FI92831B - Menetelmä hyötyeläinten parasiitteja vastaan vaikuttavien milbemysiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

92831

Menetelmä hyötyeläinten parasiitteja vastaan vaikuttavien milbemysiinijohdannaisten valmistamiseksi 5 Tämän keksinnön kohteena on menetelmä hyötyeläinten parasiitteja vastaan vaikuttavan 13-spiro-2'-[tetrahydro-furaani]-milbemysiinijohdannaisen valmistamiseksi, jonka kaava I on 10 ”«3 .CH3 r o-/* \'*\ ί 3 \..··!13 :*17ί Wk\ H,C-' il „ i (I)

• · H

5 Ο»!' 15 Sa\Y? \ k—l 5 9 ÄV' VCHj jossa X merkitsee ryhmää -CH(OR,)-, -C(=0)- tai -C(=N-0H)-, R! merkitsee vetyä tai ryhmää Si (R5) (R$) (R7) , 20 missä Rj, R6 ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta c,-C6-alkyyliä, R2 merkitsee metyyliä tai etyyliä, R3 merkitsee vetyä, C,-C10-alkyyliä, yksi, kaksi tai kolme kertaa halogeenilla tai kerran C,-C3-alkoksilla, mahdollisesti pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesti 25 yhden kerran hydroksilla tai halogeeni-C,-C4-alkyylikar- bonyylioksilla substituoidulla C2-C6-alkoksialkoksilla, C,-; C3-alkyylitiolla, C3-C7-sykloalkyylillä, hydroksilla, bentsyylioksilla, Ci-C4-alkyylikarbonyylioksilla tai halo-geeni-C1-C4-alkyylikarbonyylioksilla substituoitua C,-C5-30 alkyyliryhmää, C3-C7-sykloalkyyliä, mentyyliä, C2-C4-al-kenyyliä, 1-adamantyylimetyyliä, fenyyliä, bentsyyliä, fenyylirenkaassa yhdellä tai kahdella substituentilla, jotka ovat C,-C3-alkoksi- tai fenoksiryhmä, substituoitua bentsyyliryhmää, alifaattisessa C-atomissa kerran C,-C3-35 alkyylillä substituoitua bentsyyliryhmää, furyylimetyy-liä, tienyylimetyyliä tai C,-C3-alkyylioksetanyylimetyy-liä. Mainituilla parasiiteillä tarkoitetaan ekto- ja endoparasiitteja.

92831 2

Mentyyliryhminä tulevat kysymykseen o-, m- ja p-mentaa-nista johdetut mentyyliryhmät, jotka voi olla liitetty jonkin substituoimattoman rengashiiliatomin kautta C5'-5 atomissa olevaan happiatomiin. Edullisena mentyyliryhmänä mainittakoon 2-metyyli-6-isopropyyli-sykloheksyyli.

Kaavan I mukaiset yhdisteet voivat esiintyä epimeeriseok-sena hiiliatomin C5' suhteen tetrahydrofuraanirenkaassa.

10 Puhtaat epimeerit saadaan tavanomaisten fysikaalisten erotusmenetelmien avulla. Molempia epimeerejä merkitään seuraavassa kirjaimilla A ja B.

Sopivia kaavan -Si(R5) (RJ (R7) mukaisia silyyliryhmiä R, 15 ovat esimerkiksi trimetyylisilyyli, teksyylidimetyylisi-lyyli (teksyyli = 1,1,2-trimetyyli-l-propyyli: (CH3)2CH- C(CH3)2”)/ bis(isopropyyli)metyylisilyyli tai etenkin tert-butvvli-dimetvvlisilvvli.

20 Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X merkitsee ryhmää -CH(ORj)- ja R, on eri kuin vety, voidaan muuntaa silyyli-ryhmän yksinkertaisen, esim. hydrolyyttisen lohkaisun avulla erittäin aktiivisiksi vapaiksi 5-hydroksi-johdannaisiksi (X = -CH (ORj) -, Rj = H) .

25

Kaikista fenyyliryhmien tähteistä, jotka sisältävät yhden alkyyliryhmän, ovat edullisia etenkin sellaiset, joissa on 1 C-atomi. Nämä substituentit voivat esiintyä toisistaan riippumatta keskenäisessä sekajärjestyksessä. Alkyy-30 Iillä substituoituna bentsyyliryhmänä voidaan pitää myös a-metyylibentsyyliryhmää.

Käsitteellä alkyyli itsenäisesti tai jonkin toisen subs-tituentin osana tarkoitetaan riippuen esitettyjen hiili-35 atomien määrästä esimerkiksi seuraavia tähteitä: metyyli, etyyli, propyyli, butyyli, pentyyli, heksyyli, heptyyli, oktyyli, nonyyli ja dekyyli sekä isomeerit, kuten isopro- I! 92831 3 pyyli, isobutyyli, tert-butvvli ja isopentyyli. Halogee-nialkyyli halogeenialkyylikarbonyylioksissa merkitsee yksinkertaisesti...perhalogenoitua alkyylisubstituenttia, kuten CHCl2, CHF2, CH2C1, CC13, CF3, CH2F, CH2CH2C1 ja CHBr2.

5 Halogeenilla tarkoitetaan tässä ja seuraavassa fluoria, klooria, bromia tai jodia, etenkin fluoria, klooria tai bromia. Alkenyyli on vähintään kahdella C=C-kaksoissidok-sella luonnehdittu alifaattinen hiilivetytähde, esim. vinyyli, propenyyli-(1), allyyli, butenyyli-(1), butenyy-10 li-(2) ja butenyyli-(3).

C2-C6-alkoksialkoksi on alkoksitähde, jonka hiiliketju muodostuu korkeintaan 6 C-atomista ja on katkaistu happiatomilla, esim. OCH2OCH3, OCH2CH2OCH3, OCH2OC2H5, 15 OCH2CH2CH2OC3H7 tai OC(CH3)2OC2H5. Sykloalkyyli merkitsee syklopropyyliä, syklobutyyliä, syklopentyyliä, syklohek-syyliä tai sykloheptyyliä. Bentsyylioksilla substituoi-duista alkyyliryhmistä ovat etusijalla ne, jotka sisältävät 1-3 hiiliatomia alkyyliosassa, etenkin 2-bentsyy-20 lioksietyyli. Alkyylikarbonyyli tähteen R3 osana on edullisesti suoraketjuisesta tai haarautuneesta alkaanihapos-ta johdettu tähde, esim. CH3C0, C2H5CO, i-C3H7CO, n-C3H7CO, n-C4H9-CO tai tert-butvvli-CO. jossa alkyylitähteet voi olla myös halogenoitu edellä halogeenialkyylin yhteydessä 25 esitetyllä tavalla.

Furyyli, tienyyli ja alkyylioksetanyyli on sidottu molekyylin tähteeseen C-atomin, etenkin sen C-atomin kautta, joka on heteroatomin vieressä.

30

Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on -CH(OR,)- tai -C(=N-0H)-, ovat etusijalla, etenkin ne kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on -CH(ORj) - ja R, merkitsee vetyä. Silyyliryhmät R, ovat yleensä suojaryhmiä.

35

Etusijalla ovat kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R2 . merkitsee etyyliä.

4 92831

Seuraavat kaavan I mukaisten yhdisteiden alaryhmät ovat niiden erinomaisen parasitisidisen vaikutuksen johdosta etusijalla: 5 Ryhmä Ia: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on - CH(ORj) - ja R, on vety tai -Si (Rs) (RJ (R7) , jolloin R5, R^ ja R7 merkitsevät toisistaan riippumatta C,-C4-alkyyliä, R2 merkitsee metyyliä tai etyyliä, ja R3 merkitsee C2-C4-alke-nyyliä.

10

Ryhmä Ib: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on -CH (0Rt) -, R3 merkitsee C,-C10-alkyyliä, kerran C,-C3-alkok-silla, C,-C3-alkyylitiolla, C,-C4-alkyylikarbonyylioksilla, bentsyylioksilla tai C3-C7-sykloalkyylillä substituoitua 15 C,-C5-alkyy liä, C3-C7-sykloalkyyliä, fenyyliä, bentsyyliä tai fenyylirenkaassa yhdellä tai kahdella substituentil-la, joka on C1-C3-alkoksi, substituoitua tai alifaattises-sa C-atomissa kerran C1-C3-alkyylillä substituoitua bentsyyliä .

20

Ryhmä Ie: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on -CH(OR,) -, missä R, on vety tai tert-butyylidimetvvlisi-lyyli, tai -C(=N-0H)-, R2 merkitsee metyyliä tai etenkin etyyliä ja R3 merkitsee vetyä, C,-Cg-alkyyliä, C,-C5-alkyy-25 liä, joka on substituoitu 1-3 halogeeniatomilla, etenkin kloori- tai bromiatomilla, tai se on monosubstituoitu C,-C3-alkoksilla, C2-C6-alkoksialkoksilla, joka on substi-tuoimaton tai monosubstituoitu pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesti hydroksilla tai haloge-30 noidulla, etenkin klooratulla C^C^alkyylikarbonyyliok-silla, C[-C3-alkyylitiolla, C3-C7-sykloalkyylillä tai hydroksilla, C2-C4-alkyyliä, joka on monosubstituoitu substituoimattomalla tai halogenoidulla, etenkin klooratulla C,-C2-alkyylikarbonyylioksilla tai bentsyylioksilla, 35 C3-C7-sykloalkyyliä, mentyyliä, 1-adamantyylimetyyliä, fenyyliä, bentsyyliä, joka on substituoimaton, monosubs-. tituoitu fenyylirenkaassa fenoksilla tai substituoitu 5 92831 fenyylirenkaassa 1-2 C^-Cj-alkoksilla, a-metyylibentsyy-liä, furyylimetyyliä tai metyylioksetanyylimetyyliä.

Ryhmä Id: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on 5 -CH(ORj)- ja R! merkitsee vetyä tai tert-butvvlidimetyyli-silyyliä, R2 merkitsee etyyliä, ja R3 merkitsee vetyä, Cj-Cg-alkyyliä, C^-Cj-alkyyliä, joka on substituoitu 1-3 halogeeniatomilla, etenkin kloori- tai bromiatomilla, tai se on monosubstituoitu C,-C3-alkoksilla, C2-C6-alkoksial-10 koksilla, joka on substituoimaton tai monosubstituoitu pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesti hydroksilla tai halogenoidulla, etenkin klooratulla C,-C2-alkyylikarbonyylioksilla, C,-C3-alkyylitiolla, C3-C7-sykloalkyylillä tai hydroksilla, etyyliä, joka on 15 monosubstituoitu asetoksilla, klooriasetoksilla tai bent-syylioksilla, C3-C7-sykloalkyyliä, mentyyliä, 1-adaman-tyylimetyyliä, fenyyliä, bentsyyliä, joka on substituoimaton, monosubstituoitu fenyylirenkaassa fenoksilla tai substituoitu fenyylirenkaassa 1-2 C,-C3-alkoksilla, 20 α-metyylibentsyyliä, furyylimetyyliä tai metyylioksetanyylimetyyliä .

Ryhmä Ie: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on -CH(OR!) - ja R, merkitsee vetyä tai tert-butyylimetvvlisi-25 lyyliä, R2 merkitsee etyyliä, ja R3 merkitsee vetyä, C[-C8-alkyyliä, 2,2,2-tribromietyyliä, 2,2-bis(kloorimetyy-li)-propyyliä, 3-kloori-2,2-dimetyylipropyyliä, 2-etoksi-etyyliä, 2-(2-metoksietoksi)-etyyliä, 2-[2-(2-hydroksi-etoksi)-etoksi]-etyyliä, 2-{2-[2-(klooriasetoksi)-etok-30 si]-etoksi}-etyyliä, 2-metyylitioetyyliä, syklobutyylime-tyyliä, sykloheksyylimetyyliä, 2-hydroksietyyliä, bent-syylioksietyyliä, 2-asetoksietyyliä, 2-(klooriasetoksi)-etyyliä, syklopentyyliä, sykloheksyyliä, sykloheptyyliä, 2-metyyli-6-isopropyylisykloheksyyliä, 1-adamantyylime-35 tyyliä, fenyyliä, bentsyyliä, 3-fenoksibentsyyliä, 3,4-dimetoksibentsyyliä, α-metyylibentsyyliä, (3-metyyliok-’ setan-3-yyli)-metyyliä tai furfuryyliä.

92831 6

Ryhmä If: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on -CH(OR,)- ja R, on vety tai tert-butyylidimetyylisilyyli, R2 merkitsee etyyliä ja R3 merkitsee C^-Cj-alkyyliä, C2-C4-alkyyliä, joka on substituoitu 1-3 halogeeniatomilla, 5 etenkin bromiatomilla, tai se on monosubstituoitu Ci~C3-alkoksilla, C2-C6-alkoksialkoksilla, joka on substituoima-ton tai monosubstituoitu pääteasemassa olevassa alkok-siryhmässä terminaalisesti hydroksilla tai halogenoidul-la, etenkin klooratulla C,-C2-alkyylikarbonyylioksilla, 10 C^Cj-alkyylitiolla tai hydroksilla, 2-asetoksietyyliä, sykloheksyyliä, mentyyliä, 1-adamantyylimetyyliä, bents-yyliä, furyylimetyyliä tai metyylioksetanyylimetyyliä.

Ryhmä Ia: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on 15 -CH(OR,) - ja R, merkitsee vetyä tai tert-butvvlidimetvvli-silyyliä, R2 merkitsee etyyliä, ja R3 merkitsee C,-C5-al-kyyliä, 2,2,2-tribromietyyliä, 2-etoksietyyliä, 2—[2—(2— hydroksietoksi)etoksi]etyyliä, 2-(2-metoksletoksi)-etyyliä, 2-{2-[2-(klooriasetoksi)-etoksi]-etoksi}etyyliä, 2-20 metyylitioetyyliä, 2-hydroksietyyliä, 2-asetoksietyyliä, sykloheksyyliä, 2-metyyli-6-isopropyyli-sykloheksyyliä, 1-adamantyylimetyyliä, bentsyyliä, (3-metyylioksetan-3-yyli)-metyyliä tai furfuryyliä.

25 Ryhmä Ih: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on : -CH(OR,) - ja Rt on vety, R2 merkitsee etyyliä ja R3 mer kitsee C4-C5-alkyyliä, C4-C6-sykloalkyyliä, C4-C6-sykloal-kyylimetyyliä, fenyyliä, bentsyyliä tai a-metyylibentsyy-liä. Tämän ryhmän edustajina ovat mielenkiintoisia eten-30 kin 13-spiro-2'-[5'-(2"-metyylibutoksi)-tetrahydrofuraani ] -milbemysiini A4 ja 13-spiro-21 -[5'-(l"-metyyli-pro-poksi)-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4.

