FI94254C - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI94254C
FI94254C FI860484A FI860484A FI94254C FI 94254 C FI94254 C FI 94254C FI 860484 A FI860484 A FI 860484A FI 860484 A FI860484 A FI 860484A FI 94254 C FI94254 C FI 94254C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
formula
pro
group
ala
mmol
Prior art date
Application number
FI860484A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI860484A (fi
FI94254B (fi
FI860484A0 (fi
Inventor
Joseph P Burkhart
Fritz E Gerhart
Michael Kolb
Michel J Jung
Daniel G Schirlin
Eugene L Giroux
Bernhard Neises
Original Assignee
Merrell Dow Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merrell Dow Pharma filed Critical Merrell Dow Pharma
Publication of FI860484A0 publication Critical patent/FI860484A0/fi
Publication of FI860484A publication Critical patent/FI860484A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI94254B publication Critical patent/FI94254B/fi
Publication of FI94254C publication Critical patent/FI94254C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0227—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the (partial) peptide sequence -Phe-His-NH-(X)2-C(=0)-, e.g. Renin-inhibitors with n = 2 - 6; for n > 6 see C07K5/06 - C07K5/10
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/18—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0207—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)4-C(=0), e.g. 'isosters', replacing two amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • C07K5/0823—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

94254
Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten peptidi johdannaisten valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää proteaasientsyymi-5 inhibiittorien valmistamiseksi, jotka ovat käyttökelpoisia erilaisissa fysiologisissa käyttösovellutuksissa.
Laajassa mielessä keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat peptidaasisubstraattl-analogeja, joissa amidiryhmä, jossa on substraattipeptidin helposti lohkea-10 va amidisidos, on korvattu aktivoidulla elektrofiilisellä ketoniosalla kuten fluorimetyleeniketonilla tai a-ketokar-boksyylijohdannaisilla. Nämä peptidaasisubstraattianalogit käsittävät spesifisiä entsyymi-inhibilttoreita erilaisten proteaasien suhteen, joiden inhiboinnilla on hyödyllisiä 15 fysiologisia seurausilmiöitä erilaisissa sairaustiloissa.
Tarkemmin sanoen keksinnön mukaisesti valmistetaan tiettyjen peptidaasisubstraattien aktivoituja elektrofii-lisiä ketonijohdannaisia, jotka ovat käyttökelpoisia siksi, että ne inhiboivat seriini-, tioli-, karboksyylihappo-20 ja metallivaraisia proteaasientsyymejä, joiden inhiboin nilla on hyödyllisiä fysiologisia seurausilmiöitä erilaisissa sairaustiloissa.
Vielä spesifisemmin tämä keksintö koskee peptidaasisubstraattien aktivoituja elektrofiilisiä ketonijohdan-25 naisia, jotka kuuluvat seuraaviin yleisryhmiin, joita luonnehditaan aktiivisten paikkasidonnaisuuksiensa perusteella. Sellaisia yleisryhmiä ovat: I. Seriini-varaiset entsyymit: Näitä ovat sellaiset entsyymit kuten elastaasi (ihmisen leukosyytti), katepsii- 30 ni G, trombiini, plasmiini, C-l-esteraasi, C-3-konvertaa-·.· si, urokinaasi, plasminogeeni-aktivaattori, akrosiini, 8- laktamaasi, D-alaniini-D-alaniini karboksipeptidaasi, ky-motrypsiini, trypsiini ja kallikreiinit.
II. Tioli-varaiset entsyymit: katepsiini B.
« 2 94254 III. Karboksyylihappo-varaiset entsyymit: Näitä ovat sellaiset spesifiset entsyymit kuten reniini, Pepsiini ja katepsiini D.
IV. Metalli-varaiset entsyymit: Näitä ovat angio-5 tensiiniä muuttavat entsyymit, enkefalinaasi, pseudomonas- elastaasi ja leusiini-aminopeptidaasi.
Keksinnön kohteena on siten menetelmä edellä mainittujen entsyymien peptidaasi-inhibiittorien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava (I) 10
R,NH \ ^C-X
15 ja niiden hydraattien valmistamiseksi, jossa kaavassa Rx on peptidi, joka on valittu ryhmästä, jonka muodostavat Pro-Ala-Pro, Ala-Ala-Pro, Phe-Pro, (D)-Phe-Pro ja (MeOSuc)Lys-Pro-Val, ja johon peptidiin mahdollisesti on liittynyt aminon suojaryhmä, joka on valittu ryhmistä ase-20 tyyli (Ac), t-butyylioksikarbonyyli (Boc), karbobentsoyyli (CBz), dansyyli (DNS), metoksisukkinyyli(MeOSuc) ja 1-ada-mantaanisulfonyyli (AdS02); R2 on α-aminohapporakenneosan R-ryhmäsivuketju, joka a-ami- nohapporakenneosa on valittu ryhmistä Ala, Vai ja Phe; ... 25 X on X2 tai X2, jolloin X2 on -C02R3 ja X2 on -CF2CY,
2 I
o joissa R3 on vety tai haarautunut tai haarautumaton C2_4-30 alkyyli ja Y on -OR3, tunnettu siitä, että • · · a) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -C02R3, suoritetaan Swern-hapetus yhdisteelle, jolla on kaava • · .
3 94254 R,NH \ ^-CH-C02R3' [ OH (Dx) R2 5 jossa Rx ja R2 ovat edellä määritellyt ja R3' on sama kuin edellä määritelty R3 lukuunottamatta vetyä, ja haluttaessa poistetaan mikä tahansa suojaryhmä ja/tai käsitellään saatua yhdistettä, jossa X on -C02R3', emäksellä kaavan I mu-10 kaisen yhdisteen saamiseksi, jossa X on -C02H, tai b) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -CF2CY, suoritetaan Swern-hapetus tai pyridi-0 niumdikromaattihapetus yhdisteelle, jolla on kaava 15
R,NH^ / -CH-CF,CY
I II
OH 0 (K) r2 20 jossa Rx, R2 ja Y ovat edellä määritellyt, ja haluttaessa poistetaan mikä tahansa suojaryhmä.
Ellei toisin ole mainittu näiden peptidaasisub-straattien α-aminohapporakenneosat ovat ensisijaisesti L-konf iguraationaan.
. 25 Ennen kaavan I puitteisiin sisältyvien peptidaasi- substraatti-inhibiittorien piirin edelleen määrittelyä ja/tai kuvaamista voi olla tarkoituksenmukaista mainita eräitä peptideihin liittyviä täsmällisempiä peruskäsitteitä. Esimerkiksi, proliinia lukuun ottamatta kaikissa pro-30 telineissä tavatuissa a-aminohapoissa on yhteisenä piir- :. teenä vapaa karboksyyliryhmä ja vapaa substituoimaton ami- « noryhmä a-hiiliatomissa (proliinissa α-aminoryhmä on subs-tituoitu, joten se on todellisuudessa α-iminohappo, mutta mukavuussyistä siitä puhutaan myös α-aminoryhmänä). Lisäk-35 si kussakin a-aminohapossa on tyypillinen "R-ryhmä", tämän « 4 94254 R-ryhmän ollessa sivuketju tai tähde, joka on sitoutunut a-aminohapon α-hiiliatomiin. Esimerkiksi glysiinissä R-ryhmä-sivuketju on vety, alaniinissa se on metyyli, valii-nissa se olisi isopropyyli. Täten, kauttaaltaan tässä se-5 lityksessä R2-osa on sivuketju-R-ryhmä kussakin mainitussa α-aminohapossa). a-aminohappojen spesifisten R-ryhmien -eli sivuketjujen - osalta viittaus A. L. Lehninger'in tekstiin julkaisussa Biochemistry (katso erityisesti lukua 4) voi olla avuksi.
10 Edelleen mukavuussyistä kaavan 1 mukaisen yleisen kaavan puitteisiin sisältyvien yhdisteiden määrittelyssä, on käytetty α-aminohappo-rakenneosien osalta hyväksyttyjä lyhenteitä, jotka on esitetty taulukossa I.
Taulukko I 15
Aminohappo Lyhenne
Alaniini Ala
Lysiini Lys
Fenyylialaniini Phe 20 Proliini Pro Väliini Vai
Kaavan I mukaisissa yhdisteissä, jotka ovat käyttökelpoisia ihmisen leukosyytti-elastaasin inhibiittoreina, ·;< 25 R2 on edullisesti vallinin R-sivuryhmäketju ja peptidiin • ·
Rx on edullisesti liittynyt metoksisukkinyyli.
Polymorfi-ytimiset leukosyytit vapauttavat ihmisen leukosyyttielastaasia tulehduskohdissa ja täten ne ovat lisäsyynä lukuisissa tautitiloissa. Täten kaavan (I) mu-30 kaisilla peptidaasi-substraateilla on tulehdusta ehkäisevä • vaikutus, mikä on hyödyllistä hoidettaessa kihtiä, nivel->»· reumaa ja muita tulehdussairauksia, ja hoidettaessa ilma-pöhöä.
Kaavan 1 mukaisissa yhdisteissä, jotka ovat käyttö-35 kelpoisia katepsiini G:n inhibiittoreina, Rx on edullisesti Ala-Ala-Pro, ja R2 on edullisesti Phe-sivuketju.
• · 5 94254
Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden, jotka inhibioivat katepsiini G:tä, käyttösovellutusalue on sama kuin ihmisen leukosyytti-inhibiittorien osalta, niveltulehdus, kihti ja ilmapöhö mukaan lukien, mutta käsittää myös munuaistaudin 5 ja keuhkoloistartuntojen hoidon, joita aiheuttavat tartunnat keuhkoissa.
Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia myös kymotrypsiinin inhibiittoreina, jolloin niiden käyttösovellutus on haimatulehduksen hoito.
10 Käyttösovellutuksiaan varten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden entsyymiä inhibioivien ominaisuuksien tehokkuus ja muut biokemialliset parametrit ovat helposti todettavissa standardin mukaisin alalla hyvin tunnetuin biokemiallisin menetelmin. Todelliset annosrajat niiden spe-15 sifisiä käyttösovellutuksia varten riippuvat tietenkin hoidettavan potilaan tai eläimen tautitilan luonteesta ja vakavuudesta, jonka hoitava diagnostiikan asiantuntija määrittää. On oletettavissa, että tavallinen käytettävä annosalue on noin 0,01 - 10 mg/kg/päivä tehokkaan tera-20 peuttisen vaikutuksen aiheuttamiseksi.
Kaavan I mukaisille yhdisteille rakenteeltaan läheisiä yhdisteitä tunnetaan FI-patenttihakemuksista 860 281 ja 843 837 sekä EP-hakemusjulkaisuista 45 665, 104 041 ja 130 679. Kaavan I mukaiset yhdisteet eroavat ... 25 näistä tunnetuista yhdisteistä päätekarboksyylin modi- fioinnin osalta eikä ennalta ole tunnettua, muuttaako tietty päätekarboksyylin modifiointi halutulla tavalla aktiivisuutta tietyn kiinnostuksen kohteena olevan entsyymin suhteen. Sen vuoksi keksinnön mukaisesti valmistettu-30 jen yhdisteiden ominaisuuksia ei voida pitää tunnetun tekniikan perusteella odotettuina. Lisäksi EP-hakemusjulkai- • · sussa 130 679 kuvattujen monofluorimetyyliyhdisteiden voitaisiin olettaa olevan tehokkaita alkylointiaineita (Ks. Anagli, J. et ai., Biochem. J. 274 (1991) s. 497 - 502). 35 Alkylointiaktiivisuutensa vuoksi tästä EP-julkaisusta tunnetut yhdisteet sitoutuvat kovalenttisesti kalpainiin ja
• I
6 94254 ovat siten tämän entsyymin irreversiibelejä inhibiittorei-ta, mikä on monissa tapauksissa on haitallista. Lisäksi alkylointiaineiden tiedetään olevan mutageenisia ja karsinogeenisia. Lopuksi monofluorimetyyliyhdisteiden tiedetään 5 hajoavan yhdisteiksi, jotka ovat erittäin myrkyllisiä.
Keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet sen sijaan eivät ole alkylointlaineita ja ne ovat entsyymien, kuten kalpainin, reversiibelejä inhibiittoreita.
Biologinen aktiivisuus (entsyymi-inhibitio) eräille 10 kaavan I mukaisille yhdisteille on annettu seuraavassa taulukossa.
• · < ·· • ·« • « 7 94254
Ot ° j-* in r* o co $ " ° 0 o t c * -Η ~
JL ή S
Ö CO 3.
1 CO
2 «o ·> oo
® H 8 O
H 0) q „
„ P H (N O O O
C p w in o ^ ω p o
Μ >i P P
jj ?i CO A
1 » β ς 0 9} Σ h a: p a- ' m rj *0 2 1-1 ID ·£ Φ P X ¢0 00
3 ζ CD 8 v V
3 * C β U Λ OO
CD £ 2 «0 H 2 p w g 4j w a.
ϋ * λ: τί o « ft o _ g c jus Φ $ H 3- C * w w P Dl
0 I
Η Λ O J p a c Ä o a) £ <-* 3 5S1 ? s CO o P Φ Φ 0) δ
Ό 2 Ä Σ Σ H
A Q O O O « >ι O O O O b
. * O O U O O
C o ooooo Φ o u o o o o P T .....
CD
P (0 (0 Η Φ H
(0 r* P P (0 A (0 X & < < > cu > ^ * · · · · ·
E
H OOOOO
μ P M P P
G Dl λ Οι Οι λ
CD I I I I I
> _ id e e cd cd ·. (0 B£ ppppp • ' (0 “* < < < < <
iC I I I I I
0 0 10 (0 (0
h h P P P
CU CU < < < ooo Φ 0 0 0 P I 3 3 3
CD 10 *0 CO CO CO
P m g
Ό O £ OOO
*. £3>ι ΟΟΦΦΦ >< CO U <<222 8 94254
Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus voidaan suorittaa käyttämällä tavallisia kemiallisia reaktioita, joiden tiedetään vastaavasti olevan käyttökelpoisia erilaisten tunnettujen peptidien valmistuksessa. Suurimmaksi 5 osaksi, sen jälkeen kun on valmistettu tiettyjä a-amino-happojohdannaisten avain-välituotteita, menetelmät lopputuotteiden saamiseksi voidaan suorittaa käyttämällä tavallisia peptidi-kemian alan asiantuntijain tuntemia menetelmiä. Tähän tarkoitukseen kätevä viiteteksti näiden mene-10 telmien osalta on M. Bodanszky'n ja A. Bodanszky'n julkaisu "The Practice of Peptide Synthesis", 1985, jossa on yksityiskohdittain esitetty yksityisten aminohappojen ja aminohapporyhmien osalta parametrit ja menetelmät, jotka vaikuttavat suojaryhmien valintaan, käyttöön ja poistami-15 seen, ja jossa on esitetty myös aktivointi- ja kytkentä-menetelmiä ja muita erityisiä menettelytapoja. Ennen kuin näitä peptidikemian menetelmiä voidaan käytännössä soveltaa, ensin on kuitenkin valmistettava tiettyjä avain-väli-tuoteyhdisteitä, joissa on aktivoitu elektrofiilinen keto-20 niosa. Avain-välituoteyhdisteiden valmistusta selostetaan seuraavassa.
Yhdisteiden osalta, joissa X on X1 eli ryhmä C02R3, avain-välituoteyhdisteiden, jotka ovat välttämättömiä tavallisen peptidikytkentämenetelmän käytön kannalta, kaava * 25 on • ·« R2 J^^^^C02R3'
h2n-^^ l “j XII
30 OH
• 1 R3':n ollessa aikaisemmin muuten R3:n osalta määritelty, paitsi että H puuttuu sen määritelmästä.
Näiden yhdisteiden valmistusta ja käyttöä voidaan 35 kuvata seuraavan reaktiokaavion avulla. (Huom! Toivottu 9 94254 stereokemiallinen muoto N-substituoidun hiilen kohdalla on saatu aikaan, ellei toisin ole mainittu.)
Reaktiokaavio A
5
o 0H OH [ ] OH
HNPg «NPg HNPg H A A "H3®
XIII XIV XV XVI
10 OH o x" fi"vw»· >Sf:. ’'“υ^λ1
kytkentä napetus I
r2 «2
XVII XVIII
15 jossa A® on käytetyn hapon anioni, R3' on sama kuin edellä määritelty R3 lukuunottamatta vetyä ja Pg on sopiva amino-osan suojaryhmä.
Yhdisteet XIII ovat yleisesti tunnettuja lähtöaineita. Yleensä sellaisia aineita voidaan valmistaa muut-20 tamalla sopiva L-aminohappo esterikseen, ensisijaisesti metyyliesterikseen, tavallisin esteröintimenetelmin (esim. S0Cl2:n kanssa alkoholin läsnäollessa), esteri N-suojataan, ensisijaisesti di-tert-butyylidikarbonaatilla (Boc). Siten suojattu R2-aminohappo pelkistetään kemialli-25 sesti N-suojatun aminohapon halutuksi aldehydi-muodoksi ·« (XIII), ensisijaisesti di-isobutyylialuminiumhydridillä (Dibal); kaikkien sellaisten menetelmien ollessa alalla hyvin tunnettuja menetelmiä. Muitakin menetelmiä samojen lopputuotteiden saamiseksi alalla hyvin tunnetuin menetel-30 min on tietenkin helposti käytettävissä.
·· Reaktiokaavion A reaktiovaiheissa käytetään myöskin tavallisia hyvin tunnettuja menetelmiä. Esimerkiksi, alde-hydien (XIII) konversio vastaavaksi syaanihydriiniksi suoritetaan reaktiona vetysulfiitin (esim. NaHS03:n) kanssa, 35 jolloin saadaan vetysulfiitti-additiotuotetta XIV, jota 1 ·< 94254 käsitellään metallisyanidin (esim. KCN:n) kanssa vastaavan syaanihydriinin (XV) muodostamiseksi. Muitakin menetelmiä aldehydin muuttamiseksi syaanihydriinijohdannaiksi (XV) on tietenkin helposti käytettävissä. Syaanihydriinejä 5 lämmitetään hapon vesiliuoksen ja veden kanssa sekoittuvan liuottimen kuten eetterin (ensisijaisesti dioksaanin) seoksessa, jolloin muodostuu haluttua hydroksi-happoa (XVI) diastereoisomeeriensa seoksena. Nämä yhdisteet neutraloidaan ja puhdistetaan tavallisin menetelmin, kuten 10 ionivaihtohartsi-kromatografointimenetelmin, jolloin saa daan tuotteita, jotka esteröidään, jolloin saadaan tuotteita, jotka esteröidään, jolloin saadaan haluttuja avain-välituoteyhdisteitä (XII).
Vaiheen A(a) suorittamiseksi aminoesterit (XII) 15 kytketään Rj-osan kanssa tavallisen peptidi-kytkentä-mene-telmän mukaisesti, huolehtimalla siitä, että käytettävä suojaryhmä (mikäli sellainen on läsnä) on lohkaistavissa selektiivisesti C02R3'-osan välityksellä. Kytkettyjen tuotteiden hapetus on parhaiten suoritettavissa Swern-reaktion 20 avulla alkoholin muuttamiseksi keto-muodokseen, joka voi olla tasapainossa hydraattinsa kanssa.
Yhdisteiden osalta, joissa X2 merkitsee ryhmää -CF2<jjY, avain-välituoteyhdisteet, jotka ovat käyttökelpoi-0 25 siä valmistettaessa kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat kaa-vojen
0H
30 *>2 I2 2
;·. XXXII XXXIII
mukaisia, joiden valmistusta ja käyttöä on kuvattu reak-tiokaavion B avulla.
• · 11 94254
Reaktiokaavio B
P^H BrcF2co2R3 ' Pq,an ^^co2r3
XXXIV / XXXV
1) Pg'-lohkaisu / 1) De-esterin lohkaisu 2) Rj-kytkentä y' 2) Y-kytkentä 3) De-esterin lohkaisu 3) Pg'-lohkaisu ι/' Φ OH 0
RtHN. 1 OH °
XXXII XXXIII
\ / Y-kytkentä R-^-kytkentä ^ RlHN>vciVY ^
OH 0 XXXVI
• ·
Swern-hapetus tai N, pyridiiniumdikromaatti • · • · R1HtI^YCF^i
XXXVII
• · 12 94254 jossa Pg' on sopivan kestävä suojaryhmä käytettävissä reaktlovalhelssa ja joka lohkeaa selektiivisesti R5Y-kyt-kennän ja XXXIV:n alku-alkyloinnin jälkeen.
Sen jälkeen, kun kaavan XXXIV mukainen N-suojattu 5 aldehydi on alkuvaiheessa alkyloitu sopivalla halogenidil-la sinkin läsnäollessa, yhdisteiden XXXV saamiseksi, seu-raavat analogiset menetelmät, joita on jo selostettu reak-tiokaavion A yhteydessä ja jotka ovat alan ammattimiehen yleisesti tuntemia.
10 Seuraavien yksityiskohtaisten esimerkkien tarkoi tuksena on valaista edelleen tavallisia menettelytapoja joita voidaan käyttää hyväksi tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä kaavan (I) mukaisten entsyymi-inhibiittorien valmistamiseksi sekä menetelmän lähtöaineiden valmistuk-15 sessa.
Esimerkki 1 N*-(2-hydroksi-3,3-dif luori-l-isobutyyll-5-hekse-nyyli) -N2-lsovaleryyli-valilnlamidi
Liuokseen, jossa oli 0,621 g (3 mmol) 6-amino-4,4-20 difluori-8-metyyli-l-nonen-5-olia (saatu vastaavasta HC1- suolasta käsittelemällä vesiliuosta 4-norm. NaOH:n kanssa ja uuttamalla etyylieetterillä) ja 0,603 g (3 mmol) N-iso-valeryyli-valiinia 30 ml:ssa THF:a 0 °C:ssa, lisättiin 0,62 g disykloheksyyll-karbodi-imidiä. Seosta sekoitettiin 25 15 tuntia 25 °C:ssa, suodatettiin ja suodos konsentroitiin, jolloin saatiin puolikiinteätä ainetta, joka liuotettiin CH2Cl2:iin. Orgaaninen kerros pestiin 1-norm. HClrllä, vesipitoisella KHC03:lla ja sitten suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja paisuntahaihdutettiin, jolloin saatiin 30 kiinteätä ainetta, joka puhdistettiin edelleen kromatogra-foimalla Si02:lla (CHCl3/etyylieetteri (2:1)). Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin, paisuntahaihdutettiin, jolloin saatiin haluttua tuotetta. Rf 0,15 (CHCl3/etyyli-eetteri) (2:1)).
• ·« 13 94254
Esimerkki 2 N2-( 2-okso-3,3-difluori-l-isobutyyli-5-heksenyyli) -N2-isovaleryylivaliiniamidi
Liuokseen, jossa oli 0,1 ml oksalyylikloridia 5 2,5 ml:ssa CH2Cl2:a jäähdytettynä -55 °C:seen, lisättiin 0,17 ml DMS0:a 2,5 ml:ssa CH2Cl2:a. 5 minuutin sekoittamisen jälkeen -55 °C:ssa lisättiin 0,295 g N'-(2-hydroksi- 3,3 - d i f 1 uor i - i sobu tyy 1 i - 5 - heksenyy 1 i)-N2 - i sovaleryy 1 i - va-liiniamidia seoksessa, jossa oli 2 ml CH2Cl2:a ja 0,4 ml 10 DMS0:a. Seosta sekoitettiin 15 minuuttia -55 °C:ssa ja sitten lisättiin trietyyliamiinia (noin 0,5 ml) liuoksen pH:n säätämiseksi arvoon 8. Seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan, sitten laimennettiin CH2Cl2:lla ja pestiin H20:lla, sitten 1-norm. HClrllä. Orgaaninen kerros kuivat-15 tiin (MgS04), sitten paisuntahaihdutettiin, jolloin saatiin 0,270 g odotettua ketonia. Rf 0,3 (CHCl3/etyylieetteri (2:1)).
