FI93730C - Menetelmä bentso(kalkogeno)/4,3,2-cd/indatsolien valmistamiseksi - Google Patents

Description

93730

Menetelmä bentso(kalkogeno)[4,3,2-cd]indatsolien valmistamiseksi Förfarande för framställning av benso(kalkogeno)[4,3,2-cd]indazoler Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet on kuvattu US-patentis-sa 4,604,390, joka liitetään tähän selitykseen viitteenä. Julkaisussa on esitetty myös menetelmä yhdisteiden valmistamiseksi.

Yhdisteet ovat käyttökelpoisia antibakteerisina aineina ja fungisideinä. Yhdisteillä on myös antineoplastinen aktiivisuus, joka ilmenee in vitro- ja in vivo-aktiivisuutena leukemiaa vastaan.

Tämä keksintö koskee parannettuja menetelmiä substituoitu-jen bentso(kalkogeno)[4,3,2-cd]indatsolien valmistamiseksi . Tämä keksintö soveltuu paremmin suuressa mittakaavassa tapahtuvaan tuotantoon, sillä saadaan suuremmat saannot, puhtaampi tuote ja suojaryhmän poistaminen on helpompaa. Tämän keksinnön mukaiset kalkogeenit sisältävät happi-, rikki- tai seleeniatomin.

Yksi synteesi on yhdisteille, joilla on kaava 1 R /Rl

N-N—D—N

R4AjAxJy Λ dj

R, HND' “N

XR

R2 jossa X on happi, rikki tai seleeni, D ja D' voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat suora tai haarautunut alkyleeniryhmä, jossa 2-5 hiiliatomia, ja R2 voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat alkyyliryhmä, jossa 2-8 hiiliatomia, jotka voivat olla substituoidut hydrok- 2 93730 silla, R3, R4, R5 ja Rg voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat vety tai hydroksi, tai näiden farmaseuttisesti hyväksyttävälle suolalle. Menetelmä on seuraava: Yhdisteet, joilla on kaava 1

A

Rg N N —D—N

χόυ 4 I T / 1

R0 HND’ “N

XR

R2 jossa R]_, R2, R3, R4, R5, Rg, D, D' ja X tarkoittavat samaa kuin edellä, valmistetaan (a) saattamalla alkoksi-substituoitu yhdiste, jonka kaava 2 on /R1

N-N-D-N

\ (2) (zo)—f- Tr T η n J-S. JIL SS nh2 jossa Z on 1-4 hiiliatomia sisältävä alkyyli, n on kokonaisluku 1-4 ja Ri, R2, X ja D tarkoittavat samaa kuin edellä, reagoimaan booritribromidin kanssa sopivassa orgaanisessa liuottimessa, sen jälkeen metanolin kanssa boo-rikompleksin hajottamiseksi ja hydroksyloidun yhdisteen saamiseksi, jonka kaava 3 on 3 93730 /Rl

N-N-D-N

_ H 1 \r2 (3) (Hoi"~uixjy NH2 jossa X, D, Ri, R2 ja n tarkoittavat samaa kuin edellä, (b) saattamalla kaavan 3 mukainen yhdiste reagoimaan N-asyyli-imidatsolin kanssa, joka johdetaan 1,1'-karbonyy-lidi-imidatsolin ja [(1,1-dimetyylietoksiJkarbonyyli]ami-nohapon reaktiosta, BOC-suojatun aminohappoyhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava 4 on /Rl

N-N-D—N

^R2 (4) (Ho,n-tT n

O

N H CQNHBOC

jossa X, Ri, R2, D ja n tarkoittavat samaa kuin edellä ja Q on suora tai haarautunut alkyleeniryhmä, jossa on 1-4 hiiliatomia, (c) pelkistämällä kaavan 4 mukainen yhdisteen karbo-nyyliosa vastaavaksi metyleenin sisältäväksi yhdisteeksi 5 /1 N N — D— (H°) —*2 <5>

NHCHjQNHBOC

(d) eristämällä kaavan 5 mukainen yhdiste eristetään 4 93730 pikakromatografisesti , (e) poistamalla kaavan 5 mukaisesta yhdisteestä BOC-suojaryhmä reaktiolla hapon kanssa edellä esitetyn tämän keksinnön kaavan 1 mukaisen yhdisteen valmistamiseksi.

Toinen synteesi kaavan 1 mukaisille yhdisteille, jolla saadaan erittäin puhdasta tuotetta, on menetelmä substitu-oidun bentso(kalkogeno)[4,3,2-cd]indatsolin valmistamiseksi, jonka kaava 1 on

A

N-N — D— N

r5 \R2 /Rl u>

R, HMD' -N

XR

R2 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, jossa kaavassa X on happi, rikki tai seleeni, D ja D' voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat suora tai haarautunut alkyleeniketju, jossa on 2-5 hiiliatomia, Rj ja R2 voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat vety tai alkyyliryhmä, jossa on 2-8 hiiliatomia, jotka voivat olla substituoituja hydroksilla, ja R3, R4, R5 ja Rg voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat vety tai hyd-roksi, jossa menetelmässä (a) alkyyli-substituoitu kaavan 2 mukainen yhdiste 5 93730

A

N-N-D-N^ ίΖ0)ηΗ—"ΙιΥί *2 X y (2) NH2 jossa X, Ri, R2 ja D tarkoittavat samaa kuin edellä, Z on 1-4 hiiliatomia sisältävä alkyyli ja n on kokonaisluku 1-4, saatetaan reagoimaan booritribromidin ylimäärän kanssa sopivassa orgaanisessa liuottimessa, sen jälkeen metano-lin kanssa hydroksyloidun yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava 3 on /*l

N-N-D-N

iHoi-^VyS "2 <3> NH2 jossa X, n, D, Ri ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä, (b) kaavan 3 mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan N-asyyli-imidatsolin kanssa, joka johdetaan 1,1'-karbonyyli-di-imidatsolin ja N-trityyliaminohapon, kuten -glysiinin, alaniinin, voihapon reaktiosta N,N-dimetyyliformamidissa vastaavan trityyli-suojatun aminohappoyhdisteen saamiseksi, jonka kaava (4Ά) on 93730 6 /R1

N-N—D—N

^>vilsjL

(ho,"~CXXj <4a» NHCQNHTr jossa X, Ri, R2, D ja n tarkoittavat samaa kuin edellä, Q on suora tai haarautunut alkyleeniryhmä, jossa on 1-4 hiiliatomia, ja Tr on 0(05115)3, (c) saostetaan edellä esitetyn kaavan 4A mukaisen yhdisteen suola ja otetaan talteen kaavan 4A mukainen yhdiste , (d) pelkistetään kaavan 4A mukaisen yhdisteen karbo-nyyliosa vastaavan metyleenin sisältävän yhdisteen saamiseksi, jonka kaava 5A on /Ri N-N-D-N^ <ηο);ΗΟΧΟ 2 <s*> NHCHjQNHTr (e) puhdistetaan kaavan 5A mukainen yhdiste kiteyttämällä uudestaan, (f) poistetaan trityyli-suojaryhmä kaavan 5A mukaisesta yhdisteestä reaktiolla hapon kanssa tämän keksinnön edellä esitetyn kaavan 1 mukaisen yhdisteen valmistamiseksi .

7 93730 Tämän keksinnön mukaisen menetelmän edullisia yhdisteitä ovat: 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino)-etyyli]-2H- [l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-8-olin trihydro-kloridi, 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino)-etyyli ]-2H- [l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-9-olin tri-hydrokloridi, N-[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[l]bent-sotiopyranol4,3, 2-cd]indatsoli-5-yyli]—2—[(trifenyylime-tyyli)aminoJasetamidi, 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-5-[2-(trifenyylimetyyli) aminoetyyli]amino-2H-[l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol--8-oli, N-12-[2-(dietyyliamino)etyyli]-9-hydroksi-2H-[l]bent-sotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]-2-[(trifenyylimetyy-li)amino]asetamidi ja 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-5-[2-(trifenyylimetyyli) aminoetyyli]amino-2H-[l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol- 9-oli.

Seuraavat kaaviokuviot osoittavat kuvaavassa tarkoituksessa vaihtoehtoiset valmistusmenetelmät. Vaiheet A, B ja C kuvaavat menetelmää, jossa primäärinen amiini, yhdiste 1, alkyloidaan kuten US-patentissa 4,604,390 esitetään.