Ryhmä Ii: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X on -C(=N-35 OH)-, R2 merkitsee metyyliä tai etenkin etyyliä, ja R3 merkitsee C^Cj-alkyyliä, Cj-C3-alkyyliä, joka on substi-. tuoitu C,-C3-alkoksilla, tai C3-C7-sykloalkyyliä.

li 7 92831

Edullisia kaavan I mukaisia yksittäisyhdisteitä ovat esimerkiksi : 13-spiro-2 * — [51 — (2"-etoksi-etoksi)-tetrahydrofuraani]-5 milbemysiini A4, 13-spiro-2'-[51 -(2",2"-dimetyyli-propoksi)-tetrahydrofu-raani]-milbemysiini A4, 13-spiro-2'-[5'-sykloheksyylioksi-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4, 10 13-spiro-2·—[5'-bentsyylioksi-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4, 13-spiro-2'-[51-{2"-(2"'-metoksi-etoksi)-etoksi}-tetrahydrof uraani] -milbemysiini A4, 13-spiro-2'-[51-{2"-(2"'-(hydroksimetoksi)-etoksi)-etok-15 si}-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4, 13-spiro-2'-[51-{2"-(2"'-(2""-(klooriasetoksi)-etoksi)-etoksi)-etoksi}-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4/ 13-spiro-2'-[51-metoksi-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4 ja 20 13-spiro-21-[5'-(2"-hydroksi-etoksi)-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4.

Muita mainitsemisen arvoisia yksittäisyhdisteitä ovat edelleen myös 13-spiro-2'-[5'-(2"-metyylibutoksi)-tetra-25 hydrofuraani]-milbemysiini ja 13-spiro-21-[5'-(l"-me-: tyyli-propoksi)-tetrahydrofuraani]-milbemysiini A4.

Edelleen edullisia ovat myös kaavan I mukaiset analogiset 5-asemassa 5-0-tert-butvvlidimetvvlisilyyliryhmällä 30 suojatut yhdisteet.

Keksinnön mukainen menetelmä hyötyeläinten parasiitteja vastaan vaikuttavan 13-spiro-2'-[tetrahydrofuraani]-milbemysiini-johdannaisen valmistamiseksi, jonka kaava I 3 5 on 92831

O

P1* /\ ,CH' . λ λ i R ιΟ~·λ ,·π * n . / v \ .·· 1 1S 1 ' O^R? 5 °.··\ X/ (I) H,c' \ \[/i S.sW\

MsA», 10 jossa X merkitsee ryhmää -CH (OR() -C(=0)- tai -C (=N—OH) -, I*! merkitsee vetyä tai ryhmää Si(Rs) (R^) (R7) , missä R5, R^ ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta C,-C6-alkyyliä, R2 merkitsee metyyliä tai etyyliä, R3 merkit-15 see vetyä, C,-C10-alkyyliä, yksi, kaksi tai kolme kertaa halogeenilla tai kerran C^Cj-alkoksilla, mahdollisesti pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesta yhden kerran hydroksilla tai halogeeniC,-C4-alkyylikar-bonyylioksilla substituoidulla C2-C6-alkoksialkoksilla, C,-20 C3-alkyylitiolla, C3-C7-sykloalkyylillä, hydroksilla, bentsyylioksilla, C1-C4-alkyylikarbonyylioksilla tai halo-geeni-C,-C4-alkyylikarbonyylioksilla substituoitua C,-C5-alkyyliryhmää, C3-C7-sykloalkyyliä, mentyyliä, C2-C4-al-kenyyliä, 1-adamantyylimetyyliä, fenyyliä, bentsyyliä, 25 fenyylirenkaassa yhdellä tai kahdella substituentilia, : jotka ovat C,-C3-alkoksi- tai fenoksiryhmä, substituoitua bentsyyliryhmää, alifaattisessa C-atomissa kerran C,-C3-alkyylillä substituoitua bentsyyliryhmää, furyylimetyy-liä, tienyylimetyyliä tai Cj-C3-alkyylioksetanyylimetyyliä 30 on tunnettu siitä, että

a) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -CH (OR,) , kaavan II

35 11 9 92831 -°\

'~y\'m*A\ I

HO' · i i V^Rz 5 h r ’ \ X 7

H)C n I (ID

W

II I / /\??\ • · · <!>—! '·' XCH) 10 0R| mukainen yhdiste, jossa substituenteilla R, ja R2 on kaavan I yhteydessä määritelty merkitys, saatetaan reagoimaan happokatalysaattorin läsnäollessa reaktion suhteen inertissä liuottimessa kaavan III mukaisen 15

RjOH (III) yhdisteen kanssa, jossa substituentilla R3 on kaavan I yhteydessä määritelty merkitys, ja 20 b) haluttaessa menetelmävaihtoehdon a) mukaisesti saatava kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on -CH(OR,) ja R, on ryhmä -Si (R5) (¾) (R7) , jossa ryhmillä R5, R* ja R7 on kaavan I yhteydessä esitetyt merkitykset, samanaikaisesti mene- 25 telmävaihtoehdon a) mukaisen reaktion kanssa tai sen jälkeen muunnetaan happokatalysaattorin vaikutuksella kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa X on -CH(OH)-, ja c) haluttaessa menetelmävaihtoehdon a) tai b) mukaisesti 30 saatavassa kaavan Ie 9H3 · ,-CH 3 ·-· · « H 0 · ·

n V / ^ / \l I

v.-\ \/0BR*

KlC" \ i—! s ! *Ϋ N*, OK i 92831 10 mukaisessa yhdisteessä, jossa R] on vety ja substituen-teilla R2 ja R3 on kaavan I yhteydessä esitetyt merkitykset, kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -C(=0) ja ryhmillä R2 ja R3 on kaavan Ie yhteydessä 5 esitetyt merkitykset, ryhmä -CH(OH)- muunnetaan miedon hapetuksen avulla ryhmäksi -C(=0), jolloin saadaan vastaava kaavan Ib fH> . /\ ,CK' 10 Λ 'v /\ /‘\^/°\i i K J' >- · 5 · I * - 17* * ' l i s 7 I I·. /'\ \ . · ‘ 3 · « 0 fi R **

0 .· \ \ / U L

H,C·· π i (Ib) \

n V

15 l—\ > \n2 mukainen yhdiste, jossa substituenteilla R2 ja R3 on kaavan Ie yhteydessä esitetyt merkitykset, ja joka 20 d) haluttaessa kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -C(=N-OH) ja ryhmillä R2 ja R3 on kaavan Ib yhteydessä esitetyt merkitykset, saatetaan reagoimaan hydroksyyliamiinin tai sen suolan kanssa, jolloin saadaan 25 vastaava kaavan Ia «pH 3 κ·Ν #.CHj

Rl° \ ..·; ;s”i i·. A\ X/Oi R; 3 0 li3C' M ΐ 'Ia) \ /ϊχ??\ i—! s ! 35 mukainen yhdiste, jossa substituenteilla R2 ja R3 on kaavan Ib yhteydessä esitetyt merkitykset, ja

II

92831 11 e) haluttaessa, kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R} on pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesti yhden kerran halogeeni-C,-C4-alkyylikar-bonyylioksilla substituoitu C2-C6-alkoksialkoksi, menetel-5 män mukaisesti saatavassa kaavan I yhdisteessä, jossa R3 on pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesti yhden kerran hydroksilla substituoitu C2-C6-alkoksialkok-si, R3:een sisältyvä hydroksiryhmä muunnetaan halutuksi halogeeni-C^-C^-alkyylikarbonyylioksiryhmäksi saattamalla 10 reagoimaan vastaavan halogeeni-C,-C4-alkyylikarbonyyliha-logenidin kanssa.

Kaavan Ia mukaisten oksiimien [X = -C(=N-OH)-] valmistus tapahtuu siten, että kaavan Ib mukainen johdannainen 15 saatetaan reagoimaan hydroksyyliamiinin tai sen suolan, etenkin sen mineraalihapposuolan, etenkin sen hydrok-loridin kanssa. Reaktio suoritetaan tarkoituksenmukaisesti sopivassa liuottimessa, esim. alempialkanolissa, kuten metanolissa, etanolissa, propanolissa, eetterityyppisessä 20 yhdisteessä, kuten tetrahydrofuraanissa tai dioksaanissa, alifaattisessa karboksyylihapossa, kuten etikkahapossa tai propionihapossa, vedessä tai näiden liuottimien keskinäisessä seoksessa tai muissa tavanomaisissa reaktion suhteen inerteissä liuottimissa. Reaktiolämpötilat 25 voivat vaihdella laajalti. Tarkoituksenmukaisesti työs-: kennellään n. +0 - +100°C:ssa. Jos hydroksyyliamiini käytetään sen suolan muodossa, esim. hydrokloridina, niin on edullista, jos hapon (esim. HCl) keräämiseksi lisätään tähän tarkoitukseen tavanomaista emästä ja työskennellään 30 mahdollisesti vettä sitovan aineen, esim. molekyyliseulan läsnäollessa. Sopivina emäksinä tulevat kysymykseen orgaaniset ja epäorgaaniset emäkset, esim. tertiaariset amiinit, kuten trialkyyliamiinit (trimetyyliamiini, trietyyliamiini, tripropyyliamiini jne.), pyridiini ja 35 pyridiiniemäkset (4-dimetyyli-aminopyridiini, 4-pyrroli-dyyliaminopyridiini jne.), alkali- ja maa-alkalimetallien oksidit, hydridit ja hydroksidit, karbonaatit ja vetykar- « 92831 12 bonaatit (CaO, BaO, NaOH, KOH, NaH, Ca(OH)2f KHC03, NaHCOj, Ca(HC03)2, K2C03, Na2C03) sekä alkaliasetaatit, kuten CH3COONa tai CH3COOK. Näiden lisäksi myös alkalialkoholaa-tit, kuten C2H5ONa, n-^HyONa jne. ovat sopivia. Sopivim-5 pana pidetään trietyyliamiinia. Edullisimmin oksimointi voidaan suorittaa hydroksyyliamiinihydrokloridilla pyri-diinin läsnäollessa.

Kaavan Ib mukaiset johdannaiset voidaan valmistaa miedon 10 hapetuksen avulla, esim. pyrolusiitilla (Mn02) , Cr03/pyri-diinillä tai Oppenauer-hapetuksen avulla vastaavista vapaista, kaavan Ie mukaisista 5-hydroksi-johdannaisista. Reaktio voidaan suorittaa liuottimessa, kuten esimerkiksi eetterityyppisessä yhdisteessä tai halogenoidussa hiili-15 vedyssä tai tällaisten yhdisteiden keskinäisissä seoksissa, erittäin edullisesti dikloorimetaanissa.

Kaavan II mukaiset yhdisteet ovat uusia ja ne toimivat välituotteina. Rakenteensa johdosta ne on tarkoitettu 20 kaavan I mukaisten vaikuttavien aineiden valmistamiseksi. Keksinnön mukaisten menetelmätuotteiden valmistamiseksi käytetään edullisesti sellaisia kaavan II mukaisia lähtöaineita, jotka johtavat edellä erittäin edullisiksi kuvattuihin kaavan I mukaisiin yhdisteisiin, etenkin kaa-25 van I mukaisiin yksittäisiin yhdisteisiin.

Reaktio kaavan Ie mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi suoritetaan yleensä -30° - +70°C:ssa, etenkin -10° -+50°C:ssa. Tällöin työskennellään tarkoituksenmukaisesti 30 reaktion suhteen inertin liuottimen tai liuotinseoksen läsnäollessa. Tähän tarkoitukseen soveltuvat esim. ali-faattiset ja aromaattiset hiilivedyt, kuten bentseeni, tolueeni, ksyleeni, petrolieetteri, heksaani, halogenoi-dut hiilivedyt, kuten klooribentseeni, metyleenikloridi, 35 etyleenikloridi, kloroformi, hiilitetrakloridi, tetrak-loorietyleeni, eetterit ja eetterityyppiset yhdisteet, kuten dialkyylieetterit (dietyylieetteri, di-isopropyyli- li 92831 13 eetteri, tert-butvvlimetvvlieetteri jne.), anisoli, dioksaani, tetrahydrofuraani ja tällaisten liuottimien keskinäiset seokset.

5 Kaavan III mukaista yhdistettä käytetään useimmiten ylimääränä. Kaavan III mukaiset yhdisteet ovat tunnettuja tai ne voidaan valmistaa tunnettujen menetelmien mukaisesti .

10 Happokatalysaattoreiksi sopivat esimerkiksi karbok- syylihapot, kuten oksaalihappo ja etenkin sulfonihapot, kuten metaanisulfonihappo, p-tolueenisulfonihappo, kam-feri-10-sulfonihappo tai vast, niiden suolat, jotka on muodostettu tertiaaristen amiinien kanssa, kuten pyridi-15 nium-p-tolueenisulfonaatti.

Kaavan Ie mukaiset yhdisteet saadaan epimeeriseoksena C5'-atomin suhteen. Epimeerit voidaan valmistaa tästä fysikaalisen erotusmenetelmän avulla puhtaassa muodossa.

20 Fysikaalisiksi erotusmenetelmiksi sopivat esim. pyl- väskromatografia, pikakromatografia (Flashchromatogra-phie), paksukerroskromatografia, HPLC ja jakokiteytys.

Kaavan Ie mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa kuitenkin 25 myös sopivilla reaktioilla muista kaavan Ie mukaisista \ yhdisteistä, esim menetelmävaihtoehtojen b) tai e) mukai sesti.

Kaavan II mukaisten yhdisteiden valmistus tapahtuu siten, 30 että kaavan IV mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan inertissä liuottimessa kaavan V mukaisen Grignard-rea- genssin kanssa: CH, /v ..CHj \/\/\?Αΐ ί 35 ! !VÄV H> /s /SBr -- <Π) 3 II A A /* * X» i/H <v> /^f\ (IV) ky nch3 uRi 92831 14 jolloin substituenteilla Rt ja R2 on kaavan I yhteydessä määritelty merkitys.

Reaktio suoritetaan yleensä -80° - +70°C:ssa, etenkin 5 -50° - +50eC:ssa. Tällöin työskennellään tarkoituksen mukaisesti reaktion suhteen inertissä liuottimessa tai liuotinseoksessa. Tähän tarkoitukseen sopivat esim. alifaattiset tai aromaattiset hiilivedyt, kuten bentsee-ni, ksyleeni, petrolieetteri, heksaani, eetterit ja 10 eetterityyppiset yhdisteet, kuten dialkyylieetteri (di-etyylieetteri, di-isopropyylieetteri, tert-butyylimetyy-lieetteri jne.), anisoli, dioksaani, tetrahydrofuraani ja tällaisten liuottimien keskinäiset seokset.

15 Kaavan V mukainen Grignard-reagenssi voidaan saada liuoksena saattamalla reagoimaan vastaava bromidi jossakin yllä mainitussa liuottimessa magnesiumin kanssa ja käyttää suoraan edelleen ilman, että se on eristettävä ja puhdistettava ensin.