Esimerkki 3 5-bentsoyyliamino-3,3-difluorl-4-okso-6-fenyyli-20 heksaanihappo
Liuosta, jossa oli (2-bentsoyyliamino-4,4-difluori- 7-fenyyli-6-hepten-3-onia (1,72 g, 5 mmol) dikloorimetaa-nissa (200 ml), käsiteltiin 03:n kanssa -78 °C:ssa 12 minuuttia (noin 6 mmol 03:a). Lisättiin dimetyylisulfidia , 25 (2 ml, 0,033 moolia) ja liuoksen annettiin lämmetä huoneen • · lämpötilaan. Liuottimien poistamisen jälkeen (20 torria, 30 °C ja 0,05 torria, 30 °C) saatiin lievästi värillistä öljyä, joka sisälsi vapaata aldehydiä, jota oli noin 70 % H-NMR:n mukaisesti (VHO versus 2 CH2).
30 öljyn liuosta asetonissa (7,5 ml) käsiteltiin ;· Jones-liuoksen kanssa (7,5 ml, 1-mol. Cr03/H2S04) yön ajan.
Orgaaninen kerros erotettiin ja vesifaasi uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 10 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin suolaliuoksella, kuivattiin (MgS04) ja paisunta-35 haihdutettiin, jolloin saatiin 1,7 g raakaa happoa.
14 94254
Esimerkki 4 N1-(2-okso-3,3-difluori-l-isobutyyli-5-karboksyyli-pen tyyli) -N2-isovaleryyli-valiiniamidi
Edellä mainittua tuotetta valmistettiin N'-(2-okso-5 3,3-di fluori-1-isobu tyyli-5-heksenyyli) -N2-isovaleryyliva- liiniamidista esimerkin 3 menetelmällä.
Esimerkki 5 4-N-tert.-butoksikarbonyyliamino-2,2-difluori-3-hydroks i-6-metyyliheptaanihappo-etyy1iesteri 10 Kiehuvaan suspensioon, jossa on 0,196 g aktivoitua sinkkivillaa kuivassa tetrahydrofuraanissa (3 ml), lisätään liuos, jossa on 0,618 g (3 mmol) etyy1ibromifluori-asetaattia kuivassa THF:ssa (1 ml). Reaktion käynnistyessä lisättiin liuos, jossa on 0,5 g (2,32 mmol) N-tert.-butok-15 sikarbonyyli-leusinaalia. Seosta kiehutetaan lievästi tunnin ajan. Sen jälkeen reaktioseos jäähdytetään, sammutetaan lisäämällä etyyliasetaattia (10 ml), suolaliuosta ja 1-mol. KHS04:a. Orgaaninen kerros kuivataan vedettömällä MgS04:lla, haihdutetaan kuiviin ja puhdistetaan flash-kro-20 matografoimalla (silikageeli, 10 % etyyliasetaatti/syklo-heksaani-seos) saannon ollessa 0,210 g, Rf 0,65 (etyyliasetaatti /sykloheksaani, 1:1).
Esimerkki 6 4-N-tert♦-butoksikarbonyyliamino-2,2-difluori-3-25 hydroksi-6-metyyllheptaanihappo
Liuos, jossa on 0,0285 g (0,68 mmol) Li0H:a, H20 vedessä (2 ml), lisätään 0 °C:ssa seokseen, jossa on 0,210 g (0,62 mmol) 4-N-tert.-butoksikarbonyyliamino-2,2-difluori-3-hydroksi-6-metyyli-heptaanihappo-etyyliesteriä 30 1,2-dimetoksietaanissa (DME) (5 ml). Lämpötilan annetaan i kohota hitaasti huoneen lämpötilaan. Seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön ajan. Seos laimennetaan vedellä (10 ml), pestään dietyylieetterillä (10 ml). Vesikerros tehdään happameksi pH-arvoon noin 2 0,1-norm HCl:llä, 35 uutetaan dietyylieetterillä (2 x 10 ml). Yhdistetyt orgaa- • 15 94254 nlset kerrokset pestään suolaliuoksella ja kuivataan vedettömällä MgS04:lla. Suodattamalla ja poistamalla liuotin vakuumlssa saadaan odotettua happoa, joka kiteytetään uudelleen dietyylleetteri/pentaaniseoksesta.
5 Esimerkki 7 4-N-tert.-butoksikarbonyyliamino-2,2-difluori-3-hydroksi-N-(1-lsoamyyliaminokarbonyyli-etyyli)-6-metyyli-heptaaniamidi
Seokseen, jossa on 0,194 g (1 mmol) alaniini-iso-10 amyyliamidi-hydrokloridia metyleenikloridissa (tai DMF:ssa) (5 ml), lisätään 0,101 (1 mmol) trietyyliamiinia 0 °C:ssa. Lisätään 4-N-tert.-butoksikarbonyyli-amino-2,2-difluori-3-hydroksi-6-metyyli-heptaanihappoa (0,311 g) ja 1-hydroksibentsotriatsolla (0,202 g), minkä jälkeen lisä-15 tään DCC:tä (0,206 g, 1 mmol) metyleenikloridissa (5 ml). Reaktioseoksen annetaan lämmetä hitaasti huoneen lämpötilaan ja sekoitetaan 12 tuntia tuossa lämpötilassa. Dlsyk-loheksyyliurea suodatetaan erilleen, ja suodos haihdutetaan kuiviin vakuumlssa. Jäännös liuotetaan etyyliasetaat-20 tiin, pestään peräkkäin kylmällä 1-norm. HCl:llä, 1-norm NaOH:lla ja kuivataan vedettömällä MgS04:lla. Amidi puhdistetaan kromatografoimalla kolonnissa (silikageeli, etyyli-asetaatti/sykloheksaani-seos, 1:1, Rf 0,22 (etyyliasetaat-ti/sykloheksaani, 1:1).
. 25 Esimerkki 8 • « ' — I.
4-amino-2,2-difluori-3-hydroksi-N-(isoamyy11amino-karbonyyli)etyyli)-6-metyyll-heptaaniamidi-hydrokloridl 4-N-tert.-butoksikarbonyyliamino-2,2-difluori-3-hydroks i-N-1-i soamyyliaminokarbonyy1ietyyli)-6-metyy1i-30 heptaaniamidia (0,457 g) liuotetaan liuokseen, jossa on
Il noin 4-norm. HCl:ää dietyylieetterissä (5 ml) ja sekoite- taan huoneen lämpötilassa 14 tuntia. Sen jälkeen kun ylimääräinen reagenssi on poistettu vakuumlssa, kiinteätä jäännöstä trituroidaan eetterin kanssa kiinteän aineen 35 muodostamiseksi, jota kuivataan vakuumlssa 8 tuntia. Rf 0,63 (etikkahappo(butanoli/H2), 2:6:2).
• I
16 94254
Esimerkki 9 4-[ (2-N-isovaleryyliamino-3-metyyli-l-oksobutyy-li)amino]-2,2-difluori-3-hydroksi-N-(1-isoamyyliaminokar-bonyylietyyli)-6-metyyllheptaan!amidi 5 Liuokseen, jossa on 0,130 g (0,33 moolia) 4-amino- 2,2-difluori-3-hydroksi-N-( 1-isoamyyliaminokarbonyylietyy-li)-6-metyyli-heptaaniamidi-HCl:a THF:ssa (10 ml), lisätään 0,024 g (0,33 mmol) N-metyyli-morfoliinia huoneen lämpötilassa. 10 minuutin kuluttua seos jäähdytetään 10 0 °C:seen? sitten lisätään liuos, jossa on 0,103 g (0,50 mmol) DCC:tä THF:ssa (1 ml), minkä jälkeen lisätään 0,100 g (0,50 mmol) N-isovaleryylivaliinia. Sekoittamista jatketaan 15 tuntia, antamalla lämpötilan kohota huoneen lämpötilaan. Sakka suodatetaan erilleen ja suodos puhdis-15 tetaan THD:lla. Liuotin haihdutetaan pois vakuumissa; jäännös puhdistetaan kromatografoimalla (silikageelillä, CH3OH/CHCI3 2:98), jolloin saadaan 0,06 g odotettua amidia. Rf: 0,45 (CH30H/CHC13 8:92).
Esimerkki 10 20 4- [ (2-N-isovaleryyliamino-3-metyyli-l-oksobutyyli )- amino]-2,2-difluori-N-(1-isoamyyliamlnokarbonyylletyyli)- 6-metyyli-3-okso-heptaaniamidi
Liuos, jossa on 0,214 g (0,40 mmol) 4-[2-N-isovale-ryyliamino-3-metyyli-l-oksobutyyli)amino]-2,2-difluori-3-:. 25 hydroksi-N-( 1-isoamyyliaminokarbonyylietyyli )-6-metyyli- heptaaniamidia CH2Cl2:ssa (4 ml), lisätään suspensioon, jossa on pyridiniumdikromaattia (0,288 g) ja 3A-molekyyli-seulaa (0,336 g), jossa on 20 μΐ jääetikkahappoa. Sekoittamista jatketaan 15 tuntia huoneen lämpötilassa. Lisätään 30 Florisilia (0,200 g), sekoittamista jatketaan 0,25 tuntia : : ja seos suodatetaan. Poistamalla liuotin ja kromatografoi- > · maila (silikageeli, etyyliasetaatti/asetoni 7:3) saadaan odotettua ketonia. R(: 0,3 (etyyliasetaatti/kloroformi 1:1).
. · · 17 94254
Esimerkki 11 4-N-tert.-butoksikarbonyyllamino-2,2-difluori-6-metyyli-3-okso-heptaanihappo, etyyliesteri
Otsikon yhdistettä valmistettiin 65 %:n saannoin 5 esimerkissä 5 esitetystä alkoholista edellä esitetyllä menetelmällä. Ketoni puhdistettiin kromatografoimalla (si-likageeli, etyyliasetaatti/sykloheksaani 1:9).
Esimerkki 12 4-amino-2,2-difluorl-6-metyyli-3-okso-heptaanihap-10 po, etyyliesterihydrokloridi
Esimerkin 11 ketonin Boc-suojaryhmä lohkaistaan käyttämällä samaa menetelmää kuin esimerkissä 8 on esitetty amidin osalta. Sp.: 127 - 128 °C (hajoten).
Esimerkki 13 15 L-alaniini-metyyliesteri-hydrokloridi
Suspensioon, jossa oli L-alaniinia (25,0 g, 0,28 moolia) 125 ml:ssa metanolia, jäähdytettynä jäämeta-noli-hauteessa, lisättiin tionyylikloridia (21,0 ml, 0,29 moolia) tiputtamalla sellaisella nopeudella, että 20 reaktioseoksen sisälämpötila pysyi 5 °C:ssa tai alempana. Lisäyksen päätyttyä jäähdytyshaude poistettiin ja reaktio-seosta lämmitettiin 2 tuntia 45 °C:ssa. Reaktioseos suodatettiin pienen keltaisen kiinteän ainemäärän poistamiseksi ja suodos konsentroitiin käyttämällä pyörivää haihdutinta.
, 25 Saatuun öljyyn lisättiin tetrahydrofuraania (50 ml) ja ·« seos haihdutettiin kuiviin pyörivässä haihduttimessa. Jäännöstä käsiteltiin suurvakuumissa, jolloin saatiin harmahtavan valkeata kiinteätä ainetta. Kiinteän aineen joukkoon lisättiin eetteriä (300 ml) ja suspensiota uutettiin 30 lämmittäen vesihauteella. Jäähdyttämällä ja suodattamalla “ saatiin L-alaniini-metyyliesterihydrokloridia (37,2 g, ‘ 0,26 mmol).
