FI93781C - Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä - Google Patents
Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä Download PDFInfo
- Publication number
- FI93781C FI93781C FI931198A FI931198A FI93781C FI 93781 C FI93781 C FI 93781C FI 931198 A FI931198 A FI 931198A FI 931198 A FI931198 A FI 931198A FI 93781 C FI93781 C FI 93781C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- microparticles
- different
- labeled
- bioaffinity
- fluorescent
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
93781
BIOSPESIFINEN MULTIPARAMETRINEN MÄÄRITYSMENETELMÄ - BIOSPE-CIFIK MULTIPARAMETRISK BESTÄMNINGSMETOD
Keksinnön kohteena on biospesifinen määritysmenetelmä, jossa pystytään määrittämään useita analyyttejä yhtäaikaisesti samasta näytteestä.
Mikropartikkeleita voidaan hyödyntää kiinteänä kantajana 5 erilaisissa bioaffiniteettimäärityksissä. Tällaisissa määrityksissä on usein hyödyllistä tai välttämätöntä pystyä suorittamaan monia määritysreaktioita yhtäaikaisesti, jolloin vältetään rinnakkaisten työvaiheiden toistaminen. Eräs ajatus moniparametrianalyysin suorittamiseksi on 10 hyödyntää mikropartikkeleita kiinteänä kantajana (Soini E., US 5,028,545). Tällaisessa systeemissä partikkeleihin kiinnitetään spesifisiä koettimia, jonka jälkeen eri spesi-fiteetin omaavat partikkelit voidaan sekoittaa keskenään. Seosta voidaan siten käyttää kiinteänä kantajana bio-15 affiniteettimäärityksiä suoritettaessa. Reaktion jälkeen mittausta suoritettaessa on tärkeätä kyetä erottelemaan mahdollisimman monta, eri spesifiteetin omaavaa partikkeli-ryhmää toisistaan. Erottelussa voidaan hyödyntää mm. partikkelien kokoa (McHugh t.m.et ai. J.Immunol. Methods 1986; 20 95: 57 - 61.), värillisiä partikkeleita (Streefkerk JG,
Kors N, Boden D. Protides Biol Fluids 1976; 24: 811 - 4) tai erilaisilla fluoresoivilla aineilla merkittyjä partikkeleita (Dean K.J. et ai. Clin. Chem. 1983; 29: 1051 - 6).
Bioaffiniteettireaktioissa kaksi biologista molekyyliä 25 kykenevät sitoutumaan toisiinsa suurella tarkkuudella myös muiden molekyylien läsnäollessa. Tällaisia sitoutujapareja ovat esimerkiksi vasta-aineet ja niiden antigeenit, yksi-nauhaiset DNA-molekyylit ja niiden vastinsekvenssit, reseptorit ja reseptoriin spesifisesti sitoutuvat molekyylit ja 30 niin edelleen. Näitä kaikkia reaktioita voidaan kutsua yhteisellä nimellä bioaffiniteettireaktioiksi.
Bioaffiniteettireaktioita käytetään hyväksi monenlaisissa käytännön sovelluksissa ja tutkimukseen liittyvissä määri- 93781 2 tykeissä. Tunnettu biomolekyyli, joka voi olla biologisesta materiaalista puhdistettu (esimerkiksi vasta-aine) tai synteettisesti valmistettu (esim. oligonukleotidi DNA) voidaan leimata siten, että se kyetään havaitsemaan bio-5 affiniteettireaktion suorittamisen jälkeen. Tällä hetkellä tärkeimpiin bioaffiniteettireaktioiden sovellusalueisiin kuuluvat menetelmät ovat immunomääritykset ja nukleiini-happohybridisaatiomääritykset, joilla määritetään erilaisia komponentteja esim. verestä. Reseptoreja biologisena kom-10 ponenttina hyödyntävillä määrityksillä on tärkeä osa etsittäessä uusia lääkeaineita.
Verestä tai sen komponenteista tapahtuvat määritykset voidaan jakaa ryhmiin, joilla on merkitystä tietyn sairauden tai lääketieteellisen toimenpiteen kannalta. Multi-15 parametrimäärityksessä näihin ryhmiin, niin kutsuttuihin paneeleihin, kuuluvat analyytit voitaisiin määrittää yhtäaikaisesti samasta näytteestä. Tämä mahdollistaisi testauksen kustannusten vähenemisen, joka lisäisi suoritettavien testien määrää ja johtaisi täten varmempiin taudinmäärityk-20 siin. Moniparametrianalyysit myös vähentäisivät huomattavasti testin suorittamiseksi tarvittavaa työmäärää ja näin ollen johtaisivat nopeampiin ja luotettavampiin tuloksiin.
Luonnollisia kohteita DNA:ta biologisena komponenttina • hyödyntäville määrityksille ovat virukset sekä perinnölli- 25 set sairaudet, jotka aiheutuvat solun DNA-muutoksista.
Varsinkin perinnöllisten sairauksien kohdalla DNA-muutokset ovat varsin moninaisia ja perinnöllisiä sairauksia määritettäessä olisikin välttämätöntä pystyä toteamaan monia DNA-muutoksia samasta näytteestä yhtäaikaisesti. Tästä 30 olisi hyötyä varsinkin etsittäessä näiden DNA-muutosten kantajia laajoissa, kokonaisia populaatioita kattavissa tutkimuksissa.
Analysoitavan DNA:n alhaisen määrän takia joudutaan tutkittava geenialue usein monistamaan näytteestä ennen sen tai ·. 35 siinä olevien mutaatioiden todentamista. Useita geeni- 3 93781 alueita voidaan monistaa yhtaikaisesti samassa reaktiossa. Multiparametrimääritysmenetelmä soveltuu hyvin tällaisiin monia tutkittavia geenialueita sisältävien reaktioseosten tutkimiseen.