20

Kaavan IV mukaiset yhdisteet ovat tunnettuja tai ne voidaan valmistaa tunnettujen menetelmien mukaisesti. Esimerkiksi kaavan IV mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa julkaisuissa EP 180 539 ja EP 184 989 esitettyjen mene-25 telmien mukaisesti tai vastaavalla tavalla siten, että : kaavan VI

CHi / CHj 1 . H 0 ·

/ S / \:/ \l I

ΊΠ · N· · · · 30 ! ! iVi'», "lC’ Λ l

\ V

Ϊ m'.' rf i <VI) 6ri

K

92831 15 yhdiste, jossa substituenteilla R, ja R2 on kaavan I yhteydessä esitetty merkitys, muunnetaan ensimmäisessä 5 vaiheessa perhapoilla kaavan VII mukaisiksi 14,15-epoksi-deiksi: 1. vaihe l13 , s lii 1 10 5 1 is (VI) (VII) ja kaavan VII mukaiset 14,15-epoksidit saatetaan tämän jälkeen reagoimaan erityisen kompleksireagenssin avulla 15 kaavan Vili mukaisiksi 15-hydroksi-yhdisteiksi: CH 3 ♦ « s * *11*

2. vaihe I ι s » ÖH

20 /vh) m ja n riiP“ (VIII) (VII) punatta - 1,2 tai arvojen (Vili) 1 ja 2 välillä

Eräässä toisessa vaiheessa kaavan VIII mukaiset 15-hyd-roksi-yhdisteet saatetaan sitten reagoimaan kromaatti-, 25 halokromaatti-tai dikromaatti-ionien, etenkin pyridinium-dikromaatin kanssa, jolloin kaavan Vili mukaisena läh-töyhdisteenä käytetään mieluummin sellaista, jossa 5-OH-ryhmä on suojattu ja joka voi esiintyä esimerkiksi 5-si-lyylioksiryhmänä: 30 ?H, CH, >\ y\ 1 (Pyridin), Cr2o7] „„ !.

, .. / \ ---- H0V / S / \

3. vaihe i s \ · N

OH \ I

(VIII> \ ia (IX) 35 fH,

y\A

(IV) 92831 16 jolloin haluttujen kaavan IV mukaisten 13-okso-milbemy-siinien lisäksi muodostuu myös 13-hydroksi-yhdisteitä, 5 jotka voidaan erottaa tunnettujen menetelmien mukaisesti.

Useimmat esitetyt reaktiot suoritetaan edullisesti suoja-kaasun, kuten typen tai argonin atmosfäärissä.

10 Kaavan VI mukaiset yhdisteet ovat tunnettuja tai ne voidaan valmistaa tunnetuista yhdisteistä tunnettujen menetelmien mukaisesti.

Kaavan IV mukaiset 13-okso-johdannaiset voidaan valmistaa 15 edelleen määrätietoisesti kaavan IX mukaisista 13/3-hyd-roksi-johdannaisista hapettamalla dimetyylisulfoksidi (DMSO)/oksalyylikloridilla. Reaktio suoritetaan edullisesti -60°C:n...huoneen lämpötilan välisissä lämpötiloissa. Liuottimina tulevat kysymykseen itse DMSO sekä aro-20 maattiset hiilivedyt, kuten bentseeni, tolueeni, ksyleeni ja klooratut hiilivedyt, kuten esimerkiksi dikloorimetaa-ni. Työskennellään edullisesti lisäämällä emästä, kuten trietyyliamiinia.

25 Tunnettuihin yhdisteisiin kuuluvat kaavan M: CH j ·. .CHj

I . H 0 / V

/ \ / \t/ \t i

Λ ’ UV^R

30 CH3 · J (M) \ \ / » ♦ · · 6—' ! ÄV xcHj mukaiset milbemysiinit eli 35 92831 17 R = CH3, a = -CH- = milbemysiini A3 (US-patenttijulkai-OH su 3,950,360) R = C2H5, a = -CH- = milbemysiini A4 (US-patenttijulkai-OH su 3,950,360) 5

Silyloimalla 5-OH-ryhmä valmistetaan kaikki ne kaavojen I, II ja IV mukaiset johdannaiset, joissa R, merkitsee muuta kuin vetyä. Silylointiin käytetään tarkoituksenmukaisesti kaavan Y-Si (Rs) (R*) (R7) mukaista silaania, jossa 10 R5, R6 ja R7 merkitsevät toisistaan riippumatta C,-C6-alkyy- liä, ja muodostavat yhdessä piiatomin kanssa esimerkiksi trimetyylisilyylin, tris(tert-butyyli)silyylin, teksyyli-dimetyylisilyylin, bis(isopropyyli)metyylisilyylin tai etenkin tert-butvvli-dimetyylisilvvlin. Y merkitsee jota-15 kin silyylilähtöryhmää, joita ovat esimerkiksi bromi, kloori, syano, atsido, asetamido, trifluoriasetoksi ja trifluorimetaanisulfonyylioksi. Tätä luetteloa ei ole kuitenkaan mitenkään rajoitettu näihin, vaan alan ammattihenkilö tietää muita tyypillisiä silyylilähtöryhmiä.

20 5-O-silyloinnit suoritetaan vedettömässä ympäristössä, mieluummin inerteissä liuottimissa ja etenkin edullisesti aproottisissa liuottimissa. Reaktio suoritetaan edulli-25 sesti 0° - +80°C:ssa, etenkin +10° - +40°C:ssa. Edullisesti lisätään myös orgaanista emästä. Tällaisina tulevat kysymykseen esimerkiksi tertiaariset amiinit, kuten trietyyliamiini, trietyleenidiamiini, triatsoli ja etenkin pyridiini, imidatsoli tai 1,8-diatsabisyklo-30 [5.4.0]-undek—7—eeni (DBU).

5-asemassa olevan silyylitähteen R, poisto tapahtuu selektiivisen laimean hydrolyysin avulla (-* R, = H) esim. aryylisulfonihapolla alkoholisessa liuoksessa, HF:lla 35 asetonitriilissä, HFx»pyridiinillä tetrahydrofuraanissa tai jollakin muulla ammattihenkilön tuntemalla menetelmällä.

92831 18

Kaavan I mukaiset yhdisteet soveltuvat erinomaisesti eläinten tuholaisten, etenkin eläinten parasiitteinä esiintyvien ekto-parasiittien torjuntaan. Viimeksi mainittuihin kuuluvat lahkossa Acarina etenkin heimojen 5 Ixodidae, Dermanyssidae, Sarcoptidae ja Psoroptidae tuholaiset, lahkot Mallophaga, Siphonaptera ja Anoplura (esim. heimo Haemotopinidae), lahkossa Diptera etenkin heimojen Muscidae, Calliphoridae, Oestridae, Tabanidae, Hippoboscidae ja Gastrophilidae tuholaiset.

10

Yhdisteitä I voidaan käyttää myös hygieniatuholaisia vastaan, etenkin lahkon Diptera (heimot Sarcophagidae, Anop-hilidae ja Culicidae), lahkon Orthoptera, lahkon Dictyop-tera (esim. heimo Blattidae) ja lahkon Hymenoptera (esim.

15 heimo Formicidae) tuholaisia vastaan.

Edelleen yhdisteet vaikuttavat kaikissa kehitysvaiheissa olevia sisälmysmatoja vastaan, joista endoparasitääriset sukkulamadot voivat aiheuttaa vaikeita sairauksia nisäk-20 käissä ja siipikarjassa, esim. lampaissa, sioissa, vuohissa, naudoissa, hevosissa, aaseissa, koirissa, kissoissa, marsuissa tai häkkilinnuissa. Tyypillisiä tällaisia sukkulamatoja ovat Haemonchus, Trichostrongylus, Oster-tagia, Nematodirus, Cooperia, Ascaris, Bunostonum, Oeso-25 phagostonum, Chabertia, Trichuris, Strongylus, Trichone-ma, Dictyocaulus, Capillaria, Heterakis, Toxocara, As-caridia, Oxyuris, Ancylostoma, Uncinaria, Toxascaris ja Parascaris. Kaavan I mukaisten yhdisteiden erityisenä etuna on niiden tehokkuus sellaisia parasiittejä vastaan, 30 jotka ovat bentsimidatsoliin perustuvia vaikuttavia aineita vastaan resistenttejä.

Määrätyt sukujen Nematodirus, Cooperia ja Oesophagostomum lajeista hyökkäävät isäntäeläimen intestinaaliseutuun, 35 kun taas muut suvuista Haemonchus ja Ostertagia ovat parasiitteinä mahassa ja suvusta Dictyocaulus ovat parasiitteinä keuhkokudoksessa. Heimojen Filariidae ja Seta-

II

92831 19 riidae parasiitit esiintyvät sisäisessä solukudoksessa ja elimissä, esim. sydämessä, verisuonissa, imusuonissa ja subkutaanisessa kudoksessa. Näistä mainittakoon ennen kaikkea koiran sydänmato, Dirofilaria immitis. Kaavan I 5 mukaiset yhdisteet ovat erittäin tehokkaita näiden parasiittien suhteen.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää suoraan eläimiin, joissa on parasiitteja, antamalla yhdisteitä 10 suoraan eläimille tai käyttämällä niitä eläinten ympäristössä, esim navetoissa, aitauksissa, talleissa ja muissa tiloissa, joissa eläimiä pidetään.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, joita levitetään parasiit-15 tien vaivaamien eläinten ympäristöön, käytetään muuttamattomassa muodossa tai mieluummin yhdessä valmistustekniikassa tavanomaisten apuaineiden kanssa ja ne käsitellään tästä syystä tunnetulla tavalla formulaatioiksi, esim. emulsiokonsentraateiksi, suoraan suihkutettaviksi 20 tai laimennettaviksi liuoksiksi, laimennetuiksi emulsioiksi, ruiskutusjauheiksi, liukeneviksi jauheiksi, pölytysaineiksi tai granulaateiksi, myös polymeerisissä aineissa oleviksi kapseloinneiksi. Käyttömenetelmä, kuten suihkuttaminen, sumutus, pölytys, levitys tai kastelemi-25 nen valitaan samoin kuin formulaatioiden laji pyrittyjen . päämäärien ja olemassa olevien olosuhteiden mukaisesti.

Valmisteet, s.o. kaavan I mukaista vaikuttavaa ainetta sisältävät koostumukset valmistetaan tunnetulla tavalla, 30 esim. sekoittamalla ja/tai jauhamalla tehokkaasti vaikuttavat aineet täyteaineiden, kuten liuottimien tai kiinteiden kantoaineiden ja mahdollisesti pinta-aktiivisten yhdisteiden (tensidien) kanssa.

35 Liuottimina tulevat kysymykseen: aromaattiset hiilivedyt, etenkin fraktiot Cg - C12, kuten esim. ksyleeniseokset tai substituoidut naftaliinit, ftaalihappoesterit, kuten di- 92831 20 butyyli- tai dioktyyliftalaatti, alifaattiset hiilivedyt, kuten sykloheksaani tai parafiinit, alkoholit ja glykolit sekä niiden eetterit ja esterit, kuten etanoli, etyleeni-glykoli, etyleeniglykolimonometyyli- tai -etyylieetteri, 5 ketonit, kuten sykloheksanoni, vahvasti polaariset liuottimet, kuten N-metyyli-2-pyrrolidoni, dimetyylisulfoksidi tai dimetyyliformamidi, sekä mahdollisesti epoksidoidut kasviöljyt, kuten epoksidoitu kookosöljy tai soijaöljy, tai vesi.

10

Kiinteinä kantoaineina, esim. pölytysaineita ja disper-goitavia jauheita varten, käytetään yleensä luonnollisia kivijauheita, kuten kalsiittia, talkkia, kaoliinia, mont-morilloniittiä tai attapulgiittia. Fysikaalisten ominai-15 suuksien parantamiseksi voidaan käyttää myös korkeadis- perssiä piihappoa tai korkeadisperssejä imukykyisiä poly-meraatteja. Rakeistettuina, adsorptiivisina granulaatti-kantoaineina tulevat kysymykseen huokoiset tyypit, kuten esim. hohkakivi, tiilimurska, sepioliitti tai bentoniit-20 ti, ei-sorptiivisinä kantoaineina tulevat kysymykseen esim. kalsiitti tai hiekka. Tämän lisäksi voidaan käyttää useita epäorgaanisia tai orgaanisia esigranuloituja aineita, kuten etenkin dolomiittia tai jauhettuja kasvi jätteitä.

25

Pinta-aktiivisina yhdisteinä tulevat kysymykseen valmistettavan vaikuttavan aineen laadusta riippuen ei-iono-geeniset, kationi-ja/tai anioniaktiiviset tensidit, joilla on hyvät emulgointi-, dispergointi- ja kostutus-30 ominaisuudet. Tensideillä tarkoitetaan myös tensidiseok-sia.

Sopivia anionisia tensidejä voivat olla sekä nk. vesiliukoiset saippuat että vesiliukoiset synteettiset pinta-ak-35 tiiviset yhdisteet.

Saippuoina mainittakoon korkeampien rasvahappojen (C10- li 92831 21 C22) alkali-, maa-alkali- tai mahdollisesti substituoidut ammoniumsuolat, kuten esim. öljy- tai steariinihapon Na-tai K-suolat, tai luonnollisten rasvahapposeosten vastaavat suolat, jotka voidaan saada esim. kookos- tai taliöl-5 jystä. Edelleen mainittakoon myös rasvahappo-metyyli-tau-riinisuolat.

Useimmiten käytetään kuitenkin niin kutsuttuja synteettisiä tensidejä, etenkin rasvasulfonaatteja, rasvasulfaat-10 teja, sulfonoituja bentsimidatsoli-johdannaisia tai al-kyyliaryylisulfonaattej a.

Rasvasulfonaatit tai -sulfaatit esiintyvät yleensä alkali-, maa-alkali- tai mahdollisesti substituoituina ammo-15 niumsuoloina ja niissä on 8 - 22 C-atomia sisältävä al- kyylitähde, jolloin alkyyli käsittää myös asyylitähteiden alkyyliosan, esim. ligniinisulfonihapon, dodekyylirik-kihappoesterin tai luonnollisista rasvahapoista valmistetun rasva-alkoholisulfaattiseoksen Na- tai Ca-suola.

20 Näihin kuuluvat myös rasva-alkoholi-etyleenioksidi-addi-tiotuotteiden rikkihappoestereiden ja sulfonihappojen suolat. Sulfonoidut bentsimidatsoli-johdannaiset sisältävät mieluummin 2 sulfonihapporyhmää ja yhden 8-22 C-atomia sisältävän rasvahappotähteen. Alkyyliaryylisul-25 fonaatteja ovat esim. dodekyylibentseenisulfonihapon, dibutyylinaftaliinisulfonihapon tai naftaliinisulfoni-happo-formaldehydi-kondensaatiotuotteen Na-, Ca- tai trietanoliamiinisuolat.

30 Edelleen tulevat kysymykseen myös vastaavat fosfaatit, kuten esim. p-nonyylifenoli-(4-14)-etyleenioksidi-addi-tiotuotteen fosforihappoesterin suolat tai fosfolipidit.

Ei-ionisia tensidejä ovat etenkin alifaattisten tai syk-35 loalifaattisten alkoholien tai tyydyttyneiden tai tyydyt-tymättömien rasvahappojen ja alkyylifenolien polyglykoli-eetterijohdannaiset, jotka sisältävät 3-30 glykolieet- 92831 22 teriryhmää ja 8 - 20 hiiliatomia (alifaattisessa) hiili-vetyosassa ja 6 - 18 hiiliatomia alkyylifenolien alkyyli-osassa.