Tämä vaihtoehto vaatii kovemmat olosuhteet ja lopullisen tuotteen saanto ja puhtaus on alhaisemmat kuin tämän keksinnön mukaisesti saadulla tuotteella. Vaiheet D, E ja F kuvaavat menetelmää, jossa yhdiste asyloidaan, jonka jälkeen poistetaan samanaikaisesti kaksi suojaryhmää alalla tunnetulla tavalla. Tällä menetelmällä ei saavuteta samaa puhtautta kuin tämän keksinnön mukaisella menetelmällä. Vaiheet G, H, I ja J kuvaavat yhtä tämän keksinnön mukaista menetelmää. Vaiheet K, L, M, N ja O kuvaavat tämän 8 93730 keksinnön toista menetelmää, jossa on uudelleenkiteytys-vaihe, jolla saadaan erittäin puhdasta tuotetta. Menetelmä on erityisen sopiva suuressa mittakaavassa tapahtuvaan tuotantoon, koska se on tehokas ja taloudellinen. Trityy-liryhmän käytöllä saadaan pysyvät, kiteiset ja korkealla sulavat välituotteet, jotka voidaan puhdistaa kiteyttämällä uudestaan orgaanisesta liuottimista (vaiheet (4) ja (5)), mikä sopii suuren mittakaavan tuotantoon.

9 93730 -: x

m J0 ,. m O

n * y in «β (N ^ 2 u x

ο <-» ® - z -H

·— w “ Z o* H

Z * Z· (N 1— £~t n n n — <n ~ ~ * N B -id rsi «Ί O j5 u y aT* * _p= U υ /—v —’ ·9 y / > N U /ί λ x >- //W 33 *j Z, // \ s —_u \ z Z—(/ 7—2 o z—(' T-* / I \—/ 0=5

LrC -=^ =MT — Lr> O Os B X .

/ 'V

-- 7 -- -: v -- I

bT / »£ y “v, « Jf· *- «Γ7 2" 1 2 „ 5 l b" - -Γ* Ίν "

r* «Μ Ο _Γ* o O

ts" Ϊ-Ο-1 «-ο·* t-ö-* Γη. LrC -*-* Lr> 2=1 Β ^ ^ ^ / «| Ο Ο °«ο * π r> χ 33 au υ ο \ / «A. I -8-

W * Ζ IN

Ζ ΓΜ Μ «— ΟΙ — — οι

— fS ΟΙ X

n X μ Ο β υ υ f.—-ν — — Ανλ s ζ—(' 7—* ζ—(' χ)—ζ ι \_/ LHTmi^ Q - λ Ο

ο X

m a u ίο 93730

Kaavion vaiheessa G poistetaan metoksisuojaryhmä kaavan 1 mukaisesta yhdisteestä N-N(CH2)2N(C2H5)2 NH2 Tämä poistaminen tapahtuu saattamalla yhdiste 1 reagoimaan booritribromin ylimäärän kanssa sopivassa liuottimessa. Ylimäärä on ainakin yksi molaarinen ylimäärä. Sen jälkeen yhdiste saatetaan reagoimaan metanolin kanssa boorikomp-leksin murtamiseksi ja vastaavan hydroksi-substituoidun yhdisteen muodostamiseksi, jonka kaava 7 on N-I|,iCH2)2NlC2H5,2 (7) NH2

Booritribromidin ja yhdisteen 1 reaktio sopivassa liuottimessa tapahtuu missä tahansa lukuisista reaktio-inerteistä liuottimista, kuten 1,2-dikloorietaanissa, kloroformissa tai dikloorimetaanissa. Edullinen inertti liuotin on 1,2-dikloorietaani. Reaktio tapahtuu parhaiten kun boori tribromidin ja yhdisteen 1 moolisuhde on 6:1.

Reaktioseosta kuumennetaan 40-55°C:ssa 12-22 tunnin ajan. Mieluimmin seosta kuumennetaan noin 45-50°C:ssa 15-18 tuntia. Lisätään ylimäärin metanolia edellä saatuun seokseen ja muodostunutta seosta keitetään palautus jäähdyttäen 11 93730 3-8 tuntia. Mieluimmin palautus jäähdyttäen tapahtuvaa keittämistä jatketaan noin 5i tunnin ajan. Yhdiste otetaan talteen yhdisteen 7 hydrobromidisuolana. Mieluimmin alkok-si-substituoitu yhdiste on 5-amino-N,N-dietyyli-8-metoksi-2H-[l]bent-so(kalkogeno)[4, 3,2-cd]indatsoli-2-etaaniamii-ni.

Kaavion vaiheessa H yhdisteen 7 primäärinen amiini muutetaan vastaavaksi BOC-suojatuksi amidiksi, yhdisteeksi 8. N-asyyli-imidatsolin, joka johdetaan 1,1'-karbonyylidi-imidatsolin ja [(1,1-dimetyylietoksi)karbonyyliJglysiinin reaktiosta Ν,Ν-dimetyyliasetamidissa, liuos käsitellään yhdisteen 7 bromivetysuolalla yhdisteen 8 muodostamiseksi. Reaktio di-imidatsolin ja glysiinin välillä suoritetaan moolisuhteen ollessa 1:1 inertissä liuottimessa, kuten Ν,Ν-dimetyyliform-amidissa tai Ν,Ν-dimetyyliasetamidissa suunnilleen huoneen lämpötilassa noin puolen tunnin ajan. Sen jälkeen lisätään yhdiste 7 edellä saatuun seokseen ja reaktiota jatketaan suunnilleen huoneen lämpötilassa 15-25 tunnin ajan. Mieluimmin reaktioaika on 20-22 tuntia.

Kaavion vaiheessa I yhdisteen 8 karbonyyliryhmä pelkistetään yhdisteen 10 vastaavaksi metyleeniryhmäksi. Yhdiste 9 pelkistetään reaktiolla natrium-bis(2-metoksletoksi)alu-minium-hydridin kanssa tolueenissa lämpötilan ollessa 60-90°C. Mieluimmin lämpötila on noin 70-85°C. Yhdiste 10 eristetään pikakromatografisesti piihappogeelipylväässä. Seuraava eluointi suoritetaan liuoksella, jossa dikloori-metaanin ja metanolin suhde on noin 9:1.

Kaavion vaiheessa J yhdisteen 9 BOC-suojaryhmä muutetaan vapaaksi aminopääksi vastaavan yhdisteen 4 valmistamiseksi. Yhdiste 9 liuotetaan polaariseen inerttiin liuotti-meen, kuten metanoliin tai etanoliin. Mieluimmin käytetään absoluuttista etanolia. Tämä seos jäähdytetään noin jään i2 93730 lämpötilaan ja käsitellään toistuvasti vedettömällä kloorivedyllä. Saadaan kaavan 1 mukaiset yhdisteet. Mieluimmin yhdiste, joka on 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyli-amino)etyyli]-2H- bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-8-olin trihydrokloridi.

1 3 93730

Kaavio II

j—m ch2 ) 2n i c2h5 )2 » —»,ch2)2»(c2h5)2 -2HC1 XTjij '2ΗΒΓ ch3o s

NH2 L

Π—*»<ch J n(C »)_ II I 2 5 2 N-N(CH2)2N(C2H5)2

-± » ΓΐίίίΊ M

ΛΛ Λ sJ -► f if Y ί mcCCH2NHC,Wi nicoc»2HHCICeHs)2 10a -H02CCH21)HC{C6H5) 10 N-mcH2,2mcA,2 «-..o.,..»-,, -!u rVvs o ^jll hoAxsAJ AA,XJ '3HC1

[ HO

HN(CH2)2NHC(C6H5)3 HN{CH ) NH- 11 Λ 4 14 93730

Edellä esitetyssä kaaviossa II, kaavion vaihe K, kuten kaavion I vaihe G kuvaavat metoksisuojaryhmän poistamista kaavan 1 mukaisesta yhdisteestä N-N(CH2)2N(C2H5)2 XXju CH3(r nh2 Tämä poistaminen tapahtuu saattamalla yhdiste 1 reagoimaan booritribromidin ylimäärän kanssa sopivassa liuottimessa. Ylimäärä on ainakin yksi molaarinen ylimäärä. Sen jälkeen yhdiste saatetaan reagoimaan metanolin kanssa boorikomp-leksin murtamiseksi ja vastaavan hydroksi-substituoidun yhdisteen 7 muodostamiseksi N-N(CH2)2N(C2H5)2

Il (7) NH2

Reaktio booritribromidin ja yhdisteen 1 välillä sopivassa liuottimessa tapahtuu missä tahansa lukuisista reaktio-inerteistä liuottimesta, kuten 1,2-dikloorietaanissa, kloroformissa tai dikloorimetaanissa. Edullinen inertti liuotin on dikloorimetaani ja 1,2-dikloorietaani suhteessa noin 1:1. Reaktio tapahtuu parhaiten, kun booritribromidin moolisuhde yhdisteeseen 1 on noin 3:1 - 5:1.