5 Multiparametrimäärityksen suorittamisessa voidaan hyödyntää merkkiaineita, joiden lähettämä signaali voidaan erottaa toisistaan bioaffiniteettireaktion suorittamisen jälkeen esimerkiksi aallonpituuden tai signaalin sammumiseen kuluvan ajan perusteella. Näissä määrityksissä on käytetty 10 pääasiassa eri radioisotooppeja (Morgan CR., Proc Soc Exp Biol Med 1966; 123: 230 - 3; Wians FH, Dev J, Powell MM, Heald JI., Clin Chem 1986; 32: 887 - 90), entsyymileimoja (Dean KJ, Thompson SG, Burg JF, Buckler RT., Clin Chem 1983; 29: 1051 - 6; Bates DI, Bailey WR., kansainvälinen 15 patenttihakemus W089/06802) sekä lyhytikäistä fluoresenssia lähettäviä leimoja. Ongelmana näissä merkkiaineissa on kuitenkin usein mitattavien signaalien aallonpituuksien päällekkäisyys (isotoopit, fluoresoivat aineet), viritys ja emissioaallonpituuksien lähekkäisyys (fluoresoivat aineet), 20 erilaiset optimiolosuhteet (entsyymileimat) tai materiaalien taustafluoresenssi (lyhytikäistä fluoresenssia lähettävät leimat). Näissä systeemeissä onkin parhaimmillaan kyetty yhtäaikaisesti määrittämään ainoastaan kahta mitattavaa ainetta.
25 Aikaerotteista fluoresenssia leimateknologiana hyödyntävissä systeemeissä käytetään hyväksi harvinaisten maa-metallien lähettämää pitkäikäistä fluoresenssia (kuvio 1; Soini E., and Lövgren Timo., CRC Critical Reviews in Analytical Chemistry 1987; 18(2): 105 - 154). Metalli komplek-30 soidaan orgaaniseen molekyyliin, joka kykenee absorboimaan energiaa kompleksia viritettäessä. Toisaalta tämän ligandin tulee kyetä myös luovuttamaan kyseinen viritysenergia kompleksoimalleen metallille. Soveliaimmiksi maametalleiksi aikaerotteisissa leimoissa ovat osoittautuneet Eu, Sm, Tb 35 ja Dy. Näiden harvinaisten metallien elektronien energiatasot ovat soveliaimmat viritysnergian vastaanottamiselle 4 93781 ja toisaalta pitkäikäistä fluoresenssia vähentävät ener-giansiirtymät ovat näiden maametallien komplekseilla vähäisiä. Näiden maametallien viritystilojen purkautuessa syntyy fluoresenssia, joka koostuu monesta eri aallonpituuden 5 omaavasta kapean aallonpituusalueen kattavasta komponentista. Toiset elektroninsiirtymät ovat kuitenkin, viritys-tilojen purkautuessa, selvästi toisia suositumpia ja täten tietyn aallonpituuden omaavat komponentit muodostavatkin valtaosan havaittavasta fluoresenssista. Mitattaessa yhtälö aikaisesti näillä aikaerotteisilla leimoilla varustettuja komponentteja bioaffiniteettimäärityksissä voidaankin näiden vähäisempien komponenttien vaikutus mittaustuloksiin helposti poistaa laskennallisin menetelmin. Aikaerotteisia leimoja hyödyntävissä multiparametrimäärityksissä onkin 15 kyetty yhtäaikaisesti määrittämään jopa neljää eri biomole-kyyliä tarvittavilla herkkyyksillä (Xu Y.Y., Pettersson K., Blomberg K., Hemmilä I., Mikola H. and Lövgren T., Clin. Chem. 38/10, 2038 - 2043 (1992).
Vaihtoehtoisen mahdollisuuden multiparametrimäärityksen 20 periaatteeksi tarjoaa erilaisten kiinteiden kantajien käyttäminen spesifisten koettimien erottelemiseksi bioaf f initeettimäärityksessä . Kiinteä kantaja voidaan jakaa alueisiin, joissa kussakin on tietyn spesifiteetin omaava koetin, määrityksessä voidaan hyödyntää yhtäaikaisesti ·. 25 erilaisia kiinteitä kantajia tai kiinteä kanta voidaan jakaa eri luokkiin jonkin merkkiaineen perusteella (Soini E, US 5,028,545). Viimeisessä tapauksessa kussakin erillisessä luokassa kiinteää kantajaa on kiinnittyneenä eri spesifiteetin omaava koetin. Tämän vaihtoehdon käyttäminen 30 multiparametrimäärityksessä on houkuttelevaa, koska se tarjoaa mahdollisuuden valmistaa kukin multiparametri-systeemin komponentti erikseen, jonka jälkeen ne voidaan yhdistää. Tämä on tärkeää tuotannolliset näkökohdat huomioitaessa .
35 Keksinnön kohteena on biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä, jossa käytetään eri luokkiin jaettuja 5 93781 mikropartikkeleita. Eri luokat edustavat eri analyytteja, ja eri luokkiin kuuluvat mikropartikkelit on leimattu fluoresoivalla aineella (1) ja eri luokkiin kuuluvat mikropartikkelit on päällystetty eri analyyttejä sitovilla bioaf-5 finiteettikomponenteilla A. Menetelmässä sekoitetaan eri luokkiin kuuluvat mikropartikkelit ja lisätään analysoitava näyte seokseen, ja lisätään seokseen fluoresoivalla aineella (2) leimatut bioaffiniteettikomponentit B joko heti tai analyyttimolekyylin ja bioaffiniteettikomponentti A:n 10 välisen reaktion jälkeen. Aktivoidaan fluoresoivat aineet (1, 2) ja kvantitoidaan fluoresenssiemissiot mikropartikke-liluokan tunnistamiseksi ja eri analyyttimäärien mittaamiseksi mittaamalla fluoresenssiemissio erikseen jokaisesta mikropartikkelista. Tunnusomaista on, että mikropartikke-15 lit ja bioaffiniteettikomponentit B on leimattu erilaisilla pitkäikäistä fluoresenssia aiheuttavilla aineilla (1, 2).
Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä suoritetaan joko yksivaiheisena, jolloin kaikki reaktioon osallistuvat komponentit ovat samanaikaisesti läsnä, tai kaksivai-20 heisena, jolloin leimatun bioaffiniteettikomponentti B:n lisäys tehdään bioaffiniteettikomponentti A:n ja analyyttimolekyylin välisen reaktion jo tapahduttua.
Erään edullisen suoritusmuodon mukaan käytetään aika-erot-? 25 teista fluoresenssiä eli pitkäikäistä fluoresenssia aiheut tavaa ainetta sekä mikropartikkeliluokan tunnistajana että bioaffiniteettikomponentti B:n leimana.
Keksinnössä hyödynnetään aika-erotteista fluoresenssia (Soini E., and Lövgren Timo. CRC Critical Reviews in Analy-30 tical Chemistry 1987; 18 (2): 105 - 154.) partikkelien tai muunlaisen kiinteän kantajan merkitsemisessä. Aika-erotteista fluoresenssia käytettäessä päästään eroon lyhytkestoisesta taustafluoresenssista, joka aiheutuu erilaisten systeemissä käytettävien komponenttien luonnollisesta 35 fluoresenssista. Näin ollen, merkittäessä partikkelit eri pitoisuuksilla aikaerotteista leimaa, kyetään jo erittäin 6 93781 matala pitoisuus merkkiainetta havaitsemaan. Herkkyys ja aikaerotteisen fluoresenssi-mittauksen hyvä lineaarisuus mahdollistavat aikaerotteisen leiman mittaamisen erittäin laajalla konsentraatioalueella. Kuviossa 2 nähdään euro-5 piumin annosvastekäyrä, jossa standardit (EuCl3) oli tehty fluoresenssia korostavassa liuoksessa ja fluoresenssi mitattu 1 sekunnin ajan käyttäen aika-erotteista fluoro-metria (1230 Fluorometer, LKB-Wallac, Turku, Finland).
Laaja konsentraatioalue taasen mahdollistaa kiinteän kanta-10 jän erottelussa monen eri ryhmän erottamisen toisistaan. Aikaerotteista fluoresenssia käytettäessä kyetään myös käyttämään eri aallonpituuksilla valoa emittoivia leimoja (M. Saarma, L. Järvekulg, I. Hemmilä, H. Siitari & R. Sinijärv, Journal of Virological Methods 23: 47 - 54, 1989; 15 Xu Y.Y., Pettersson K., Blomberg K., Hemmilä I., Mikola H. and Lövgren T., Clin. Chem. 38/10, 2038 - 2043 (1992) ja Iitiä A., Liukkonen L. and Siitari H., Molecular and Cellular Probes 1992; 6, 505-512). Keksinnössä hyödynnetään myös näiden eri aallonpituuksia emittoivien leimojen kon-20 sentraatioiden kombinaatioita partikkeleiden tai muunlaisen kiinteän kantajan merkitsemisessä.
Käytettäessä mikropartikkelia kiinteänä kantajana multi-parametrimäärityksen eri analyyttien erottelussa tarvitaan varsinaisen analyytin havaitsemiseen ainoastaan yksi tai : 25 joitakin leimoja. Käytettäessä leimateknologiana aikaerotteista fluoresenssia, jonka avulla kyetään erottamaan useita leimoja toisistaan, vapauttaa luokitettavan kiinteän kantajan käyttö yhden tai useamman leimoista käytettäväksi kiinteän kantajan luokkien erotteluun. Kuviossa 3 nähdään 30 Eu+3, Tb+3, Sm+3 ja Dy+3 PTA-kelatoidun seoksen emission aallonpituus-, viive- ja intensiteettiprofiili.
Kiinteän kantajan jako luokkiin voidaan suorittaa joko eri aallonpituudella fluoresoivien aikaerotteisten leimojen perusteella, erilaisten aikaerotteisen leiman pitoisuuksien ...35 perusteella, aikaerotteisen ja lyhytikäisen fluoresoivien • ’ leimojen yhtäaikaisen käytön perusteella tai jollakin 7 93781 näiden yhdistelmällä. Esimerkiksi käyttämällä kahta, eri aallonpituudella fluoresoivaa, aikaerotteista leimaa, kymmenessä eri pitoisuudessa kiinteän kantajan luokkien erottelussa, voidaan sata erilaista kiinteän kantajan 5 luokkaa erottaa toisistaan.
Hyvin monta toisistaan erotettavissa olevaa kiintokantaja-luokkaa saadaan samaan multiparametrimääritykseen käyttämällä mikropartikkeleita, jotka sisältävät fluoresoivia lantanidikelaatteja. Eri fluoresoivat aineet voivat olla 10 kytkettyjä eri mikropartikkeleihin tai samoihin mikropar-tikkeleihin. On edullista leimata samat mikropartikkelit monilla erilaisilla fluoresoivilla aineilla, koska hyödyntämällä näiden eri fluoresoivien kelaattien kombinaatioita ja/tai niiden pitoisuuksien kombinaatioita saadaan tällä 15 tavoin hyvin monta kombinaatiomahdollisuutta. Kiintokanta jaluokat tunnistetaan mittaamalla aika-erotteista fluoresenssia käyttäen yksittäisten mikropartikkeleiden sisältämän lantanidikelaatin/kelaattien fluoresenssi-intensiteetti. Tunnistamisen jälkeen määritetään partikkelilla 20 suoritetun yleisesti tunnetun spesifisen bioaffiniteetti-reaktion tulos käyttäen leimatun bioaffiniteettikomponentin määrittämiseen tunnistetulta mikropartikkelilta fluoresoivaa lantanidikelaattileimaa, jolloin kuitenkin käytetään eri lantanidia kuin tunnistusmittauksessa. Multipara-25 metrimäärityksissä käytetään kiintokantajina partikkeita, joiden halkaisija on < 1 mm.