Esimerkki 14
Boc-L-alaniini-metyyllesteri 35 Sekoitettuun suspensioon, jossa on L-alaniinimetyy- liesteri-hydrokloridia (10,0 g, 71,6 mmol) metyleeniklori-
• I
18 94254 dlssa (220 ml) argon-atmosfäärin suojaamana, lisättiin trietyyliamiinia (010,0 ml, 71,6 mmol). Viidentoista minuutin kuluttua lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli di-tert.-butyylidikarbonaattia (15,3 g, 70,2 mmol) mety-5 leenikloridissa (30 ml). Lisäyksen päätyttyä reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Reaktioseos kaadettiin erotussuppiloon, jossa oli 50 ml vettä ja kerrokset erotettiin. Orgaaninen kerros pestiin 0,5-norm. kloorivetyhapolla (2 x 50 ml) ja suolaliuoksella (50 ml). 10 Orgaaninen kerros kuivattiin sitten magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja pääosa liuottimesta haihdutettiin pois pyörivää haihdutinta käyttäen. Loput liuotintähteet poistettiin suurvakuumissa, jolloin saatiin Boc-L-alaniini-me-tyyliesteriä (14,27 g, 70,2 mmol).
15 Esimerkki 15
Boc-L-alaninaali
Boc-L-alaniini-metyyliesteriä (5,0 g, 24,6 mmol) liuotettiin kuivaan tolueeniin (150 ml) argon-atmosfäärin suojaamana ja jäähdytettiin kuivajää-asetonihauteessa. Tä-20 hän voimakkaasti sekoitettuun liuokseen lisättiin siirto-neulalla liuos, jossa oli di-isobutyylialuminiumhydridiä (1,0-mol. heksaaneissa, 61,6 ml, 61,5 mmol) esijäähdytettynä kuivajää-asetonihauteessa, 6 minuutin kuluttua reaktio sammutettiin varovaisesti metanolilla (4 ml) ja seok-25 sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. Reaktioseos > kaadettiin erotussuppiloon, jossa oli 250 ml eetteriä ja 200 ml jääkylmää 0,25-norm. kloorivetyhappoa. Kerrokset erotettiin ja orgaaninen kerros pestiin 0,25-norm. kloorivetyhapolla (3 x 80 ml) ja suolaliuoksella (50 ml). Or-30 gaaninen kerros kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatet-: tiin ja haihdutettiin kuiviin käyttämällä pyörivää haihdu tinta ympäristön lämpötilassa. Jäännös kromatografoitiin käyttämällä seosta heksaanit - 30 % etyyliasetaattia, jolloin saatiin Boc-L-alaniaalia. Yhdistettä voidaan valmis-35 taa myös menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa Synthesis, 1983, s. 676.
« 19 94254
Esimerkki 16 (3S)-3-amino-2-hvdroksibutaanlhappo
Suspensioon, jossa oli Boc-L-alanaalia (3,5 g, 14,4 mmmol) jääkylmässä vedessä (30 ml), lisättiin jääkylmää 5 liuosta, jossa oli natriumvetysulfiittia (1,5 g, 14,4 mmol) vedessä (10 ml). Muodostunutta suspensiota sekoitettiin jäähauteen lämpötilassa yön ajan. Saatuun liuokseen lisättiin etyyliasetaattia (200 ml) ja sitten liuos, jossa oli kaliumsyanidia (0,9 g, 14,4 mmol) vedessä (10 ml). 10 Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 4 tuntia ja kaadettiin sitten erotussuppiloon ja kerrokset erotettiin. Orgaaninen kerros pestiin vedellä (2 x 100 ml) ja suolaliuoksella (75 ml), sitten kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin käyttämäl-15 lä pyörivää haihdutinta. Syaanihydriini liuotettiin diok-saaniin (50 ml) ja lisättiin väkevää kloorivetyhappoa (50 ml). Reaktioseosta kiehutettiin yön ajan ja sitten jäähdytettiin huoneen lämpötilassa. Reaktioseos kaadettiin erotussuppiloon, jossa oli eetteriä (100 ml) ja kerrokset 20 erotettiin. Vesikerros uutettiin edelleen 100 ml:n kanssa eetteriä ja haihdutettiin sitten kuiviin pyörivässä haihduttimessa. Saatu jäännös liuotettiin veteen (30 ml) ja pH säädettiin 2-norm. ammoniumhydroksidilla noin arvoon 7. Tämä liuos pantiin Biorad AG 50 W-X8 H© -hartsikolonniin 25 ja eluoitiin 2-norm. ammoniumhydroksidilla. Yhdistämällä sopivat fraktiot ja haihduttamalla kuiviin saatiin raakaa (3S)-3-amino-2-hydroksibutaanihappoa, joka kiteytettiin sitten uudelleen vesi-asetoni-seoksesta, jolloin saatiin haluttua tuotetta (1,05 g, 8,8 mmol) valkeana kiinteänä 30 aineena.
·,* Esimerkki 17 •
Metwll-(3S)-3-amino-2-hvdroksibutanoaatti
Suspensioon, jossa oli (3S)-3-amino-2-hydroksi-butaanihappoa (1,0 g, 8,4 mmol) metanolissa (25 ml), joh-35 dettiin kuplina kuivaa kloorivetykaasua kunnes muodostui liuos. Liuoksen muodostettua reaktioseosta jäähdytettiin
»«I
20 94254 jäähauteessa ja kyllästettiin kloorivedyllä. Jäähdytys-haude poistettiin ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 3,5 tuntia. Liuotin poistettiin pyörivässä haihduttimessa ympäristön lämpötilassa ja saatu jäännös 5 liuotettiin metanoliin (25 ml), jäähdytettiin jäähauteessa ja kyllästettiin kloorivetykaasulla. Lämmittämällä reak-tioliuos huoneen lämpötilassa ja poistamalla liuotin pyörivässä haihduttimessa saatiin öljyä. Tähän öljyyn lisättiin trietyyliamiinia (15 ml), sen jälkeen pieni määrä 10 metanolia (noin 15 ml), joka tarvittiin liuottamaan alkuperäinen kumimainen kiinteä aine. Liuos jäähdytettiin jäähauteessa ja lisättiin sekoittaen annoksittain eetteriä (75 ml). Saostunut trietyyliamiini-hydrokloridi suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 15 metyyli-(3S)-3-amino-2-hydroksibutanoaattia.
Esimerkki 18
Boc-L-alanyyli-L-prolllni-bentsyyliesteri
Boc-L-alaniinia (19,5 g, 0,10 mol) liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (90 ml) argon-atmosfäärin suojaa-20 mana pullossa, johon oli kiinnitetty lisäsekoitin ja sisä-lämpömittari. Liuos jäähdytettiin -15 °C:seen ja lisättiin N-metyylimorfoliinia (11,4 ml, 0,10 mol ja sen jälkeen isobutyyliklooriformiaattia (13,4 ml, 0,10 mol) sellaisella nopeudella, että reaktioseoksen sisälämpötila pysyi vä-• 25 Iillä -10 - 15 °C. Viiden minuutin kuluttua lisäyksen päät tymisestä lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli K-pro-liini-bentsyyliesteri-hydrokloridia (25,2 g, 0,10 mol) ja N-metyylimorfoliinia (11,4 ml, 0,10 mol) kloroformissa (90 ml) sellaisella nopeudella, että reaktioseoksen sisä-30 lämpötila pysyi välillä -10 - 15 °C. Lisäyksen päätyttyä . reaktioseoksen annettiin lämmetä hitaasti huoneen lämpöti- laan ja sitten sekoitettiin yön ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos konsentroitiin käyttämällä pyörivää haihdutin-ta, jäännös laimennettiin seoksella etyyliasetaatti 35 (500 ml)/0,2-norm. suolahappo (100 ml) ja kaadettiin ero- tussuppiloon. Kerrokset erotettiin ja vesifaasi uutettiin 21 94254 edelleen 150 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt orgaaniset osat pestiin 0,2-norm. kloorivetyhapolla (2 x 100 ml), vedellä (100 ml), kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-lluoksella (2 x 100 ml), jälleen vedellä (100 ml) ja lo-5 puksl suolaliuoksella (100 ml). Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin pyörivässä haihduttimessa. Kromatografolmalla käyttämällä eluenttlna etyyllasetaattl-heksaanl-seosta saatiin Boc-L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteriä? 10 Rf: 0,15 (etyyliasetaatti/heksaani - 30:70).
Esimerkki 19 L-alanyyll-L-prolllnl-bentsyyllesterl-hydroklorldl
Liuokseen, jossa oli Boc-L-alanyyli-L-proliinibent-syyliesteriä (31,6 g, 83,94 mmol) etyyliasetaatissa 15 (400 ml) jäähdytettyä jäähauteessa, johdettiin kuplina kloorivetykaasua 15 minuutin ajan. Kaasun lisääminen keskeytettiin, jäähdytyshaude poistettiin ja liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia. Konsentroimalla käyttämällä pyörivää haihdutinta ja kuivaamalla sen jäl-20 keen jäännöstä [vakuumi-eksikaattorissa kaliumhydroksidi-pillereiden yläpuolella yön ajan] saatiin L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteri-hydrokloridia (25,5 g, 81,5 mmol).
Esimerkki 20 .25 Boc-L-alanyyli-L-alanyyll-L-proliini-bentsyyli- esterl L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteri-hydrokloridia (13,0 g, 41,6 mmol) liuotettiin metyleenikloridiin (650 ml) argon-atmosfäärin suojaamana pullossa, johon oli 30 kiinnitetty lisäsekoitin. Liuokseen lisättiin käsipumpulla N-metyylimorfoliinia (4,8 ml, 43,6 mmol) ja 5 minuutin kuluttua, lisättiin Boc-L-alaniinia (7,9 g, 41,6 mmol) ja sen jälkeen l-etoksikarbonyyli-2-etoksi-l,2-dihydrokino-liinia (11,8 g, 47,8 mmol) - Saatua liuosta sekoitettiin 35 huoneen lämpötilassa yön ajan. Reaktioseos kaadettiin ero-tussuppiloon, jossa oli vettä (300 ml) ja kerrokset ero- •« 22 94254 tettiin. Vesikerros uutettiin kloroformilla (200 ml) ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 0,5-norm, kloorive-tyhapolla (3 x 200 ml), vedellä (2 x 200 ml), kyllästetyllä natriumvetykarbonaatilla (2 x 200 ml) ja suolavedellä 5 (200 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin sitten magnesium- sulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin pyörivässä haihduttimessa. Lisäämällä eetteri-heksaani-seosta saatiin raakaa Boc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliini-bent-syyllesteriä, joka voitiin kiteyttää uudelleen etyyliase-10 taatti-heksaaniseoksesta, jolloin saatiin puhdasta tuotet ta (15,1 g), sp. 124 - 126 °C.
Esimerkki 21 L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteri- hydrokloridi 15 Liuokseen, jossa oli Boc-L-alanyyli-L-alanyyli-L- proliini-bentsyyliesteriä (25,5 g, 57,9 mmol) etyyliasetaatissa (650 ml) jäähdytettynä jäähauteessa, johdettiin kuplina kloorivetykaasua 15 minuutin ajan, jonka jälkeen kupliminen keskeytettiin. Jäähdytyshaude poistettiin ja 20 liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia.
Reaktioseos konsentroitiin pyörivässä haihduttimessa ja saatu kumimainen kiinteä aine liuotettiin metyleeniklori-di-heksaani-seokseen. Poistamalla liuottimet saatiin L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliinibentsyyliesteri-hydroklori- . 25 dia, jota kuivattiin kaliumhydroksidi-pillerien päällä vakuumi-eksikaattorissa yön ajan, jolloin saatiin 21,09 g (54,7 mmol) haluttua tuotetta.