Reaktioseosta kuumennetaan noin 40-85eC:ssa 12-20 tuntia. Mieluimmin seosta kuumennetaan noin 50-65eC:ssa noin 15-18 15 93730 tuntia. Lisätään ylimäärin metanolia edellä saatuun seokseen ja muodostunutta seosta keitetään palautus jäähdyttäen 2-8 tuntia. Mieluimmin palautus jäähdyttäen tapahtuvaa keittämistä jatketaan noin 4-5i tunnin ajan. Yhdiste otetaan talteen yhdisteen 7 hydrobromidisuolana. Mieluimmin alkoksi-substituoitu yhdiste on 5-amino-N,N-dietyyli-8-me-toksi-2H-[llbent-so(kalkogeno)[4,3,2-cd]indatsoli-2-etaa-niamiini.

Kaavion vaiheissa L ja M yhdisteen 10 primäärinen amiini muutetaan vastaavaksi yhdisteen 10 mukaiseksi trityylisuo-jatuksi amidiksi. N-asyyli-imidatsolin liuos, joka saadaan 1,1'-karbonyylidi-imidatsolin ja N-trityyliglysiinin reaktiosta Ν,Ν-dimetyyliformamidissa, saatetaan reagoimaan yhdisteen 7 kanssa yhdisteen 10a muodostamiseksi. Reaktio di-imidatsolin ja N-trityyliglysiinin välillä tapahtuu moolisuhteessa noin 1:1 suunnilleen huoneen lämpötilassa noin 2 tunnin ajan. Sen jälkeen yhdiste 7 lisätään seokseen ja reaktiota jatketaan huoneen lämpötilassa 16-24 tuntia. Mieluimmin N-asyyli-imidatsolin suhde aminoryhmään on 1:2. Reaktioaika on mieluimmin noin 18 tuntia. Tuote 10a käsitellään trietyyliamiinin ainakin kahden ja mieluimmin 5-10 moolin ylimäärällä metanolin ja etyyliasetaatin 6:l-seoksessa yhdisteen 10 valmistamiseksi.

Kaavion vaiheessa N yhdisteen 10 karbonyyliryhmä pelkistetään yhdisteen 11 vastaavaksi metyleeniryhmäksi. Yhdiste 10 pelkistetään reaktiolla litiumaluminiumhydridin tai natrium-bis(2-metoksietoksi)aluminiumhydridin kanssa sopivassa orgaanisessa liuottimessa. Mieluimmin pelkistys suoritetaan natrium-bis(2-metoksietoksi Jaluminiumhydridillä tolueenissa noin 60-90°C:ssa, mieluimmin noin 65-75eC:ssa. Edellä saatu reaktioseos käsitellään varovasti vedellä ja uutetaan etyyliasetaatilla, jonka jälkeen etyyliasetaatin ja tetrahydrofuraanin 1:1-seoksella.

ie 93730

Tuote, t.s. yhdiste 11, puhdistetaan kiteyttämällä uudestaan. Yhdiste 11 laitetaan orgaaniseen liuottimeen, kuten metanoliin, asetonitriiliin, dikloorimetaaniin tai etyyliasetaattiin, mieluimmin käytetään metanolin, asetonitrii-lin ja etyyliasetaatin seosta suhteessa 1:1:2.

Kaavion vaiheessa O yhdisteen 11A trityylisuojaryhmä muutetaan vapaaksi aminopäätteeksi, jolloin saadaan vastaava yhdiste 4A. Yhdiste 11A sekoitetaan inertin liuottimen, kuten dikloorimetaanin kanssa ja se liukenee lisättäessä 2,2,2-trifluorietanolia. Lisätään kloorivetyhappoa; mieluimmin käytetään konsentroitua kloorivetyhappoa. Saadaan kaavan 1 mukaiset yhdisteet.

H

17 93730

Kaavio III

N-N^^NEt2 ^ .NEt, I N-2 CH3°yVVS * "°Wvk UCSXJ · 2HC1 —► ΥΥΎί -¾.

T S^S| -2ΗΒΓ

NH~ I

IA NH2 1A 7A 2 N— N^SEt2 N_N^/NEt2

HO. 1.1 M HCk Il I

XXjn —- ΎΥτι ην/^ΝΗΤγ Hi'^NHTr

10B 11A

.NEt- N-N 2 H0\^\ 0 1 \Ä T J · 3HC1 hn/\/NH2

4A

Edellä esitetyssä kaaviossa III on esitetty samat vaiheet kuin kaaviossa II edellä ja saadaan yhdiste, joka on nimeltään 5-[(2-aminoetyyli)-amino]-2-[2(dietyyli-amino)etyyli]-2H-[l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-9-olin trihydrokloridi.

Mieluimmin yhdiste on 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(di-etyyliamino)etyyli]-2H-bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol- 18 93730 8-olin trihydrokloridi tai 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino) etyyli]-2H-bentsotiopyranoi 4,3,2-cdlindat-sol-9-olin trihydrokloridi.

Esimerkit 1, 2 ja 3 kuvaavat menetelmän vaiheita A, B ja C.

Esimerkit 4, 5 ja 6 kuvaavat menetelmän vaiheita D, E ja F.

Esimerkkien 7-19 tarkoituksena on kuvata tätä keksintöä. Nämä esimerkit esitetään keksinnön valaisemiseksi eikä niitä ole laadittu rajoittamaan keksinnön piiriä.

Esimerkki 1 2-[2-[[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-metoksi-2H-[lIbentso-tiopyranot 4,3,2-cd]indatsol-5-yylilaminoletyyli]-lH-iso- indoli-1,3(2H)-dioni (2)

Liuoksen, jossa oli 441,4 g (1,0 moolia) 5-amino-N,N-di-etyyli-8-metoksi-2H-[1]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsoli-2-etaaniamiinin dihydrokloridia (1, US-patentti 4,604,390) 8,9 litrassa vettä, pH säädettiin arvoon 10 käyttäen 2,5 1 2 N vesipitoista natriumhydroksidia. Saostunut vapaa emäs uutettiin 52 litraan dikloorimetaania. Orgaaninen faasi pestiin vedellä ja konsentroitiin kiinteäksi jäännökseksi, joka kuivattiin tislaamalla atseotrooppisesti 7,4 litran kanssa tolueenia, jonka jälkeen jauhettiin huhmaressa hienoksi jauheeksi. Tämä sekoitettiin hyvin 393,8 g:n (1,55 moolia) kanssa N-(2-bromietyyli)ftaali-imidiä ja 109,2 g;n (1,3 moolia) kanssa natriumbikarbonaattia. Seosta sekoitettiin 100-106°C:ssa 19 tuntia, jonka jälkeen jäähdytettiin 25°C:seen. Kovettunut kiinteä massa digeroitiin dikloorimetaanin ja veden seokseen. Or- 19 93730 gaaninen faasi pestiin vedellä, kuivattiin ja konsentroitiin kuitumaiseksi jäännökseksi, joka hierrettiin di etyyli-eetterin kanssa. Kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, saatiin 545,5 g raakatuotetta, joka liuotettiin 40 litraan asetonitriiliä. Liuos kirkastettiin aktiivihiilellä, jonka jälkeen sitä pidettiin yön yli 0-5°C:ssa. Saostuneet kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, pestiin kylmällä asetonitriilillä ja kuivattiin 220mm/37°C/1,25 h, saatiin 324,1 g (59,8 %) puhdasta yhdistettä 2, sul.p. 171-172,5°C, puhtaus 99,1 % HPLC:llä mitattuna.