Mikropartikkelien luokitukseen käytettävä leima tai käytettävät leimat voidaan liittää mikropartikkeleihin niiden valmistusprosessin yhteydessä esimerkiksi käyttäen kopoly-30 merisaatiota. Vaihtoehtoisesti voidaan leima/leimat kemiallisesti liittää valmiiden mikropartikkeleiden pintaan.
Keksintö kuvataan tarkemmin seuraavin ei-rajoittavin esimerkein .
8 93781
Esimerkki 1
Verinäytteen tyrotropiinin (TSH), tytoksiinin (T3), vapaan tyroksiinin (vapaa T4) ja tyroglobuliinin (TG) pitoisuuksien samanaikainen määrittäminen 5 Tyypillisesti multiparametrimääritystä voisi käyttää ihmisen kilpirauhasen toiminnan määrittämiseksi, jolloin samanaikaisesti mitataan esim. verinäytteestä tyrotropiinin (TSH), tytoksiinin (T3), vapaan tyroksiinin (vapaa T4) ja tyroglobuliinin (TG) pitoisuudet. Kyseisessä esimerkki-10 tapauksessa käytetään neljää kooltaan ja ominaisuuksiltaan identtistä partikkeliluokkaa, jotka on leimattu partikkeli-luokkien tunnistamiseksi eri terbiumkelaattipitoisuuksilla (1 x Tb, TSH-määritys; 5 x Tb, T3-määritys; 10 x Tb, vapaa T4-määritys; ja 15 15 x Tb, TG-määritys). Tuotantovaiheessa partikkeliluokat pidetään erillisinä, kunnes niiden on todettu toimivan kyseisissä määrityksissä, jolloin ne sekoitetaan multiparametrimääritystä varten. Määrityksistä TSH ja TG ovat non-kompetitiivisia ja T3 sekä vapaa T4 ovat kompetitiivisia. 1 20 x Tb-partikkelit on pinnoitettu monoklonaalisella TSH-spesifisellä vasta-aineella, 5 x Tb-partikkelit on pinnoitettu anti-T3-vasta-aineella, 10 x Tb-partikkelit on pinnoitettu antiT4-vasta-aineella ja 15 x Tb-partikkelit on pinnoitettu monoklonaalisella TG-25 spesifisellä vasta-aineella. Multiparametrimäärityksessä käytetään seuraavia fluoresoivalla Eu-kelaatilla leimattuja bioaffiniteettikomponentteja: Eu-leimattu monoklonaalinen TSH-spesifinen vasta-aine, Eu-leimattu T3-johdannainen, Eu-leimattu T4-analogi sekä Eu-leimattu monoklonaalinen TG-30 spesifinen vasta-aine. Multiparametrimäärityksessä partik-keliluokkaseos, näyte ja Eu-kelaatilla leimatut komponentit reagoivat samanaikaisesti, jolloin määritys on yksivaiheinen. Inkubaatiovaiheen jälkeen partikkeliluokat tunnistetaan niiden Tb-kelaattipitoisuuden perusteella ja yksit-35 täisten tunnistettujen partikkeleiden Eu-pitoisuus mitataan. Sekä tunnistus- että mittausvaiheessa käytetään aika- 9 93781 erotteista fluoresenssia. Mitatuista Eu-pitoisuuksista lasketaan kunkin mitattavan analyytin (TSH, T3, vapaa T4 ja TG) pitoisuus. Aika-erotteisessa fluoresenssimittauksessa käytetään joko virtaussytomeria, aika-erotteista mikro-5 skooppia tai aika-erotteista mikrofluorometriä tai muita aika-erotteiseen teknologiaan perustuvia mittalaitteita (US 5,028,545; Xu Y.Y. et ai., Clin. Chem. 38/10, 2038 - 2043 (1992); Seveus L et ai., Cytometry 13: 329 - 338 (1992)).
Esimerkki 2 10 Useampien mutaatioiden samanaikainen osoittaminen
Multiparametrimääritystä voidaan käyttää perinnöllisen sairauden osoittamiseen, jolloin geenitasolla useita sairauteen liittyviä mutaatioita osoitetaan samanaikaisesti. Esimerkiksi Duchenne lihasdystrofiän (DMD) osoittamiseksi 15 täytyy geenissä tarkkaan identifioida yhdeksän eri deletio-mahdollisuutta, jotka kaikki liittyvät kyseiseen sairauteen. Multiparametrimääritys toteutetaan seuraavasti: tutkimuksen kohteena oleva geenialue monistetaan esimerkiksi PCR-menetelmällä (PCR = polymerase chain reaction eli 20 polymeraasiketjureaktio), jonka jälkeen käytetään yhdeksän kooltaan ja ominaisuuksiltaan identtistä partikkeliluokkaa, jotka ovat tunnistettavissa toinen toisistaan sisältämänsä fluoresoivan Tb-kelaatin pitoisuuksina (lx, 2x, 4x, 8x, 16x, 32x, 64x, 128x, 256xTb). Tuotantovaiheessa jokaisen 25 partikkeliluokan pintaan immobilisoidaan nukleiinihappo-koetin (bioaffiniteettikomponentti), joka spesifisesti tunnistaa yhden mainituista yhdeksästä deletioista. Multiparametrimääritystä varten valmistetaan partikkeliluokista seos, joka sisältää kaikki yhdeksän partikkeliluokkaa, 30 joilla DMD:n aiheuttamat mutaatiot voidaan osoittaa. Itse määrityksessä tarvitaan kyseinen partikkeliseos, näyte sekä yhdeksän eri nukleiinihappokoetinta, jotka kaikki on leimattu fluoresoivalla Eu-kelaatilla. Inkubaatiovaiheen jälkeen yksittäisten partikkeleiden luokka todetaan niiden 35 Tb-fluoresenssi-intensiteetin perusteella ja yksittäisten 10 93781 partikkeleiden Eu-pitoisuus mitataan.
