tipoittain n. 25°:ssa 80 ml etanolia 30 minuutin kuluessa, sitten sekoitetaan vielä kerran 22 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja haihdutetaan tämän jälkeen. Jäännös liuotetaan 80 ml:aan etanolia ja siihen lisätään tipoittain samalla hieman jäähdyttäen 80 ml pro-pyleenioksidia 80 ml:ssa etanolia. Sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa, suodatetaan ja pestään etanolilla ja eetterillä. Näin saadaan E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri, sp. 215 - 217° (haj.).

Esimerkki 3: E-2-amino-4-metwli-5-fosfono-3-penteenihappo-etvvliesteri a) E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-di(2-kloorietyyli)fosfo-no-3-penteenihappoetyyliesteri(i) 8,2 g E-5-bromi-2-formyyliamino-4-metyyli-3-penteenihappo-etyyliesteriä ja 19 ml tris-(2-kloorietyyli)fosfiittia sekoitetaan 20 tunnin ajan 70°:n haudelämpötilassa. Saatu seos kromatografoidaan piihappogeelissä, jolloin eluoidaan etikkaesterillä ja etikkaesteri/isopropanolilla (7:1), tuote kiteytetään etikkaesteri/dietyylieetteristä. Näin • · ·· saadaan E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-di(2-kloorietyyli)- fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri, sp. 47 - 49°.

b) E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyylies-teri(2) 94415 37 Käyttämällä 3 g E-2-formyyliamino-4-metyyli-5-di(kloori-etyyli) fosfono-3-penteenihappoetyyliesteriä saadaan esimerkissä 2 esitetyllä tavalla samoin E-2-amino-4-metyyli- 5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri, sp. 215° (haj.).

Esimerkki 4; (2R)-2-amino-4-roetyvli^5^fosfono-3-penteeni-happo a) (L) -N-tert-butoksikarbonwli-seriini-N-metoksi-N-metw-liamidi (1)

Liuokseen, jossa on 1 kg (L)-N-tert-butoksikarbonyyli-se-riiniä 1 l:ssa tetrahydrofuraania, lisätään -20 - -25°:ssa 541,6 ml N-metyylimorfoliinia 27 minuutin kuluessa. Sekoitetaan 15 minuutin ajan ja sitten samassa lämpötilassa lisätään 699,6 ml kloorimuurahaishappo-isobutyyliesteriä 42 minuutin kuluessa ja 445,8 ml N-metoksi-N-metyyliamiinia 40 minuutin kuluessa. Annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitten liuotin haihdutetaan pois kiertohaihduttimessa. Jäännös liuotetaan 3 l:aan etyyliasetaattia, liuos uutetaan 3,5 1:11a 2n-suolahappoa ja 3 1:11a kyllästettyä NaHC03-liuosta. Vesifaasit uutetaan 3 kertaa kulloinkin 1 1:11a etyyliasetaattia, orgaaniset faasit pestään 2 1:11a kyllästettyä NaCl-liuosta, kuivatetaan MgS04:n päällä ja haihdutetaan 50°:ssa tyhjiössä. Jäännöstä sekoitetaan 2 tunnin ajan jääjäähdytyksessä heksaanin (3,5 1) kanssa. Valkoinen suspensio suodatetaan, suodos pestään 1 1:11a heksaania. Kuivatetaan 40°:ssa tyhjiössä, jolloin saadaan 781 g yhdistettä 1, sp. 116 - 117°. C10H20N2O5: laskettu (%): C 48,38, H 8,12, N 11,28, saatu (%): C 48,28, H 8,02, N 11,32.

b) (L) -3-tert-butoksikarbonwli-2,2-dimetyyli-oksatsoli-diini-4-karboksyylihappo-N-metoksi-N-metyyliamidi (2)

Seos, jossa on 781 g yhdistettä l, 3,3 1 asetonidimetyyli-• asetaalia ja 42 g pyridinium-(tolueeni-4-sulfonaatti)a, 94415 38 lämmitetään 72°:seen ja sitä keitetään tämän jälkeen 17 tunnin ajan palautusjäähdyttäen. Lisätään 20 g pyridinium-tosylaattia, minkä jälkeen keitetään vielä 9 tunnin ajan, jolloin tislataan pois n. 750 ml liuotinta ja korvataan 700 ml:11a asetoni-dimetyyliasetaalia. Liuotin haihdutetaan pois ja jäännös liuotetaan 2 l:aan dietyylieetteriä.

Orgaaninen faasi uutetaan 2 kertaa ln-suolahapolla (l 1, 0,5 1) ja kulloinkin kerran kyllästetyllä NaHC03- tai vast. NaCl-liuoksella (kumpaakin 0,3 1). Vesifaasit uutetaan 2 kertaa kulloinkin 0,5 1:11a dietyylieetteriä.

MgS04:llä kuivatetun orgaanisen faasin jäännös liuotetaan kuumana 850 ml:aan heksaani/dietyylieetteri (9:1). Lisätään 600 ml heksaania ja 50 ml dietyylieetteriä ja sitten jäähdytetään ja laimennetaan kiteytymisen aikana 1,1 1:11a heksaania. Suspensio suodatetaan. Suodos pestään heksaa-nilla. Kuivatus 40°:ssa tyhjiössä tuottaa 640 g yhdistettä 2., sp. 67 - 68°.

C13H24N2°5*· laskettu (%): C 54,15, H 8,39, N 9,72, saatu (%): C 53,96, H 8,37, N 9,91.

c) (4S)-2,2-dimetyyli-4-formyyli-3-oksatsolidiini-karbok-swlihappo-tert-butwliesteri (2) c, a) Pelkistys LiAlH4: llä

Liuokseen, jossa on 28,8 g yhdistettä 2 350 ml:ssa kuivaa dietyylieetteriä, lisätään jääjäähdytyksessä 2,53 g LiAlH4:ä 5 - 15°:n sisälämpötilassa. Sekoitetaan 1,5 tunnin ajan 5°:ssa ja sitten lisätään tipoittain liuos, jossa

• I

on 5,77 g KHS04:ä 60 ml:ssa vettä, niin nopeasti, että lämpötila pysyy alle I5e:ssa (40 min.). Suspensio suodatetaan ja suodos pestään eetterillä. Lisäämällä jäätä suodos pestään 2 kertaa kulloinkin 200 ml:11a ln-suolahappoa, 2 kertaa kulloinkin 150 ml:11a 5%:ista NaHC03-liuosta ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella. Vesifaasit uutetaan kerran 94415 39 dietyylieetterillä, orgaaniset uutteet kuivatetaan Na2S04:llä ja haihdutetaan. Jäännöksen tislaus 0,4 mbaa-rissa tuottaa 17,78 g yhdistettä 3 (kp. 85 - 90°C), [ ]D = -93° (c - 1, CHC13), C11H19N04: laskettu (%): C 57,63, H 8,35, N 6,11, O 27,91, saatu (%): C 57,59, H 8,54, N 6,17, 0 27,74.

c.b) Pelkistys di-isobutvvlialuminiumhvdridillä

Liuokseen, jossa on 10 g yhdistettä 2. 120 ml:ssa kuivaa dietyylieetteriä, lisätään tipoittain jääjäähdytyksessä 66 ml di-isobutyylialuminiumhydridin lM-liuosta heksaanissa. Sekoitetaan 10 minuutin ajan huoneen lämpötilassa, jäähdytetään 0°:seen ja lisätään liuos, jossa on 38 g KHS04:ä 160 ml:ssa vettä (lämpöt. 0 - 15°). Sekoitetaan 30 minuutin ajan huoneen lämpötilassa ja suodatetaan. Suodos pestään dietyylieetterillä ja vedellä, suodoksen orgaaninen faasi pestään jääjäähdytyksessä 2 kertaa kulloinkin 100 ml:11a ln-suolahappoa, 2 kertaa kulloinkin 100 ml:11a 10%:sta NaHC03-liuosta ja 2 kertaa 100 ml:11a kyllästettyä ' NaCl-liuosta. Orgaaniset uutteet kuivatetaan Na2S04:llä ja haihdutetaan. Jäännöksen tislaus 0,2 mbaarissa tuottaa 5,83 g yhdistettä 2 (kp. 78e).

;* d) 3— ((4' Rl -N-tert-butyvlioksikarbonyyli-2' .2/-dimetyyli- 4'—oksatsolidinyyli)-2-metyyli-propeenihappoetyyliesteri (4.)

Liuos, jossa on 39,5 g (4S)-2,2-dimetyyli-4-formyyli-ok-satsolidiini-3-karbokswlihaDPo-tert-butwliesteriä 2 200 • · ·: ml:ssa dikloorimetaania, lisätään tipoittain 2 tunnin ku luessa liuokseen, jossa on 68,7 g 1-etoksikarbonyylietyli-deeni-trifenyylifosforaania 900 ml:ssa dikloorimetaania. Sekoitetaan 6 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten jäähdytetään 10°:seen ja lisätään tipoittain 15 minuutin kuluessa 530 ml 10%:sta natriumvetyfosfaatin vesiliuosta.

94415 40

Sekoitetaan 30 minuutin ajan 15°:ssa ja sitten erotetaan orgaaninen faasi ja vesifaasi uutetaan 250 ml:11a di-kloorimetaania. Orgaaniset faasit kuivatetaan magnesium-sulfaatin päällä ja haihdutetaan. Jäännökseen sekoitetaan 70 ml eetteriä. Suspensio suodatetaan, suodatusaines pestään eetterillä. Suodos haihdutetaan, jäännös erotetaan kromatografoimalla piihappogeelissä. Eluointi heksaani/-etyyliasetaatilla (9:1) tuottaa cis-isomeerin (2,32 g) ja sekafraktion (2,21 g, cis/trans = 38:62) lisäksi 45,4 g yhdistettä £. 1H-NMR (60 MHz, CDCI3, trans-isomeeri): mm.

4.7 ppm (m, HC(4')), 6,7 ppm (d, J - 9, H-C(3)). 1H-NMR (60 MHz, CDCI3, cis-isomeeri): mm. 5,2 ppm (m, H-C(4')), 6.08 ppm (d, J = 7, H-C(3)).

e) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(3'-hydroksi-2'-metyyli-prop-1'-enyyli) -oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butwlies-teri(S) 3°:seen jäähdytettyyn liuokseen, jossa on 48,7 g yhdistettä 4. 1 l:ssa kuivaa dietyylieetteriä, lisätään 15 minuutin kuluessa 389 ml di-isobutyylialuminiumhydridin 1-molaaris-ta liuosta heksaanissa. Annetaan lämmetä 11°:seen ja sitten lisätään jääjäähdytyksessä 100 ml etyyliasetaattia ja sen jälkeen 50 ml 2n-natriumhydroksidia. Annetaan lämmetä V ilman jäähdytystä n. 28°:seen ja lisätään vielä 7 ml 2n- natriumhydroksidia. Sekoitetaan 15 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, lisätään natriumsulfaattia ja suodatetaan.

Suodoksen haihduttaminen tuottaa 42,1 g raakaa yhdistettä 5. Näyte (0,97 g) puhdistetaan kromatografoimalla 40 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi heksaani/etyyliasetaatilla (3:1) tuottaa 0,74 g yhdistettä £. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) : mm. 3,52 (dxd, J = 9 ja 3) ja 4,02 (dxd, J * 9 ja 6) (2H-C(5)), 3,78 (m, 2H-C(3')), 4,54 (m, H-C(4)), 4,81 (t, J 6, OH), 5,33 (d, J = 9, H-C(l')).

f) (4R) -2,2-dimetyyli-4- (3 ' -bromi-2' -metyyli-prop-l ' -enyy li) -oksatsolidiini-3-karboksvylihappo-tert-butwliesteri (6) 94415 41

Liuokseen, jossa on 41,0 g yhdistettä £ ja 60,2 g tetra-bromimetaania 1 l:ssa kuivaa dietyylieetteriä, lisätään 0°:ssa 47,6 g trifenyylifosfiinia. 30 minuutin kuluttua jäähdytyshaude poistetaan ja sekoitetaan 17 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Lisätään 20 g tetrabromimetaania ja 15,9 g trifenyylifosfiinia ja sekoitetaan 2 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Suodatetaan valkoinen suspensio ja suodatusaines pestään eetterillä. Suodoksen haihdutusjäännös kromatografoidaan 0,9 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi heksaani/etyyliasetaatilla (9:1) tuottaa 30,59 g yhdistettä £, sp. 62 - 65°. ^M-NMR (300 MHZ, DMSO-d6): mm. 3,55 (dxd, J = 9 ja 2) ja 4,04 (dxd, J - 9 ja 6) (2H-C(5)), 4,15 (m, 2H-C(3')), 4,49 (m, H-C(4)), 5,65 (d, J = 9, H-C(l'))· g) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(3'-dimetyylifosfono-2'-metyyli-prop-1'-enyyli)-oksatsolidiini-3-karboksvylihappo-tert-bu-tyyliesteri (2)

Liuosta, jossa on 13,4 g yhdistettä 6 70 ml:ssa trimetyy-lifosfiittia, sekoitetaan 15 tunnin ajan 80°:ssa. Ylimääräinen fosfiitti haihdutetaan pois 24 mbaarissa. Jäännöksen kuivatus suurtyhjiössä tuottaa 14,3 g raakaa yhdistettä 2. ^-NMR (300 MHZ, DMSO-dg): mm. 2,63 (d, J - 23, 2H-V C(3')), 3,59 (d, J- 11, (CH30)2PO).

h) N-((2R)-5-dimetyylifosfono-l-hydroksi-4-metyyli-3-pen-ten-2-yyli) -karbamiinihappo-tert-butvyliesteri (£)

Liuokseen, jossa on 14,0 g yhdistettä 2 250 mlissa metano-..ί lia, lisätään 7 g Amberlyst·-15:ta (H+-muoto, 20 - 50 mesh). Sekoitetaan 17 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, suodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännöksen kromatogra-fointi 0,33 kg:ssa piihappogeeliä käyttämällä eluointiai-neena etyyliasetaatti/metanolia (10:1) tuottaa 10,6 g yhdistettä 8. 1H-NMR (300 MHz, DMS0-dfi): mm. 4,60 (t, J * 6, Λ OH), 6,67 (d, J = 7, NH).