Esimerkki 2 2—[2—[I2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[l]bent-sotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyliJamino]etyyli]-lH-iso-indoli-l,3(2H)-dionin dihydrobromidi (3) 25°C:nen liuos, jossa oli 324,1 g (0,598 moolia) 2-[2-[[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[1]bentsotiopyra-no-[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino]etyyli]-lH-isoindoli-1,3(2H)-dionia (2) 7,45 litrassa dikloorimetaania, käsiteltiin tipoittain 2 tunnin kuluessa 2,1 litralla (2,1 moolia) boori-tribromin 1 M liuosta dikloorimetaanissa. Seosta keitettiin palautus jäähdyttäen 6,75 tuntia, käsiteltiin vielä 300 mlilla (0,3 moolia) booritribromidi-liuosta, jonka jälkeen kuumennettiin edelleen yön yli. Palautus jäähdytysseos käsiteltiin varovasti 1,86 litralla metanolia, kuumennettiin vielä 12 tunnin ajan, sen jälkeen jäähdytettiin ja sekoitettiin 3 tuntia jäähauteessa. Kiinteät aineet kerättiin talteen suodattamalla, pestiin peräkkäin dikloorimetaanilla ja heksaanilla, sen jälkeen kuivattiin 220mm/45°C/20 h, saatiin 291,8 g (70,8 %) yhdistettä 3, sul.p. 232,5-234°C, puhtaus 98,9 % HPLCtllä mitattuna.

Esimerkki 3 20 9 3 7 3 0 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2h-[1]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-8-olin trihydroklo-ridi(4)

Suspensio, jossa oli 5 g (7,25 mmoolia) 2-[2-[[2-[2-(di-etyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[1]bentsotiopyrano [4,3,2-cd]-indatsol-5-yyli]amino]etyyli]-lH-isoindoli-l,3(2H)-dionin dihydrobromidia (3) 150 ml:ssa metanolia, käsiteltiin tipoittain 9,6 ml:11a vedetöntä metyylihydrat-siinia ja seosta sekoitettiin 25°C:ssa 21 tuntia. Liuos suodatettiin Celiten® läpi ja konsentroitiin öljymäiseksi jäännökseksi, joka jäähdytettiin jäähauteessa ja käsiteltiin 30 ml:11a 2 N kloorivetyhappoa. Saostuneet kiinteät aineet suodatettiin ja vesipitoista suodosta perkkäin kuumennettiin 45-50°C:ssa 10 minuuttia, sekoitettiin 25°C:ssa 10 minuuttia ja jäähdytettiin 5°C:ssa 30 minuuttia. Lisää saostunutta kiinteää ainetta suodatettiin ja pestiin 25 ml :11a kylmää vettä. Vesipitoinen suodos kirkastettiin aktiivihiilellä, käsiteltiin 1 ml:lla Dowex 1X2-100 (Cl-)— ioninvaihtohartsia ja sekoitettiiin 5°C:ssa 50 minuuttia. Liuos suodatettiin Celiten® läpi ja suodos laimennettiin 1,3 tilavuudella absoluuttista etanolia. Jääkylmä liuos käsiteltiin annoksittain 0,15 tilavuudella kloorivedyn 10 N liuosta 2-propanolissa. Seisotettiin yön yli 0-5°C:ssa, jonka jälkeen kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, pestiin peräkkäin absoluuttisella etanolilla, eetterillä, sen jälkeen heksaanilla ja kuivattiin, saatiin 2,95 g (80 %) yhdistettä 4, sul.p. 261-263°C (haj.). Näyte, joka oli 2,6 g, liuotettiin seokseen, jossa oli 20 ml vettä ja 80 ml absoluuttista etanolia. Jääkylmä liuos käsiteltiin kuten edellä 15 ml :11a kloorivetyä 2-propanolissa, sen jälkeen seisotettiin 0-5°C:ssa 4 tuntia. Saostuneet kiinteät aineet suodatettiin, jonka jälkeen pestiin 21 93730 edellä esitetyllä tavalla ja kuivattiin O,8mm/50°C/yön yli, saatiin 2,35 g (90 %) yhdistettä 4^, sul.p. 263-265°C, puhtaus 96,5 % HPLCtllä mitattuna.

Koko saanto vaiheilla A, B ja C yhteensä 38,1 %.

Esimerkki 4 [2-[[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-metoksi-2H-[lJbentso-tiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino]-2-oksoetyyli 3-karbamiinihapon 1,1-dimetyyliestyyliesteri (5)

Seosta, jossa oli 44,96 g (0,1 moolia) 5-amino-N,N-dietyyli -8-metoks i-2H- [1 ]bentsotiopyrano[4,3,2-cd1indatsoli-2-etaaniamiinin dihydrokloridia (1), 30,6 g (0,175 moolia) [(1,1-dimetyylietoksiJkarbonyyliIglysiiniä, 44,53 g (0,175 moolia) bis(2-okso-3-oksatsolidinyyli)fosfiiniklo-ridia, 76 ml (0,436 moolia) N,N-di-isopropyylietyyliamii-nia ja 449 ml dikloorimetaania, sekoitettiin 24 tuntia 25° C:ssa. Liuos pestiin peräkkäin 1 N vesipitoisella kaliumkarbonaatilla ja vedellä, kuivattiin ja konsentroitiin kiinteäksi jäännökseksi. Hierrettiin 2-propanolissa, jonka jälkeen kiteytettiin uudestaan asetonitriilistä, saatiin 45,1 g (86 %) yhdistettä 5^, sul.p. 130-132°C. Pieni annos puhdistettiin piihappogeelillä pikakromatografisesti elu-ointiaineena dikloorimetaanin ja metanolin 20:l-seos. Puhtaat tuotefraktiot konsentroitiin kiinteäksi aineeksi, joka kiteytettiin asetonitriilistä, saatiin puhdas yhdiste 5, sul.p. 131-133 °C.

22 93730

Esimerkki 5 [2-[ [ 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-metoksi-2H-[1]bentso-tiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino 3etyyli]-karba-miinihapon 1,1-dimetyylietyyliesteri (6) 80°C:nen liuos, jossa oli 49 ,94 g (95 mmoolia) [2— E t 2— C 2— (di-etyyliamino)etyyli]-8-metoksi-2H-[1Jbentsotiopyrano [4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino-2-oksoetyyli]-karbamiini-hapon 1,1-dimetyylietyyliesteriä (^) 120 ml:ssa tolueenia, käsiteltiin tipoittain 2,75 tunnin kuluessa 142,6 ml:lla (475 mmoolia) natrium-bis(2-metoksietoksi)aluminiumhydri-din 3,4 M liuosta tolueenissa. Lisäyksen jälkeen liuos jäähdytettiin jäillä ja käsiteltiin varovasti 20 ml:11a kyllästettyä vesipitoista ammoniumkloridia, sen jälkeen 200 ml:11a vettä. Seos suodatettiin Celiten· läpi ja suo-dos konsentroitiin vesipitoiseksi liuokseksi, joka uutettiin kolmella annoksella dikloorimetaania. Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä, kuivattiin ja konsentroitiin kiinteäksi jäännökseksi, joka puhdistettiin piihappogee-lillä pikakromatografisesti eluointiaineena dikloorimetaa-nin ja metanoli 97:3-seos. Puhtaat tuotefraktiot konsentroitiin kiinteäksi aineeksi, joka kiteytettiin asetonit-riilistä, saatiin 30,7 g (63 %) yhdistettä (>, sul.p. 133-134°C. Puhtaus 99,9 % HPLC:llä mitattuna.