5 Muita sopivia ei-ionisia tensidejä ovat vesiliukoiset, 20 - 250 etyleeniglykolieetteriryhmää ja 10 - 100 propy-leeniglykolieetteriryhmää sisältävät polyetyleenioksidi-additiotuotteet, jotka on muodostettu polypropyleenigly-kolin, etyleenidiaminopolypropyleeniglykolin ja alkyyli- 10 polypropyleeniglykolin kanssa, joissa on l - 10 hiiliatomia alkyyliketjussa. Nämä yhdisteet sisältävät tavallisesti 1-5 etyleeniglykoliyksikköä propyleeniyksikköä kohden.

15 Esimerkkeinä ei-ionisista tensideistä mainittakoon nonyy-lifenolipolyetoksietanolit, risiiniöljypolyglykolieette-rit, polypropyleeni/polyetyleenioksidi-additiotuotteet, tributyylifenoksipolyetoksietanoli, polyetyleeniglykoli ja oktyylifenoksipolyetoksietanoli.

20

Edelleen kysymykseen tulevat myös polyoksietyleenisorbi-taanin rasvahappoesterit, esim. polyoksietyleenisorbitaa-ni-trioleaatti.

25 Kationiset tensidit ovat mieluummin kvaternaarisia ammo-niumsuoloja, jotka sisältävät N-substituenttina vähintään yhden 8-22 C-atomia sisältävän alkyylitähteen ja muina substituentteina alempia, mahdollisesti halogenoituja alkyyli-, bentsyyli- tai alempia hydroksialkyylitähteitä.

30 Suolat esiintyvät mieluummin halogenideina, metyylisul-faatteina tai etyylisulfaatteina, esim. stearyylitrime-tyyliammoniumkloridi tai bentsyylidi(2-kloorietyyli)etyy-liammoniumbromidi.

35 Valmistustekniikassa tavanomaisia tensidejä on esitetty mm. julkaisussa: "1986 International Mc Cutcheon's Emulsifiers and Deter- 92831 23 gents", The Manufacturing Confectioner Publishing Co., Glen Rock, New Jersey, USA.

Pestisidiset valmisteet sisältävät yleensä 0,01 - 95%, 5 etenkin 0,1 - 80% kaavan I mukaista vaikuttavaa ainetta, 5 - 99,99% kiinteää tai nestemäistä lisäainetta ja 0 -25%, etenkin 0,1 - 25% tensidiä.

Vaikkakin kauppatavarana etusijalla ovat pikemminkin kon-10 sentroidut koostumukset, loppukuluttaja käyttää yleensä laimennettuja koostumuksia, joiden vaikuttavan aineen pitoisuus on 1 - 10.000 ppm.

Koostumukset voivat sisältää myös muita lisäaineita, 15 kuten stabiliontiaineita, vaahtoamisenestoaineita, viskositeetin säätöaineita, sideaineita, kiinnitysaineita sekä lannoitteita tai muita vaikuttavia aineita erityisten vaikutusten aikaansaamiseksi.

20 Kaavan I mukaisia yhdisteitä, joita käytetään suoraan eläimiin, joissa on parasiitteja, annetaan muuntamat-tomassa muodossa tai farmaseuttisten aineiden muodossa.

Käytettäessä kaavan I mukaisia yhdisteitä tai vastaavia 25 farmaseuttisia aineita endoparasitääristen koti- ja hyötyeläinten, kuten nautojen, lampaiden, vuohien, kissojen ja koirien sukkulamatojen, heisimatojen ja imumato-jen torjuntaan yhdisteitä tai aineita voidaan antaa eläimille sekä yksittäisannoksena että toistuvasti, 30 jolloin yksittäiset annokset ovat eläinlajista riippuen . . mieluummin 0,01 - 10, etenkin 0,1 - 10 mg/kg. Pitkäaikai sella käsittelyllä saadaan useissa tapauksissa parempi vaikutus tai voidaan tullaan toimeen pienemmillä koko-naisannoksilla. Vaikuttava aine tai vast, sitä sisältävä 35 farmaseuttinen aine voidaan lisätä myös rehuun tai juomiin. Valmisrehu sisältää vaikuttavan aineen yhdistelmiä mieluummin 0,005 - 0,1 paino-%:n konsentraationa. Far- 92831 24 maseuttiset aineet voidaan antaa eläimille peroraalisesti liuosten, emulsioiden, suspensioiden, jauheiden, tablettien, pillereiden tai kapseleiden muodossa. Mikäli liuosten tai emulsioiden fysikaaliset ja toksilogiset ominai-5 suudet sallivat, kaavan I mukaiset yhdisteet tai vast, niitä sisältävät farmaseuttiset aineet voidaan myös esimerkiksi injektoida eläimiin subkutaanisesti, antaa intraruminaalisesti tai levittää pour-on-menetelmällä eläinten päälle. Edelleen vaikuttavan aineen antaminen 10 eläimille on mahdollista myös nuolukivien (suolan) tai melassilohkojen muodossa. Peroraaliseen ja/tai intrarumi-naaliseen annostukseen käytetään edullisesti vesipitoisia farmaseuttisia koostumuksia.

15 Kaavan I mukaisen vaikuttavan aineen ia farmaseuttisten koostumusten valmistusesimerkkeiä (% = painoprosentti)

Ruiskutusjauhe a) b) c) 20 vaikuttavaa ainetta 25% 50% 75%

Na-ligniinisulfonaattia 5% 5%

Na-lauryylisulfaattia 3% - 5%

Na-di-isobutyylinaftaliinisulfonaattia - 6% 10% oktyylifenolipolyeteeniglykolieetteriä - 2% - 25 (7-8 moolia AeO) korkeadisperssiä piihappoa 5% 10% 10% kaoliinia 62% 27%

Vaikuttava aine sekoitetaan hyvin lisäaineiden kanssa ja 30 jauhetaan hyvin sopivassa myllyssä. Saadaan ruiskutusjauhe, joka voidaan laimentaa vedellä halutun konsentraation omaaviksi suspensioiksi.

II

92831 25

Emulsio-konsentraatti vaikuttavaa ainetta 10 % oktyylifenolipolyeteeniglykolieetteriä 3 % (4-5 moolia AeO) 5 Ca-dodekyylibentseenisulfonaattia 3 % risiiniöljypolyglykolieetteriä 4 % (36 moolia AeO) sykloheksanonia 30 % ksyleeniseosta 50 % 10 Tästä konsentraatista voidaan valmistaa laimentamalla vedellä halutun konsentraation omaavia emulsioita.

Pölvtvsaine 15 a) b) vaikuttavaa ainetta 5 % 8 % talkkia 95 % kaoliinia - 92 % 20 Saadaan käyttövalmis pölytysaine, jossa vaikuttava aine on sekoitettu kantoaineen kanssa ja jauhettu hyvin sopivassa myllyssä.

Suulakepuristettu qranulaatti 25 : vaikuttavaa ainetta 10 %

Na-ligniinisulfonaattia 2 % karboksimetyyliselluloosaa 1 % kaoliinia 87 % 30

Vaikuttava aine sekoitetaan lisäaineiden kanssa, jauhetaan ja kostutetaan vedellä. Tämä seos suulakepuristetaan ja kuivataan tämän jälkeen ilmavirrassa.

92831 26

Tabletit tai vast, suuret pillerit I vaikuttavaa ainetta 33,0 % metyyliselluloosaa 0,80 % 5 piihappoa, korkeadisperssiä 0,80 % maissitärkkelystä 8,40 %

Metyyliselluloosa sekoitetaan veteen ja sen annetaan paisua; piihappo sekoitetaan tähän paisuneeseen seokseen ja 10 suspendoidaan homogeenisesti. Vaikuttava aine ja maissi-tärkkelys sekoitetaan. Tähän seokseen muokataan vesipitoinen suspensio ja vaivataan taikinaksi. Tämä massa granuloidaan seulan läpi (silmäkoko 12 M) ja sitten se kuivataan.

15 II maitosokeria, kiteistä 22,50 % maissitärkkelystä 17,00 % mikrokit. selluloosaa 16,50 % magnesiumstearaattia 1,00 % 20

Kaikki 4 apuainetta sekoitetaan hyvin.

Vaiheet I ja II sekoitetaan ja puristetaan tableteiksi 25 tai suuriksi pillereiksi.

Injektoitavat valmisteet A. Öljyinen kantoaine (hidas vapautuminen) 30 vaikuttavaa ainetta 0,1 - 1,0 g maapähkinäöljyä ad 100 ml vaikuttavaa ainetta 0,1 - 1,0 g 35 sesaamiöljyä ad 100 ml

Valmistus: Vaikuttava aine liuotetaan öljyn osaan sekoit- n 92831 27 taen ja mahdollisesti hieman lämmittäen, täytetään jäähtymisen jälkeen laskettuun määrään ja steriilisuodatetaan sopivan kalvosuodattimen läpi (0,22 μιη) .

5 B. Sekoittuva liuotin (keskinkertainen vapautumisnopeus) vaikuttavaa ainetta 0,1 - 1,0 g 4-hydroksimetyyli-l,3-dioksolaania (glyserolimuoto) 40 g 10 1,2-propaanidiolia ad 100 ml vaikuttavaa ainetta 0,1 - 1,0 g glyserolidimetyyliketaalia 40 g 1,2-propaanidiolia ad 100 ml 15

Valmistus: Vaikuttava aine liuotetaan liuottimen osaan sekoittaen, täytetään laskettuun määrään ja steriilisuodatetaan sopivan kalvosuodattimen (0,22 μτη) läpi.

20 C. Vesipitoinen solubilisaatti (nopea vapautuminen) vaikuttavaa ainetta 0,1 - 1,0 g polyetoksyloitua risiiniöljyä (40 etyleenioksidiyksikköä)* 40 g 25 1,2-propaanidiolia 20 g . bentsyylialkoholia 1 g aqua ad injekt. ad 100 ml * Kaupasta saatavana nimellä CREMOPHOR® EL (BASF AG) 30 vaikuttavaa ainetta 0,1 - 1,0 g polyetoksyloitua sorbitaanimono-oleaattia (20 etyleenioksidiyksikköä)** 8 g 4-hydroksimetyyli-l,3-dioksolaania (glyserolimuoto) 20 g 35 bentsyylialkoholia 1 g aqua ad injekt. ad 100 ml ** Kaupasta saatavana nimellä TWEEN® 80 (ICI) 92831 28

Valmistus: Vaikuttava aine liuotetaan liuottimiin ja ten-sidiin ja täytetään vedellä laskettuun määrään. Steriili-suodatetaan sopivan kalvosuodattimen läpi, jonka huokoskoko on 0,22 Mm.

5

Biologiset esimerkit B-l. Vaikutus Lucilia sericatan L,-toukkia vastaan 10 1 ml testattavan aktiivisen aineen suspensiota sekoite taan erityisen toukkienkasvatusväliaineen (3 ml) kanssa n. 50°C:ssa siten, että muodostuu homogenaatti, jossa on valinnaisesti 250 ppm tai 125 ppm vaikuttavaa ainetta. Jokaiseen reagenssilasinäytteeseen käytetään n. 30 Lu-15 cilia-toukkaa (LJ . 4 päivän kuluttua määritetään kuol- leisuusmäärä. Kaavan I mukaiset yhdisteet saavat aikaan 125 ppm:n konsentraatiossa 100-%:sen vaikutuksen.

B-2. Akarisidinen vaikutus Boophilus microplusin (Biarra-20 kanta) suhteen PVC-levylle kiinnitetään vaakasuorasti tarra siten, että sille voidaan liimata 10 Boophilus microplusin (Biarra-kanta) punkkinaarasta, jotka ovat imeneet itsensä täyteen 25 verta, vierekkäin riviin selästään. Jokainen punkki injektoidaan injektioneulalla 1 Ml:lla nestettä, joka sisältää polyeteeniglykolin ja asetonin l:l-seosta ja johon on liuotettu määrätty vaikuttavan aineen määrä, joka on 1,0 Mg/punkki. Kontrollieläimet saavat vaikuttavasta 30 aineesta vapaan injektion. Käsittelyn jälkeen eläimet pidetään normaaliolosuhteissa insektariumissa n. 28°C:ssa ja 80 %:n suhteellisessa ilmankosteudessa, kunnes ne munivat ja toukat ovat kuoriutuneet kontrollieläinten munista.

35

Kaavan I mukaiset, kuten esim. valmistusesimerkkien mukaiset yhdisteet saavat aikaan tässä vaikuttavan aineen

II

92831 29 konsentraatiossa sen, että vielä 30 päivän kuluttua yhdeksän kymmenestä punkkinaaraasta (= 90 %) munivat munia, jotka eivät ole kuoriutumiskelpoisia.

5 B-3. Koe sukkulamadoilla (Haemonchus contortus ja Tricho- strongylus colubriformis) infektoiduilla lampailla

Vaikuttava aine muodostetaan suspensiona, sijoitetaan ma-hasondilla tai injektiolla lampaan pötsiin, joka on in-10 fektoitu keinotekoisesti Haemonchus contortusilla ja Tri-chostrongylus colubriformisilla. Annosta kohden käytetään 1-3 eläintä. Jokainen lammas käsitellään vain kerran yhdellä ainoalla annoksella, nimittäin valinnaisesti 1 mg/kg:n tai 0,2 mg/kg:n annoksella. Arviointi tapahtuu 15 vertaamalla ennen käsittelyä ja käsittelyn jälkeen lampaiden ulosteeseen erittyneiden matomunien määrä. Samanaikaisesti ja samalla tavoin infektoidut, mutta käsittelemättömät lampaat toimivat kontrollina. Kaavan I mukaisilla, kuten esim. valmistusesimerkkien mukaisilla 20 yhdisteillä on tässä testissä 0,2 mg/kg:n annoksessa hyvä vaikutus, so. että verrattuna käsittelemättömiin, mutta infektoituihin vertailuryhmiin käsitellyissä lampaissa ei esiintynyt sukkulamatoja (= ulosteen matomunien täydellinen häviäminen).

25 . B-4. Larvisidinen vaikutus Aedes aegyptin suhteen

Veden (150 ml) pinnalle, joka on säiliössä, pipetoidaan niin paljon vaikuttavan aineen 0,l-%:sta asetonista 30 liuosta, että konsentraatio on valinnaisesti 10 ppm, 3,3 ppm ja 1,6 ppm. Asetonin haihtumisen jälkeen säiliöön laitetaan n. 30 - 40 3-päiväistä Aedes-toukkaa. 1, 2 ja 5 päivän kuluttua tutkitaan kuolleisuus.

35 Kaavan I mukaiset, kuten esim. valmistusesimerkkien mukaiset yhdisteet saivat aikaan tässä testissä 1,6 ppm:n konsentraatiossa jo yhden päivän kuluttua kaikkien touk- 92831 30 kien täydellisen tuhoutumisen.