94415 42 i) (2R) -2-tert-buto)csikarbonvvliainino-5-dimetyylif osfono- 4-metyyli-3-penteenihappo (9.) i.al Hapetus kromirikkihapolla

Liuokseen, jossa on 0,323 g yhdistettä £ 10 ml:ssa asetonia, lisätään 0,77 ml liuosta, joka on 3,25 molaarinen kromitrioksidin suhteen ja 5,29-molaarinen rikkihapon suhteen. Sekoitetaan 40 minuutin ajan huoneen lämpötilassa, lisätään 2 ml isopropanolia ja sitten 50 ml etyyliasetaattia ja seokseen lisätään 0,1 g aktiivihiiltä. 10 minuutin kuluttua suodatetaan ja pestään 50 ml:11a etyyliasetaattia. Suodos haihdutetaan 3 kertaa kulloinkin 50 ml:11a 10%:sta natriumvetykarbonaattiliuosta. Vesifaasi uutetaan 2 kertaa kulloinkin 40 ml:11a etyyliasetaattia, tehdään 2n-suolahapolla happamaksi pH-arvoon 1 ja uutetaan 3 kertaa kulloinkin 70 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaniset uutteet pestään kyllästetyllä keittosuolaliuoksella, kuivatetaan magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Kromato-grafointi 8 g:ssa piihappogeeliä käyttämällä eluenttina kloroformi/metanoli/etikkahappoa (18:1:1) tuottaa 65 mg yhdistettä 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): 1,37 (s, (CH3)3CO), 1,82 (d, J - 2, CH3-C(4)), 2,63 (d, J = 22, 2H—C(5)), 3,61 (d, J * 11, (CH30)2P0), 4,62 (t, J - 8, H-C(2)) , 5,25 (m, H-C(3)), 7,18 (d, J = 8, NH) , 11,7 - 12,5 (C02H).

i.bl Hapetus happi/platinalla

Liuokseen, jossa on 0,66 g yhdistettä 8 ja 0,2 g natrium-·· vetykarbonaattia 20 ml:ssa vettä ja 2 ml:ssa dioksaania, lisätään platinan suspensio, joka on valmistettu hydraa-malla 313 mg platinaoksidia 50 ml:ssa vettä. Sylinterimäi-sessä laitteessa johdetaan happea läpi voimakkaasti sekoittaen 55°:ssa lasisintterin avulla alhaalta ylöspäin, suodatetaan, pestään vedellä ja suodos uutetaan 5 kertaa • 94415 43 kulloinkin 100 - 150 ml:11a etyyliasetaattia. Uutteiden haihduttaminen tuottaa 220 mg eduktia *>. Vesifaasiin lisätään 1 g Amberlist· 15:ta (vahvasti hapan), suodatetaan ja haihdutetaan tyhjiössä 40°:ssa. Puhdistus kohdan f,a) mukaisesti tuottaa 156 mg yhdistettä £. ^H-NMR (300 MHz, CDC13): 1,43 (S, (CH3)3C), 1,96 (d, J = 3, CH3-C(4)), 2,55 ja 2,71 (2 dxd, J = 22 ja 15, 2H-C(5)), 3,75 ja 3,76 (2 d, J * 11, 2 OCH3), 4,97 (m, H-C(2)), 5,25 - 5,45 (m, NH ja H”C(3)) .

j) (2R)-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo (10)

Liuokseen, jossa on 123 mg yhdistettä £ 3 ml:ssa dikloori-metaania, lisätään 0°:ssa 0,71 ml trimetyylisilyylibromi-dia. Sekoitetaan 4 tunnin ajan 0°:ssa ja sitten lisätään 20 ml vettä. 30 minuutin kuluttua dikloorimetaani-faasi erotetaan ja pestään 3 kertaa kulloinkin 15 ml:11a vettä.

Vesifaasit uutetaan 3 kertaa kulloinkin 20 ml:11a dikloo-rimetaania ja haihdutetaan tyhjiössä. Jäännös liuotetaan 10 ml:aan 5n-suolahappoa ja sitä sekoitetaan 48 tunnin ajan, laimennetaan 20 ml:11a vettä ja uutetaan 3 kertaa kulloinkin 20 ml:11a dikloorimetaania. Vesifaasi haihdutetaan tyhjiössä, jäännös kuivatetaan suurtyhjiössä, liuotetaan 3 ml:aan etanolia ja sitten lisätään tipoittain n. 1 ml propyleenioksidia. Suspensio suodatetaan. Suodatusai-neksen pesu etanolilla ja kuivatus suurtyhjiössä huoneen lämpötilassa tuottaa 62 mg yhdistettä .lfi, sp. 165° (haj.).

Näyte derivatisoidaan enantiomeeripuhtauden analysoimiseksi (R) - (+) -metoksi-trif luorimetyyli-f enyylietikkahappoklo-·· ridilla amidiksi. ^H-NMR-analyysi (300 MHz) integroimalla OCH3-signaalit tuottaa > 95 % (2R)-isomeeriä (3,44 ppm) ja < 5 % (2S)-isomeeriä (3,37 ppm).

94415 44

Esimerkki 5; (2Ri-2-amino-4-metwli-5-fosfono-3-penteeni-happoetwliesteri a) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(3'-di-isopropyylifosfono-2'-me-tyyli-prop-1'-enyyli)-oksatsolidiini-3-karboksyylihappo-tert-butyvliesteri (l)

Liuos, jossa on 6,68 g esimerkin 5f) mukaista bromidia 14,8 ml:ssa kuivaa tri-isopropyylifosfiittia, lämmitetään 17 tunnin kuluessa 100 mbaarin paineessa 70°:seen. Seos haihdutetaan 0,4 mbaarissa/70°:ssa. Kromatografointi 350 g:ssa piihappogeeliä (eluentti heksaani/etyyliasetaatti = 1:1) tuottaa 8,28 g yhdistettä 1, Rf-arvo = 0,077.

b) N—((2R)-5-di-isopropyylifosfono-l-hydroksi-4-metyyli- 3-penten-2-yyli) karbamiinihappo-ter£-butyyliesteri (2.)

Liuokseen, jossa on 4,49 g esimerkin a) mukaista fosfoni-happoesteriä 1 100 ml:ssa metanolia, lisätään 2,25 g Amber lyst· 15:ta (H+-muoto, 20 - 50 mesh). Sekoitetaan 2 päivän ajan huoneen lämpötilassa, suodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännöksen kromatografia 125 g:ssa piihappogeeliä (eluentti etyyliasetaatti/metanoli = 20:1) tuottaa 2,44 g yhdistettä 2· c) (2R) -2-tert-butoksikarbonwliamino-5-di-isopropwlifos-fono-4-metyyli-3-penteenihappo (2)

Liuokseen, jossa on 1,6 g esimerkin b) mukaista alkoholia 2 60 ml:ssa asetonia, lisätään 0 - 5°:ssa liuos, joka on 3,25-molaarinen kromi(VI)oksidin suhteen ja 5,29-molaari-nen rikkihapon suhteen. Sekoitetaan 6 tunnin ajan o°:ssa ja 12 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Lisätään 5 ml isopropanolia ja 40 ml 20%:sta keittosuolaliuosta ja sekoitetaan 10 minuutin ajan, sitten uutetaan 15 tunnin ajan Kutscher-Steudel-laitteessa yhtäjaksoisesti metyyliasetaa- 45 - 94415 tiliä. Orgaaninen faasi kuivatetaan natriumsulfaatin päällä, haihdutetaan ja jäännös kromatografoidaan 75 g:ssa heksaani/etyyliasetaatti/etikkahappoa (16:10:1). Tämä tuottaa 0,92 g yhdistettä 2, [a]D = -94,5° (c = 1,2, CHC13). 1H-NMR (300 MHz, CDCI3): 1,2 - 1,3 (4d, (2-propO)2), 1,4 (S, (CH3)3CO), 1,95 (d, J = 3, CH3-C(4)), 3,5 ja 3,62 (2 dxd, J = 23 ja 15, 2H-C(5)), 4,66 (m, (2-propO)2), 4,92 (m, H-C(2)), 5,30 (m, H-C(3)), 5,42 (d, J = 7, NH), 9,0 - 10,0 (leveä, C02H).

d) (2R) -2-tert-butoksikarbonwliamino-5-di-isopropwlifos-fono-4-metyyli-3-penteenihappo-etyyliesteri (4.)

Liuokseen, jossa on 0,2 g kohdan c) mukaista happoa 15 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, lisätään 0 - 5°:ssa 0,09 g l-amino-l-kloori-N,N,2-trimetyylipropeenia. Sekoitetaan 30 minuutin ajan 0°:ssa ja sitten lisätään 0,4 g pyridiiniä 5 ml:ssa etanolia. Sekoitetaan 90 minuutin ajan 0°:ssa ja 15 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, laimennetaan 20 ml:11a dikloorimetaania ja pestään 2 kertaa kulloinkin 20 ml:11a vettä. Orgaaninen faasi kuivatetaan natriumsulfaatin päällä, haihdutetaan ja kromatografoidaan 25 g:ssa piihappo-geeliä. Eluointi etyyliasetaatti/metanolilla (10:1) tuottaa 0,12 g yhdistettä ±. ^H-NMR (300 MHz, CDC13): 1,2 -.*. 1,4 (m, 2 (CH3)2CHO, CH3CH20) , 1,45 (s, (CH3)3CO), 1,98 (d, J = 3, CH3—C(4)), 2,55 (d, J * 23, 2H-C(5)), 4,2 (m, CH3CH2Q), 4,69 (m, 2 (CH3)2£HQ), 5,0 (m, H-C(2)), 5,16 (m, H-C(3), NH).

e) (2R) -2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyli- .. esteri (2)

Liuokseen, jossa on 0,1 g kohdan d) mukaista esteriä £ 10 ml:ssa dikloorimetaania, lisätään 0°:ssa 0,11 ml trimetyy-lisilyylibromidia. Sekoitetaan 4 tunnin ajan 0°:ssa ja 15 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Lisätään 20 ml vettä, < 4 46 - 94415 sekoitetaan 15 minuutin ajan, erotetaan vesifaasi ja haihdutetaan vesi pois suurtyhjiössä. Jäännös liuotetaan 2 kertaa kulloinkin 5 ml:aan etanolia, haihdutetaan ja liuotetaan uudelleen 5 ml:aan etanolia. Lisätään 0,5 ml propy-leenioksidia. Sakka suodatetaan pois, pestään etanolilla ja kuivatetaan 15 tunnin ajan suurtyhjiössä (15 tuntia), 48 mg yhdistettä 5, [a]D * -75· (c = 0,5, H20).

Näyte derivatisoidaan enantiomeeripuhtauden analysoimiseksi (R)-(+)-metoksi-trifluorimetyyli-fenyylietikkahappo-kloridilla ja tämän jälkeen diatsometaanilla amidi-dime-tyyliesteriksi. *H-NMR-analyysi (300 MHz) integroimalla OCH3-signaalit tuottaa > 97 % (2R)-isomeeriä (3,5 ppm) ja < 3 % (2S)-isomeeriä (3,37 ppm).