Esimerkki 22
Metoksisukkinyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliini-30 bentsyyliesteri
Liuokseen, jossa oli L-alanyyli-L-alanyyli-L-pro- • « liini-bentsyyliesterihydrokloridia (19,2 g, 50,0 mmol), mono-metyylisukkinaattia (6,6 g, 50,0 mmol) ja 1-hydroksi-bentsotriatsoli*xH20:ta (16,9 g) N,N-dimetyyliformamidissa 35 (125 ml) argon-atmosfäärin suojaamana ja jäähdytettynä · · 23 94254 jäähauteessa, lisättiin N-metyylimorfoliinia (5,5 ml, 50,0 nunol). 5 minuutin kuluttua lisättiin N,N'-disyklohek-syylikarbodi-imidiä (11,8 g, 57,7 mmol), jäähdytyshaude poistettiin ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpöti-5 lassa yön ajan. Reaktioseos suodatettiin ja suodos kaadettiin erotussuppiloon, jossa oli seoksena kloroformia (750 ml)/0,5-norm. suolahappoa (250 ml). Kerrokset erotettiin ja vesifaasi uutettiin kloroformilla (200 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 0,5-norm. suolahapolla 10 (2 x 250 ml), vedellä (2 x 250 ml), kyllästetyllä natrium- vetykarbonaatilla (2 x 250 ml) ja suolaliuoksella (250 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja konsentroitiin pyörivässä haihduttimessa. Viimeiset liuotintähteet poistettiin käyttämällä 15 vakuumipumppua ja jäännös kromatografoitiin käyttämällä eluenttina asetoni-etyyliasetaattiseosta. Saatu raaka MeOSuc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteri kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatista, jolloin saatiin puhdasta tuotetta, sp. 124 - 127 °C.
20 Esimerkki 23
MeOSuc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliini Parr’in pulloon, joka oli huuhdeltu argonilla ja jossa oli 4,0 g 10-prosenttista palladium-puuhiilikata-lyyttiä lisättiin tert.-butanolia (775 ml) ja sitten 25 MeOSuc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteriä (13,0 g, 28,2 mmol). Seosta ravisteltiin 30 psi:n vetypai-neessa 30 - 40 °C:ssa yön aikana. Seos suodatettiin Celite'n läpi ja suodos haihdutettiin kuiviin pyörivässä haihduttimessa. Jäännös tislattiin aseotrooppisesti kloro-30 formi-heksaani-seoksen kanssa viimeisten tert.-butanoii-tähtien poistamiseksi ja sitten kuivattiin suurvakuumissa, jolloin saatiin MeOSuc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliinia (10,4 g, 28,0 mmol).
* I
24 94254
Esimerkki 24
Asetyyli-L-propyyli-L-alanyyli-L-proliini-bentsyy- liesteri
Ac-L-proliinia (3,05 g. 19,41 mmol) liuotettiin 5 kuivaan tetrahydrofuraaniin (100 ml) argon-atmosfäärin suojaamana pullossa, johon oli kiinnitetty lisäsekoitin ja sisälämpömittari. Liuos jäähdytettiin -15 °C:seen ja lisättiin N-metyylimorfoliinia (2,13 ml, 19,41 mmol) ja sen jälkeen isobutyyliklooriformiaattia (2,51 ml, 19,41 mmol) 10 sellaisella nopeudella, että reaktioseoksen sisälämpötila pysyi välillä -10 - 15 °C. Viiden minuutin kuluttua lisäyksen päättymisestä lisättiin liuos, jossa oli L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteri-hydrokloridia (6,08 g, 19,41 mmol) kloroformissa (70 ml) ja sen jälkeen toinen 15 erä N-metyylimorfoliinia (2,13 ml, 19,41 mmol) sellaisella nopeudella, että reaktioseoksen sisälämpötila pysyi välillä -10 - 15 °C. Reaktioseoksen annettiin sitten lämmetä hitaasti huoneen lämpötilaan ja sekoitettiin 2,5 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos konsentroitiin pieneksi 20 jäännökseksi pyörivässä haihduttimessa, laimennettiin kloroformilla (500 ml) ja kaadettiin erotussuppiloon, jossa se pestiin 0,2-norm. suolahapolla (3 x 200 ml) ja 5-pro-senttisella natriumvetykarbonaatilla (200 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin, kon-25 sentroitiin pyörivässä haihduttimessa ja kromatografoitiin käyttämällä eluenttina metyleenikloridi-metanoliseosta, jolloin saatiin Ac-L-prolyyli-L-alanyyli-L-proliinibent-syyliesteriä, Rf: 0,35 (CH30H/CH2/CH2C12- 7:93).
Esimerkki 25 30 Asetyyli-L-prolyyli-L-alanyyli-L-proliini
Parr'in pulloon, joka oli huuhdeltu argonilla, ja jossa oli 450 mg 10-prosenttista palladium/puuhiili-katalyyttiä, lisättiin liuos, jossa oli Ac-L-prolyyli-L-alanyyli-L-proliini-bentsyyliesteriä (1,0 g, 2,41 mmol) 35 absoluuttisessa etanolissa (100 ml). Sisältöä ravisteltiin 25 94254 40 psi:n vetypaineessa yön ajan huoneen lämpötilassa. Seos suodatettiin Celite'n läpi ja suodos haihdutettiin kuiviin pyörivässä haihduttimessa, jolloin saatiin raakaa Ac-L-propyyli-L-alanyyli-L-proliinia, joka kiteytettiin terra-5 hydrofuraani-metanoli-eetteri-seoksesta, jolloin saatiin haluttua tuotetta (0,57 g) 73 %:n saannoin.
Esimerkki 26 3-[ (N-asetyyliprolyyli)alanyyllprolyyliamino]-2-hydroksibutaanihappo, metyyliesteri 10 Ac-L-prolyyli-L-alanyyli-L-proliinia (0,65 g, 2,00 mmol) suspendoitiin kuivaan asetonitriiliin (20 ml) argon-atmosfäärin suojaamana pullossa, johon oli kiinnitetty lisäsekoitin ja sisälämpömittari. Suspensio jäähdytettiin -15 °C:seen ja lisättiin N-metyylimorfoliinia 15 (0,22 ml, 2,00 mmol) ja sen jälkeen isobutyylikloorifor- miaattia (0,26 ml, 2,00 mmol) sellaisella nopeudella, että reaktioseoksen sisälämpötila pysyi välillä -10 - 15 °C. 10 minuutin kuluttua lisättiin liuos, jossa oli metyyli-(3S)- 3-amino-2-hydroksibutanoaattia (0,53 g, 4,00 mmol) kloro-20 formissa (2,5 ml) sellaisella nopeudella, että reaktio- seoksen sisälämpötila pysyi välillä -10 - 15 °C. Reaktio-seos lämmitettiin hitaasti huoneen lämpötilaan ja sitten sekoitettiin 3 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin pyörivässä haihdutettimessa, jäännös liuotettiin veteen . 25 (20 ml) ja käsiteltiin hartsin sekoituskerroksen kanssa (J. T. Baker - ANGMI-615, 11,0 g). 15 minuutin kuluttua seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin pyörivässä haihduttimessa. Kromatografoimalla käyttämällä eluenttina metyleenikloridi/metanoli-seosta saatiin edellä 30 mainittua tuotetta (0,32 g) 36 %:n saannoin.
Esimerkki 27
Boc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-proliini
Parr'in pullo huuhdeltiin argonilla ja siihen pantiin 10-prosenttista palladium-puuhiiltä (0,74 g), ja 35 sen jälkeen lisättiin Boc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-prolii-ni-bentsyyliesteriä (1,8 g, 4,0 mmol) liuotettuna tert.- • « 26 94254 butanoliin (300 ml). Reaktioseosta ravisteltiin 30 psi:n vetypaineessa 35 °C:ssa 5 tuntia. Huoneen lämpötilaan jäähdyttämisen jälkeen lisättiin etanolia (50 ml) ja liuos suodatettiin Celite'n läpi ja suodos konsentroitiin pyöri-5 vässä haihduttimessa. Jäännös tislattiin aseotrooppisesti kloroformi/heksaani-seoksen kanssa viimeisten tert.-buta-nolijäännösten poistamiseksi ja sitten kuivattiin suurva-kuumissa, jolloin saatiin Boc-L-alanyyli-L-alanyyli-L-pro-liinia (1,40 g, 3,9 mmol) 98 %:n saannoin.
10 Esimerkki 28 N*-( 2-metoksietoksimetoksi-3,3-difluori-l-isobu-twli-4-karbokslbutwli) -N2-isovalerwli-valiiniamidi
Edellä mainittua yhdistettä valmistettiin N1-2-me-toksietoksimetoksi-3,3-dif luori-1-isobutyyli-5-heksenyy-15 li )-N2-isovaleryyli-valiiniamidista esimerkissä 3 esitetyl lä menetelmällä käyttämällä ekvivalenttisia ainemääriä ja olosuhteita.
Esimerkki 29 Ν*-( 2-metoksietokslmetoksi-3.3-dif luori-1-isobutvv-20 ϋ-4-Γ1-( isoamwliaminokarbonwli )etwli1metwliaminokar- bonwlibutwli) -N2-isovalerwli-valiiniamidi
Edellä mainittua yhdistettä valmistettiin N1-(2-me-toksietoksimetoksi-3,3-difluori-1-isobutyyli-4-karboksi-butyyli )-N2-isovaleryyli-valiiniamidista esimerkissä 18 25 esitetyllä menetelmällä.
Määräsuhteet: 1,50 g (3,02 mmol) peptidihappoa 10 ml:ssa THF:a, 0,305 g (0,33 ml, 3,02 mmol) N-metyyli-morfoliinia, 0,412 g (3,02 mmol) isobutyyliklooriformiaat-tia, N-metyylialaniini-isoamyyliamidihydrokloridia 30 (0,63 g, 3,02 mmol) ja N-metyylimorfoliinia (0,306 g, . 3,02 mmol) 5 mlrssa THF:a. Flash-kromatografoimalla (etyy- liasetaatti/pentaani, 2:1) saadaan 0,3 g edellä mainittua yhdistettä. 1,50 g:sta peptidihappoa, käyttämällä esimerkin 49 menetelmää, saadaan valmistettua, flash-kromatogra-35 foimalla suoritetun puhdistuksen jälkeen 0,39 g haluttua tuotetta.
« · # 27 94254
Esimerkki 30 N*-(2-hydroksi-3,3-dlfluori-l-isobutyyli-4-[[1-(iso-amyyliaminokarbonyyli)-etyyli]-metyyliamino]karbonyyli-butyyli) -N2-lsovaleryyli-valiiniamidl 5 Seosta, jossa oli 0,3 g (0,46 mmol) Nl-(2-metoksi- etoksimetoksi-3,3-difluori-l-isobutyyli-4-[[l-(isoamyyli-aminokarbonyyli)etyyli]-metyyliamiini]karbonyylibutyyli)-N2-isovaleryyli-valiiniamidia ja 0,52 g (2,31 mmol) ZnBr2:a 3 ml:ssa CH2Cl2:a, sekoitettiin 24 tuntia huoneenlämpöti-10 lassa, Flash-kromatografoimalla (etyyliasetaatti) saadaan 0,11 g edellä mainittua alkoholia.
Esimerkki 31 N*-( 2-okso-3,3-dlfluori-l-isobutyyli-4-[ [l-(iso-amyyliamino )etyyll ] metyyli amino] karbonyylibutyyli)-N2-lso-15 valeryyli-valllniamidi
Edellä mainittua yhdistettä valmistettiin N1-(2-hydroksi-3,3-difluori-l-isobutyyli-4-[ [l-( isoamyyliamino) -etyyli] metyyliamino] karbonyylibutyyli) -N2-isovaleryyli-va-liiniamidista esimerkissä 2 esitetyllä menetelmällä.