B-5. Milbisidinen vaikutus Dermanyssys gallinaeta vastaan 5 2 - 3 ml testiliuosta (100, 10, 1 ja 0,1 ppm aktiivista ainetta) lisätään ylhäältä avoimeen lasisäiliöön ja lasi-säiliöön laitetaan n. 200 punkkia, jotka ovat eri kehitysvaiheissa. Lasisäiliö suljetaan vanutupolla ja sitä ravistellaan 10 minuuttia tasaisesti, jotta punkit ovat 10 kostuneet täysin. Tämän jälkeen säiliö laitetaan ylösalaisin, kunnes ylimääräinen testiliuos on imeytynyt vanuun. Säiliö käännetään uudelleen ja käsiteltyjä toukkia tutkitaan laboratorio-olosuhteissa kolmen päivän ajan testiaineiden tehokkuuden arvioimiseksi, jolloin kuol-15 leisuutta pidetään tehokkuuden mittapuuna.

Kaavan I mukaisilla, kuten esim. valmistusesimerkkien mukaisilla yhdisteillä on 100 ppm:n konsentraatiossa 100 %:n vaikutus.

20

Valmistusesimerkkeiä Välituotteiden valmistus 25 AI. 5-0-tert-butyylidimetyylisilyyli-13/3-[2-(l, 3-diokso-lan-2-yyli)etyyli]-13a-hydroksi-milbemysiini A4:n valmistus_

Suspensioon, jossa oli 650 mg magnesiumlastuja 20 ml:ssa 30 tetrahydrofuraania (THF), lisättiin 2 1/2 tunnin kuluessa 40°C:ssa liuos, jossa oli 2,40 ml 2-(2-bromietyyli)-1,3-dioksolaania 10 ml:ssa THF:a. Grignard-reagenssin muodostamisen käynnistämiseksi reaktion alussa lisättiin muutamia jodikiteitä. Reaktioseosta sekoitettiin tämän jälkeen 35 vielä 30 minuutin ajan 40°C:ssa argon-atmosfäärissä ja sitten se dekantoitiin. Näin saatiin 2-(1,3-dioksolan-2-yyli)etyylimagnesiumbromidin 0,2 M liuos THF:ssä.

Il 92831 31

Liuos, jossa oli 1,006 g 5-O-tert-butvvlidimetvvlisilvv-li-13-okso-milbemysiini A4:ä 8 ml:ssa THF:ä, jäähdytettiin -15°C:seen ja sitten siihen lisättiin 30 minuutin kuluessa 17,0 ml 2-(1,3-dioksolan-2-yyli)etyylimagnesiumbromi-5 din 0,2 M liuosta THF:ssä. Sekoitettiin 30 minuutin ajan -15°C:ssa ja sitten lisättiin varovasti 5 ml kyllästettyä NH4Cl-liuosta, sitten reaktioseos kaadettiin 100 ml:aan kyllästettyä NaHC03-liuosta ja uutettiin 3 kertaa 150 ml:11a eetteriä. Orgaaniset faasit pestiin 100 ml:11a 10 kyllästettyä NaCl-liuosta, kuivatettiin MgS04:llä ja haihdutettiin. Raakatuotteen kromatografia piihappogee-lissä heksaani/dimetoksietaanilla (6:1) tuotti C(13)-epi-meerin (87 mg, 8 %) lisäksi 969 mg (84 %) tuotetta.

15 Massaspektri (MS) : m/e: 772 (M+, C43H68O10Si) 'H-NMR (300 MHz, CDClj) : 3,05 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,42 ppm (bs, w k = 11) (CSH) , 4,85 ppm (t, J = 3) (OCH(CH2)0) .

20 A2. 13/3-(2-(1,3-dioksolan-2-yyli)etyyli]-13a-hydroksi- milbemvsiini A,.: n valmistus_

Liuosta, jossa oli 40 mg 5-O-tert-butvvlidimetvvlisilvv-li-130-[2-(1,3-dioksolan-2-yyli)etyyli]-13a-hydroksi-25 milbemysiini A^ä 1 ml:ssa HFx«pyridiini/THF-liuosta (valmistettu 6,5 ml:sta HFxepyridiiniä, 15,7 ml:sta pyri-diiniä ja 50 ml:sta THF:ä), sekoitettiin 18 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos kaadettiin sitten 50 ml:aan kyllästettyä NaHC03-liuosta ja uutettiin 100 ml:11a 30 dietyylieetteriä. Orgaaninen faasi pestiin 50 ml:11a kyllästettyä NaCl-liuosta, kuivatettiin MgS04:llä ja haihdutettiin. Raakatuotteen kromatografia piihappogee-lissä heksaani/etikkahappoetyyliesterillä (1:1) tuotti 27 mg (79 %) tuotetta.

35 MS: (m/e): 658 (M+, Ο^Η^Ο,ο) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) 92831 32 (C25H) , 4,28 ppm (t, J = 7) (CSH) , 4,85 ppm (t, J = 4) (0CH(CH2)0) .

A3 . 5-0-tert-butyylidimetyylisilyyli-13/?-[2-(l, 3-diokso-5 lan-2-yyli)etyyli]-13a-hydroksi-milbemysiini A3:n valmistus_

Esimerkin AI mukaisesti saadaan otsikkoyhdiste 420 mg:sta 5-0-tert-butvvlidimetvvlisilvvli-13-okso-milbemysiini A3: a 10 ja 7,0 ml:sta 2-(1,3-dioksolan-2-yyli)etyylimagnesiumbro-midin 0,2 M liuoksesta.

Massaspektri (MS): (m/e): 758 (M+, C^H^O^Si).

15 A4. 13/3—[2—(1,3-dioksolan-2-yyli) etyyli]-13a-hydroksi- milbemvsiini A3:n valmistus_

Otsikkoyhdiste voidaan valmistaa esimerkin A2 mukaisesti 5-0-tert-butvvlidimetvvlisilvvli-13/3- [ 2 - (1,3-dioksolan-2-20 yyli)etyyli]-13a-hydroksi-milbemysiini A3:sta.

Massaspektri (MS) : (m/e) : 644 (M+, C36H52O10) .

Kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistus 25

Hl: milbemysiini A4:n -13-spiro-2'-[5'-metoksi-tetrahydro-furaaninl valmistus_

Liuokseen, jossa oli 50 mg 5-O-tert-butvvlidimetvvlisi-3 0 lyyli-13|S- [2 - (1,3-dioksolan-2-yyli) etyyli] -13a-hydroksi- milbemysiini A4:ä 1 ml:ssa p-tolueenisulfonihapon l-%:sta liuosta metanolissa, sekoitettiin 90 minuutin ajan huoneen lämmössä. Reaktioseos kaadettiin sitten 50 ml:aan kyllästettyä NaHC03-liuosta ja uutettiin 100 ml: 11a 35 dietyylieetteriä. Orgaaninen faasi pestiin 50 ml:11a kyllästettyä NaCl-liuosta, kuivatettiin MgS04:llä ja haihdutettiin. Kromatografoimalla raakatuote piihappogee- li 92831 33

Iissä heksaani/etikkahappoetyyliesterillä (2:1) voitiin eristää 35 mg (86 %) tuotetta epimeeriseoksena C5'-atomissa (isomeeri Arisomeeri B n. 3:1).

5 MS: (m/e) : 628 (M+, C36H5209) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,09 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 3,40* ja 3,45 ppm (2s) (CH30) , 4,03 ja 4,12* ppm (2s) (OH), 4,29 ppm (6s, w% = 15) (C5H), 4,99* ppm (d, J = 4) ja 5,10 ppm (dd, J = 4, J' = 2) (OCH(CH2)0).

10 H2: 5-O-tert-butvvlidimetvvlisilvvli-milbemvsiini A4-13-spiro-2'-[5'-(2”-etoksi-etoksi)-tetrahydrofuraanin] valmistus_ 15 Liuokseen, jossa oli 80 mg 5-O-tert-butvvlidimetvvlisi-lyyli-130-[2-(1,3-dioksolan-2-yyli) etyyli] -13a-hydroksi-milbemysiini A4:ä ja 200 μΐ etyleeniglykoli-monoetyylieet-teriä 2 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin 24 mg (±)-kamferi-10-sulfonihappoa. Sekoitettiin 2 tunnin ajan 20 huoneen lämmössä ja sitten reaktioseos kaadettiin 50 ml:aan kyllästettyä NaHC03-liuosta ja uutettiin 100 ml :11a dietyylieetteriä. Orgaaninen faasi pestiin 50 ml:11a kyllästettyä NaCl-liuosta, kuivatettiin MgS04:llä ja haihdutettiin. Raakatuotteen kromatografia piihappogee-25 Iissä heksaani/etikkahappoetyyliesterillä (6:1) tuotti 62 • mg (50 %) isomeeriä A ja 32 mg (26 %) isomeeriä B.

Isomeeri A: MS: (m/e): 800 (M+, C^H^OjoSi) 30 ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,08 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,09 ppm (s) (OH), 4,42 ppm (bs, w% = 10), 5,13 ppm (bs, w% = 6) (OCH(CH2)O) .

Isomeeri B: 35 MS: (m/e): 800 (M+, C^H^oSi) ‘H-NMR (3 00 MHz, CDClj) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,03 ppm (s) (OH), 4,42 ppm (bs, w% = 10) (C5H) , 92831 34 5,23 ppm (bd, J = 3) (OCH(CH2)0), 5,51 ppm (dd, J = 11, J' = 6) (C1SH).

H3: milbemysiini A4-13-spiro-21-[5'-(2"-etoksi-etoksi)-5 tetrahvdrofuraaninl valmistus_

a) Isomeeri A

Liuosta, jossa oli 58 mg 5-0-tert-butyylidimetvvlisi-10 lyyli-13-spiro-2 * — [5 * -(2"-etoksi-etoksi)-tetrahydrofuraania] (isomeeriä A) 1 ml:ssa HFx»pyridiini/THF-liuosta (vrt. yllä), sekoitettiin 16 tunnin ajan huoneen lämmössä. Reaktioseos kaadettiin sitten 50 ml:aan kyllästettyä NaHC03-liuosta ja uutettiin 100 ml:11a dietyylieetteriä.

15 Orgaaninen faasi pestiin 50 ml:11a kyllästettyä NaCl- liuosta, kuivatettiin MgS03:lla ja haihdutettiin. Kroraa-tografoimalla raakatuote piihappogeelissä heksaani/etik-kahappoetyyliesterillä (2:1) saatiin 47 mg (94 %) tuotetta .

20 MS: (m/e) : 686 (M+, C39H58O10) ‘H-NMR (300 MHz, CDClj) : 3,08 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,10 ppm (s) (OH), 4,28 ppm (t, J = 7) (CSH) , 5,13 ppm (bd, J = 4) (OCH(CH2)0).

25

• b) Isomeeri B

29,5 mg:sta 5-Q-tert-butvvlidimetyvlisilvvli-13-spiro-21 -[5*-(2"-etoksi-etoksi)-tetrahydrofuraania] (isomeeriä B) 30 saatiin ohjeen H3.a mukaisesti 22 mg (88 %) tuotetta.

MS: (m/e): 686 (M+, C39H5gO10) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,06 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H), 4,03 ppm (s) (OH), 4,28 ppm (t, J = 7) (CSH) , 5,22 35 ppm (bd, J = 4) (0CH(CH2)0), 5,50 ppm (dd, J = 11, J' = 5) (C15H) .

t

II

92831 35 H4: 5-O-tert-butyylidimetyylisilyyli-milbemysiini A4-13-spiro-2 ' - [5 ' - (2", 2"-dixnetyyli-propoksi) -tetrahydrofuraa-ninl valmistus_ 5 Liuokseen, jossa oli 120 mg 5-0-tert-butvvlidimetyylisi-lyyli-13/3-[2- (1,3-dioksolan-2-yyli) etyyli] -13a-hydroksi-milbemysiini A4:ä ja 274 mg neopentyylialkoholia 2 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin 36 mg (±)-kamferi-10-sulfo-nihappoa. Reaktioseosta sekoitettiin 2 tunnin ajan huo-10 neen lämmössä ja loppuvaiheet suoritettiin valmistusesi-merkissä H2 esitetyllä tavalla. Kromatografoimalla raaka-tuote piihappogeelissä heksaani/dietyylieetterillä (5:1) voitiin eristää 64 mg (52 %) isomeeriä A ja 35 mg (28 %) isomeeriä B.

15

Isomeeri A: MS: (m/e) : 798 (M+, C46H7409Si) ‘H-NMR (300 MHz, CDClj) : 0,88 ppm (s) (C(CH3)3), 2,96 ppm (d, J = 9) (OCHHC(CH3)3), 3,08 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) 20 (C25H) , 3,50 ppm (d, J = 9) (OCHHC (CH3) 3) , 4,09 ppm (s) (OH), 4,42 ppm (bs, = 10) (C5H), 4,07 ppm (bd, J = 3) (0CH(CH2)0) .

Isomeeri B: 25 MS: (m/e): 798 (M+, C46H7409Si) lH-NMR (300 MHz, CDC13) : 0,88 ppm (s) (C(CH3)3), 3,02 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 3,06 ppm (d, J = 9) (OCHHC (CH3) 3) , 3,51 ppm (d, J = 9) (OCHHC (CH3) 3) , 4,11 ppm (s) (OH), 4,42 ppm (bs, w3g = 10) (C5H) , 5,14 ppm (dd, J = 30 5, J' = 2,5) (OCH(CH2)0), 5,56 ppm (t, J = 7,5) (C15H) .

H5: milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-(2",2"-dimetyylipro-poksil-tetrahvdrofuraaninl valmistus_

35 a) Isomeeri A

: 61 mg:sta 5-O-tert-butvvlidimetvvlisilvvli-milbemysiini 92831 36 A4-13-spiro-2 ' - [ 5 ' - (2" , 2"-diiaetyyli-propoksi) -tetrahydro-furaania] (isomeeriä A) saatiin valmistusesimerkin H3 mukaisesti 47 mg (90 %) tuotetta.

5 MS: (m/e) : 684 (M+, C^O,) lH-NMR (300 MHz, CDC13) : 0,87 ppm (s) (C(CH3)3), 2,95 ppm (d, J = 9) (OCHHC (CH3) 3) , 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (CjjH) , 3,40 ppm (d, J = 9) (OCHHC (CH3) 3) , 4,11 ppm (s) (OH), 4,28 ppm (t, J = 7) (C5H) , 5,06 ppm (bs, = 6) 10 (0CH(CH2)0).

b) Isomeeri B

29 mg:sta 5-0-tert-butvvlidimetvv1isi1vvli-milbemysiini 15 A4-13-spiro-2'-[5'-(2",2"-dimetyyli-propoksi)-tetrahydro- furaania] (isomeeriä B) voitiin valmistaa valmistusohjeen H3 mukaisesti 22 mg (85 %) tuotetta.

MS: (m/e): 684 (M+, C^O,) 20 ‘H-NMR (300 MHZ, CDC13) : 0,88 ppm (S) (C(CH3)3), 3,01 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C2JH) , 3,05 ppm (d, J = 9) (OCHHC (CH3) 3) , 3,50 ppm (d, J = 9) (OCHHC (CH3) 3) , 4,09 ppm (s) (OH), 4,28 ppm (t, J = 7) (CSH), 5,15 ppm (dd, J = 5, m, J' = 2,5) (OCH(CH2)0), 5,55 ppm (t, J = 8) (C1SH) .