Multiparametrimäärityksessä on täten kaikki tunnetut DMD:en liittyvät yhdeksän mutaatiota todennettavissa. Aika-erot-teiset fluoresenssimittaukset tehdään joko virtaussytomet-5 rillä, aika-erotteisella fluoresenssimikroskoopilla tai mikrofluorometrillä (US 5,028,545; Xu Y.Y. et ai., Clin. Chem. 38/10, 2038 - 2043 (1992); Seveus L et ai., Cytometry 13: 329 - 338 (1992)) .
Alan ammattimiehelle on selvää, että keksinnön erilaiset 10 sovellutusmuodot voivat vaihdella jäljempänä esitettävien patenttivaatimusten puitteissa.
Claims (7)
1. Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä, jossa käytetään eri luokkiin jaettuja mikropartikkeleita, jolloin eri luokat edustavat eri analyytteja, jossa eri luokkiin kuuluvat mikropartikkelit on leimattu fluoresoivalla ai- 5 neella (1) ja jossa eri luokkiin kuuluvat mikropartikkelit on päällystetty eri analyyttejä sitovilla bioaffiniteetti-komponenteilla A, jossa - sekoitetaan eri luokkiin kuuluvat mikropartikkelit ja lisätään analysoitava näyte seokseen, ja lisätään seokseen 10 fluoresoivalla aineella (2) leimatut bioaffiniteettikom-ponentit B joko heti tai analyyttimolekyylin ja bioaf f initeettikomponentti A:n välisen reaktion jälkeen, - aktivoidaan fluoresoivat aineet (1, 2) ja kvantitoidaan 15 fluoresenssiemissiot mikropartikkeliluokan tunnistamiseksi ja eri analyyttimäärien mittaamiseksi mittaamalla fluo-resenssiemissio erikseen jokaisesta mikropartikkelista tunnettu siitä, että - mikropartikkelit ja bioaffiniteettikomponentit B on 20 leimattu erilaisilla pitkäikäistä fluoresenssia aiheuttavilla aineilla (1, 2).
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että fluoresoiva aine (1) on korvattu kahdella tai useammalla pitkäikäistä fluoresenssia 25 aiheuttavilla aineilla (la, Ib...) mikropartikkelin luokan määrittämiseksi siten, että eri aineet (la, Ib...) esiintyvät samassa mikropartikkelissa tai eri mikropartikkeleissa.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä 30 tunnettu siitä, että ainakin yksi pitkäikäistä fluoresenssia aiheuttavista aineista (1, la, Ib...) esiintyy useammissa pitoisuuksissa mikropartikkeleissa. 93781
4. Patenttivaatimuksen 1, 2 tai 3 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että mikropartikkelit on lisäksi leimattu lyhytikäistä fluoresenssia aiheuttavalla aineella (3), joka voi esiintyä samoissa mikropartikkeleissa, jotka 5 on leimattu yhdellä tai useammalla pitkäikäistä fluoresenssia aiheuttavalla aineella (1, la, Ib...) tai eri mikropartikkeleissa .
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että lyhytikäistä fluoresenssia 10 aiheuttavaa ainetta käytetään eri pitoisuuksia.
6. Jonkin patenttivaatimuksista 1-5 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että pitkäikäistä fluoresenssia aiheuttavat aineet (1, 2) ovat Eu-, Tb-, Sm- tai Dy-kelaat- 15 teja.
7. Jonkin patenttivaatimuksista 1-6 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että mikropartikkeleiden halkaisija on alle 1 mm. il 93781
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI931198A FI93781C (fi) | 1993-03-18 | 1993-03-18 | Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä |
| EP19940850024 EP0617286B1 (en) | 1993-03-18 | 1994-02-16 | Biospecific solid phase carrier |
| DE1994622210 DE69422210T2 (de) | 1993-03-18 | 1994-02-16 | Biospezifischer Festphasenträger |
| ES94850024T ES2139728T3 (es) | 1993-03-18 | 1994-02-16 | Soporte bioespecifico en fase solida. |
| JP4704294A JPH06317593A (ja) | 1993-03-18 | 1994-03-17 | 生体特異的固相担体を使用する検定法 |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI931198 | 1993-03-18 | ||
| FI931198A FI93781C (fi) | 1993-03-18 | 1993-03-18 | Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI931198A0 FI931198A0 (fi) | 1993-03-18 |
| FI931198A FI931198A (fi) | 1994-09-19 |
| FI93781B FI93781B (fi) | 1995-02-15 |
| FI93781C true FI93781C (fi) | 1995-05-26 |
Family
ID=8537581
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI931198A FI93781C (fi) | 1993-03-18 | 1993-03-18 | Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0617286B1 (fi) |
| JP (1) | JPH06317593A (fi) |
| DE (1) | DE69422210T2 (fi) |
| ES (1) | ES2139728T3 (fi) |
| FI (1) | FI93781C (fi) |
Families Citing this family (80)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6716394B2 (en) | 1998-08-11 | 2004-04-06 | Caliper Technologies Corp. | DNA sequencing using multiple fluorescent labels being distinguishable by their decay times |
| AU5479599A (en) * | 1998-08-11 | 2000-03-06 | Caliper Technologies Corporation | Methods and systems for sequencing dna by distinguishing the decay times of fluorescent probes |
| WO2001035078A1 (en) * | 1999-11-09 | 2001-05-17 | Raytheon Company | Method and apparatus for performing cell analysis based on simultaneous multiple marker emissions from neoplasia (casmmen) |
| EP1282818A2 (en) * | 2000-03-31 | 2003-02-12 | Glaxo Group Limited | Method and reagents for investigating functional molecular interactions |
| AU2002230842A1 (en) | 2000-10-30 | 2002-05-15 | The General Hospital Corporation | Optical methods and systems for tissue analysis |
| US9295391B1 (en) | 2000-11-10 | 2016-03-29 | The General Hospital Corporation | Spectrally encoded miniature endoscopic imaging probe |