Esimerkki 6 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino)etyyliJ-2H-[1Ibentsotiopyranot4,3,2-cd1indatsol-8-oli (4) 25°C:nen liuos, jossa oli 0,25 g (0,49 mmoolia) [2-Π2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-metoksi-2H-[1Ibentsotiopyrano-[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino]etyyli]-karbamiinihapon 1,1-dimetyylietyyliesteriä ((>) 7,5 ml:ssa dikloorietaania, 23 93730 käsiteltiin tipoittain 2,45 mltlla (2,45 mmoolia) boori-tribromidin 1 M liuosta dikloorimetaanissa. Seosta sekoitettiin 25°C:ssa 18 tuntia, käsiteltiin varovasti 3 ml:lla metanolia, sen jälkeen kuumennettiin palautus jäähdyttäen 6 tuntia. Jäähdytettiin 25°C:seen, saostuneet kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, pestiin peräkkäin metanolil-la ja dikloorimetaanilla ja kuivattiin 200mm/60°C/yön yli, saatiin 0,3 g yhdistettä 4, puhtaus 95,2 % HPLCrllä mitattuna. Kiinteät aineet liuotettiin 10,6 ml:aan etanolin ja veden 4:l-seosta ja liuos käsiteltiin annoksittain 1,6 ml:11a bromivedyn 2,6 M liuosta 2-propanolissa. Seisotettiin yön yli 0-5°C:ssa, saostuneet kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, pestiin ja kuivattiin kuten edellä, saatiin 0,28 g (90 %) yhdistettä 4 suolana, joka sisälsi 2,9 ekvivalenttia bromivetyä, sul.p. 282°C (haj.), puhtaus 96,1 % HPLC:llä mitattuna.

Koko saanto vaihelle D-F yhteensä 48,8 %.

Esimerkki 7 5-amino-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2H-[1]bentsotiopyrano-[4,3,2-cd]indatsol-8-olin dihydrobromidi (7) 25°C:nen suspensio, jossa oli 75 g (0,17 moolia) 5-amino-N,N-dietyyli-8-metoksi-2H-[1]bentsotiopyrano[4,3,2-cd] indatsoli-2-etaaniamiinin dihydrokloridia (1) 1,35 litrassa dikloorietaania, käsiteltiin tipoittain 213 g:lla (0,85 moolia) booritribromidia. Seosta kuumennettiin 78°C:ssa 16 tuntia, käsiteltiin varovasti 1,5 litralla metanolia, jonka jälkeen kuumennettiin palautus jäähdyttäen 6 tuntia. Jäähdytettiin 25°C:seen, sen jälkeen jäähdytettiin -5°C:seen yön aikana, saostuneet kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, pestiin kylmällä metanolilla ja kuivattiin 2 mm/48°C/24 h, saatiin 84,3 g (96 %) yhdistettä T_ suola- 93730 24 na, joka sisälsi 2,0 ekvivalenttia bromivetyä, sul.p.

318°C (haj.), puhtaus 98,3 % HPLCsllä mitattuna.

Esimerkki 8 [2-[[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[1Ibentso-tiopyranol4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino]-2-oksoetyyli]-karbamiinihapon 1,1-dimetyylietyyliesteri (8) 25°C:nen seos, jossa oli 85,6 g (0,52 moolia) l,l'-karbok-syylidi-imidatsolia 465 ml:ssa Ν,Ν-dimetyyliasetamidia, käsiteltiin annoksittain 87,5 g:lla (0,50 moolia) [(1,1— dime-tyylietoksi)karbonyyliIglysiiniä. Liuosta sekoitettiin 0,5 tuntia, sen jälkeen käsiteltiin 154,6 g:lla (0,282 moolia) 5-amino-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2H-[l] bentsotiopyrano-[4,3,2-cd ] indatsol-8-olin (T_) suolaa, joka sisälsi 2,4 ekvivalenttia bromivetyä. Seosta sekoitettiin 25°C:ssa 21 tuntia, konsentroitiin tyhjössä viskoosiseksi öljyksi, jonka jälkeen laimennettiin 10%:isella vesipitoisella natriumbikarbonaatilla. Vesipitoinen faasiuutettiin kolmella dikloorimetaaniannoksella ja yhdistetyt uutteet (1,05 1) pestiin vedellä, jonka jälkeen laimennetiin 650 ml:11a metanolia. Liuosta sekoitettiin 25°C:ssa 64 tuntia, sen jälkeen konsentroitiin kiinteäksi jäännökseksi, joka hierrettiin kuuman asetonitriilin kanssa. Kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, pestiin asetonitriilil-lä ja ilmakuivattiin 25°C/3 päivää, saatiin 133,1 g (91 %) yhdistettä 8, sul.p. 198°C (haj.), puhtaus 94,7 % HPLCtllä mitattuna.

25 9 3 7 3 0

Esimerkki 9 [2—[[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[l]bentso-tiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino]etyyli]-karbamii-nihapon 1,1-dimetyylietyyliesteri (9) 80°C:nen liuos, jossa oli 14,4 ml (48,8 mmoolia) natrium-bis(2-metoksietoksi)aluminiumhydridin 3,4 M liuosta tolu-eenissa, käsiteltiin annoksittain 30 minuutin kuluessa 5 g:lla (9,8 mmoolia) [2-[[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[1]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli] amino]-2-oksoetyyli]-karbamiinihapon 1,1-dimetyylietyyli-esteriä (8). Lisäyksen jälkeen liuos jäähdytettiin 25°C:seen ja lisättiin tipoittain 3 ml kyllästettyä vesipitoista ammoniumkloridiliuosta. Seosta sekoitettiin 18 tuntia, laimennettiin 35 ml:11a vettä ja suodatettiin pii-happogeelin läpi. Suodos konsentroitiin vesipitoiseksi faasiksi, joka uutettiin kolmella dikloorimetaaniannoksel-la. Yhdistetyt uutteet pestiin vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin öljymäiseksi jäännökseksi, joka puhdistettiin pikakromatografisesti piihappogeelillä eluointiainee-na dikloorimetaanin ja metanolin 93:7-seos. Puhtaat tuo-tefraktiot konsentroitiin, saatiin 3,2 g (64 %) yhdistettä 9 vaahtona tyhjössä suoritetun kuivauksen jälkeen, puhtaus oli 99,3 % HPLCsllä mitattuna.

Esimerkki 10 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[(2-(dietyyliamino)etyyli]-2H- [l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-8-olin trihydroklori-di (4) Jääkylmään liuokseen, jossa oli 29,4 g (59,1 mmoolia) [2-[[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[1Jbentsotio-pyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]amino]etyyli]-karbamiini- 26 9 3 7 3 0 hapon 1,1 dimetyylietyyliesteriä ja 800 ml absoluuttista etyylialkoholia, pulputettiin hitaasti vedetöntä kloori-vetyä kunnes lämpötila kohosi 12°C:seen. Seos jäähdytettiin 3°C:seen ja pulputusprosessi toistettiin kolme kertaa, sen jälkeen seos lämmitettiin 25°C:seen. Sekoitettiin yön yli, jonka jälkeen kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, sitten sekoitettiin 30 minuuttia 5°C:ssa liuoksen kanssa, jossa oli 250 ml vettä ja 800 ml etyylialkoholia. Seos laimennettiin lisäämällä 250 ml etyylialkoholia ja sekoitettiin 5°C:ssa 5 tuntia, sen jälkeen -5°C:ssa 30 minuuttia. Kiinteät aineet kerättiin suodattamalla, pestiin peräkkäin dietyylieetterillä, jonka jälkeen heksaanilla ja kuivattiin vedettömän fosforipentoksidin päällä 2 mm/40°C/ 2 h, jonka jälkeen 2 mm/25°C/48 h, saatiin 27,6 g (90,5 *) yhdistettä 4^ trihydrokloridisuolana, johon solvatoituneena 0,5 ekvivalenttia vettä, sul.p. 260-264°C (haj.), puhtaus 99,4 % HPLCillä mitattuna.

Koko saanto vaiheille D-J yhteensä 50,6 %.