Esimerkki 6: (2R1 -2-aniino-4-metwli-7-fosfono-3-hepteeni-h?PPQ

a) (4R) -2,2-dimetyyli-4- (1 ' -hydroksi-2' -metyyliprop-2' -enyyli)-oksatsolidiini-3-karboksyylihappo-tert-butyylies-teri (1)

Liuokseen, jossa on 6,9 g (4S)-2,2-dimetyyli-4-formyyli-oksatsolidiini-3-karboksyylihappo-tert-butyyliesteriä *. (esimerkin 5c mukaisesti) 60 ml:ssa kuivaa tetrahydrofu- raania, lisätään tipoittain 25 minuutin kuluessa 0 -5°:ssa 45 ml isopropenyylimagnesiumbromidin 1,1-molaarista liuosta. Sekoitetaan 45 minuutin ajan o°:ssa, annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan, jäähdytetään jälleen 10°:seen ja lisätään 90 ml puskuriliuosta (1-molaarista, fosfaatti, ... pH 7). Suodatetaan ja uutetaan suodos 2 kertaa kulloinkin 100 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaninen faasi pestään 2 kertaa kulloinkin 50 ml:11a vettä ja kyllästetyllä keitto-suolaliuoksella, kuivatetaan natriumsulfaatilla. Liuottimen haihduttaminen tuottaa 8 g yhdistettä 1 diastereomee-riseoksena. Erotus voi tapahtua kromatografoimalla piihap- 94415 47 pogeelissä heksaani/etyyliasetaatilla = 4:1 ja se tuottaa kiteisen (l'S)-threo-epimeerin (R^-arvo = 0,2) ja (l'R)-erythro-epimeerin (R^-arvo = 0,16) suhteessa n. 1:2.

b) (4R)-4-(l'-asetoksi-2'-metoksi-prop-2'-enyyli)-2,2-di-metyyli-oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butvylies-teri (2)

Liuokseen, jossa on 15,6 g kohdan a) mukaista epimeeri-seosta 60 ml:ssa pyridiiniä, lisätään tipoittain 0 -5°:ssa 10 minuutin kuluessa 60 ml etikkahappoanhydridiä. Sekoitetaan 15 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, laimennetaan 0,5 1:11a dietyylieetteriä ja lisätään jääjäähdytyksessä 200 ml 2n-suolahappoa. Orgaaninen faasi pestään 250 ml:11a 2n-suolahappoa ja 2 kertaa kulloinkin 200 ml:11a 10%:sta natriumkarbonaattiliuosta. Kuivattaminen natrium-sulfaatin päällä ja liuottimen haihduttaminen tuottaa 15,4 g yhdistettä 2· c) (4R) -4- (4' -karboksi-2' -metyyli-butenyyli) -2,2-dimetyy-li-oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butwliesteri (2)

Liuokseen, jossa on 5,25 g di-isopropyyliamiinia 200 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania, lisätään 0°:ssa 34,5 ml butyylilitiumin 1,6-molaarista liuosta heksaanissa. Jäähdytetään -75°:seen ja lisätään tipoittain 10 minuutin kuluessa liuos, jossa on 15 g kohdan b) mukaista asetaattia 2 100 ml:ssa tetrahydrofuraania, ja sitten lisätään 5 minuutin kuluttua liuos, jossa on 8 g tert-butyylidimetyyli-·· silyylikloridia 30 ml:ssa l,3-dimetyyli-3,4,5,6-tetra- hydro-2-(lH)-pyrimidinonia. Annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan, kuumennetaan 2 tunnin ajan palautusjäähdyttäen, jäähdytetään huoneen lämpötilaan, lisätään 230 ml 45%:sta ammoniumfluoridiliuosta, sekoitetaan 20 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja haihdutetaan. Orgaanisen faasin öl- - 94415 48 jyiseen haihdutusjäännökseen lisätään jääjäähdytyksessä 150 ml n-natriumhydroksidia ja seos uutetaan 2 kertaa kulloinkin 200 ml:11a dikloorimetaania. Vesifaasi tehdään happamaksi 300 ml:11a 20%:sta sitruunahappo-liuosta ja uutetaan 3 kertaa kulloinkin 300 ml:11a dikloorimetaania.

Orgaaniset faasit pestään 20%:sella keittosuolaliuoksella, kuivatetaan natriumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Jäännöksen kromatografointi 50 g:ssa piihappogeeliä käyttämällä eluenttina heksaani/etyyliasetaattia (1:1) tuottaa 11 g kiinteää yhdistettä 2· d) (4R)-4-(4'-karbaetoksi-2·-metyyli-butenyyli)-2,2-dime- tyvli-oksatBolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butwlieste-ri (1) d.a^ Lähtöaineena happo 3 Jääkylmään liuokseen, jossa on 7,8 g kohdan c) mukaista karboksyylihappoa 2 100 mlrssa kuivaa dikloorimetaania, lisätään tipoittain 10 minuutin kuluessa 3,9 ml 1-amino-l-kloori-N,N,2-trimetyylipropeenia. Pidetään 30 minuutin ajan 0°:ssa ja sitten lisätään 20 minuutin kuluessa liuos, jossa on 2,2 g pyridiiniä 80 ml:ssa etanolia. Sekoitetaan 12 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten laimennetaan 100 ml:11a dikloorimetaania ja pestään 2 kertaa kulloinkin 100 ml:11a vettä. Orgaaninen faasi kuivatetaan natriumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Jäännöksen kromatografia piihappogeelissä heksaani/etyyliasetaatilla (10:1) tuottaa 6,5 g esteriä 1, [a]D = +6,17° (c = l, CHC13). C18H31N05: laskettu (%): C 63,32, H 9,15, N 4,10, .. saatu (%): C 63,4, H 9,2, N 4,5.

d.bl Lähtöaineena eoimeeriseos 1

Liuosta, jossa on 8 g kohdan a) mukaista alkoholia 1 ja 0,05 ml propionihappoa 10,5 ml:ssa ortoetikkahappo-tri- 94415 49 etyyliesteriä, lämmitetään tislaamalla hitaasti etanolia pois 14 tunnin ajan 135 - 140°:seen. Haihdutetaan suurtyh-jiössä 40°:ssa. Jäännöksen kromatografia piihappogeelissä heksaani/etyyliasetaatilla (10:1) tuottaa 8 g yhdistettä 4.

e) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(5'-hydroksi-2'-metyyli-pent-l'-enyyli)-oksatsolidiini-3-karboksyylihappo-tert-butyylies-teri (5)

Liuokseen, jossa on 14,5 g kohdan d) mukaisesti valmistettua yhdistettä 4. 250 ml:ssa absoluuttista dietyylieette-riä, lisätään annoksittain 0°:ssa 1,61 g litiumaluminium-hydridiä. Sekoitetaan 18 tunnin ajan o - 2°:ssa ja lisätään jäähdyttäen asetoni/kuivajäällä liuos, jossa on 5 g kaliumvetysulfaattia 60 ml:ssa vettä. Suodatetaan ja pestään 4 kertaa kulloinkin 200 ml:11a dietyylieetteriä. Orgaaninen faasi pestään 3 kertaa kulloinkin 80 ml:11a n-suolahappoa, 3 kertaa kulloinkin 80 ml:11a kyllästettyä natriumbikarbonaattiliuosta, 2 kertaa kulloinkin 200 ml:11a kyllästettyä keittosuolaliuosta, kuivatetaan nat-riumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Kromatografoimalla piihappogeelissä heksaani/etyyliasetaatilla (1:1) saadaan 11,3 g yhdistettä 5, ci6H29N04: .* laskettu (%) : C 64,19, H 9,77, N 4,68, saatu (%): 63,6, H 9,8, N 4,7.

f) (4R)-4-(5'-bromi-2'-metyyli-pent-l#-enyyli)-2,2-dime-tyy 1 i -oksat s o 1 idi in i -3 -kar boksyy 1 ihappo-tert-butyyli ester i (£) • · 0 - 2°:ssa liuokseen, jossa on 4,4 g kohdan e) mukaista alkoholia 5 200 ml:ssa dikloorimetaania, lisätään 4,87 g tetrabromimetaania, 3,85 g trifenyylifosfiinia ja 0,6 ml pyridiiniä. Pidetään 12 tunnin ajan 0 - 2°:ssa ja sitten lisätään vielä 1 g tetrabromimetaania ja 1 g trifenyyli- 94415 50 fosfiinia ja sekoitetaan 6 tunnin ajan 0°:ssa. Haihdutetaan, otetaan etyyliasetaattiin, suodatetaan ja haihdutetaan. Kromatografoimalla piihappogeelissä heksaani/etyyli-asetaatilla (10:1) saadaan 4,5 g yhdistettä 6, C16H28N03Bri laskettu (%): 53,04, H 7,79, N 4,87, Br 22,06, saatu (%): C 53,1, H 7,7, N 3,9, Br 21,6.

g) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(2'-metyyli-5'-di-isopropyylifos-fono-pent-l'-enyyli)-oksatsolidiini-3-karboksyylihappo-tert-butyyliesteri (2)

Liuos, jossa on 10,9 g bromidia £ 22 ml:ssa tri-isopropyy-lifosfiittia, lämmitetään 100 mbaarissa 24 tunnin ajan 135 - 140°:seen. Ylimääräinen reagenssi haihdutetaan pois 0,1 mbaarissa/60°:ssa. Jäännöksen kromatografia piihappogeelissä heksaani/etyyliasetaatilla (1:1) tuottaa 10,7 g yhdistettä 2· h) N- ((2R) -l-hydroksi-4-metyyli-7-di-isopropyylifosfono-hept-3-en-2-yyli) -kar bami inihappo-tert-but w 1 ies ter i (£)

Liuokseen, jossa on 3 g kohdan g) mukaista yhdistettä 2 100 ml:ssa etanolia, lisätään 3 g Amberlyst· 15:ta (H+-muoto). Sekoitetaan 20 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, suodatetaan, haihdutetaan ja kromatografoidaan 50 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi etyyliasetaatti/metanolilla (10:1) tuottaa 2,3 g yhdistettä £, [a]D = -5,9° (c = 1, chci3). c19h38no6p: laskettu (%): C 56,0, H 9,4, N 3,44, P 7,6, .. saatu (%): C 55,4, H 9,3, N 3,4, P 7,3.

i) (2R)-2-tert-butoksikarbonvvliamino-4 -metvvli-7-di-iso-propyy1ifosfono-3-hepteenihappo (9) 51 - 94415 i.ai Hapetus kromihapolla 0 - 5°:ssa 0,84 ml liuosta, joka on 3,25 molaarinen kro-mitrioksidin suhteen ja 5,29-molaarinen rikkihapon suhteen, lisätään tipoittain liuokseen, jossa on 0,5 g kohdan h) mukaista alkoholia 8 15 ml:ssa asetonia. Sekoitetaan 30 minuutin ajan 0°:ssa ja 35 minuutin ajan huoneen lämpötilassa, lisätään 4 ml isopropanolia, 80 ml etyyliasetaattia ja 30 ml 20%:sta keittosuolaliuosta ja suodatetaan. Vesi-faasi uutetaan 3 kertaa kulloinkin 20 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaninen faasi kuivatetaan natriumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Kromatografointi 20 g:ssa heksaa-ni/etyyliasetaatti/etikkahapolla (16:10:1) tuottaa 0,34 g yhdistettä £. [a]D - -35,25· (c = 1,39, CHC13), 13C-NMR (75 MHZ, CDC13): 173,8 (C02H), 155,0 (OCON), 140,4 (0(4)), 121,1 (C(3)), 79,5 (0£(CH3)3), 70,3 (OCH), 52,1 (C(2)), 39,7 (d, J = 18, C(5)), 28,3 ((CH3)3C), 25,7 (d, J - 142, C(7)), 24,0 ((CH3)2CH), 20,2 (d, J - 5, 0(6)).

i^bl Hapetus platina-hapella

Liuokseen, jossa on 3 g esimerkin h) mukaista alkoholia 2 105 ml:ssa dioksaania, lisätään 55°:ssa platinan suspensio 45 ml:ssa vettä, joka on valmistettu hydraamalla 1 g .* platinaoksidia 45 ml:ssa vettä ja poistamalla siitä kaasu.