| GB2408797B (en) | 2001-05-01 | 2006-09-20 | Gen Hospital Corp | Method and apparatus for determination of atherosclerotic plaque type by measurement of tissue optical properties |
| US7355716B2 (en) | 2002-01-24 | 2008-04-08 | The General Hospital Corporation | Apparatus and method for ranging and noise reduction of low coherence interferometry LCI and optical coherence tomography OCT signals by parallel detection of spectral bands |
| US7643153B2 (en) | 2003-01-24 | 2010-01-05 | The General Hospital Corporation | Apparatus and method for ranging and noise reduction of low coherence interferometry LCI and optical coherence tomography OCT signals by parallel detection of spectral bands |
| CA2519937C (en) | 2003-03-31 | 2012-11-20 | Guillermo J. Tearney | Speckle reduction in optical coherence tomography by path length encoded angular compounding |
| JP2007526620A (ja) | 2003-06-06 | 2007-09-13 | ザ・ジェネラル・ホスピタル・コーポレイション | 波長同調発信源装置及びその方法 |
| EP2270448B1 (en) | 2003-10-27 | 2020-03-18 | The General Hospital Corporation | Method and apparatus for performing optical imaging using frequency-domain interferometry |
| KR101239250B1 (ko) | 2004-05-29 | 2013-03-05 | 더 제너럴 하스피탈 코포레이션 | 광간섭 단층촬영 화상 진단에서 반사층을 이용한 색 분산보상을 위한 프로세스, 시스템 및 소프트웨어 배열 |
| AU2005270037B2 (en) | 2004-07-02 | 2012-02-09 | The General Hospital Corporation | Endoscopic imaging probe comprising dual clad fibre |
| US8081316B2 (en) | 2004-08-06 | 2011-12-20 | The General Hospital Corporation | Process, system and software arrangement for determining at least one location in a sample using an optical coherence tomography |
| JP5324095B2 (ja) | 2004-08-24 | 2013-10-23 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 血管セグメントを画像化する方法および装置 |
| WO2006024014A2 (en) | 2004-08-24 | 2006-03-02 | The General Hospital Corporation | Process, system and software arrangement for measuring a mechanical strain and elastic properties of a sample |
| US7365859B2 (en) | 2004-09-10 | 2008-04-29 | The General Hospital Corporation | System and method for optical coherence imaging |
| KR101257100B1 (ko) | 2004-09-29 | 2013-04-22 | 더 제너럴 하스피탈 코포레이션 | 광 간섭 영상화 시스템 및 방법 |
| WO2006058049A1 (en) | 2004-11-24 | 2006-06-01 | The General Hospital Corporation | Common-path interferometer for endoscopic oct |
| EP1816949A1 (en) | 2004-11-29 | 2007-08-15 | The General Hospital Corporation | Arrangements, devices, endoscopes, catheters and methods for performing optical imaging by simultaneously illuminating and detecting multiple points on a sample |
| EP1875436B1 (en) | 2005-04-28 | 2009-12-09 | The General Hospital Corporation | Evaluation of image features of an anatomical structure in optical coherence tomography images |
| WO2007019574A2 (en) | 2005-08-09 | 2007-02-15 | The General Hospital Corporation | Apparatus, methods and storage medium for performing polarization-based quadrature demodulation in optical coherence tomography |
| PL1937137T3 (pl) | 2005-09-29 | 2022-11-21 | General Hospital Corporation | Sposób oraz aparatura dla obrazowania optycznego za pośrednictwem kodowania spektralnego |
| US7889348B2 (en) | 2005-10-14 | 2011-02-15 | The General Hospital Corporation | Arrangements and methods for facilitating photoluminescence imaging |
| JP5680826B2 (ja) | 2006-01-10 | 2015-03-04 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | １以上のスペクトルを符号化する内視鏡技術によるデータ生成システム |
| US9087368B2 (en) | 2006-01-19 | 2015-07-21 | The General Hospital Corporation | Methods and systems for optical imaging or epithelial luminal organs by beam scanning thereof |
| WO2007084903A2 (en) | 2006-01-19 | 2007-07-26 | The General Hospital Corporation | Apparatus for obtaining information for a structure using spectrally-encoded endoscopy techniques and method for producing one or more optical arrangements |
| GB0601183D0 (en) | 2006-01-20 | 2006-03-01 | Perkinelmer Ltd | Improvements in and relating to imaging |
| JP5524487B2 (ja) | 2006-02-01 | 2014-06-18 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | コンフォーマルレーザ治療手順を用いてサンプルの少なくとも一部分に電磁放射を放射する方法及びシステム。 |
| EP2659852A3 (en) | 2006-02-01 | 2014-01-15 | The General Hospital Corporation | Apparatus for applying a plurality of electro-magnetic radiations to a sample |
| WO2007092911A2 (en) | 2006-02-08 | 2007-08-16 | The General Hospital Corporation | Methods, arrangements and systems for obtaining information associated with an anatomical sample using optical microscopy |
| JP2009527770A (ja) | 2006-02-24 | 2009-07-30 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 角度分解型のフーリエドメイン光干渉断層撮影法を遂行する方法及びシステム |
| CN101466298B (zh) | 2006-04-05 | 2011-08-31 | 通用医疗公司 | 用于样本的偏振敏感光频域成像的方法、装置和系统 |
| EP2015669A2 (en) | 2006-05-10 | 2009-01-21 | The General Hospital Corporation | Processes, arrangements and systems for providing frequency domain imaging of a sample |
| US7782464B2 (en) | 2006-05-12 | 2010-08-24 | The General Hospital Corporation | Processes, arrangements and systems for providing a fiber layer thickness map based on optical coherence tomography images |
| WO2008024948A2 (en) | 2006-08-25 | 2008-02-28 | The General Hospital Corporation | Apparatus and methods for enhancing optical coherence tomography imaging using volumetric filtering techniques |