25 H6: 5-O-tert-butvvlidimetvvlisilvvli-milbemvsiini A4-13-spiro-2,-[5'-(2"-(2"'-(2""-hydroksletoksi)-etoksi)-etok-sil-tetrahvdrofuraaninl valmistus_ 30 Liuokseen, jossa oli 120 mg 5-O-tert-butyylidimetvylisi-lyyli-13/8-[2-(1,3-dioksolan-2-yyli) etyyli]-l3a-hydroksi-milbemysiini A^ä ja 828 μΐ trietyleeniglykolia 2 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin 36 mg (+)-kamferi-10-sulfo-nihappoa. Reaktioseosta sekoitettiin 2 tunnin ajan huo-35 neen lämmössä ja sitten se viimeisteltiin valmistusesi- merkissä H2 esitetyllä tavalla. Kromatografoimalla raaka-. tuote piihappogeelissä heksaani/etikkahappoetyyliesteril-

II

92831 37 lä (1:1) saatiin 96 mg (72 %) tuotetta epimeeriseoksena C51-atomissa (isomeeri A:isomeeri B n. 3:1).

MS: (m/e) : 860 (M+, C47H76012Si) 5 lH-NMR (3 00 MHz, CDC13) : 3,08 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,02 ppm ja 4,10* ppm (2s) (OH), 4,42 ppm (bs, wj = 10) (C5H) , 5,12* ppm (bs, w% = 6) ja 5,16 ppm (dd, J = 5, J' =2) (0CH(CH2)0) .

10 H7 : milbemysiini A4-13-spiro-2 ^[5^(2^(2^- (2""-hydrok-sietoksi)-etoksi)-etoksi)-tetrahvdrofuraanini valmistus 50 mg:sta 5-O-tert-butyylidimetyylisilyyli-milbemysiini A4-13-spiro-2,-[5'-(2"-(2"'-(2”"-hydroksletoksi)-etoksi)-15 etoksi)-tetrahydrofuraania] saatiin valmistusesimerkin H3 mukaisesti 39 mg (90 %) tuotetta epimeeriseoksena 05'-atomissa (isomeeri A:isomeeri B n. 2,5:1).

MS: (m/e): 74 6 (M+, C41H62012) 20 ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (bt, J = 9) (C^H), 4,00 ppm ja 4,10* ppm (2s) (OH), 4,27 ppm (t, J = 7) (C5H) , 5,11* ppm (bt, J = 2) ja 5,22 ppm (dd, J = 5, J' = 2) (0CH(CH2)0) .

25 H8: 5-O-tert-butyylidimetyylisilyyli-milbemysiini A4-13-spiro-21-[5'-(2"-(2"'-(2""-(klooriasetoksi)-etoksi)-etok-sil-etoksi-tetrahydrofuraaninl valmistus_

Liuokseen, jossa oli 42 mg 5-0-tert-butvvlidimetvvlisi-30 lyyli-milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-(2M-(2"'-(2""-hydroksietoksi)-etoksi)-etoksi)-tetrahydrofuraania] [epimeeriseos C5'-atomissa (isomeeri A:isomeeri B n.

3:1)] ja 39 μΐ pyridiiniä 2 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin 0°C:ssa 1 μΐ klooriasetyylikloridia. Sekoitet-35 tiin 6 tunnin ajan 0°C:ssa ja sitten reaktioseos kaadettiin 50 ml:aan 1 N HCl-liuosta ja uutettiin 100 ml:11a ; dietyylieetteriä. Orgaaninen faasi pestiin 50 ml:11a 92831 38 kyllästettyä NaHC03--liuosta ja 50 ml: 11a kyllästettyä NaCl-liuosta, kuivatettiin MgS04:llä ja haihdutettiin. Raakatuotteen kromatografia piihappogeelissä heksaani/-etikkahappoetyyliesterillä (3:1) tuotti 42 mg (92 %) 5 tuotetta epimeeriseoksena C5'atomissa (isomeeri A:isomee-ri B n. 3:1).

MS: (m/e) : 936 (M+, C^Clo^Si) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) 10 (C^H), 4,00 ppm ja 4,08* ppm (2s) (OH), 4,08 ppm (s) (CH2C1) , 4,41 ppm (bs, wh = 10) (C5H) , 5,10* ppm (bt, J = 3) ja 5,22 ppm (dd, J = 5, J' = 2,5) (0CH(CH2)0).

H9: milbemysiini A4-13-spiro-2 '-[5 ' - (2"-(2" ' - (2MM-(kloori-15 asetoksi)-etoksi)-etoksi)-etoksi)-tetrahydrofuraanin] valmistus_ 39 mg:sta 5-O-tert-butvvlidimetyylisilyyli-milbemysiini A4-spiro-2·-[5'-(2"-(2"1 -(2"”-(klooriasetoksi)-etoksi)-20 etoksi)-etoksi)-tetrahydrofuraania] [epimeeriseos C5'- atomissa (isomeeri A:isomeeri B n. 3:1)] saatiin valmis-tusesimerkin H3 mukaisesti 26 mg (75 %) tuotetta epimeeriseoksena C5'-atomissa (isomeeri A:isomeeri B n. 3:1).

25 MS: (m/e): 822 (M+, 043Η6301013) !H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,00 ppm ja 4,10* ppm (2s) (OH), 4,08 ppm (s) (CH2C1) , 4,27 ppm (t, J = 7) (CjH) , 5,11* ppm (bt, J = 2,5) ja 5,22 ppm (m) (OCH(CH2)0).

30

Edellä esitettyjen menetelmien mukaisesti voidaan valmistaa esimerkiksi myös seuraavat kaavan I mukaiset yhdisteet .

Il 92831 39 HIO: 5-O-tert-butyylidimetyylisilyyli-milbemysiini A4-13-spiro-2 * — Γ S *-bentsvvlioksi-tetrahvdrofuraani 1_ a) Isomeeri A 5 MS: (m/e) : 818 (M+, C4gH70O9Si) ‘H-NMR (300 MHz, CDCl3) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,09 ppm (s) (OH), 4,42 ppm (bs, w% = 11) (C5H) , 4,48 ppm (d, J = 11,5) (OCHHC6H5) , 4,82 ppm (d, J = 11,5) 10 (OCHHC6H5) , 5,20 ppm (bt, J = 2,5) (OCH(CH2)0), 7,33 ppm (m) (C6H5).

b) Isomeeri B

15 MS: (m/2) : 818 (M+, C4gH70O9Si) ‘H-NMR (300 MHz, CDClj) : 3,00 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,12 ppm (S) (OH), 4,41 ppm (bs, w% = 10) (CjH), 4,57 ppm (d, J = 11,5) (OCHHC6H5) , 4,86 ppm (d, J - 11,5) (OCHHC6H5) , 5,54 ppm (dd, J = 10, J' = 5) (CISH) , 7,32 ppm 20 (m) (C6Hj) .

Hll: milbemysiini Ä4-13-spiro-21-[5'-bentsyylioksi-tetra-hvdrofuraani 1__

25 a) Isomeeri A

MS: (m/e): 704 (M+, C42H5609) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 4,10 ppm (S) (OH), 4,28 ppm (t, J = 7) (CSH) , 4,48 30 ppm (d, J = 11,5) (OCHHC6H5) , 4,82 ppm (d, J = 11,5) (OCHHC6H5) , 5,20 ppm (bt, J = 2,5) (OCH(CH2)0), 7,33 ppm (m) (C6H5).

b) Isomeeri B 35 MS: (m/e): 704 (M+, C42H5609) 92831 40 1H-NMR (300 MHz, CDCl3) : 3,00 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C^H), 4,10 ppm (s) (OH), 4,27 ppm (t, J = 7) (C5H) , 4,57 ppm (d, J = 11,5) (OCHHC6H5) , 4,85 ppm (d, J = 11,5) (OCHHC6Hj) , 5,30 ppm (bt, J = 2,5) (OCH(CH2)0), 7,31 ppm 5 (m) (C6H5) .

H12: 5-0-tert-butyylidimetyylisilyyli-milbemysiini A4-i3-spiro-2' — r 51-svkloheksvvlioksi-tetrahvdrofuraanil

10 a) Isomeeri A

MS: (m/e) : 810 (M+, C47H7409Si) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C^H), 3,60 ppm (m) (OCH(CH2)CH2) , 4,09 ppm (s) (OH), 15 4,41 ppm (bs, w% = 10) (CSH) .

b) Isomeeri B

MS: (m/e): 810 (M+, C47H7409Si) 20 ‘H-NMR (300 MHz, CDCl3) : 3,01 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C2JH) , 3,62 ppm (m) (OCH(CH2) CH2) , 4,08 ppm (s) (OH), 4,40 ppm (bs, = 10) (C5H) , 5,55 ppm (bs, J = 8) (C1SH) .

H13: milbemysiini A4-13-spiro-2 ' - [ 5 1 -sykloheksyylioksi-2 5 tetrahvdrof uraani 1______

a) Isomeeri A

MS: (m/e): 696 (M+, c41h“o9) 30 ‘H-NMR (300 MHz, CDCl3) : 3,08 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C25H) , 3,62 ppm (m) (OCH (CH2) CH2) , 4,10 ppm (s) (OH), 4,28 ppm (t, J = 7) (CSH) .

b) Isomeeri B 35 MS: (m/e): 696 (M+, Ο,,ΗβοΟ,)

II

92831 41 'H-NMR (300 MHz, CDClj) : 3,02 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C^H) , 3,62 ppm (OCH (CH2) CH2) , 4,07 ppm (s) (OH), 4,27 ppm (t, J = 7) (CSH) , 5,56 ppm (dd, J = 10, J' = 5) (C1SH) .

5 H14: 5-O-tert-butvvlidimetvvlisilvvli-milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-(2"-(2"'-metoksi-etoksi)-etoksi-tetrahydro-furaani 1_ 10 Epimeeriseos C51-atomissa (isomeeri A:isomeeri Bn. 3:1) MS: (m/e): 830 (M+, C46H740MSi) lH-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,08 ppm (bt, J = 9) (C25H) , 3,36 ppm (s) (CH30) , 4,02 ppm ja 4,09* ppm (2s) (OH), 4,41 ppm 15 (bs, w% = 11) (CjH), 5,12* ppm (bs, = 6) ja 5,23 ppm (bs, w% = 6) (OCH(CH2)0).

H15: milbemysiini A4-13-spiro-21-[5·-(2"-(2M'-metoksi-etoksi) -etoksi)-tetrahvdrofuraani 1__ 20

Epimeeriseos C5·-atomissa (isomeeri A:isomeeri Bn. 2:3) MS: (m/e): 716 (M+, W,,) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,08 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) 25 (CjjH) , 3,38 ppm (s) (CH30) , 4,01* ja 4,10 ppm (2s) (OH), 4,29 ppm (t, J = 7) (CjH) , 5,12 ppm (bs, w% = 7) ja 4,23* ppm (bs, w% = 6) (0CH(CH2)0).

H16: 5-O-tert-butyylidimetyylisilyyli-milbemysiini A4-13-30 spiro-2· — [5 * — ((3"-metyyli-oksetan-3"-yyli)-metoksi)-te-trahvdrofuraani 1_

Epimeeriseos C5'-atomissa (isomeeri A:isomeeri Bn. 1:1) 35 MS: (m/e): 812 (M+, C46H72O10Si) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,02 ja 3,07 ppm (2dt, Jd = 2,5, « 92831 42

Jt = 9) (CyH), 3,40 ja 3,47 ppm (2d, J = 10) (OCHHC), 3,87 ja 3,88 ppm (2d, J = 10) (OCHHC), 4,09 ja 4,10 ppm (2s) (OH), 5,12 ppm (bd, J = 3,5) ja 5,20 ppm (dd, J = 4,5, J' = 2) (0CH(CH2)0) .

5 H17: milbemysiini A4-13-spiro-2' — [5' — ((3"-metyyli-oksetan-3 "-vvlil -metoksi) -tetrahvdrofuraani 1__

Epimeeriseos C5'-atomissa (isomeeri A:isomeeri B n. 1:1) 10 MS: (m/e): 698 (M+, CAO,) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,02 ja 3,07 ppm (2dt, Jd = 2,5,

Jt = 9) (C25H) , 3,40 ja 3,46 ppm (2d, J = 10) (OCHHC), 3,86 ja 3,88 ppm (2d, J = 10) (OCHHC), 4,09 ja 4,10 ppm 15 (2s) (OH), 4,28 ppm (t, J = 7) (C5H) , 5,12 ppm (bd, J = 3,5) ja 5,20 ppm (dd, J = 5, J' = 2) (0CH(CH2)0).

H18: 5-tert-butvvlidimetyylisilyyli-milbemvsiini A4-13-spiro-2 * -Γ 51-(2"-hvdroksi-etoksi)-tetrahvdrofuraani1 20

Epimeeriseos C5'-atomissa (isomeeri A:isomeeri B n. 1:1) MS: (rci/2): 772 (M+, C43H6gO10Si) 'H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) 25 (C^H), 3,98 ja 4,06* ppm (2s) (OH), 4,41 ppm (bs, w% = 11) (C5H), 5,13* ppm (d, J = 4,5) ja 5,22 ppm (dd, J = 5, J' = 3) (0CH(CH2)0).

H19: milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-(2"-hydroksi-etok-3 0 si)-tetrahvdrofuraani 1_

a) Isomeeri A

MS: (m/e): 658 (M+, Cj^O^) 35 ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) (C2JH) , 4,06 ppm (s) (OH), 4,27 ppm (t, J = 7) (C5H) , 5,13 ppm (d, J = 4,5) (OCH(CH2)0).

11 92831 43

b) Isomeeri B

MS: (m/e) : 658 (M+, Cj^O^) ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,07 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9) 5 (CjjH) , 3,98 ppm (s) (OH), 4,27 ppm (t, J = 7) (C5H) , 5,22 ppm (dd, J = 5, J' = 3) (0CH(CH2)0), 5,53 ppm (dd, J = 10,5, J' = 4,5) (C1SH) .

H20: 5-deshydroksi-5-oksimino-milbemysiini Ä4-13-spiro-10 2'-[51 -(2",2"-dimetyyli-propoksi)-tetrahydrofuraanin] valmistus_ a) Liuosta, jossa on 50 mg milbemysiini A4-13-spiro-2 ' -[51 -(2",2H-dimetyyli-propoksi)-tetrahydrofuraania] 15 3 ml:ssa dikloorimetaania, sekoitetaan mangaanidioksidin (95 mg) kanssa 5 tunnin ajan huoneen lämmössä. Mangaanidioksidi suodatetaan pois piimään läpi ja liuoksen haihduttamisen jälkeen saadaan 47 mg raakaa 5-deshydrok-si-5-okso-milbemysiini A4-13-spiro-21-[5'-(2",2"-dimetyy-20 li-propoksi)-tetrahydrofuraania]. MS: (m/e): 682 (M+, C40H58O9) · b) Tämä raakatuote liuotetaan yhdessä hydroksyyliamiini-hydrokloridin (47 mg) kanssa 1,0 ml:aan pyridiiniä. Se- 25 koitetaan tunnin ajan huoneen lämmössä ja sitten suoritetaan loppuvaiheet dietyylieetterillä ja IN HCl:lla. Kro-matografoimalla raakatuote piihappogeelissä etikkahap-poetyyliesteri/heksaanilla (1:3) saadaan 35 mg otsikkoyh-distettä.