55 - 60°:ssa johdetaan happea läpi voimakkaasti sekoittaen (n. 1900 rpm). Suodatetaan Celite·:n läpi, pestään 2 kertaa kulloinkin 80 ml:11a vettä ja haihdutetaan suodos 40°:ssa suurtyhjiössä. Liuotetaan 200 ml:aan vettä, lisätään 1 g natriumbikarbonaattia ja 50 ml 20%:ista keitto-suolaliuosta ja uutetaan 3 kertaa kulloinkin 100 ml: 11a etyyliasetaattia. Orgaaniset faasit kuivatetaan natrium-sulfaatin päällä. Suodattaminen ja haihduttaminen tuottaa 1,8 g eduktia £. Vesifaasi tehdään happamaksi n. 20 ml:11a n-rikkihappoa ja uutetaan 5 kertaa kulloinkin 120 ml:11a etyyliasetaattia. Kuivatus natriumsulfaatin päällä, haih- 52

• 9441F

duttaminen ja jäännöksen kroxnatografia kohdan i,a) mukaisesti tuottaa 0,8 g happoa £.

j) (2R)-2-amino-4-metyyli-7-fosfono-3-hepteenihappo f10)

Liuosta, jossa on 3,3 g kohdan i) mukaista happoa 9 ja 2,6 g Ν,Ο-bis-trimetyylisilyyliasetamidia, sekoitetaan tunnin ajan argon-atmosfäärissä huoneen lämpötilassa. Lisätään 4,4 g trimetyylibromisilaania ja sekoitetaan 24 tunnin ajan. Reaktioseos lisätään tipoittain 0°:ssa 400 ml:aan vettä ja sekoitetaan 30 minuutin ajan. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään 3 kertaa kulloinkin 50 ml:11a vettä.

Vesifaasit uutetaan 3 kertaa kulloinkin 30 ml:11a dikloo-rimetaania ja haihdutetaan 40°:ssa suurtyhjiössä 10 ml:aan. Kromatografia 20 ml:ssa Dowex* 50 Wx8:a käyttämällä eluenttina vettä ja eluaatin lyofilisointi tuottaa 0,4 g yhdistettä lfi amorfisena valkoisena jauheena, sp. 252° (haj.), [a]D = -86,5« (C = 1, H20), C8H16N05P*1 H20: laskettu (%): C 37,05, H 6,9, N 5,5, saatu (%): C 36,3, H 6,5, N 5,6.

Näyte derivatisoidaan enantiomeeripuhtauden analysoimiseksi (R)-(+)-metoksi-trifluorimetyyli-fenyylietikkahappo-kloridilla amidiksi. ^-H-NMR-analyysi (300 MHz) integroi-,· maila 0CH3-signaalit tuottaa > 94 % (2R)-isomeeriä (3,24 ppm) ja < 6 % (2S)-isomeeriä (3,17 ppm).

Esimerkki 7: (2R)-2-amino-7-fosfono-3-hepteenihappo a) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(1'-hydroksi-prop-2 '-enyyli)-ok-,, satsolidiini-3-karbokswlihaPDQ-tert-butyvliesteri (1)

Liuokseen, jossa on 25 g (4S)-2,2-dimetyyli-4-formyyli-oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butwliesteriä (esimerkin 5c mukaisesti) 300 ml:ssa kuivaa tetrahydrofu-raania, lisätään 30 minuutin kuluessa 0 - 5«:ssa 60 ml vi- 94415 53 nyylimagnesiumbromidin 2,4-molaarista liuosta tetrahydro-furaanissa. Sekoitetaan tunnin ajan 0°:ssa, annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Jäähdyttämällä 10°:seen lisätään 300 ml puskuriliuosta (1-molaarista, fosfaatti, pH 7). Suodatetaan 10 minuutin kuluttua, uutetaan 2 kertaa kulloinkin 150 ml:11a etyyliasetaattia ja pestään 2 kertaa kulloinkin 100 ml:11a vettä. Vesifaasi uutetaan 2 kertaa kulloinkin 100 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaniset uutteet kuivatetaan magnesiumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Jäännöksen kromatografia piihappogeelissä heksaani/etyyliasetaatilla »4:1 tuottaa 24,2 g epimeeriseosta 1, C13H23N04: laskettu (%): C 60,68, H 9,01, N 5,44, saatu (%): c 60,7, H 9,1, N 5,6.

b) (4R)-4-(4'-etoksikarbonyylibutenyyli)-2,2-dimetyyli-ok-satsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butwliesteri (2.)

Liuosta, jossa on 22,5 g kohdan a) mukaista alkoholia 1 ja 0,3 ml propionihappoa 38,5 ml:ssa ortomuurahaishappo-tri-etyyliesteriä, lämmitetään tislaamalla samalla hitaasti etanoli pois 4 tunnin ajan 135 - 140°:seen. Haihdutetaan suurtyhjiössä 50°:ssa ja kromatografoidaan 300 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi heksaani/etyyliasetaatilla (4:1) .·. tuottaa 23,9 g yhdistettä 2., [a]D = -10,0° (c = 1,5, CHC13), C17H29N05: laskettu (%): C 62,36, H 8,93, N 4,28, saatu (%): C 62,2, H 8,9, N 4,4.

c) (4R) -2,2-dimetyyli-4- (5' -hydroksi-pentenyyli) -oksatso-lidi ini- 3 -karbokswl ihappo-tert-butwl iesteri (3.) 0 - 2°:ssa liuokseen, jossa on 23,5 g kohdan b) mukaista yhdistettä 2. 550 ml:ssa absoluuttista dietyylieetteriä, lisätään annoksittain 2,7 g litiumaluminiumhydridiä. Sekoitetaan 3 tunnin ajan 0 - 2°:ssa ja sitten lisätään tipoittaan jäähdyttäen liuos, jossa on 25 g kaliumvetykarbo- - 94415 54 naattia 250 ml:ssa vettä. Suodatetaan Celite*:n läpi ja pestään hyvin dietyylieetterillä. Orgaaninen faasi pestään 2 kertaa kulloinkin 200 ml: 11a n·*suolahappoa ja 2 kertaa kulloinkin 250 ml:11a 10%:sta natriumbikarbonaattiliuosta.

Vesifaasit uutetaan 2 kertaa kulloinkin 100 ml:11a eetteriä. 20%:sella keittosuolaliuoksella pestyt orgaaniset faasit kuivatetaan natriumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Kromatografointi piihappogeelissä käyttämällä eluenttina heksaani/etyyliasetaattia tuottaa 18,6 g yhdistettä 2, [a]D - -10,1° (c - 1,4, CHC13), C15H27N04: laskettu (%): C 63,13, H 9,54, N 4,91, saatu (%): C 63,0, H 9,5, N 5,0.

d) (4R)-4-(5/-bromi-pentenyyli)-2,2-dimetyyli-oksatsoli-diini-3 -karboksyy 1 ihappo-tert-butyvliesteri (4.)

Liuokseen, jossa on 18,5 g kohdan c) mukaista alkoholia 3, 28,2 g tetrabromimetaania ja 22,3 g trifenyylifosfiinia 600 ml:ssa dikloorimetaania, lisätään tipoittain 0°:ssa 7 ml pyridiiniä. Sekoitetaan 12 tunnin ajan 0 - 2°:ssa, haihdutetaan, otetaan 150 ml:aan etyyliasetaattia, suodatetaan, haihdutetaan 50 ml:aan ja kromatografoidaan 200 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi heksaani/etyyliasetaatilla (10:1) tuottaa 19,9 g bromidia 4., [a]D = -18,9° (c = 1, !·. CHCI3), c15H26N03Br: laskettu (%): C 51,73, H 7,53, N 4,02, Br 22,94, saatu (%): C 51,7, H 7,7, N 4,2, Br 23,0.

e) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(5'-di-2-propyylifosfono-pentenyy- li) -oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butwliesteri (5)

Liuos, jossa on 19,9 g kohdan d) mukaista bromidia 4. 60 ml:ssa tri-isopropyylifosfiittia, lämmitetään 100 mbaaris-sa 20 tunnin kuluessa 130 - 135°:seen. Ylimääräinen rea-genssi tislataan pois 60°:ssa/0,l mbaarissa, jäännös kro- - 94415 55 matografoidaan 250 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi heksaa-ni/etyyliasetaatilla (1:1) tuottaa 20,6 g fosfonihappoes-teriä *>, [a]D - -8,6° (c - 0,8, CHC13), C21H40NO6P: laskettu (%): C 58,18, H 9,30, N 3,23, P 7,15, saatu (%): C 57,4, H 9,3, N 3,2, P 7,5.

f) N-((2R)-l-hydroksi-7-(di-isopropyylifosfono-hept-3-en- 2-yyli)-karbamiinihappo-tert-butwliesteri (6)

Liuosta, jossa on 20,6 g kohdan e) mukaista yhdistettä *> 800 ml:ssa metanoiia, sekoitetaan 20 tunnin ajan Amber-lyst* 15:n kanssa (30 g, H+-muoto) huoneen lämpötilassa. Suodatetaan, pestään metanolilla, haihdutetaan ja kromato-grafoidaan 100 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi etyyliasetaatilla tuottaa 14,8 g yhdistettä £, [a]D - -3,6· (c = 1,5, CHC13), C18H36N06P: laskettu (%): C 54,95, H 9,22, N 3,56, P 7,87, saatu (%): C 53,6, H 9,0, N 3,4, P 9,0.

g) (2R)-2-tert-butoksikarbonyvliamino-7-di-isopropwlifos-fono-3-hepteenihappo (7)

Liuokseen, jossa on 7,4 g kohdan f) mukaista alkoholia £ 300 ml:ssa asetonia, lisätään tipoittain 0 - 2°:ssa 20 mi- t .·. nuutin kuluessa 15 ml liuosta, joka on 3,25-molaarinen kromitrioksidin suhteen ja 5,29-molaarinen rikkihapon suhteen. Sekoitetaan 2 tunnin ajan 0 - 2°:ssa, 4 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja lisätään sitten 30 ml isopropanolia, 300 ml etyyliasetaattia ja 200 ml 20%:sta keitto-suolaliuosta. Vesifaasi uutetaan 2 kertaa kulloinkin 250 ml:11a etyyliasetaattia, orgaaniset faasit kuivatetaan natriumsulfaatin päällä ja haihdutetaan. Kromatografia 200 g:ssa piihappogeeliä heksaani/etyyliasetaati/etikkahapolla (16:10:1) tuottaa 4,55 g happoa 2» [«3d = ”24,9· (c = 0,8, CHC13).

» - 94415 56 h) (2R)-2—amino-7—fosfono-3-hepteenihappo (8)

Liuosta, jossa on 3,1 g happoa 7 ja 3 ml Ν,Ο-bis-trimetyy-lisilyyliasetamidia 200 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Lisätään 3,5 ml trimetyylibromisilaania ja sekoitetaan 30 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Haihtuvat aineosat haihdutetaan pois, jäännös otetaan 50 ml:aan dikloorimetaania ja siihen lisätään 0 - 2°:ssa 250 ml vettä. Vesifaasi erotetaan ja haihdutetaan suurtyhjiössä 10 ml:aan. Kromatografointi 20 ml:ssa Dowex* 50 Wx8:a käyttämällä eluenttina vettä ja eluaatin lyofilisointi tuottaa 1,04 g yhdistettä & amorfisena jauheena, [o]D = -65,2° (c = 1, H20), 13C-NMR (75 MHz, D20): 172,8 (C02H), 140,3 (C(4)), 122,2 (C(3)), 56,4 (C(2)), 33,3 (d, J * 17, C(5)), 27,3 (d, J = 134, C(7)), 22,6 (d, J s 4, C(6)). Näyte derivatisoidaan enantiomeeri-puhtauden analysoimiseksi (R) -(+)-metoksi-trifluorimetyy-li-fenyylietikkahappokloridilla ja sitten diatsometaanilla amidi-trimetyyliesteriksi. 1H-NMR-analyysi (300 MHz) integroimalla OCH3~signaalit tuottaa > 95 % (2R)-isomeeriä (3,54 ppm) ja < 5 % (2S)-isomeeriä (3,37 ppm) .