| US8838213B2 (en) | 2006-10-19 | 2014-09-16 | The General Hospital Corporation | Apparatus and method for obtaining and providing imaging information associated with at least one portion of a sample, and effecting such portion(s) |
| JP2010517080A (ja) | 2007-01-19 | 2010-05-20 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 分散広帯域光の高速波長スキャンのための回転ディスク反射 |
| US20080206804A1 (en) * | 2007-01-19 | 2008-08-28 | The General Hospital Corporation | Arrangements and methods for multidimensional multiplexed luminescence imaging and diagnosis |
| EP2132840A2 (en) | 2007-03-23 | 2009-12-16 | The General Hospital Corporation | Methods, arrangements and apparatus for utlizing a wavelength-swept laser using angular scanning and dispersion procedures |
| US10534129B2 (en) | 2007-03-30 | 2020-01-14 | The General Hospital Corporation | System and method providing intracoronary laser speckle imaging for the detection of vulnerable plaque |
| WO2008131082A1 (en) | 2007-04-17 | 2008-10-30 | The General Hospital Corporation | Apparatus and methods for measuring vibrations using spectrally-encoded endoscopy techniques |
| US8115919B2 (en) | 2007-05-04 | 2012-02-14 | The General Hospital Corporation | Methods, arrangements and systems for obtaining information associated with a sample using optical microscopy |
| EP2173254A2 (en) | 2007-07-31 | 2010-04-14 | The General Hospital Corporation | Systems and methods for providing beam scan patterns for high speed doppler optical frequency domain imaging |
| JP5536650B2 (ja) | 2007-08-31 | 2014-07-02 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 自己干渉蛍光顕微鏡検査のためのシステムと方法、及び、それに関連するコンピュータがアクセス可能な媒体 |
| WO2009059034A1 (en) | 2007-10-30 | 2009-05-07 | The General Hospital Corporation | System and method for cladding mode detection |
| US7898656B2 (en) | 2008-04-30 | 2011-03-01 | The General Hospital Corporation | Apparatus and method for cross axis parallel spectroscopy |
| WO2009137701A2 (en) | 2008-05-07 | 2009-11-12 | The General Hospital Corporation | System, method and computer-accessible medium for tracking vessel motion during three-dimensional coronary artery microscopy |
| US8861910B2 (en) | 2008-06-20 | 2014-10-14 | The General Hospital Corporation | Fused fiber optic coupler arrangement and method for use thereof |
| EP2309923B1 (en) | 2008-07-14 | 2020-11-25 | The General Hospital Corporation | Apparatus and methods for color endoscopy |
| EP2359121A4 (en) | 2008-12-10 | 2013-08-14 | Gen Hospital Corp | SYSTEMS, APPARATUS AND METHODS FOR EXTENSION OF THE OPTICAL COHERENCE TOMOGRAPHY IMAGING DEPTH RANGE, THROUGH OPTICAL SUB-SAMPLING |
| EP2389093A4 (en) | 2009-01-20 | 2013-07-31 | Gen Hospital Corp | APPARATUS, SYSTEM AND METHOD FOR ENDOSCOPIC BIOPSY |
| WO2010085775A2 (en) | 2009-01-26 | 2010-07-29 | The General Hospital Corporation | System, method and computer-accessible medium for providing wide-field superresolution microscopy |
| WO2010105197A2 (en) | 2009-03-12 | 2010-09-16 | The General Hospital Corporation | Non-contact optical system, computer-accessible medium and method for measuring at least one mechanical property of tissue using coherent speckle techniques(s) |
| CN102469943A (zh) | 2009-07-14 | 2012-05-23 | 通用医疗公司 | 用于测量脉管内流动和压力的设备、系统和方法 |
| JP5819864B2 (ja) | 2010-03-05 | 2015-11-24 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 特定の分解能にて少なくとも１つの解剖構造の微細画像を提供するシステム、方法およびコンピュータがアクセス可能な媒体 |
| US9069130B2 (en) | 2010-05-03 | 2015-06-30 | The General Hospital Corporation | Apparatus, method and system for generating optical radiation from biological gain media |
| EP2575597B1 (en) | 2010-05-25 | 2022-05-04 | The General Hospital Corporation | Apparatus for providing optical imaging of structures and compositions |
| EP2575598A2 (en) | 2010-05-25 | 2013-04-10 | The General Hospital Corporation | Apparatus, systems, methods and computer-accessible medium for spectral analysis of optical coherence tomography images |
| JP6066901B2 (ja) | 2010-06-03 | 2017-01-25 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | １つまたは複数の管腔器官内または管腔器官にある構造を撮像するための装置およびデバイスのための方法 |
| WO2012058381A2 (en) | 2010-10-27 | 2012-05-03 | The General Hospital Corporation | Apparatus, systems and methods for measuring blood pressure within at least one vessel |
| WO2013013049A1 (en) | 2011-07-19 | 2013-01-24 | The General Hospital Corporation | Systems, methods, apparatus and computer-accessible-medium for providing polarization-mode dispersion compensation in optical coherence tomography |
| US10241028B2 (en) | 2011-08-25 | 2019-03-26 | The General Hospital Corporation | Methods, systems, arrangements and computer-accessible medium for providing micro-optical coherence tomography procedures |
| EP2769491A4 (en) | 2011-10-18 | 2015-07-22 | Gen Hospital Corp | DEVICE AND METHOD FOR PRODUCING AND / OR PROVIDING RECIRCULATING OPTICAL DELAY (DE) |
| EP2833776A4 (en) | 2012-03-30 | 2015-12-09 | Gen Hospital Corp | IMAGING SYSTEM, METHOD AND DISTAL FIXATION FOR MULTIDIRECTIONAL FIELD ENDOSCOPY |
| US11490797B2 (en) | 2012-05-21 | 2022-11-08 | The General Hospital Corporation | Apparatus, device and method for capsule microscopy |