30 MS: (m/e): 697 (M+, C40H59NO9) ‘H-NMR (300 MH<, CDCI3) : 0,88 ppm (s) (C(CH3)3), 2,96 ppm (d, J = 9,5) (OCHHC(CH3)3) , 3,08 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9,5) (C25H) , 3,48 ppm (d, J = 9,5) (OCHHC (CH3) 3) , 4,64 ppm 35 (S) (C6H) , 7,62 ppm (s) (N-OH) .

92831 44 H21: 5-deshydroksi-5-oksimino-milbemysiini A4-13-spiro-2'-Γ5'-svkloheksvvlioksi-tetrahvdrofuraaninl valmistus_ a) Liuokseen, jossa on 30 mg milbemysiini A,,-13-spiro-2'- 5 [5'-sykloheksyylioksitetrahydrofuraania] 3 ml:ssa dikloo- rimetaania, lisätään 56 mg mangaanidioksidia. Sekoitetaan 2 tunnin ajan huoneen lämmössä ja sitten reaktioseos suodatetaan piimään läpi. Liuoksen haihduttamisen jälkeen saadaan 30 mg raakaa 5-deshydroksi-5-okso-milbemysiini 10 A4-13-spiro-2'-[5'-sykloheksyylioksi-tetrahydrofuraania].

MS: (m/e) : 694 (M+, c4,H58o9) .

b) 29 mg tätä raakatuotetta ja 30 mg hydroksyyliamiini-hydrokloridia sekoitetaan 1,0 ml:ssa pyridiiniä 2 tunnin 15 ajan huoneen lämpötilassa. Reaktio viimeistellään dietyy-lieetterillä ja IN HCl:lla ja kromatografoimalla raaka-tuote piihappogeelissä etikkahappoetyyliesteri/heksaanil-la (1:3) saadaan 23 mg otsikkoyhdistettä.

20 MS: (m/e): 709 (M+, C41HJ9N09) ‘H-NMR (300 MHz, CDCl3) : 3,09 ppm (dt, Jd = 2,5, Jt = 9,5) (C25H) , 3,62 ppm (m) (OCH (CH2) CH2, 4,55 ppm (s) (C6H) , 7,65 ppm (s) (N-OH).

25 H22: 5-deshydroksi-5-oksimino-milbemysiini A4-13-spiro-2'- • (5 1 - (2l,-metvvli-butoksi) -tetrahvdrofuraanini valmistus a) Liuokseen, jossa on 30 mg milbemysiini A4-13-spiro-2 ' -[5'-(2"-metyylibutoksi)-tetrahydrofuraania] 3 ml:ssa di-30 kloorimetaania, lisätään 57 mg mangaanidioksidia. Sekoitetaan 2 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten reaktioseos suodatetaan piimään läpi ja liuoksen haihduttamisen jälkeen saadaan 27 mg raakaa 5-deshydroksi-5-okso-milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-(2"-metyyli-butoksi)-35 -tetrahydrofuraania].

MS: (m/e): 682 (M+, C40H58O9) .

n 92831 45 b) 26 mg tätä raakatuotetta liuotetaan hydroksyyliamiini-hydrokloridin (26 mg) kanssa 1,0 ml:aan pyridiiniä. Sekoitetaan 90 minuutin ajan huoneen lämmössä ja sitten suoritetaan loppuvaiheet dietyylieetterillä ja IN HCl:-5 11a. Raakatuotteen kromatografia piihappogeelissä etik- kahappoetyyliesteri/heksaanilla (1:3) tuottaa 21 mg otsikkoyhdistettä.

MS: (m/e) : 697 (M+, C40HS9NO9) 10 lH-NMR (300 MHz, CDC13) : 3,10 ppm (dd, J1 = 6, J2 = 9,5) (OCHHCH(CH3)C2H5) , 3,66 ppm (dd, J1 = 6, J2 = 9,5) (OCHHCH)CH3)C2H5) , 4,64 ppm (s) (C6H) , 7,68 ppm (s) (N-OH).

15 H23: 5-deshydroksi-5-oksimino-milbemysiini A3-l3-spiro-2'- f51 -(2"-etoksi-etoksi1 -tetrahvdrofuraanini valmistus a) Liuokseen, jossa on 14,5 mg milbemysiini A3-spiro-2'-[5'-(2"-etoksi-etoksi)-tetrahydrofuraania] 3 ml:ssa di- 20 kloorimetaania, lisätään 60 mg mangaanidioksidia. Sekoitetaan 90 minuutin ajan huoneen lämmössä ja sitten reak-tioseos suodatetaan piimään läpi ja liuoksen haihduttamisen jälkeen saadaan 14 mg raakaa 5-deshydroksi-5-okso-milbemysiini A3-13-spiro-2,-[5'-(2"-etoksi-etoksi)-tetra-25 hydrofuraania].

MS: (m/e): 670 (M+, ΟΜΗΜΟ210) .

b) Tämä raakatuote ja 20 mg hydroksyyliamiinihydroklori-dia liuotetaan 1,0 ml:aan pyridiiniä. Sekoitetaan tunnin 30 ajan huoneen lämpötilassa ja suoritetaan loppuvaiheet • dietyylieetterillä ja IN HCl:lla. Kromatografoimalla raakatuote piihappogeelissä etikkahappoetyyliesteri/hek-saanilla (1:3) saadan 10 mg otsikkoyhdistettä.

MS: (m/e): 685 (M+, C38H55NO10) .

35

Esitettyjen työtapojen mukaisesti valmistetaan myös seu- • raavat yhdisteet: 92831 46

Taulukko 1: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X = -CH (OR,) -, Rj = H ja R2 = CH3 5 Yhdiste R3 Epimeeri Fysik. vakiot n: o___ 1.1 CH3 A/B m/e: 614 (M+ , C35H50O9) 1.2 CH2C(CH3)3 A m/e: 670 (M\ C39H5809) 1.3 CH2C(CH3)3 B m/e: 670 (M+, C39H5809)

10 1.4 CH2C(CH3)3 A/B

1.5 CH2CH2OC2H5 A m/e: 67 2 (M+, C38H56O10) 1.6 CH2CH2OC2H5 B m/e: 672 (M+, C38H56O10) 1.7 CH2CH2OC2H3 A/B raakatuote 1.8 sykloheksyyli A m/e: 682 (M\ C40H58O9) 15 1.9 sykloheksyyli B m/e: 682 (M+, C40H58O9) 1.10 sykloheksyyli A/B raakatuote <fH3 1.11 CHz_i~Ä A m/e: 684 '7 (M+, C39H56Ol0) CH j 20 1.12 CH2-·— B m/e: 684 M (M+, C39H56O10) 1.13 ί”3 A/B m/e: 684 CHz (M+, C39H56Ol0) 1.14 CH2-syklobutyyli A m/e: 668 (M+, C39H5609) 1.15 CH2-syklobutyyli B m/e: 668 (M+, C39H5609) 1.16 CH2-syklobutyyli A/B raakatuote 2 5 1.17 CH2CH(CH3) CH2CH3 A m/e: 67 0 (M+, C39H58 09) 1.18 CH2CH (CH3) CH2CH3 B m/e: 67 0 (M\ C39H5809) li 92831 47 1.19 CH2CH(CH3)CH2CH3 A/B raakatuote 1.20 CH2-(2-furyyli) A m/e: 680 (M+, C39H52O10) 1.21 CH2-(2-furyyli) B m/e: 680 (M\ C39H52O10) 1.22 CH2-(2-furyyli) A/B m/e: 680 (M+, C39H52O10) 5 1.23 CH2CH2OCOCH3 A/B m/e: 686 (M\ CjgHjgO,,) 1.24 CH2- (2-tienyyli) A m/e: 696 (M+, C39H5209S) 1.25 CH2-(2-tienyyli) B m/e: 696 (M\ C39H5209S) 1.26 CH2- (2-tienyyli) A/B m/e: 696 (M+, C39H5209S) 1.27 H A m/e: 600 (M\ Cj.H.jO,) 10 1.28 H B m/e: 600 (M+, Cj^gO,) 1.29 H A/B m/e: 600 (M+, Cj^gO,) 1.30 CH2-sykloheksyyli A m/e: 696 (M+, ^,ΗβοΟ,) 1.31 CH2-sykloheksyyli B m/e: 696 (M+, Cg^O,) 1.32 CH2-sykloheksyyli A/B raakatuote 15 1.33 CH2C(CH3)=CH2 A m/e: 654 (M\ CjgH^O,) 1.34 CH2C(CH3) =CH2 B m/e: 654 (M\ CjgHggO,) 1.3 5 CH2C(CH3)=CH2 A/B m/e: 654 _(M+, CnHM09) 92831 48

Taulukko 2: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X = -CHiORJ-, R! = H ja R2 = C2H5

Yhdiste R3 Epimeeri Fysik. vakiot 5 n; o____ 2.1 fenyyli A m/e: 690 (M+, C41Hm09) 2.2 fenyyli B m/e: 690 (M\ C41Hm09) 2.3 fenyyli A/B raakatuote 10 2.4 CH2CH2OCH2CH2OCH3 A m/e: 716 (M+, C40H60Ou) 2.5 CH2C(CHj) (CH2C1)2 A m/e: 752 (M+, C40H58C1209) 2.6 CH2C(CH3) (CH2C1)2 B m/e: 752 (M+, C40H58Cl2O9) 2.7 CH2C(CH3) (CH2C1)2 A/B raakatuote 2.8 CH2CBr3 A m/e: 880, 878 (M+, C37H51Br309) 15 2.9 CH2CBr3 B m/e: 880, 878 (M+, C37H51Br309) 2.10 CH2CBr3 A/B raakatuote 2.11 CH2-syklobutyyli A m/e: 682 (M+, C40H5gO9) 2.12 CH2-syklobutyyli B m/e: 682 (M+, C40H58O9) 2.13 CH2-syklobutyyli A/B raakatuote 2 0 2.14 CH2CH(CH3)CH2CH3 A m/e: 684 (M+, C40H60O9) 2.15 CH2CH(CH3)CH2CH3 B m/e: 684 (M+, QoH^O,) 2.16 CH2CH(CH3) CH2CH3 A/B raakatuote 2.17 CH2CH2SCH3 A m/e: 688 (M+ , C39H5609S) 2.18 CH2CH2SCH3 B m/e: 688 (M+ , C39H5609S) 2 5 2.19 CH2CH2SCH3 A/B raakatuote 2.20 1-adamantyylime- A m/e: 762 tyyli (M+ , W,) 92831 49 2.21 1-adamantyylime- B m/e: 762 tyyli (M+, c46h66o9) 2.22 1-adamantyylime- A/B raakatuote tyyli 2.23 CH2- (2-furyyli) A m/e: 694 (M\ <34ΟΗΜΟ10) 2.24 CH2- (2-furyyli) B m/e: 694 (M+, C40HmO10) 5 2.25 CH2-(2-furyyli) A/B raakatuote 2.26 (+)-2-metyyli-6- A m/e: 752 isopropyyli-syk- (M+, C45H6g09) loheksyyli 2.27 (+)-2-metyyli-6- B m/e: 752 isopropyyli-syk- (M+, C45H6g09) loheksyyli 2.28 (+)-2-metyyli-6- A/B raakatuote isopropyyli-syk- loheksyyli 2.29 CH2CH2OCOCH3 A m/e: 7 00 (M+, C39H56Ou) 10 2.3 0 CH2CH2OCOCH3 A/B raakatuote 2.31 CH.CH.OCHoC.H, A m/e: 748 (M\ C^O.o) 2.3 2 CH2CH2OCH2C6H5 B m/e: 748 (M\ C^H^Ojo) 2.3 3 CH2CH2OCH2C6H5 A/B raakatuote 2.34 H A/B m/e: 573 (M+, C^HjoO,) 15 2.35 syklopentyyli A m/e: 682 (M+, C40H5gO9) 2.36 syklopentyyli B m/e: 682 (M+, C40HJ8O9) 2.37 syklopentyyli A/B raakatuote 2.38 sykloheptyyli A m/e: 710 (M\ C42H6209) 2.39 sykloheptyyli B m/e: 710 (M\ C42H6209) 20 2.40 sykloheptyyli A/B raakatuote 2.41 CH2C(CH3)2CH2C1 A m/e: 718 (M+, C40H59ClO9) 92831 50 2.42 CH2C(CH3)2CH2C1 B m/e: 718 (M\ C40H59ClO9) 2.43 CH2C(CH3)2CH2C1 A/B raakatuote 2.44 CH(CH3)CH2CH3 (S) A m/e: 670 (M\ C39H5809) 2.45 CH(CH3)CH2CH3 (S) B m/e: 670 (M+, C39H5809) 5 2.4 6 CH(CH3) CH2CH3 (S) A/B raakatuote 2.4 7 CH2CH2OCOCH2Cl A m/e: 734 (M\ C39H35C10u) 2.48 CH2CH2OCOCH2Cl B m/e: 734 (M+, C39HS5C10M) 2.49 CH2CH2OCOCH2C1 A/B raakatuote 2.50 CH2CH(CH2CH2CH3)2 A m/e: 726 (M\ C43Hm09) 10 2.51 CH2CH(CH2CH2CH3)2 B m/e: 72 6

(M+, C^HM

2.52 CH2CH(CH2CH2CH3) 2 A/B raakatuote 2.53 CH(CH3) CH2CH3 (R) A m/e: 670 (M+, C39H5809) 2.54 CH(CH3)CH2CH3 (R) B m/e: 670 (M+, C39H5809) 2.55 CH(CH3) CH2CH3 (R) A/B raakatuote 15 2.56 3-fenoksi- A m/e: 796 bentsyyli (M+, C^H^O,,,) 2.57 3-fenoksi- B m/e: 796 bentsyyli (M+, C^H^O,,,) 2.58 3-fenoksi- A/B raakatuote bentsyyli 2.59 CH2-sykloheksyyli A m/e: 710 (M+, C42H6209) 2.60 CH2-sykloheksyyli B m/e: 710 (M\ c42h62o9) 20 2.61 CH2-sykloheksyyli A/B raakatuote 2.62 3,4-dimetoksi- A m/e: 764 bentsyyli (M+, C^O,,) 2.63 3,4-dimetoksi- B m/e: 764 bentsyyli (M+, C^H^On) 2.64 3,4-dimetoksi- A/S raakatuote bentsyyli