Esimerkki 8: (2R)-2-amino-4-fluori-5-fosfono-3-penteeni-happo (2) a) (4R) -4-(2'-karbometoksi-2'-fluori-vinyyli)-2,2-dimetyy-li-oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butyvliesteri (1)

Suspensioon, jossa on 13 g sinkkijauhetta ja 2 g kupari- (I)kloridia liuoksessa, jossa on 8,2 g (4S)-2,2-dimetyyli- 4-formyyli-oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-butyyli-esteriä (esimerkin 5c mukainen) 200 ml:ssa kuivaa tetra-hydrofuraania ja 4,1 g:ssa etikkahappoanhydridiä, lisätään sekoittaen ja lämmittäen 8,1 g dikloorifluorietikkahappo-metyyliesteriä (argon-atmosfääri). Keitetään 2 tunnin ajan « 57 • 94415 palautusjäähdyttäen, annetaan jäähtyä, laimennetaan di-etyylieetterillä, suodatetaan Celite*:n läpi ja haihdutetaan suodos. Jäännöksen kromatografointi piihappogeelissä käyttämällä eluenttina heksaani/etyyliasetaattia (19:1) tuottaa 5,07 g yhdistettä 1, massaspektri (field-desorp-tion): 303 (M+) , ^H-NMR (60 MHz, CDC13) : mm. 5,93 (dxd, J « 31 ja 8,5, H-C(1')).

b) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(2'-fluori-3'-hydroksi-propenyy- 1i)-oksatso1idiini-3-karboksyy1ihappo-tert-butw1iesteri (2)

Liuokseen, jossa on 4,9 g kohdan a) mukaista esteriä 2. 160 ml:ssa absoluuttista dietyylieetteriä, lisätään tipoittain di-isobutyylialuminiumhydridin IM-liuos heksaanissa. Sekoitetaan tunnin ajan 0 - 5°:ssa, lisätään 80 ml etyyliasetaattia, sitten 25 ml 2N-natriumhydroksidia, jolloin lämpötila pidetään alle 25°:ssa. Sekoitetaan 30 minuutin ajan huoneen lämpötilassa, lisätään 50 g natriumsulfaat-tia, suodatetaan ja pestään etyyliasetaatilla. Suodoksen kuivattaminen natriumsulfaatilla, haihduttaminen ja kromatografointi 100 g:ssa piihappogeeliä heksaani/etyyliase-taatilla (3:1) tuottaa 3,7 g yhdistettä 2/ [a]D = +2,5° (c - 2,5, CHCI3), C13H22N04F: laskettu (%): C 56,72, H 8,06, N 5,09, saatu (%): C 56,2, H 8,2, N 5,1.

c) (4R)—4—(3#-bromi-2'-fluori-propenyyli)-2,2-dimetyyli-oksatsolidiini-3-karboksyylihappo-£e£t-butyyliesteri (3.) --- Liuokseen, jossa on 3,7 g kohdan b) mukaista alkoholia 2 200 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, lisätään 0 - 2°:ssa 10 minuutin kuluessa 6,63 g tetrabromimetaania ja 5,24 g tri-fenyylifosfiinia. Sekoitetaan 15 tunnin ajan 0 - 2°:ssa ja sitten haihdutetaan, otetaan 80 ml:aan etyyliasetaattia, suodatetaan ja haihdutetaan suodos. Jäännöksen kromatogra- 4 • .

94415 58 fointi 50 g:ssa piihappogeeliä heksaani/etyyliasetaatilla (4:1) tuottaa 3,7 g bromidia 2» [a]D = +12,7· (c = 1, CHC13), C13H21NBrF03: laskettu (%): C 46,17, H 6,26, N 4,14, saatu (%): C 46,4, H 6,3, N 4,2.

d) (4R)-2,2-dimetyyli-4-(2'-fluori-3'-di-2-propyylifosfo-no-propenyy1i)-oksatsolidiini-3-karbokswlihappo-tert-bu-tyyliesteri (£)

Liuos, jossa on 3,7 g kohdan c) mukaista bromidia 2 30 ml:ssa tri-2-propyylifosfiittia, lämmitetään 100 mbaarissa 7 tunnin kuluessa 130 - 135°:seen. Ylimääräinen reagenssi haihdutetaan pois 90°:ssa/0,l mbaarissa. Jäännöksen kroma-tografointi 100 g:ssa piihappogeeliä heksaani/etyyliasetaatilla (3:1) tuottaa 2,8 g fosfonaattia 4., [a]D = -8,6° (c = 3, chci3), c19h35nfo6p: laskettu (%): C 53,89, H 8,33, N 3,31, saatu (%): C 53,7, H 8,4, N 3,4.

e) N—((2R)-4-fluori-l-hydroksi-5-di-2-propyyli-fosfono-pent-3-en-2-yyli)-karbamiinihappo-tert-butvvliesteri (2)

Liuosta, jossa on 2,3 g kohdan d) mukaista fosfonaattia 4 \ 250 ml:ssa metanolia, sekoitetaan Amberlyst-15:n kanssa (5 g, H+-muoto) 20 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Suodatetaan, haihdutetaan ja kromatografoidaan 80 g:ssa piihappogeeliä. Eluointi etyyliasetaatilla tuottaa 1,31 g alkoholia 5, [a]D = -21,1° (c = 1, CHC13), C13H31NF05P: laskettu (%): C 52,31, H 8,51, N 3,81, saatu (%): C 50,2, H 8,2, N 3,7.

f) (2R) -2-tert-butoksikarbonyyliamino-4-fluori-5-di-2-pro-pyylifosfono-3-penteenihappo (2)

Liuokseen, jossa on 1,3 g kohdan e) mukaista alkoholia 2 80 ml:ssa asetonia, lisätään 0 - 2°:ssa 2,5 ml liuosta, - 94415 59 joka on 3,25-molaarinen kromitrioksidin suhteen ja 5,29-molaarinen rikkihapon suhteen. Sekoitetaan 2 tunnin ajan 0 - 2°:ssa ja annetaan lämmetä 4 tunnin kuluessa huoneen lämpötilaan. Lisätään 10 ml 2-propanolia, 100 ml etyyliasetaattia ja 50 ml 20%:sta NaCl-liuosta ja sitten erotetaan vesifaasi ja uutetaan 4 kertaa kulloinkin 100 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaanisten faasien kuivattaminen nat-riumsulfaatilla, haihduttaminen ja kromatografointi 70 g:ssa piihappogeeliä käyttämällä eluenttina heksaani/etyy-liasetaatti/etikkahappoa (10:16:1) tuottaa 0,87 g happoa £, [«]D * -72,9e (C « 0,8, CHCl3).

g) (2R)—2-amino—4-fluori—5-fosfono-3-penteenihappo (7)

Liuosta, jossa on 0,8 g kohdan f) mukaista yhdistettä £ ja 0,84 ml Ν,Ο-bis-trimetyylisilyyliasetamidia 80 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Lisätään 0,98 ml trimetyylibromisilaania ja sekoitetaan 30 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Haihtuvat aineosat haihdutetaan pois, jäännös liuotetaan 50 ml:aan dikloorimetaania ja sitten lisätään 0 - 5°:ssa 200 ml vettä. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään 2 kertaa kulloinkin 50 ml:11a vettä. Vesifaasit haihdutetaan 10 ml:aan suurtyhjiössä. Kromatografointi 30 ml:ssa Dowex 50 Wx8:a käyttämällä eluenttina vettä ja eluaatin lyofilisointi tuottaa 0,22 g yhdistettä 7, [a)D = -44,8® (c = 0,5, H20), massaspektri (fast-atom bombardment): 214 (M+H)+. ^C-NMR (75 MHz, D20): 172,7 (C02H), 161,5 (dxd, J = 263 ja 12, C(4)) , 100,9 (t, J n. 11, C(3)), 49,5 (C(2)), 33,5 (dxd, J = 128 ja 26, C(5)).

·< Näyte derivatisoidaan enantiomeeripuhtauden analysoimiseksi (R)-(+)-metoksi-trifluorimetyyli-fenyylietikkahappo-kloridilla amidiksi. 1H-NMR-analyysi (300 MHz) integroimalla OCH3-signaalit tuottaa > 90 % (2R)-isomeeriä (3,49 ppm) ja < 10 % (2S)-isomeeriä (3,38 ppm).

60 - 94415

Esimerkki 9: (2R)-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteeni- happoetyyliesteri a) (2R,3S)-2-formyyliamino-3-hydroksi-4-metyyli-4-pentee-nihappoetyyliesteri (1) aa) Lähtöaineena 1,1,3,3-tetrametyyli-1,3-disila-2-atsoli-diini-N-etikkahappoetyyliesteri

Liuokseen, jossa on 2,26 ml N-sykloheksyyli-N-isopropyyli-amiinia 60 ml:ssa absoluuttista tetrahydrofuraania, lisätään -20e:ssa 7,6 ml butyylilitiumin 1,6-molaarista liuosta heksaanissa. 20 minuutin kuluttua jäähdytetään -78°:seen ja lisätään tipoittain liuos, jossa on 3 g 1,1,3,3-tetrametyyli-l,3-disila-2-atsolidiini-N-etikkahap-poetyyliesteriä 60 ml:ssa tetrahydrofuraania. Sekoitetaan tunnin ajan -78°:ssa ja sitten lisätään 142 ml syklopenta-dienyyli-bis-O-l,2:5,6-di-isopropylideeni-D-glukofurano-syyli-titaani(IV)kloridin n. 0,035-molaarista liuosta eetterissä ja sekoitetaan 17 tunnin ajan -78°:ssa. Reaktio-liuos siirretään teräskanyylin avulla argon-paineella astiaan, jossa on -78°:seen jäähdytettyä liuosta, jossa on 1,1 ml metakroleiinia 15 ml:ssa tetrahydrofuraania. Annetaan lämmetä hitaasti huoneen lämpötilaan, sekoitetaan 2 tunnin ajan, lisätään 1,5 ml vettä ja suodatetaan. Suodos laimennetaan 250 ml:11a dietyylieetteriä, pestään 3 kertaa kulloinkin 250 ml:11a n. 10%:sta keittosuolaliuosta ja 250 ml:11a kyllästettyä keittosuolaliuosta. Vesifaasit uutetaan 2 kertaa kulloinkin 250 ml:11a dietyylieetteriä. Orgaaniset faasi kuivatetaan natriumsulfaatin päällä, haih-dutetaan ja liuotetaan kuumana 150 ml:aan sykloheksaania. Jäähtyessä kiteytyy l,2:5,6-di-0-isopropylideeni-D-gluko-furanoosi. Emäliuos haihdutetaan, jäännös otetaan 120 ml:aan tetrahydrofuraania, 24 ml:aan vettä ja 4,5 ml:aan etikkahappoa ja sekoitetaan 2 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Haihduttaminen suurtyhjiössä huoneen lämpötilassa • · • 94415 61 tuottaa 10,6 g jäännöstä, joka sisältää (2R,3S)-2-amino- 3-hydroksi-4-metyyli-4-penteenihappoetyyliesterin. Näytettä (5 mg) derivatisoidaan 2 tunnin ajan 0,2 ml:11a tri-fluorietikkahappoanhydridiä 0,3 ml:ssa dikloorimetaania. Kapillaarikaasukromatografia (Chirasil®-L-Val, 90 -180®/2° minuuttia kohden) tuottaa 99,25 % (2R,3S)-entan-tiomeeriä (retentioaika Tret = 10,28 min.) ja 0,75 % (2S,3R)—enantiomeeriä (retentioaika Tre^ = 11,48 min.). Kuumennetaan tämän jälkeen 5 1/2 tunnin ajan 80 ml:ssa muurahaishappoetyyliesteriä palautusjäähdyttäen. Haihduttaminen ja kromatografointi piihappogelissä heksaani/etyyliasetaatilla (1:1) tuottaa 1,64 g formamidia 1. Näytteen (5 mg) analyysi asetaattina kaasukromatografialla (Chira-sil®-L-Val, 160 - 180®, 1® minuuttia kohden): 99,2 % (2R,3S)-enantiomeeriä (Tret « 13,64 min.), 0,8 % (2S,3R)-enantiomeeriä (Tret * 13,94 min.).

a,b) Lähtöaineena isosyaanietikkahappoetyyliesteri

Liuokseen, jossa on 24,88 g isosyaanietikkahappoetyylies-teriä ja 18,51 g metakroleiinia 220 ml:ssa 1,2-dikloori-metaania, lisätään 50®:ssa 1,65 g (S)-N-metyyli-N[2-(dime-tyyliamino)-etyyli]-l-[(R)-1',2-bis-(difenyylifosfino)-ferrosenyyli]-etyyliamiinia ja 1,105 g bis(sykloheksyyli-isosyanidi)kulta(I)tetrafluoriboraattia. Sekoitetaan 5 tunnin ajan 50®:ssa argon-atmosfäärissä, haihdutetaan, otetaan 400 ml:aan dietyylieetteriä, suodatetaan ja haihdutetaan suodos. Haihdutusjäännöksen tislaus suurtyhjiös-sä (0,04 mbaaria) tuottaa 33,62 g 5-(2-propenyyli)-oksat-soliini-4-karboksyylihappoetyyliesterin stereoisomeeri-seosta, kp. 42 - 52®, MS.: m/e = 183 (2 %, M+), 110 (80 %), 85 (100 %). Liuosta, jossa on 33 g tätä seosta 74 ml:ssa vettä ja 33 ml:ssa tetrahydrofuraania, kuumennetaan 3 tunnin ajan palautusjäähdyttäen. Haihduttaminen tyhjiössä tuottaa 36,1 g stereoisomeeristen 2-formyyliamino-3- . hydroksi-4-metyyli-4-penteenihappo-etyyliestereiden 2.