| EP2948758B1 (en) | 2013-01-28 | 2024-03-13 | The General Hospital Corporation | Apparatus for providing diffuse spectroscopy co-registered with optical frequency domain imaging |
| WO2014120791A1 (en) | 2013-01-29 | 2014-08-07 | The General Hospital Corporation | Apparatus, systems and methods for providing information regarding the aortic valve |
| US11179028B2 (en) | 2013-02-01 | 2021-11-23 | The General Hospital Corporation | Objective lens arrangement for confocal endomicroscopy |
| JP6378311B2 (ja) | 2013-03-15 | 2018-08-22 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 物体を特徴付ける方法とシステム |
| EP2997354A4 (en) | 2013-05-13 | 2017-01-18 | The General Hospital Corporation | Detecting self-interefering fluorescence phase and amplitude |
| WO2015010133A1 (en) | 2013-07-19 | 2015-01-22 | The General Hospital Corporation | Determining eye motion by imaging retina. with feedback |
| EP3692887B1 (en) | 2013-07-19 | 2024-03-06 | The General Hospital Corporation | Imaging apparatus which utilizes multidirectional field of view endoscopy |
| EP3910282B1 (en) | 2013-07-26 | 2024-01-17 | The General Hospital Corporation | Method of providing a laser radiation with a laser arrangement utilizing optical dispersion for applications in fourier-domain optical coherence tomography |
| WO2015105870A1 (en) | 2014-01-08 | 2015-07-16 | The General Hospital Corporation | Method and apparatus for microscopic imaging |
| US10736494B2 (en) | 2014-01-31 | 2020-08-11 | The General Hospital Corporation | System and method for facilitating manual and/or automatic volumetric imaging with real-time tension or force feedback using a tethered imaging device |
| US10228556B2 (en) | 2014-04-04 | 2019-03-12 | The General Hospital Corporation | Apparatus and method for controlling propagation and/or transmission of electromagnetic radiation in flexible waveguide(s) |
| US10912462B2 (en) | 2014-07-25 | 2021-02-09 | The General Hospital Corporation | Apparatus, devices and methods for in vivo imaging and diagnosis |
| CN109313198B (zh) | 2016-06-09 | 2022-07-15 | 雷度米特图尔库公司 | 用于结合测定的背景阻断剂 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE454781B (sv) * | 1986-10-17 | 1988-05-30 | Wallac Oy | Hybridiseringsforfarande for detektion av polynukleotidsekvens |
| SE458968B (sv) * | 1987-06-16 | 1989-05-22 | Wallac Oy | Biospecifikt analysfoerfarande foer flera analyter i vilket ingaar partikelraekning och maerkning med fluorescerande maerksubstanser |
| WO1992012255A1 (en) * | 1990-12-28 | 1992-07-23 | Abbott Laboratories | Simultaneous determination of multiple analytes using a time-resolved heterogeneous chemiluminescence assay |
-
1993
- 1993-03-18 FI FI931198A patent/FI93781C/fi active
-
1994
- 1994-02-16 ES ES94850024T patent/ES2139728T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-16 DE DE1994622210 patent/DE69422210T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-02-16 EP EP19940850024 patent/EP0617286B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-03-17 JP JP4704294A patent/JPH06317593A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0617286A3 (en) | 1995-07-26 |
| FI931198A0 (fi) | 1993-03-18 |
| JPH06317593A (ja) | 1994-11-15 |
| EP0617286B1 (en) | 1999-12-22 |
| FI93781B (fi) | 1995-02-15 |
| DE69422210D1 (de) | 2000-01-27 |
| EP0617286A2 (en) | 1994-09-28 |
| DE69422210T2 (de) | 2000-04-20 |
| ES2139728T3 (es) | 2000-02-16 |
| FI931198A (fi) | 1994-09-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI93781C (fi) | Biospesifinen multiparametrinen määritysmenetelmä | |
| US5656207A (en) | Detecting or quantifying multiple analytes using labelling techniques | |
| EP0121442B1 (en) | Fluorescent multiparameter particle analysis | |
| CN102735833B (zh) | 甲状腺过氧化物酶抗体均相发光免疫分析试剂盒及其检测方法 | |
| JP3553601B2 (ja) | 検定方法 | |
| JP3021038B2 (ja) | 標識技術を用いた複数分析物の検出または定量 | |
| US8956823B2 (en) | Anti-antibody reagent | |
| JPS5942454A (ja) | 液体中のハプテン又は抗原を分析するための均一系免疫分析方法及び試薬 | |
| SE454115B (sv) | Homogenfasanalys med lantanidkelat som merksubstans | |
| EP1448990B1 (en) | Particle-based ligand assay with extended dynamic range | |
| JP2007101559A (ja) | 多種検定用の標準希釈液 | |
| JP2005502871A (ja) | レーザ励起蛍光検出毛管電気泳動法を利用する粒子均一アッセイ法 | |
| JPH0319948B2 (fi) | ||
| FI111194B (fi) | Kaksikohtainen immuunitesti vasta-aineelle käyttäen kemiluminisoivaa leimaa ja biotiiniin sidottua ligandia | |
| CA2422856C (en) | Methods and kits for decreasing interferences of assay samples containing plasma or serum in specific binding assays by using a large polycation | |
| CN1924581A (zh) | 前列腺特异性抗原化学发光定量检测试剂盒 | |
| CN110618280A (zh) | 一种促甲状腺素测定试剂盒及其制备方法 | |
| Woodhead et al. | Magic Lite design and development | |
| Soini | Biospecific assays with time-resolved fluorescence detection | |
| US6423549B1 (en) | Phycoerythrin labeled thyronine analogues and assays using labeled analogues | |
| WO1998054578A1 (en) | Chemiluminescent hemoglobin assay | |
| CN1209615C (zh) | 测定生物活性物质的目视荧光免疫分析法 | |
| JPS6281566A (ja) | 微粒子の螢光強度測定による定量方法 | |
| CN117169519B (zh) | 用于检测样本中tt3和/或tt4的解离剂和试剂盒 | |
| RU2710262C1 (ru) | Способ проведения биологического микроанализа |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application |