20 Määräsuhteet: oksalyylikloridi (0,176 mmol, 0,0244 mg) 0,5 ml:ssa CH2Cl2:a, 0,0275 mg (0,352 mmol) DMS0:a, 90 mg alkoholia 1,5 ml:ssa CH2Cl2:a (-55 °C:ssa) 0,081 g trimetyyliamiinia (0,8 mmol).
Flash-kromatografoimalla (etyyliasetaatti) saatiin - v 25 0,02 g edellä mainittua yhdistettä.
Esimerkki 32 4-N-tert.-butokslkarbonyyliamino-2,2-difluori-3-hydroksl-5-metyyliheksaanlhappo, etyyliesteri
Otsikon yhdistettä valmistettiin 35 %:n saannoin L-30 BOC-valinaalista käyttämällä samaa menetelmää kuin esterin osalta, joka on esitetty esimerkissä 5. Rf * 0,52 (etyyli-asetaatti/C6H12, 1:1).
m • i * 9«S4
Esimerkki 33 4-amino-2,2-difluori-3-hydroksi-5-metyyllheksaanl-happo, etyyliesteri-hydrokloridi
Esimerkin 32 alkoholin Boc-suojaryhmä lohkaistaan 5 käyttämällä samaa menetelmää kuin amidin osalta, joka on esitetty esimerkissä 8, sp. 182 °C.
Esimerkki 34 4-[metoksisukkinyyli-L-alanyyli-L-alanyyli-L-pro-lyyli] amino-2,2-dif luorl-3-hydroksi-5-metyyliheksaani-10 happo, etyyliesteri
Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 0,371 g (1 mmol) MeOSuc-L-Ala-L-Ala-L-ProOH:ta kuivassa asetonitriilissä (10 ml) typen suojaamana, lisättiin 0,106 g (1,05 mmol) N-metyylimorfoliinia. Saatu liuos jäähdytettiin -20 °C:seen. 15 Jäähtyneeseen reaktioseokseen lisättiin isobutyylikloori- formiaattia (0,136 g, 1 mmol). 10 minuutin kuluttua jäähtyneeseen seokseen lisättiin liuos, jossa oli 0,275 g (1,05 mmol) 4-amino-2,2-difluori-3-hydroksi-5-metyylihek-saanihappo, etyyliesteri-hydrokloridia ja 0,106 g 20 (1,05 mmol) N-metyylimorfoliinia kuivassa DMF:ssa (2 ml).
Reaktioseosta sekoitettiin -20 °C:ssa 4 tuntia ja sitten sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. 15 tunnin sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa seos konsentroitiin ja pantiin suurvakuumiin 40 °C:seen kaiken DMF:n pois-• 25 tamiseksi. Kromatografoimalla (silikageeli, etyyliasetaat- ti/asetoni-seos 7:3) saatiin odotettua alkoholia 85 %:n saannoin. Rf: 0,38 (etyyliasetaatti/asetoni 1:1).
Esimerkki 35 4- [metoksisukkinyyli-L-alanyyli-L-alanyyll-L-pro-30 lyyli]amino-2,2-dif luori-5-metyyli-3-okso-heksaanihappo, . etyyliesteri
Otsikon yhdistettä saatiin 65 %:n saannoin esimerkin 34 alkoholista käyttämällä esimerkissä 10 esitettyä menetelmää, sp.: 96 - 97 °C.
35 Edellä oleva esittää yksityiskohtaisesti keksinnön piirin yleisiä ja spesifisiä kohteita samoin kuin tapaa 29 94254 jolla keksintöä voidaan soveltaa ja käyttää hyväksi. Sen lisäksi seuraavassa esitetään viittaukset kirjallisuuteen (viitteet Ai - A20), josta ilmenee alalla tunnettuja menetelmiä, joita käyttäen voidaan arvioida yhdisteitä bioke-5 miallisten vaikutustensa osalta.
Esimerkiksi ihmisen elastaasi määritetään in vitro käyttämällä kromof ori-peptidejä, sukkinyylialanyylialanyy-lialanyyli-p-nitroanilidia (AI), metoksisukkinyylialanyy-lialanyylipropyylivalyyli-p-nitroanilidia (A2), ja muita 10 peptidejä, joita kaikkia on saatavissa kaupallisesti. Koe-puskuri, pH 8,0, ja koemenetelmät ovat samanlaisia kuin menetelmät, joita on ovat selostaneet Lottenberg yrn. (A3, A4). Entsyymiä puhdistetaan ihmisen ysköksestä (A5), vaikkakin nykyisin sitä on äskettäin ilmaantunut saataville 15 kaupallisena tuotteena. Nopeiden inhibiittorien kineettinen karakterisoiminen tapahtuu Dixon'in menetelmällä (A6), kun taas hitaasti ja/tai lujasti sitovien inhibiittorien karakterisointiin käytetään analyysimenetelmä, joita ovat selostaneet Williams ja Morrison (A7).
20 Samalla tavalla analysoidaan muita proteaaseja ja inhibiittorien vaikutukset määritetään in vitro samanlaisella spektroskooppisella menetelmällä: niitä ovat katep-siini G (A2); trombiini (A3); kymotrypsiini (A8), trypsii-ni (A9); plasmiini (A3); Cl-esteraasi (AIO); urokinaasi 25 (A3); plasminogeeniaktivaattori (All); akrosiini (A12), β-laktamaasi (A13), katepsiini B (A14), pepsiini (A15); katepsiini D (A16) ja leusiini-aminopeptIdaasi (A17). Pseudomonas-elastaasi määritetään kytkentämääritysmenetel-mällä käyttämällä ihmisen elastaasi- substraattia ja mik-30 rosomaalista aminopeptidaasia.
; Angiotensiiniä I muuttavan entsyymin ja enkefali- naasin ja niiden inhibiittorien radiometriset määritykset perustuvat Ryan'in menetelmään (A18) ja niissä käytetään tritioita substraattia, jota toimittaa Ventrex Laborato-35 ries, Inc., Radioimmuunimääritystä käytetään reniinin tut- • 30 94254 kimiseen (A19). C3-konvertaasi määritetään kuten ovat esittäneet Tack ym. (A20).
Yksityisiä määritysmenetelmiä käsitellään laajemmin seuraavissa julkaisuissa: 5 AI. The synthesis and analytical use of a highly sensitive and convenient substrate Of elastase. J. Bieth, B. Spiess and C. G. Wermuth, Biochemical Medicine, 11 (1974) 350 - 375.
A2. Mapping the extended substrate binding site of 10 cathepsin G and human leukocyte elastase. Studies with peptide substrates related to the alpha 1-protease inhibitor reactive site. K. Nakajima, J. C. Powers, B. M. Ashe and M. Zimmerman, The Journal of Biological Chemistry, 254 (1979) 4027 - 4032.
15 A3. Assay of coagulation proteases using peptide chromogenic and fluorogenic substrates. R. Lottenberg, U. Christensen, C. M. Jackson and P. L. Coleman, in, Methods in Enzymology (L. Lorand, ed), Academic Press, New York, 1979, vol. 80, pp. 341 - 361.
20 A4. Solution composition dependent variation in extinction coefficients for p-nitroaniline. R. Lottenberg and C. M. Jackson, Biochimica et Biophysica Acta, 742 (1983) 558 - 564.
A5. A rapid procedure for the large scale purifica-25 tion of elastase and cathepsin G from human sputum. R. R.
I t
Martodam, R. J. Baugh, D. Y. Twumasi and I. E. Liener, Preparative Biochemistry, 9 (1979) 15 - 31.
A6. The determination of enzyme inhibitor constants. M. Dixon, The Biochemical Journal, 55 (1953) 30 170 - 171.
A7. The kinetics of reversible tight-binding inhi-bition. J. W. Williams and J. F. Morrison, in, Methods in Enzymology (D. L. Purich, ed), Academic Press, New York, 1979, vol. 63, pp. 437 - 467.
35 A8. Two convenient spectrophotometric enzyme as says. A biochemistry experiment in kinetics. J. A.
31 94254
Hurlbut, T. N. Ball, H. C. Pound and J. L. Graves, Journal of Chemical Education, 50 (1973) 149 - 151.
A9. The preparation and properties of two new chro-mogenic substrates of trypsin. B. F. Erlanger, N. Kokowsky 5 and W. Cohen, Archives of Biochemistry and Biophysics, 95 (1961) 271 - 278.
AIO. The human complement system serine proteases Clr and Cls and their proenzymes. R. B. Sim, in, Methods in Enzymology (L. Lorand, ed), Academic Press, New York, 10 1979, vol. 80, pp. 26 - 42.
All. Extrinsic plasminogen activator and urokinase.
J. H. Verheijen, C. Kluft, G. T. G. Chang and E. Mullaart, in, Methods of Enzymatic Analysis (H. U. Bergmeyer, J. Bergmeyer and M. Grassl, eds.), Verlag Chemie, Weinheim, 15 1984, third edition, vol. 5, pp. 425 - 433.
A12. Sperm acrosin. W. Mueller-Esterl and H. Fritz, in, Methods in Enzymology (L. Lorand, ed), Academic Press, New York, 1979, vol. 80, pp. 621 - 632.
A13. Novel method for detection of beta-lactamases 20 by using a chromogenic cephalosporin substrate. C. H.
O'Callaghan, A. Morris, S. M. Kirby and A. H. Shingler, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1 (1972) 283 - 288.
A14. Cathepsin B, cathepsin H, and cathepsin L. A. J. Barrett and H. Kirschke, in. Methods in Enzymology (L.
. , 25 Lorand, ed), Academic Press, New York, 1979, vol. 80, pp.
535 - 561.
A15. Pepsins, gastricsins and their zymogens. A. P.
Ryle, in, Method of Enzymatic Analysis (H. U. Bergmeyer, J. Bergmeyer and M. Grassl, eds), Verlag Chemie, Weinheim, 30 1984, third edition, vol. 5, pp. 223 - 238.
. A16. Cathepsin D, cathepsin E. V. Turk, T. Lah and « I. Kregar, in, Methods of Enzymatic Analysis (H. U. Bergmeyer, J. Bergmeyer and M. Grassl, eds), Verlag Chemie, Weinheim, 1984, third edition, vol. 5, pp. 211 -35 222.
32 94254 A17. Amino acid arylamidase. J. C. M. Hafkenscheid, in. Methods of Enzymatic Analysis (H. U. Bergmeyer, J. Bergmeyer and M. Grassl, eds), Verlag Chemie, Weinheim, 1984, third edition, vol. 5, pp. 11 - 15.
5 A18. Angiotensin I converting enzyme (kininase II).
J. W. Ryan, in, Methods of Enzymatic Analysis (H. U. Bergmeyer, J. Bergmeyer and M. Grassl, eds), Verlag Chemie, Weinheim, 1984, third edition, vol. 5, pp. 20 - 34.
10 A19. Renin. T. Inagami and M. Naruse, in, Methods of Enzymatic Analysis (H. U. Bergmeyer, J. Bergmeyer and M. Grassl, eds), Verlag Chemie, Weinheim, 1984, third edition, vol. 5, pp. 249 - 258.
A20. The third, fourth, and fifth components of 15 human complement: isolation and biochemical properties.
B. F. Tack, J. Janatova, M. L. Thomas, R. A. Harrison and C. H. Hammer, in, Methods in Enzymology (L. Lorand, ed), Academic Press, New York, 1979, vol. 80, pp. 64 - 101.