* 62 94415 seosta. Näyte (35 mg) derivatisoidaan 2 ml:ssa dikloorime-taania 0,05 ml:lla Ν,Ο-bis-trimetyylisilyyliasetamidia ja analysoidaan kapillaari-kaasukromatografialla (Chirasil·-L-Val, 150°): 89,1 % (2R,3S)-isomeeriä (Tret ® 22,1 min.), 5,8 % (2S,3R)-isomeeriä (Tret = 23,1 min.), 2,8 % (2R,3R)-isomeeriä (Tret * 24,3 min.), 2,3 % (2S,3S)-isomeeriä (Tret - 25,4 min.).

Liuokseen, jossa on 20,2 g yhdistettä 2, 16,83 ml trietyy-liamiinia ja 0,62 g 4-(dimetyyliamino)pyridiiniä 300 ml:ssa dikloorimetania, lisätään tipoittain 25 minuutin kuluessa 0 - 3®:ssa liuos, jossa on 11,42 g etikkahappoan-hydridiä 50 ml:ssa dikloorimetaania. 30 minuutin kuluttua pestään 2 kertaa jääkylmällä 2n-suolahapolla ja 2 kertaa 10%:sella keittosuolaliuoksella. Vesifaasit uutetaan 100 ml:11a dikloorimetaania. Natriumsulfaatin päällä kuivatettujen orgaanisten faasien haihdutusjäännös liuotetaan kuumana heksaani/etyyliasetaattiin (4:1). Annettaessa hitaasti jäähtyä n. 30°:seen kiteytyy 1,82 g raseemisia (2R*, 2S*)-2-formyyliamino-3-asetoksi-4-metyyli-4-penteenihappo-etyyliestereitä, sp. 98 - 106°. Emäliuos jäähdytetään hitaasti -12°:seen ja pidetään tunnin ajan tässä lämpötilassa. Suodatus tuottaa 15,04 g asetaattia 2, sp. 73 - 75°, [a]j) = -75,6° (c *= 1, CHC13) , kaasukromatografinen ana- v lyysi (Chirasil*-L-Val, 160 - 180®, 1® minuuttia kohden): (2R,3S)-isomeeriä 93,5 % (Tret = 14,5 min.), (2S,3R)-isomeeriä 2,2 % (Tret = 14,8 min.), (2R,3R)-isomeeriä 2,2 % (Tret = 16,8 min.), (2S,3S)-isomeeriä 2,1 % (17,1 min.).

Liuokseen, jossa on (2R,3S)-2-formyyliamino-3-asetoksi-4---- metyyli-4-penteenihappoetyyliesteriä (3) 400 ml:ssa abso luuttista etanolia, lisätään -16®:ssa 20,64 g vedetöntä kaliumkarbonaattia. Sekoitetaan 4 tunnin ajan -18® --ll®:ssa ja sitten lisätään tipoittain 500 ml puskuri-liuosta (l-molaarinen, fosfaatti, pH = 7). Sekoitetaan 30 minuutin ajan huoneen lämpötilassa ja uutetaan 3 kertaa 94415 63 kulloinkin 350 ml:11a dikloorimetaania. Natriumsulfaatin päällä kuivatettujen orgaanisten faasien haihdutusjäännöksen kromatografointi 1 kg:ssa piihappogeeliä käyttämällä eluenttina heksaani/etyyliasetaattia (1:2) tuottaa 9,8 g alkoholia X.

b) (2R)-2-formyyliamino-4-metyyli-5-di-isopropyylifosfono- 3-penteenihappoetyyliesteri (1)

Liuokseen, jossa on 14,19 g kohdan a) mukaista yhdistettä 1 210 ml:ssa 1,2-dikloorietaania, lisätään 18 - 20°:ssa 6,57 ml tionyylibromidia ja 2-tuntisen sekoittamisen jälkeen 135 ml vettä. 15 minuutin kuluttua erotetaan orgaaninen faasi ja pestään 3 kertaa kulloinkin 150 ml:11a jää-vettä ja kerran 100 ml:11a jääkylmää kyllästettyä natrium-vetykarbonaatti-liuosta. Natriumsulfaatilla kuivatetun orgaanisen faasin haihdutusjäännys liuotetaan 60 ml:aan tri-isopropyylifosfiittia ja sekoitetaan 17 tunnin ajan 75°:ssa/100 mbaarissa. Ylimääräinen reagenssi tislataan pois suurtyhjiössä 90°:ssa. Jäännöksen kromatografointi 650 g:ssa piihappogeeliä etyyliasetaatti/metanolilla (20:1) tuottaa 10,88 g fosfonihappoesteriä £., (a]D = -123,5e (c = 1, CHCI3). 1H-NMR-analyysi (300 MHz) lisäämällä (1R)-1-(9'-antrasenyyli)-2,2,2-trifluorietanolia v osoittaa enantiomeeripuhtaudeksi >90 %.

c) (2R)-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyy-liesteri (£)

Liuokseen, jossa on 10,3 g kohdan b) mukaista yhdistettä 4 -- 42 ml:ssa dikloorimetaania, lisätään tipoittain huoneen lämpötilassa 15 minuutin kuluessa 23 ml trimetyylibromisi-laania. 21 1/2 tunnin kuluttua lisätään jääjäähdytyksessä 42 ml etanolia ja sekoitetaan edelleen 20 tunnin ajan. Haihdutetaan, jäännös liuotetaan 3 kertaa kulloinkin 70 ml:aan tolueenia ja haihdutetaan joka kerta uudestaan.

94415 64 Jäännös liuotetaan 42 ml:aan etanolia ja sitten lisätään 42 ml propyleenioksidia. 11/2 tunnin kuluttua suodatetaan. Suodatusaineksen kuivattaminen tyhjiöeksikkaattoris-sa P205/K0H:n päällä (3 tuntia/80e) tuottaa 6,17 g yhdistettä 5, [<1]D = -78° (c = 0,6, H20), sp. 194 - 197° (haj.) , C8H16N05P: laskettu (%): C 40,51, H 6,80, N 5,91, P 13,06 saatu (%): C 39,4, H 7,09, N 5,73, P 12,98.

Näyte derivatisoidaan enantiomeeripuhtauden analysoimiseksi (R)-(+)-metoksi-trifluorimetyyli-fenyylietikkahappo-kloridilla ja diatsometaanilla amidi-dimetyylifosfonaatik-si. ^H-NMR-analyysi (300 MHz) integroimalla OCH3-signaalit tuottaa > 93 % (2R)-isomeeriä (3,51 ppm) ja < 7 % (2S)- isomeeriä (3,37 ppm).

Esimerkki 10i (2R)-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteeni-happo

Liuosta, jossa on 100 mg (2R)-2-amino-4-metyyli-5-fosfono- 3-penteenihappoetyyliesteriä (esim. 10) 3 ml:ssa n-suola-happoa, lämmitetään 4 1/2 tunnin ajan 100°:n hauteessa.

Haihdutetaan ja jäännöstä kuivatetaan 30 minuutin ajan suurtyhjiössä 60°:ssa. Jäännös liuotetaan 15 ml:aan etano-lia ja sitten lisätään 4 ml propyleenioksidia. Suodattaminen ja suodatusaineksen kuivattaminen tyhjiöeksikkaatto-rissa P205/KOH:n päällä tuottaa 62 mg happoa.

Näyte derivatisoidaan enantiomeeripuhtauden analysoimiseksi (R)-(+)-metoksi-trifluorimetyyli-fenyylietikkahappo-.1! kloridilla amidiksi ja analysoidaan ^H-NMRtllä (300 MHz) integroimalla OCH3-signaalit: > 95 % (2R)-enantiomeeriä (3,25 ppm) ja < 5 % (2S)-enantiomeeriä (3,18 ppm).

• * 94415 65

Esimerkki 11; E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihap-po (1) 12 g E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyli-esteriä sekoitetaan 70 ml:ssa vettä 19 tunnin ajan palautus jäähdyttäen. Reaktioseos jäähdytetään hitaasti huoneen lämpötilaan, sekoitetaan tunnin ajan jäähauteessa, suodatetaan ja pestään kylmällä vedellä. Näin saadaan E-2-ami-no-4-metyy1i-5-fosfono-3-penteenihappo monohydraattina, sp. 163° (haj.).

Esimerkki 12: E-2-dimetwliamino-4-metwli-5-fosfono-3-penteen ihappo

Seosta, jossa on 3,56 g E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteriä, 45 ml 98%:sta muurahaishappoa ja 30 ml 37%:sta formaldehydin vesiliuosta, sekoitetaan 30 minuutin ajan 105°:n haudelämpötilassa. Tämän jälkeen haihdutetaan kuiviin tyhjiössä. Jäännös otetaan pieneen määrään vettä ja sitten tämä kaikki haihdutetaan jälleen tyhjiössä. Tämä toimenpide toistetaan vielä 2 kertaa.

Kiinteään jäännökseen sekoitetaan 80 ml vettä. Tunnin kuluttua liukenematon erotetaan pois kovasuodattimen läpi ja pestään vedellä. Suodos ja pesuvesi haihdutetaan tyhjiössä kuiviin. Jäännös suspendoidaan 100 ml:aan vettä ja sitten lisätään 30 ml 1 N natriumhydroksidia ja sitten annetaan seistä 2 päivän ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos haihdutetaan tyhjiössä n. 25 ml:n jäämämäärään ja puhdistetaan ioninvaihdinkromatografialla (Dowex 50 W x 8 H20). Fraktiot, jotka sisältävät halutun tuotteen, yhdistetään, .!! haihdutetaan tyhjiössä ja kiteytetään uudelleen vesi /eta nolista. Näin saadaan E-2-dimetyyliamino-4-metyyli-5-fos-fono-3-penteenihappo, sp. 239° (haj.). 1 · • · 94415 66

Esimerkki 13: E-2-dimetvYliamino-4-metwli-5-fosfono-3-penteenihappoetwliesteri 1,19 g:aan E-2-dimetyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-pen-teenihappoa lisätään 30 ml 8-n. etanolista kloorivety-liuosta ja sekoitetaan 24 tunnin ajan 40e:ssa« Reaktioseos haihdutetaan tyhjiössä kuiviin. Lisätään 30 ml puhdasta etanolia, sitten haihdutetaan uudelleen, jolloin saadaan 1,90 g punertavaa öljyä, joka liuotetaan kuumaan isopropa-noliin. Jäähtymisen jälkeen saadaan kiteinen E-2-dimetyy-liamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri-hydrokloridi, sp. 203° (haj.).

Esimerkki 14: E-2-bentswliamino-4-metwli-5-fosfono-3-penteenihappoetvvliesteri

Liuokseen, jossa on 5,69 g E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono- 3-penteenihappoetyyliesteriä 48 ml:ssa vettä ja 48 ml:ssa etanolia, lisätään 16 ml jääetikkaa, 5,90 g natriumase-taattia (vedetöntä) ja 12,2 ml bentsaldehydiä. Jäähdyttämällä tehokkaasti jää/keittosuolalla lisätään tunnin kuluessa n. 70 annoksena 15,70 g natriumboorihydridiä, jolloin puolen määrän lisäyksen jälkeen, n. 30 minuutin kuluttua, lisätään 4 ml bentsaldehydiä. Reaktioseoksen läm-v pötila pidetään 0 - 10°:ssa. Lisäyksen loputtua sekoite taan tunnin ajan 0°:ssa ja sitten lisätään tipoittain 1 N suolahappoa, kunnes reaktio on kongonhapan. Liukenemattomat suolat suodatetaan pois ja pestään vedellä. Suodos haihdutetaan kuiviin tyhjiössä, jäännös haihdutetaan vielä 2 kertaa etanolin lisäyksen jälkeen. Sitten jäännökseen sekoitetaan 150 ml etanolia, liukenematon imusuodatetaan ja pestään etanolilla. Suodokseen lisätään 25 ml propylee-nioksidia ja sekoitetaan 2 tunnin ajan. Kiteytynyt materiaali (pääasiassa edukti) suodatetaan pois. Emäliuos haihdutetaan kuiviin ja siihen sekoitetaan 350 ml etyyliasetaattia. Xmusuodatuksen jälkeen saatu kiteinen raaka- - 94415 67 tuote kiteytetään uudelleen etanolista. Näin saadaan E-2-bentsyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyli-esteri, sp. 192° (haj.).

Esimerkki 15: E-2-bentswliaroino-4-metwli-5-fosfono-3-penteenihappoetvvliesteri

Liuosta, jossa on 1,00 g E-2-bentsyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteriä 6 ml:ssa vettä, sekoitetaan 20 tunnin ajan palautusjäähdyttäen. Reaktioseos haihdutetaan kuiviin tyhjiössä. Jäännökseen lisätään etanolia ja haihdutetaan jälleen. Tämä toimenpide toistetaan vielä 2 kertaa. Jäännös liuotetaan kiehuvaan metanoliin. Jäähtymisen jälkeen saadaan kiteinen E-2-bentsyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp. 150° (haj.).