Esimerkki 11 5-amino-N,N-dietyyli-8-hydroksi-2H-Il]bentsotiopyrano-[4,3,2-cd3indatsoli-2-etaaniamiinin dihydrobromidi (7) 12 litran neljäkaulainen kolvi varustettiin mekaanisella sekoittajalla, höyryhauteella, typen sisään- ja ulossyö-töllä, tiputussuppilolla, jossa oli kumiväliseinä ja jääh-dyttimellä, joka oli yhdistetty tehokkaaseen kaasunpesu-laitteeseen. Metoksiyhdiste 1 (150 g, 0,34 moolia) suspen-doitiin 3 litraan dikloorimetaanin ja dikloorietaanin l:l-seosta. Booritribromidi siirrettiin suppiloon taipuisalla neulalla argon-atmosfäärissä ja lisättiin tipoittain sekoitettuun lietteeseen. Lisäys kesti noin 40 minuuttia ja reaktioseoksen lämpötila nousi 20°C:sta 32eC:seen. Re- 27 93730 aktioseosta kuumennettiin palautus jäähdyttäen höyryhau-teella yön yli. Seos jäähdytettiin 30°C:seen ja tarkastettiin TLCsllä. Lähtöainetta ei enää havaittu tässä vaiheessa. Reaktioseokseen lisättiin varovasti 5 litraa metyylialkoholia. Sen jälkeen, kun oli lisätty metanolin toinen litra, seos kuumennettiin höyryhauteella 55-57°C:seen ja pidettiin palautuslämpötilassa 4 tuntia. Sen jälkeen sen annettiin jäähtyä 25-30°C:seen ja sitä jäähdytettiin 2-propanoli-jäähauteella yön yli. Kylmä seos (-6°C) suodatettiin kynttiläsuodattimella, pestiin 1 litralla kylmää metanolia, siirrettiin Buchner-suppiloon käyttäen 1 litra metanolia ja suodatettiin. Kerättyä sakkaa kuivattiin ilmassa 20 minuuttia, sen jälkeen kuivattiin tyhjöuunissa (200 mmHg, 42°C) yön yli. Näin saatiin 156,4 g (89,2 %) tuotetta, sul.p. 308-309°C (terävä hajomainen, ruskistuu >300°C), puhtaus 99,2 % HPLCsllä mitattuna.

Esimerkki 12 N-[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[l]bentsotio-pyranot 4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]-2-[(trifenyylimetyyli) aminol-asetamidi (10) 22 litran neljäkaulainen kolvi varustettiin mekaanisella sekoittajalla, jäähdyttimellä ja typen sisään- ja ulossyö-töllä. 1,1'-karbonyylidi-imidatsoli (560 g, 3,45 moolia) laitettiin kolviin ja liuotettiin 4 litraan DMFsää. N-trityyliglysiini lisättiin annoksittain kiinteänä aineena 30 minuutin kuluessa. Tummaa seosta sekoitettiin typpi-atmosfäärissä 2 tuntia. Hienonnettu amiini 7 lisättiin seokseen annoksittain 30 minuutin kuluessa, saatiin tummanruskea liuos. Sekoitettiin 18 tuntia typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen reaktioseos tutkittiin TLCsllä (Si02* C^C^sMeOH, 4:1), mikä osoitti, että vain pieniä jälkiä lähtöaineesta oli jäljellä. Liuos konsent- 28 93730 roitiin pyöröhaihduttimessa tyhjössä, saatiin tumina öljy. Kuuma öljy kaadettiin 16 litraan vettä samalla voimakkaasti sekoittaen kermamaisen kiinteän aineen saamiseksi, joka kerättiin suodattamalla, pestiin vedellä niin paljon kuin oli tarpeen ja kuivattiin 20 tuntia 40°C/12 mmHg typpivir-rassa, saatiin 4,5 kg raaka, kosteaa tuotetta 10a. Kiinteä aine laitettiin 72 litran kolviin, joka oli varustettu sekoittajalla, jäähdyttimellä, typen sisään- ja ulossyö-töllä ja höyryhauteella, ja käsiteltiin kaikkiaan 48 litralla metanolia, 8 litralla etyyliasetaattia ja 1 kg:11a trietyyliamiinia noin 78°C:ssa kolmen tunnin ajan. Reak-tioseos jäähdytettiin -l°C:seen 2-propanoli/jäähauteella ja suodatettiin kynttiläsuodattimella yön kuluessa. Sakka pestiin kolvissa 2x8 litralla uutta metanolia. Kiinteä aine kerättiin sintterilasisuppilolle, pestiin metanolilla (4 x 250 ml), kuivattiin 40°C/12 mHg typpiatmosfäärissä yön yli. Näin saatiin 744 g (73 %) tuotetta, joka oli yhdiste 10, sul.p. 214-216°C, puhtaus 99,6 % HPLC:llä mitattuna.

Esimerkki 13 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-5-[2-(trifenyylimetyyli)-aminoetyyli]amino-2H-[1]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]-indat-sol-8-oli(ll) 22 litran neljäkaulainen kolvi varustettiin jäähdyttäjäl-lä, mekaanisella sekoittajalla, typen sisään- ja ulossyö-töllä, lämpömittarilla, jossa lämpö- ja aikasäädin, kuu-mennusvaipalla. Kolviin laitettiin 7 litraa tolueenia ja 560 ml natrium-bis(2-metoksietoksi)aluminiumhydridiä to-lueeniliuoksessa ja seos kuumennettiin 70°C:seen typpiat-mosfäärissä. Kiinteä amidi, yhdiste 10 (350 g, 0,535 moolia) lisättiin annoksittain. Tummanpunaista seosta sekoitettiin 80°C:ssa 4,5 tuntia, sen jälkeen annettiin jäähtyä 29 93730 huoneen lämpötilaan yön aikana. TLC osoitti, ettei lähtöainetta enää ollut. Reaktioseos käsiteltiin varovasti vedellä. Ensimmäinen osa vedestä noin 25 ml aikaansai voimakkaan reaktion. Sen jälkeen lisättiin vettä kaikkiaan 3,5 litraa ja seos siirrettiin 30 litran dekantterilasiin ja orgaaninen kerros erotettiin. Jäännöksenä saatu seos uutettiin etyyliasetaatilla, jonka jälkeen etyyliasetaatin ja tetrahydrofuraanin 1:1-seoksella. Orgaaniset kerrokset erotettiin 6 litran erotussuppiloon ja pestiin vedellä (1 litra suppiloa kohti) neutraaliksi. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset (kaikkiaan 62 1) kuivattiin Na2S04:llä (200 g/10 1) yön yli. Suodatettu liuos haihdutettiin ja kuivattiin atseotrooppisesti 5 litran kanssa tolueenia. Melkein kuivaan kiinteään jäännökseen lisättiin 6 1 meta-nolia ja seosta keitettiin palautusjäähdyttäen pyöröhaih-duttajassa ilmakehän paineessa 45 minuutin ajan. Kolvi poistettiin ja jätettiin kylmään huoneeseen yön yli. Kiinteä aine kerättiin suodattamalla, pestiin 2 x 0,5 litralla kylmää metanolia ja kuivattiin tyhjöuunissa 40°C/10 mmHg yön yli. Näin saatiin 316,7 g (92,5 %) tuotetta, joka oli yhdiste 11, sul.p. 175,5-178°C, puhtaus oli 98,3 % HPLCrllä mitattuna. Näyte, joka oli 20 g tätä ainetta, kiteytettiin uudestaan metanolin, asetonitriilin ja etyyliasetaatin 250:250:300 ml-seoksesta, saatiin kaksi erää tuotetta: 16,26 g (81,3 %), sul.p. 203-205°C, puhtaus 99,18 % HPLC:llä mitattuna ja 2,9 g (14,5 %), sul.p. 201-203°C, puhtaus 98,52 % HPLC:llä mitattuna.

Molemmat erät sisälsivät sen jälkeen, kun niitä oli kuivattu tyhjöuunissa (200 mm, 45°C, 15 h) yön yli, jonkin verran asetonitriiliä liuotinjäännöksenä. Tämä havaittiin selvästi ^HNMR:ssä ja mikroanalyysissä. Sen jälkeen, kun molempia näytetteitä kuivattiin edelleen 5 tuntia 1,5 mmHg/45°C, saatiin tyydyttävät analyyttiset arvot ja näytteet olivat vapaat asetonitriilistä.