II

92831 51 2.65 CH(CHj)C6H5 (R) A m/e: 718 (M+, C43Hjg09) 2.66 CH(CH3)C6H5 (R) B m/e: 718 (M\ C43H5809) 2.67 CH(CH3)C6H5 (R) A/B raakatuote 2.68 CH(CH3)C6H5 (S) A m/e: 718 (M+, C43H5809) 5 2.69 CH(CH3)C6H5 (S) B m/e: 718 (M+, C43HJ809) 2.70 CH(CH3)C6H5 (S) A/B raakatuote 2.71 CH2CH(CH3)2 A m/e: 670 (M+, C39H5809) 2.72 CH2CH(CH3)2 B m/e: 670 (M+, C39H5809) 2.73 CH2CH(CH3)2 A/S raakatuote 10

Taulukko 3: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X = -CH (OR,) -, Rj = Si(CH3)2C(CH3)3 ja R2 = CH3 15 Yhdiste R3 Epimeeri Fysik. vakiot n: o____ 3.1 CH2C(CH3)3 A m/e: 784 (M+, C45H7209Si) 3.2 CH2C(CH3)3 B m/e: 784 (M+, C45H7209Si) 3.3 CH2C(CH3)3 A/B raakatuote 2 0 3.4 CH2CH2OC2H5 A m/e: 786 (M\ C^H^O^Si) 3.5 CH2CH2OC2H5 B m/e: 786 (M\ Οφ,Η,,Ο,οΞΐ) 3.6 CH2CH2OC2H5 A/B raakatuote 3.7 sykloheksyyli A m/e: 796 (M+, C46H7209S i) • 3.8 sykloheksyyli B m/e: 796 (M+, C46H7209Si) 25 3.9 sykloheksyyli A/B raakatuote 3.10 CH2-syklobutyyli A m/e: 782 (M\ C45H70O8Si) 92831 52 3.11 CH2-syklobutyyli B m/e: 782 (M\ C45H70O8Si) 3.12 CH2-syklobutyyli A/B raakatuote 3.13 CH2CH(CH3) CH2CH3 A m/e: 784 (M+ , C45H7209Si) 3.14 CH2CH(CH3)CH2CH3 B m/e: 784 (M+ , C45H7209Si) 5 3.15 CH2CH(CH3)CH2CH3 A/B raakatuote 3.16 CH2-sykloheksyyli A m/e: 810 (M\ C47H7409Si) 3.17 CH2-sykloheksyyli B m/e: 810 (M+, C47H7409Si) 3.18 _CH2-sykloheksyyli_A/B_raakatuote_ 10

Taulukko 4: Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa X = -CH (OR,) - , R, = Si (CH3) 2C (CH3) 3 ja R2 = C2H5

Yhdiste R3 Epimeeri Fysik. vakiot 15 n:o____ 4.1 CH2C(CH3) (CH2C1)2 A m/e: 868 (M+, C46H72Cl209Si) 4.2 CH2C(CH3) (CH2C1)2 B m/e: 868 (M+, C46H72Cl209Si) 4.3 CH2C(CH3) (CH2C1)2 A/B raakatuote 4.4 CH2CBr3 A m/e: 992, 994 (M+, C43H65Br309Si) 20 4.5 CH2CBr3 B m/e: 992, 994 (M+, C43H65Br309Si) 4.6 CH2CBr3 A/B raakatuote 4.7 CH2-syklobutyyli A m/e: 796 (M+, C46H7208Si) 4.8 CH2-syklobutyyli B m/e: 79 6 ·. (M+, C46H7208Si) 4.9 CH2-syklobutyyli A/B raakatuote 25 4.10 CH2CH(CH3) CH2CH3 A m/e: 798 (M+, C46H7409Si) 4.11 CH2CH(CH3)CH2CH3 B m/e: 798 (M\ C46H7409Si) 4.12 CH2CH(CH3)CH2CH3 A/B raakatuote

II

92831 53 4.13 1-adamantyylime- A m/e: 876 tyyli (M+, c52H80o9si) 4.14 1-adamantyylime- B m/e: 876 tyyli (M+, c52Hg0o9si) 4.15 1-adamantyylime- A/B raakatuote tyyli 4.16 CH2-(2-furyyli) A m/e: 808 (M\ C46H68O10Si) 5 4.17 CH2-(2-furyyli) B m/e: 808 (M+, C46H68O10Si) 4.18 CH2-(2-furyyli) A/B raakatuote 4.19 (+)-2-metyyli-6- A m/e: 866 isopropyyli-syk- (M+, C51H8209Si) loheksyyli 4.20 (+)-2-metyyli-6- B m/e: 866 isopropyyli-syk- (M+, C51H8209Si) loheksyyli 4.21 (+)-2-metyyli-6- A/B raakatuote isopropyyli-syk- loheksyyli 10 4.2 2 CH2CH2OCH2C6H5 A m/e: 8 62 (M+, C50H74O10Si) 4.2 3 CH2CH2OCH2C6H5 B m/e: 8 62 (M+, C50H74O10Si) 4.2 4 CH2CH2OCH2C6H5 A/B raakatuote 4.25 H A/B m/e: 728 (M+, C4|HM09Si) 4.26 syklopentyyli A m/e: 796 (M , C46H7209Si) 15 4.27 syklopentyyli B m/e: 796 (M+, C46H7209Si) 4.28 syklopentyyli A/B raakatuote 4.29 CH2C(CH3)2CH2C1 A m/e: 832 (M+,C46H73Cl09Si) 4.30 CH2C(CH3)2CH2C1 B m/e: 832 . (M+,C46H73C109Si) 4.31 CH2C (CH3) 2CH2C1 A/B raakatuote 20 4.32 CH(CH3)CH2CH3 (S) A m/e: 784 (M+ , C45H7209Si) 4.33 CH(CH3)CH2CH3 (S) B m/e: 784 (M\C45H7209Si) 4.34 CH(CH3)CH2CH3 (S) A/B raakatuote 92831 54 4.3 5 CH2CH2OCOCH2Cl A m/e: 848 (M+,C45H69C10uSi) 4.36 CH2CH2OCOCH2Cl B m/e: 848 (M+,C45H69ClOuSi) 4.37 CH2CH2OCOCH2Cl A/B raakatuote 4.38 CH2CH(CH2CH2CH3)2 A m/e: 840 (M+ , C49H80O9S i) 5 4.39 CH2CH(CH2CH2CH3)2 B m/e: 84 0 (M+,C49H80O9Si) 4.4 0 CH2CH(CH2CH2CH3)2 A/B raakatuote 4.41 CH(CH3)CH2CH3 (R) A m/e: 784 (M+,C45H7209Si) 4.42 CH(CH3)CH2CH3 (R) B m/e: 784 (M\C45H7209Si) 4.43 CH (CH3) CH2CH3 (R) A/B raakatuote 10 4.44 3-f enoksi-bents- A m/e: 910 yyli (M+, c34h7401qS1 ) 4.45 3-fenoksi-bents- B m/e: 910 yyli (M+ , C^H-^OigSi) 4.46 3-fenoksi-bents- A/B raakatuote yyli 4.47 CH2-sykloheksyyli A m/e: 824 (M f , C48H7609S i) 4.48 CH2-sykloheksyyli B m/e: 824 (M+ , C48H7609Si) 15 4.49 CH2-sykloheksyyli A/B raakatuote 4.50 3,4-dimetoksi- A m/e: 878 bentsyyli (M+, C50H74OnSi) 4.51 3,4-dimetoksi- B m/e: 878 bentsyyli (M+, C50H74OuSi) 4.52 3,4-dimetoksi- A/B raakatuote bentsyyli 4.53 CH(CH3)C6H5 (R) A m/e: 832 (M\C49H7209Si) : 20 4.54 CH(CH3)C6H5 (R) B m/e: 832 (M+,C49H7209Si) 4.55 CH(CH3)C6H5 (R) A/B raakatuote 4.56 CH(CH3)C6H5 (S) A m/e: 832 (M\C49H7209Si) 4.57 CH(CH3)C6H5 (S) B m/e: 83 2 (M+ , C49H7209Si)

II

92831 55 4.58 CH(CH3)C6H5 (S) A/B raakatuote 4.59 CH2CH(CH3)2 A τη/e: 784 (M\C45H7209Si) 4.60 CH2CH(CH3)2 B m/e: 784 (M+ / C45H7209S i) 4.61 CH2CH(CH3)2 A/B raakatuote 5

Claims (12)

92831 56

1. Menetelmä hyötyeläinten parasiitteja vastaan vaikuttavan 13-spiro-2'-[tetrahydrofuraani]-milbemysiinijohdan-5 naisen valmistamiseksi, jonka kaava I on 29 CH3 * ,CH 3 · — V ' u 0 ' V D « v / \ / \τκ \i i Rl \ ;·./κ„ Ό ..· \ \ /* 0 β Ri H ,c* il i ( I) 10 \ \4 • I I i—J 5 1' a^ nch3 15 jossa X merkitsee ryhmää -CHiOR^-, -C(=0)- tai -C(=N-0H)-, Rl merkitsee vetyä tai ryhmää Si( R5) (R6) (R7), missä R5, R6 ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta Cj-C6-alkyyliä, R2 merkitsee metyyliä tai etyyliä, R3 merkitsee vetyä, C1-C10-alkyyliä, yksi, kaksi tai kolme kertaa 20 halogeenilla tai kerran C1-C3-alkoksilla, mahdollisesti pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesti yhden kerran hydroksilla tai halogeeni-C^-C^-alkyylikar-bonyylioksilla substituoidulla C2-C6-alkoksialkoksilla, C^-Cj-alkyylitiolla, C3-C7-sykloalkyylillä, hydroksilla, 25 bentsyylioksilla, C^-C^-alkyylikarbonyylioksilla tai halo-geeni-C1-C4-alkyylikarbonyylioksilla substituoitua C1-C6-alkyyliryhmää, C3-C7-sykloalkyyliä, mentyyliä, C2-C4-al-kenyyliä, 1-adamantyylimetyyliä, fenyyliä, bentsyyliä, fenyylirenkaassa yhdellä tai kahdella substituentilla, 30 jotka ovat C^-C^-alkoksi- tai fenoksiryhmä, substituoitua bentsyyliryhmää, alifaattisessa C-atomissa kerran C^-Cj-alkyylillä substituoitua bentsyyliryhmää, furyylimetyy-liä, tienyylimetyyliä tai Cj-Cj-alkyylioksetanyylimetyy-liä, tunnettu siitä, että 35 a) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -CH(ORj), kaavan II 92831 57 LJa 9H> /\ ,CH> -f/\ /* « 5 h</i i J-o4\ H jC · ' *' °A II I/ /\?K • · · d—j 10 fiXj/ xch3 OR j mukainen yhdiste, jossa substituenteilla R3 ja R2 on kaavan I yhteydessä määritelty merkitys, saatetaan reagoimaan happokatalysaattorin läsnäollessa reaktion suhteen 15 inertissä liuottimessa kaavan III mukaisen R30H (III) yhdisteen kanssa, jossa substituentilla R3 on kaavan I 20 yhteydessä määritelty merkitys, ja b) haluttaessa menetelmävaihtoehdon a) mukaisesti saatava kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on -CII(OR^) ja RL on ryhmä -Si( Rs) (R6) ( R7), jossa ryhmillä R5, R6 ja R7 on kaavan I yhteydessä esitetyt merkitykset, samanaikaisesti mene- 25 telmävaihtoehdon a) mukaisen reaktion kanssa tai sen jäl-·’ keen muunnetaan happokatalysaattorin vaikutuksella kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa X on -CH(OH)-, ja c) haluttaessa menetelmävaihtoehdon a) tai b) mukaisesti saatavassa kaavan Ie 30 CHj · CHj B - Λ V / \ / \?Ai I R jO—·λ 4 I ] · 17* 4 4 V\ " x/'^· h3c ή i (Ic) 35 \ • · · dH-ί s ! \h3 uR i 92831 58 mukaisessa yhdisteessä, jossa on vety ja substituenteilla R2 ja R3 on kaavan I yhteydessä esitetyt merkitykset, kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa X on -C(=0) ja ryhmillä R2 ja R3 on kaavan Ie yhteydessä esitetyt mer-5 kitykset, ryhmä -CH(OH)- muunnetaan miedon hapetuksen avulla ryhmäksi -C(=0), jolloin saadaan vastaava kaavan Ib /\ ,CHj io .·;ι) ;si7i ;·. · .· 0 fl r2 °.·· \ N/ (Ib) HjC II Λ I \ \'£ a j/· /b^*\ « · » k—'· S Ϊ 15 ^ \Hi mukainen yhdiste, jossa substituenteilla R2 ja R3 on kaavan Ie yhteydessä esitetyt merkitykset, ja joka d) haluttaessa kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamisek-20 si, jossa X on -C(=N-0H) ja ryhmillä R2 ja R3 on kaavan Ib yhteydessä esitetyt merkitykset, saatetaan reagoimaan hydroksyyliamiinin tai sen suolan kanssa, jolloin saadaan vastaava kaavan Ia 25 ?H> /\ .-CH> « —· ·. · H 0 · · „ Λ /, v / \ / \t/\i I \ ,··!“ b"i iviv o · \ \ / 2 / T \ H jC* H 1 (Ιβ) \ \V6 Il n„i/H 30 /ί\?9\ 6—i s S i Ύ> mukainen yhdiste, jossa substituenteilla R2 ja R3 on kaa-35 van Ib yhteydessä esitetyt merkitykset, ja e) haluttaessa, kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R3 on pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä li 92831 59 terminaalisesti yhden kerran halogeeni-C^-C^-alkyylikar-bonyylioksilla substituoitu C2-C6-alkoksialkoksi, menetelmän mukaisesti saatavassa kaavan I yhdisteessä, jossa R3 on pääteasemassa olevassa alkoksiryhmässä terminaalisesti 5 yhden kerran hydroksilla substituoitu C2-C6-alkoksialkok-si, R3:een sisältyvä hydroksiryhmä muunnetaan halutuksi halogeeni-Cj-C^-alkyylikarbonyylioksiryhmäksi saattamalla reagoimaan vastaavan halogeeni-Cj-C^-alkyylikarbonyyliha-logenidin kanssa. 10

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-(2"-etoksi-etoksi)-tetrahydrofuraani].

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2 ' - [ 5 ' -(2",2"-dimetyyli-propoksi)-tetrahydrofuraani].

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu 20 siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-sykloheksyylioksi-tetrahydrofuraani].

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'- 25 bentsyylioksi-tetrahydrofuraani].

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-{2"-(2"'-metoksi-etoksi)-etoksi}-tetrahydrofuraani]. 30

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu ! siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2 ' - [ 5 ' - {2"-(2"'-(hydroksimetoksi)-etoksi)-etoksi}-tetrahydrofu-raani]. 35

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2’-[5'- 92831 60 {2"- (2"'-(2""-(klooriasetoksi)-etoksi)-etoksi)-etoksi}-tertahydrofuraani].

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu 5 siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-metoksi-tetrahydrofuraani].

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'- 10 (2"-hydroksi-etoksi)-tetrahydrofuraani].

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'[5'-(2"-metyyli-butoksi)tetrahydrofuraani]. 15

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan milbemysiini A4-13-spiro-2'-[5'-(1"-metyyli-propoksi)-tetrahydrofuraani]. Il 92831 61