20 Noudattamalla edellä viitattuja menetelmiä, samoin kuin käyttämällä hyväksi muita tunnettuja menetelmiä sekä vertailemalla keskenään yhdisteitä, joiden tiedetään olevan käyttökelpoisia edellä mainittujen tautitilojen hoitamisen yhteydessä, uskotaan, että sopivaa materiaalia on 25 saatavilla siten, että tavallisen alan asiantuntijan on mahdollista soveltaa käytännössä hyväksi keksintöä. Luonnollisestikin tämän keksinnön yhdisteiden käyttösovellutusta varten yhdisteet on ensisijaisesti formuloitu sopiviksi farmaseuttisiksi valmisteiksi kuten tableteiksi, 30 kapseleiksi tai eliksiireiksi, annettaviksi suun kautta tai steriileiksi liuoksiksi tai suspensioiksi parenteraa- « lista antoa varten. Tämän keksinnön yhdisteitä voidaan antaa potilaille (eläimille ja ihmisille), jotka ovat sellaisen hoidon tarpeessa annosrajoin 0,01 - 10 mg kehon 35 painon kiloa kohden päivässä. Kuten edellä on mainittu, 33 94254 annos riippuu sairauden vaikeudesta, potilaan painosta ja muista tekijöistä, jotka alan asiantuntija voi todeta.
Edellä esitettyjä yhdisteitä formuloidaan tyypillisesti farmaseuttisiksi yhdistelmiksi alla esitetyllä 5 tavalla.
Noin 10 - 500 mg kaavan I mukaista yhdistettä tai yhdisteiden seosta tai fysiologisesti hyväksyttävää suolaa sekoitetaan fysiologisesti hyväksyttävän väliaineen, kantajan, täyteaineen, sideaineen, säilytysaineen, stabili-10 saattorin, aromiaineen jne. kanssa annosyksikkö-muotoon farmaseuttisesti hyväksyttävällä käytännön edellyttämällä tavalla. Aktiivisen aineen määrä näissä yhdistelmissä tai valmisteissa on sellainen, että saadaan mainituissa rajoissa oleva sopiva annos.
15 Kuvaavia apuaineita, joita voidaan käyttää table teissa, kapseleissa ja näiden kaltaisissa valmisteissa ovat seuraavat aineet: sideaine, kuten traganttikumi, akaasia, maissitärkkelys tai gelatiini; täyteaine kuten mikrokiteinen selluloosa, hajottava aine kuten maissitärk-20 kelys, esigelatinoitu tärkkelys, algiinihappo ja näiden kaltaiset aineet; liukastava aine kuten magnesiumstearaat-ti: makeutusaine kuten sakkaroosi, laktoosi tai sakkarii-ni; aromiaine kuten piparminttuöljy tai talvikkiöljy tai kirsikka. Annosyksikkömuodon ollessa kapseli, se voi si-·,·,1 25 sältää edellä mainitun tyyppisten aineiden lisäksi nestemäistä kantajaa kuten rasvaöljyä. Erilaisia muita materiaaleja voi olla läsnä pinnoitteina tai joilla voidaan muulla tavalla modifioida annosyksikön fysikaalista muotoa. Esimerkiksi tabletit voivat olla päällystettyjä sel-30 lakalla, sokerilla tai kummallakin. Siirappi tai eliksiiri voi sisältää aktiivista yhdistettä, sakkaroosia makeutus- 4 aineena, metyyli- ja propyyliparabeeneja säilytysaineina, väri- ja aromiainetta kuten kirsikka- tai appelsiinimaus-tetta.
35 Injektoitaviksi tarkoitetut steriilit yhdistelmät voidaan formuloida tavanomaisen farmaseuttisen käytännön 94254 34 mukaisesti liuottamalla tai suspendoimalla aktiivinen aine väliaineeseen kuten veteen injektointiin soveltuvaa veteen, luonnossa esiintyvän kasviöljyyn kuten seesamöljyyn, kookospähkinä-öljyyn, maapähkinäöljyyn, kookospähkinä-öl-5 jyyn, maapähkinäöljyyn, puuvillasiemenöljyyn, jne. tai synteettiseen rasva-väliaineeseen kuten etyylioleaattiin tai tämän kaltaisiin aineisiin. Tarvittaessa seokseen voidaan lisätä puskureita, säilytysaineita, antioksidantteja ja näiden kaltaisia aineita.
t « * » « » « 1 ♦

Claims (6)

  1. 94254 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (I) 5 R,NH. C-X N/S u> r2 10 ja niiden hydraattien valmistamiseksi, jossa kaavassa Rx on peptidi ryhmästä Pro- Ala-Pro, Ala-Ala-Pro, Phe-Pro, (D)-Phe-Pro ja (MeOSuc)Lys-Pro-Val, ja johon peptidiin mahdollisesti on liittynyt aminon suojaryhmä, ryhmistä asetyyli (Ac), t-butyylioksikarbonyyli (Boc), karbobentsoyyli 15 (CBz), dansyyli (DNS), metoksisukkinyyli(MeOSuc) ja 1-ada-mantaanisulfonyyli (AdS02); R2 on α-aminohapporakenneosan R-ryhmäsivuketju, joka a-ami- nohapporakenneosa on Ala, Vai tai Phe; X on X1 tai X2, jolloin
  2. 20 Xj on -C02R3 ja X2 on -CF2CY, II O joissa R3 on vety tai haarautunut tai haarautumaton Cj^-al-kyyli ja , . 25 Y on -0R3, tunnettu siitä, että « a) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -C02R3, suoritetaan Swern-hapetus yhdisteelle, jolla on kaava
  3. 30 RjNH. -CH-C02R3' j °H (D1} R2 jossa R3 ja R2 ovat edellä määritellyt ja R3' on sama kuin 35 t · · 94254 edellä määritelty R3 lukuunottamatta vetyä, ja haluttaessa poistetaan mikä tahansa suojaryhmä ja/tai käsitellään saatua yhdistettä, jossa X on -C02R3', emäksellä kaavan I mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa X on -C02H, tai 5 b) kaavan 1 mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -CF2CY, suoritetaan Swern-hapetus tai pyridi-0 niumdikromaattihapetus yhdisteelle, jolla on kaava 10 R.NH. . -CH-CF2CY I 1' OH O (K) r2 jossa Rlf R2 ja Y ovat edellä määritellyt, ja haluttaessa 15 poistetaan mikä tahansa suojaryhmä. • « « • h h 94254 Förfarande för framställning av terapeutiskt aktiva peptidderivat med formeln (I) 5 RiNH-s. . C-X Il 0 (I) r2 10 och hydrater därav, i vilken formel R2 är en peptid ur gruppen Pro-Ala-Pro, Ala-Ala-Pro, Phe-Pro, (D)-Phe-Pro och (MeOSuc)Lys-Pro-Val och vid vilken peptid eventuellt är bunden en aminoskyddsgrupp av grupperna acetyl (Ac), t-bu-tyloxikarbonyl (Boc), karbobensoyl (CBz), dansyl (DNS), 15 metoxisuccinyl (MeOSuc) och 1-adamantansulfonyl (AdS02); R2 är en R-gruppsidokedja av en a-aminosyrastrukturdel, vilken α-aminosyrastrukturdel är Ala, Vai eller Phe; X är X: eller X2, varvid X2 är -C02R3 och
  4. 20 X2 är -CF2CY, II o väri R3 är väte eller förgrenad eller oförgrenad C^-alkyl och Y är -0R3, kännetecknat därav, att . . 25 a) för framställning av en förening med formeln I, < väri X är -C02R3, en förening med formeln RjNH ^ -CH-C02R3 * OH (DJ
  5. 30 R2 « väri Rx och R2 är ovan definierade och R3' är samma som ovan definierad R3 förutom väte, underkastas en Swern-oxidation > - · 94254 och om sd önskas, avlägsnas vilken soin heist skyddsgrupp och/eller behandlas en erhällen förening, väri X är -C02R3' med en bas för erhällande av en förening med formeln I, väri X är -C02H, eller 5 b) för framställning av en förening med formeln I, väri X är -CF2CY, en förening med formeln 0 RiNH -CH-CF2CY
  6. 10 OH 0 (K) r2 väri Rl7 R2 och Y är ovan definierade, underkastas en Swern-oxidation eller pyridiniumdikromatoxidation, och om 15 sä önskas, avlägsnas vilken som heist skyddsgrupp.
FI860484A 1985-02-04 1986-02-03 Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi FI94254C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US69798785A 1985-02-04 1985-02-04
US69798785 1985-02-04

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI860484A0 FI860484A0 (fi) 1986-02-03
FI860484A FI860484A (fi) 1986-08-05
FI94254B FI94254B (fi) 1995-04-28
FI94254C true FI94254C (fi) 1995-08-10

Family

ID=24803437

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI860484A FI94254C (fi) 1985-02-04 1986-02-03 Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi

Country Status (20)

Country Link
EP (1) EP0195212B1 (fi)
JP (1) JP2529825B2 (fi)
KR (1) KR900008004B1 (fi)
CN (1) CN86101268A (fi)
AR (1) AR246975A1 (fi)
AT (1) ATE97652T1 (fi)
AU (1) AU600226B2 (fi)
CA (1) CA1341029C (fi)
DE (1) DE3689314T2 (fi)
DK (1) DK51586A (fi)
ES (3) ES8800720A1 (fi)
FI (1) FI94254C (fi)
GR (1) GR860321B (fi)
HU (1) HU207102B (fi)
IE (1) IE60582B1 (fi)
IL (1) IL77748A (fi)
NO (1) NO169543C (fi)
NZ (1) NZ215024A (fi)
PT (1) PT81965B (fi)
ZA (1) ZA86746B (fi)

Families Citing this family (108)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ214543A (en) * 1984-12-14 1990-03-27 Australian Commercial Research Amino acid and peptide derivatives that inhibit human leucocytic elastase enzyme (hle)
US5055450A (en) * 1985-01-22 1991-10-08 Ici Americas Inc. Peptide derivatives
US5194588A (en) * 1985-01-22 1993-03-16 Ici Americas Inc. Aminoalcohol intermediates for peptide derivatives
GB8600263D0 (en) * 1985-01-22 1986-02-12 Ici America Inc Peptide derivatives
US5496927A (en) * 1985-02-04 1996-03-05 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
GB8613704D0 (en) * 1986-06-05 1986-07-09 Ici America Inc Difluoro keto compounds
GB8619182D0 (en) * 1986-08-06 1986-09-17 Sandoz Ltd Peptides & derivatives
US5055451A (en) * 1986-12-22 1991-10-08 Syntex Inc. Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors
US5158936A (en) * 1986-12-22 1992-10-27 Syntex (U.S.A.) Inc. Aryloxy and arylacyloxy methyl ketones as thiol protease inhibitors
NZ223148A (en) * 1987-01-16 1989-10-27 Merrell Dow Pharma Peptide derivatives having peptidase inhibition activity
EP0276101A3 (en) * 1987-01-19 1989-11-23 Ici Americas Inc. Substituted peptide derivatives
US4820691A (en) * 1987-06-24 1989-04-11 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino acid 1,2-diketo derivatives as renin inhibitors
US5217958A (en) * 1988-03-03 1993-06-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. 1,2-hydroxy phosphonates and derivatives thereof
US4981843A (en) * 1988-04-07 1991-01-01 E. R. Squibb & Sons, Inc. N-heterocyclic alcohol derivatives
US5151513A (en) * 1988-04-29 1992-09-29 E. R. Squibb & Sons, Inc. N-heterocyclic alcohol derivatives
EP0353732A3 (de) * 1988-08-05 1991-11-06 Ciba-Geigy Ag Neue Fluorolefine, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
WO1992015605A2 (en) * 1991-03-01 1992-09-17 Protein Engineering Corporation Inhibitors of human neutrophil elastase and human cathepsin g
ZA897515B (en) * 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
US5736520A (en) * 1988-10-07 1998-04-07 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
EP0371179A1 (en) * 1988-10-28 1990-06-06 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel analogs of peptidase substrates
EP0369391A3 (en) * 1988-11-15 1991-09-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. N-substituted amides
CA2021660A1 (en) * 1989-07-26 1991-01-27 Philippe Bey Peptidase inhibitors
NZ235155A (en) * 1989-09-11 1993-04-28 Merrell Dow Pharma Peptidase substrates in which the carboxy terminal group has been replaced by a tricarbonyl radical
CA2018801C (en) * 1990-06-12 2000-08-22 Pierre Louis Beaulieu Antiherpes peptide derivatives having a 1,4-dioxo c n-terminus
JPH06504547A (ja) * 1990-12-28 1994-05-26 ジョージア・テック・リサーチ・コーポレーション ペプチドケトアミド、ケト酸およびケトエステル