93730 30

Esimerkki 14

Raaka-aineen uudelleenkoteyttäminen 72 litran viisikaulainen pyöreäpohjäinen kovi varustettiin jäähdyttäjällä, mekaanisella sekoittajalla, lämpöparilla, typen sisään- ja ulossyötöllä ja höyryhauteella. Raakatuo-te, joka oli yhdiste 11, laitettiin kolviin typpiatmosfäärissä sekoitettiin metanolin ja asetonitriilin kanssa (kumpaakin 14,5 1) ja seos kuumennettiin 61°C:seen. Lisättiin etyyliasetaattia 24 1 ja seosta kuumennettiin palautus jäähdyttäen yksi tunti. Kuuma liuos suodatettiin kolmeen 20 litran lasiseen happopulloon (carboys), jotka jäähdytettiin yön aikana 2°C:seen. Hyvin kiteytynyt sakka kerättiin suodattamalla 3 litran huokoslasisuodatinsuppi-lolla, pestiin kylmällä metanolilla (3 x 0,25 1) ja kuivattiin Buflovac®-uunissa 35°C/ 12 mmHg 15 tuntia. Liukenematon aine, joka jäi 72 litran kolviin, liuotttiin metanolin, asetonitriilin ja etyyliasetaatin 2:1:4 litran seokseen keittäen palautus jäähdyttäen 30 minuuttia. Kun suodatettiin ja jäähdytettiin edellä esitetyllä tavalla, saatiin toinen annos yhdistettä (81 g). Emäliuoksista saatiin jäähdyttämisen jälkeen vielä kaksi erää lisää. Edellä saadut erät kuivattiin, analysoitiin, sekoitettiin ja seulottiin seulalla numero 20, saatiin 1013 g yhdistettä 11, sul.p. 198-200eC, puhtaus 99,2 % HPLCsllä mitattuna.

Esimerkki 15 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino)etyyli3-2H-[13 bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-8-olin trihydroklo-ridi (4) 2 litran neljäkaulainen kolvi varustettiin sekoittajalla, argonpeitteisellä adapterilla, lämpömittarilla ja lisäys- 31 93730 suppilolla. Yhdiste 11 (12,8 g, 0,02 moolia) sekoitettiin argonatmosfäärissä 200 ml:n kanssa dikloorimetaania ja liuotettiin lisäämällä 100 ml 2,2,2-trifluorietanolia. Liuokseen lisättiin askorbiinihappoa (0,21 g), jonka jälkeen tipoittain 57 ml noin 9 N HCl:ää. Muodostui hitaasti keltaisen-vihreä liete, jota sekoitettiin 5 minuuttia, jonka jälkeen lisättiin 200 ml vettä. Kaksi-faasista seosta sekoitettiin vielä 10 minuuttia ja otettiin TLC-näyte. Kiinteää ainetta muodostui lisää ja vettä lisättiin (2 x 150 ml) sen liuottamiseksi. Sekoittamista jatkettiin vielä 10 minuuttia. Kokonaisreaktioaika oli 45 minuuttia. Reak-tioseos siirrettiin 1 litran erotussuppiloon, joka oli varustettu inertin kaasun sisään-ulossyöttölaitteella ja kerrokset erotettiin. Vesikerros pestiin dikloorimetaanil-la (3 x 100 ml). Vesikerroksen kokonaistilavuus oli noin 650 ml ja se laimennetiin 2600 ml:11a etanolia. Toinen erä askorbiinihappoa, 0,21 g, lisättiin, jonka jälkeen 42 ml noin 9 N HCl/2-propanoli-liuosta. Seos huuhdeltiin argon-kaasulla, suljettiin ja jätettiin kylmään huoneeseen 1,5 tunnin ajaksi. Sen jälkeen toinen erä, 5 ml HCl/2-propa-noliliuosta lisättiin ja sakkaa alkoi muodostua. Suljettu seos jätettiin kylmään huoneeseen 7 tunnin ajaksi. Sakka kerättiin suodattamalla argonatmosfäärissä ja pestiin 150 ml:11a heksaania. Kostea kermamainen kiinteä aine liuotettiin 75 ml:aan vettä, lisättiin 0,11 g askorbiinihappoa ja liuos sekoitettiin 300 ml:n kanssa etanolia, jonka jälkeen 15 ml:n kanssa HCl/2-propanoli-liuosta. Sakka muodostui välittömästi ja seos jätettiin argonatmosfääriin kylmään huoneeseen 10 tunnin ajaksi. Hyvin paksu seos suodatettiin ja sakka pestiin heksaanilla, kuivattiin tyh-jöuunissa ilman vuotoa (1 mmHg, huoneen lämpötila, P2O5) 20 tunnin ajan. Näin saatiin 8,85 g (86,5 %) harmahtavan valkoista kuohkeaa kiinteää ainetta, hajoaa >260°C, puhtaus 99,4 % HPLC:llä mitattuna.

93730 32

Kokonaissaannot vaiheille K - O ovat 50 %ssta - 55 %:iin. Esimerkki 16 5-amino-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2H-[1]bentsotiopyrano-[4,3,2-cd]indatsol-9-olin dihydrobromidi (7A)

Liuos, jossa oli 98 g (0,222 moolia) 5-amino-N,N-dietyy-li-9-metoksi-2H-[l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsoli-2-etaaniamiinin dihydrokloridia (yhdiste IA) 900 ml:ssa 1,2-dikloori-etaania, käsiteltiin 444 ml:lla booritribro-midin 1 M liuosta dikloormetaanissa (0,444 moolia). Seos kuumennetiin 50°C: seen 24 tunnin kuluessa, jona aikana lisättiin 200 ml boori-tribromidiliuosta (0,200 moolia) ja reaktiota jatkettiin 50eC:ssa vielä 24 tuntia. Seos jäähdytettiin ja lisättiin varovasti metanolia (600 ml). Seosta kuumennettiin palautus jäähdyttäen 3 tuntia, jonka jälkeen jäähdytettiin 0°C:ssa 48 tuntia. Keltainen sakka kerättiin imusuodatuksella, pestiin kylmällä metanolilla, jonka jälkeen kuivattiin 60°C:ssa, 200 mmHg, saatiin 110,4 g 5-amino-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2H-[llbentso-tiopyranol4,3,2-cd]indatsol-9-olin hydrobromidia, joka sisälsi 1,8 ekvivalenttia bromivetyä, sul.p. 305°C (hajaantuen), puhtaus 98,36 % HPLC:llä mitattuna.

Esimerkki 17 N-[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-9-hydroksi-2H-[1Ibentsotio-pyrano[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]-2-[(trifenyylimetyyli) aminol-asetamidi (10B)

Liuos, jossa oli 29,52 g (0,182 moolia) karbonyylidi-imi-datsolia 375 ml:ssa vedetöntä DMF:ää, käsiteltiin 61,1 g:lla (0,193 moolia) trityyliglysiiniä annoksittain tunnin kuluesessa. Seosta sekoitettiin 45 minuuttia, jonka 33 93730 aikana lisättiin 47 g (0,091 moolia) 5-amino-2-[2-(dietyy-liamino)etyyli]-2H-[l]bentsotiopyrano[4,3,2-cdlindatsol-9-olin hydrobromidia (yhdiste 7A). Tätä seosta sekoitettiin 48 tuntia, sen jälkeen DMF haihdutettiin alennetussa paineessa, saatiin viskoottinen tumma öljy, joka käsiteltiin 600 ml:11a vettä ja muodostunut keltaisenruskea kiinteä aine kerättiin suodattamalla, käyttäen imusuoda-tusta ja pestiin vedellä. Tämä kiinteä aine suspendoitiin seokseen, jossa oli 750 ml metanolia ja 50 ml trietyyli-amiinia, ja kuumennettiin palautus jäähdyttäen 2 tuntia. Reaktioastia laitettiin kylmään 48 tunnin ajaksi, sen jälkeen suodatettiin, saatiin 48,55 g (80 %) tuotetta kel-taisenruskena kiinteänä aineena, sul.p. 239-240,5°C, puhtaus 94,58 % HPLCrllä mitattuna.

Esimerkki 18 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-5-[2-(trifenyylimetyyli)amino-etyyli]amino-2H-[l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-9-oli (HA) 80°C:seen liuokseen, jossa oli 94,6 ml natrium-bis(2-me-toksietoksi)aluminiumhydridin 3,4 M liuosta tolueenissa (0,325 moolia) ja 86 ml tolueenia, lisättiin 43,0 g (0,065 moolia) N-[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-9-hydroksi-2H-[l] bentsotiopyrano-[4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]—2—[(trifenyylimetyyli )amino]asetamidia (yhdiste 10B) annoksittain 45 minuutin kuluessa. Reaktiota jatkettiin 80°C:ssa 2,5 tuntia, sen jälkeen jäähdytettiin 25°C:seen ja sekoitettiin edelleen 18 tuntia, jonka jälkeen reaktio sammutettiin 47 ml:11a vettä. Muodostunut kiinteä aine siirrettiin sintterilasisuppiloon ja uutettiin kymmenen kertaa, yhteensä 4500 ml:11a kloroformia. Yhdistetyt uutteet haihdutettiin kuiviin, jonka jälkeen liuotettiin uudestaan 310 ml:aan kuumaa etyyliasetaattia ja liukenematon aines suo- 93730 34 datettiin. Suodos haihdutettiin taas kuiviin ja jäännöstä kuumennettiin palautus jäähdyttäen metanolissa (650 ml) 0,5 tuntia, sen jälkeen jäähdytettiin (3°C) 18 tunnin ajan. Imusuodatettiin, jonka jälkeen kuivattiin uunissa, saatiin 33,5 g keltaista kiinteää ainetta, jota taas keitettiin palautus jäähdyttäen metanolissa (525 ml), jäähdytettiin, suodatettiin ja kuivattiin, saatiin 31,6 g keltaista kiinteää ainetta (76 %), sul.p. 137-139°C, puhtaus 97,04 % HPLCtllä mitattuna.