Esimerkki 16; E-2-isopropwliamino-4-metwli-5-fosfono-3-penteenihappoetvvliesteri

Liuokseen, jossa on 6,40 g E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono- 3-penteenihappoetyyliesteriä 54 ml:ssa vettä ja 18 ml:ssa jääetikkaa, lisätään 6,64 g natriumasetaattia (vedetöntä) ja 18 ml asetonia. Jäähdyttämällä tehokkaasti jää/keitto-suolalla lisätään 90 minuutin kuluessa n. 70 annoksena . 17,67 g natriumboorihydridiä, jolloin 20 minuutin ja 50 minuutin kuluttua lisätään kulloinkin 18 ml asetonia. Lisäyksen loputtua paksua, valkoista suspensiota sekoitetaan vielä 30 minuutin ajan 0°:ssa ja sitten lisätään tipoittaan 1 N suolahappoa, kunnes reaktio on kongonhapan. Muodostunut kirkas liuos haihdutetaan tyhjiössä, jäännös haihdutetaan vielä 2 kertaa etanolin lisäyksen jälkeen. Jäännökseen sekoitetaan 200 ml etanolia huoneen lämpötilassa, liukenematon suodatetaan pois ja pestään etanolilla. Suodos haihdutetaan tyhjiössä ja jäännös kiteytetään uudelleen isopropanolista. Näin saadaan E-2-isopropyyli-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri-hyd-rokloridi, sp. 203 - 205° (haj.).

68 94415

Esimerkki 17: E-2-isopropwliamino-4-metwli-5-fosfono-3-penteenihappo

Liuosta, jossa on 1,20 g E-2-isopropyyliamino-4-metyyli- 5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri-hydrokloridia 7 ml:ssa vettä, sekoitetaan 20 tunnin ajan palautusjäähdyttäen. Reaktioseos haihdutetaan kuiviin tyhjiössä. Jäännökseen lisätään etanolia ja haihdutetaan jälleen. Tämä toimenpide toistetaan vielä 2 kertaa. Jäännös liuotetaan 25 ml:aan etanolia, lisätään sekoittaen tipoittain kaikkiaan 5 ml propyleenioksidia ja sitten tämä seos haihdutetaan kuiviin. Jäännös liuotetaan pieneen määrään vettä ja sitten lisätään etanolia, kunnes seos on samea. Sekoitettaessa 4 tunnin ajan huoneen lämpötilassa tapahtuu hidas kiteytyminen. Tuote suodatetaan pois, pestään etanolilla ja dietyylieetterillä ja kuivatetaan 100°:ssa suurtyhjiössä.

Näin saadaan E-2-isopropyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp. 225 - 227° (haj.).

Esimerkki 18: E-2-metwliamino-4-metwli-5-fosfono-3-pen-t?enihappo a) 2-(N-metyyli-N-formyyli-amino)-3-hydroksi-4-metyyli-4-penteenihappoetyyliesteri (1) 20.60 g esimerkin 1 mukaisesti valmistettua 5-(2-propenyy- li)-2-oksatsoliini-4-karboksyylihappoetyyliesteriä liuotetaan 200 ml:aan kuivaa dikloorimetaania argon-atmosfäärissä. Sitten lisätään tipoittain 15°:ssa suspensio, jossa on 16.60 g trimetyylioksoniumtetrafluoriboraattia 200 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania. Reaktioseosta sekoitetaan 17 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten lisätään hitaasti 150 ml vettä ja 45 ml kyllästettyä kaliumbikarbonaatti-liuosta, niin että saadaan pH-arvoksi 7. Erotettu orgaaninen faasi pestään 2 kertaa vedellä ja kerran kyllästetyllä keittosuolaliuoksella ja kuivatetaan natriumsulfaatin • .

94415 69 päällä. Dikloorimetaani tislataan pois ja sitten öljyinen jäännös tislataan kuulaputkessa, kp. 120 - 130°/15 Pa.

Näin saadaan 2-(N-metyyli-formyyliamino)-3-hydroksi-4-me-tyyli-4-penteenihappoetyyliesteri vaaleankeltaisena hunajana. IR (CH2C12)j 3550 (HO), 1740 (CO-esteri), 1675 (CO-amidi).

b) E-2-(N-metyyli-N-formyyli-amino)-4-metyyli-5-di-isopro-pyy1ifosfono-3-penteenihappoetyy1iesteri (2)

Liuokseen, jossa on 17,80 g 2-(N-metyyliformyyliamino)-3-hydroksi-4-metyyli-4-penteenihappoetyyliesteriä 248 ml:ssa 1,2-dikloorietaania, lisätään tipoittain 20°:ssa argon-atmosfäärissä 7,70 ml tionyylibromidia. Seosta sekoitetaan 2 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Tämän jälkeen lisätään tipoittain hieman jäähdyttäen (20°) 150 ml vettä. Kaksi-faasista seosta sekoitetaan hyvin vielä 20 minuutin ajan. Orgaaninen faasi erotetaan ja pestään 3 kertaa vesi/jääl-lä, kerran jää/kyllästetty kaliumbikarbonaatti-liuoksella ja kerran kyllästetyllä keittosuolaliuoksella. Kuivatetaan natriumsulfaatin päällä ja tislataan pois 1,2-dikloorimetaani 35°:ssa tyhjiössä, jolloin saadaan välituote, johon lisätään huoneen lämpötilassa 66 ml tri-isopropyylifos-fiittia ja sitten sekoitetaan 75°:ssa alennetussa painees-·. sa (n. 13 kPa) 17 tunnin ajan. Sitten ylimääräinen tri- isopropyylifosfiitti ja muut haihtuvat sivutuotteet tislataan pois suurtyhjiössä. Puhdistamalla pylväskromatografi-sesti (piihappogeeli, etikkaesteri) saadaan E-2-(N-metyyli-formyyliamino) -4-metyyli-5-di-isopropyylifosfono-3 -penteenihappoetyy 1iesteri kellertävänä hunajana. IR (CH2C12): 1740 (CO-esteri), 1670 (CO-amidi), 1235 (P=0), 980 - 1010 (P-O-C) . Yhdiste esiintyy ^-H-NMR-spektrin mukaisesti kahden rotameerin seoksena.

c) E-2-metyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo (2) 94415 70

Liuokseen, jossa on 9,50 g E-2-(N-metyyli-formyyliamino)- 4-metyyli-5-di-isopropyylifosfono-3-penteenihappoetyyli-esteriä 40 ml:ssa kuivaa dikloorimetaania, lisätään ti-poittain 20°:ssa argon-atmosfäärissä 20 ml trimetyylibro-misilaania 10 minuutin kuluessa. Sekoitetaan 20 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten lisätään tipoittain 15 minuutin kuluessa 37 ml etanolia ja sekoitetaan jälleen 20 tunnin ajan. Tämän jälkeen kirkas reaktioliuos haihdutetaan kuiviin tyhjiössä. Jäännös haihdutetaan vielä 2 kertaa sen jälkeen, kun siihen on lisätty kulloinkin 30 ml tolueenia. Saatavaan öljyyn lisätään 128 ml 2 N suolahappoa ja sekoitetaan 16 tunnin ajan 85· :n haudelämpötilassa.

Reaktioseos haihdutetaan tyhjiössä. Haihduttaminen 2 kertaa etanoli/tolueenin (1:1) lisäyksen jälkeen tuottaa öljyisen jäännöksen, joka liuotetaan 51 ml:aan etanolia, ja lisätään tipoittain liuos, jossa on 51 ml propyleenioksi-dia 51 ml:ssa etanolia. Kiteisenä saostuva tuote suodatetaan pois 2 tunnin kuluttua jä kiteytetään uudelleen vesi /etanolista. Näin saadaan E-2-metyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp. 239· (haj.).

Esimerkki 19:

Vastaavalla, esimerkeissä 1-3 tai 5 ja 8 esitetyllä ta-v valla voidaan valmistaa edelleen seuraavat yhdisteet: E-2-amino-5-fosfino-3-penteenihappoetyyliesteri, sp. 172 -173·, E-2-amino-5-fosfino-3-penteenihappobutyyliesteri, sp. 160 - 161·, ..*« E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri, sp. 167 - 168·, E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappobutyyliesteri, sp. 160 - 161°, E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappo-oktyyliesteri, sp. 161 - 162°, • .

94415 71 E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappopropyyliesteri, sp. 161 - 162°, E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappopentyyliesteri, sp. 160 - 161®, E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappoisobutyyliesteri, sp.

163 - 164®, E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappo-sek-butyyliesteri, sp.

169 - 170®, E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoinetyylieste-ri, sp. 193 - 194®, (vesi/asetoni, 9:1), E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappopropyylieste-ri, sp. 184 - 185®, (vesi), E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo-n-butyylies-teri, sp. 186 - 187®, (vesi/asetoni, 2:1), E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo-isobutyyli-esteri, sp. 181 - 182®, (vesi/asetoni, 9:1), E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappopentyylieste-ri, sp. 207 - 208®, E-2-amino-4-metyyli-5-f osf ono-3-penteenihappoheksyylieste-ri, sp. 207 - 208®, E-2-amino-7-fosfono-4-hepteenihappobutyyliesteri, sp.

186®, E-2-amino-5-fosfono-4-penteenihappometyyliesteri, sp. 219 - 220®, ·.· E-2-amino-5-fosfono-4-penteenihappoetyyliesteri, sp. 234°, E-2-amino-5-fosfono-4-penteenihappobutyyliesteri, sp.

239®, E-2-amino-5-fosfono-4-penteenihappo-oktyyliesteri, sp.

236®, E-2-axnino-5-fosfono-4-penteenihappo-2-hydroksietyylieste-A ri, sp. 197®.

♦ „ 94415

Esimerkki 20: Vastaavalla, esimerkeissä 11, 12, 17 ja 18 tai 4, 6, 7, 8 ja 10 esitetyllä tavalla voidaan valmistaa edelleen seuraavat yhdisteet: E-2-amino-5-fosfono-4-penteenihappo, sp. 219 - 220°, E-2-ämino-5-metyylifosfonyyli-4-penteenihappo, sp. 222°, E-2-amino-5-butyylifosfonyyli-4-penteenihappo, sp. 232 -233°, E-2-amino-5-oktyylifosfonyyli-4-penteenihappo, sp. 221 -223°, E-2-amino-5-dodekyylifosfonyyli-4-penteenihappo, sp. 211°, E-2-amino-6-fosfono-4-hekseenihappo, sp. 244 - 246°, E-2-amino-6-metyylifosfonyyli-4-hekseenihappo, sp. 145 -150°, E-2-amino-6-butyylifosfonyyli-4-hekseenihappo, sp. 216°, E-2-amino-6-oktyylifosfonyyli-4-hekseenihappo, sp. 209 -210°, E-2-amino-6-dodekyylifosfonyyli-4-hekseenihappo, sp. 197 - 200°, E-2-amino-7-fosfono-4-hepteenihappo, sp. 125° (haj.), E-2-amino-5-fosfono-3-penteenihappo, valkoinen amorfinen jauhe, 1H-NMR (D20): 2,39 (dd, 2H, C(5)-H), 4,27 (d, 1H, C(2)-H), 5,53 (m, 1H, C(3)-H), 5,87 (m, 1H, C(4)-H), sp. etanoli/vedestä suoritetun uudelleenkiteyttämisen jälkeen v 191 - 192°, E—2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, 1h-NMR (D20): 1,73 (S, 3H, CH3), 4,55 (s, 1H, C(2)-H), E-2-amino-5-metyylifosfonyyli-3-penteenihappo, amorfinen valkoinen jauhe, 1H-NMR (D20): 2,55 (dd, 2H, C(5)-H), 4,38 (d, 1H, C(2)—H), 5,64 (m, 1H, C(3)-H), 5,91 (m, 1H, C(4)-H) , E-2-amino-5-fosfino-3-penteenihappo, sp. 139 - 140°, E-2-amino-4-metyyli-5-fosfino-3-penteenihappo, sp. 176 -177®, (2S)-E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp.

196®, (a]2°d = +97,1 ± 1,9® (£ * 0,5, vesi).