US5391705A (en) * 1991-03-15 1995-02-21 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Polyfluorinated tripeptide thrombin inhibitors
HU217612B (hu) * 1991-05-23 2000-03-28 Merrel Dow Pharmaceuticals Inc. Eljárás elasztáz és katepszin G inhibitor hatású peptidek előállítására
WO1993008211A1 (en) * 1991-10-23 1993-04-29 The Procter & Gamble Company Tripeptide derivative anti-inflammatory agents
US5650508A (en) * 1991-12-27 1997-07-22 Georgia Tech Research Corporation Peptide ketoamides
US6235929B1 (en) 1991-12-27 2001-05-22 Georgia Tech Research Corporation Tripeptide α-ketoamides
US5441960A (en) * 1992-04-16 1995-08-15 Zeneca Limited 1-pyrimidinylacetamide human leukocyte elastate inhibitors
US5486529A (en) * 1992-04-16 1996-01-23 Zeneca Limited Certain pyridyl ketones for treating diseases involving leukocyte elastase
US5739279A (en) * 1992-07-31 1998-04-14 Pfizer Inc. Peptidyl 4-amino-2,2-difluoro-3-oxo-1,6-hexanedioic acid derivatives as antiinflammatory agents
US5514694A (en) * 1992-09-21 1996-05-07 Georgia Tech Research Corp Peptidyl ketoamides
US5371072A (en) * 1992-10-16 1994-12-06 Corvas International, Inc. Asp-Pro-Arg α-keto-amide enzyme inhibitors
IL108031A0 (en) * 1992-12-22 1994-04-12 Procter & Gamble Difluoro pentapeptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them
US5563127A (en) * 1993-03-24 1996-10-08 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Boronic acid and ester inhibitors of thrombin
US5783563A (en) * 1993-06-03 1998-07-21 Astra Aktiebolag Method for treatment or prophylaxis of venous thrombosis
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US6984627B1 (en) 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
US5541290A (en) * 1993-06-24 1996-07-30 Harbeson; Scott L. Optically pure calpain inhibitor compounds
US5977074A (en) * 1993-10-01 1999-11-02 Merrell Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of β-amyloid protein production
PT721449E (pt) * 1993-10-01 2002-06-28 Merrell Pharma Inc Inibidores da producao da proteina beta-amiloide
US6060462A (en) * 1993-10-20 2000-05-09 Dupont Pharmaceuticals Company Electrophilic peptide analogs as inhibitors of trypsin-like enzymes
EP0731788B1 (en) * 1993-12-02 2002-09-11 Merrell Pharmaceuticals Inc. Prolyl endopeptidase inhibitors
US6008196A (en) * 1994-06-02 1999-12-28 Hoechst Marion Roussel, Inc. Perfluoroalkyl ketone inhibitors of elastase and processes for making the same
JP4221059B2 (ja) * 1994-06-02 2009-02-12 アベンティス・インコーポレイテッド エラスターゼインヒビターのプロドラッグとしてのアシル化エノール誘導体
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
US5510369A (en) * 1994-07-22 1996-04-23 Merck & Co., Inc. Pyrrolidine thrombin inhibitors
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
GB9502152D0 (en) * 1995-02-03 1995-03-29 Zeneca Ltd Proline derivatives
NZ302649A (en) * 1995-02-17 2000-01-28 Basf Ag Dipeptide amidine derivatives, preparation and pharmaceutical compositions thereof
US5629324A (en) * 1995-04-10 1997-05-13 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5721214A (en) * 1995-06-07 1998-02-24 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor Xa
US6046169A (en) * 1995-06-07 2000-04-04 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor XA
US5919765A (en) * 1995-06-07 1999-07-06 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor XA
US6069130A (en) 1995-06-07 2000-05-30 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
US6022861A (en) * 1995-06-07 2000-02-08 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
US6211154B1 (en) 1995-06-07 2001-04-03 Cor Therapeutics, Inc. Ketoheterocyclic inhibitors of factor Xa
SA96170106A (ar) 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
US6069232A (en) * 1995-10-02 2000-05-30 Hoechst Marion Roussel, Inc. Polyfluoroalkyl tryptophan tripeptide thrombin inhibitors
GB9524267D0 (en) * 1995-11-28 1996-01-31 Isis Innovation Enzyme inhibitor and method
US6172044B1 (en) 1995-12-01 2001-01-09 Aventis Pharmaceuticals Inc. Acylated enol derivative of α-ketoesters and α-ketoamides
TWI238827B (en) 1995-12-21 2005-09-01 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
US5739354A (en) * 1996-03-26 1998-04-14 Hoechst Marion Roussel, Inc. Process for the preparation of N-methyl-D-phenylalanyl-N- 1- 3- (aminoiminomethyl)amino!propyl!-3,3-difluoro-2-oxohexyl!-L-prolinamide
US6245743B1 (en) 1996-06-05 2001-06-12 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor Xa
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
US5792761A (en) * 1996-08-12 1998-08-11 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
SI0932617T1 (en) * 1996-10-18 2002-06-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis c virus ns3 protease
EP2409985A3 (en) 1996-10-18 2013-05-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors de serine proteases, especially of the NS3 protease of the hepatitis C virus
US5798377A (en) * 1996-10-21 1998-08-25 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5854011A (en) * 1996-12-19 1998-12-29 Idexx Laboratories Incorporated Method and components for the detection of yeasts and/or molds in a sample
RU2183642C2 (ru) * 1997-05-02 2002-06-20 Акцо Нобель Н.В. Ингибиторы сериновых протеаз
AR013084A1 (es) 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
CA2317761A1 (en) 1998-01-26 1999-07-29 Basf Aktiengesellschaft Thrombin inhibitors
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
WO2000042059A1 (en) 1999-01-13 2000-07-20 Astrazeneca Ab New amidinobenzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
AU2001265094A1 (en) 2000-06-01 2001-12-11 Merck And Co., Inc. Pyrazinone thrombin inhibitors
DK1385870T3 (da) 2000-07-21 2010-07-05 Schering Corp Peptider som inhibitorer af NS3-serinprotease fra hepatitis C-virus
US7244721B2 (en) 2000-07-21 2007-07-17 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
HUP0303358A3 (en) * 2000-07-21 2005-10-28 Schering Corp Novel peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus and pharmaceutical compositions containing them
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
ATE420067T1 (de) 2000-11-06 2009-01-15 Univ Kyushu Nat Univ Corp Peptid-derivate und ihre pharmazeutisch akzeptablensalze, verfahren zur herstellung von beiden und ihre verwendung
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
US6528503B2 (en) 2000-12-18 2003-03-04 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
AU2002230836A1 (en) 2000-12-18 2002-07-01 Merck & Co., Inc. Benzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
US6610701B2 (en) 2001-02-09 2003-08-26 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US7144899B2 (en) 2001-02-09 2006-12-05 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
JP2005531540A (ja) 2002-04-30 2005-10-20 トラスティーズ・オブ・タフツ・カレッジ セリンプロテアーゼ阻害剤のスマートプロドラッグ
US7084134B2 (en) 2002-05-02 2006-08-01 Merk & Co., Inc. Thrombin inhibitors
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
US6989369B2 (en) 2003-02-07 2006-01-24 Dyax Corp. Kunitz domain peptides
US7781424B2 (en) 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
MY148123A (en) 2003-09-05 2013-02-28 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly hcv ns3-ns4a protease
US7795205B2 (en) 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
GB0507577D0 (en) 2005-04-14 2005-05-18 Novartis Ag Organic compounds
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
HUE060305T2 (hu) 2011-08-30 2023-02-28 Tufts College FAP-aktivált proteaszóma inhibitorok a szolid tumorok kezelésére
PE20171335A1 (es) 2014-10-06 2017-09-13 Cortexyme Inc Inhibidores de gingipaina de lisina
JP6877424B2 (ja) 2015-11-09 2021-05-26 コーテクシーミー， インコーポレイテッド アルギニンジンジパインの阻害剤
BR112019004864A8 (pt) 2016-09-16 2023-03-07 Cortexyme Inc Inibidores cetona de lisina gingipain

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4277395A (en) * 1980-06-16 1981-07-07 Richardson-Merrell Inc. Novel enzyme inhibitors
US4518528A (en) * 1983-05-19 1985-05-21 Rasnick David W α Amino fluoro ketones
GB8600263D0 (en) * 1985-01-22 1986-02-12 Ici America Inc Peptide derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
AU5288186A (en) 1986-08-07
EP0195212B1 (en) 1993-11-24
DE3689314T2 (de) 1994-05-19
ES8800051A1 (es) 1987-10-16
IL77748A (en) 1991-11-21
ES551597A0 (es) 1987-11-16
PT81965B (pt) 1988-01-22
DK51586D0 (da) 1986-02-03
GR860321B (en) 1986-06-04
NZ215024A (en) 1989-08-29
EP0195212A3 (en) 1988-10-05
ES553505A0 (es) 1987-10-16
IE860303L (en) 1986-08-04
HUT40142A (en) 1986-11-28
KR900008004B1 (ko) 1990-10-29
EP0195212A2 (en) 1986-09-24
KR860006488A (ko) 1986-09-11
NO860371L (no) 1986-08-05
PT81965A (en) 1986-03-01
DK51586A (da) 1986-08-05
ES8800050A1 (es) 1987-10-16
CA1341029C (en) 2000-06-20
ZA86746B (en) 1986-09-24
NO169543B (no) 1992-03-30
JP2529825B2 (ja) 1996-09-04
HU207102B (en) 1993-03-01
ES553504A0 (es) 1987-10-16
FI860484A (fi) 1986-08-05
JPS61183253A (ja) 1986-08-15
AU600226B2 (en) 1990-08-09
ES8800720A1 (es) 1987-11-16
AR246975A1 (es) 1994-10-31
IE60582B1 (en) 1994-07-27
ATE97652T1 (de) 1993-12-15
DE3689314D1 (de) 1994-01-05
FI94254B (fi) 1995-04-28
NO169543C (no) 1992-07-08
FI860484A0 (fi) 1986-02-03
CN86101268A (zh) 1987-02-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI94254C (fi) Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi
US6130315A (en) Peptidase inhibitors
HU204847B (en) Process for producing new peptidase inhibitors
EP0417721B1 (en) Novel peptidase and isomerase inhibitors
AU2003208471B2 (en) Selective dipeptide inhibitors of kallikrein
US6008196A (en) Perfluoroalkyl ketone inhibitors of elastase and processes for making the same
EP0410411A2 (en) Novel peptidase inhibitors
EP0362002A1 (en) HIV protease inhibitors
EP0736036A1 (en) Kininogen inhibitors
US5798377A (en) Thrombin inhibitors
CA2212356A1 (en) Novel 4-substituted-3-peptidyl-azetidin-2-one derivatives useful as cysteine proteinase inhibitor
HU221197B1 (en) Elastase inhibitor tripeptides and pharmaceutical compositions comprising thereof
US6693072B2 (en) Elastase inhibitors
KR0139535B1 (ko) 신규 펩티다제 억제제
US5888971A (en) Macrocyclic peptides useful in the treatment of thrombin related disorders
Albericio et al. 2-Mercaptopyridine-1-oxide-based peptide coupling reagents
US5698523A (en) Acylated enol derivatives as prodrugs of elastase inhibitors
EP1140984B1 (en) Selective inhibitors of mmp-12

Legal Events

Date Code Title Description
BB Publication of examined application
MM Patent lapsed

Owner name: MERRELL DOW PHARMACEUTICALS INC.