Esimerkki 19 5-[(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2H-[1]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-9-olin trihydroklo-ridi (4A)

Mekaanisesti sekoitettua liuosta, jossa oli 31 g (0,048 moolia) 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-5-[[2-[(trifenyylimetyyli )-amino]etyyli]amino]-2H-[l]bentsotiopyrano[4,3,2-cd]indatsol-9-olia (yhdiste 11A), 495 ml dikloorimetaania ja 247 ml trifluorietanolia, sekoitettiin 10 minuuttia. Lisättiin 99 ml konsentroitua HCl-liuosta ja 99 ml vettä ja sekoitettiin 10 minuuttia, jona aikana lisättiin vielä 250 ml vettä ja reaktioseosta sekoitettiin 45 minuuttia. Seos siirrettiin erotussuppiloon, kerrokset erotettiin ja orgaaninen kerros laskettiin pois. Vesipitoinen kerros pestiin vielä 200 ml :11a dikloorimetaania, jonka jälkeen se käsiteltiin 750 ml:lla etanolia ja 20 mlslla 6,22 M isopropanolista kloorivetyä, sen jälkeen jäähdytettiin 2,5 tuntia. Seos suodatettiin ja valkoinen kiinteä aine liuotettiin 250 ml:aan vettä. Lisättiin etanolia (700 ml) ja 5 ml 6,22 M isopropanolista kloorivetyä ja seosta jäähdytettiin (-5°C) 18 tuntia. Valkoinen kiinteä aine kerättiin imusuodattamalla, saatiin 21,02 g tuotetta, sul.p. 270°C (haj.), puhtaus 98,91 % HPLC:llä mitattuna.

Claims (17)

35 93730

1. Menetelmä substituoidun bentso(kalkogeno)[4,3,2-cd]in-datsolin, jonka kaava 1 on /Ri -N — D— N Nr2 XXxXj r

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (a) reagoivat aineet ovat booritribromidi ja metanoli.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (a) reaktioaika on 15-20 tuntia lämpötilassa, joka on 50-65°C.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelemä, tunnettu siitä, että vaiheessa (a) n on 1 ja Z on metyy li.

4. I / 1 R, HND' -N XR R2 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, jossa kaavassa X on happi tai rikki, D ja D' voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat suora tai haarautunut alkyleeniryhmä, jossa 2-5 hiiliatomia, Ri ja R2 voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat vety tai alkyyliryhmä, jossa 2-8 hiiliatomia, jotka voivat olla substituoidut hydroksilla, ja R3, R4, R5 ja Rg voivat olla samanlaiset tai erilaiset ja ovat vety tai hydroksi, tunnettu siitä, että (a) alkyyli-substituoitu yhdiste, jonka kaava 2 on A N-N-D-H R2 (20) -f- H T I V^xaJ (2) NH2 jossa X, Ri, R2 ja D tarkoittavat samaa kuin edellä, Z on 1-4 hiiliatomia sisältävä alkyyli ja n on kokonaisluku 1-4, saatetaan reagoimaan booritribromidin ylimäärän kanssa sopivassa orgaanisessa liuottimessa, sen jälkeen meta-nolin kanssa hydroksyloidun yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava 3 on 93730 Λ H N-D —N NR2 (3) (H0’n~WxXJ nh2 jossa X, n, D, Ri ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä? (b) kaavan 3 mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan N-asyyli-imidatsolin kanssa, joka johdetaan 1,11-karbonyyli-di-imidatsolin ja N-trityyliaminohapon reaktiosta N,N-di-metyyliformamidissa, vastaavan trityylisuojatun aminohap-poyhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava 4 on /R1 N N—D—N r^lli XR2 (H0)"~ti[ D («) NHCQNHTr jossa X, Ri, R2, D ja n tarkoittavat samaa kuin edellä, Q on suora tai haarautunut alkyleeniryhmä, jossa on 1-4 hiili-atomia, ja Tr on CiCgHs^? (c) edellä esitetyn kaavan 4A mukaisen yhdisteen suola saostetaan ja kaavan 4A mukainen yhdiste otetaan talteen? (d) kaavan 4A mukainen yhdiste, jossa on karbonyyli-osa, pelkistetään vastaavan metyleeniosan sisältäväksi kaavan 5A mukaiseksi yhdisteeksi H 93730 /Ri N-N—D—N rAA, VR2 (HO)-- I (5A) n LL ' -J NHCH2QNHTr' (e) kaavan 5A mukainen yhdiste puhdistetaan kiteyttämällä uudestaan; (f) kaavan 5A mukaisesta yhdisteestä poistetaan tri-tyylisuojaryhmä reaktiolla hapon kanssa tämän keksinnön mukaisen edellä esitetyn kaavan 1 mukaisen yhdisteen valmistamiseksi.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (a) alkoksi-substituoitu yhdiste on 5-amino-N,N-dietyyli-8-metoksi-2H-[l]bentso (kalkoqeno)-[4,3,2-cd]indatsoli-2-etaanjämiini.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (a) X on rikki. 93730

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetalmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (a) orgaaninen liuotin on dikloorimetaanin ja 1,2-dikloorietaanin seos suhteessa 1:1.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (b) kaavan 3 mukaisen yhdisteen suhde reagoiviin aineisiin 1,1'-karbonyylidi-imi-datsoliin ja N-trityyliglysiiniin on 1:2:2 - 1:3:3.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (c) saostava aine on vesi ja yhdisteen 11 talteenottaminen tapahtuu trietyyliamii-nilla metanolin ja etyyliasetaatin seoksessa.

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (d) pelkistävä aine on natriumbis(2-metoksietoksi)aluminiumhydridi.

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (d) pelkistys tapahtuu tolueenissa ja tuote uutetaan etyyliasetaatilla, ja sen jälkeen etyyliasetaatin ja tetrahydrofuraanin seoksella, jossa suhde 4:1 - 1:1.

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että vaiheessa (e) puhdistava aine on metano-li, asetonitriili ja etyyliasetaatti suhteessa 1:1:1 -1:1:2.

13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (f) reaktioseos on kaksi-faasinen seos, jossa dikloorimetaania ja trifluorietanolia suhteessa 2:1 ja vettä. 39 93730

14. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (f) reaktioaika on 30 minuutista 90 minuuttiin huoneen lämpötilassa.

15. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa (f) happo on kloorivety.

16. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistettu yhdiste on 5-[(2-amino-etyyli)-amino]-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2H-[1]bentso-tiopyrano-[4,3,2-cd]indatsol-8-olin trihydrokloridi, tai 5-t(2-aminoetyyli)amino]-2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-2H- [1]bentsotiopyrano-14,3,2-cd]indatsol-9-olin trihydrokloridi .

17. Yhdiste, joka on N-[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-8-hydroksi-2H-[1Jbentsotiopyranot 4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]-2-[(trifenyylimetyyli)amino]asetamidi, 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-5-[2-(trifenyylimetyyli)amino-etyyli]amino-2H-[lIbentsotiopyranoi4,3,2-cd]-indatsol-8-oli, N-[2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-9-hydroksi-2H-[1Jbentsotiopyranot 4,3,2-cd]indatsol-5-yyli]-2-[(trifenyylimetyyli) amino]asetamidi, tai 2-[2-(dietyyliamino)etyyli]-5-[2-(trifenyylimetyyli)amino-etyyli]amino-2H-[l]bentsotiopyrano-[4,3,2-cd1indatsol-9- oli. 93730