94415 73 E-2-amino-4-metyyli-5-metyylifosfonyyli-3-penteenihappo, ^-NMR (D20) : 1,20 (d, 3H, CH3-P) , 1,75 (d, 3H, CH3) , 2,45 (d, 2H, C(5)-H), 4,50 (d, 1H, C(2)-H), 5,15 (m, 1H, C(3)-H), E-2-amino-2-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp. 225 -226° (vedestä), E-2-amino-3-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, valkoinen jauhe, sp. 168°, ^NMR (D20): 1,50 (d, 3H, CH3), 2,4 (m, 2H, CH2), 4,30 (s, 1H, C(2)-H), 5,60 (m, 1H, C(4)-H), E-2-amino-5-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, valkoinen amorfinen kiinteä kappale, ^H-NMR (020): 1,05 (dd, 3H, CH3), 2,45 (m, 1H, C(5)—H), 4,33 (d, 2H, C(2)-H), 5,5 ja 5,9 (2m, 2H, C(3)—H ja C(4)-H), E-2-amino-4-etyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp. 176°, E-2-amino-4-propyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp. 193®, E-2-amino-4-butyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp. 186 -187«, E-2-amino-4-isopropyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, sp.

201®, E-2-amino-4-tert-butYyli-5-fosfono--3-penteenihappo, sp.

252 - 253®, 1H-NMR (D20): 0,95 (s, 9H, (CH3)3C), Z-2-amino-4-tert-butyvli-5-,fosfono-3-penteenihappo. 1H-NMR (D20)ϊ 1,08 (s, 9H, (CH3)3C), 2,45 (m, 2H, CH2), 4,95 (d, 1H, C(2)-H), 5,20 (m, 1H, C(3)-H), < v. E-2-amino-4-bentsyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, värittö miä neulasia, sp. 196 - 198«, E-2-amino-4-fenyyli-5-fosfono-3-penteenihappo, värittömiä neulasia, sp. 230 - 233®, E-2-amino-4-metyyli-5-metyylifosfono-3-penteenihappo sivutuotteena, sp. 149 - 150®.

··

Esimerkki 21; E-2-metwliamino-4-metwli-3-penteenihappo-etvvliesteri 1,20 g:aan E-2-metyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-pentee-nihappoa lisätään 50 ml 8 N etanolista kloorivetyliuosta 94415 74 ja sekoitetaan 25 tunnin ajan 40°:ssa. Reaktioseos haihdutetaan tyhjiössä kuiviin. Kaksikertainen haihduttaminen etanoli/tolueenin (1:1) lisäyksen jälkeen tuottaa öljyisen jäännöksen, joka liuotetaan 5 ml:aan etanolia, ja sitten lisätään tipoittain liuos, jossa on 5 ml propyleenioksidia 5 ml:ssa etanolia. Kiteisenä saostuva tuote suodatetaan pois 2 tunnin kuluttua ja pestään etanolilla ja eetterillä. Kuivatetaan (80°, 4 tuntia) suurtyhjiössä, jolloin saadaan E-2-metyyliamino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteeni-happoetyyliesteri, sp. 235 - 240° (haj.).

Esimerkki 22: 1000 kapselin valmistus, jotka sisältävät 10 mg esimerkin 6 mukaista aktiivista ainetta ja joiden koostumus on seuraava: E-2-amino-6-fosfono-4-hekseenihappoa 10,0 g maitosokeria 207,0 g modifioitua tärkkelystä 80,0 g magnesiumstearaattia 3,0 g

Menetelmä: Kaikki jauhemaiset aineosat seulotaan seulalla, jonka silmäkoko on 0,6 mm. Sitten vaikuttava aine laitetaan sopivaan sekoittimeen ja sekoitetaan homogeeniseksi ensin magnesiumstearaatin kanssa, sitten maitosokerin ja tärkkelyksen kanssa. Gelatiinikapselit n:o 2 täytetään 300 mg:11a tätä seosta, jolloin käytetään kapselintäyttökonet-ta.

Vastaavalla tavalla valmistetaan kapseleita, jotka sisältävät 10 - 200 mg jotakin toista tässä julkaistua ja *: esimerkeissä 1-20 esitettyä yhdistettä.

Esimerkki 23: 10.000 tabletin valmistus, jotka sisältävät 10 mg esimerkin 5 mukaista aktiivista ainetta ja joiden koostumus on seuraava: • 94415 75 E-2-amino-6-fosfono-4-hekseenihappoa 100,00 g maitosokeria 2.535,00 g maissitärkkelystä 125,00 g polyeteeniglykolia 6000 150,00 g magnesiumstearaattia 40,00 g puhdistettua vettä g. s.

Menetelmä; Kaikki jauhemaiset aineosat seulotaan seulalla, jonka silmäkoko on 0,6 mm. Sitten vaikuttava aine sekoitetaan maitosokerin, magnesiumstearaatin ja puolen tärkke-lysmäärän kanssa sopivassa sekoittimessa. Loput tärkkelyksestä suspendoidaan 65 ml:aan vettä ja suspensio lisätään polyeteeniglykolin 260 ml:ssa vettä olevaan kiehuvaan liuokseen. Saatu tahna lisätään jauheisiin ja granuloidaan mahdollisesti lisäämällä vielä vettä. Granulaattia kuivatetaan yön yli 35°:ssa, seulotaan seulalla, jonka silmäkoko on 1,2 mm, ja puristetaan tableteiksi, joissa on mur-toura.

Vastaavalla tavalla valmistetaan tabletteja, jotka sisältävät 10 - 200 mg jotakin toista tässä julkaistua ja esimerkeissä 1-20 esitettyä yhdistettä.

i » « 9 4 I •

. ]· I

Claims (11)

94415 76

1. Menetelmä kaavan I R3 R4 H J-B-C-Rs HO- P” A 1 r6 (I)» Rt R2 mukaisten tyydyttymättömien aminohappoyhdisteiden ja niiden suolojen valmistamiseksi, jossa kaavassa Rj merkitsee vetyä, alkyyliä tai hydroksia, R2 merkitsee vetyä, alkyy-liä, halogeenialempialkyyliä, hydroksialempialkyyliä, alempialkoksialempialkyyliä, aryylialempialkyyliä, alem-pialkenyyliä, halogeenia tai aryyliä, R3 merkitsee vetyä, alkyyliä tai aryyliä, R« merkitsee vetyä tai alkyyliä, Rj merkitsee mahdollisesti esteröityä tai amidoitua karbok-sia, R« merkitsee substituoimatonta tai alempialkyylillä tai aryylialempialkyylillä substituoitua aminoryhmää, A merkitsee substituoimatonta tai alkyylillä substituoitua, 1-3 hiiliatomia (C-atomia) sisältävää α,ω-alkyleeniä tai suoraa sidosta ja B merkitsee metyleeniä tai sidosta, edellyttäen, että A merkitsee substituoimatonta tai alkyylillä substituoitua, 1-3 C-atomia sisältävää α,ω-alkyleeniä, kun B merkitsee suoraa sidosta, tunnettu siitä, että kaavan Is l4 -a-rBTs (ii>' R2 . mukainen yhdiste, jossa tähteillä R2, R3, R4, A ja B on kaavan I yhteydessä määritellyt merkitykset, tähteellä Zs on tähteen R5 merkitys tai se merkitsee suojattua karbok-sia, Z6 merkitsee suojattua ryhmää R* ja X 77 94415 merkitsee reaktiokykyistä esteröityä hydroksia, saatetaan reagoimaan kaavan OR Zj — P (III) h mukaisen yhdisteen kanssa, jossa merkitsee suojattua hydroksia, Z2 merkitsee vetyä, alkyyliä tai suojattua hydroksia ja R merkitsee eetteröivää ryhmää, siten, että saadussa kaavan R3 R, n y-B-?_z5 (IV> z’-rA-r * Zt R* mukaisessa välituotteessa suojatusta hydroksiryhmästä Z, ja mahdollisesti Z2 vapautetaan hydroksi, suojatusta aminoryhmästä Z6 amino ja mahdollisesti läsnä olevasta suojatusta karboksiryhmästä Z5 karboksi käsittelemällä trialempialkyylihalogeenisilaanilla halogenoidussa ali-faattisessa hiilivedyssä -25 - +50°C:ssa ja solvolysoi-malla, ja menetelmän mukaisesti saatavassa yhdisteessä, jossa Rj merkitsee esteröityä tai amidoitua karboksia, ·. muunnetaan esteröity tai amidoitu karboksiryhmä karbok- siksi ja/tai haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muunnetaan suolaksi tai saatu suola joksikin toiseksi suolaksi tai kaavan I mukaiseksi vapaaksi yhdisteeksi ja/tai haluttaessa erotetaan optinen isomeeri saadun kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen suolan stereoisomee-" risten muotojen seoksesta.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähdetään kaavan II mukaisesta yhdisteestä, jossa suojattu hydroksi Zj ja/tai Z2 merkitsee alifaattisella alkoholilla eetteröityä hydroksia, • · 94415 78 kuten mahdollisesti halogeenilla tai korkeammassa kuin a-asemassa hydroksilla, oksolla, alempialkoksilla, alempi-alkanoyylioksilla ja/tai mono- tai dialempialkyyliaminol-la substituoidulla alempialkanolilla, alempialkenolilla tai alempialkynolilla eetteröityä hydroksia, ennen kaikkea alempialkoksia.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähdetään kaavojen II ja III mukaisesta yhdisteestä, jossa suojattu ryhmä Z6 merkitsee mahdollisesti alempialkyylillä tai aryylialempialkyylillä N-substituoitua asyyliaminoryhmää.

4. Jonkin patenttivaatimuksista 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähdetään kaavojen II ja III mukaisesta yhdisteestä, jossa suojattu ryhmä Z6 merkitsee mahdollisesti 1- tai 2-asemassa substituoitua alempial-koksikarbonyyliaminoryhmää, esimerkiksi tert-butyylioksi-karbonyy1iaminoa.

5. Jonkin patenttivaatimuksista 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähdetään kaavojen II ja III mukaisesta yhdisteestä, jossa suojattu ryhmä Z6 merkitsee mahdollisesti alempialkyylillä tai aryylialempialkyylillä N-substituoitua alempialkanoyyliarainoryhmää, esimerkiksi v formyyliaminoa.

6. Jonkin patenttivaatimuksista 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että trialempialkyylihalogeeni-silaanina käytetään trialempialkyylikloorisilaania, tri-alempialkyylijodisilaania tai trialempialkyylibromisilaa-nia, etenkin trialempialkyylibromisilaania ja suojattujen ryhmien Zlt Z2, Z5 ja/tai Z6 vapauttaminen suoritetaan halogenoidussa hiilivedyssä, etenkin halogenoidussa ali-faattisessa hiilivedyssä, edullisesti dikloorimetaanissa liuottimena tai laimentimena ja lisätään halogeenivedyn sieppausainetta, etenkin propyleeni-oksidia seoksessa II • · 79 94415 etanolin kanssa.

7. Jonkin patenttivaatimuksista 1-6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että menetelmän mukaisesti saatava kaavan I mukainen yhdiste, jossa Rj merkitsee alempial-koksikarbonyyliryhmää, hydrolysoidaan vedessä lisäämättä happoa tai emästä.

8. Jonkin patenttivaatimuksista 1-7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukaisia yhdisteitä tai niiden farmaseuttisesti käyttökelpoisia suoloja, joissa yhdisteissä Rt merkitsee vetyä, alem-pialkyyliä tai hydroksia, R2 merkitsee vetyä tai alempial-kyyliä, R3 ja R« merkitsevät vetyä, Rs merkitsee alempial-koksikarbonyyliä ja R* merkitsee aminoa, jolloin A merkitsee 1-3 hiiliatomia sisältävää α,ω-alkyleeniä ja B merkitsee sidosta.

9. Jonkin patenttivaatimuksista 1-8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukaisia yhdisteitä tai niiden farmaseuttisesti käyttökelpoisia suoloja, joissa yhdisteissä R, merkitsee hydroksia, R2 merkitsee vetyä tai alempialkyyliä, R3 ja R* merkitsevät vetyä, Rj merkitsee alempialkoksikarbonyyliä tai karbok-sia, R* merkitsee aminoa, A merkitsee metyleeniä ja B mer- ♦. kitsee sidosta.

10. Jonkin patenttivaatimuksista 1-8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (2RJ-E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo tai (2RJ-E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappoetyyliesteri tai kulloinkin niiden farmaseuttisesti käyttökelpoinen suola.

11. Jonkin patenttivaatimuksista 1-8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (2RJ-E-2-amino-4-metyy1i-7-fosfono-3-hepteenihappo, E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappometyyliesteri, E-2- • · 80 94415 amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo-n-propyyli-esteri, E-2-amino-4-roetyyli-5-fosfono-3-penteenihappo-n-butyyli esteri, E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteeni-happo-isobutyyliesteri, E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo-n-pentyyliesteri tai E-2-amino-4-metyyli-5-fosfono-3-penteenihappo-n-heksyyliesteri tai kulloinkin niiden farmaseuttisesti käyttökelpoinen suola.